Spektrometer
menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat
pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang diabsorpsi. Spektrofotometer
digunakan untuk mengukur energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan,
direfleksikan, atau diemisikan sebagai fungsi dari panjang gelombang (Suhatarti, 2013).
Spektrum UV-Vis merupakan hasil interaksi antara radikal elektromagnetik (REM) dengan
molekul. Radiasi REM merupakan bentuk radiasi yang mempunyai sifat gelombang dan partikel.
Spektrum UV-Vis mempunyai bentuk yang lebar dan hanya sedikit informasi tentang struktur
yang bisa didapatkan dari spektrum ini. tetapi spektrum ini sangat berguna untuk pengukuran
secara kuantitatif. Konsentrasi dari analit didalam larutan bisa ditentukan dengan mengukur
absorban pada panjang gelombang tertentu dengan menggunakan hukum Lambert-Beer
(Suhartati, 2013).
Pada umumnya terdapat dua tipe instrumen spektrofotometer, yaitu single-beam dan double
beam. Single-beam instrument. Dapat digunakan untuk kuantitatif dengan mengukur absorbansi
pada panjang gelombang tunggal, Single-beam instrument mempunyai beberapa keuntungan
yaitu sederhana, dan harganya murah. Panjang gelombang paling rendah adalah 190 sampai 210
nm dan paling tinggi adalah 800-1000 nm. Double-beam instrument mempunyai dua sinar yang
dibentuk oleh potongan cermin yang berbentuk V yang disebut pemecah sinar. Sinar pertama
melewati larutan blanko dan sinar kedua secara serentak melewati sampel (Suhartati,2013).