FORMULASI SABUN CUCI TANGAN CAIR DENGAN

PENAMBAHAN FRAKSI AKTIF EKSTRAK DAUN

CIPLUKAN (Physalis angulata L.) DAN UJI AKTIVITAS
ANTIBAKTERI TERHADAP BAKTERI Escherichia coli

SKRIPSI

Oleh
BARA NURUL ZAHIRA
K1A017031

KEMENTERIAN PENDIDIKAN, KEBUDAYAAN,

RISET, DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
JURUSAN KIMIA
PURWOKERTO
2022
FORMULASI SABUN CUCI TANGAN CAIR DENGAN
PENAMBAHAN FRAKSI AKTIF EKSTRAK DAUN
CIPLUKAN (Physalis angulata L.) DAN UJI AKTIVITAS
ANTIBAKTERI TERHADAP BAKTERI Escherichia coli

SKRIPSI

Oleh
BARA NURUL ZAHIRA
K1A017031

Sebagai Salah Satu Persyaratan untuk Memperoleh

Gelar Sarjana Strata Satu (S1) pada Jurusan Kimia

KEMENTERIAN PENDIDIKAN, KEBUDAYAAN,

RISET, DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
JURUSAN KIMIA
PURWOKERTO
2022
 LEMBAR PENGESAHAN

FORMULASI SABUN CUCI TANGAN CAIR DENGAN PENAMBAHAN

FRAKSI AKTIF EKSTRAK DAUN CIPLUKAN (Physalis angulata L.) DAN
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI TERHADAP BAKTERI Escherichia coli

Oleh :
BARA NURUL ZAHIRA
K1A017031

Diterima dan disahkan

Pada tanggal : ……………..

Pembimbing I Pembimbing II

Dian Riana Ningsih, S.Si., M.Si. Purwati, S.Si., M.Si.

NIP. 19810121 200604 2 001 NIP. 19730204 200003 2 001

Mengetahui,
Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Drs. Sunardi, M.Si.

NIP. 19590715 199002 1 001

i
 PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi yang berjudul :

FORMULASI SABUN CUCI TANGAN CAIR DENGAN PENAMBAHAN
FRAKSI AKTIF EKSTRAK DAUN CIPLUKAN (Physalis angulata L.) DAN
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI TERHADAP BAKTERI Escherichia coli
adalah benar merupakan hasil karya saya sendiri dan semua sumber data serta
informasi yang digunakan telah dinyatakan secara jelas dan dapat diperiksa
kebenarannya.

Bila pernyataan ini tidak benar, maka saya bersedia menerima sanksi pencabutan
gelar kesarjanaan yang telah saya peroleh.

Purwokerto, Januari 2022

Bara Nurul Zahira

K1A017031

ii
 PEDOMAN PENGGUNAAN SKRIPSI

Skripsi ini terdaftar dan tersedia di Pusat Informasi Ilmiah Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam dan terbuka untuk umum dengan ketentuan bahwa hak
cipta ada pada penulis dengan mengikuti aturan HaKI yang berlaku di Universitas
Jenderal Soedirman. Pengutipan dan atau peringkasan hanya dapat dilakukan
dengan mengikuti kebiasaan ilmiah untuk menyebutkan sumbernya.

iii
 KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT. yang telah melimpahkan
rahmat, taufik, dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul “Formulasi Sabun Cuci Tangan Cair dengan Penambahan Fraksi
Aktif Ekstrak Daun Ciplukan (Physalis angulata L.) dan Uji Aktivitas
Antibakteri terhadap Bakteri Escherichia coli”. Skripsi ini disusun sebagai
persyaratan untuk menyelesaikan Program Studi Strata Satu (S1) Kimia pada
Universitas Jenderal Soedirman.
Skripsi ini pada proses penyusunannya tentu mengalami banyak hambatan,
namun berkat bantuan banyak pihak akhirnya semua dapat dilewati. Ucapan terima
kasih penulis tujukan kepada:
1. Ibu Dian Riana Ningsih, S. Si., M.Si. selaku pembimbing tugas akhir I dan
ibu Purwati, S. Si., M. Si. selaku pembimbing tugas akhir II yang selalu
memberikan arahan dan bimbingan sehingga skripsi ini dapat terselesaikan.
2. Bapak Mochamad Chasani, S.Si., M.Si. dan bapak Amin Fatoni, M.Si.,
Ph.D. yang telah memberikan kritik dan saran yang membangun dalam
penyusunan skripsi ini.
3. Ibu Suyata S. Si., M.Si. selaku dosen Pembimbing Akademik yang selalu
memberikan nasihat dan saran demi perbaikan untuk ke depannya.
4. Bapak Amin Fatoni, M.Si., Ph.D. selaku Ketua Jurusan Kimia Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Jenderal Soedirman.
5. Bapak Drs. Sunardi, M. Si. selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Jenderal Soedirman.
6. Ibu Ari Asnani, Ph.D. selaku ketua Laboratorium Biokimia serta bapak Ade
Martinus, M.Sc. selaku analis Laboratorium Biokimia yang telah membantu
dalam pelaksanaan penelitian.
7. Seluruh staff dan dosen pengajar di lingkungan Fakultas MIPA khususnya
Jurusan Kimia yang telah memberikan ilmu yang bermanfaat.
8. Kedua orangtua serta kedua kakak saya yang senantiasa memberikan doa,
nasihat, dan motivasi.

iv
 9. Teman-teman kimia angkatan 2017 Universitas Jenderal Soedirman yang
senantiasa menemani serta memberikan dukungan dan bantuan.
10. Teman-teman Laboratorium Biokimia yang telah memberikan bantuan di
hampir setiap proses pengambilan data.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat untuk semua, baik bagi penulis
maupun pembaca. Penulis menyadari bahwa tidak ada yang sempurna di dunia
termasuk dalam penyusunan skripsi ini yang masih terdapat banyak kekurangan
sehingga kritik dan saran sangat diharapkan.

Purwokerto, Januari 2022

Penulis

v
 DAFTAR ISI

LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................ i

PERNYATAAN............................................................................................. ii
PEDOMAN PENGGUNAAN SKRIPSI ...................................................... iii
KATA PENGANTAR .................................................................................. iv
DAFTAR ISI ................................................................................................. vi
DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG................................................ ix
DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xi
DAFTAR TABEL ........................................................................................ xii
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................... xiii
ABSTRAK .................................................................................................. xiv
ABSTRACT ................................................................................................. xv
BAB 1 PENDAHULUAN ............................................................................. 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah ........................................................................ 2
1.3 Tujuan Penelitian.......................................................................... 2
1.4 Manfaat Penelitian........................................................................ 2
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .................................................................... 3
2.1 Ciplukan (Physalis angulata L.) .................................................. 3
2.2 Maserasi ....................................................................................... 5
2.3 Fraksinasi ..................................................................................... 5
2.4 Spekstroskopi FTIR ...................................................................... 6
2.5 Senyawa Antibakteri .................................................................... 8
2.6 Uji Aktivitas Antibakteri .............................................................. 9
2.7 Escherichia coli .......................................................................... 10
2.8 Sabun Cuci Tangan Cair ............................................................ 11
BAB 3 METODE PENELITIAN................................................................. 14
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................... 14
3.2 Alat dan Bahan Penelitian .......................................................... 14
3.2.1 Alat ..................................................................................... 14

vi
 3.2.2 Bahan .................................................................................. 14
3.3 Prosedur Kerja ............................................................................ 14
3.3.1 Preparasi sampel ................................................................. 14
3.3.2 Pembuatan ekstrak metanol daun ciplukan ........................ 15
3.3.3 Fraksinasi ekstrak metanol daun ciplukan .......................... 15
3.3.4 Regenerasi bakteri E. coli ................................................... 15
3.3.5 Uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol, fraksi n-heksana,
fraksi etil asetat, dan fraksi residu ekstrak metanol daun
ciplukan .............................................................................. 16
3.3.6 Identifikasi dengan spektroskopi FTIR .............................. 16
3.3.7 Uji fitokimia ....................................................................... 17
3.3.8 Formulasi sabun cuci tangan cair ....................................... 18
3.3.9 Uji aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair .................. 19
3.3.10 Uji kestabilan sabun cuci tangan cair ............................... 20
3.3.11 Analisis data ..................................................................... 22
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN........................................................ 23
4.1 Preparasi Sampel ........................................................................ 23
4.2 Ekstraksi Sampel ........................................................................ 23
4.3 Fraksinasi Sampel ...................................................................... 24
4.4 Regenerasi Bakteri ..................................................................... 25
4.5 Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol, Fraksi n-Heksana,
Fraksi Etil Asetat, dan Fraksi Residu Ekstrak Metanol Daun
Ciplukan .................................................................................... 25
4.6 Analisis Fraksi yang Teraktif dengan FTIR ............................... 28
4.7 Uji Fitokimia .............................................................................. 29
4.8 Formulasi Sabun Cuci Tangan Cair ........................................... 33
4.9 Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Cuci Tangan Cair ................... 34
4.10 Karakterisasi Sabun Cuci Tangan Cair .................................... 37
BAB 5 KESIMPULAN ................................................................................ 43
5.1 Kesimpulan................................................................................. 43
5.2 Saran ........................................................................................... 43
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 44

vii
LAMPIRAN ................................................................................................. 54
RIWAYAT HIDUP ...................................................................................... 71

viii
 DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG

Pemakaian
SINGKATAN Nama pertama kali
pada halaman
FTIR Fourier Transform Infrared vi
E. coli Escherichia coli vii
Mg Magnesium ix
FeCl3 Ferri klorida ix
pH Potential of Hydrogen ix
KOH Kalium hidroksida xii
CMC Carboxyl methyl cellulose xii
SLS Sodium lauril sulfat xii
mm Milimeter xii
cPs Sentipoise xii
ppm Part per million xii
cm Sentimeter 1
IR Infra merah 7
PHBS Penerapan Hidup Bersih dan Sehat 12
NaOH Natrium hidroksida 13
NA Nutrient Agar 15
NB Nutrient Broth 15
HCl Hidrogen klorida 15
Mg Magnesium 15
H2SO4 Asam sulfat 15
mL Mililiter 16
rpm Rotasi per menit 16
OD Optical density 17
SNI Standar Nasional Indonesia 21
ANOVA Analysis of Variance 22

ix
 Pemakaian
LAMBANG Nama pertama kali
pada halaman
% Persen xii
µ Mikro 11
°C Derajat Celsius 11
N Normalitas 15

x
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Tanaman ciplukan ..................................................................... 4

Gambar 2.2 Daun ciplukan ........................................................................... 4
Gambar 2.3 Skema alat spektroskopi FTIR ................................................. 6
Gambar 2.4 Morfologi bakteri E. coli ........................................................ 10
Gambar 4.1 Hasil uji antibakteri ekstrak metanol, fraksi n-heksana, fraksi
etil asetat, dan fraksi residu daun ciplukan ............................. 27
Gambar 4.2 Reaksi antara flavonoid dengan serbuk Mg............................ 29
Gambar 4.3 Reaksi antara senyawa tanin dengan FeCl3 ............................ 30
Gambar 4.4 Reaksi terbentuknya busa pada uji saponin ............................ 31
Gambar 4.5 Reaksi uji polifenol ................................................................. 32
Gambar 4.6 Mekanisme reaksi uji alkoloid dengan pereaksi Wagner ....... 33
Gambar 4.7 Reaksi saponifikasi ................................................................. 34
Gambar 4.8 Grafik hasil uji aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair ... 35
Gambar 4.9 Hasil uji nilai pH sabun cuci tangan cair ................................ 37
Gambar 4.10 Hasil uji stabilitas busa sabun cuci tangan cair .................... 38
Gambar 4.11 Hasil uji viskositas sabun cuci tangan cair ........................... 40
Gambar 4.12 Hasil uji asam lemak bebas sabun cuci tangan cair .............. 41
Gambar 4.13 Hasil uji hedonik sabun cuci tangan cair fraksi residu ......... 42

xi
 DAFTAR TABEL

Tabel 3.1 Komposisi formula sabun cuci tangan cair ................................. 19

Tabel 4.1 Nilai rendemen dari setiap fraksi................................................. 24
Tabel 4.2 Hasil uji fitokimia fraksi metanol daun ciplukan ........................ 30
Tabel 4.3 Hasil uji busa sabun cuci tangan cair .......................................... 38

xii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Hasil Preparasi dan Fraksinasi Sampel ..................................... 54

Lampiran 2 Pembuatan Media dan Hasil Regenerasi Bakteri ..................... 56
Lampiran 3 Pembuatan Larutan untuk Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak
dan setiap Fraksi Ekstrak Daun Ciplukan ................................. 57
Lampiran 4 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan setiap Fraksi
Ekstrak Daun Ciplukan ............................................................. 58
Lampiran 5 Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan setiap
Fraksi Ekstrak Daun Ciplukan .................................................. 60
Lampiran 6 Gambar Hasil Uji Fitokimia ..................................................... 61
Lampiran 7 Pembuatan Larutan untuk Formulasi Sabun Cuci Tangan
Cair ............................................................................................ 62
Lampiran 8 Data Hasil Uji Aktivitas Antibakteri terhadap Sabun Cuci
Tangan cair dengan Penambahan Zat Aktif Fraksi Residu
Ekstrak Metanol Daun Ciplukan ............................................... 63
Lampiran 9 Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Cuci Tangan
Cair dengan Penambahan Fraksi Residu Ekstrak Metanol
Daun Ciplukan........................................................................... 64
Lampiran 10 Data Uji Karakteristik Sabun Cuci Tangan Cair dengan
Penambahan Fraksi Residu Ekstrak Metanol Daun Ciplukan .. 65
Lampiran 11 Gambar Pembuatan dan Uji Karakteristik Sabun Cuci
Tangan Cair dengan Penambahan Fraksi Residu Ekstrak
Metanol Daun Ciplukan ............................................................ 70

xiii
 ABSTRAK

Tangan sebagai salah satu anggota tubuh yang memiliki banyak fungsi perlu
dijaga dan diperhatikan kebersihannya. Upaya yang dapat dilakukan adalah dengan
mencuci tangan menggunakan sabun. Penggunaan zat aktif antibakteri seperti
triclosan dapat menyebabkan resistensi bakteri dan iritasi pada kulit sehingga perlu
dicari bahan alternatif yang alami. Salah satu bahan alam yang mengandung
senyawa antibakteri adalah ciplukan terutama pada bagian daun karena
mengandung metabolit sekunder berupa alkaloid, steroid, tanin, polifenol, saponin,
dan flavonoid. Tujuan penelitian ini adalah menentukan ekstrak atau fraksi yang
teraktif untuk dapat digunakan sebagai zat aktif alami pada sabun cuci tangan cair
yang selanjutnya sabun tersebut dikarakterisasi dan diuji aktivitas antibakteri
terhadap bakteri E. coli. Sabun dibuat dengan metode semi boiled. Bahan utama
pembuatan sabun berupa minyak kelapa sawit dan KOH 20% serta bahan tambahan
berupa carboxyl methyl cellulose, sodium lauril sulfat, asam sitrat, asam stearat,
pewangi, pewarna, dan ekstrak atau fraksi ekstrak daun ciplukan yang teraktif
dengan konsentrasi 1000 ppm. Ekstrak atau fraksi ekstrak yang teraktif didapatkan
oleh fraksi residu dengan diameter zona hambat sebesar 2,75 mm. Sabun cuci
tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol daun
ciplukan memiliki wujud cair berwarna kuning telur dan aroma jeruk lemon.
Karakteristik sabun yang dibuat telah memenuhi standar mutu yang ditetapkan.
Nilai pH yang didapatkan sebesar 6,84, stabilitas busa 85,53%, viskositas 14,95
cPs, dan kadar asam lemak bebas 0,85%. Uji aktivitas antibakteri sabun yang telah
dibuat mendapatkan nilai diameter zona hambat sebesar 21,27 mm.
Kata kunci: ekstrak metanol daun ciplukan, antibakteri, Escherichia coli, sabun
cuci tangan cair.

xiv
 ABSTRACT

Hands as a part of the body that has many functions must be kept clean. Efforts
that can be taken is to wash it with soap. The use of antibacterial active substances
such as triclosan can cause bacterial resistance and irritation to the skin, so it is
necessary to look for natural alternative ingredients. One of the natural ingredients
that contain antibacterial compounds is ciplukan, especially on the leaves because
it contains secondary metabolites in the form of alkaloids, steroids, tannins,
polyphenols, saponins, and flavonoids. The purpose of this study was to determine
the most active extract or fraction to be used as a natural active substance in liquid
hand soap then characterized and tested for antibacterial against E. coli bacteria.
The soap was made using the semi-boiled method. The main ingredients used were
palm oil and 20% KOH and additional ingredients such as carboxyl methyl
cellulose, sodium lauryl sulfate, citric acid, stearic acid, fragrances, dyes, and the
most active extract or fraction of ciplukan leaf 1000 ppm. The most active extract
or fraction was obtained by the residue fraction with an inhibition zone diameter of
2.75 mm. Liquid hand soap with the active substance of the residual fraction have
a liquid form, egg yolk color, and lemon scent. The characteristics of liquid hand
soap that has been made has met the quality standards. The pH value obtained is
6.84, foam stability 85.53%, viscosity 14.95 cPs, and free fatty acid content of
0.85%. Antibacterial activity test of liquid soap obtained an inhibition zone
diameter of 21.27 mm.
Keywords: ciplukan leaf methanol extract, antibacterial, Escherichia coli, liquid
hand soap.

xv
 BAB 1
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Ciplukan (Physalis angulata L.) atau yang dikenal dengan buah beri emas telah
digunakan sejak lama sebagai obat herbal. Hampir seluruh bagian dari tanaman ini
seperti akar, batang, daun, dan buahnya dapat dikonsumsi. Ciplukan dikenal dapat
menyembuhkan beberapa jenis penyakit seperti malaria, asma, hepatitis, dermatitis,
rematik, dan leukimia (Kusumaningtyas, et al., 2015). Ciplukan, pada penelitian
sebelumnya, diketahui memiliki aktivitas antikanker, antidiabetes, antiinflamasi,
antioksidan, dan antibakteri (Sharma, et al., 2015). Menurut Lestari (2019), ekstrak
daun ciplukan pada konsentrasi 15 ppm dapat menghambat pertumbuhan bakteri S.
aureus dengan zona hambat sebesar 1,55 mm dan memiliki komponen senyawa
aktif seperti tanin, saponin, flavonoid, steroid, alkaloid, dan polifenol.
Penelitian yang telah dilakukan oleh Isniyetti (2010), menyimpulkan bahwa
flavonoid yang terkandung pada daun ciplukan memiliki aktivitas antibakteri
terhadap bakteri gram negatif dan gram positif. Bakteri yang bersifat gram negatif
salah satunya adalah bakteri E. coli. Bakteri E. coli dapat ditemukan di kulit
terutama tangan sebagai mikroorganisme transien yang bersifat patogen
(Rachmawati & Triyana, 2008). Tubuh dapat terinfeksi apabila ada kontak
langsung antara mulut dengan tangan yang terkontaminasi bakteri E. coli atau dapat
juga melalui aktivitas makan dan minum. Infeksi yang dapat diakibatkan oleh
bakteri E. coli yaitu infeksi saluran kemih, diare, dan gasteroenteritis. Upaya untuk
mencegah perpindahan bakteri patogen salah satunya adalah melalui gerakan
sanitasi, yaitu dengan mencuci tangan menggunakan sabun (Mustikawati, 2017).
Sabun cuci tangan yang banyak beredar menggunakan triclosan atau
triclocarban sebagai zat antibakteri (Tirayo, et al., 2016). Penggunaan bahan
triclosan secara terus-menerus atau berlebihan diketahui dapat menyebabkan
bakteri resisten terhadap bahan tersebut. Efek samping lain yang dapat terjadi yaitu
alergi dan gangguan pada sistem hormon (Marhamah, et al., 2019). Salah satu cara

1
 2

untuk menghadapi permasalahan tersebut adalah menggantikannya dengan bahan

alam yang juga memiliki sifat antibakteri. Oleh karena itu, pada penelitian ini
dilakukan pembuatan sabun cuci tangan dengan penambahan zat aktif ekstrak daun
ciplukan yang sebelumnya telah dilakukan fraksinasi menggunakan pelarut n-
heksana dan etil asetat serta karakterisasi fraksi teraktif dengan metode
spektroskopi FTIR. Sabun cuci tangan yang dibuat berbentuk cairan karena praktis
digunakan, mudah dibawa, mudah disimpan, tidak mudah rusak, dan kemasannya
lebih menarik (Widyasanti, et al., 2017).
1.2 Rumusan Masalah
1. Bagaimana aktivitas antibakteri fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, fraksi residu,
dan ekstrak kasar daun ciplukan?
2. Senyawa metabolit sekunder apa yang terkandung dalam ekstrak atau fraksi
ekstrak daun ciplukan?
3. Bagaimana formulasi sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif
ekstrak atau fraksi ekstrak daun ciplukan?
4. Bagaimana karakteristik dan aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair dengan
penambahan zat aktif ekstrak atau fraksi ekstrak daun ciplukan?
1.4 Tujuan Penelitian
1. Mengetahui aktivitas antibakteri yang tertinggi di antara fraksi n-heksana, fraksi
etil asetat, fraksi residu, dan ekstrak kasar daun ciplukan.
2. Mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam
ekstrak atau fraksi ekstrak daun ciplukan.
3. Mengetahui formulasi sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif
ekstrak atau fraksi ekstrak daun ciplukan.
4. Mengetahui karakteristik dan aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair dengan
penambahan zat aktif ekstrak atau fraksi ekstrak daun ciplukan.
1.5 Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah memberikan informasi mengenai golongan
senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak atau fraksi ekstrak
daun ciplukan yang teraktif dalam menghambat pertumbuhan E. coli dan dapat
digunakan sebagai zat aktif alami untuk sabun cuci tangan cair.
 BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Ciplukan (Physalis angulata L.)

Ciplukan merupakan tanaman yang tersebar di belahan dunia daerah tropis dan
substropis (Kusumaningtyas, et al., 2015) termasuk Indonesia. Tanaman ini
tersebar sebagai rumput liar pada taman, lahan buangan, sepanjang jalan, dan di
dalam hutan sepanjang sungai mendekati permukaan laut. Sebutan untuk tanaman
ini bermacam-macam, yaitu Winter Cherry, Cape Gooseberry, Hogweed, Balloon
Cherry, Coqueret, Strawberry Tomato, dan Cutleaf Ground Cherry (Sharma, et al.,
2015). Klasifikasi tumbuhan ciplukan menurut Sharma, et al., (2015) adalah
sebagai berikut.
Kingdom : Plantae
Order : Solanales
Family : Solanaceae
Subfamily : Solanoideae
Tribe : Physaleae
Subtribe : Physalinae
Genus : Physalis (L.)
Ciplukan secara morfologi memiliki batang yang bercabang dan dapat tumbuh
hingga 1 meter. Ciplukan memiliki daun dengan panjang sekitar 9 cm, berbentuk
bulat hingga oval, dan ujungnya runcing. Bunga yang dihasilkan memiliki panjang
sekitar 6 mm, berwarna putih atau kuning pucat, dan menyendiri di poros daun.
Buahnya biasa disebut juga golden berry karena memiliki warna emas yang
panjangnya sekitar 3-5 mm dengan kelopak seperti balon yang membungkusnya.
Buah ciplukan diproduksi dalam jumlah sedikit. Biji ciplukan berwarna kuning
pucat, berukuran 1-1,5 mm, dan berbentuk seperti cakram (Sharma, et al., 2015).
Tanaman ciplukan disajikan pada Gambar 2.1.

3
 4

Gambar 2.1 Tanaman ciplukan

(Hornus, 2011)
Senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman ciplukan berupa fisalin,
alkaloid, vitamin C, tanin, kriptosantin, asam malat, dan asam klorogenik (Adil,
2007). Senyawa fisalin dan alkaloid tropan merupakan dua golongan senyawa
kimia yang sangat penting dan berguna dalam dunia medis. Tropan menunjukkan
aktivitas anti-muskarinik, sedangkan fisalin diketahui memiliki aktivitas antitumor
dan sitotoksik (Sharma, et al., 2015). Seluruh bagian tanaman dapat dijadikan obat
berbagai macam penyakit seperti kencing manis, sakit paru-paru, sakit
tenggorokan, dan influenza (Adil, 2007).
2.1.1 Daun ciplukan
Daun ciplukan, seperti pada Gambar 2.2, memiliki bentuk bulat telur dengan
tepi yang terkadang rata dan tidak rata. Ujung daun berbentuk runcing. Panjang
daun sekitar 5-15 cm dan lebar daun sekitar 2-10 cm (Ratri & Darini, 2016).

Gambar 2.2 Daun ciplukan

(Dokumen pribadi)
Daun ciplukan di beberapa kota dikenal berguna sebagai obat tradisional untuk
merawat orang dengan berbagai macam penyakit. Penyakit yang biasa diobati
 5

dengan daun ciplukan yaitu dermatitis, trasitis, impaludism, reumatik, dan hepatitis
(Cheng, et al., 2017). Daun ciplukan diketahui dapat penghambat pertumbuhan sel
kanker karena memiliki kandungan senyawa aktif berupa saponin, flavonoid,
polifenol, dan fisalin yang dapat memberikan efek sitotoksik (Fitria, et al., 2011).
Senyawa aktif tersebut diketahui juga memiliki aktivitas antibakteri. Penelitian
yang telah dilakukan sebelumnya menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun ciplukan
dapat menghambat pertumbuhan bakteri baik gram positif maupun negatif. Salah
satu bakteri gram negatif adalah E. coli.
2.2 Maserasi
Maserasi adalah metode isolasi senyawa bahan alam dengan cara merendam
sampel dengan pelarut organik pada temperatur ruang. Proses perendaman
menyebabkan pecahnya dinding sel pada tumbuhan karena tekanan dalam dan luar
sel berbeda sehingga metabolit sekunder dalam sitoplasma dapat larut dalam pelarut
organik. Pemilihan pelarut berdasarkan kelarutan senyawa bahan alam yang akan
dilarutkan. Pelarut yang umum digunakan adalah metanol karena kemampuannya
dalam melarutkan seluruh golongan metabolit sekunder (Hasrianti, et al., 2016).
Prinsip kerja maserasi adalah penyarian zat aktif dengan cara merendam serbuk
dalam cairan penyari yang sesuai selama beberapa hari pada temperatur kamar dan
terlindung dari cahaya sehingga dinding sel pecah dan cairan penyari dapat masuk.
Keuntungan dari metode maserasi adalah peralatan dan pelakuannya sederhana,
sedangkan kekurangannya adalah waktu yang diperlukan lama, volume cairan
penyari yang dibutuhkan banyak, dan tidak dapat digunakan untuk bahan-bahan
dengan tekstur keras (Hasrianti, et al., 2016).
2.3 Fraksinasi
Fraksinasi adalah metode pemisahan ekstrak hasil maserasi yang menggunakan
berbagai pelarut dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda (Akhsanita, 2012).
Senyawa yang bersifat polar cenderung larut dalam senyawa polar, begitupun
sebaliknya. Hal ini berdasarkan prinsip like dissolve like (Sembiring, et al., 2016).
Masing-masing senyawa organik yang terdapat dalam tumbuhan memiliki
afinitas yang berbeda terhadap polaritas tiap pelarut yang digunakan. Oleh karena
itu, pelarut yang digunakan sebaiknya memiliki tingkat polaritas yang berbeda-beda
 6

untuk dapat mengambil senyawa-senyawa fenolik dalam tumbuhan. Pelarut

nonpolar seperti n-heksana dapat melarutkan senyawa-senyawa nonpolar seperti
minyak, karotenoid, steroid, dan triterpenoid. Pelarut semi polar seperti etil asetat
dapat melarutkan senyawa semi polar seperti flavonoid aglikon. Pelarut polar dapat
melarutkan glikosida-glikosida lainnya (Sembiring, et al., 2016).
Metode pemisahan ekstraksi cairan biasanya dilakukan dengan menggunakan
corong pisah. Kedua pelarut yang tidak saling bercampur dimasukkan ke dalam
corong pisah dan dikocok lalu didiamkan sehingga terbentuk dua lapisan yaitu
lapisan atas dan bawah. Hal tersebut menandakan zat terlarut telah terdistribusi ke
dalam fasanya masing-masing tergantung kelarutannya terhadap fasa tersebut.
Kedua lapisan dapat dipisahkan dengan membuka pipa corong pisah dan ditampung
pada wadah yang berbeda (Dalimunthe, et al., 2016).
2.4 Spektroskopi Fourier Transform Infrared (FTIR)
Salah satu metode spektroskopi adalah spektroskopi FTIR. Hasil spektrum pada
metode ini dianalisis dengan sinar inframerah yang dilengkapi dengan transformasi
Fourier (Anam, et al., 2007).

Gambar 2.3 Skema alat spektroskopi FTIR

(Anam, et al., 2007)
Skema alat spektroskopi FTIR secara sederhana ditunjukkan pada Gambar 2.3
dengan (1) sumber cahaya inframerah (IR), (2) pembagi berkas (beam spliter), (3)
kaca pemantul, (4) sensor IR, (5) sampel, dan (6) layar (display). Gugus fungsi
suatu sampel dapat dianalisis dengan cara membandingkan pita absorbansi yang
 7

terbentuk pada spektrum IR menggunakan tabel korelasi dengan spektrum senyawa

yang telah diketahui (Anam et al., 2007).
FTIR dapat digunakan untuk identifikasi sampel secara kualitatif dan kuantitatif
Kelebihan spektroskopi FTIR yaitu memiliki kemampuan yang cepat dalam
menganalisis sampel, tidak merusak sampel selama proses analisis, dan preparasi
sampel yang dibutuhkan sederhana (Rasyida, et al., 2014).
2.5 Senyawa Antibakteri
Antibakteri merupakan senyawa yang digunakan untuk mengendalikan
pertumbuhan bakteri yang dapat menyebabkan infeksi dan penyakit atau dapat
menyebabkan pembusukan dan perusakan bahan. Mekanisme penghambatan
pertumbuhan bakteri oleh senyawa antibakteri digolongkan menjadi lima, yaitu
menghambat proses sintesis dinding sel, merusak dinding sel bakteri, menghambat
penyusunan protein sel, menghambat penyusunan asam nukleat, dan perusakan
asam nukleat sel bakteri (Sulistyo, 1971).
2.5.1 Saponin
Saponin adalah glikosida dengan struktur umumnya memiliki kelompok
glikosil yang terikat pada posisi C3 yang menyebabkan saponin memiliki sifat
seperti sabun atau detergen sehingga saponin disebut sebagai surfaktan alami.
Terdapat berbagai macam sifat saponin, seperti kemampuan hemolitik, aktivitas
antibakteri, antimolluska, antivirus, sitotoksik, efek hipokolesterolemia, dan
antiprotozoal (Yanuartono, et al., 2017). Saponin bersifat non-volatile dan dapat
larut dalam air dan alkohol namun tidak dalam eter. (Illing, et al., 2017).
2.5.2 Alkaloid
Alkaloid merupakan senyawa organik yang sebagian besar ditemukan pada
tanaman yaitu bagian biji, akar, kulit batang, daun, dan buah. Konsentrasi alkaloid
jumlahnya sedikit sehingga apabila ingin mendapatkan senyawa yang murni harus
dipisahkan dari campuran senyawa yang terdapat dalam tumbuhan. Alkaloid
memiliki satu atau lebih atom hidrogen dan bersifat basa, sehingga dinamakan
demikian. Alkaloid pada tumbuhan sebagai senyawa metabolit sekunder yang
berfungsi melindungi tumbuhan dari penyakit, serangan hama, pengatur
perkembangan, dan sebagai basa mineral untuk mengatur keseimbangan ion
 8

(Sianipar & Siahaan, 2017). Alkaloid juga berkhasiat dalam dunia medis sebagai
antidiare, antidiabetes, antibakteri, antimikroba, dan antimalaria (Ningrum, et al.,
2016). Cara kerja alkaloid sebagai antibakteri yaitu dengan mengganggu sel bakteri
bagian komponen penyusun peptidoglikan sehingga dinding sel tidak terbentuk
sempurna dan menyebabkan sel mengalami kematian (Amalia, et al., 2017).
2.5.3 Flavonoid
Flavonoid merupakan salah satu golongan metabolit sekunder yang dihasilkan
oleh tanaman yang termasuk dalam kelompok besar polifenol. Senyawa ini terdapat
pada semua bagian tanaman termasuk daun, akar, kayu, kulit, tepung sari, nektar,
bunga, buah, dan biji (Zuraida, et al., 2017). Flavonoid dan turunannya diketahui
memiliki dua fungsi fisiologis, yaitu mengatasi serangan penyakit dan melindungi
struktur sel tubuh. Flavonoid dapat mengatasi serangan penyakit yang berasal dari
bakteri dan virus pada tanaman. Cara kerja flavonoid dalam menghambat
pertumbuhan bakteri adalah dengan merusak permeabilitas dinding sel bakteri.
Kandungan flavonoid yang berupa senyawa fenol dapat mendenaturasi protein dan
merusak dinding sel bakteri (Kurniawan & Aryana, 2015).
2.5.4 Steroid
Steroid merupakan senyawa turunan lipid yang tidak terhidrolisis. Senyawa
yang termasuk turunan steroid adalah kolesterol, ergosterol, dan estrogen (Illing, et
al., 2017). Steroid yang ada pada tumbuhan berfungsi untuk menghambat penuaan
daun, sedangkan pada hewan berperan sebagai hormon yang dapat mempengaruhi
pertumbuhan dan perkembangbiakan (Suryelita, et al., 2017). Steroid diketahui
dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara merusak membran lipid
sehingga terjadi kebocoran pada liposom (Sudarmi, et al., 2017).
2.5.5 Polifenol
Polifenol adalah suatu senyawa yang pada cincin aromatiknya terdapat
beberapa gugus hidroksil (-OH). Senyawa ini dalam tumbuhan biasanya berada
dalam bentuk glikosida atau esternya (Illing, et al., 2017). Peran polifenol pada
tumbuhan adalah pemberi warna, contohnya adalah warna daun (Lestari, et al.,
2015). Polifenol diketahui memiliki aktivitas antioksidan dan antibakteri. Fungsi
fenol sebagai antibakteri adalah bakteriosida dan bakteriostatik. Fenol dalam
 9

konsentrasi tinggi dapat menekan sejumlah faktor virulensi mikroba sehingga dapat
menghambat pertumbuhan koloni bakteri (Rizka & Saptarini, 2018).
2.5.6 Tanin
Tanin adalah salah satu golongan metabolit sekunder dengan beberapa khasiat,
yaitu sebagai astringen, anti diare, antibakteri, dan antioksidan. Tanin dapat
memiliki kemampuan aktivitas antibakteri karena tanin dapat membuat dinding sel
mengerut sehingga permeabilitas sel terganggu dan menyebabkan rusaknya dinding
sel (Amalia, et al., 2017). Terdapat dua jenis tanin yang ada pada tumbuhan, yaitu
tanin terkondensasi dan tanin terhidrolisis (Fathurrahman & Musfiroh, 2018).
2.6 Uji Aktivitas Antibakteri
Uji aktivitas antibakteri dapat dilakukan dengan dua metode yaitu metode difusi
dan metode pengenceran (Kusmiyati & Agustini, 2007).
2.6.1 Metode difusi
Metode difusi dapat dilakukan dengan tiga cara, yaitu metode silinder, metode
lubang, dan metode kertas cakram. Metode silinder dilakukan dengan cara
menempatkan silinder gelas dalam posisi berdiri di atas media agar yang telah
diinokulasi dengan bakteri yang selanjutnya diisi larutan yang akan diuji lalu
dilakukan proses inkubasi. Daerah hambatan di sekeliling silinder diamati. Metode
lubang dilakukan dengan membuat lubang pada media agar yang telah diinokulasi
bakteri lalu lubang tersebut diisi dengan larutan yang akan diuji dilanjutkan dengan
proses inkubasi. Daerah hambatan di sekitar lubang diamati. Metode menggunakan
kertas cakram dilakukan dengan mencelupkan kertas cakram ke dalam larutan yang
diuji kemudian diletakkan di atas media agar yang telah diinokulasikan bakteri.
Daerah hambat diamati pada sekeliling cakram.
2.6.2 Metode pengenceran
Zat yang akan diuji antibakteri diencerkan terlebih dahulu dan kemudian
dimasukkan ke dalam tabung-tabung reaksi steril. Masing-masing tabung
ditambahkan bakteri uji yang telah diketahui jumlahnya yang selanjutnya
dipindahkan ke dalam tabung-tabung berisi media steril. Semua tabung diinkubasi
dan penghambatan pertumbuhan diamati.
 10

2.7 Escherichia coli

Bakteri E. coli yang ditemukan pertama kali oleh Theodor Escherish pada tahun
1885 (Melliawati, 2009) merupakan bakteri fakultatif anaerob yang bersifat gram
negatif dan berbentuk batang dalam sel tunggal maupun berpasangan (Noviana,
2004). Klasifikasi E. coli menurut Sutiknowati (2016) adalah sebagai berikut.
Domain : Bacteria
Kingdom : Eubacteria
Phylum : Proteobacteria
Class : Gammaproteobacteria
Order : Enterobacteriales
Family : Enterobacteriaceae
Genus : Escherichia
Species : Escherichia coli
Bentuk yang dimiliki E. coli yaitu bulat cenderung ke batang dengan panjang
sekitar 2 µm, diameter 0,5 µm, dan volume sel sekitar 0,6–0,7 m3. Pergerakan E.
Coli menggunakan fagel peritrik dan tidak terlalu aktif. Hidup pada rentang suhu
20-40 ˚C dengan suhu optimum berada pada 37 ˚C, bakteri ini dapat ditemukan
pada tubuh manusia tepatnya di usus besar. Bakteri E. coli juga dapat ditemukan di
alam terbuka yaitu di dalam tanah, sehingga dapat digunakan sebagai indikator zat
pencemar dalam tanah (Sutiknowati, 2016). Morfologi bakteri E. coli disajikan
pada Gambar 2.4.

Gambar 2.4 Morfologi bakteri E. coli

(Melliawati, 2009)
 11

Peran bakteri E. coli pada tubuh salah satunya adalah menghasilkan kolisin
untuk melindungi saluran pencernaan dari bakteri patogenik. Akan tetapi, apabila
E.coli berpindah dari tempat aslinya maka akan berubah menjadi bakteri patogen
yang dapat menyebabkan infeksi (Melliawati, 2009). Infeksi yang disebabkan oleh
bakteri ini yaitu infeksi saluran kemih, meningitis akut, pneumonia, dan infeksi
enterik (Noviana, 2004).
2.8 Sabun Cuci Tangan Cair
Kegiatan yang mendukung program PHBS salah satunya adalah mencuci
tangan menggunakan sabun. Mencuci tangan hanya dengan air terbukti tidak efektif
dalam menjaga kesehatan dibandingan dengan menggunakan sabun. Tangan yang
dicuci menggunakan sabun dapat terhindar dari beberapa penyakit atau infeksi,
seperti infeksi saluran pernafasan, diare, infeksi cacing, mata, dan penyakit kulit
(Mustikawati, 2017).
Sabun merupakan campuran yang bersifat mengeluarkan busa dan terbuat dari
senyawa natrium dengan asam lemak. Sabun digunakan sebagai bahan pembersih
tubuh sehingga dibuat khusus agar tidak menimbulkan iritasi pada kulit. Pembuatan
sabun dapat dilakukan dengan dua acara, yaitu dengan saponifikasi dan netralisasi
minyak. Proses saponifikasi terjadi karena adanya reaksi antara trigliserida dengan
alkali yang menghasilkan produk samping berupa gliserol. Proses netralisasi terjadi
karena adanya reaksi antara asam lemak bebas dengan alkali dan tidak diperoleh
gliserol sebagai produk samping (Widyasanti, et al., 2016).
Terdapat dua bentuk sediaan sabun cuci tangan, yaitu losio dan gel. Sediaan
losio dibagi lagi menjadi emulsi dan larutan. Sabun cuci tangan yang lebih disukai
saat ini adalah sediaan dalam bentuk larutan karena penampilannya yang lebih
menarik (Nurlina, et al., 2013). Kelebihan sabun cair yaitu praktis dalam
penggunaan dan penyimpanan (Marhamah, et al., 2019).
Sabun cair antiseptik mengandung bahan antiseptik yang bersifat antibakteri.
Bahan tersebut di antaranya adalah triclosan, heksalorofen, dan bithionol. Kadar
triclosan dalam sabun antiseptik yang diperbolehkan yaitu kurang dari 0,3%.
Penggunaan pada konsentrasi tinggi maupun terlalu rendah dapat meningkatkan
daya resistensi bakteri terhadap bahan tersebut (Marhamah, et al., 2019).
 12

2.8.1 Komposisi sabun cuci tangan cair

Sabun cuci tangan cair menurut Dimpudus, et al., (2017) mengandung bahan-
bahan berupa minyak, KOH, CMC, SLS, asam stearat, asam sitrat, parfum dan
akuades.
2.8.1.1 Minyak kelapa sawit
Minyak kelapa sawit adalah salah satu minyak nabati yang banyak digunakan
dalam proses pengolahan makanan. Pembuatan minyak kelapa sawit melalui proses
ekstraksi mesokarp buah kelapa sawit yang kemudian ekstraknya dilakukan proses
pemurnian dan fraksinasi. Kelebihan minyak kelapa sawit yaitu harganya murah,
tersedia dalam jumlah banyak, dan memiliki tingkat stabilitas yang tinggi terhadap
oksidasi (Taufik & Seftiono, 2018).
2.8.1.2 Kalium hidroksida
Kalium hidroksida biasa digunakan sebagai basa dalam pembuatan sabun. Basa
yang sering digunakan dalam pembuatan sabun yaitu NaOH dan KOH. Sabun padat
menggunakan NaOH pada proses pembuatannya, sedangkan KOH digunakan
dalam pembuatan sabun cair. Kalium hidroksida pada pembuatan sabun cair
berguna untuk membantu proses saponifikasi dan mempengaruhi karakteristik
sabun yaitu kadar asam lemak bebas dan alkali bebas (Susanti & Priamsari, 2019).
2.8.1.3 CMC
Carboxyl methyl cellulose merupakan rantai polimer yang tersusun dari unit
molekul berupa sellulosa. Sifat CMC di antaranya adalah mudah larut dalam air
baik dalam air dingin maupun panas, stabil terhadap lemak dan tidak larut dalam
pelarut organik, inert, dan bersifat sebagai pengikat. Kegunaan CMC sangat banyak
pada beberapa bidang, salah satunya adalah bidang kosmetik sebagai pengental
pada produk berbusa (Kamal, 2010).

2.8.1.4 SLS
Sodium lauril sulfat merupakan surfaktan alkil yang bersifat anionik yang dapat
menurunkan tegangan permukaan larutan. Fungsi SLS di antaranya adalah sebagai
lemak pengemulsi, bahan pembasah, dan detergen. Sodium lauril sulfat merupakan
salah satu bahan yang paling sering digunakan dalam sabun dan cukup baik jika
 13

diaplikasikan pada kulit (Lestari, et al., 2020). Sodium lauril sulfat pada sabun cair
berguna sebagai surfaktan yang dapat menghasilkan busa (Kasenda, et al., 2016).
1.8.1.5 Asam stearat
Asam stearat adalah campuran asam organik berbentuk padat mengilat
berwarna putih atau kuning pucat yang berasal dari minyak dan lemak yang
sebagian besar kandungannya berupa asam oktadekonat dan asam heksadekonat
(Febriyanti, 2014). Asam stearat dalam formula sabun merupakan asam lemak
sehingga dapat mengikat kelebihan alkali (Apriyani, 2013).
1.8.1.6 Asam sitrat
Asam sitrat merupakan asam organik dengan nama struktur asam 2-hidroksi
propuna 1,2,3-trikarboksilat. Kristalnya bening atau putih, tidak berbau, memiliki
rasa asam, dan mudah larut dalam air. Keberadaan asam sitrat cukup melimpah pada
tumbuhan terutama buah-buahan (Wahyuni, 2011). Asam sitrat pada produk
pembersih seperti sabun berguna sebagai pengatur pH (Retnowati, et al., 2013).
1.8.1.7 Parfum
Parfum adalah campuran dari bahan pewangi (odoriforus substance) yang
dilarutkan dalam pelarut yang sesuai. Bahan pewangi tersebut berasal dari minyak
atsiri atau bahan sintesis (Hardiyati, et al., 2019). Parfum dapat digunakan pada
sabun sebagai bahan pewangi (Marjanah, et al., 2019).
 BAB 3
METODE PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian dilaksanakan selama 6 bulan (Maret – Oktober 2021) di
Laboratorium Biokimia dan Kimia Organik Jurusan Kimia Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Jenderal Soedirman.
3.2 Alat dan Bahan Penelitian
3.2.1 Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah spektrometer FTIR Shimadzu
IR Tracer-100 di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto,
blender, vacuum rotary evaporator IKA RV 10 Basic, pisau, gelas beker, tabung
Erlenmeyer, tabung reaksi, gelas ukur, labu ukur, pipet volumetrik, mikropipet,
corong pisah, seperangkat alat titrasi, lemari pendingin, pembakar Bunsen, oven,
autoklaf, hot plate, jarum ose, inkubator, cawan petri, drugalsky, crock borer,
jangka sorong, penggaris, batang pengaduk, pelat tetes, magnetic stirrer, pH meter,
viskometer Ostwald, dan timbangan analitik.
3.2.2 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah daun ciplukan segar
yang diambil dari Petambakan, Madukara, Banjarnegara, metanol teknis, kertas
saring, n-heksana teknis, etil asetat teknis, bakteri E. coli, NA bubuk, NB bubuk,
minyak kelapa sawit, KOH, SLS, CMC, asam stearat, parfum, triclosan, etanol
99,5% teknis, kloramfenikol, indikator fenolftalein 1%, kassa, wrapping,
aluminium foil, HCl pekat, serbuk Mg, H2SO4 pekat, FeCl3 0,1%, HCl 2 N, FeCl3
5%, H2SO4 2 N, reagen Wagner, dan akuades.
3.3 Prosedur Kerja
3.3.1 Preparasi sampel
Prosedur preparasi bahan mengacu pada Ningsih, et al (2016). Daun ciplukan
yang segar dipetik lalu dicuci dan dipotong kecil-kecil. Daun kemudian
dikeringanginkan hingga memiliki tekstur yang rapuh dengan cara diletakkan di

14
 15

tempat yang terbuka tanpa terkena sinar matahari langsung. Daun yang telah
kering kemudian dihaluskan dengan blender.
3.3.2 Pembuatan ekstrak metanol daun ciplukan
Prosedur pembuatan sampel mengacu pada Asikin & Wibowo (2016), yaitu
ekstraksi dengan metode maserasi. Serbuk daun ciplukan sebanyak 165,66 gram
dimaserasi menggunakan pelarut metanol hingga serbuk terendam selama 24 jam
sambil sesekali diaduk. Langkah selanjutnya yaitu dilakukan penyaringan sehingga
diperoleh filtrat dan ampas. Ampas kemudian dimaserasi kembali selama 24 jam.
Langkah yang dilakukan diulang kembali hingga tidak ada lagi senyawa yang dapat
terekstrak oleh metanol yang ditandai dengan pelarut yang jernih. Semua filtrat
dikumpulkan lalu dipekatkan dengan vacuum rotary evaporator pada temperatur
60˚C dengan kecepatan putaran 30-80 rpm. Hasil yang didapatkan ditimbang.
3.3.3 Fraksinasi ekstrak metanol daun ciplukan
Prosedur fraksinasi ekstrak metanol daun ciplukan mengacu pada penelitian
Kusumaningtyas, (2020). Fraksinasi partisi padat-cair dilakukan berturut-turut
menggunakan pelarut n-heksana dan etil asetat. Esktrak metanol daun ciplukan
sebanyak 2/3 bagian dari hasil ekstraksi dimasukkan ke dalam Erlenmeyer dan
ditambahkan 50 mL pelarut n-heksana lalu diaduk. Pelarut yang telah jenuh
kemudian dipisahkan dari ekstrak setelah didiamkan selama 24 jam. Ekstrak dalam
Erlenmeyer kemudian ditambahkan pelarut n-heksana kembali dan diulangi proses
yang sama selama 3 hari. Ekstrak yang tidak larut dalam pelarut n-heksana
kemudian dilakukan fraksinasi partisi lanjutan menggunakan pelarut etil asetat
selama 3 kali 24 jam. Hasil fraksinasi (fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi
residu ekstrak metanol) masing-masing dikumpulkan untuk diuapkan dengan
vacuum rotary evaporator pada temperatur 60˚C dengan kecepatan 30-80 rpm
sehingga diperoleh fraksi kental bebas pelarut.
3.3.4 Regenerasi bakteri E. coli
Prosedur regenerasi bakteri mengacu pada Ningsih et al., (2019). Regenerasi
bakteri diambil dari bakteri stok sebagai kultur primer. Bakteri dibiakkan dalam
media padat menggunakan agar miring NA. Media agar dibuat dengan melarutkan
0,8 gram NA ke dalam 35 mL akuades kemudian dipanaskan sambil diaduk hingga
 16

mendidih. Media yang telah mendidih dituang ke dalam 5 tabung reaksi masing-
masing sebanyak 7 mL dan disterilkan selama 15 menit pada temperatur 21˚C.
Media dimiringkan dengan kemiringan 30˚ dan dibiarkan memadat. Isolat bakteri
E. coli sebanyak 1 ose digoreskan pada media agar miring NA dan diinkubasi
selama 1x24 jam pada temperatur 37˚C.
3.3.5 Uji aktivitas antibakteri ekstrak dan setiap fraksi ekstrak daun ciplukan
Prosedur uji aktivitas antibakteri untuk menentukan ekstrak atau fraksi ekstrak
daun ciplukan yang teraktif menghambat pertumbuhan bakteri. Langkah-langkah
yang dilakukan mengacu pada Ningsih, et al., (2016). Uji aktivitas pada penelitian
ini dilakukan dengan metode difusi agar. Bakteri uji yang digunakan adalah bakteri
E. coli. Ekstrak metanol daun ciplukan dibuat konsentrasi 1000 ppm. Bakteri E. coli
hasil regenerasi diambil sebanyak 1 ose lalu diinkubasi dalam NB sebanyak 30 mL
selama 18-24 jam pada temperatur 37˚C. Bakteri E. coli hasil regenerasi sebanyak
5 mL diambil dan diukur ODnya (absorbansi) pada panjang gelombang 620 nm.
Apabila nilai OD > 1 (sampai 1,2), maka biakan diambil sebanyak 50 µL dan
apabila nilai OD < 1 (sampai 0,8), maka biakan diambil sebanyak 100 µL. Media
NA sebanyak 15 mL dituangkan dalam cawan petri dan dibiarkan memadat. Biakan
bakteri E. coli di-streak secara spread plate di atas media menggunakan drugalsky.
Media berisi bakteri dilubangi dengan diameter ± 8 mm menggunakan crock borer.
Masing-masing konsentrasi ekstrak metanol daun ciplukan dimasukkan ke lubang
media NA sebanyak 40 µL. Pembanding yang digunakan untuk kontrol positif
adalah antibiotik kloramfenikol dan setiap pelarut, sedangkan untuk kontrol negatif
adalah akuades. Media NA yang telah dimasukkan ekstrak, kontrol positif, dan
negatif kemudian diinkubasi selama 1x24 jam pada temperatur 37˚C. Aktivitas
antibakteri diperoleh dengan mengukur daerah zona bening di sekeliling lubang
sampel menggunakan jangka sorong.
3.3.6 Identifikasi dengan spektroskopi FTIR
Prosedur identifikasi dengan spektrometer FTIR mengacu pada Ningsih, et al
(2016). Ekstrak atau fraksi ekstrak daun ciplukan yang teraktif dalam menghambat
pertumbuhan E. coli kemudian dianalisis menggunakan spektrometer FTIR
sehingga pita serapan gugus fungsi dari senyawa kimia pada sampel diketahui.
 17

3.3.7 Uji fitokimia

Uji fitokimia dilakukan untuk mengetahui senyawa metabolit sekunder yang
terkandung dalam ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif
terhadap bakteri E. coli. Uji fitokimia dilakukan dengan identifikasi flavonoid,
steroid, tanin, saponin, polifenol, dan alkaloid.
3.3.7.1 Identifikasi flavonoid
Ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif sebanyak 1 mL
ditambahkan HCl pekat sebanyak 2 tetes dan serbuk Mg lalu dikocok kuat. Hasil
positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna larutan jingga (Lisi, et al., 2017).
3.3.7.2 Identifikasi steroid
Ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif diteteskan pada
pelat tetes dan dibiarkan kering. Tetesan yang telah kering kemudian ditambahkan
2 tetes H2SO4 pekat. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna biru,
ungu, atau hijau (Lisi, et al., 2017).
3.3.7.3 Identifikasi tanin
Ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif dilarutkan
dalam akuades lalu dididihkan dan disaring. Filtrat kemudian ditambahkan FeCl3
0,1%. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna hitam kebiruan atau
hijau (Lestari, 2019).
3.3.7.4 Identifikasi saponin
Ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif sebanyak 1 mL
dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan 5 mL air panas dan
dikocok kuat. Hasil positif ditunjukkan dengan adanya buih yang konsisten selama
10 menit dalam intensitas yang banyak (Lisi, et al., 2017).
3.3.7.5 Identifikasi polifenol
Ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif dilarutkan
dalam akuades lalu dipanaskan selama 5 menit dan disaring. Filtrat ditambahkan
dengan 4-5 tetes FeCl3 5% (b/v). Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya
warna biru tua atau hijau kehitaman (Lestari, 2019).
 18

3.3.7.6 Identifikasi alkaloid

Ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif sebanyak 1 mL
ditambahkan 10 tetes H2SO4 2 N dan reagen Wagner yang selanjutnya dikocok
kuat. Hasil positif ditunjukkan dengan adanya endapan coklat (Lisi, et al., 2017).
3.3.8 Formulasi sabun cuci tangan cair
Prosedur pembuatan sabun cuci tangan cair dari ekstrak atau fraksi ekstrak
metanol daun ciplukan yang teraktif mengacu pada Wahdalia, (2017). Bahan yang
diperlukan terlebih dahulu ditimbang sesuai formulasi pada Tabel 3.1. Minyak
kelapa sawit sebanyak 15 mL dimasukkan ke dalam gelas beker dan ditambahkan
8 mL KOH sedikit demi sedikit sambil dipanaskan pada temperatur 70-80˚C hingga
terbentuk sabun pasta. Sabun pasta ditambahkan dengan akuades lalu diaduk hingga
homogen. Campuran yang telah homogen kemudian ditambahkan zat aditif berupa
CMC, SLS, asam sitrat, dan asam stearat dengan pengadukan setiap penambahan
bahan. Ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif dari stok
1000 ppm dan pewangi atau parfum ditambahkan ke dalam campuran tersebut dan
diaduk kembali hingga terbentuk sabun cair dengan penambahan ekstrak atau fraksi
ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif. Sabun tersebut ditambahkan akuades
hingga volume 70 mL dan ditempatkan dalam wadah yang bersih.
 19

Tabel 3.1 Komposisi formula sabun cuci tangan cair dengan penambahan ekstrak
atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif dalam
menghambat pertumbuhan bakteri E. coli
Bahan KN KP F Keterangan
Ekstrak atau fraksi ekstrak
metanol daun ciplukan - - 7 µL Zat aktif
yang teraktif
KOH 20% 8 mL 8 mL 8 mL Sumber basa
Pembentuk
SLS 0,28 g 0,28 g 0,28 g
busa
CMC 0,05 g 0,05 g 0,05 g Pengental
Penstabil
Asam stearat 0,15 g 0,15 g 0,15 g
busa
Penyeimbang
Asam sitrat 1,3 g 1,3 g 1,3 g
pH
Sumber
Minyak kelapa sawit 15 mL 15 mL 15 mL
trigliserida
Pewangi 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL Pewangi

Triclosan 1000 ppm - 7 µL - Bahan aktif

Akuades Ditambahkan hingga volume 70 mL Pelarut

Keterangan :
KN = Kontrol Negatif (Basis sabun cuci tangan cair)
KP = Kontrol Positif (Basis sabun cuci tangan cair + 7 µL triklosan 1000 ppm)
F = Formula (Basis sabun cuci tangan cair + ekstrak atau fraksi ekstrak metanol
daun ciplukan yang teraktif 1000 ppm)
3.3.9 Uji aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair
Prosedur uji aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair mengacu pada Ningsih
et al., (2017). Uji aktivitas antibakteri dilakukan untuk mengetahui kemampuan
formulasi sabun yang telah dibuat dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli.
Pengujian dilakukan pada hari ke-1 menggunakan metode difusi agar (sumuran).
Kontrol positif yang digunakan adalah basis sabun cuci tangan cair dengan
penambahan zat aktif triclosan 1000 ppm, sedangkan kontrol negatif berupa basis
sabun cuci tangan cair. Uji aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair
menggunakan metode seperti pada 3.3.5.
 20

3.3.10 Uji kestabilan sabun cuci tangan cair

Kestabilan sabun cuci tangan cair dengan penambahan ekstrak atau fraksi
ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif diuji dengan pemeriksaan
organoleptik, penentuan viskositas, penentuan pH, uji tinggi busa, dan uji kadar
alkali bebas atau asam lemak bebas.
3.3.10.1 Uji organoleptik
Uji organoleptik dilakukan untuk mengamati bentuk, warna, dan bau sabun cuci
tangan cair dengan penambahan ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan
yang teraktif. Uji organoleptik dilakukan secara hedonik menggunakan skala
penilaian 1-5 dengan skala 1 (tidak suka), 2 (kurang suka), 3 (suka), 4 (cukup suka),
5 (sangat suka. Panelis berjumlah 10 orang (Yamlean & Bodhi, 2017).
3.3.10.2 Uji pH
Uji pH dilakukan untuk menentukan tingkat keamanan sabun cuci tangan cair
dengan penambahan ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif
dengan membandingkan pH sabun dengan rentang pH yang diterima baku mutu.
Sabun cuci tangan cair sebanyak 0,5 g dilarutkan dalam 10 mL akuades. pH meter
dicelupkan ke dalam larutan tersebut dan nilai pH yang didapat dicatat. Syarat nilai
pH untuk sabun cuci tangan cair sesuai SNI 4085:2017 yaitu pada pH 4-10.
3.3.10.3 Uji tinggi dan kestabilan busa
Uji tinggi dan kestabilan busa dilakukan dengan menambahkan sebanyak 1
gram sabun cuci tangan cair penambahan ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun
ciplukan yang teraktif dengan 10 mL akuades. Larutan kemudian dikocok selama
20 detik dengan cara membolak-balikkan tabung reaksi secara beraturan. Tinggi
busa yang dihasilkan dicatat pada menit ke-0 dan ke-5 dengan skala pengukuran
0,1 cm menggunakan penggaris. Nilai kestabilan busa didapatkan dari selisih tinggi
busa pada menit ke-0 (t0) dan ke-5 (t5) (Marini & Rosyida, 2018).
3.3.10.4 Uji viskositas
Uji viskositas dilakukan dengan menggunakan viskometer Ostwald. Sabun cuci
tangan cair dengan penambahan ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan
yang teraktif sebanyak 10 mL dimasukkan ke dalam viskometer lalu dipompa
menggunakan filler sampai tanda batas atas. Waktu yang diperlukan sabun untuk
 21

melewati batas atas hingga batas bawah dicatat sebagai waktu alir. Sabun
selanjutnya diukur kerapatannya menggunakan piknometer. Bobot jenis sabun
didapatkan dari selisih piknometer kosong dengan piknometer yang telah diisi
dengan sabun (Fauzia & Khusnia, 2020).
3.3.10.5 Uji kadar alkali bebas atau asam lemak bebas
Prosedur pengujian kadar alkali bebas sesuai dengan SNI 4085:2017. Sabun
sebanyak 1 gram ditambahkan 20 mL etanol 99,5% kemudian dipanaskan selama
30 menit dan disaring. Filtrat yang dihasilkan dipanaskan hingga mendidih dan
ditambahkan 0,1 mL indikator fenolftalein 1%. Apabila larutan bersifat asam
(ditandai dengan larutan tidak berwarna) maka larutan dititrasi dengan larutan
standar KOH, namun apabila larutan bersifat basa (ditandai dengan larutan
berwarna merah) maka larutan dititrasi dengan larutan standar HCl. Jumlah volume
larutan standar yang bereaksi digunakan untuk menghitung KOH jika alkali atau
menjadi asam oleat jika asam.
56 𝑥 V 𝑥 N
Kadar alkali bebas = x 100%
b
Keterangan:
Alkali bebas dinyatakan dalam satuan % fraksi massa
V = Volume HCl dalam titrasi (mL)
N = Normalitas HCl (N)
b = Bobot sampel (mg)
56 = Berat ekuivalen KOH
256 𝑥 V 𝑥 N
Kadar asam lemak bebas = x 100%
b
Keterangan:
Asam lemak bebas dinyatakan dalam satuan % fraksi massa
V = Volume KOH dalam titrasi (mL)
N = Normalitas KOH (N)
b = Bobot sampel (mg)
256 = berat ekuivalen asam palmitat (C16H32O2)
 22

3.3.11 Analisis data

Data hasil penelitian dianalisis menggunakan uji ANOVA. Pengujian dilakukan
untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan signifikan pada hasil penelitian dari
setiap formula. Uji one-way ANOVA dilakukan terhadap hasil penentuan nilai uji
aktivitas antibakteri ekstrak metanol, fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi
residu ekstrak metanol daun ciplukan, uji pH, viskositas, stabilitas busa, kadar alkali
atau asam lemak bebas, dan aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair dengan
penambahan ekstrak atau fraksi ekstrak metanol daun ciplukan yang teraktif.
Apabila hasil uji ANOVA yang diperoleh terdapat berbedaan signifikan, maka uji
lanjut perlu dilakukan. Salah satu uji lanjut yang sering digunakan adalah uji beda
nyata Duncan yang bertujuan untuk melihat pengaruh antar perlakuan dengan
ketelitian sensitif (Mattjik & Sumertajaya, 2000).
 BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Preparasi Sampel

Daun ciplukan segar sebanyak 1,5 kg dipisahkan dari dahannya lalu dicuci
dengan air bersih yang mengalir sehingga tidak ada lagi kotoran yang menempel.
Daun ciplukan yang telah bersih kemudian dipotong kecil-kecil dan dikeringkan
tidak di bawah sinar matahari langsung. Tujuan pemotongan daun menjadi
berukuran lebih kecil yaitu untuk mempercepat proses pengeringan. Pengeringan
dilakukan dengan cara dikeringanginkan dan terhindar dari sinar matahari agar
sampel tidak mengalami kerusakan akibat temperatur yang terlalu tinggi.
Pengeringan di bawah sinar matahari langsung juga dapat mempengaruhi warna
daun yaitu adanya perubahan warna dari hijau menjadi hijau pucat atau pudar. Hal
tersebut disebabkan oleh terjadinya degradasi klorofil menjadi phenofitin selama
proses pengeringan. Klorofil sensitif terhadap cahaya, panas, oksigen, dan
degradasi kimia (Luliana, et al., 2016).
Daun ciplukan yang telah kering lalu dihaluskan menggunakan blender menjadi
serbuk. Hal itu bertujuan untuk memperkecil ukuran partikel sampel yang
menyebabkan luas permukaan kontak antara sampel dengan pelarutnya lebih besar
sehingga proses penyerapan zat aktif menjadi lebih mudah (Salamah, et al., 2017).
Berat serbuk daun ciplukan yang diperoleh sebesar 165,66 gram sehingga rendemen
serbuk yang didapatkan sebesar 11,044%. Sampel kering, serbuk, dan perhitungan
rendemen serbuk terdapat pada Lampiran 1.
4.2 Ekstraksi Sampel
Serbuk daun ciplukan selanjutnya diekstraksi dengan tujuan untuk menyerap
zat aktif yang terkandung dalam serbuk. Metode ekstraksi yang digunakan pada
penelitian ini adalah maserasi. Maserasi adalah salah satu metode ekstraksi yang
umum digunakan. Metode tersebut dipilih karena prosesnya yang sederhana dan
menggunakan temperatur kamar sehingga senyawa-senyawa dalam tanaman yang
tidak tahan temperatur tinggi dapat terhindar dari kerusakan (Badaring, 2020).

23
 24

Serbuk daun ciplukan dimaserasi dengan cara direndam dalam pelarut metanol
hingga terendam sepenuhnya dan didiamkan selama 24 jam sambil sesekali diaduk.
Pelarut metanol dipilih karena metanol dikenal sebagai pelarut universal pada
proses ekstraksi bahan alam sehingga dapat menarik sebagian besar komponen
kimia dalam tumbuhan, baik yang bersifat polar, semipolar, maupun nonpolar
(Suryani, et al., 2016).
Filtrat yang didapat dipisahkan dari ampasnya. Ampas dimaserasi kembali
hingga tidak ada lagi senyawa yang tersisa ditandai dengan filtrat jernih. Penelitian
ini mendapatkan filtrat jernih dengan maserasi sebanyak 7 kali. Proses yang terjadi
selama maserasi adalah zat aktif pada serbuk akan larut pada pelarut akibat
perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam dan luar sel sehingga larutan
dengan konsentrasi tinggi akan terdorong ke luar (Salamah, et al., 2017).
Semua filtrat dikumpulkan lalu dipekatkan dengan vacuum rotary evaporator
temperatur 60°C dan kecepatan 50 rpm. Vacuum rotary evaporator akan
menguapkan pelarut metanol menggunakan waterbath dengan temperatur yang
dikondisikan agar tidak merusak komponen senyawa dalam sampel (Panantya,
2013). Berat ekstrak kental metanol daun ciplukan yang didapatkan sebesar 27,5
gram sehingga rendemen yang diperoleh sebesar 16,6%. Hasil yang didapatkan
telah memenuhi persyaratan Farmakope Herbal Indonesia yang menyatakan bahwa
rendemen tidak kurang dari 7,2% (Depkes RI, 2000). Ekstrak metanol daun
ciplukan dan perhitungan rendemen dapat dilihat pada Lampiran 1.
4.3 Fraksinasi Sampel
Ekstrak metanol daun ciplukan hasil ekstraksi diambil 18,33 gram untuk
dilakukan fraksinasi partisi padat-cair menggunakan pelarut n-heksana dan etil
asetat. Ekstrak dalam Erlenmeyer ditambahkan 50 mL pelarut n-heksana lalu
dilakukan pengadukan dan didiamkan selama 24 jam. Larutan yang telah jenuh
kemudian dipisahkan. Proses diulangi kembali selama 3 kali 24 jam. Ekstrak yang
tidak larut dalam pelarut n-heksana kemudian difraksinasi kembali dengan pelarut
etil asetat dengan prosedur yang sama selama 3 kali 24 jam. Setiap fraksi
dikumpulkan untuk diuapkan menggunakan vacuum rotary evaporator pada
temperatur 60°C dengan kecepatan 50 rpm. Ekstrak yang tidak larut pada pelarut
 25

n-heksana dan etil asetat disimpan sebagai fraksi residu. Nilai rendemen dari setiap
fraksi yang didapatkan disajikan pada Tabel 4.1 dan Lampiran 1.
Tabel 4.1 Nilai rendemen dari setiap fraksi
Fraksi Berat (gram) Rendemen (%)
n-Heksana 2,53 13,80
Etil asetat 0,25 1,36
Residu 15,55 84,83

Proses fraksinasi bertujuan untuk memisahkan komponen-komponen senyawa

aktif pada hasil ekstraksi berdasarkan perbedaan kelarutan (Nuria, et al., 2014).
Rendemen terbesar terdapat pada fraksi residu, yaitu sebesar 84,83% yang
menunjukkan bahwa ekstrak memiliki banyak komponen bioaktif yang bersifat
polar (Wendersteyt, et al., 2021).
4.4 Regenerasi Bakteri
Bakteri yang digunakan untuk uji aktivitas antibakteri harus diregenerasi
terlebih dahulu agar didapatkan stok isolat yang muda dan baru. Regenerasi bakteri
menggunakan media NA sebagai media tumbuh. Media NA merupakan media yang
umum digunakan karena sudah teruji secara klinis sehingga proses pertumbuhan
bakteri dapat berlangsung optimal (Anisah & Rahayu, 2015).
Bakteri E. coli sebanyak 1 ose diambil dari stok isolat lalu digoreskan secara
streak plate pada media miring yang baru. Media baru yang telah digoreskan bakteri
kemudian dimasukkan ke dalam inkubator selama 24 jam pada temperatur 37 °C.
Inkubasi dilakukan untuk menjaga temperatur lingkungan bakteri agar berada pada
kondisi optimumnya (Ningsih, et al., 2014). Lama waktu inkubasi yang umum
digunakan pada bakteri untuk peremajaan adalah 24 jam (Pelczar & Chan, 2008).
Bakteri dalam media miring diamati setelah proses inkubasi selama 24 jam.
Bakteri E. coli dapat tumbuh pada temperatur 20 °C - 40 °C dengan temperatur
optimum 37 °C (Sutiknowati, 2016). Proses regenerasi menghasilkan koloni bakteri
yang berwarna putih kekuningan dan berlendir dengan bentuk mengikuti pola
streak plate. Gambar isolar dapat dilihat pada Lampiran 2. Hasil regenerasi
selanjutnya digunakan untuk uji aktivitas antibakteri.
 26

4.5 Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan setiap Fraksi Ekstrak Daun
Ciplukan
Uji aktivitas antibateri dilakukan untuk mengetahui kemampuan ekstrak dan
setiap fraksi ekstrak daun ciplukan dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli.
Metode yang digunakan adalah metode difusi sumuran karena mudah dalam
pengukuran luas zona hambat yang terbentuk sehingga aktivitas isolat merata ke
semua bagian media (Listari, 2009).
Sampel yang diuji yaitu ekstrak kasar metanol daun ciplukan, fraksi n-heksana,
fraksi etil asetat, dan fraksi residu dengan masing-masing konsentrasi sebesar 1000
ppm. Kontrol negatif yang digunakan adalah akuades, sedangkan kontrol positif
berupa kloramfenikol. Kloramfenikol merupakan antibiotik bakteriostatik dengan
spektrum luas yang aktif terhadap bakteri Gram positif maupun negatif, termasuk
bakteri E. coli (Cahyono, 2013).
Uji aktivitas antibakteri menggunakan media NA dan NB. Metode pembuatan
media ditunjukkan pada Lampiran 2. Isolat bakteri ditumbuhkan dalam media NB
dan diinkubasi selama 24 jam pada temperatur 37 °C. Media NB merupakan media
cair untuk menumbuhkan bakteri uji. Bakteri yang tumbuh pada media NB
ditunjukkan dengan adanya endapan keruh berwarna putih. Biakan bakteri E. coli
pada media NB diambil sebagian untuk melihat tingkat kekeruhan (Optical
Density) pada panjang gelombang 620 nm. Nilai OD sebanding dengan kepadatan
bakteri dalam suspensi. Semakin tinggi tingkat kepadatan bakteri dalam suspensi
maka nilai OD juga semakin tinggi (Seniati, et al., 2019). Panjang gelombang 620
nm masuk dalam rentang panjang gelombang yang digunakan untuk melihat
kekeruhan pada larutan kuning sampai coklat (Febriyansari, 2008).
Sampel dimasukkan ke dalam media NA yang sudah disebarkan bakteri E. coli
dan dilubangi kemudian diinkubasi selama 24 jam pada temperatur 37 °C untuk
dilakukan pengamatan. Pengamatan dilakukan dengan mengukur diameter zona
bening menggunakan jangka sorong untuk mengetahui kemampuan sampel dalam
menghambat pertumbuhan bakteri E. coli.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak dan setiap fraksi ekstrak daun
ciplukan memiliki kemampuan untuk menghambat pertumbuhan bakteri E. coli.
 27

Hal ini sesuai dengan penelitian Lestari, (2019) yang menyatakan bahwa ekstrak
metanol daun ciplukan memiliki aktivitas antibakteri dengan nilai KHTM sebesar
1,55 mm pada konsentrasi 15 ppm. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak dan setiap
fraksi ekstrak daun ciplukan disajikan pada Gambar 4.1 dan data selengkapnya
dapat dilihat pada Lampiran 4, dan Lampiran 5.
30
Diameter zona hambat (mm)

25
25
20
15
10
5 1,72 2,28 2,75 1,59 2,21 2,16 2,27
0
0

Sampel

Gambar 4.1 Hasil uji antibakteri ekstrak dan setiap fraksi ekstrak daun ciplukan

Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa fraksi residu memiliki nilai
diameter zona hambat lebih tinggi dibandingkan fraksi n-heksana dan etil asetat.
Hal ini menunjukkan bahwa senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam
ekstrak lebih banyak yang bersifat polar. Diameter zona hambat fraksi residu juga
memiliki nilai lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak metanol dikarenakan fraksi
residu memiliki kandungan senyawa yang lebih murni.
Akuades sebagai kontrol negatif tidak memiliki kemampuan untuk
menghambat pertumbuhan bakteri E. coli ditandai dengan tidak terbentuknya zona
hambat. Kontrol positif berupa kloramfenikol memiliki diameter zona hambat
sebesar 25 mm.
Data diameter zona hambat kemudian diuji secara statistik dengan uji one-way
ANOVA dan uji lanjut Duncan. Hasil yang diperoleh ditampilkan pada Lampiran
4 yang menunjukkan nilai yang berbeda nyata (significant) 0,000 (p<0,05). Hal ini
dapat diartikan bahwa terdapat berbedaan nilai diameter zona hambat secara
 28

signifikan antara ekstrak metanol, fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi
residu ekstrak daun ciplukan.
Hasil uji lanjut Duncan menunjukkan bahwa diameter zona hambat fraksi residu
ekstrak daun ciplukan memiliki nilai yang berbeda nyata dengan akuades dan
pelarut metanol sehingga dapat diartikan bahwa akuades dan pelarut metanol tidak
mempengaruhi nilai aktivitas antibakteri fraksi residu ekstrak daun ciplukan.
Kloramfenikol memiliki hasil yang berbeda nyata dibandingkan semua pelarut
dan ekstrak daun ciplukan. Mekanisme kloramfenikol dalam menghambat
pertumbuhan bakteri adalah dengan menghambat kerja dari enzim peptidil
transferase yang berada pada fase pemanjangan sehingga sintesis protein pada
mikroorganisme mengalami kerusakan (Cahyono, 2013).
4.6 Analisis Fraksi yang Teraktif dengan FTIR
Fraksi residu dianalisis menggunakan spektroskopi FTIR didasarkan pada
karakteristik gugus fungsi yang terkandung di dalamnya. Spektra FTIR yang
diperoleh merupakan hasil dari proses scanning sampel fraksi residu menggunakan
alat FTIR pada daerah IR dengan bilangan gelombang 4000-400 cm-1 dan
ditunjukkan pada Gambar 4.2.

3576,02

921,97

1238,3
2931,8 1396,46 975,98
1589,34

3244,27
1334,74 1045,42

Gambar 4.2 Hasil uji FTIR fraksi residu

Serapan-serapan yang didapatkan pada hasil uji FTIR fraksi residu ekstrak
metanol daun ciplukan mendukung adanya senyawa flavonoid, tanin, saponin,
 29

polifenol, steroid, dan alkaloid. Peak yang muncul pada daerah 921,97 cm-1
(lemah), 975,98 cm-1 (sedang), 1045,42 (kuat), dan 12938,3 cm-1 (sedang) yang
merupakan serapan dari gugus eter (CO). Peak 1589,34 cm-1 (sedang) berada pada
panjang gelombang 1450 – 1600 cm-1 yang merupakan gugus C-C (aril) sp. Peak
2931,8 cm-1 (lemah) merupakan gugus C-H sp3 karena berada pada golongan
panjang gelombang 2800-3000 cm-1. Peak 3244,37 dan 3576,02 cm-1 dengan
intensitas lemah berada pada golongan panjang gelombang 3000 – 3700 cm-1
merupakan gugus OH, NH, CH sp2, atau CH sp. Hal tersebut mendukung adanya
senyawa polifenol yang diperkuat dengan munculnya peak 1334,74 dan 1396,46
cm-1 dengan intensitas sedang yang juga merupakan gugus OH (Fessenden &
Fessenden, 1986).
4.7 Uji Fitokimia
Fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan juga diuji fitokimia untuk
mengetahui metabolit sekunder yang terkandung di dalamnya. Tumbuhan
memproduksi metabolit sekunder agar dapat bertahan pada kondisi lingkungan
yang kurang sesuai bagi kelangsungan hidupnya (Saragih & Arsita, 2019).
Parameter yang digunakan untuk uji fitokimia pada penelitian ini yaitu flavonoid,
steroid, tanin, saponin, polifenol, dan alkaloid.
Tabel 4.2 Hasil uji fitokimia fraksi metanol daun ciplukan
Senyawa Reagen Hasil identifikasi Keterangan
Flavonoid HCl pekat dan serbuk Mg Larutan jingga +
Steroid H2SO4 pekat Ungu +
Tanin FeCl3 0,1% Hijau kehitaman +
Saponin Akuades Terdapat buih +
Polifenol FeCl3 5% Hijau kehitaman +
H2SO4 2N dan reagen
Alkaloid Endapan coklat +
Wagner
Keterangan: Tanda + menunjukkan senyawa terkandung dalam fraksi residu

Hasil uji fitokimia disajikan pada Tabel 4.2 dan Lampiran 7 yang menunjukkan
bahwa fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan mengandung flavonoid, steroid,
tanin, saponin, polifenol, dan alkaloid. Hal ini sesuai dengan penelitian Lestari,
(2019) yang menyatakan bahwa ekstrak kasar metanol daun ciplukan mengandung
keenam metabolit sekunder yang sama.
 30

Fraksi residu diuji flavonoid dengan cara direaksikan menggunakan HCl pekat
dan serbuk Mg. Tujuan penambahan HCl pekat adalah untuk menghidrolisis O-
glikosil pada flavonoid agar berubah menjadi aglikonnya. Serbuk Mg kemudian
ditambahkan dan bereaksi dengan gugus hidroksil yang ada pada flavonoid.
Flavonoid yang direaksikan dengan HCl pekat dan serbuk Mg akan tereduksi
menghasilkan warna merah, kuning, atau jingga (Latifah, 2015). Reaksi yang
terjadi antara flavonoid dengan serbuk Mg disajikan pada Gambar 4.3.

+ Serbuk Mg

Gambar 4.3 Reaksi antara flavonoid dengan serbuk Mg

(Latifah, 2015)

Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang memiliki inti berupa 15 atom

karbon dan tersusun atas dua cincin benzena dengan sejumlah 3 karbon rantai lurus
sebagai penghubung. Tumbuhan mengandung flavonoid yang umumnya dalam
bentuk glikosida yang berikatan dengan gula pada tumbuhan (Malik, et al., 2014).
Flavonoid sebagai antibakteri bekerja dengan menghambat pembentukan asam
nukleat, menghambat fungsi membran sitoplasma, dan menghambat metabolisme
energi bakteri (Manik, et al., 2014).
Hasil uji steroid menunjukkan bahwa fraksi residu ekstrak metanol positif
mengandung senyawa tersebut ditunjukkan dengan munculnya warna ungu setelah
penambahan H2SO4 (Lisi, et al., 2017). Hal ini sesuai dengan penelitian Lestari,
(2019) yang menyatakan bahwa ekstrak metanol daun ciplukan memiliki
kandungan senyawa metabolit sekunder salah satunya adalah steroid. Steroid pada
tumbuhan, baik tingkat tinggi maupun rendah, umumnya berbentuk sterol dan
memiliki peran dalam memberikan warna pada daun dan bunga (Suryelita, 2017).
Steroid membuat sel mengalami kerapuhan dan lisis melalui interaksi senyawa
 31

lipofilik yang ada pada steroid dengan membran fosfolipid yang sifatnya permeabel
(Rijayanti, 2014).
Tanin diduga terkandung dalam fraksi residu karena terdapat perubahan warna
larutan menjadi hijau kehitaman setelah bereaksi dengan FeCl3 0,1%. FeCl3
berfungsi untuk mengidentifikasi senyawa fenolik, salah satunya adalah tanin
(Robinson, 1995). Hal itu terjadi karena tanin membentuk senyawa kompleks
dengan Fe3+ yang berwarna hijau kehitaman atau biru tinta (Latifah, 2015). Dugaan
reaksi yang terjadi antara tanin dengan FeCl3 0,1% ditunjukkan pada Gambar 4.4.

Gambar 4.4 Reaksi antara senyawa tanin dengan FeCl3

(Mabruroh, 2015)

Tanin secara umum merupakan senyawa polifenol dengan berat molekul sekitar
500-3000 yang disintesis oleh tanaman. Tanin memiliki gugus hidroksi fenolik
sehingga dapat berikatan silang secara efektif dengan protein dan molekul-molekul
lain (Hidayah, 2016). Tanin termasuk dalam senyawa polar sehingga tanin dapat
diesktraksi menggunakan pelarut polar seperti metanol (Halimu, et al., 2017).
Tanin dapat menjadi penyebab terjadinya lisis pada sel bakteri karena tanin
memiliki target pada polipeptida dinding sel bakteri sehingga sintesis dinding sel
tidak berjalan sempurna (Sapara, et al., 2016).
Fraksi residu positif mengandung saponin ditunjukkan dengan adanya busa
yang mantap setelah dilakukan pengocokan menggunakan akuades. Saponin
memiliki sifat yang dapat menurunkan tegangan permukaan air sehingga busa dapat
terbentuk. Hal itu dikarenakan saponin memiliki struktur molekul seperti sabun
dengan adanya gugus hidrofilik dan lipofilik. Molekul saponin akan menyebar
 32

secara vertikal pada permukaan air. Mekanisme terbentuknya busa pada uji saponin
disajikan pada Gambar 4.5.

Gugus hidrofilik

Gugus hidrofilik

Gambar 4.5 Reaksi terbentuknya busa pada uji saponin

(Amananti, et al., 2017)

Saponin merupakan senyawa yang terkandung dalam tanaman tingkat tinggi

dengan sifat yang dimiliki seperti sabun sehingga disebut sebagai surfaktan alami
(Yanuartono, et al., 2017). Saponin dari tanaman paling tepat diesktraksi
menggunakan pelarut etanol 70-95% atau metanol karena saponin memiliki sifat
yang polar sehingga lebih mudah larut (Rachman, et al., 2018). Saponin sebagai
senyawa antibakteri memiliki mekanisme kerja dengan mendenaturasi protein
melalui zat aktif permukaannya yang seperti deterjen sehingga tegangan permukaan
dinding sel akan diturunkan dan fungsi membran sel bakteri mengalami gangguan
(Sudarmi, et al., 2017).
Warna hijau kehitaman yang terbentuk setelah penambahan FeCl3 pada uji
polifenol mengindikasikan bahwa fraksi residu positif mengandung senyawa
polifenol. Perubahan warna yang terjadi diakibatkan oleh bereaksinya ion Fe3+
dengan gugus -OH dari senyawa fenol sehingga terbentuk senyawa kompleks
[Fe(OAr)6]3- (Illing, et al., 2017).
Polifenol merupakan senyawa yang memiliki cincin aromatik dengan satu atau
lebih gugus hidroksil sehingga memiliki sifat yang cenderung polar (Baihakki, et
al., 2015). Hal ini dapat diartikan bahwa polifenol lebih mudah larut dalam pelarut
polar, salah satunya adalah metanol. Peran senyawa polifenol yang merupakan agen
antibakteri adalah sebagai toksin dalam protoplasma yang merusak dan menembus
dinding sel bakteri (Anggraini, et al., 2019).
 33

Uji alkoloid pada fraksi residu menghasilkan tanda positif ditandai dengan
adanya endapan coklat. Fraksi residu direaksikan dengan H2SO4 sehingga terbentuk
garam alkaloid. Sifat basa pada senyawa alkaloid memudahkannya untuk larut
dalam pelarut asam (Wahdalia, 2020). Pereaksi yang digunakan adalah pereaksi
Wagner. Reaksi yang terjadi pada uji Wagner terdapat pada Gambar 4.6.

Gambar 4.6 Mekanisme reaksi uji alkoloid dengan pereaksi Wagner

(Illing, et al., 2017)

Alkoloid merupakan senyawa yang memiliki setidaknya satu atom nitrogen dan
memiliki sifat basa. Keberadaan alkaloid bagi tanaman sangat penting karena
merupakan pelindung tanaman dari hama, penyakit, dan basa mineral yang dapat
mengatur keseimbangan ion pada tanaman. Alkaloid banyak ditemukan hanya pada
bagian tertentu dari tanaman, seperti akar, buah, biji, daun, dan kulit batang
(Sianipar & Siahaan, 2017). Mekanisme alkaloid sebagai sebagai senyawa
antibakteri adalah mengganggu komponen penyusun peptidoglikan sehingga
lapisan dinding sel bakteri tidak berbentuk secara sempurna (Rijayanti, 2014).
4.8 Formulasi Sabun Cuci Tangan Cair
Fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan diketahui merupakan fraksi yang
teraktif dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli sehingga digunakan
sebagai zat aktif atau bahan tambahan dalam formulasi sabun cuci tangan cair.
Bahan utama pembuatan sabun berupa minyak kelapa sawit sebagai asam lemak
dan KOH sebagai basa atau alkali. Bahan tambahan yang digunakan diantaranya
adalah CMC sebagai pengental, SLS sebagai pembentuk busa, asam stearat sebagai
penstabil busa, asam sitrat sebagai penyeimbang pH, pewangi sebagai pengharum,
pewarna agar sabun lebih menarik, dan akuades untuk pengenceran.
 34

Pembuatan sabun dimulai dengan memanaskan minyak kelapa sawit terlebih

dahulu agar tidak terjadi penggumpalan saat menambahkan bahan. Metode yang
digunakan adalah metode semi-panas (semi boiled) karena menggunakan panas
pada temperatur 70-80°C (Handayani, 2009). Temperatur yang rendah membuat
proses saponifikasi berjalan lambat, sedangkan temperatur tinggi membuat produk
tidak terbentuk sempurna (Priani & Lukmayani, 2010). Larutan KOH 20%
ditambahkan pada minyak yang telah panas sedikit demi sedikit agar reaksi berjalan
sempurna dan homogen. Penambahan dilakukan dengan pengadukan terus-menerus
selama 60 menit sampai tahap trace. Tahap trace adalah tahapan ketika sabun mulai
menyusut menjadi padatan atau pasta (Sari, et al., 2019).
Proses mereaksikan asam lemak atau minyak dengan basa disebut dengan reaksi
saponifikasi. Reaksi saponifikasi bukan merupakan reaksi kesetimbangan. Lemak
minyak dihidrolisis oleh basa alkali menghasilkan garam alkali (sabun) sebagai
produk utama dan gliserol sebagai produk samping (Suarsa, 2018). Lemak minyak
yang digunakan adalah minyak goreng sawit karena komponen utamanya berupa
trigliserida. Basa yang digunakan adalah KOH karena sabun yang dibuat adalah
sabun lunak atau cair. Reaksi saponifikasi disajikan pada Gambar 4.7.
O

H2C OH
O

OH

O
H2C OH

Gambar 4.7 Reaksi saponifikasi

(Ningrum & Kusuma, 2013)

Pasta hasil saponifikasi diencerkan dengan akuades dan ditambahkan zat aditif
berupa CMC, SLS, asam sitrat, asam stearat, pewangi, dan pewarna. Campuran
kemudian didiamkan sampai terdapat dua fasa yaitu sabun dan gliserol dengan
sabun berada di bawah sehingga menggunakan corong pisah untuk memudahkan
pemisahan. Sabun yang dihasilkan ditunjukkan pada Lampiran 12.
 35

4.9 Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Cuci Tangan Cair

Uji aktivitas antibakteri dilakukan untuk mengetahui kemampuan sabun cuci
tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol daun
ciplukan dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli. Metode yang digunakan
adalah metode difusi sumuran. Kontrol negatif yang digunakan adalah akuades,
sedangkan kontrol positif berupa triclosan.
35
30,75
Diameter zona hambat (mm)

30

25
21,27
19,8
20

15

10

0
Basis sabun cuci Sabun cuci tangan Sabun cuci tangan
tangan cair cair + fraksi residu cair + triclosan

Sampel

Gambar 4.8 Hasil uji aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair

Hasil uji aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair disajikan pada Gambar 4.8
dan Lampiran 9 serta data selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 10. Grafik
tersebut menunjukkan bahwa sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif
fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan memiliki nilai aktivitas antibakteri
terhadap E. coli dengan diameter zona hambat sebesar 21,27 mm. Nilai aktivitas
yang diperoleh lebih tinggi dibandingkan dengan basis sabun cuci tangan cair
karena fraksi residu memiliki metabolit sekunder yang turut memberikan peran
dalam menambah nilai aktivitas antibakteri.
Kontrol negatif diketahui memiliki nilai diameter zona hambat sebesar 19,8 mm
yang menunjukkan bahwa kontrol negatif juga memiliki aktivitas yang dapat
menghambat pertumbuhan bakteri E. coli. Hal tersebut dapat terjadi karena bahan-
bahan yang terkandung di dalamnya. Minyak kelapa sawit sebagai bahan dasar
pembuatan sabun diketahui memiliki aktivitas antibakteri karena mengandung
asam lemak jenuh dan asam lemak tidak jenuh (Fauziati, 2019). Jumlah atom
 36

karbon dalam asam lemak yang lebih dari sepuluh menyebabkan lisis pada
protoplasma sehingga bakteri mengalami kematian (Debois & Smith, 2010). Asam
sitrat sebagai asam organik dapat melawan mikroorganisme ditentukan dengan nilai
pH dan pKa. Nilai pKa asam sitrat termasuk tinggi sehingga memiliki aktivitas
antibakteri yang tinggi (Siregar, 2018).
Kontrol positif menggunakan triclosan sebagai zat aktif yang ditambahkan ke
dalam basis sabun cuci tangan cair. Konsentrasi yang digunakan sebesar 1000 ppm
karena fraksi residu yang digunakan juga 1000 ppm sehingga dapat
membandingkan aktivitas antibakteri kedua zat aktif tersebut. Triclosan adalah
salah satu dari sekian antiseptik buatan yang ditambahkan pada basis sabun cuci
tangan cair untuk memperkuat kemampuan antibakterinya karena bersifat
bakteriostatik. Mekanisme triclosan dalam menghambat pertumbuhan bakteri
adalah dengan masuk ke dalam sel bakteri dan mengganggu fungsi membran dan
sintesis RNA, asam lemak, dan protein (Nasution, 2018). Penggunaan triclosan
secara terus-menerus mengakibatkan terjadinya resistensi antibiotik, terganggunya
kesehatan alergi, dan gangguan sistem hormon (Purbosari, 2021).
Hasil uji one-way ANOVA menunjukkan nilai yang berbeda nyata (significant)
0,030 (p<0,05) sehingga dapat diartikan bahwa terdapat perbedaan signifikan
dengan penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol terhadap nilai aktivitas
antibakteri yang diperoleh. Hasil uji lanjut Duncan terhadap sabun cuci tangan cair
dengan penambahan zat aktif fraksi residu memiliki hasil yang tidak berbeda nyata
dengan kontrol positif. Hal tersebut dapat diartikan bahwa fraksi residu ekstrak
metanol daun ciplukan dapat digunakan sebagai bahan alami pengganti triclosan.
4.10 Karakterisasi Sabun Cuci Tangan Cair
Sabun cuci tangan cair yang telah dibuat kemudian dikarakterisasi untuk
menentukan apakah karakteristik sabun sudah memenuhi baku mutu. Parameter
yang diujikan yaitu nilai pH, tinggi dan stabilitas busa, viskositas, kadar asam lemak
bebas atau alkali bebas, dan organoleptik. Data yang didapatkan kemudian diuji
secara statistik menggunakan uji one-way ANOVA dan diuji lanjut Duncan. Hasil
yang didapatkan ditunjukkan pada Lampiran 11 dan Lampiran 12.
 37

4.10.1 Uji pH
Sabun cuci tangan cair dilakukan uji pH untuk mengetahui tingkat keasamaan
atau kebasaannya. Uji pH penting dilakukan karena sabun digunakan langsung pada
kulit sehingga harus dipastikan aman agar tidak menimbulkan iritasi. Alat yang
digunakan berupa pH meter yang sebelumnya telah dikalibrasi. Hasil uji pH
disajikan pada Gambar 4.9.
6,9 6,84 6,85

6,8

6,7
Nilai pH

6,6
6,53
6,5

6,4

6,3
Basis sabun cuci Sabun cuci tangan Sabun cuci tangan
tangan cair cair + fraksi residu cair + triclosan

Sampel
Gambar 4.9 Hasil uji nilai pH sabun cuci tangan cair

Hasil uji pH sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi residu
ekstrak metanol daun ciplukan memiliki nilai sebesar 6,83. Hasil yang didapatkan
telah sesuai dengan baku mutu yang ditetapkan oleh SNI 4085:2017 yaitu berada
pada rentang pH 4-10.
Hasil analisis data one-way ANOVA menunjukkan nilai yang berbeda nyata
(significant) 0,000 (p<0,05). Hal ini dapat diartikan bahwa terdapat perbedaan
signifikan penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol terhadap pH yang
dihasilkan. Hasil uji lanjut Duncan terhadap sabun cuci tangan cair dengan
penambahan zat aktif fraksi residu memiliki hasil yang berbeda nyata dengan
kontrol negatif namun tidak berbeda nyata dengan kontrol positif. Hal ini
menunjukkan bahwa nilai pH sabun dengan penambahan fraksi residu ekstrak
metanol tidak berbeda jauh dengan sabun yang ditambahkan triclosan.
 38

4.10.2 Uji tinggi dan stabilitas busa

Karakterisasi selanjutnya adalah uji tinggi dan stabilitas busa. Uji tinggi busa
dilakukan untuk menentukan apakah daya busa yang dihasilkan sabun cuci tangan
cair dengan penambahan fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan telah sesuai
dengan standar yang ditetapkan. Semakin banyak intensitas busa maka sabun
semakin nyaman digunakan meskipun hal tersebut tidak menunjukkan kekuatan
sabun tersebut dalam membunuh bakteri atau kuman. Hasil uji tinggi busa disajikan
pada Tabel 4.3.
Tabel 4.3 Hasil uji busa sabun cuci tangan cair
Tinggi awal Tinggi akhir
Sampel
(mm) (mm)
Basis sabun cuci tangan cair 69 58
Sabun cuci tangan cair + fraksi residu 81 69
Sabun cuci tangan cair + triclosan 85 74

Hasil penelitian menunjukkan bahwa tinggi busa sabun cuci tangan cair dengan
penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan memiliki nilai
sebesar 81 mm. Hasil tersebut telah sesuai dengan persyaratan yang ditetapkan,
yaitu berada pada rentang 13-220 mm (Hutauruk, et al., 2020). Hasil uji tinggi bisa
kemudian digunakan untuk uji stabilitas busa.
88
87,29
87
Nilai stabilitas busa (%)

86 85,53

85
83,94
84

83

82
Basis sabun cuci Sabun cuci tangan Sabun cuci tangan
tangan cair cair + fraksi residu cair + triclosan

Sampel
Gambar 4.10 Hasil uji stabilitas busa sabun cuci tangan cair

Hasil penelitian menunjukkan stabilitas busa sabun cuci tangan cair dengan
penambahan fraksi residu ekstrak metanol memiliki nilai sebesar 85,53%. Hal
 39

tersebut menunjukkan bahwa nilai stabilitas busa yang dihasilkan telah memenuhi
persyaratan karena melebihi persentase kestabilan busa yang dianggap baik yaitu
apabila busa dapat bertahan 60-70% dari volume awal dalam waktu 5 menit
(Rinaldi, 2021).
Hasil analisis data uji one-way ANOVA menunjukkan nilai yang berbeda nyata
(significant) 0,000 (p<0,05). Hal ini dapat diartikan bahwa terdapat perbedaan
signifikan dengan penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol terhadap
stabilitas busa yang dihasilkan. Hasil uji lanjut Duncan terhadap sabun cuci tangan
cair dengan penambahan zat aktif fraksi residu memiliki hasil yang berbeda nyata
dengan kontrol negatif dan kontrol positif.
Karakteristik busa dari sabun dipengaruhi oleh adanya bahan aktif sabun atau
penstabil busa. Semakin banyak bahan aktif yang ditambahkan maka tegangan
permukaan akan menurun sehingga stabilitas busa semakin tinggi (Wahdalia,
2020). Formulasi sabun cuci tangan cair menggunakan SLS sebagai bahan aktif
sabun karena merupakan pembentuk busa yang baik dan cukup baik ditoleransi oleh
kulit sehingga menjadi yang paling sering digunakan (Kartika, 2010). Hasil
penelitian menunjukkan bahwa penambahan SLS sebagai surfaktan dapat
menghasilkan busa yang stabil dan penambahan fraksi residu ekstrak metanol daun
ciplukan secara signifikan dapat meningkatkan kestabilan busa.
Nilai kestabilan busa juga dapat dipengaruhi oleh minyak kelapa sawit sebagai
bahan dasar pembuatan sabun karena mengandung asam palmitat (C16H32O2) yang
cukup tinggi, yaitu sebesar 44,3% yang berfungsi untuk menghasilkan busa yang
stabil (Widyasanti, et al., 2017). Kandungan saponin dalam fraksi residu ekstrak
turut mempengaruhi tinggi busa karena saponin dikenal sebagai surfaktan alami.
4.10.3 Uji viskositas
Uji viskositas dilakukan untuk mengetahui kekentalan sabun cuci tangan cair
dengan penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan.
Kekentalan sabun cuci tangan cair mempengaruhi kesukaan pengguna karena
semakin kental maka semakin disukai. Namun, sabun yang terlalu kental juga dapat
membuat sabun sulit mengalir sehingga membutuhkan waktu untuk dituangkan.
 40

Alat yang digunakan adalah viskometer Ostwald. Hasil yang didapatkan

ditunjukkan pada Gambar 4.11.
Hasil uji viskositas menunjukkan sabun cuci tangan cair dengan penambahan
fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan memiliki nilai sebesar 14,95 cPs. Nilai
viskositas yang rendah menunjukkan bahwa sabun cuci tangan cair fraksi residu
memiliki konsistensi yang sangat cair. Hal ini dapat dipengaruhi oleh penambahan
akuades saat proses pembuatan.
15,2
14,95
15
Nilai viskositas (cPs)

14,8
14,6 14,43
14,4
14,2
13,96
14
13,8
13,6
13,4
Basis sabun cuci Sabun cuci tangan Sabun cuci tangan
tangan cair cair + fraksi residu cair + triclosan

Sampel
Gambar 4.11 Hasil uji viskositas sabun cuci tangan cair

Hasil analisis secara statistik menunjukkan nilai yang berbeda nyata 0,020
(p<0,05) yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antar sabun
cuci tangan cair yang telah dibuat sehingga dapat dikatakan penambahan fraksi
residu memiliki pengaruh terhadap viskositas sabun.
4.10.4 Uji alkali bebas atau asam lemak bebas
Uji alkali bebas atau asam lemak bebas dilakukan untuk mengetahui jumlah
alkali atau asam lemak bebas yang terkandung dalam sabun cuci tangan cair dengan
penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan. Hasil
penambahan indikator fenolftalein tidak mengubah warna sabun menjadi merah
yang berarti bahwa sabun cuci tangan cair yang telah dibuat mengandung asam
lemak bebas. Lemak atau trigliserida terurai oleh molekul air sehingga
menghasilkan gliserol dan asam lemak bebas (Bidilah, et al., 2017). Sabun
 41

kemudian dititrasi dengan larutan standar KOH sampai berubah warna. Nilai kadar
asam lemak bebas yang dapat dilihat pada Gambar 4.12.
Hasil penelitian menunjukkan asam lemak bebas sabun cuci tangan cair fraksi
residu ekstrak metanol daun ciplukan memiliki nilai sebesar 0,85%. SNI sabun cair
06-3532-1994 menetapkan baku mutu nilai asam lemak bebas yang diperbolehkan
tidak lebih dari 2,5% sehingga dapat diartikan bahwa sabun cuci tangan yang telah
dibuat sudah memenuhi standar.
1 0,94
0,9 0,85
Nilai asam lemak bebas (%)

0,8
0,68
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
Basis sabun cuci Sabun cuci tangan Sabun cuci tangan
tangan cair cair + fraksi residu cair + triclosan

Sampel
Gambar 4.12 Hasil uji asam lemak bebas sabun cuci tangan cair

Asam lemak bebas merupakan asam lemak pada sabun cuci tangan cair yang
tidak terikat sebagai senyawa kalium atau senyawa trigliserida (lemak netral). Nilai
asam lemak bebas yang melebihi standar baku mutu menyebabkan daya bersih
sabun cuci tangan cair yang dibuat menjadi berkurang karena asam lemak bebas
tidak dibutuhkan saat proses pembersihan. Keberadaan asam lemak menyebabkan
sabun lebih terfokus menarik asam lemak bebas yang ada pada sabun dibandingkan
dengan kotoran yang menempel pada kulit (Qisti, 2009).
Hasil uji one-way ANOVA diperoleh menunjukkan nilai yang tidak berbeda
nyata 0,178 (p>0,05) sehingga dapat diartikan bahwa penambahan fraksi residu
ekstrak metanol daun ciplukan pada sabun cuci tangan cair tidak memberikan
pengaruh yang signifikan. Uji lanjut Duncan menghasilkan nilai asam lemak bebas
antar sabun cuci tangan cair tidak berbeda secara signifikan.
 42

4.10.5 Uji organoleptik

Karakterisasi sabun selanjutnya adalah uji organoleptik. Tujuan dari uji
organoleptik adalah untuk mengamati tampilan fisik dari sabun cuci tangan cair
dengan penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan.
Parameter yang digunakan adalah bentuk, aroma, dan warna. Bentuk sabun cuci
tangan cair fraksi residu berupa cairan dengan aroma jeruk lemon dan warna kuning
telur. Aroma dan warna yang dihasilkan adalah hasil dari penambahan zat aditif
berupa pengharum dan pewarna.
Sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi residu selanjutnya
dilakukan uji hedonik untuk menentukan tingkat penerimaan sabun oleh konsumen.
Nilai yang didapatkan berdasarkan tingkat kesukaan dari 10 orang panelis dengan
rentang 1-5. Semakin tinggi nilai yang didapatkan maka panelis semakin suka
terhadap sabun cuci tangan cair yang telah dibuat. Parameter yang digunakan
adalah bentuk, aroma, warna, dan kesan setelah pemakaian. Hasil yang didapatkan
dapat dilihat pada Gambar 4.13.
4,75
4,7 4,7
4,7
Nilai uji organoleptik

4,65

4,6

4,55
4,5 4,5
4,5

4,45

4,4
Bentuk Aroma Warna Kesan setelah
pemakaian
Parameter

Gambar 4.13 Hasil uji hedonik sabun cuci tangan cair fraksi residu

Hasil uji hedonik memperoleh nilai yang berada pada rentang 4,5-4,7 dengan
perolehan nilai 4,5 didapatkan oleh parameter bentuk dan kesan setelah pemakaian
sedangkan aroma dan warna mendapatkan nilai masing-masing 4,7. Aroma dan
warna yang disukai karena penambahan zat aditif berupa aroma lemon dan zat
warna kuning telur yang banyak digunakan untuk sabun.
 BAB 5
KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan
Kesimpulan yang diperoleh dari hasil penelitian yang dilakukan adalah sebagai
berikut:
1. Hasil uji aktivitas antibakteri tertinggi didapatkan oleh fraksi residu ekstrak
metanol dengan diameter zona hambat sebesar 2,75 mm.
2. Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa fraksi residu ekstrak metanol daun
ciplukan positif mengandung senyawa metabolit sekunder berupa alkaloid,
saponin, steroid, tanin, polifenol, dan flavonoid.
3. Sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak
metanol daun ciplukan diformulasikan menggunakan metode semi boiled
dengan bahan dasar berupa minyak kelapa sawit dan KOH 20% serta bahan
aditif seperti CMC, asam stearat, SLS, asam sitrat, akuades, pewangi, pewarna,
dan fraksi metanol daun ciplukan 1000 ppm.
4. Karakteristik sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi residu
ekstrak metanol daun ciplukan yaitu berbentuk cairan dengan warna kuning telur
dan aroma lemon memiliki rata nilai pH sebesar 6,84, nilai stabilitas busa sebesar
85,53%, nilai viskositas sebesar 14,95 cPs, dan nilai asam lemak bebas sebesar
0,85%. Uji hedonik didapatkan hasil berupa sabun dengan penambahan fraksi
residu cukup disukai oleh panelis. Uji aktivitas antibakteri sabun mendapatkan
diameter zona hambat sebesar 21,27 mm.
5.2 Saran
Penelitian ini menghasilkan fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan
sebagai fraksi yang memiliki aktivitas antibakteri tertinggi. Perlu dilakukan
penelitian lebih lanjut mengenai golongan metabolit sekunder dalam fraksi residu
yang teraktif dalam menghambat pertumbuhan bakteri. Perlu juga untuk melakukan
uji aktivitas antibakteri dengan spesies yang berbeda baik terhadap fraksi residu
maupun sabun. Sabun yang dibuat juga perlu dilakukan uji lanjut seperti uji klinis
apabila ingin dijadikan produk yang dapat dipasarkan.

43
 DAFTAR PUSTAKA

Adil. 2007. Khasiat Ciplukan. [http://lipi.go.id/berita/khasiat-ciplukan/1615].

Diakses pada 31 Januari 2021.
Akhsanita, M. 2012. Uji Sitotoksik Esktrak, Fraksi, dan Sub-fraksi Daun Jati
(Tectona grandis Linn. f.) dengan Metoda Brine Shrimp Lethality Bioassay.
Skripsi Sarjana Farmasi. Fakultas Farmasi. Universitas Andalas. Padang.
Amalia, A., Sari, I., dan Nursanty, R. 2017. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etil
Asetat Daun Sembung (Blumea balsamifera (L.) Dc.) terhadap Pertumbuhan
Bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA). Prosiding
Seminar Nasional Biotik. 4 (1) : 387-391.

Amananti, W., Tivani, I., dan Riyanta, A. B. 2017. Uji Kandungan Saponin pada
Daun, Tangkai Daun, dan Biji Tanaman Turi (Sesbania Grandiflora).
Seminar Nasional Ilmu Pengetahuan dan Teknologi Terapan : 209-213.
Anam, C., Sirojudin, dan Firdausi, K. S. 2007. Analisis Gugus Fungsi pada Sampel
Uji, Bensin, dan Spiritus menggunakan Metode Spektroskopi FTIR. Berkala
Fisika. 10 (1) : 79-85.
Anggraini, W. Nisa, S. C., Ramadhani, dan R., Ma’arif, B. 2019. Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Etanol 96% Buah Blewah (Cucumis melo L. var.
Cantalupensis) terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli.
Pharmaceutical Journal of Indonesia. 5 (1) : 61-66.
Anisah dan Rahayu, T. 2015. Media Alternatif untuk Pertumbuhan Bakteri
Menggunakan Sumber Karbohidrat yang Berbeda. Seminar Nasional XII
Pendidikan Biologi FKIP UNS : 855-860.
Apriyani D. 2013. Formulasi Sediaan Sabun Mandi Cair Minyak Atsiri Jeruk Nipis
(Citrus aurantifolia) dengan Cocamid dea sebagai Surfaktan. Naskah
Publikasi. Fakultas Farmasi. Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Surakarta.
Arifin, H., Uthia, R., dan Efrianti, F. 2017. Paengaruh Hasil Fraksinasi Ekstrak
Daun Kemangi (Ocimum sanctum L.) terhadap Aktivitas Susunan Saraf Pusat
pada Mencit Putih Jantan. Jurnal Farmasi Higea. 9 (1) : 85-95.
Asikin, G. A. dan Wibowo, M. A. 2016. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol
Daun Mangga Bacang (Mangifera foetida L.) terhadap Propionibacterium
acnes secara in vitro. Jurnal Cerebellum. 2 : 434–449.
Badan Standarisasi Nasional. 1994. Standar Mutu Sabun Mandi. SNI 06-3532-
1994. Dewan Standarisasi Nasional. Jakarta.

44
 45

Badan Standarisasi Nasional. 2017. Sabun Mandi Cair, SNI 4085:2017. Dewan
Standarisasi Nasional. Jakarta.
Badaring, D. R., Sari, S. P. M., Nurhabiba, S., Wulan, W., dan Lembang, S. A. R.
2020. Uji Ekstrak Daun Maja (Aegle marmelos L.) terhadap Pertumbuhan
Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Indonesian Journal of
Fundamental Sciences. 6 (1) : 16-16.
Baihakki, Feliatra, dan Wikanta, T. 2015. Extraction of Polyphenol from
Sargassum Sp. and Its Entrapment in the Nanochitosan. Jurnal Online
Mahasiswa Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Riau. 2 (1).
Bidilah, S. A., Rumape, O., dan Mohamad, E. 2017. Optimasi Waktu Pengadukan
dan Volume KOH Sabun Cair Berbahan Dasar Minyak Jelantah. Jurnal
Entropi. 12 (1) : 55-60.
Cahyono, W. 2013. Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Sirih
Merah (Piper crocatum Ruiz and Pav) dan Kloramfenikol terhadap Bakteri
Salmonella typhi, Shigella dysenteriae, dan Staphylococcus aureus beserta
Bioautografinya. Naskah Publikasi. Fakultas Farmasi. Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Surakarta.
Cheng, P. S., Chong, Y. Q., Zhao, F., Kang, N., Li, X. C., dan Qiu, F. 2017.
Physalins V-IX, 16,24-cyclo-13, 14-seco with Anolides from Physalis
angulata and Their Anti-imflammatory Activities. Scientific Reports.
Dalimunthe, C.A., Sembiring, Y. R., Andriyanto, M., Siregar, T. HS., Darwis, H.
S., dan Barus, D. A. 2016. Identifikasi dan Uji Metabolit Sekunder Bangun-
bangun (Coleus amboinicus) terhadap Penyakit Jamur Akar Putih
(Rhigidoporus microporus) di Laboratorium. Jurnal Pendidikan Karet. 34 (2)
: 189-200.
Debois, A. dan Smith, V. J. 2010. Antibacterial free fatty acids: activities,
mechanisms of action and biotechnological potential. Apllied Microbiology
and Biotechnology. 85 (6) : 1629-1642.
Departemen Kesehatan RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan
Obat, Cetakan Pertama. Dikjen POM. Direktorat Pengawasan Obat
Tradisional.
Dimpudus, S.A., Yamlean, P. V. Y., dan Yudistira A. 2017. Formulasi Sediaan
Sabun Cair Antiseptik Ekstrak Etanol Bunga Pacar Air (Impatiens balsamina
L.) dan Uji Efektivitasnya terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Secara In
Vitro. Jurnal Ilmiah Farmasi. 6 (3) : 208-215.
Fathurrahman, N. R., dan Musfiroh, I. 2018. Artikel Tinjauan: Teknik Analisis
Instrumentasi Senyawa Tanin. Farmaka. 16 (2) : 449-456.
 46

Fauziati, Hermanto, dan Fitriani. 2019. Peluang Minyak Mentah Sawit sebagai
Bahan Sediaan Farmasi. Jurnal Riset Teknologi Industri. 13 (2) : 314-324.
Febriyansari, A. N. 2008. Penerapan Model Gompertz pada Pertumbuhan Bakteri
L. acidophilus dan B. longum di Media Adonan Es Krim (Ice Cream Mix atau
ICM) Jenis Standar. Skripsi. Universitas Brawijaya. Malang.
Febriyanti, R. 2014. Pengaruh Konsentrasi Asam Stearat sebagai Basis terhadap
Sifat Fisik Sabun Transparan Minyak Jeruk Purut (Oleum citrus hystrixd. C.)
dengan Metode Destilasi. Jurnal Ilmiah Farmasi. 3 (1) : 1-4.
Fessenden, R.J. dan Fessenden, J.S. 1986. Kimia Organik Dasar Edisi Ketiga Jilid
3, Diterjemahkan Oleh A.H. Pudjaatmaka. Erlangga. Jakarta.
Fitria, M., Armandari, I., Septhea, D. B., Ikawati A.H.M., dan Meiyanto, E. 2011.
Ekstrak Etanolik Herba Ciplukan (Physalis angulata L.) Berefek Sitotoksik
dan Menginduksi Apoptosis pada Sel Kanker Payudara MCF-7. Bionatura.
13(2) : 101-107.
Gandjar, I. G. dan Rohman, A. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar.
Yogyakarta.
Halimu, R. B., Sulistijowati, R. S., dan Mile, L. 2017. Identifikasi Kadungan Tanin
pada Sonneratia alba. Nikè: Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan. 5 (4) :
93-97.
Handayani, H. C. 2009. Pengaruh Peningkatan Konsentrasi Ekstrak Etanol 96%
Biji Alpukat (Perseae americana Mill) terhadap Formulasi Sabun Padat
Transparan. Skripsi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan. UIN Syarif
Hidayatullah. Jakarta.
Hardiyanti, I., Simanjuntak, P., dan Suwarno, T. 2019. Pembuatan dan Evaluasi
Parfum Padat dari Minyak Atsiri Vanilla (Vanilla planifola), Melati
(Jasminum sambac (L.) Air, Jeruk Manis (Citrus sinensis (L.) Osbeck) dalam
Kemasan Bros. Medika Tadulako. 6 (3) : 101-106.
Hastrianti, Nururrahmah, dan Nurasia. 2016. Pemanfaatan Ekstrak Bawang Merah
dan Asam Asetat sebagai Pengawet Alami Bakso. Jurnal Dinamika. 7 (1) :
9-30.
Hidayah, N. 2016. Pemanfaatan Senyawa Metabolit Sekunder Tanaman (tanin dan
Saponin) dalam Mengurangi Emisi Metan Ternak Ruminansia. Jurnal Sains
Peternakan Indonesia. 11 (2) : 89-98.
Hornus, Philippe. 2011. Physalis angulata L.
[https://www.treknature.com/gallery/Africa/Gabon/North/Moyen-
Ogooue/Bindo/photo256145.htm]. Diakses pada 18 Februari 2021.
 47

Hutauruk, H. P., Yamlean, P. V. Y., dan Wiyono, W. 2020. Formulasi dan Uji
Aktivitas Sabun Cair Ekstrak Etanol Herba Seledri (Apium Graveolens L)
terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi.
9 (1) : 73-81.
Illing, I., Safitri, W., dan Erfiana. 2017. Uji Fitokimia Ekstrak Buah Dengen. Jurnal
Dinamika. 8 (1) : 66-84.
Indriani, S. 2020. Isolasi Senyawa Bioaktif Fraksi Etil Asetat Rimpang Lempuyang
Gajah (Zingiber zerumbet (L.) Smith) serta Uji Toksisitas terhadap Artemia
salina Leach. Skripsi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam.
Universitas Jenderal Soedirman. Purwokerto.
Ismaniar, M. 2013. Perbandingan Komponen Kimia Penyusun Minyak Atsiri pada
Buah dari Genus Piper (Piper betle L, Piper cubeba L, dan Piper
retrofractum Vahl) Menggunakan Analisis GC-MS. Skripsi. Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Sebelas Maret.
Surakarta.
Isniyetti. 2010. Isolasi dan Uji Antibakteri Flavonoid dari Daun Ciplukan (Physalis
angulata Linn). Jurnal Ilmiah. 2 : 95-102.
Kamal, N. 2010. Pengaruh Bahan Aktif Aditif CMC (Carboxyl methyil cellulose)
terhadap Beberapa Parameter pada Larutan Sukrosa. Jurnal Teknologi. 1 : 78-
84.
Kartika, G. F. 2010. Pengaruh Peningkatan Konsentrasi Carbopol 940 sebagai
Bahan Pengental terhadap Viskositas dan Ketahanan Busa Sediaan Shampoo.
Skripsi. Fakultas Farmasi. Universitas Sanata Dharma. Yogyakarta.
Khopkar, S. M. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Universitas Indonesia Press.
Jakarta.
Kurniawan, B., dan Aryana, W. F. 2015. Binahong (Cassia alata L) as Inhibitor of
Escherichia coli Growth. J Majority. 4 (4) : 100-104.
Kusmiyati dan Agustini, N. W. S. 2017. Uji Senyawa Antibakteri dari Mikroalga
Porphyridium cruentum. Biodiveritas. 8(1) : 48-53.
Kusumaningtyas, W. R., Laily, N., dan Limandha, P. 2015. Potential of Ciplukan
(Physalis angulata L.) as Source of Functional Ingredient. Procedia
Chemistry. 14 : 367-372.
Kusumaningtyas, G. A. 2020. Formulasi Sediaan Gel Facial Wash dengan
Penambahan Ekstrak Daun Mangga Bacang (Mangifera foetida Lour) dan Uji
Aktivitas Antibakteri Propionibacterium acne. Skripsi. Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Jenderal Soedirman. Purwokerto.
Latifah, L. 2015. Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid dan Uji Aktivitas
Antioksidan pada Ekstrak Rimpang Kencur (Kaempfeira galanga l) dengan
 48

Metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Skripsi. Fakultas Teknologi dan

Sains. Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim. Malang.
Lestari, D. M. 2019. Formulasi Sediaan Salep Ekstrak Daun Ciplukan (Physalis
angulata L.) dan Uji Aktivitas terhadap Bakteri Staphypococcus aureus.
Skripsi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas
Jenderal Soedirman. Purwokerto.
Lestari, T., Nurmala, A., dan Nurmalasari, M. 2015. Penetapan Kadar Polifenol dan
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sintrong (Crassocephalum
crepidiodes (Benth.) S. moore). Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada. 13
(1) : 107-112.
Lestari, U., Handayani, W. T., dan Syamsurizal. 2020. Formulasi dan Uji
Efektivitas Daya Bersih Sabun Padat Kombinasi Arang Aktif Cangkang
Sawit dan Sodium Lauril Sulfat. Journal of Pharmaceutical Science and
Clinical Research. 5 (2) :136-150.
Lisi, A. K. F., Runtuwene, M.R.J., dan Wewengkang, D. S. 2017. Uji Fitokimia dan
Aktivitas Antioksidan dari Ekstrak Metanol Bunga Soyogik. Jurnal Ilmiah
Farmasi. 6 (1) : 53-61.
Listari, Y. 2009. Efektifitas Penggunaan Metode Pengujian Antibiotik Isolat
Streptomyces dari Rizosferfamilia poaceae terhadap Escherichia coli. Skripsi.
Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan. Universitas Muhammadiyah
Surakarta. Surakarta.
Luliana, S., Purwanti, N. U., dan Manihuruk, K. N. 2016. Pengaruh Cara
Pengeringan Simplisia Daun Senggani (Melastoma malabathricum L.)
terhadap Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode DPPH (2,2-difenil-1-
pikrilhidrazil). Journal of Pharmaceutical Sciences and Research. 3 (3): 120-
129.
Mabruroh, A. I. 2015. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Tanin dari Daun Rumput
Bambu (Lophatherum gracile Brongn) dan Identifikasinya. Skripsi. Fakultas
Sains dan Teknologi. Universitas Islam Negri Maulana Malik Ibrahim.
Malang.
Malik, A. Edward, F., dan Waris, R. 2014. Skrining Fitokimia dan Penetapan
Kandungan Flavonoid Total Ekstrak Metanolik Herba Boroco (Celosia
argentea L.). Jurnal Fitofarmaka Indonesia. 1 (1) : 1-5.
Marhamah, Ujiani, S., dan Tuntun, M. 2019. Kemampuan Sabun Anatiseptik Cair
yang Mengandung Triclosan yang Terdaftar di BPOM dalam Menghambat
Pertumbuhan Bakteri Echerichia coli. Jurnal Kesehatan. 10 (1) : 17-24.
 49

Marini, dan Rosyida, A. 2018. Formulasi Ekstrak Etanol Daun Katuk (Sauropus
Androgynuss (L.) Merr) dalam Sediaan Sabun Mandi Cair. Jurnal Cerata. 9
(1) : 8-16.
Marjanah, Indriaty, dan Setyoko. 2019. Wirausaha Kreatif Pembuatan Sabun Cair
Aroma Terapi bagi Masyarakat di Birem Rayeuk Aceh Timur. Jurnal
Pengabdian Untukmu Negeri. 3 (2) : 97-103.
Mattjik, A. A., dan Sumertajaya, I. M. 2000. Perancangan Percobaan dengan
Aplikasi SAS dan Minitab. Jilid 1 Edisi kedua. ITB Press. Bogor.
Melliawati, R. 2009. Escherichia coli dalam Kehidupan Manusia. BioTrends. 4 (1)
: 10-14.
Mustikawati, I. S. 2017. Perilaku Cuci Tangan Pakai Sabun: Studi Kualitatif pada
Ibu-ibu di Kampung Nelayan Muara Angke Jakarta Utara. Jurnal Arkesmas.
2 (1). 115-125.
Nasution, N. V. 2018. Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Mandi Cair terhadap
Staphylococcus Aureus Dan Escherichia coli. Skripsi. Fakultas Farmasi.
Universitas Sumatera Utara. Medan.
Ningrum, N. P. dan Kusuma M. A. I. 2013. Pemanfaatan Minyak Goreng Bekas
dan Abu Kulit Buah Kapuk Randu (Soda qie) sebagai Bahan Pembuatan
Sabun Mandi Organik Berbasis Teknologi Ramah Lingkungan. Jurnal
Teknologi Kimia dan Industri, 2, (2) : 275-285.
Ningrum, R., Purwanti, E., dan Sukarsono. 2016. Identifikasi Senyawa Alkaloid
dari Batang Karamunting (Rhodomyrtus tomentosa) sebagai Bahan Ajar
Biologi untuk SMA Kelas X. Jurnal Pendidikan Biologi Indonesia. 2 (3) :
231-236.
Ningsih, D. R., Purwati., Zusfahair, Z., dan Nurdin, A., 2019. Hand Sanitizer
Ekstrak Metanol Daun Mangga Arumanis (Mangifera indica L.). Alchemy
Jurnal Penelitian Kimia. 15 (1) : 10-23.
Ningsih, D.R., Zusfahair, dan Mantari, D. 2017. Ekstrak Daun Mangga (Mangifera
indica L.) sebagai Antijamur terhadap Jamur Candida albicans dan
Identifikasi Golongan Senyawanya. Jurnal Kimia Riset. 2 (1) : 61-68.
Ningsih, D.R., Zusfahair., dan Kartika, D. 2016. Identifikasi Senyawa Metabolit
Sekunder serta Uji Aktivitas Ekstrak Daun Sirsak sebagai Antibakteri.
Molekul. 11(1) : 101-111.
Noviana, H. 2004. Pola Kepekaan Antibiotika Escherichia coli yang Diisolasi dari
Berbagai Spesimen Klinis. Jurnal Kedokter Trisakti. 23(4) : 122-126.
Nuria, M.C., Chabibah, Z., Banu, S., dan Fithria, R. F. 2014. Penelusuran Potensi
Fraksi n-Heksana dan Etil Asetat dari Ekstrak Metanol Daun Gugur Ketapang
 50

(Terminalia catappa L.) sebagai Antidiare. Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi
Klinik.
Nurlina, Attamimi F., Rosvina, dan Tomagola, I. 2013. Formulasi Sabun Cair
Pencuci Tangan yang Mengandung Ekstrak Daun Kemangi (Occimum
basilicum L.). As-Syifaa. 5 (2) : 119-127.
Panantya, J. 2013. Pengaruh Proporsi Drug Load terhadap Profil Disolusi Dispersi
Padat Kurkumin Ekstrak Temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) dalam
Polivinil Pirolidon dengan Vacuum Rotary Evaporator. Skripsi. Fakultas
Farmasi. Universitas Sanata Dharma. Yogyakarta.
Pelczar, Michael J., dan Chan, E. C. S. 2008. Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid I. UI
Press. Jakarta.
Priani, S. E. dan Lukmayani, Y. 2010. Pembuatan Sabun Transparan Berbahan
Dasar Minyak Jelantah Serta Hasil Uji Iritasinya Pada Kelinci. Prosiding
Seminar Nasional Penelitian dan Pengabdian pada Masyarakat Edisi
Eksakta. 31-48.
Purbosari, I. 2021. Uji Efektifitas Daya Hambat Sabun Cair Cuci Tangan di Kota
Surabaya terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherechia Coli secara in Vitro. Journal of Islamic Pharmacy. 6 (1) : 35-59.
Qisti, R. (2009), Sifat Kimia Sabun Transparan dengan Penambahan Madu Pada
Konsetrasi Yang Berbeda. Skripsi. Fakultas Peternakan. Institut Pertanian
Bogor.
Rachman, A. Wardatun, S., dan Wiendarlina, I. Y. 2018. Isolasi dan Identifikasi
Senyawa Saponin Ekstrak Metanol Daun Binahong (Anredera cordifolia
(Ten.) Steenis). Jurnal Online Mahasiswa Bidang Farmasi. 1 (1).
Rachmawati, F. J., dan Triyana, S. Y. 2008. Perbandingan Angka Kuman pada Cuci
Tangan dengan Beberapa Bahan sebagai Standarisasi Kerja di Laboratorium
Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia. Jurnal
Logika. 5 (1) : 1-13.
Rasyida, K., Kuswandi, B., dan Kristiningrum N. 2014. Deteksi Kemurnian Air
Zamzam Menggunakan Metode Spektrofotometri Fourier Transform
Infrared (FTIR) dan Kemometrik. e-Jurnal Pustaka Kesehatan. 2 (2) : 320-
326.
Ratri, W. S., dan Darini, M. Th. 2016. Peluang Ekonomi Tanaman Ciplukan
(Physalis angulata L) sebagai Abate Alami. Jurnal SCIENTECH. 2 (1) : 128-
135.
Retnowati, D. S., Kumoro, A. C., Ratnawati, dan Budiyati, C. S. 2013. Pembuatan
dan Karakterisasi Sabun dengan Proses Dingin. Jurnal Rekayasa Proses. 7
(2) : 46-51.
 51

Rijayanti, R. P. 2014. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mangga

Bacang (Mangifera Foetida L.) terhadap Staphylococcus Aureus secara In
Vitro. Naskah Publikasi. Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura.
Pontianak.
Rizka, H. O., dan Saptarini, N. M. 2018. Artikel Ulasan : Pemanfaatan Kulit Buah
Rambutan (Nephelium lappaceum Linn) sebagai Sediaan Fungsional.
Farmaka. 16 (2) : 78-83.
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi VI.
Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata. ITB. Bandung.
Salamah, N., Rozak, M., dan Abror, M. A. 2017. Pengaruh Metode Penyarian
terhadap Kadar Alkaloid Total Daun Jembirit (Tabernaemontana
sphaerocarpa. BL) dengan Metode Spektrofotometri Visibel. Pharmaciana.
7 (1) : 113-122.
Sapara, T. U., Waworuntu, O., dan Juliatri. 2016. Efektivitas Antibakteri Ekstrak
Daun Pacar Air (Impatiens balsamina L.) terhadap Pertumbuhan
Porphyromonas gingivalis. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi. 5 (4) : 10-17.
Saragih, D. E. dan Arsita, E. V. 2019. Kandungan Fitokimia Zanthoxylum
acanthopodium dan Potensinya sebagai Tanaman Obat di Wilayah Toba
Samosir dan Tapanuli Utara, Sumatera Utara. Prosiding Seminar Nasional
Masyarakat Biodiversitas Indonesia. 5 (1) : 71-76.
Sari, F. I., 2016. Uji Stabilitas Fisik dan Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Pala
(Myristica fragrans Houtt.) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dalam
Formulasi Sabun Cair. Skripsi. Surakarta : Fakultas Farmasi.Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
Sari, S. A., Firdaus M., Fadilla, N. A., dan Irsanti, R. 2019. Studi Pembuatan Sabun
Cair dari Daging Buah Pepaya (Analisis Pengaruh Kadar Kalium Hidroksida
terhadap Kualitas Sabun). TALENTA Conference Series: Science &
Technology. 2 (1) : 60-65.
Sembiring, E., Sangi, M. S., dan Edi, S. 2016. Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan
Fraksi dari Biji Jagung (Zea mays L.). Chem Prog. 9 (1) : 14-20.
Seniati, Marbiah, dan Irham, A. 2019. Pengukuran Kepadatan Bakteri Vibrio
harveyi secara Cepat dengan Menggunakan Spektrofotometer.
Agrokompleks. 19 (2) : 12-19.
Sharma, N., Bano, A., Dhaliwal, H. S., dan Sharma V. 2015. A Pharmacological
Comprehensive Review on ‘RASSBHARY’ Physalis angulata (L.).
International Journal of Pharmacy and Pharmacautical Sciences. 7(8) : 30-
34.
 52

Sianipar, R. H., dan Siahaan, M. A. 2017. Pemeriksaan Senyawa Alkaloid pada

Beberapa Tanaman Familia Solanaceae serta Identifikasinya dengan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Jurnal Farmanesia. 4 (1) : 1-11.
Siregar, F. K. 2018. Pembuatan dan Karakterisasi Film Berbasis Karboksimetil
Selulosa dari Daun Gebang (Corypha utan), Polivinil Alkohol, dan Asam
Sitrat untuk Aplikasi Antibakteri. Tesis. Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam. Universitas Sumatera Utara. Medan.
Suarsa, I. W. 2018. Pembuatan Sabun Lunak dari Minyak Goreng Bekas Ditinjau
dari Kinetika Kimia. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam.
Universitas Udayana. Bali.
Sudarmi, K., Darmayasa, I. B. G., dan Muksin, I. K. 2017. Uji Fitokimia dan Daya
Hambat Ekstrak Daun Juwet (Syzygium cumini) terhadap Pertumbuhan
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus ATCC. Jurnal Simbiosis. 5 (2) :
47-51.
Sulistyo, 1971. Farmakologi dan Terapi. EKG. Yogyakarta.
Suryani, N. C., Permana, D. G. M., dan Jambe, A. A. G. N. A. 2016. Pengaruh Jenis
Pelarut terhadap Kandungan Total Flavonoid dan Aktivitas Antioksidan
Ekstrak Daun Matoa (Pometia pinnata). Jurnal Ilmu Pangan dan Teknologi
(Online). 5 (1).
Suryelita, Etika, S. B., dan Kurnia, N. S. 2017. Isolasi dan Karakterisasi Senyawa
Steroid dari Daun Cemara Natal (Cupressus funebris Endl.). Eksakta. 18 (1)
: 86-94.
Susanti, M. M., dan Priamsari, M. R. 2019. Pemberdayaan Ibu-ibu PKK
Pengolahan Limbah Minyak Goreng Bekas menjadi Sabun Cair di Desa
Sidorejo Kabupaten Semarang. Indonesian Journal of Community Services.
1 (1) : 48-61.
Sutiknowati, L. I. 2016. Bioindikator Pencemar, Bakteri Escherichia coli. Oseana.
41 (4). 63-71.
Taufik, M., dan Seftiono, H. 2018. Karakteristik Fisik dan Kimia Minyak Goreng
Sawit Hasil Proses Penggorengan dengan Metode Deep-Fat Frying. Jurnal
Teknologi. 10 (2) : 123-130.
Tirayo, A. J., Munir, M. A., dan Hutasoit, G. A. 2016. The Comparison of Inhibitor
Effect Between Antiseptic Soap with Betel Leaf Extract (Piper betle Linn) on
the Growth of Escherichia coli. Jurnal Ilmiah Kedokteran. 3 (3) : 31-39.
Wahdalia, E. 2020. Formulasi Sabun Cuci Tangan Cair Ekstrak Kulit Nanas Madu
(Ananas comocus (L) Merr.) Desa Siwarak Karangreja Purbalingga dan Uji
 53

Aktivitas Antibakterinya. Skripsi. Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam. Universitas Jenderal Soedirman. Purwokerto.
Wahyuni, D. S. 2011. Produksi Asam Sitrat dari Limbah Ampas Sagu (Metroxylon
sagu) dengan Menggunakan Aspergillus niger. Skripsi. Fakultas Ilmu
Kesehatan. Universitas Islam Negeri Alauddin. Makassar.
Wendersteyt, N. V., Wewengkang D. S., dan Abdullah, S. S. 2021. Uji Aktivitas
Antimikroba dari Ekstrak dan Fraksi Ascidian Herdmania momus dari
Perairan Pulau Bangka Likupang terhadap Pertumbuhan Mikroba
Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium dan Candida albicans.
Pharmacon. 10 (1) : 706-712.
Widyasanti, A., Farddani, C. L., dan Rohdiana, D. 2016. Pembuatan Sabun Padat
Transparan Menggunakan Minyak Kelapa Sawit (Palm Oil) dengan
Penambahan Bahan Aktif Ekstrak Teh Putih (Camellia sinensis). Jurnal
Teknik Pertanian Lampung. 5 (3) : 125-136.
Widyasanti, A., Rahayu, A. Y., dan Zain, S. 2017. Pembuatan Sabun Cair Berbasis
Virgin Coconut Oil (VCO) dengan Penambahan Minyak Melati (Jasminum
sambac) sebagai Essential Oil. Jurnal Teknotan. 11 (2) : 1-10.
Wulandari, L. 2011. Kromatografi Lapis Tipis. PT Taman Kampus. Presindo.
Jember.
Yanuartono, Purnamaningsih, H., Nururrozi, A., dan Indarjulianto, S. 2017.
Saponin : Dampak terhadap Ternak (Ulasan). Jurnal Peternakan Sriwijaya. 6
(2) : 79-90.
Zuraida, Suslistiyani, Sajuthi, D., dan Suparto, I. H. 2015. Fenol, Flavonoid, dan
Aktivitas Antioksidan pada Ekstrak Kulit Batang Pulai (Alstonia scholaris
R.Br). Jurnal Penelitian Hasil Hutan. 35 (3) : 211-219.
 LAMPIRAN

Lampiran 1 Hasil Preparasi dan Fraksinasi Sampel

Sampel kering Serbuk

Distilasi pelarut Maserasi

Evaporasi Ekstrak metanol Fraksinasi

Fraksi n-heksana Fraksi etil asetat Fraksi residu

54
 55

Perhitungan rendemen serbuk daun ciplukan

Berat awal = 1500 gram
Berat akhir = 165,66 gram
berat serbuk daun ciplukan 165,66
Rendemen (%) = x 100% = x 100% = 11,044%
berat daun ciplukan segar 1500

Perhitungan rendemen ekstrak metanol daun ciplukan

Berat awal (serbuk daun ciplukan) = 165,66 gram
Berat akhir (ekstrak metanol) = 27,5 gram
berat ekstrak metanol 27,5
Rendemen (%) = berat serbuk daun ciplukan x 100% = 165,66 x 100% = 16,6%

Perhitungan rendemen fraksi n-heksana ekstrak metanol daun ciplukan

Berat awal (ekstrak metanol) = 27,5 gram
Berat akhir (fraksi n-heksana) = 3,795 gram
berat fraksi 𝑛−heksana 3,795
Rendemen (%) = x 100% = x 100% = 13,8%
berat ekstrak metanol 27,5

Perhitungan rendemen fraksi etil asetat ekstrak metanol daun ciplukan

Berat awal (ekstrak metanol) = 27,5 gram
Berat akhir (fraksi etil asetat) = 0,375 gram
berat fraksi etil asetat 0,375
Rendemen (%) = berat ekstrak metanol x 100% = x 100% = 1,36%
27,5

Perhitungan rendemen fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan

Berat awal (ekstrak metanol) = 27,5 gram
Berat akhir (fraksi residu) = 23,325 gram
berat fraksi residu 23,325
Rendemen (%) = berat ekstrak metanol x 100% = x 100% = 84,82%
27,5
 56

Lampiran 2 Pembuatan Media dan Hasil Regenerasi Bakteri

1. Pembuatan media Nutrien Agar

Media NA sebanyak 20 gram dilarutkan dalam 1000 mL akuades lalu
dipanaskan di atas hot plate sambil diaduk hingga homogen. Media tersebut
kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf pada temperatur 121˚C pada tekanan
2 atm selama 15 menit.
2. Pembuatan media Nutrien Broth
Sebanyak 0,24 gram bubuk NB dilarutkan dalam akuades sebanyak 30 mL lalu
dipanaskan sambil diaduk menggunakan magnetic stirrer. Media tersebut
kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf untuk disterilisasi pada temperatur
121˚C pada tekanan 2 atm selama 15 menit.
3. Hasil regenerasi bakteri Escherichia coli
 57

Lampiran 3 Pembuatan Larutan untuk Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan

Setiap Fraksi Ekstrak Daun Ciplukan

a. Pembuatan larutan ekstrak dan setiap fraksi ekstrak daun ciplukan konsentrasi
1000 ppm
10 mg ekstrak / 10 mL akuades
b. Pembuatan larutan kloramfenikol 1000 ppm (kemasan 250 mg)
1000 mg 250 mg
=
1L x

x = 250 mL
Kloramfenikol sebanyak 250 mg dimasukkan dalam labu ukur 250 mL dan
dilarutkan dengan akuades sampai tanda batas.
 58

Lampiran 4 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan Setiap Fraksi

Ekstrak Daun Ciplukan

1. Hasil uji antibakteri ekstrak dan setiap fraksi ekstrak daun ciplukan
Diameter Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata
Sampel lubang
I II III (cm)
(mm)
Akuades 5 0,00 0,00 0,00 0,00
Metanol 5 1,82 1,80 1,53 1,72
Ekstrak Metanol 5 2,45 2,18 2,22 2,28
Fraksi Residu 5 2,47 3,00 2,78 2,75
Etil Asetat 5 1,88 1,53 1,35 1,59
Fraksi Etil Asetat 5 2,22 2,23 2,17 2,21
n-heksana 5 2,17 2,15 2,17 2,16
Fraksi n-heksana 5 2,07 2,27 2,47 2,27
Kloramfenikol 5 25,87 25,75 23,40 25,00
Keterangan: Diameter zona hambat telah dikurangi dengan diameter lubang

2. Hasil one-way ANOVA uji aktivitas antibakteri ekstrak dan setiap fraksi ekstrak
daun ciplukan

ANOVA
Diameter zona hambat
Sum of df Mean F Sig.
Squares Square
Between
1441.940 8 180.242 746.930 .000
Groups
Within Groups 4.344 18 .241
Total 1446.283 26
 59

Diameter Zona Hambat

Duncan
Sampel N Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4
Akuades 3 .0000
Etil Asetat 3 1.5867
Metanol 3 1.7167
n-Heksana 3 2.1633 2.1633
Fraksi Etil Asetat 3 2.2067 2.2067
Fraksi n-Heksana 3 2.2700 2.2700
Ekstrak Metanol 3 2.2833 2.2833
Fraksi Residu 3 2.7500
Kloramfenikol 3 25.0067
Sig. 1.000 .139 .204 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
 60

Lampiran 5 Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan Setiap

Fraksi Ekstrak Daun Ciplukan

Metanol Ekstrak metanol Fraksi residu

Etil asetat Fraksi etil asetat Akuades

n-Heksana Fraksi n-heksana Kloramfenikol 1000 ppm

 61

Lampiran 6 Gambar Hasil Uji Fitokimia

Flavonoid Steroid
Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah

Tanin Saponin
Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah

Alkaloid Polifenol
Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah
 62

Lampiran 7 Pembuatan Larutan untuk Formulasi Sabun Cuci Tangan Cair

a. Pembuatan larutan KOH 20%

berat zat terlarut (g)
% b/v = volume pelarut (mL) x 100%
berat KOH
20% = x 100%
100 mL

Berat KOH = 20 gram

KOH sebanyak 20 gram dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL dan dilarutkan
dengan akuades sampai tanda batas.
b. Pembuatan larutan triclosan 1000 ppm
10 mg triclosan / 10 mL akuades
 63

Lampiran 8 Data Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Cuci Tangan Cair
dengan Penambahan Zat Aktif Fraksi Residu Ekstrak Metanol
Daun Ciplukan

1. Hasil uji antibakteri sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi
residu ekstrak metanol daun ciplukan
Diameter Zona Hambat Zona Hambat
Sampel (mm) Rata-rata Sesungguhnya
I II III (mm)
Basis sabun cuci
20,00 18,82 20,60 19,80 0,00
tangan cair
Sabun cuci tangan
20,18 19,80 23,82 21,27 1,47
cair + fraksi residu
Sabun cuci tangan
29,92 31 31,33 30,75 10,95
cair + triclosan

2. Hasil one-way ANOVA uji aktivitas antibakteri sabun cuci tangan cair dengan
penambahan zat aktif fraksi residu ekstrak metanol daun ciplukan

ANOVA
Diameter Zona Hambat
Sum of df Mean F Sig.
Squares Square
Between Groups 184.873 2 92.436 6.633 .030
Within Groups 83.614 6 13.936
Total 268.486 8

Diameter Zona Hambat

Duncan
Sampel N Subset for alpha = 0.05
1 2
Basis sabun cuci tangan cair 3 19.8067
Sabun cuci tangan cair +
3 23.6600 23.6600
fraksi residu
sabun cuci tangan cair +
3 30.7500
triclosan
Sig. .253 .059
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
 64

Lampiran 9 Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Cuci Tangan Cair
dengan Penambahan Zat Aktif Fraksi Residu Ekstrak Metanol
Daun Ciplukan

Sabun cuci tangan cair

Basis sabun cuci Sabun cuci tangan cair
+ fraksi residu ekstrak
tangan cair + triclosan
metanol daun ciplukan
 65

Lampiran 10 Data Uji Karakteristik Sabun Cuci Tangan Cair dengan

Penambahan Zat Aktif Fraksi Residu Ekstrak Metanol Daun
Ciplukan

A. Uji pH sabun cuci tangan cair dengan penambahan fraksi residu ekstrak metanol
daun ciplukan
1. Hasil uji pH
Nilai pH Rata-
Sampel
Ulangan I Ulangan II Ulangan III rata
Basis sabun cuci
6,87 6,84 6,85 6,85
tangan cair
Sabun cuci tangan
6,82 6,85 6,84 6,84
cair + fraksi residu
Sabun cuci tangan
6,50 6,54 6,54 6,53
cair + triclosan

2. Hasil one-way ANOVA uji pH

ANOVA
Nilai pH
Sum of df Mean F Sig.
Squares Square
Between
.203 2 .102 304.633 .000
Groups
Within Groups .002 6 .000
Total .205 8

Nilai pH
Duncan
Sampel N Subset for alpha = 0.05
1 2
Basis sabun cuci tangan cair 3 6.5267
Sabun cuci tangan cair +
3 6.8367
fraksi residu
Sabun cuci tangan cair +
3 6.8533
triclosan
Sig. 1.000 .306
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
 66

B. Uji stabilitas busa sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi
residu ekstrak metanol daun ciplukan
1. Hasil uji stabilitas busa
Nilai stabilitas busa (%) Rata-
Sampel
Ulangan I Ulangan II Ulangan III rata (%)
Basis sabun cuci
87,06 87,40 87,42 87,29
tangan cair
Sabun cuci tangan
85,19 85,72 85,70 85,53
cair + fraksi residu
Sabun cuci tangan
84,06 83,90 83,86 83,94
cair + triclosan

2. Hasil one-way ANOVA uji stabilitas busa

ANOVA
Nilai Stabilitas Busa
Sum of Df Mean F Sig.
Squares Square
Between
16.881 2 8.441 65.776 .000
Groups
Within Groups .770 6 .128
Total 17.651 8

Nilai Stabilitas Busa

Duncan
Sampel N Subset for alpha = 0.05
1 2 3
Basis sabun cuci tangan cair 3 83.9400
Sabun cuci tangan cair +
3 85.5333
fraksi residu
sabun cuci tangan cair +
3 87.2933
triclosan
Sig. 1.000 1.000 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
 67

C. Uji viskositas sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi residu
ekstrak metanol daun ciplukan
1. Hasil uji viskositas
Nilai viskositas (cPs) Rata-
Sampel rata
Ulangan I Ulangan II Ulangan III (cPs)
Basis sabun cuci
14,47 14,46 14,35 14,43
tangan cair
Sabun cuci tangan
15,02 15,16 14,66 14,95
cair + fraksi residu
Sabun cuci tangan
13,80 13,94 14,15 13,96
cair + triclosan

2. Hasil one-way ANOVA uji viskositas

ANOVA
Nilai uji viskositas
Sum of Df Mean F Sig.
Squares Square
Between
1.452 2 .726 21.353 .002
Groups
Within Groups .204 6 .034
Total 1.656 8

Nilai uji viskositas

Duncan
Sampel N Subset for alpha = 0.05
1 2 3
Basis sabun cuci tangan cair 3 13.9633
Sabun cuci tangan cair +
3 14.4267
fraksi residu
Sabun cuci tangan cair +
3 14.9467
triclosan
Sig. 1.000 1.000 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
 68

D. Uji asam lemak bebas sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi
residu ekstrak metanol daun ciplukan
1. Hasil uji asam lemak bebas
Nilai asam lemak bebas (%) Rata-rata
Konsentrasi
Ulangan I Ulangan II Ulangan III (%)
Basis sabun cuci
1,024 1,024 0,768 0,94
tangan cair
Sabun cuci
tangan cair + 0,768 0,768 1,024 0,85
fraksi residu
Sabun cuci
tangan cair + 0,768 0,768 0,512 0,68
triclosan

2. Hasil one-way ANOVA uji asam lemak bebas

ANOVA
Nilai uji asam lemak bebas
Sum of Df Mean F Sig.
Squares Square
Between Groups .102 2 .051 2.333 .178
Within Groups .131 6 .022
Total .233 8

Nilai uji asam lemak bebas

Duncan
Sampel N Subset for alpha = 0.05
1
Basis sabun cuci tangan cair 3 .68267
Sabun cuci tangan cair +
3 .85333
fraksi residu
sabun cuci tangan cair +
3 .93867
triclosan
Sig. .086
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
 69

E. Uji organoleptik sabun cuci tangan cair dengan penambahan zat aktif fraksi
residu ekstrak metanol daun ciplukan

Hasil uji organoleptik metode hedonik

Nilai uji Jumlah Rata-
No Parameter uji Total
1 2 3 4 5 panelis rata
1 Bentuk 1 3 6 10 45 4,5
2 Aroma 3 7 10 47 4,7
3 Warna 1 1 8 10 47 4,7
Kesan setelah
4 2 1 2 5 10 45 4,5
pemakaian
 70

Lampiran 11 Gambar Pembuatan dan Uji Karakteristik Sabun Cuci Tangan

Cair dengan Penambahan Zat Aktif Fraksi Residu Ekstrak
Metanol Daun Ciplukan

Sabun cuci tangan cair Uji pH Uji alkali bebas

Uji tinggi dan Uji viskositas Uji organoleptik

kestabilan busa
 RIWAYAT HIDUP

Nama : Bara Nurul Zahira

Tempat, Tanggal Lahir : Banyumas, 21 Februari 1999
NIM : K1A017031
Fakultas / Jurusan : MIPA Unsoed / Kimia
Angkatan : 2017
Email : 21baranurulz@gmail.com
Alamat Asal : RT005/RW001 Petambakan, Madukara
Banjarnegara, Jawa Tengah

Riwayat Pendidikan
1. TK 2 Bani Saleh Bekasi, 2003-2005
2. SD 6 Bani Saleh Bekasi, 2005-2011
3. SMP Negeri 1 Purwokerto, 2011-2014
4. SMA Negeri 5 Purwokerto, 2014-2017
5. Strata satu (S1) :
a. Perguruan Tinggi : Universitas Jenderal Soedirman
b. Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
c. Jurusan : Kimia
d. Bidang Kajian : Biokimia - Kimia Organik

71