Skripsi Nija Fix

SKRIPSI
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI

FRAKSI N-HEKSAN DAN ETANOL KULIT BATANG ASAM
JAWA (Tamarindus indica L.) TERHADAP BAKTERI Escherichia
coli Dan Staphylococcus aureus
NUR HANIJA
F201801045
PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS MANDALA WALUYA
2022
LEMBAR PERSETUJUAN
Skripsi ini telah dipertahankan dihadapan Tim Penguji seminar ujian
Komprehensif dan disetujui untuk diperbanyak sebagai salah satu syarat untuk
memperoleh gelar sarjana Program Studi Farmasi Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Mandala Waluya.
Kendari, Agustus 2022
Tim Pembimbing
Pembimbing I Pembimbing II
apt. Muhammad Isrul., S.Si., M.Si. Risky Juliansyah, S.Farm., M.Si

NIDN : 0925018801 NIDN : 0911038804
Mengetahui,
Dekan Fakultas Sains Dan Teknologi

Universitas Mandala Waluya
Dr. Sri Anggarini Rasyid, S.Si.,M.Si

NIDN : 09 2909 8202
ii
ABSTRAK

Program Studi Farmasi
Fakultas Sains dan Teknologi
Skripisi. Agustus 2022
Nur Hanija
“Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi N-Heksan Dan
Etanol Kulit Batang Asam Jawa (Tamarindus Indica L.) Terhadap Bakteri
Escherichia coli Dan Staphylococcus aureus”
Pembimbing I: apt.Muhammad Isrul,S.Si.,M.Si
Pembimbing II: Risky Juliansyah, S.Farm.,M.Si
Saat ini penyakit infeksi masih menjadi masalah kesehatan baik di negara
berkembang ataupun di negara maju. Mikroorganisme penyebab terjadinya penyakit
infeksi antara lain adalah parasit, virus, dan bakteri.
Penelitian ini merupakan penelitian analitik laboratorium dengan perlakuan
fraksi n-heksan dan etanol kulit batang asam jawa konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10%.
Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi agar dengan tiga kali
replikasi. Analisis data dilakukan dengan menggunakan analisis statistik yaitu uji
Mann Whitney.
Hasil rendamen ekstrak kulit batang asam jawa didapatkan sebesar 3,38%.
Sementara rendemen fraksi n-hexan sebesar 41%, dan rendemen fraksi etanol sebesar
27,5%.
Hasil skrining fitokimia fraksi n-heksan mengandung senyawa alkaloid, fenol,
flavonoid, dan triterpenoid. Sedangkan fraksi etanol mengandung senyawa fenol,
flavonoid, dan tanin.
Hasil pengujian aktivitas antibakteri fraksi n-heksan dan etanol terhadap
Escherichia coli menunjukkan rata-rata zona hambat pada fraksi n-heksan 20,33
mm, 22,25 mm, dan 26,91 mm. Fraksi etanol sebesar 19,41 mm, 26,41 mm, dan
27,25 mm. Sedangkan hasil pengujian aktivitas antibakteri fraksi n-heksan dan
etanol terhadap Staphylococcus aureus menunjukkan rata-rata zona hambat pada
fraksi n-heksan sebesar 23,16 mm, 25,25 mm, dan 28,08 mm. Fraksi etanol
sebesar 21,58 mm, 24,25 mm, dan 29 mm.
Aktivitas fraksi n-heksan dan fraksi etanol pada konsentrasi 2,5%, dan 5%
terhadap kontrol positif signifikan (P<0,05) terhadap bakteri Escherichia coli.
Pada Staphylococcus aureus fraksi n-heksan dan fraksi pada konsentrasi 2,5%,
5%, dan 10% terhadap kontrol positif signifikan (P<0,05). Sedangkan pada
fraksi etanol konsentrasi 10% dengan kontrol positif tidak signifikan (P>0,05).
Kata Kunci : Kulit Batang Asam Jawa, Skrining fitokimia Antibakteri,

Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Fraksi n-heksan,
Fraksi Etanol
Daftar Pustaka : 24 (1987-2021)
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur Penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah
memberikan Rahmat dan Karunia-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan hasil
penelitian yang berjudul “Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antibakteri
Fraksi N-Heksan Dan Etanol Kulit Batang Asam Jawa (Tamarindus Indica L.)
Terhadap Bakteri Escherichia coli Dan Staphylococcus aureus” guna memenuhi
salah satu persyaratan untuk menyelesaikan pendidikan pada Program Studi Ilmu
Farmasi di Universitas Mandala Waluya.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penyusunan skripsi ini masih jauh dari
kesempurnaan oleh karena itu saran-saran dari semua pihak yang sifatnya
membangun untuk meningkatkan mutu dari penulisan skripsi ini sangat penulis
harapkan.
Pada kesempatan ini Penulis tidak lupa menghanturkan rasa terima kasih yang
sebesar-besarnya kepada Bapak apt. Muh. Isrul, S.Si., M.Si. selaku Pembimbing I
dan kepada Ibu Risky Juliansyah, S.Farm., M.Si. selaku Pembimbing II atas semua
waktu, tenaga, dan pikiran yang telah diberikannya dalam membimbing,
mengarahkan, memberi saran maupun kritik sehingga Hasil Penelitian ini menjadi
lebih baik.
Tak lupa pula penulis haturkan rasa terima kasih yang sebesar-besarnya
kepada :
1. Ketua Yayasan Universitas Mandala Waluya
2. Rektor Universitas Mandala Waluya
iv
3. Ketua Lembaga (LPPM) Universitas Mandala Waluya
4. Ketua Dekan Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Mandala Waluya, Ibu Sri
Anggarini Rasyid, S.Si., M.Si
5. Para Tim Penguji masing-masing : Bapak apt Bai Athur Ridwan S.Farm.,
M.Pharm. Sci. selaku Penguji I, Ibu apt. Silviana Hasanuddin., S.Farm., M.Farm.
selaku penguji II dan Ibu Titi Purnama, S.Si., M.Kes selaku penguji III.
6. Seluruh dosen dan staf Universitas Mandala Waluya yang telah banyak
membantu penulis semasa pendidikan.
7. Kedua orang tua tercinta yang telah memberikan dukungan, kasih sayang serta
motivasi.
8. Seluruh teman – teman khususnya Program Studi Farmasi yang telah memberikan
bantuan dan motivasi kepada Penulis hingga selesainya skripsi ini.
Demikian skripsi ini semoga dapat bermanfaat bagi semua pihak dan
terutama Penulis dalam menyelesaikan pendidikan di Universitas Mandala Waluya
Kendari, Agustus 2022
Penulis
v
DAFTAR ISI
LEMBAR PERSETUJUAN................................................................................................ii
ABSTRAK...........................................................................................................................iii
KATA PENGANTAR.........................................................................................................iv
DAFTAR ISI........................................................................................................................vi
DAFTAR TABEL.............................................................................................................viii
DAFTAR GAMBAR...........................................................................................................ix
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................................x
DAFTAR ARTI LAMBANG DAN SINGKATAN..........................................................xi
BAB I PENDAHULUAN.....................................................................................................1
A. Latar Belakang............................................................................................................1
B. Rumusan Masalah.......................................................................................................4
C. Tujuan Penelitian........................................................................................................5
D. Manfaat Penelitian......................................................................................................6
E. Kebaruan Penelitian....................................................................................................7
BAB IITINJAUAN PUSTAKA...........................................................................................8
A. Tinjauan Umum Tentang Variabel Terikat....................................................8
B. Tinjauan Teori Tentang Variabel Bebas......................................................17
C. Kajian Empiris.............................................................................................23
BAB IIIKERANGKA KONSEP.......................................................................................24
A. Dasar Pikir Penelitian...................................................................................24
B. Bagan Kerangka Konsep Penelitian.............................................................25
C. Variabel Penelitian.......................................................................................25
D. Definisi Operasional dan Kriteria Objektif..................................................25
E. Hipotesis......................................................................................................27
BAB IV METODE PENELITIAN...................................................................................29
A. Jenis dan Rancangan Penelitian...................................................................29
B. Lokasi dan Waktu Penelitian.......................................................................30
C. Populasi dan Sampel....................................................................................30
D. Alat dan Bahan Penelitian............................................................................31
vi
E. Skrining Fitokimia...........................................................................................31
F. ProsedurKerja.................................................................................................32
G. Etika Penelitian...............................................................................................38
I. Waktu Penelitian..............................................................................................38
BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................................39
A. Gambaran Umum Lokasi Penelitian............................................................39
B. Hasil Penelitian............................................................................................39
C. Pembahasan..................................................................................................47
BAB VI PENUTUP............................................................................................................55
A. Kesimpulan..................................................................................................55
B. Saran.............................................................................................................56
DAFTAR PUSTAKA.........................................................................................................57
LAMPIRAN........................................................................................................................59
vii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
1. Kebaruan Penelitian ................................................................................... 7
2. Kategori zona hambat................................................................................ 18
3. Waktu Penelitian......................................................................................... 38
4. . Hasil Rendemen Serbuk kulit batang asam jawa (Tamarindus indica 39

L.)...................................................................................................................
5. Rendamen fraksi kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.)............ 40
6. Hasil Identifikasi Kandungan Senyawa Kimia fraksi n-Heksan kulit 40

batang asam jawa (Tamarindus indica L.)..................................................
7 Hasil Identifikasi Kandungan Senyawa Kimia fraksi Etanol kulit batang 40
asam jawa (Tamarindus indica L.).............................................................
8 Diameter zona hambat fraksi Etanol kulit batang asam jawa terhadap 41
bakteri Escherichia coli............................................................................
9 Diameter zona hambat fraksi n-heksan kulit batang asam jawa terhadap 42
bakteri Escherichia coli............................................................................
1 Diameter zona hambat fraksi Etanol kulit batang asam jawa terhadap 42
0 bakteri Staphylococcus aureus.................................................................
1 Diameter zona hambat fraksi n-heksan kulit batang asam jawa terhadap 43
1 bakteri Staphylococcus aureus.................................................................
1 Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi etanol kulit batang 44
2 asam jawa pada Escherichia coli..................................................
1 Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi n-heksan kulit 44
3 batang asam jawa pada Escherichia coli..................................................
1 Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi etanol kulit batang 45
4 asam jawa pada Staphylococcus aureus....................................
1 Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi n-heksan kulit 46
viii
5 batang asam jawa pada Staphylococcus aureus....................................
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
1. Bakteri Staphylococcus aureus.......................................................................... 11
2. Bakteri Escherichia coli.................................................................................. 14
3. Asam Jawa..................................................................................................... 19
4. Bagan Kerangka Konsep............................................................................... 26
5. Desain Penelitian........................................................................................... 29
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1 Skema Penelitian................................................................................................. 61
2 Perhitungan...................................................................................................... 62
3 Skrining Fitokimia.............................................................................................. 64
4 Dokumentasi 65
5 Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Etanol Terhadap Bakteri Escherichia 71
coli ........
6 Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Heksan Terhadap Bakteri Escherichia 75
coli.....................................................................................................................
7 Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Etanol Terhadap Bakteri Staphylococcus 80
aureus.................................................................................................................
8 Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Heksan Terhadap Bakteri 85
Staphylococcus aureus........................................................................................
9 Hasil Analisis SPSS............................................................................................ 91
x
DAFTAR ARTI LAMBANG DAN SINGKATAN
No. Singkatan Arti
1. Cm Centimeter
2. G Gram
4. ml Mililiter
5. Mm Milimeter
6. DMSO Dimetil sulfoksida
7. % Persen
8. HCl Hidroklorida
9. Mg Magnesium
10. F.ET Fraksi etanol
11. H2SO4 Asam Sulfat
12. FeCl3 Besi Klorida Tiga
13 NA Nutrient Agar
14. F.NH Fraksi n-heksan
15. KPF Kontrol Positif
16. KNF Kontrol Negatif
xi
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Dewasa ini penyakit infeksi masih menjadi masalah kesehatan baik di negara
yang masih berkembang ataupun di negara yang sudah maju. Mikroorganisme
penyebab terjadinya penyakit infeksi antara lain adalah parasit, virus, dan bakteri .
Penyakit infeksi masih menjadi masalah kesehatan yang utama di beberapa
negara, khususnya di negara berkembang (Kementerian Kesehatan RI, 2011).
Penyebab infeksi disebabkan oleh sejumlah mikroorganisme seperti bakteri yang
bersifat patogen yang biasa dikenal dengan kuman penyakit. Sejumlah bahan
antimikroorganisme yang digunakan untuk menghambat kuman penyakit penyebab
infeksi telah lama dikembangkan pada tingkat organisme, baik seluler maupun
molekuler. Bahan antimikroorganisme tersebut dikenal dengan antibiotik.
Berdasarkan data WHO tahun 2015 menyatakan bahwa Indonesia menduduki
peringkat ke-8 dari 27 negara yang banyak didapati kasus resistensi bakteri
terhadap antibiotika, hal ini disebabkan karena penggunaan antibiotika yang tidak
rasional, sedangkan pada tahun 2013, WHO menyebutkan bahwa terdapat 480.000
kasus Multi Drug Resistance Tuberculosis (MDRTB) di dunia. Data ini
menunjukkan bahwa resistensi antibiotika memang telah menjadi masalah yang
harus segera diselesaikan (Zuhriyah, 2018).
Staphylococcus aureus merupakan bakteri patogen Gram positif yang
mudah tumbuh pada kebanyakan medium bakteriologis dalam keadaan aerob
maupun anaerob fakultatif. Staphylococcus aureus banyak ditemukan di sekitar
1
lingkungan hidup manusia penyebab penyakit infeksi di dunia. Hal ini disebabkan
oleh kemampuan Staphylococcus aureus yang mudah beradaptasi dengan
lingkungan melalui ketahanannya terhadap antimikrobial yang dimilikinya. Bakteri
ini terutama ditemukan pada kulit, kelenjar kulit, selaput lendir, luka dan umumnya
merupakan penyebab radang tenggorokan, infeksi kulit (bisul), serta infeksi sistem
saraf pusat dan paru-paru. Manifestasi dari infeksi Staphylococcus aureus ini dapat
berupa impetigo, pneumonia, osteomielitis, pioartrosis, endokarditis, metastasis
staphylococcal, keracunan makanan, sindrom syok toksik, meningitis, dan sepsis
(Khusnan, 2008). Menurut (Jinghua et al, 2017) kasus resistensi antibiotik seperti
penisilin, eritromisin, tetraksiklin, dan klindamisin telah terjadi pada bakteri
Staphylococcus aureus
Escherichia coli adalah bakteri yang banyak ditemukan dalam usus besar
manusia, sifatnya dapat menyebabkan infeksi pada usus misalnya diare pada anak,
infeksi saluran kemih juga kemampuannya menimbulkan infeksi pada jaringan
tubuh lain dari luar usus (Croxen, 2013). Infeksi bakteri yang paling sering
menimbulkan diare adalah infeksi bakteri Escherichia coli.
Kloramfenikol adalah antibiotik spektrum luas yang efektif terhadap
beberapa jenis bakteri dan kuman anaerob. Kloramfenokol memiliki mekanisme
menghambat sintesis protein bakteri pada ribosom subunit 50S dan menghambat
enzim peptidil transferase sehingga ikatan peptida tidak terbentuk pada proses
sintesis protein bakteri (Widayati, 2020). Kloramfenikol sebagai kontrol positif
menunjukan aktivitas antibakteri yang sangat kuat karena memiliki zona hambat
lebih dari 20 mm (Tarman, 2014). Menurut Davis (1971) menyatakan bahwa
2
ketentuan kekuatan antibiotik antibakteri yaitu sangat kuat untuk zona hambat 20
mm atau lebih, kuat untuk zona hambat 10-20 mm, sedang untuk zona hambat 5-10
mm, dan lemah untuk daerah hambat kurang dari 5 mm.
Pengetahuan tentang khasiat dan keamanan tanaman obat di Indonesia
biasanya hanya berdasarkan pengalaman empiris yang biasanya diwariskan secara
turun temurun dan belum teruji secara ilmiah.Untuk itu diperlukan penelitian
tentang obat tradisional, sehingga nantinya obat tersebut dapat aman digunakan
oleh masyarakat (Irnawati, 2016).
Peningkatan resistensi bakteri terhadap antibiotik mendorong para peneliti
untuk mencari alternatif pengobatan yang lebih efektif dan aman, yaitu dengan
memanfaatkan bahan alam (Amelia, 2018). Selain itu pemanfaatan bahan alam ini
juga dapat membantu masyarakat pedesaan dengan kondisi ekonomi lemah yang
terkendala dengan harga obat-obatan yang cukup mahal, serta jarak tempuh menuju
apotek atau pusat pelayanan kesehatan yang cukup jauh. Salah satu bahan alam
yang dapat dimanfaatkan untuk obat tradisional adalah tanaman Kulit Batang
Asam jawa (Tamarandus indica L.).
Berbagai penelitian telah menemukan aktivitas asam jawa dalam
menghambat pertumbuhan dalam berbagai jenis bakteri. Aktivitas antibakteri ini
disebabkan oleh adanya kandungan fitokimia seperti tanin, flavonoid, alkaloid,
cyanogenic glycosida antraquinone, dan berbagai senyawa aromatik lainya (Putri,
2014). Menurut (Nwodo et al, 2011) kulit batang asam jawa (Tamarindus indica
L.) mengandung flavonoid, alkaloid, tanin, dan cyanogenic, glikosida dan
antrakuinon yang berfungsi sebagai antibakteri. Flavonoid merupakan golongan
3
terbesar dari senyawa polifenol yang dapat bekerja sebagai antioksidan dan juga
sebagai antibakteri maupun antifungi yang bekerja dengan menghambat
pertumbuhan jamur dengan menyebabkan gangguan permeabilitas membran sel
jamur. Gugus hidroksil yang terdapat pada senyawa flavonoid menyebabkan
perubahan komponen organik dan transport nutrisi yang akhirnya akan
mengakibatkan timbulnya efek toksik terhadap jamur (Yulianita, 2019)
Penelitian mengenai kulit batang asam jawa terhadap aktivitas antibakteri
dengan menggunakan konsentrasi fraksi 2,5% dan 5% dan 10% mengacu pada
penelitian ekstrak etanol daun asam jawa dengan konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10%
terbukti mulai menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dengan
diameter zona hambat masing-masing 7,96 mm, 8,18 mm, dan 8,46 mm (Jusnita,
2016).
Pada penelitian ini dilakukan fraksinasi dimana tujuan dari fraksinasi adalah
untuk memisahkan senyawa-senyawa berdasarkan tingkat kepolarannya. Pada
prinsipnya senyawa polar diekstraksi dengan pelarut polar sedangkan senyawa non
polar diekstraksi dengan pelarut non polar (Uthia et al, 2017). Fraksi n-heksan
diketahui dapat menarik senyawa flavonoid dimana senyawa tersebut memiliki
aktivitas sebagai antibakteri sedangkan pada fraksi etanol dapat menarik senyawa
polifenol.
B. Rumusan Masalah
Adapun rumusan masalah dalam penelitian adalah :
1. Apa saja kandungan kimia yang terdapat pada fraksi n-heksan dan etanol kulit
batang asam jawa (Tamarindus indica L.)?
4
2. Apakah fraksi n-heksan dan etanol kulit batang asam jawa (Tamarindus indica
L.) mempunyai aktivitas antibakteri pada konsentrasi 2,5%, 5% dan 10% ?
3. Apakah konsentrasi paling optimum fraksi n-heksan dan etanol kulit batang
asam jawa (Tamarindus indica L.) mampu menghambat bakteri Escherichia coli
dan Staphylococcus aureus?
4. Bagaimana perbedaan aktivitas antibakteri fraksi n-heksan dan etanol dengan
konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% terhadap bakteri Escherichia coli dan
C. Tujuan Penelitian
1. Tujuan Umum
Untuk mengetahui manfaat dan aktivitas fraksi kulit batang asam jawa
(Tamarindus indica L.) terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus pada konsentrasi 2,5%, 5% dan 10 %
2. Tujuan Khusus
Tujuan khusus penelitian ini adalah sebagai berikut:
1) Untuk mengetahui kandungan kimia yang terdapat pada fraksi n-heksan dan
etanol kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.)
2) Untuk mengetahui aktivitas antibakteri fraksi n-heksan dan etanol kulit batang
asam jawa (Tamarindus indica L.) pada konsentrasi 2,5%, 5% dan 10%
3. Untuk mengetahui konsentrasi paling optimum fraksi n-heksan dan etanol
kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.) dalam menghambat bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
5
4. Untuk mengetahui perbedaan aktivitas antibakteri fraksi n-heksan dan etanol
dengan konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% terhadap bakteri Escherichia coli dan
D. Manfaat Penelitian
Adapun manfaat penelitian ini adalah :
1. Manfaat Teoritis
Dapat memberikan informasi yang dapat dipertanggungjawabkan secara
ilmiah mengenai manfaat fraksi kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.).
2. Manfaat Institusi
Dapat mewujudkan peran Universitas Mandala Waluya dalam mengkaji
permasalahan yang terjadi di masyarakat terkait tanaman obat lokal.
3. Manfaat Praktis
Dapat menambah pengetahuan dan keahlian peneliti dalam pengujian
fraksi n-heksan dan etanol kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.)
terhadap aktivitas antibakteri.
6
E. Kebaruan Penelitian
Penelitian tentang uji aktivitas fraksi n-heksan dan etanol kulit batang asam
jawa (Tamarindus indica L.) terhadap skrining fitokimia dan uji aktivitas antibakteri
dilakukan sebelumnya. Penelitian yang terkait dengan ini dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Kebaruan penelitian
No Peneliti dan tahun Judul Persamaan Perbedaan
1. Jusnita, (2016) Uji Aktivitas Menggunakan 1. Penelitian

Antibakteri Ekstrak bakteri yang sama sebelumnya
Etanol 70% Daun
Asam Jawa melakukan penelitian
(Tamarindus Indica dengan jenis sampel
L) Dan Formulasi yang berbeda
Sediaan Obat Kumur
Terhadap Bakteri
Staphylococcus
Aureus
2. Nwodo, (2011) Assesment of Menggunakan Berbeda metode

Tamarindus indica sampel yang sama penelitian
Extract for
Antibacterial Activity
3. Putri (2014) Potensi Dan Menggunakan 2.

Pemanfaatan sampel yang sama
Berbeda metode
Tamarindus Indica
penelitian
Dalam Berbagai
Terapi.
4. Hidayatullah, 2021 Daya Hambat Ekstrak Menggunakan Menggunakan bakteri

Daun Jawa sampel yang sama dan metode yang
(Tamarindus indica berbeda
Linn.) Terhadap
Pertumbuhan Bakteri
Enterococcus faecalis
7
8
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Tinjauan Umum Tentang Variabel Terikat
1. Tinjauan Tentang Skrining Fitokimia
Fitokimia atau kimia tumbuhan mempelajari aneka ragam senyawa
organik yang dibentuk dan ditimbun oleh tumbuhan yaitu mengenai struktur
kimianya, biosintesisnya, perubahan serta metabolismenya, penyebaranya
secara alamiah serta fungsi biologisnya. Tumbuhan menghasilkan berbagai
macam senyawa kimia organik, senyawa kimia ini bisa berupa metabolit
primer maupun metabolit sekunder. Kebanyakan tumbuhan menghasilkan
metabolit sekunder, yang dimana senyawa ini dikenal sebagai alamiah
metabolisme.
Kandungan senyawa metabolit sekunder dalam suatu tanaman dapat
diketahui dengan suatu metode pendekatan yang dapat memberikan informasi
adanya senyawa metabolit sekunder. Salah satu metode yang bisa digunakan
yaitu skrining fitokimia (Harborne, 1987)
Uji fitokimia terhadap senyawa kimia metabolit sekunder merupakan
langkah awal yang penting dalam penelitian mengenai tumbuhan obat atau
dalam hal pencarian senyawa aktif baru yang berasal dari bahan alam yang
dapat menjadi precursor bagi sintesis obat-obat baru .
9
2. Tinjauan Tentang Bakteri Staphylococcus aureus
1. Defenisi Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus merupakan bakteri fakultatif anaerob. Bakteri
ini tumbuh pada suhu optimum 37ºC, tetapi membentuk pigmen paling baik
pada suhu kamar (20-25ºC). Koloni pada perbenihan padat berwarna abu-
abu sampai kuning keemasan, berbentuk bundar, halus, menonjol, dan
berkilau. Lebih dari 90% isolat klinik menghasilkan Staphylococcus aureus
yang mempunyai kapsul polisakarida atau selaput tipis yang berperan
dalam virulensi bakteri (Jawetz et al., 2008). Pada lempeng agar, koloninya
berbentuk bulat, diameter 1-2 mm, cembung, buram, mengkilat dan
konsistensinya lunak. Pada lempeng agar darah umumnya koloni lebih
besar dan pada varietas tertentu koloninya di kelilingi oleh zona hemolisis
(Syahrurahman et al., 2010).
b. Klasifikasi Staphylococcus aureus
Klasifikasi Staphylococcus aureus adalah sebagai berikut:
Domain : Bacteria
Kingdom : Eubacteria
Ordo : Eubacteriales
Famili : Micrococcaceae
Genus : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus aureus (Syahrurahman et al., 2010).
10
Gambar 1. Bakteri Staphylococcus aureus
(Febrianasari, 2018).
c. Morfologi Staphylococcus aureus
Bakteri Staphylococcus aureus berbentuk bulat. Koloni mikroskopik
cenderung berbentuk menyerupai buah anggur. Menurut bahasa Yunani,
Staphyle berarti anggur dan coccus berarti bulat atau bola. Salah satu
spesies menghasilkan pigmen warna kuning emas sehingga dinamakan
aureus (berarti emas, seperti matahari). Bakteri ini dapat tumbuh dengan
atau tanpa bantuan oksigen (Febrianasari, 2018).
d. Karakteristik
Bakteri Staphylococcus aureus bersifat patogen pada manusia.
Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram-positif berbentuk bulat
dan berdiameter 0,8-1,0 mikron, tidak bergerak, dan tidak berspora (Radji,
2011). Bakteri ini merupakan bakteri gram positif yang memiliki dinding
sel luar yang tebal yang terbuat dari polimer kompleks yang disebut
peptidoglikan. Bakteri gram positif memiliki lapisan kandungan lipid yang
rendah yaitu hanya sebesar 1-4% (Pelczar dan Chan, 2005).
Kisaran suhu pertumbuhan Staphylococcus aureus 15-400C dan suhu
optimum adalah 350C. Staphylococcus aureus membentuk koloni besar
11
berwarna agak kuning dalam media yang baik. Staphylococcus aureus
bersifat anaerob fakultatif dan dapat tumbuh karena melakukan respirasi
aerob atau fermentasi yang menghasilkan asam laktat. Diantara semua
bakteri yang tidak membentuk spora, Staphylococcus aureus termasuk
bakteri yang memiliki daya tahan paling kuat (Radji, 2011).
Menurut Locke et al (2012), bakteri Staphylococcus aureus
menyebabkan beberapa penyakit, yaitu penyakit kulit seperti impetigo,
paronikia, abses, selulitis, dan infeksi kulit. Pada tulang dan sendi dapat
menyebabkan osteomyelitis dan arthritis septik, menyebabkan pneumonia
pada organ pernafasan, dan menyebabkan endocarditis infektif pada organ
kardiovaskular. Staphylococcus aureus merupakan salah satu penyebab
utama nosocomial akibat luka tindakan operasi dan pemakaian alat-alat
perlengkapan perawatan rumah sakit.
Menurut Chiller, dkk (2001), hampir setiap orang akan mengalami
beberapa tipe infeksi Staphylococcus aureus sepanjang hidupnya. Setiap
jaringan ataupun organ tubuh dapat terinfeksi dan menimbulkan penyakit
dengan tanda-tanda khas, yaitu perdangan, nekrosis, dan pembentukan
abses. Bakteri ini juga dapat menyebabkan penyakit kulit yang dapat
menyerang bayi yang baru lahir hingga orang dewasa. Beberapa antibiotik
dapat digunakan untuk memghambat Staphylococcus aureus antara lain
ampisilin, penisilin, tetrasiklin, kloksasilin, sefalosporin, vankomisin, dan
metisilin (Tirta, 2010).
12
3. Bakteri Escherichia coli
a. Sejarah Escherichia coli
Escherichia coli adalah salah satu jenis bakteri yang secara normal
hidup dalam saluran pencernaan baik manusia maupun hewan yang sehat.
Nama bakteri ini diambil dari nama seorang bacteriologist yang berasal dari
Germani yaitu Theodor Von Escherich, yang berhasil melakukan isolasi
bakteri ini pertama kali pada tahun 1885. Dr. Escherich juga berhasil
membuktikan bahwa diare dan gastroenteritis yang terjadi pada infant
adalah disebabkan oleh bakteri Escherichia coli (Jawetz et al., 1995).
b. Klasifikasi
Klasifikasi nomenklatur Escherichia coli sebagai berikut :
Superdomain : Phylogenetica
Filum : Proterobacteria
Kelas : Gamma Proteobacteria
Ordo : Enterobacteriales
Family : Enterobacteriaceae
Genus : Escherichia
Species : Escherichia coli (Jawetz et al., 1995).
13
Gambar 2. Escherichia coli (Carr, 2016)
c. Morfologi
Escherichia coli merupakan bakteri Gram negatif berbentuk batang
pendek yang memiliki panjang sekitar 2 μm, diameter 0,7 μm, lebar 0,4-
0,7μm dan bersifat anaerob fakultatif. Bentuk sel dari bentuk seperti coocal
hingga membentuk sepanjang ukuran filamentous. Tidak ditemukan spora.
Selnya bisa terdapat tunggal, berpasangan, dan dalam rantai pendek,
biasanya tidak berkapsul. Escherichia coli membentuk koloni yang bundar,
cembung, dan halus dengan tepi yang nyata (Jawetz et al., 1995).
Pertumbuhan yang baik pada suhu optimal 370C pada media yang
mengandung 1% pepton sebagai sumber karbon dan nitrogen. Escherichia
coli memfermentasikan laktosa dan memproduksi indol yang digunakan
untuk mengidentifikasikan bakteri pada makanan dan air. Escherichia coli
berbentuk sirkular, konveks dan koloni tidak berpigmen pada nutrient dan
media darah. Escherichia coli dapat bertahan hingga suhu 600C selama 15
menit atau pada suhu 550C selama 60 menit. Escherichia coli tumbuh baik
pada temperatur antara 8°-46°C dan temperatur optimum 37°C. Bakteri
yang dipelihara di bawah temperatur minimum atau sedikit di atas
14
temperatur maksimum, tidak akan segera mati melainkan berada di dalam
keadaan tidur atau dormansi (Melliawati, 2009).
4. Tinjauan Tentang Antibakteri
a. Pengertian Antibakteri
Antibakteri merupakan zat yang dapat mengganggu pertumbuhan atau
bahkan mematikan bakteri dengan cara mengganggu metabolisme mikroba
yang merugikan (Dwidjoseputro, 1980 dalam Maulida, 2010).
Mikroorganisme dapat menimbulkan penyakit pada makhluk hidup lain
karena memiliki kemampuan menginfeksi, mulai dari infeksi ringan sampai
infeksi berat bahkan kematian. Oleh karena itu, pengendalian yang tepat
perlu dilakukan agar mikroorganisme tidak menimbulkan kerugian (Radji,
2011).
Beberapa agen antimikroba merupakan antibiotik. Walaupun semua
antibiotik merupakan agen antimikroba, namun tidak semua agen
antimikroba merupakan antibiotik (Burton dan Engelkirk, 2004). Antibiotik
adalah suatu metabolit yang diperoleh atau dibentuk oleh berbagai jenis
mikroorganisme, yang dalam konsentrasi rendah mampu menghambat
pertumbuhan mikroorganisme lain.
Menurut Burton dan Engelkirk (2004), antibakteri yang ideal harus
memiliki kualitas sebagai berikut :
1) Membunuh atau menghambat pertumbuhan patogen
2) Tidak menyebabkan kerusakan pada inang
3) Tidak menyebabkan reaksi alergi pada inang
15
4) Tetap stabil saat disimpan baik dalam bentuk padatan maupun cair
5) Bertahan pada jaringan khusus pada tubuh dalam waktu yang
cukup lama sehingga menjadi efektif
6) Membunuh patogen sebelum mengalami mutasi dan menjadi resisten
Antibakteri harus dapat menghambat atau membunuh patogen tanpa
merugikan inang. Oleh karena itu, antibakteri harus menyasar pada proses
metabolisme atau struktur yang dimiliki oleh patogen tapi tidak dimiliki
oleh inang.
b. Mekanisme Kerja Antibakteri
Menurut Radji (2011), berdasarkan mekanisme kerjanya dalam
menghambat pertumbuhan mikroorganisme, antibakteri digolongkan
sebagai berikut:
1) Antibakteri yang dapat menghambat sintesis dinding sel
Dinding sel bakteri sangat penting untuk mempertahankan struktur
sel bakteri. Oleh karena itu, zat yang dapat merusak dinding sel akan
melisiskan dinding sel sehingga dapat mempengaruhi bentuk dan
struktur sel, yang pada akhirnya dapat membunuh sel bakteri tersebut.
2) Antibakteri yang dapat menganggu atau merusak membran sel
Membran sel mempunyai peranan penting dalam mengatur
transportasi nutrisi dan metabolit yang dapat keluar masuk sel. Membran
sel juga berfungsi sebagai tempat berlangsungnya respirasi dan aktivitas
biosintesis dalam sel. Beberapa jenis antibakteri dapat mengganggu
membran sel sehingga dapat mempengaruhi kehidupan sel bakteri.
16
3) Antibakteri yang dapat menganggu biosintesis asam nukleat
Proses replikasi DNA di dalam sel merupakan siklus yang sangat
penting bagi kehidupan sel. Beberapa jenis antibakteri dapat
mengganggu metabolisme asam nukleat tersebut sehingga
mempengaruhi seluruh fase pertumbuhan sel bakteri
4) Antibakteri yang menghambat sintesis protein
Sintesis protein merupakan suatu rangkaian proses yang terdiri atas
proses transkripsi (yaitu DNA ditranskripsi menjadi mRNA) dan proses
translasi (yaitu mRNA ditranslasi menjadi protein). Antibakteri dapat
menghambat proses-proses tersebut akan menghambat sintesis protein.
c. Daya Hambat Antibakteri
Daya antibakteri dapat ditentukan berdasarkan nilai KHM dan
KBM terhadap pertumbuhan suatu bakteri. Konsentrasi minimal yang
diperlukan untuk menghambat pertumbuhan bakteri dikenal sebagai
konsentrasi/ Kadar Hambat Minimal (KHM). Konsentrasi minimal yang
diperlukan untuk membunuh 99,9% pertumbuhan bakteri dikenal sebagai
konsentrasi bunuh minimal (KBM) (Forbes, 2007). Menurut CLSI (2015)
bahwa standar daya hambat kloramfenikol terhdap bakteri Staphylococcus
aureus sebesar 29-37 mm sedangkan pada bakteri E. Coli >18 mm
Suatu zat aktif dikatakan memiliki potensi yang tinggi sebagai
antibakteri jika pada konsentrasi rendah memiliki daya hambat yang
besar.
17
B. Tinjauan Teori Tentang Variabel Bebas
1. Kulit Batang Asam Jawa (Tamarindus indica L.)
Tanaman Asam Jawa merupakan pohon dengan tinggi batang
mencapai 25 m. Memiliki daun yang rindang, bentuk daun bersirip genap,dan
bertangkai panjang. Panjang daun asam sekitar 17 cm, bunga berwarna
kuning kemerahan. Buah berbentuk polong, berwarna coklat berasa khas
asam dan mimiliki biji 2-5 buah.
Tanaman asam dapat tumbuh subur di daerah terbuka dengan
ketinggian antara 0-1.300 m. Tanaman asam menyukai daerah terbuka
dengan intensitas sinar matahari penuh sepanjang hari (Afifah, 2003)
Tanaman asam jawa juga telah dikenal masyarakat sebagai pohon
rindang dan ditemukan hampir di seluruh wilayah Indonesia dan digunakan
sebagai pengobatan tradisional untuk mengobati beberapa macam penyakit
seperti demam, disentri, dan gangguan pencernaan. Asam jawa juga memiliki
kandungan antibakteri yang cukup luas dan merupakan sumber potensial
dari antimikroba golongan baru. Asam jawa memiliki banyak kandungan zat
diantaranya adalah flavonoid, tanin, saponin, dan alkaloid yang sangat
berguna untuk menyembuhkan berbagai macam penyakit dan juga
menghambat aktivitas antibakteri (Hidayatullah, 2021).
18
Gambar 3. Asam Jawa (Heyne, 1987)
2. Klasifikasi dari tanaman Kulit batang Asam Jawa (Tamarindus indica L.) (Itis,
2016):
Kingdom : Plantae
Divisi : Tracheophyta
Class : Magnoliopsida
Ordo : Fabales
Family : Fabaceae
Genus : Tamarindus
Species : Tamarindus indica L.
3. Senyawa Kimia Asam Jawa (Tamarindus indica L.)
Kandungan kimia alamiah yang terdapat dalam buah asam diantaranya
gula invert, asam tartrat, asam sitrat, asam pipecolic, sirine, beta alanine,
proline, dan leuchine. Sementara itu kulit kayunya menagndung tanin (Meher,
2014) Daun asam jawa memiliki banyak kandungan zat yang berguna untuk
menyembuhkan berbagai macam penyakit dan juga dapat menghambat
19
aktivitas antibakteri dalam tubuh. Menurut penelitian Arranz et al, 2010
menunjukan bahwa daun asam jawa mampu menghambat pertumbuhan bakteri
B.Subtilis, P. Aeruginosa, dan E. Coli. Menurut nwodo et al, 2011 hasil uji
fitokimia dari ekstrak daun asam jawa mengandung tanin, flavonoid, saponin,
glikosida, terpen, sterol, dan antraquinon. Daun asam jawa juga mengandung
senyawa flavonoid diantaranya luteolin, apegenin, orientin, dan vitexin.
2. Tinjauan Tentang Ekstraksi
Menurut (Dirtjen POM, 2005) Ekstraksi adalah kegiatan pengambilan
suatu senyawa kimia yang dapat larut dari suatu simplisia dalam komposisi
pelarut cair tertentu sehingga dapat dipisahkan dari kandungan atau
pengotor yang tidak dapat larut dalam pelarut tersebut. Ekstrak merupakan
suatu sediaan kental yang didapatkan dengan suatu jalan ekstraksi senyawa
aktif dari suatu simplisia baik nabati maupun hewani dengan meggunakan
pelarut yang dapat melarutkan senyawa target, kemudian diperlakukan
sedemikian rupa sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan. Tujuan
pembuatan ekstrak tanaman obat adalah tidak lain untuk dapat
menstandarisasi kandungannya sehingga keseragaman mutu, khasiat dan
keamanan produk dapat dijamin. Keuntungan penggunaan ekstrak
dibandingkan dengan simplisia adalah penggunaannya dapat lebih
sederhana, jika dilihat dari segi jumlah peggunaanya yang lebih sedikit dari
bobot tumbuhan atau simplisia asalnya. Kesamaan aktivitas dalam bentuk
ekstrak dan simplisia asalnya sebenarnya tidak berbeda jauh tetapi tidak
20
sama persis dikarenakan pelarut yang digunakan tidak dapat mengekstrak
kandungan berkhasiatya dengan sempurna.
Menurut (Dirtjen POM, 2005) metode ekstraksi senyawa organik
bahan alam yang biasanya diterapkan adalah sebagai berikut :
a. Metode Maserasi
Maserasi merupakan proses perendaman simplisia pada temperatur
ruang menggunakan suatu pelarut yang sesuai dengan kelarutan senyawa
target. Proses perendaman dengan pelarut tersebut menyebabkan perbedaan
tekanan yang berada didalam dan diluar sel sehingga akan memecah
dinding sel dan juga membran sel. Dengan terjadinya hal tersebut maka
diharapkan metabolit sekunder yang berada didalam sitoplasma akan larut
dalam pelarut organik sehingga diharapkan senyawa target akan terlarut
seutuhnya karena lama perendaman dapat diatur. Keuntungan
menggunakan metode maserasi antara lain mudah, tidak menggunakan suhu
tinggi sehingga stabilitas bahan dapat tetap terjaga dan alat dan proses yang
dibutuhkan cukup sederhana.
Maserasi umumnya dilakukan dengan cara : memasukkan simplisia
yang sudah diserbukkan dengan derajat halus tertentu sebanyak 10 bagian
ke dalam bejana maserasi yang dilengkapi pengaduk mekanik, kemudian
ditambahkan 75 bagian cairan penyari ditutup dan dibiarkan selama 3 hari
pada temperatur kamar terlindung dari cahaya sambil berulang-ulang
21
diaduk. Setelah 3 hari, disaring kedalam bejana penampung, kemudian
ampasnya diperas dan ditambah cairan penyari lagi secukupnya dan diaduk
kemudian disaring lagi hingga diperoleh sari 100 bagian. Sari yang
diperoleh ditutup dan disimpan pada tempat yang terlindung dari cahaya
selama 2 hari, endapan yang terbentuk dipisahkan dan filtratnya dipekatkan.
b. Perkolasi
Perkolasi merupakan proses melewatkan suatu pelarut organik pada
simplisia sehingga pelarut tersebut diharapkan dapat membawa senyawa
target. Metode ekstraksi ini hanya akan efektif jika senyawa target sangat
mudah larut dalam pelarut organik yang digunakan.
c. Sokletasi
Sokletasi merupakan suatu proses mengalirkan pelarut dalam sistem
sirkulasi yang akan selalu membasahi sampel dengan bantuan pemanasan.
Keuntungan dari metode ini adalah dapat menghemat pelarut, tetapi metode
ini hanya dapat diterapkan pada senyawa yang stabil terhadap pemanasan.
d. Destilasi Uap
Destilasi uap merupakan metode ekstraksi yang umum untuk proses
senyawa volatil seperti minyak atsiri. Sangat sesuai digunakan untuk
senyawa target yang stabil pada temperatur tinggi, lebih tinggi dari titik
didih pelarut yang digunakan.
3. Fraksinasi
Fraksinasi merupakan prosedur pemisahan yang bertujuan untuk
22
memisahkan golongan utama yang lain. Pemisahan jumlah dan jenis senyawa
menjadi fraksi yang berbeda yang bergantung pada jenis simplisia Sebagaimana
diketahui bahwa senyawa-senyawa yang bersifat non polar akan larut dalam
pelarut yang non polar sedangkan senyawa-senyawa yang bersifat polar akan
larut dalam pelarut yang bersifat polar juga (Mutiasari, 2012). fraksinasi
bertingkat biasanya menggunakan pelarut organik seperti eter, aseton,
diklorometana, atau campuran pelarut tersebut Pemakaiaan pelarut pada
fraksinasi bertingkat diawali dengan pelarut yang kurang polar dan dilanjutkan
dengan pelarut yang lebih polar (Adijuwana, 1989).
Fraksinasi pada prinsipnya adalah proses penarikan senyawa pada
suatu ekstrak dengan menggunkan dua macam pelarut yang tidak saling
bercampur. Pelarut yang umumnya dipakai untuk fraksinasi adalah n-heksan,
etil asetat, dan metanol. Untuk menarik lemak dan senyawa nonpolar digunakan
n-heksan untuk menarik senyawa semi polar digunakan etil asetat, sedangkan
metanol untuk menarik senyawa polar. Sebagaimana diketahui bahwa senyawa-
senyawa yang bersifat nonpolar akan larut pada pelarut nonpolar sedangkan
senyawa yang bersifat polar akan larut pada pelarut polar (Sari, 2017).
Metode dari fraksinasi yang biasa digunakan adalah metode fraksinasi
cair-cair (Harborne, 1987). Fraksinasi cair-cair adalah pemisahan sekelompok
senyawa dari kumpulan senyawa dalam sebuah ekstrak yang telah dilarutkan
pada suatu pelarut dengan cara menambahkan jenis pelarut lain yang memiliki
polaritas berbeda dan tidak dapat bercampur antara keduanya (immiscible).
Pada umumnya fraksinasi dengan metode ini dilakukan dengan menggunakan
23
labu pemisah (separating funnel). Sedangkan Teknik fraksinasi lainnya adalah
dengan metode kromatografi kolom. Pada dasarnya, prinsip kerjanya hampir
sama dengan ekstraksi cair-cair, yang membedakan adalah media yang
digunakan. Pada fraksinasi dengan kromatografi kolom, maka proses pembagian
fraksinya dilakukan pada sebuah kolom dengan menggunakan prinsip-prinsip
kromatografi di mana sama-sama mengaplikasikan prinsip tingkat
kepolaran/polaritas, prinsip yang sama seperti pada ekstraksi cair-cair (Nugroho,
2017).
C. Kajian Empiris
Asam jawa dicirikan memiliki variabilitas morfologi dan kandungan kimia
yang besar dan secara lebih lanjut terdapat dalam berbagai kultur dan jenis yang
terutama ditujukan untuk pengobatan (Karklelien et al, 2014). Secara tradisional
asam jawa telah digunakan sebagai obat herbal untuk menyembuhkan malaria dan
juga sebagai antibakteri. Asam jawa memiliki banyak kandungan zat yang berguna
untuk menyembuhkan berbagai macam penyakit dan juga dapat menghambat
aktivitas antibakteri dalam tubuh.. Menurut Ali, 2018 asam jawa memiliki khasiat
yang baik dari segi protein, lemak, dan beberapa vitamin seperti ribovlafin, niasin,
asam askorbat, dan B-karoten
24
BAB III
KERANGKA KONSEP
A. Dasar Pikir Penelitian
Pengetahuan tentang khasiat dan keamanan tanaman obat di Indonesia
biasanya hanya berdasarkan pengalaman empiris yang biasanya diwariskan secara
turun temurun dan belum teruji secara ilmiah. Untuk itu diperlukan penelitian
tentang obat tradisional, sehingga nantinya obat tersebut dapat aman digunakan
oleh masyarakat. Banyak tanaman lokal yang sering dimanfaatkan oleh masyarakat
sebagai obat tradisional untuk mengobati berbagai penyakit. Salah Satunya adalah
kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.). Asam jawa memiliki beberapa
kandungan senyawa kimia seperti flavonoid, alkaloid, tannin dan saponin.
Staphylococcus aureus termasuk salah satu bakteri penyebab terjadinya
penyakit infeksi. Bakteri ini terdapat pada beberapa saluran, yaitu di saluran
pernapasan atas, kulit, saluran cerna dan vagina. Staphylococcus aureus dapat
menyebabkan infeksi baik secara langsung ataupun tidak langsung. Luka terbuka
merupakan pemicu utama masuknya bakteri Staphylococcus aureus kedalam
tubuh manusia dan menimbulkan penyakit infeksi, dimana benda seperti debu dan
25
kapas dapat menyebabkan terkontaminasinya luka terbuka tersebut
Selain Staphylococcus aureus, ada juga bakteri Escherichia coli yang dapat
menginfeksi manusia. Escherichia coli adalah bakteri yang banyak ditemukan
dalam usus besar manusia, sifatnya dapat menyebabkan infeksi pada usus misalnya
diare pada anak, infeksi saluran kemih juga kemampuannya menimbulkan infeksi
pada jaringan tubuh lain dari luar usus (Croxen, dkk., 2013). Infeksi bakteri yang
paling sering menimbulkan diare adalah infeksi bakteri Escherichia coli.
B. Bagan Kerangka Konsep Penelitian
Fraksi n-heksan kulit batang asam

jawa(Tamarindus indica L.) Skrining fitokimia dan Aktivitas
Antibakeri
Fraksi etanol kulit batang asam
jawa(Tamarindus indica L.)
Keterangan :
: Variabel Dependen
: Variabel Independen
: Menyatakan pengaruh antara variabel independen
dan dependen
Gambar 4 . Bagan kerangka konsep peneliti
C. Variabel Penelitian
1. Variabel dependen : Variabel terikat pada penelitian ini adalah skrining
fitokimia dan aktivitas antibakteri
2. Variabel independen : Variabel bebas pada penelitian ini adalah :
a. Fraksi n-heksan kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.)
26
b. Fraksi etanol kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.)
D. Definisi Operasional dan Kriteria Objektif
4. Definisi Operasional Variabel Dependen
Uji aktivitas antibakteri adalah kegiatan menentukan adanya zona
hambat dari suatu yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri.
Kriteria Obyektif:
Memiliki efek antibakteri : Memiliki efek antibakteri dengan adanya
zona bening (mm)
Tidak memiliki efek antibakteri : .Tidak memiliki efek antibakteri dengan
tidak adanya zona bening (mm)
Kriteria Kekuatan
Memiliki zona hambat : Memiliki zona hambat dengan efek zona
bening 5 mm
Tidak memiliki zona hambat : .Tidak memiliki efek zona hambat dengan
efek zona bening <5 mm
Menurut Haspari (2015), kriteria kekuatan antibakteri adalah sebagai
berikut:
1) Diameter zona hambat > 20 mm : daya hambat sangat kuat
2) Diameter zona hambat 10-20 mm : daya hambat kuat
3) Diameter zona hambat 5-10 mm : daya hambat sedang
4) Diameter zona hambat 0-5 mm : daya hambat lemah
Tabel 2. Kategori diameter zona hambat (Susanto et al., 2012)
27
Diameter Kekuatan daya hambat
≤ 5 mm Lemah
5-10 mm Sedang
11-20 mm Kuat
> 21 mm Sangat kuat
2. Definisi Operasional Variabel Independen
a. Fraksi N-Heksan Kulit batang Asam Jawa
Fraksi n-heksan kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.) adalah
hasil yang didapatkan dari proses partisi ekstrak menggunakan pelarut n-
heksan.
Kriteria objektif : Dalam satuan gram.
b. Fraksi Etanol Kulit batang Asam Jawa
Fraksi etanol kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.) adalah
hasil yang didapatkan dari proses partisi ekstrak menggunakan pelarut
etanol.
Kriteria objektif : Dalam satuan gram.
E. Hipotesis
Hipotesis dalam penelitian ini telah dilakukan uji statistik yaitu :
p > 0,05 H0 diterima, Ha ditolak
p < 0,05 H0 ditolak, Ha diterima
Keterangan :
28
1. Untuk mengetahui kandungan kimia fraksi n-hexan dan etanol kulit batang
asam jawa
H0= Fraksi n-hexan dan etanol dan kulit batang asam jawa tidak
mempunyai kandungan kimia
Ha= Fraksi n-hexan dan etanol kulit batang asam jawa mempunyai
kandungan kimia
2. Mengetahui aktivitas antibakteri fraksi n-hexan dan etanol kulit batang
asam jawa (Tamarindus indica L.) pada konsentrasi 2,5%, 5% dan 10%
H0 = Fraksi n-hexan dan etanol kulit batang asam jawa (Tamarindus
indica L.) pada konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% tidak memiliki
aktivitas antibakteri
Ha = Fraksi n-hexan dan etanol kulit batang asam jawa (Tamarindus indica
L.) pada konsentrasi 2,5%, 5% dan 10% memiiki aktivitas
antibakteri
3. Untuk mengetahui konsentrasi paling optimum fraksi n-hexan dan
etanol kulit batang asam jawa terhadap bakteri Escherichia coli dan
H0 = Fraksi n-hexan dan etanol dan polar kulit batang asam jawa tidak
mempunyai konsentrasi paling optimum terhadap bakteri
Ha = Fraksi n-hexan dan etanol dan polar kulit batang asam jawa
mempunyai konsentrasi paling optimum terhadap bakteri
29
4. Untuk mengetahui perbedaan aktivitas antibakteri fraksi n-heksan dan
etanol dengan konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% terhadap bakteri
H0 = Fraksi n-hexan dan etanol dan polar kulit batang asam jawa tidak
mempunyai perbedaan dengan konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10%
terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
Ha = Fraksi n-hexan dan etanol dan polar kulit batang asam jawa tidak
mempunyai perbedaan dengan konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10%
terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
BAB IV
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
1. Jenis Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian analitik yang bertujuan untuk
mengetahui aktivitas fraksi n-heksan dan etanol kulit batang asam jawa
(Tamarindus indica L.) terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus . Penelitian ini terdiri dari 4 perlakuan yang terdiri dari kontrol
negative (DMSO), kontrol positif (Kloramfenikol) dan pengujian
menggunakan fraksi n-heksan dan etanol kulit batang asam jawa dengan
varian konsentrasi yang sama yaitu 2,5%, 5%, dan 10%. dengan 3 kali
replikasi/pengulangan. Dengan desain penelitian sebagai berikut:
2. Rancangan Penelitian
K ZH
E UAA K
KBAJ EEKBAJ
30
K
F.NH F.ET K+
DRZH
K-
Gambar 5. Desain Penelitian
Keterangan:
1. KBAJ = Kulit batang Asam Jawa
2. EEKBAJ= Ekstrak Etanol Kulit batang Asam Jawa
3. F.NH= Fraksi n-Heksan
4. F.ET= Fraksi Etanol
5. EL= Eksperimen Laboratorium
6. UAA= Uji Aktivitas Antibakteri
7. K1= Konsentrasi Fraksi n-Heksan dan etanol 2,5%
8. K2= Konsentrasi Fraksi n-Heksan dan etanol 5%
9. K3= Konsentrasi Fraksi n-Heksan dan etanol 10%
10. K+= Kontrol Positif (+) Kloramfenikol
11. K-= Kontrol Negatif (-) DMSO
12. ZH= Zona Hambat
13. DRZH= Diameter Rata-Rata Zona Hambat
B. Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan pada bulan April–Juli 2022 bertempat di
31
Laboratorium Fitokimia-Farmakognosi dan Kimia Farmasi-Mikrobiologi
C. Populasi dan Sampel
1. Populasi
Populasi penelitian ini adalah tanaman Kulit batang Asam Jawa
(Tamarindus indica L..) di peroleh dari Desa Maligano, Kec. Maligano, Kab.
Muna
2. Sampel
Sampel dalam penelitian ini adalah Kulit batang Asam Jawa
(Tamarindus indica L..).
D. Alat dan Bahan Penelitian
1. Alat
Alat-alat yang digunakan adalah rotary evaporator (IKA),erlenmeyer
(pyrexR), corong pisah, gelas ukur (pyrexR), gelas kimia (pyrexR), betang
pengaduk,timbangan digital, autoklaf, oven, tabung reaksi (pyrexR), pipet
tetes,cawan petri (pyrexR), vial, pembakar bunsen dan korek api, wadah toples,
aluminium foil, hot plate, pinset, gunting, jarum ose lurus, jarum ose
bulat,penggaris, rak tabung, toples, batang pengaduk, inkubator.
2. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penilitian ini adalah ekstrak, etanol 96%, n-
heksan, Kloramfenikol, fraksi n-heksan dan etanol kulit batang asam jawa,
DMSO, aquadest, NaCl, Escherichia coli dan Staphylococcus aureus, Nutrient
Agar (NA).
32
3. Bakteri uji
Bakteri uji yang digunakan dalam penelitian ini yaitu Stapylococcus
aureus dan Escherichia coli”
4. Skrining Fitokimia
Bahan yang diperlukan dalam proses skrining fitokimia yaitu pereaksi
dragendroff, pereaksi mayer, asam sulfat (H2SO4) asam asetat anhidrat, FeCl3
1%
F. ProsedurKerja
1. Determinasi Sampel
Determinasi tanaman dilakukan dengan mempersamakan sifat
morfologi tumbuhan diantaranya bentuk, ukuran, jumlah, bagian-bagian daun,
bunga, buah, biji dan lain-lain. Membandingkan dan mempersamakan ciri-ciri
tumbuhan yang akan diteliti dengan tumbuhan yang sudah dikenali
identitasnya. Determinasi sampel dilakukan di Laboratorium Farmasi
Universitas Mandala Waluya.
2. Pengolahan Sampel
Kulit batang asam jawa yang telah diperoleh dicuci dengan
menggunakan air mengalir hingga kotoran-kotoran yang menempel pada daun
bersih, kemudian dirajang sedemikian kecilnya untuk mempermudah proses
pengeringannya. Sampel yang telah dikeringkan dihaluskan dalam bentuk
serbuk (Departemen Kesehatan, 1985).
3. Ekstraksi
Kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.) yang telah
33
dibersihkan dan dirajang, dijemur dengan tidak terkena sinar matahari
langsung selama ±3hari kemudian dilakukan ekstraksi. Ekstraksi dilakukan
menggunakan metode maserasi cara dingin dengan cara maserasi, yaitu
merendam kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.) dengan
menggunakan etanol 96%. Proses ini dilakukan dengan perendaman kulit
batang asam jawa selama 3 kali 24 jam dalam bejana maserasi. Selanjutnya
disaring dengan menggunakan kain flanel dan corong saringan. Hasil
penyaringan dipekatkan dalam rotary evaporator pada suhu 50oC hingga
menghasilkan ekstrak kental (Doughari, 2012).
4. Fraksinasi
Ekstrak etanol 96% diambil sebanyak 20 g dilarutkan sedikit dengan
etanol kemudian dimasukan kedalam corong pisah dan ditambahkan n-heksan:
aquadest (1:1) sebanyak 250 ml. Larutan dikocok berapa menit dan dibiarkan
sampai terjadi pemisahan. Setelah terbentuk dua lapisan selanjutnya lapisan di
pisahkan dan lapisan bawah dimasukan kembali kedalam corong. Penambahan
pelarut n-heksan dilakukan secara berulang-ulang hingga n-heksan tidak
berwarna lagi. Kemudian lapisan bawah yang berisi etanol dipisahkan kembali
lalu kemudian dipekatkan dalam rotary evaporator.
Uji alkaloid
Fraksi sampel ditambah HCl 2 N dan larutan dibagi dalam 2 tabung.
Tabung 1 ditambah 2-3 tetes reagen dragendorff, tabung 2 ditambahkan 2-3
tetes reagen mayer Terbentuknya endapan jingaa pada tabung 1, endapan putih
34
kekunig-kuningan pada tabung 2 menunjukkan adanya alkaloid
Uji flavonoid
Fraksi sampel dituang kedalam tabung reaksi, lalu ditambahkan dengan
asam sulfat (H2SO4) 2 N sebanyak 2 tetes lalu dikocok sampai tercampur. Jika
menghasilkan warna kuning, merah, atau coklat menandakan adanya
flavonoid
Uji triterpenoid/steroid
Fraksi sampel dilarutkan dalam 1 ml n-hexan, kemudian ditambah dengan
0,5 ml asam asetat anhidrat. Campuran tersebut ditetesi dengan 2 ml H 2SO4
pekat melalui dinding tabung. Jika hasil yang diperoleh berupa cincin
kecoklatan atau violet pada perbatasan dua pelarut menunjukkan adanya
triterpenoid, sedangkan munculnya warna hijau kebiruan menunjukkan adanya
sterol
Uji tanin
Fraksi sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi dilarutkan dalam 2 ml
air dan ditambahkan 3 tetes larutan FeCl 3 1%. Timbulnya warna biru
kehitaman dan hijau kehitaman menunjukkan adanya senyawa tannin
Uji Fenol
Fraksi sampel dimasukkan ke dalam tabung, lalu ditambahkan 10 tetes air
panas dan 3 tetes pereaksi FeCl3 3%. Jika warna larutan berubah menjadi
warna hijau kebiruan atau biru gelap, menunjukkan adanya senyawa fenol
(Dian, 2016).
35
6. Pengujian Aktivitas Antibakteri
A. Sterilisasi alat
Alat yang akan digunakan dicuci bersih kemudian dibungkus sterilisasi
dengan autoklaf pada suhu 121˚C selama 15 menit untuk alat yang tidak
tahan pemanasan sedangkan alat alat gelas dimasukkan ke dalam oven
kemudian disterilkan pada suhu 160-170˚C selama 1-2 jam, pinset dan ose
bulat disterilkan dengan cara dipijarkan menggunakan lampu spiritus.
B. Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)
Ditimbang media NA sebanyak 1,4 g, dimasukkan ke dalam
erlenmeyer kemudian ditambahkan dengan aquadest sebanyak 70 ml, lalu
dipanaskan sampai mendidih diaduk sesekali selama 1 menit atau sampai
serbuk larut sempurna. Selanjutnya disterilkan dalam autoklaf pada suhu
121 ˚C selama 15 menit.
C. Sterilisasi Media
Adapun prosedur sterilisasi media dalam penelitian ini yaitu
dibungkus media yang telah dibuat menggunakan kertas kemudian
dimasukkan ke dalam autoklaf tutup autoklaf lalu dikunci dengan erat
disambungkan pada stop kontak, temperatur diatur pada angka 121˚C
selama 15 menit, setelah 15 menit, dikeluarkan media yang telah
disterilkan,didinginkan, media siap digunakan.
D. Pembuatan Larutan Standar Mc Farland 0,5
Pembuatan Larutan McFarland 0,5. Dipipet larutan BaCl2 1 %
sebanyak 0,05 ml dimasukan ke dalam tabung reaksi. Kemudian dipipet
36
juga larutan H2SO4 1 % sebanyak 9,95 ml. Dicampurkan kedalam tabung
reaksi yang sudah berisi larutan BaCl2 1 %. larutan ini di vortex sampai
tercampur sempurna. Penyimpanan larutan di dalam kulkas (Angreni, 2017)
E. Pembiakan Bakteri
Media Nutrient agar (NA) diambil sebanyak 5 ml, dimasukan
kedalam tabung reaksi. Bakteri uji berupa Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli yang berasal dari biakan murni masing-masing diambil 1
ose dimasukkan kedalam tabung reaksi dengan cara menggoreskan pada
media NA, kemudian diletakan pada sudut kemiringan 30-400 dan dibiarkan
memadat, selanjutnya di inkubasi, temperatur yang digunakan dalam proses
inkubasi yaitu 35-370C selama 1 x 24 jam.
F. Pembuatan Suspensi Bakteri
Dilakukan pembuatan suspensi dengan cara diambil NaCl sebanyak
10 ml menggunakan spoit steril dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi.
Diambil biakan dengan menggunakan ose steril kemudian dimasukkan
kedalam tabung reaksi yang berisi NaCl.
G. Pembuatan Larutan Bahan Uji
Dibuat larutan bahan uji dengan konsentrasi fraksi masing-masing
2,5%, 5% dan 10%% kulit batang asam jawa kemudian masing masing
dilarutkan dalam 3 ml larutan DMSO.DMSO juga digunakan sebagai
kontrol negatif sedangkan kontrol positif menggunakan obat antibiotik
(kloramfenikol 1%)
H. Pengujian Aktivitas Antibakteri
37
Sebanyak 15 ml media NA diambil dengan menggunakan spoit steril
dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Diambil sebanyak 1 ml suspensi
NaCl dimasukkan ke dalam media NA dan dihomogenkan lalu media
dituang ke dalam cawan petri dan dibiarkan media tersebut menjadi padat.
paper disk berdiameter 6 mm direndam selama 15 menit kedalam masing-
masing bahan fraksi kulit batang asam jawa dengan konsentrasi 2,5%, 5%
dan 10%, DMSO (-) dan kloramfenikol (+). Selanjutnya paper disk
diletakkan pada permukaan media yang telah memadat secara aseptis
dengan menggunakan pinset steril, lalu diinkubasi pada suhu 37˚C selama
1x24 jam dengan posisi terbalik. prosedur ini dilakukan replikasi sebanyak
3 kali. Aktivitas antibakteri diamati keesokan harinya berdasarkan diameter
zona hambat atau zona bening yang terbentuk disekeliling paper disk.
Daerah bening diukur menggunakan jangka sorong manual. Setelah
didapatkan diameter zona hambat dari masing masing percobaan, kemudian
nilainya dirata- ratakan sehingga diperoleh diameter zona hambat pada
masing-masing konsentrasi ekstrak. Menurut Haspari (2015), diameter
zona hambat > 20 mm dikategorikan sangat kuat,diameter zona hambat 10-
20 mm dikategorikan kuat,diameter zona hambat 5-10 mm dikategorikan
sedang, dan diameter zona hambat 0-5 mm dikategorikan lemah.
F. Pengolahan dan Analisis Data
Data diolah dan di analisis menggunakan uji analysis of varlance
(Anova) melalui program spps.terlebih dahulu data diuji menggunakan uji
normalitas, selanjutnya dilakukan uji homogenitas kedua pengujian tersebut
38
merupakan syarat yang harus dipenuhi sebelum dilakukan uji ANOVA.
Tujuan uji normalitas untuk memperlihatkan bahwa data yang dianalisis
terdistribusi normal atau tidak.pengujian normalitas terpenuhi jika hasil uji
signifikan dengan taraf signifikan (α = 0,05). Jika nilai signifikan lebih
besar dari α, maka data tersebut terdistribusi normal. Sebaliknya bila mana
signifikan lebih kecil dari α,maka data tersebut tidak terdistribusi normal,
kemudian dilakukan uji homogenitas, tujuannya untuk mengetahui varian
dari beberapa populasi menunjukan sama atau tidak. Bilamana nilai
signifikan pada uji homogenitas lebih kecil dari α, maka varian dari dua
atau lebih kelompok populasi data adalah tidak sama, kebalikannya,
apabila nilai signifikan lebih besar dari α maka varian dari dua atau lebih
kelompok populasi data adalah sama.
G. Etika Penelitian
Adapun etika dalam melakukan suatu penelitian yaitu pertama peneliti
mengajukan surat izin melakukan penelitian kepada Kepala Laboratorium
Farmasi Universitas Mandala Waluya, selanjutnya peneliti menentukan alat
dan bahan yang akan digunakan dalam penelitian dan terakhir peneliti
melakukan penelitian dengan tetap memperhatikan aturan dalam
Laboratorium Farmasi Universitas Mandala Waluya.
I. Waktu Penelitian
Tabel 3. Waku Penelitian
No Kegiatan Bulan
. 1 2 3 4
1. Persiapan Penelitian
2. Pengambilan Sampel
39
3. Determinasi Sampel
4. Ekstraksi Sampel
5. Fraksinasi Sampel
7. Pengujian Aktivitas Antibakteri
8. Analisis Data
BAB V
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Gambaran Umum Lokasi Penelitian
Penelitian ini dilakukan di 2 laboratorium berbeda, pertama dilakukan
skrining fitokimia setelah itu penelitian dilanjutkan dengan proses ekstraksi dan
fraksinasi kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.) di laboratorium
Farmakognosi- Fitokimia dan kedua dilakukan pengujian aktivitas antibakteri di
laboratorium Kimia Farmasi-Mikrobiologi Universitas Mandala Waluya. .
B. Hasil Penelitian
1. Analisis Univariat
a) Hasil rendemen ekstrak kulit batang asam jawa (Tamarindus indica
L.)
Hasil rendemen ekstrak kulit batang asam jawa (Tamarindus indica
L.) dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel 4. Hasil Rendemen Serbuk kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.)
Sampel Pelarut Simplisia Ekstrak Rendemen

Kering (g) Kental (g) Ekstrak (%)
40
Kulit Batang Etanol 96% 1500 50,7 3,38
Asam Jawa
b) Hasil rendamen fraksi kulit batang asam jawa (Tamarindus indica
L.)
Hasil rendamen fraksi kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.)
dapat dilihat pada tabel 5.
Tabel 5. Rendamen fraksi kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.)
Fraksi Ekstrak kental (g) Berat fraksi (g) Rendamen (%)

Fraksi n-heksan 8,2 41
Fraksi Etanol 20 5,5 27,5
c) Hasil Identifikasi Kadungan Senyawa Kimia

Tabel 6. Hasil Identifikasi Kandungan Senyawa Kimia fraksi n-Heksan kulit
batang asam jawa (Tamarindus indica L.)
No Golongan Nama Hasil Keterangan
. Senyawa Pereaksi (+/-)
1. Alkaloid Mayer + Terbentuk endapan putih
kekuning-kuningan
Dragendorff - Tidak terbentuk endapan jingga
2. Fenol FeCl3 + Terbentuk warna hijau kebiruan
atau biru gelap
3. Flavonoid H2SO4 + Terbentuk warna kuning
4. Tanin FeCl3 1% - Tidak terbentuk warna biru
kehitaman atau hijau
kehitaman
5. Triterpenoid H2SO4 + Terbentuk cincin kecoklatan
atau violet
Keterangan :
(+) : Mengandung senyawa metabolit sekunder
(-) : Tidak mengandung senyawa metabolit sekunder
Tabel 7. Hasil Identifikasi Kandungan Senyawa Kimia fraksi Etanol kulit batang
asam jawa (Tamarindus indica L.)
No Golongan Nama Hasil Keterangan
. Senyawa Pereaksi (+/-)
1. Alkaloid Mayer - Tidak terbentuk endapan putih
kekuning-kuningan
41
Dragendorff - Tidak terbentuk endapan jingga
2. Fenol FeCl3 + Terbentuk warna hijau kebiruan
atau biru gelap
3. Flavonoid H2SO4 + Terbentuk warna kuning
4. Tanin FeCl3 1% + Terbentuk warna biru
kehitaman atau hijau
kehitaman
5. Triterpenoid H2SO4 - Tidak terbentuk cincin
kecoklatan atau violet
Keterangan :
(+) : Mengandung senyawa metabolit sekunder
(-) : Tidak mengandung senyawa metabolit sekunder
d) Hasil Aktivitas Anntibakteri Fraksi Kulit Batang Asam Jawa
(Tamarindus indica L.)
Adapun hasil pengukuran diameter zona hambat fraksi kulit batang
asam jawa terhadap bakteri Echerichia coli dan Staphylococcus aureus
dengan menggunakan metode paper disk yaitu :
Tabel 8. Diameter zona hambat fraksi n-heksan kulit batang asam jawa terhadap
bakteri Escherichia coli
Diameter Zona Rata-

Sampe Konsentras Replikas Hambat (mm) Interpretasi
rata
l i i Efektifitas
A B C D (mm)
Positif 25 22 23 25 23,15 sangat kuat
Negatif 0 0 0 0 0 Tidak ada
2,5% 1 16 19 21 18 17,9 sangat kuat
5% 24 21 19 19 20,15 sangat kuat
10% 24 26 26 28 25,4 sangat kuat

N-
2,5% 2
Heksan 19 20 21 20 19,4 sangat kuat
5% 24 18 17 20 19,15 sangat kuat
10% 21 28 30 27 25,9 sangat kuat
42
2,5% 3 19 21 24 26 21,9 sangat kuat
5% 28 21 30 26 25,65 sangat kuat
10% 29 25 29 30 27,65 sangat kuat
Ket:
A = Cawan petri 1
B = Cawan petri 2
C = Cawan petri 3
D = Cawan petri 4
Tabel 9. Diameter zona hambat fraksi n-heksan kulit batang asam jawa terhadap
bakteri Staphylococcus aureus
Diameter Zona Hambat

Sampe Konsentras Replikas Rata-rata Interpretasi
(mm)
l i i (mm) Efektifitas
A B C D
2,5% 1 21 19 24 24 21,4 sangat kuat
5% 24 24 24 24 23,4 sangat kuat
10% 21 25 31 31 26,4 sangat kuat

N-
2,5% 2
Heksan 21 21 28 24 22,9 sangat kuat
5% 24 24 22 29 24,15 sangat kuat
10% 25 25 32 29 27,15 sangat kuat

2,5% 3 24 21 24 27 23,4 sangat kuat
5% 24 21 32 31 26,4 sangat kuat
10% 31 31 29 27 28,9 sangat kuat
Ket:
A = Cawan petri 1
B = Cawan petri 2
C = Cawan petri 3
43
D = Cawan petri 4
Tabel 10. Diameter zona hambat fraksi Etanol kulit batang asam jawa terhadap
bakteri Escherichia coli

Sampe Konsentras Replikas (mm) Rata-rata Interpretasi
A B C D
2,5% 1 19 17 19 19 17,9 sangat kuat
5% 24 21 33 24 24,9 sangat kuat
10% 25 31 24 24 25,4 sangat kuat

Etanol 2,5% 2 21 19 19 21 19,4 sangat kuat
5% 29 24 28 26 26,15 sangat kuat
10% 25 31 26 29 27,15 sangat kuat

2,5% 3 21 21 19 18 19,15 sangat kuat
5% 27 24 31 26 26,4 sangat kuat
10% 26 33 24 29 27,4 sangat kuat
Ket:
A = Cawan petri 1
B = Cawan petri 2
C = Cawan petri 3
D = Cawan petri 4
44
Tabel 11. Diameter zona hambat fraksi etanol kulit batang asam jawa terhadap bakteri

Sampe Konsentras Replikas (mm) Rata-rata Interpretasi
A B C D
2,5% 1 19 21 21 21 19,9 sangat kuat
5% 21 24 23 24 22,4 sangat kuat
10% 26 34 36 24 29,4 sangat kuat

Etanol 2,5% 2 18 19 19 20 18,4 sangat kuat
5% 24 24 23 26 23,65 sangat kuat
10% 24 31 31 24 26,9 sangat kuat

2,5% 3 24 24 24 29 24,65 sangat kuat
5% 23 27 23 29 24,9 sangat kuat
10% 27 29 31 24 27,15 sangat kuat
Ket:
A = Cawan petri 1
B = Cawan petri 2
C = Cawan petri 3
D = Cawan petri 4
45
2. Analisis Bivariat
Tabel 12. Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi n-heksan kulit
batang asam jawa pada Escherichia coli
Uji statistik perbandingan setiap konsentrasi

Hasil diameter zona
hambat (mm) P value
Konsentrasi Keterangan
A vs B Escherichia (Perbedaan)
A B
coli
2,5% vs 5% 20,33 ±2,64 22,25±4,13 0,347* Tidak signifikan

2,5% vs 10% 20,33 ±2,64 26,91 ±2,67 0,000 Signifikan
2,5% vs KPF 20,33 ±2,64 29,37 ±3,09 0,000 Signifikan
2,5% vs KNF 20,33 ±2,64 0,00±0,00 0,000 Signifikan
5% vs 10% 22,25±4,13 26,91 ±2,67 0,007 Signifikan
5% vs KPF 22,25±4,13 29,37 ±3,09 0,001 Signifikan
5% vs KNF 22,25±4,13 0,00±0,00 0,000 Signifikan
10% vs KPF 26,91 ±2,67 29,37 ±3,09 0,089* Tidak signifikan
10% vs KNF 26,91 ±2,67 0,00±0,00 0,000 Signifikan
KPF vs KNF 29,37 ±3,09 0,00±0,00 0,000 Signifikan
Ket:
1.KPF = Kontrol Positif (Kloramfenikol) 2. KNF = Kontrol Negatif (DMSO)
46
Tabel 13. Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi n-heksan kulit
batang asam jawa pada Staphylococcus aureus

Hasil diameter zona
Konsentrasi hambat (mm) Pvalue Keterangan

A vs B Staphylococcu (Perbedaan)
A B
s aureus

2,5% vs 10% 23,16 ±2,65 28,08 ±3,44 0,001 Signifikan
5% vs 10% 25,25±3,46 28,08 ±3,44 0,033 Signifikan
10% vs KPF 28,08 ±3,44 30,75 ±4,45 0,000 Signifikan
Ket:
Tabel 14. Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi etanol kulit
batang asam jawa pada Escherichia coli
Konsentrasi Hasil diameter zona Pvalue Keterangan
A vs B hambat (mm) Eschircia (Perbedaan)
47
A B coli

2,5% vs 10% 19,14 ±1,31 27,25 ±3,19 0,000 Signifikan
5% vs 10% 26,41±3,39 27,25 ±3,19 0,551* Tidak signifikan
Ket:
Tabel 15. Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi etanol kulit
batang asam jawa pada Staphylococcus aureus

Hasil diameter zona
Konsentrasi hambat (mm) Pvalue Keterangan

A vs B staphylococcus (Perbedaan)
A B
aureus
2,5% vs 5% 21,58 ±3,14 24,25±2,13 0,000 Signifikan

2,5% vs 10% 21,58 ±3,14 29,00 ±4,02 0,000 Signifikan
5% vs 10% 24,25±2,13 29,00 ±4,02 0,001 Signifikan
Ket:
48
C. Pembahasan
Penelitian ini dilakukan untuk menguji aktivitas antibakteri fraksi kulit
batang asam jawa terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus. Sampel yang digunakan adalah kulit batang asam jawa
(Tamarindus indica L.), sampel diperoleh dari Desa Maligano Kecamatan
Maligano Kabupaten Muna, Provinsi Sulawesi Tenggara.
Sampel yang telah diperoleh kemudian dicuci dengan air mengalir
hingga bersih dengan tujuan untuk menghilangkan atau mengurangi tanah dan
debu yang melekat pada daun, kemudian sampel dikeringkan di bawah sinar
matahari secara tidak langsung dengan ditutup kain hitam. Hal tersebut dilakukan
supaya pemanasan lebih maksimal, cepat, dan juga menghindari terjadinya bahan
yang rusak karena sinar UV dari sinar matahari. Tujuan pengeringan adalah untuk
mengurangi kadar air sehingga pertumbuhan jamur dan mikroorganisme dapat
dicegah, menghentikan reaksi enzimatis serta mencegah terjadinya perubahan
kimiawi. Simplisia yang telah kering kemudian dibuat menjadi serbuk. Hal tersebut
dilakukan supaya luas permukaan simplisia menjadi lebih besar sehingga kontak
antara permukaan simplisia dengan cairan penyari menjadi lebih besar, setelah itu
dilakukan untuk proses ekstraksi dan fraksinasi.
49
Sampel kulit batang asam jawa sebanyak 1500 g dibuat ekstrak dengan
metode maserasi, menggunakan pelarut etanol 96%. Etanol digunakan sebagai
pelarut karena bersifat polar, universal dan mudah didapat. Selain itu, etanol juga
merupakan pelarut untuk zat organik maupun anorganik, sehingga etanol 96%
diharapkan mampu mengekstrak senyawa metabolit sekunder lebih banyak.
Penggunaan etanol juga merupakan pelarut yang efektif dalam mengekstraksi
klorofil sampel dalam bentuk daun Karena semakin tinggi konsentrasi etanol maka
akan semakin mudah dalam proses pemisahan senyawa metabolit sekunder dari
sampel (Putra et al, 2017).
Proses maserasi dilakukan selama 3 hari dan ekstrak yang didapat
selanjutnya dipisahkan dengan pelarutnya menggunakan rotary vacum evaporator
dan didapatkan ekstrak kental etanol berwarna hitam pekat sebanyak 50,7 g dan
berat rendamen 3,38%. Menurut (Lalopua, 2020) jenis pelarut yang digunakan
berpengaruh terhadap keberhasilan pengambilan senyawa bioaktif pada tanaman.
Jumlah pelarut yang digunakan berpengaruh terhadap hasil rendemen yang akan
dihasilkan, semakin banyak jumlah pelarut yang digunakan maka akan semakin
optimal senyawa yang dapat ditarik.
Tahap selanjutnya fraksinasi ekstrak kulit batang asam jawa dengan
menggunakan metode ekstraksi cair cair. fraksinasi disini adalah proses pemisahan
senyawa berdasarkan tingkat kepolaranya masing-masing. Dalam proses fraksinasi
dilakukan dengan cara bertingkat berdasarkan tingkat kepolaran pelarut yang
dimulai dari pelarut n-heksan (non polar), etanol (polar). Proses fraksinasi
didapatkan ekstrak kental dari masing-masing pelarut (n-heksan dan etanol) 20 g
50
dengan randeman 41% fraksi n-heksan dan 27,5% untuk fraksi etanol. Adapun
hasil rendamen yang diperoleh yaitu telah memenuhi persyaratan Farmakope
Herbal Indonesia, yaitu rendamen tidak kurang dari 7,2% (Courtney, 2012).
Hasil dari pengujuan skrining fitokimia ekstrak kulit batang asam jawa positif
mengandung senyawa alkaloid dan tanin (Satrijayati, 2010). Sementara itu, hasil
skrining fitokimia dari fraksi heksan positif mengandung alkaloid, fenol, dan
triterpenoid. Fraksi etanol positif mengandung fenol, flavonoid, dan tanin.
Mekanisme kerja senyawa alkaloid sebagai antibakteri dengan mengganggu
komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri sehingga lapisan dinding sel
tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel. Flavonoid sebagai
antimikroba dapat dibagi menjadi tiga yaitu menghambat sintesis asam nukleat,
menghambat fungsi membran sel, dan menghambat metabolisme energi (Gultom,
2020)
Bakteri yang digunakan pada penelitian ini Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus. Media kultur yang digunakan yaitu media NA (Nutrient
Agar), pembuatan media dilakukan dengan mencampurkan serbuk NA sebanyak
1,4 g dengan aquadest 70 ml kemudian dihomogenkan diatas hot plate pada suhu
50°C hingga media larut, setelah itu dimasukan media ke dalam autoklaf selama
15 menit pada suhu 121°C agar media tersebut tetap steril dan terhindar dari
kontaminasi mikroba.
Alasan dari penggunaan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
karena menurut penelitian yang dilakukan oleh (Utami, 2013) bahwa baketri
Escherichia coli memiliki sifat resistensi terhadap berbagai antibiotik seperti
51
tetraksiklin dan amoksisilin, serta sensitif terhadap sefoksitin. Sedangkan bakteri
Staphylococcus aureus memiliki sifat resistensi terhadap antibiotik amoksisilin
dan sensitif terhadap tetrasiklin dan sefoksitin
Kontrol positif yang digunakan dalam penelitian ini adalah kloramfenikol 1%
sedangkan kontrol negatif digunakan DMSO. Kontrol positif diperlukan sebagai
pembanding, hal ini digunakan untuk membandingkan perlakuan (sampel) dengan
antibiotik murni (kloramfenikol). Kloramfenikol merupakan antibiotik yang
berspektrum luas sehingga dapat menghambat bakteri Gram positif dan Gram
negatif (Pelczar dan Chan, 2008). Sedangkan kontrol negatif digunakan untuk
mengetahui apakah pelarut dan bahan tambahan yang digunakan dapat
mempengaruhi hasil uji bakteri atau tidak.
Fraksi kulit batang asam jawa dibuat 3 variasi konsentrasi yaitu 2,5%, 5%,
dan 10% dengan 2 kontrol yaitu kontrol positif (kloramfenikol) dan kontrol
negatif (DMSO) yang diujikan ke media yang telah ditanami bakteri dengan
bantuan paper disk. Kelebihan paper disk adalah mudah dilakukan, tidak
memerlukan peralatan khusus dan relatif murah (Otto, 2013). Pada penelitian ini
replikasi dilakukan sebanyak 3 kali, replikasi merupakan banyaknya unit yang
mendapatkan perlakuan sama pada kondisi tertentu. Fungsi dari replikasi yaitu
agar kesalahan pada saat pengerjaan dapat diestimasi.
Dalam penelitian ini, data hasil aktivitas antibakteri dianalisis secara
statistik. Pengujian statistik yang dilakukan ialah uji One-Way Anova. Uji One-
Way Anova dipilih karena hanya ada dua variabel penguji yang akan diuji yaitu
fraksi n-heksan dan etanol kulit batang asam jawa. Syarat dalam uji One-Way
52
Anova data yang akan diuji harus berdistribusi normal serta data memiliki varian
yang sama (homogen). Oleh karena itu sebelum dilakukan pengujian dengan uji
Anova, data harus diuji normalitas dan uji homogenitas terlebih dahulu dengan
menggunakan SPSS for windows versi 22 (Florensia Febrianasari, 2018). Uji
normalitas bertujuan untuk memperlihatkan sebaran data pada sebuah variabel
terdistribusi normal atau tidak. Sedangkan uji homogenitas bertujuan untuk
memperlihatkan apakah data dalam variabel bersifat homogen atau tidak. Analisis
yang digunakan dalam penelitian ini yaitu menggunakan metode non-parametrik
(Mann-Whitney) sebagai alternatif jika data penelitian tidak terdistribusi normal
dan homogen. Dikatakan normal dan homogen jika hasil dari masing-masing uji
memiliki nilai signifikan p>0,05. Kemudian dilanjutkan uji One-Way Anova yang
digunakan untuk melihat ada tidaknya perbedaan antara rata-rata dari keseluruhan
perlakuan ditandai dengan nilai p<0,05, tetapi tidak dapat memberikan informasi
ada tidaknya perbedaan antara satu perlakuan dengan perlakuan lainya, sehingga
dilakukan uji selanjutnya yaitu uji LSD (least significant difference).
Pada hasil uji aktivitas antibakteri fraksi heksan kulit batang asam jawa
(Tamarindus indica L.) terhadap bakteri Escherichia coli memiliki aktivitas zona
hambat pada konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% dengan nilai rata-rata sebesar 20,33
mm, 22,25 mm, dan 26,91 mm. Fraksi etanol dengan nilai rata-rata sebesar 19,14
mm, 26,41 mm, dan 27,25 mm.
Pada hasil uji aktivitas antibakteri Staphylococcus aureus fraksi heksan
kulit batang asam jawa (Tamarindus indica L.) terhadap bakteri memiliki
aktivitas zona hambat pada konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% dengan nilai rata-rata
53
sebesar 23,16 mm, 25,25 mm, dan 28,08 mm. Fraksi etanol dengan nilai rata-rata
sebesar 21,58 mm, 24,25 mm, dan 29 mm. Hal ini sesuai dengan penelitian yang
dilakukan oleh (Jusnita, 2016) bahwa ekstrak kulit batang asam jawa dengan
konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% mempunyai aktivitas zona hambat antibakteri
dengan nilai rata-rata sebesar 7,96 mm, 16,46 mm, 8,18 mm, dan 8,46 mm.
Pada hasil uji statistik Mannwhitney fraksi hexan dengan menggunakan
bakteri Escherichia coli dengan konsentrasi 2,5% dan 5%%, 10% dan kontrol
positif (kloramfenikol) data distribusi yang dihasilkan tidak signifikan yang
artinya data yang dihasilkan tidak berbeda jauh. Pada fraksi etanol didapatkan
konsentrasi 2,5% dan 5%, 5% dan 10%, 10% dan kontrol positif (kloramfenikol)
data distribusi yang dihasilkan tidak signifikan yang artinya data yang dihasilkan
tidak berbeda jauh.
Pada hasil uji statistik Mannwhitney fraksi hexan dengan menggunakan
bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi 2,5% dan 5% data distribusi
yang dihasilkan tidak signifikan yang artinya data yang dihasilkan tidak berbeda
jauh. Pada fraksi etanol didapatkan konsentrasi 2,5% dan 5%, 5% dan 10%, 10%
dan kontrol positif (kloramfenikol) data distribusi yang dihasilkan tidak
signifikan yang artinya data yang dihasilkan tidak berbeda jauh. Diameter zona
hambat yang dihasilkan dipengaruhi oleh banyak faktor, diantaranya kecepatan
difusi, sifat media agar yang digunakan, jumlah mikroorganisme yang diinokulasi,
kecepatan tumbuh bakteri, konsentrasi bahan kimia serta kondisi saat inkubasi.
Menurut (Elifah, 2010) bahwa diamter zona hambat tidak selalu naik sebanding
dengan naiknya konsentrasi antibakteri, ini terjadi karena perbedaan kecepatan
54
difusi senyawa antijamur pada media agar serta jenis dan konsentrasi senyawa
antijamur yang berbeda juga memberikan diameter zona hambat yang berbeda
pula.
Analisis menggunakan variansi satu arah pada aktivitas antibakteri
menunjukkan nilai signifikansi p<0,05 yang menunjukkan bahwa fraksi n-heksan
dan etanol kulit batang asam jawa memiliki aktivitas antibakteri. Berdasarkan hasil
uji statistik One Way Anova diperoleh hasil 0,000 yang artinya lebih kecil dari 0,05
(p<0,05).
Menurut Amrie et al, 2014 daya hambat yang dihasilkan oleh bahan
antimikroba akan semakin tinggi apabila konsentrasinya juga tinggi. Hal ini
seseuai dengan hasil penelitian yang didapatkan dari masing-masing fraksi baik
itu fraksi heksan maupun etanol memiliki aktivitas antibakteri yang semakin
tinggi apabila konsentrasinya dinaikan.
Dari hasil rata-rata yang didapatkan terdapat perbedaan data yang dihasilkan
dimana pada bakteri Escherichia coli fraksi etanol yang lebih bagus dalam
menghambat bakteri Escherichia coli. Sedangkan pada pengujian bakteri
Staphylococcus aureus fraksi hexan yang lebih bagus dalam menghambat bakteri
Staphylococcus aureus namun perbedaan diantara kedua fraksi ini tidak jauh
berbeda.
Dari ketiga konsentrasi yang digunakan menunjukan yang paling kuat
dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli adalah konsentrasi
10% dengan rata-rata diameter zona hambat yaitu 26,91 mm untuk fraksi hexan
dan 27,25 mm untuk fraksi etanol. Sementara itu pada bakteri Staphylococcus
55
aureus untuk fraksi hexan 10% rata-rata diameter zona hambat 28,08 mm dan
fraksi etanol 29 mm. Menurut Lovista (2010) bahwa semakin besar konsentrasi
suatu ekstrak maka daya hambat terhadap bakteri patogen semakin tinggi. Hal ini
menunjukkan bahwa semakin tinggi tingkat konsetrasi fraksi kulit batang asam
jawa (Tamarindus indica L.) maka akan semakin kuat daya hambat terhadap
bakteri. Adapun alasan penggunaan Larutan McFarland adalah sebagai referensi
untuk menyesuaikan kekeruhan suspensi bakteri dengan larutan McFarland, jika
tingkat kekeruhannya sama maka suspensi bakteri dapat dilanjutkan ke pengujian
antibakteri
Menurut penelitian yang dilakukan oleh (Doughari,2006) bahwa ekstrak
etanol kulit batang asam jawa memiliki tingkat aktivitas zona hambat 1,55 mm,
0,92 mm, 0,68, dan 0,48 mm. Hal ini membuktikan bahwa kulit batang asam jawa
memiliki aktivitas sebagai antibakteri.
56
BAB VI
PENUTUP
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian setelah dianalisis secara statistik dan
pembahasan maka dapat disimpulkan bahwa :
1. Kandungan kimia fraksi n-hexan positif mengandung alkaloid, fenol,
flavonoid, dan triterpenoid. Fraksi polar positif mengandung fenol,
flavonoid, dan tanin.
2. Fraksi n-heksan dengan konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% kulit batang asam
jawa (Tamarindus indica L.) mempunyai aktivitas terhadap bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan zona hambat rata-rata
20,33 mm, 22,25 mm, 26,91 mm, 23,16 mm, 25,25 mm, dan 28,08 mm.
Fraksi etanol dengan konsentrasi 2,5%, 5%, dan 10% kulit batang asam
jawa (Tamarindus indica L.) mempunyai aktivitas terhadap bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan zona hambat rata-rata
19,41 mm, 26,41 mm, 27,25 mm, 21,58 mm, 24,25 mm, dan 29 mm.
3. Konsentrasi paling optimum dalam menghambat pertumbuhan bakteri
Escherichia coli adalah konsentrasi 10% dengan rata-rata diameter zona
57
hambat yaitu 26,91 mm untuk fraksi n-heksan dan 27,25 mm untuk fraksi
etanol. Sementara itu pada bakteri Staphylococcus aureus untuk fraksi n-
heksan 10% rata-rata diameter zona hambat 28,08 mm dan fraksi etanol 29
mm
4. Perbedaan aktivitas fraksi n-heksan dan etanol pada bakteri Escherichia
coli terlihat fraksi etanol yang lebih mempunyai aktivitas antibakteri,
sedangkan pada bakteri Staphylococcus aureus fraksi n-heksan yang lebih
mempunyai aktivitas antibakteri
B. Saran
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan maka disarankan :
1. Perlu dilakukan pengkajian komponen zat aktif spesifik yang terkandung dalam
fraksi kulit batang asam jawa (Tamrindus indica L).
2. Dilakuakan penelitian lebih lanjut yakni fraksi etil kulit batang asam jawa
dibuat dalam bentuk sediaan farmasi dan pengujian pada pertumbuhan
antibakteri untuk mengetahui ke efektifan fraksi kulit batang asam jawa jika
dibuat dalam bentuk sediaan.
58
DAFTAR PUSTAKA
Afifah, E. 2003. Tanaman Obat Untuk Mengatasi Hepatitis. Jakarta: Agromedia

Pustaka
Arranz, J.E.,. 2010. Antimicrobial Activity Of Extracts From Tamarindus
Indica L. Leaves. Pharmacognosy Magazine. Vol. 6
Anisah, L., Sari, P., Ikhsanudin M. 2017, Pengaruh Konsentrasi Ekstrak Daun Teh
(Camellia Sinensis L.) Sebagai Pertumbuhan Rambut Pada Kelinci
(Lepusspp.) Dengan Metode Maserasi, Jurnal Para Pemikir, 6(2)
Brooks, G.F., Carroll, K., Butel, J.S. 2013. Jawetz, Melnick, & Adelberg’s Medical
Microbiology. Ed ke-26. Philadelphia: McGraw-Hills Company Inc;
Croxen, M. A. Law, R. J. Scholz, R. Keeney, K. M. Wlodarska, M. dan Finlay, BB.
2013. Recent Advances in Understanding Enteric Pathogenic Escherichia coli.
Clin Microbiol Rev. 26 : 822-880.
Doughari, J.H., 2006, Antimicrobial Activity of Tamarindus indica
Linn, Tropical Journal Pharmaceutical Research, 5 (2), 597-603
Depkes RI. 2007. Kebijakan Obat Tradisional Nasional. Jakarta: Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia.
Febrianasari, 2018. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Kirinyu (Chromolaena
odorata) Terhadap Staphylococcus aureus. Skripsi. Universitas Sanata
Dharma. Yogyakarta.
Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia . Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan. Bandung : Penerbit ITB.
Haspari, Endah. 2015. Uji Anti Bakteri Ekstrak Herba Meniran (Phyllanthus Niruri)
Terhadap Pertumbuhan Bakteri Bacillus Cereus Dan Escherichia coli, Skripsi,
Pendidikan Biologi Universitas Sanata Dharma: Yogyakarta.
Herawati E., Amelia, T. R. N., 2018. Potensi Bahan Herbal Ekstrak Etanol Daun
Mengkudu Asal Desa Wajar Lor. Tulungagung, Jawa Timur. Terhadap
Bakteri Penyebab Jerawat. Jurnal Kesehatan. 2(2).
Hidayatullah, S.A. 2021. Daya Hambat Ekstrak Daun Jawa (Tamarindus indica
Linn.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Enterococcus faecalis. Surabaya:
Universitas Hang Tuah
Irnawati. 2016. Uji Toksisitas Akut Infusa Kulit Batang Ubi Kayu (Manihot esculenta
Crantz) menggunakan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Majalah
Farmasi, Sains, dan Kesehatan. Pharmauho Volume 2, No. 1, Hal. 10-12.
Jusnita, N., Irawan, D., 2016. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 70% Daun
Asam Jawa (Tamarindus Indica L) Dan Formulasi Sediaan Obat Kumur
Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus. Jakarta: Universitas 17 Agustus
59
1945 Jakarta
Khusnan, I.O.S Siti, Soegiyono., 2008. Isolasi, identifikasi dan Karakterisasi Fenotip
Bakteri Staphylococcus aureus Dari Limbah Penyembelihan dan Karkas Ayam
Potong. Jurnal Veteriner Maret. Vol.9 No.1.: 45-51
Kemenkes RI. 2011. Profil Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta: Kemenkes RI
Mazni, R. 2008. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Umbi Bidara Upas
(Merremia mammosa chois) Terhadap Staphylococcus aureus Dan
Escherichia coli Serta Brine Shrimp Lethality Test. Skripsi Tidak Diterbitkan.
Surakarta: Fakultas Farmasi UMS Surakarta.
Nwodo, U.U., Obiiyeke, G.E., Chigor, V.N. Dkk., 2011. Assesment of Tamarindus
indica Extract for Antibacterial Activity. International Journal of Molecular
Sciences. 6385-6396
Nugroho, A., 2017. Buku Ajar Teknologi Bahan Alam. Lambung Mangkurat
University Press: Banjarmasin
Pelczar, M. J. dan Chan, E. C. S., 2005, “Dasar-dasar Mikrobiologi 1”, Alihbahasa:
Hadioetomo, R. S., Imas, T., Tjitrosomo, S.S. dan Angka, S. L., UIPress,
Jakarta.
Putri, C.R.H, 2014. Potensi Dan Pemanfaatan Tamarindus Indica Dalam
Berbagai Terapi. Jurnal “Ilmiah Kedokteran” Vol.3( 2)
Rahayu, A. 2015. Aktivitas Ekstrak Etanol Kulit Batang Asam Jawa (Tamarindus
indica L.) Terhadap Pseudomonas aeruginosa. Bandung: Politeknik
Kesehatan Kemenkes Bandung
Syahrurachman, Agus, Chatim, Soebandrio, Karuniawati, Santoso, Harun. 2010.
Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran. Staf Pengajar Fakultas Kedoktern
Universitas Indonesia. Edisi Revisi. Jakarta: Binarupa Aksara.
Zuhriyah, A., Februyani, N., Jamilah, L.A., 2018. Tingkat Pengetahuan Penggunaan
Antibiotik Jenis Amoxicilin Pada Masyarakat Desa Pilanggede Kecamatan
Balen Kabupaten Bojonegoro. P-ISSN: 2088-4834. Vol. 2 No.8
60
LAMPIRAN
61
Lampiran 1. Skema Penelitian
Sampel kulit batang asam jawa Dilakukan sortasi

basah dan kering
Sampel di ekstraksi menggunakan metode maserasi

lalu dievab untuk mendapatkan ekstrak kental
Ekstrak kental di Fraksinasi menggunaakan n-heksan dan

etanol menggunakan corong pisah
Pembutan media Nutrient agar (NA)
Peremajaan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus
Pembuatan Larutan Mc Farland 0,5
Pembuatan suspensi Bakteri
F.NH F.ET
Pengukuran zona hambat terhadap bakteri
Pengolahan analisis data
62
Lampiran 2. Perhitungan
1. Perhitungan rendaman ekstrak kulit batang asam jawa
Berat simplisia kering =1500 g
Berat total ekstrak = 50,7 g
berat total ekstak

Rendaman ekstrak =
berat simplisia kering
x 100%
50,7 g
= x 100%
1500 g
= 3,38%
2. Perhitungan randeman ekstrak fraksi n-heksan kulit batang asam jawa
Bobot ekstrak = 20 g
Bobot fraksi = 8,2 g

bobot fraksi n−heksan
Randeman ekstrak fraksi =
bobot ekstrak
x 100%
8,2 g
= 20 x 100%
= 41%
3. Perhitungan randeman ekstrak fraksi etanol kulit batang asam jawa
Bobot eksrak = 20 g
Bobot fraksi = 5,5 g

bobot fraksi etanol
Randeman ekstrak fraksi = x 100%
bobot ekstrak
63
5,5 g
= 20 g x 100%
= 27,5 %
4. Medium Nutrient Agar (NA)
Cawan petri ada 3
3 x 15 ml = 45 ml + 25 ml = 70 ml
20
NA = x 70 ml = 1,4 gram
1000
5. Perhitungan Fraksi Kulit batang Asam Jawa (Tamarindus indica L.)
2,5
Fraksi n- heksan 2,5% = x 3 ml = 0,075 g
100
5
Fraksi n-heksan 5% = x 3 ml = 0,15 g
100
10
Fraksi n-heksan 10% = x 3 ml = 0,3 g
100
2,5
Fraksi etanol 2,5% = x 3 ml = 0,075 g
100
5
Fraksi etanol 5% = x 3 ml = 0,15 g
100
10
Fraksi etanol 10% = x 3 ml = 0,3 g
100
1
(+) Kloramfenikol = x 3 ml = 0,03 g
100
(-) DMSO = 3 ml
64
Lampiran 3.Skema Skrining Fitokimia
Uji Alkaloid
+ HCl 2N
+ 2-3 tetes pereaksi drangendorff
+ 2-3 tetes reagen mayer
Uji Flavonoid
+ 5 tetes etanol
+ serbuk Mg 0,2 gr
+ 5 tetes HCl pekat
Uji Saponin
+ 10 ml air panas
Uji Triterpenoid/steroid
+ 1 ml n-heksan
+ 0,5 ml asam asetat anhidrat
+ 2 ml H2SO4 pekat
Uji Tanin
+ 2 ml aquadest
+ 3 ml FeCl3
+ 2 ml H2SO4 pekat
65
Uji Fenol
+ 10 tetes air panas

+ 3 tetes pereaksi FeCl3
+ 2 ml H2SO4 pekat
Lampiran 4. Dokumentasi
No Gambar Keterangan
.
1. Penimbangan simplisia kering
2. Ekstrak Kental Kulit Batang

Asam Jawa
3. Fraksi n-heksan
66
4. Fraksi etanol
5. Flavonoid n-heksan (-)
6. Tanin n-heksan (-)
7. Tanin etanol (+)
8. Fenol n-heksan (+)
67
9. Fenol etanol (+)
10. Alkaloid n-heksan Px.

Dragendorff (-)
11. Alkaloid n-heksan Px. mayer (+)
12. Alkaloid etanol Px. Dragendorff

(+)
13. Alkaloid n-heksan Px. mayer (-)
68
14. Triterpenoid n-heksan (+)
15. Triterpenoid etanol (-)
16. Hasil zona hambat fraksi etanol

replikasi 1 terhadap bakteri
Escherichia coli

Escherichia coli

Escherichia coli
69
19 Hasil zona hambat fraksi etanol

21 Hasil zona hambat fraksi etanol

22 Hasil zona hambat fraksi n-heksan

Escherichia coli

Escherichia coli
70
Escherichia coli



28 Larutan standard Mc-Farland
71
29 Larutan standard Mc-Farland
Lampiran 5. Hasil Analisis MannWhitney Fraksi n-heksan Terhadap Bakteri
Escherichia coli
Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
Zona_Hambat Fraksi Heksan 2,5% 12 11,08 133,00
Fraksi Heksan 5% 12 13,92 167,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U 55,000
Wilcoxon W 133,000
Z -,992
Asymp. Sig. (2-tailed) ,321
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,347b
a. Grouping Variable: Perlakuan

b. Not corrected for ties.
72
Ranks
Fraksi Heksan 10% 12 17,92 215,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 85,000
Z -3,772

Ranks
KPF 12 18,00 216,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 84,000
Z -3,821

Ranks
73
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,452

Ranks
Zona_Hambat Fraksi Heksan 5% 12 8,67 104,00
Fraksi Heksan 10% 12 16,33 196,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 104,000
Z -2,669

Ranks
KPF 12 17,13 205,50
Total 24
74
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 94,500
Z -3,210

Ranks
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,446

Ranks
KPF 12 15,00 180,00
75
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 120,000
Z -1,737

Ranks
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,447

Ranks
Zona_Hambat KPF 12 18,50 222,00
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
76
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,447

Lampiran 6. Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Heksan Terhadap Bakteri
Ranks
Fraksi Heksan 5% 12 14,54 174,50
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 125,500
Z -1,519

Ranks
77
Fraksi Heksan 10% 12 17,13 205,50
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 94,500
Z -3,244

Ranks
KPF 12 18,50 222,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,221

Ranks
78
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,476

Ranks
Fraksi Heksan 10% 12 15,58 187,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 113,000
Z -2,177

Ranks
79
KPF 12 18,38 220,50
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 79,500
Z -4,158

Ranks
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,505

Ranks
80
KPF 12 18,25 219,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 81,000
Z -4,040

Ranks
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,459

Ranks
81
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,486

Lampiran 7. Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Etanol Terhadap Bakteri
Escherichia coli
Ranks
Zona_Hambat Fraksi Etanol 2,5% 12 6,67 80,00
Fraksi Etanol 5% 12 18,33 220,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 80,000
Z -4,101
82
Ranks
Fraksi Etanol 10% 12 18,50 222,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,206

Ranks
KPF 12 18,50 222,00

Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,226

Ranks
83
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,493

Ranks
Zona_Hambat Fraksi Etanol 5% 12 11,63 139,50
Fraksi Etanol 10% 12 13,38 160,50
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 139,500
Z -,616

84
Ranks
KPF 12 16,13 193,50
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 106,500
Z -2,549

Ranks
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,454

Ranks
85
KPF 12 15,08 181,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 119,000
Z -1,829

Ranks
KNF 12 6,50 78,00

Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,451

Ranks
86
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,476

Lampiran 7. Hasil Analisis MannWhitney Fraksi etanol Terhadap Bakteri
Ranks
Fraksi Etanol 5% 24 22,67 544,00
Total 36
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 122,000
Z -3,401
87
Ranks
Fraksi Etanol 10% 12 17,67 212,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 88,000
Z -3,622

Ranks

KPF 12 17,21 206,50
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 93,500
Z -3,332

Ranks
88
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,456

Ranks
Fraksi Etanol 10% 12 16,88 202,50

Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 97,500
Z -3,085

Ranks
89
KPF 12 16,04 192,50
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 107,500
Z -2,529

Ranks
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,465

Ranks
90
KPF 12 10,75 129,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Wilcoxon W 129,000
Z -1,242

Ranks
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,458

91
Ranks
KNF 12 6,50 78,00
Total 24
Test Statisticsa
Zona_Hambat
Mann-Whitney U ,000
Wilcoxon W 78,000
Z -4,466

Lampiran 9. Hasil Analisis SPSS
Oneway
Descriptives
Zona_Hambat
95% Confidence Interval for
Mean
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
Fraksi Heksan 2,5% 12 20,3333 2,64002 ,76211 18,6559 22,0107 16,00 26,00
Fraksi Heksan 5% 12 22,2500 4,13686 1,19421 19,6216 24,8784 17,00 30,00
Fraksi Heksan 10% 12 26,9167 2,67848 ,77321 25,2148 28,6185 21,00 30,00
Fraksi Etanol 2,5% 12 19,4167 1,31137 ,37856 18,5835 20,2499 17,00 21,00
Fraksi Etanol 5% 12 26,4167 3,39675 ,98056 24,2585 28,5749 21,00 33,00
Fraksi Etanol 10% 12 27,2500 3,19446 ,92216 25,2203 29,2797 24,00 33,00
KPF 24 29,3750 3,09013 ,63077 28,0702 30,6798 22,00 34,00
KNF 24 ,0000 ,00000 ,00000 ,0000 ,0000 ,00 ,00
Total 120 20,1333 10,95977 1,00049 18,1523 22,1144 ,00 34,00
92
Descriptives
Zona_Hambat
95% Confidence Interval for

Mean
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
Fraksi Heksan 2,5% 12 23,1667 2,65718 ,76706 21,4784 24,8550 19,00 28,00
Fraksi Heksan 5% 12 25,2500 3,46738 1,00095 23,0469 27,4531 21,00 32,00
Fraksi Heksan 10% 12 28,0833 3,44986 ,99589 25,8914 30,2753 21,00 32,00
Fraksi Etanol 2,5% 12 21,5833 3,14667 ,90836 19,5840 23,5826 18,00 29,00
Fraksi Etanol 5% 12 24,2500 2,13733 ,61699 22,8920 25,6080 21,00 29,00
Fraksi Etanol 10% 12 29,0000 4,02266 1,16124 26,4441 31,5559 24,00 36,00
KPF 24 30,7500 4,45509 ,90939 28,8688 32,6312 24,00 37,00
KNF 24 ,0000 ,00000 ,00000 ,0000 ,0000 ,00 ,00
Total 120 21,2833 11,50972 1,05069 19,2029 23,3638 ,00 37,00
ANOVA
Zona_Hambat
Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 13472,325 7 1924,618 262,381 ,000
Within Groups 821,542 112 7,335
Total 14293,867 119
ANOVA
Zona_Hambat
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 14629,867 7 2089,981 206,327 ,000

Within Groups 1134,500 112 10,129
Total 15764,367 119
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
93
Dependent Variable: Zona_Hambat
LSD
Mean Difference 95% Confidence Interval
(I) Perlakuan (J) Perlakuan (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
Fraksi Heksan 2,5% Fraksi Heksan 5% -1,91667 1,10568 ,086 -4,1074 ,2741
Fraksi Heksan 10% -6,58333* 1,10568 ,000 -8,7741 -4,3926
Fraksi Etanol 2,5% ,91667 1,10568 ,409 -1,2741 3,1074
Fraksi Etanol 5% -6,08333* 1,10568 ,000 -8,2741 -3,8926
Fraksi Etanol 10% -6,91667* 1,10568 ,000 -9,1074 -4,7259
KPF -9,04167* ,95755 ,000 -10,9389 -7,1444
KNF 20,33333* ,95755 ,000 18,4361 22,2306

Fraksi Heksan 5% Fraksi Heksan 2,5% 1,91667 1,10568 ,086 -,2741 4,1074
Fraksi Heksan 10% -4,66667* 1,10568 ,000 -6,8574 -2,4759
Fraksi Etanol 2,5% 2,83333* 1,10568 ,012 ,6426 5,0241
Fraksi Etanol 5% -4,16667 *
1,10568 ,000 -6,3574 -1,9759
1,10568 ,000 -7,1908 -2,8092
KPF -7,12500* ,95755 ,000 -9,0223 -5,2277
KNF 22,25000* ,95755 ,000 20,3527 24,1473
Fraksi Heksan 10% Fraksi Heksan 2,5% 6,58333 *
1,10568 ,000 4,3926 8,7741
Fraksi Heksan 5% 4,66667 *
1,10568 ,000 2,4759 6,8574
Fraksi Etanol 2,5% 7,50000* 1,10568 ,000 5,3092 9,6908
Fraksi Etanol 5% ,50000 1,10568 ,652 -1,6908 2,6908
Fraksi Etanol 10% -,33333 1,10568 ,764 -2,5241 1,8574
KPF -2,45833 *
,95755 ,012 -4,3556 -,5611
KNF 26,91667* ,95755 ,000 25,0194 28,8139
Fraksi Etanol 2,5% Fraksi Heksan 2,5% -,91667 1,10568 ,409 -3,1074 1,2741
Fraksi Heksan 5% -2,83333 *
1,10568 ,012 -5,0241 -,6426
1,10568 ,000 -9,6908 -5,3092
Fraksi Etanol 5% -7,00000* 1,10568 ,000 -9,1908 -4,8092
Fraksi Etanol 10% -7,83333* 1,10568 ,000 -10,0241 -5,6426
KPF -9,95833 *
,95755 ,000 -11,8556 -8,0611
KNF 19,41667 *
,95755 ,000 17,5194 21,3139
Fraksi Etanol 5% Fraksi Heksan 2,5% 6,08333* 1,10568 ,000 3,8926 8,2741
Fraksi Heksan 5% 4,16667* 1,10568 ,000 1,9759 6,3574
Fraksi Heksan 10% -,50000 1,10568 ,652 -2,6908 1,6908
Fraksi Etanol 2,5% 7,00000 *
1,10568 ,000 4,8092 9,1908
Fraksi Etanol 10% -,83333 1,10568 ,453 -3,0241 1,3574
94
KPF -2,95833* ,95755 ,003 -4,8556 -1,0611
KNF 26,41667 *
,95755 ,000 24,5194 28,3139
Fraksi Etanol 10% Fraksi Heksan 2,5% 6,91667 *
1,10568 ,000 4,7259 9,1074
Fraksi Heksan 5% 5,00000* 1,10568 ,000 2,8092 7,1908
Fraksi Heksan 10% ,33333 1,10568 ,764 -1,8574 2,5241
1,10568 ,000 5,6426 10,0241
Fraksi Etanol 5% ,83333 1,10568 ,453 -1,3574 3,0241
KPF -2,12500* ,95755 ,028 -4,0223 -,2277
KNF 27,25000* ,95755 ,000 25,3527 29,1473
KPF Fraksi Heksan 2,5% 9,04167 *
,95755 ,000 7,1444 10,9389
,95755 ,000 5,2277 9,0223
Fraksi Heksan 10% 2,45833* ,95755 ,012 ,5611 4,3556
Fraksi Etanol 2,5% 9,95833* ,95755 ,000 8,0611 11,8556
Fraksi Etanol 5% 2,95833 *
,95755 ,003 1,0611 4,8556
,95755 ,028 ,2277 4,0223
KNF 29,37500* ,78184 ,000 27,8259 30,9241
KNF Fraksi Heksan 2,5% -20,33333* ,95755 ,000 -22,2306 -18,4361

,95755 ,000 -24,1473 -20,3527
Fraksi Heksan 10% -26,91667* ,95755 ,000 -28,8139 -25,0194
Fraksi Etanol 2,5% -19,41667 *

,95755 ,000 -21,3139 -17,5194
Fraksi Etanol 5% -26,41667* ,95755 ,000 -28,3139 -24,5194

,95755 ,000 -29,1473 -25,3527
KPF -29,37500* ,78184 ,000 -30,9241 -27,8259
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Zona_Hambat
LSD
Mean Difference 95% Confidence Interval
(I) Perlakuan (J) Perlakuan (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
Fraksi Heksan 2,5% Fraksi Heksan 5% -2,08333 1,29932 ,112 -4,6578 ,4911

1,29932 ,000 -7,4911 -2,3422
Fraksi Etanol 2,5% 1,58333 1,29932 ,226 -,9911 4,1578
Fraksi Etanol 5% -1,08333 1,29932 ,406 -3,6578 1,4911
Fraksi Etanol 10% -5,83333* 1,29932 ,000 -8,4078 -3,2589
KPF -7,58333 *
1,12525 ,000 -9,8129 -5,3538
95
KNF 23,16667* 1,12525 ,000 20,9371 25,3962
Fraksi Heksan 5% Fraksi Heksan 2,5% 2,08333 1,29932 ,112 -,4911 4,6578
Fraksi Heksan 10% -2,83333* 1,29932 ,031 -5,4078 -,2589
Fraksi Etanol 2,5% 3,66667* 1,29932 ,006 1,0922 6,2411
Fraksi Etanol 5% 1,00000 1,29932 ,443 -1,5744 3,5744
1,29932 ,005 -6,3244 -1,1756
KPF -5,50000* 1,12525 ,000 -7,7295 -3,2705
KNF 25,25000* 1,12525 ,000 23,0205 27,4795
Fraksi Heksan 10% Fraksi Heksan 2,5% 4,91667 *
1,29932 ,000 2,3422 7,4911
1,29932 ,031 ,2589 5,4078
Fraksi Etanol 2,5% 6,50000* 1,29932 ,000 3,9256 9,0744
Fraksi Etanol 5% 3,83333* 1,29932 ,004 1,2589 6,4078
Fraksi Etanol 10% -,91667 1,29932 ,482 -3,4911 1,6578
KPF -2,66667 *
1,12525 ,020 -4,8962 -,4371
KNF 28,08333* 1,12525 ,000 25,8538 30,3129
Fraksi Etanol 2,5% Fraksi Heksan 2,5% -1,58333 1,29932 ,226 -4,1578 ,9911
1,29932 ,006 -6,2411 -1,0922
1,29932 ,000 -9,0744 -3,9256
Fraksi Etanol 5% -2,66667* 1,29932 ,042 -5,2411 -,0922
Fraksi Etanol 10% -7,41667* 1,29932 ,000 -9,9911 -4,8422
KPF -9,16667 *
1,12525 ,000 -11,3962 -6,9371
KNF 21,58333 *
1,12525 ,000 19,3538 23,8129
Fraksi Etanol 5% Fraksi Heksan 2,5% 1,08333 1,29932 ,406 -1,4911 3,6578
Fraksi Heksan 5% -1,00000 1,29932 ,443 -3,5744 1,5744
1,29932 ,004 -6,4078 -1,2589
1,29932 ,042 ,0922 5,2411
Fraksi Etanol 10% -4,75000* 1,29932 ,000 -7,3244 -2,1756
KPF -6,50000* 1,12525 ,000 -8,7295 -4,2705
KNF 24,25000 *
1,12525 ,000 22,0205 26,4795
Fraksi Etanol 10% Fraksi Heksan 2,5% 5,83333 *
1,29932 ,000 3,2589 8,4078
Fraksi Heksan 5% 3,75000* 1,29932 ,005 1,1756 6,3244
Fraksi Heksan 10% ,91667 1,29932 ,482 -1,6578 3,4911
1,29932 ,000 4,8422 9,9911
1,29932 ,000 2,1756 7,3244
KPF -1,75000 1,12525 ,123 -3,9795 ,4795
KNF 29,00000* 1,12525 ,000 26,7705 31,2295
KPF Fraksi Heksan 2,5% 7,58333 *
1,12525 ,000 5,3538 9,8129
96
Fraksi Heksan 5% 5,50000* 1,12525 ,000 3,2705 7,7295
1,12525 ,020 ,4371 4,8962
1,12525 ,000 6,9371 11,3962
Fraksi Etanol 5% 6,50000* 1,12525 ,000 4,2705 8,7295
Fraksi Etanol 10% 1,75000 1,12525 ,123 -,4795 3,9795
KNF 30,75000 *
,91876 ,000 28,9296 32,5704
KNF Fraksi Heksan 2,5% -23,16667 *
1,12525 ,000 -25,3962 -20,9371
Fraksi Heksan 5% -25,25000* 1,12525 ,000 -27,4795 -23,0205

1,12525 ,000 -30,3129 -25,8538
Fraksi Etanol 2,5% -21,58333* 1,12525 ,000 -23,8129 -19,3538

1,12525 ,000 -26,4795 -22,0205
Fraksi Etanol 10% -29,00000* 1,12525 ,000 -31,2295 -26,7705
KPF -30,75000 *
,91876 ,000 -32,5704 -28,9296
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
97

Skripsi Nija Fix

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Skripsi Nija Fix

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

SKRIPSI

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI

PROGRAM STUDI FARMASI

Skripsi ini telah dipertahankan dihadapan Tim Penguji seminar ujian

Universitas Mandala Waluya.

Kendari, Agustus 2022

apt. Muhammad Isrul., S.Si., M.Si. Risky Juliansyah, S.Farm., M.Si

Dekan Fakultas Sains Dan Teknologi

Dr. Sri Anggarini Rasyid, S.Si.,M.Si

Universitas Mandala Waluya

Kata Kunci : Kulit Batang Asam Jawa, Skrining fitokimia Antibakteri,

memberikan Rahmat dan Karunia-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan hasil

penelitian yang berjudul “Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antibakteri

Terhadap Bakteri Escherichia coli Dan Staphylococcus aureus” guna memenuhi

Farmasi di Universitas Mandala Waluya.

waktu, tenaga, dan pikiran yang telah diberikannya dalam membimbing,

1. Ketua Yayasan Universitas Mandala Waluya

2. Rektor Universitas Mandala Waluya

Anggarini Rasyid, S.Si., M.Si

membantu penulis semasa pendidikan.

bantuan dan motivasi kepada Penulis hingga selesainya skripsi ini.

terutama Penulis dalam menyelesaikan pendidikan di Universitas Mandala Waluya

Kendari, Agustus 2022

2. Kategori zona hambat................................................................................ 18

4. . Hasil Rendemen Serbuk kulit batang asam jawa (Tamarindus indica 39

6. Hasil Identifikasi Kandungan Senyawa Kimia fraksi n-Heksan kulit 40

0 bakteri Staphylococcus aureus.................................................................

1 bakteri Staphylococcus aureus.................................................................

2 asam jawa pada Escherichia coli..................................................

1 Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi n-heksan kulit 44

3 batang asam jawa pada Escherichia coli..................................................

4 asam jawa pada Staphylococcus aureus....................................

1 Hasil Analisis Mann-Whitney Test zona hambat fraksi n-heksan kulit 46

2. Bakteri Escherichia coli.................................................................................. 14

4. Bagan Kerangka Konsep............................................................................... 26

5 Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Etanol Terhadap Bakteri Escherichia 71

6 Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Heksan Terhadap Bakteri Escherichia 75

7 Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Etanol Terhadap Bakteri Staphylococcus 80

8 Hasil Analisis MannWhitney Fraksi Heksan Terhadap Bakteri 85

9 Hasil Analisis SPSS............................................................................................ 91

No. Singkatan Arti

6. DMSO Dimetil sulfoksida

10. F.ET Fraksi etanol

11. H2SO4 Asam Sulfat

12. FeCl3 Besi Klorida Tiga

14. F.NH Fraksi n-heksan

15. KPF Kontrol Positif

16. KNF Kontrol Negatif

yang masih berkembang ataupun di negara yang sudah maju. Mikroorganisme

Penyakit infeksi masih menjadi masalah kesehatan yang utama di beberapa

negara, khususnya di negara berkembang (Kementerian Kesehatan RI, 2011).

Penyebab infeksi disebabkan oleh sejumlah mikroorganisme seperti bakteri yang

antimikroorganisme yang digunakan untuk menghambat kuman penyakit penyebab

molekuler. Bahan antimikroorganisme tersebut dikenal dengan antibiotik.

Berdasarkan data WHO tahun 2015 menyatakan bahwa Indonesia menduduki

kasus Multi Drug Resistance Tuberculosis (MDRTB) di dunia. Data ini

menunjukkan bahwa resistensi antibiotika memang telah menjadi masalah yang

harus segera diselesaikan (Zuhriyah, 2018).

Staphylococcus aureus merupakan bakteri patogen Gram positif yang

mudah tumbuh pada kebanyakan medium bakteriologis dalam keadaan aerob

maupun anaerob fakultatif. Staphylococcus aureus banyak ditemukan di sekitar

oleh kemampuan Staphylococcus aureus yang mudah beradaptasi dengan

lingkungan melalui ketahanannya terhadap antimikrobial yang dimilikinya. Bakteri

berupa impetigo, pneumonia, osteomielitis, pioartrosis, endokarditis, metastasis