RENI LUKAS
NIM : F201801086
Skripsi ini telah kami setujui untuk disajikan dihadapan Tim Penguji pada Ujian
Komprehensif Program Studi S-1 Farmasi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Mandala Waluya dalam
Kendari,Agustus 2022
Tim Pembimbing
Pembimbing I Pembimbing II
Dr. Drs. H. La Ode Saafi, DAP&E., M.Sc(HEc) Apt. Mus Ifaya, S.Farm.,M.Si
NIDK : 88 0785 0017 NIDN : 09 0909 8802
Mengetahui,
ii
ABSTRAK
Uji toksisitas akut adalah pengujian untuk mendeteksi efek toksik yang muncul dalam
waktu singkat setelah pemberian sediaan uji dan untuk memperoleh data-respon yang khas
dari sediaan uji untuk mengetahui derajat bahaya zat uji untuk manusia. Herba kancing ungu
(Borreria laevis Lamk.) mengandung minyak atsiri, flavon atau saponin yang digunakan
sebagai peluruh dahak. Efek farmakologis dapat mengobati asma, batuk, radang mata, sakit
kepala, sakit panas dan disentri. LD50 merupakan tahap awal untuk menentukan keamanan
bahan yang digunakan untuk manusia, dalam menentukan dosis yang menyebabkan kematian
50% pada hewan uji. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui ekstrak herba kancing ungu
(Borreria laevis Lamk.) menimbulkan efek toksisitas akut terhadap mencit dan untuk
mengetahui dosis yang menyebabkan kematian 50% mencit.
Penelitian ini merupakan penelitian analitik eksperimental laboratorium, sampel
diekstraksi dengan metode maserasi. Uji toksisitas akut menggunakan metode fixed dose,
dengan kelompok perlakuan yaitu kelompok control Na.CMC 1% dan kelompok dosis 5, 50,
300 dan 2000 mg/kgBB. Analisis data dilakukan menggunakan menggunakan software SPSS
(Statistical Package For the Social Sciences).
Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etanol herba kancing ungu (Borreria laevis
Lamk.) tidak mempunyai efek toksik terhadap hasil pengamatan gejala toksisitas pada mencit
seperti gromming, salivasi, jalan dengan perut, lemas, dan tremor. Pemberian dosis 5, 50, dan
300 mg/kgBB menyebabkan kematian hanya 1 ekor tiap kelompok dosis sedangkan dosis
2000 mg/kgBB tidak menyebabkan kematian tetapi hasil tersebut dapat diabaikan karena
hanya terjadi pada 1 ekor mencit tiap kelompok dosis 5, 50, 300 mg/kgBB (tidak mencapai
50%).
Kata Kunci : Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.), Uji Toksisitas Akut,
Mus musculus
Daftar Pustaka : 33 (1978 – 2021)
iii
ABSTRACT
iv
KATA PENGANTAR
Puji syukur Penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan
Rahmat dan Karunia-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan Skripsi yang berjudul “Uji
Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.) Yang
Diukur Dari Nilai LD50 Terhadap Mencit (Mus musculus)” guna memenuhi salah satu
Mandala Waluya.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa Penyusunan Skripsi ini masih jauh dari
kesempurnaan oleh karena itu saran-saran dari semua pihak yang sifatnya membangun untuk
Pada kesempatan ini pertama-tama penulis ingin mengucapkan rasa Terima Kasih
kepada kedua orang tua tercinta, Ayahanda Lukas Palungan dan Ibunda Fina Ponno yang
telah melahirkan dan membesarkan penulis dengan penuh kasih sayang, penuh kesabaran, dan
tak henti-hentinya selalu mendoakan, memberikan nasehat dan bantuan moril maupun materi
Penulis juga tidak lupa menghanturkan rasa terimakasih yang sebesar-besarnya kepada
Bapak Dr. Drs. H. La Ode Saafi, DAP&E., M.Sc(HEc) selaku Pembimbing I dan kepada
Ibu apt. Mus Ifaya, S.Farm.,M.Si selaku Pembimbing II atas semua waktu, tenaga dan
pikiran yang telah diberikannya dalam membimbing, mengarahkan, memberi saran maupun
Tak lupa pula penulis haturkan rasa terima kasih yang sebesar-besarnya kepada:
2. Ibu Dr. Ratna Umi Nurlila, S.Si. M.Sc selaku Rektor Universitas Mandala Waluya.
v
3. Bapak Laode Hadju SKM., M.Kes selaku wakil rektor Bidang Akademik, Ibu Wa Ode
Nova Noviyanti SKM., M.Kes selaku wakil rektor Bidang Non Akademik, Toto Surianto
Waluya.
4. Bapak La Djabo Buton, SKM.,M.Kes selaku Ketua Lembaga Penelitian dan Pengabdian
5. Ibu Asbath Said, S.Kep,Ns., M.Kes selaku Ketua Lembaga Penjaminan Mutu (LPJM)
6. Ibu Sri Anggarini Rasyid, S.Si., M.Si selaku Dekan Fakultas Sains dan Teknologi
7. Ibu apt. Wa Ode Yuliastri, S.Farm., M.Si selaku Ketua Prodi Farmasi Fakultas Sains Dan
8. Para Tim Penguji masing-masing: Bapak apt. Muhammad Isrul, S.Si.,M.Si selaku Penguji
I, Ibu apt. Citra Dewi, S.Farm.,M.Farm selaku Penguji II, Ibu apt. Fatma Sari Siharis,
9. Seluruh dosen dan staf/karyawan Universitas Mandala Waluya yang telah banyak
10. Seluruh keluarga tercinta yang telah memberikan motivasi, dukungan, kasih sayang serta
11. Untuk Sahabat-sahabat doyan eat-eat Ayuni Dhita Widyasari, Adilla Muwahaddah,
Herdianti Cahya Wulandari, Mudriqhoh Wahyu Nisypu, Eka Oktaviana Bambang P.S,
Selfi, Aningsa Puput Melati, Anastasya Fabiola P., Sarmila, Sasmita, Wulan Arianti dan
Aulia Azizah Rauf yang selalu ada menemani dan telah banyak membantu serta
vi
mendukung sampai saat ini.
vii
12. Untuk Sahabatku Seliana, Cici, Eka, Arin yang selalu memberi semangat dan motivasi
selama ini.
13. Untuk sahabat-sahabat Story Of Lorong Fani, Iin, Silva, Erlita, Siska, Septi dan Siska Allo
14. Seluruh teman – teman Program Studi Farmasi angkatan 2018 khususnya kelas B2 yang
15. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan namanya satu per satu yang telah terlibat dan
membantu sehingga Hasil Penelitian ini dapat disusun dengan baik dan lancar.
Semoga kebaikan mereka mendapatkan pahala dari Tuhan Yang Maha Esa. Penulis
sadar bahwa penyusunan Skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, penulis berharap Hasil
Penulis
viii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL...................................................................................................................i
LEMBAR PERSETUJUAN SKRIPSI....................................................................................ii
ABSTRAK.................................................................................................................................iii
ABSTRACT..............................................................................................................................iv
KATA PENGANTAR...............................................................................................................v
DAFTAR ISI...........................................................................................................................viii
DAFTAR TABEL......................................................................................................................x
DAFTAR GAMBAR................................................................................................................xi
DAFTAR SINGKATAN.........................................................................................................xii
DAFTAR LAMPIRAN..........................................................................................................xiii
BAB I PENDAHULUAN..........................................................................................................1
A. Latar Belakang...............................................................................................................1
B. Rumusan Masalah..........................................................................................................3
C. Tujuan Penelitian............................................................................................................3
D. Manfaat Penelitian..........................................................................................................4
E. Kebaruan Penelitian.......................................................................................................5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA...............................................................................................7
A. Tinjauan Teoritis Variabel Terikat.................................................................................7
B. Tinjauan Teoritis Variabel Bebas.................................................................................21
C. Kajian Empiris..............................................................................................................25
BAB III KERANGKA KONSEP PENELITIAN..................................................................27
A. Dasar Pikir Penelitian...................................................................................................27
B. Bagan Kerangka Konsep Penelitian.............................................................................28
C. Variabel Penelitian.......................................................................................................28
D. Definisi Operasional & Kriteria Objektif.....................................................................29
E. Hipotesis Penelitian......................................................................................................30
BAB IV METODE PENELITIAN.........................................................................................31
A. Jenis dan Desain Penelitian..........................................................................................31
B. Lokasi dan Waktu Penelitian........................................................................................32
C. Populasi dan Sampel....................................................................................................32
D. Alat dan Bahan.............................................................................................................32
E. Prosedur Penelitian.......................................................................................................33
F. Pengolahan dan Analisis Data......................................................................................36
G. Etika Penelitian............................................................................................................38
ix
BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN...................................................................................39
A. Gambaran Umum Lokasi Penelitian............................................................................39
B. Analisis Data................................................................................................................39
C. Pembahasan..................................................................................................................46
BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN.................................................................................53
A. Kesimpulan...................................................................................................................53
B. Saran.............................................................................................................................53
DAFTAR PUSTAKA...............................................................................................................54
x
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Kebaruan Penelitian.................................................................................................................5
2. Klasifikasi LD50................................................................................................................................................................................10
3. Penggolongan LD50 berdasarkan GRAS.................................................................................10
4. Sifat Fisiologis Mencit...........................................................................................................18
5. Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak Herba Kancing Ungu (Borreria................................40
6. Hasil Pengamatan Gejala Toksik...........................................................................................40
7. Hasil Pengamatan Jumlah Kematian Hewan Coba Dalam 24 Jam Dan................................41
8. Hasil Uji Normalitas..............................................................................................................41
9. Hasil uji T..............................................................................................................................42
10. Hasil Uji F............................................................................................................................43
11. Hasil Uji T Independent......................................................................................................44
12. Hasil Uji LSD......................................................................................................................45
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Hewan coba mencit (Mus musculus).....................................................................................17
2. Tanaman Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.).................................................................22
3. Bagan Kerangka Konsep.......................................................................................................28
xii
DAFTAR SINGKATAN
1. BB Berat Badan
2. cm Centimeter
3. G Gram
4. GHS Globally Harmonized Classification System
5. Kg Kilogram
6. LD50 Lethal Dose 50
7. LSD Least Significant Difference
8. Mg Milligram
9. Ml Milliliter
10. Na.CMC Natrium Carboxymetyl Cellulosa
11. OECD Organisation for Economic Co-operation and Development
12. Vp Volume pemberian
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Surat Determinasi..................................................................................................................58
2. Skema Kerja Pembuatan Ekstrak...........................................................................................61
3. Skema Kerja Uji Toksisitas Akut..........................................................................................62
4. Perhitungan............................................................................................................................63
5. Dokumentasi Penelitian.........................................................................................................68
6. Hasil Olah Data SPSS............................................................................................................73
xiv
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Obat tradisional telah digunakan sejak lama untuk menjaga kesehatan masyarakat.
80% orang di dunia ini masih menggunakan obat tradisional saat ini. Di seluruh dunia,
seperempat dari obat yang digunakan saat ini memiliki komponen aktif yang diekstraksi
dan dibuat dari tumbuhan. Obat tradisional ialah bahan atau campuran yang terbuat dari
tumbuhan, hewan, mineral, sediaan cair (galenik), atau kombinasi dari bahan-bahan
tersebut yang telah digunakan untuk pengobatan secara turun-temurun dan dapat
Meskipun obat tradisional telah digunakan sejak lama, namun belum sepenuhnya
aman karena mengandung zat asing bagi tubuh. Oleh karena itu, sangat penting untuk
memahami potensi berbahayanya. Jika jumlah yang diserap relatif kecil, efek toksik pada
organisme hidup mungkin tidak terlihat, dan bahayanya mungkin hanya mempengaruhi sel
Mempelajari dampak kumulatif bahan kimia, dosis yang mungkin memiliki efek
lainnya dapat membantu menilai bahaya paparan manusia terhadap zat tersebut. Secara
umum, data ini diuji sebagai model untuk sejumlah uji toksisitas, termasuk uji toksisitas
oral, uji toksisitas subkronis oral, uji toksisitas oral kronis, uji teratogenisitas, uji kepekaan
kulit, uji iritasi mata, uji iritasi kulit akut, dan uji sensitisasi kulit. Tes iritasi mukosa dari
studi pada hewan, tes untuk toksisitas karsinogenik, toksisitas kulit subkronis dan akut.
1
Pilihan tes bergantung pada tujuan penggunaan zat dan kemungkinan orang terpapar
(BPOM, 2014).
seberapa berbahaya suatu bahan kimia bagi sistem biologis dan untuk mendapatkan
informasi tentang respons dosis normal bahan uji. Informasi yang dikumpulkan dapat
digunakan untuk menilai tingkat bahaya formulasi uji terhadap paparan manusia dan
Pengujian toksisitas akut, subkronis, dan kronis ialah tiga kategori pengujian
toksisitas. Dosis fatal bahan kimia ditentukan oleh pengujian toksisitas akut (LD50).
Pemberian bahan kimia untuk dievaluasi setidaknya sekali dalam 24 jam adalah cara
pengujian toksisitas akut dilakukan. Studi toksisitas akut adalah penelitian praklinis
dengan tujuan menentukan seberapa berbahaya suatu zat segera setelah paparan tunggal.
Dalam penyelidikan toksisitas akut, pengukuran kuantitatif yang dikenal sebagai LD50
sering digunakan untuk menunjukkan kisaran dosis yang fatal. Untuk menjamin aman
dikonsumsi, tanaman obat harus melalui beberapa proses pengujian. Uji toksisitas akut
Tumbuhan rumput kancing ungu adalah herba, berbentuk tabung dan memiliki
polimorfisme yang terkait dengan ukurannya. Tanaman ini merupakan tanaman tahunan
dan termasuk tumbuhan liar (Plasta, 2007). Selain itu, kancing ungu (Borreria laevis
Lamk.) adalah salah satu tumbuhan dalam spesies Borreria dan Spermacoce. Ekstrak dari
2
Kandungan kimia ekstrak herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) adalah
gomphrenin III, gomphrenin V, gomphrenin VI dan amarathin (Dewi et al., 2013). Selain
itu herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) juga mengandung minyak atsiri, flavon
atau saponin yang biasa digunakan sebagai peluruh dahak. Efek farmakologis dari
tumbuhan ini dinilai mampu mengobati asma, batuk, radang mata, sakit kepala, sakit panas
hal tersebut dan mengingat khasiatnya yang tinggi, penulis tertarik untuk melakukan uji
toksisitas akut pada ekstrak etanol Herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) yang
B. Rumusan Masalah
Berdasarkan uraian dalam latar belakang, maka dapat dirumuskan masalah penelitian
sebagai berikut :
1. Apakah ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.) menimbulkan
2. Pada dosis berapa ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.)
C. Tujuan Penelitian
1. Tujuan Umum
Untuk mengetahui efek toksisitas ekstrak Herba Kancing Ungu (Borreria laevis
Lamk.) terhadap mencit yang diukur secara kuantitatif dengan nilai LD50.
3
2. Tujuan Khusus
b. Menentukan nilai dosis Ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat Teoritis
a. IPTEK
2. Praktis
a. Tenaga Farmasi
toksisitas akut ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.).
b. Bagi Masyarakat
4
E. Kebaruan Penelitian
Berdasarkan kajian literatur, penelitian yang berjudul “Uji Toksisitas Akut Ekstrak
Etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.) Yang Diukur Dari Nilai LD50
Terhadap Mencit (Mus musculus)” belum pernah ditemukan pada penelitian sebelumnya.
5
5. Jumain Uji Toksisitas Akut Pengujian yang Menggunakan
(2018) Dan LD50 Ekstrak sama. sampel yang
Etanol Daun Kirinyuh berbeda dan
(Euphatorium Metode
odoratum Linn) Pada perhitungan nilai
Mencit (Mus LD50 yang
Musculus) berbeda
(Aritmatik Reed
dan Muench).
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
berbahaya suatu obat terhadap sistem biologis dan untuk mendapatkan informasi
tentang respons dosis normal. Untuk menetapkan dosis yang diperlukan untuk
keselamatan manusia, data yang diperoleh dapat digunakan untuk membuat klaim
mengenai tingkat bahaya produk obat yang diteliti saat terpapar ke manusia (BPOM,
2014).
senyawa terhadap komponen bioaktif yang berbahaya pada konsentrasi besar tetapi
berubah menjadi obat pada kadar rendah. Tubuh dapat menyerap bahan kimia atau
senyawa asing dari lingkungan melalui difusi, yang dapat berdampak langsung pada
keseimbangan di dalam tubuh. Sebagai uji penapisan senyawa bioaktif, uji toksisitas
dilakukan untuk mengidentifikasi efek bahan kimia yang dihasilkan oleh dosis tunggal
Pemilihan jenis hewan uji dan jumlah hewan uji, teknik pemberian preparat uji, dan
temuan uji toksisitas in vivo merupakan aspek yang mempengaruhi kehandalan hasil.
memilih dosis tes konsekuensi persiapan ujian. Teknik dan proses yang digunakan
2014).
7
1) Penggolongan Uji Toksisitas
Badan Pengawas Obat dan Makanan Nomor 7 Tahun 2014 tentang Pedoman Uji
berkembang dalam waktu 24 jam setelah pemberian oral berulang dosis tunggal
Ide dasar di balik uji toksisitas oral akut adalah bahwa berbagai dosis
sediaan uji diberikan kepada beberapa kelompok hewan percobaan, satu dosis
diberikan kepada setiap kelompok, dan kemudian keberadaan efek toksik dan
kematian dipantau. Hewan mati yang terkait dengan pemberian sediaan uji
indikasi toksisitas baik yang mati selama percobaan maupun yang bertahan
Tujuan uji toksisitas oral akut adalah untuk mengidentifikasi toksisitas yang
mempelajari lebih lanjut tentang risiko yang terkait dengan paparan akut zat,
tingkat dosis. Menetapkan kelas dan pelabelan bahan atau sediaan, melakukan
uji toksisitas, dan menghitung nilai LD50 bahan atau sediaan (BPOM, 2014).
8
Metode dalam pengujian toksisitas akut berdasarkan pedoman Organisation
beberapa metode yaitu OECD berdasarkan pedoman nomor 410 (Acute Oral
hewan uji berkelamin sama dengan pemberian dosis secara bertingkat, dimana
kelompok hewan uji terdiri dari 5 hewan uji, banyaknya hewan uji dalam
menentukan parameter dalam metode ini yang bertolak belakang dengan animal
OECD telah mengeluarkan pedoman No. 420 (Fixed Dose Method), 423 (Acute
Toxic Class Method) dan 425 (Up And Down Procedure). Berdasarkan metode
tersebut, penggunaan tikus atau mencit sebagai hewan percobaan betina karena
2014).
Dalam penyelidikan ini, dosis tetap atau fixed doses 5, 50, 300, 2000, dan
5000 mg/kg diberikan kepada hewan uji secara bertahap sesuai dengan premis
pengujian metode OECD 420. Dosis yang digunakan untuk prosedur ini adalah
Pendekatan ini memiliki manfaat menggunakan lebih sedikit hewan uji dan
9
Tabel 2. Klasifikasi LD50
Sebuah tes yang disebut uji toksisitas oral subkronis digunakan untuk
diberikan kepada hewan uji dalam dosis oral berulang hingga 10% dari hidup
Prinsip dasar uji toksisitas oral subkronis adalah bahwa dosis yang
berbeda dari persiapan uji diberikan kepada beberapa kelompok hewan uji, satu
dosis per kelompok per hari selama 28 atau 90 hari, kemudian kelompok satelit
1
reversibel. Hewan harus diperiksa tingkat toksisitasnya setiap hari selama
persiapan tes diberikan. Hewan yang mati selama pengujian segera dibaptis dan
kecuali jika telah melalui masa rigor mortis (keras). Semua hewan hidup
dibaptis pada akhir waktu persiapan tes, dan setiap organ dan jaringan
tentang adanya efek toksik dari zat yang tidak ditemukan dalam uji toksisitas
akut, data tentang potensi efek toksik setelah paparan berulang pada sediaan uji
untuk jangka waktu tertentu, data tentang dosis yang tidak memiliki efek toksik
(No Observed Adverse Effect Level/NOAEL), dan data tentang efek kumulatif
yang berkembang selama pemberian berulang zat uji selama sebagian besar
kehidupan hewan uji. Uji toksisitas kronis pada dasarnya identik dengan uji
tidak berbahaya. atau 12 bulan untuk bahan kimia murni atau bahan uji yang
berulang dalam jangka waktu yang lebih lama dan menetapkan tingkat dosis
1
efek
1
toksik yang tidak teramati adalah tujuan dari pengujian toksisitas oral kronis
453 (2018) uji toksisitas oral kronis dan uji karsinogenisitas dapat dilakukan
d. Uji Teratogenisitas
teratoma adalah untuk menyediakan zat uji untuk beberapa kelompok hewan
Sang ibu menjalani otopsi, rahim diangkat, dan janin dievaluasi sehari sebelum
berbahaya yang terjadi segera setelah aplikasi kulit dari sediaan uji dibuat. Ide
dasar di balik pengujian toksisitas kulit akut adalah untuk memberikan dosis
tertentu dari persiapan tes untuk banyak kelompok hewan uji dari jenis kelamin
yang sama, dengan dosis pertama yang dipilih tergantung pada hasil tes awal.
Kemudian, dipilih dosis yang menunjukkan efek samping toksik tetapi tidak
1
Tes toksisitas kulit akut digunakan untuk menetapkan autotoksisitas suatu
zat, mengumpulkan data risiko setelah paparan kulit akut, dan mengumpulkan
data awal yang dapat digunakan untuk menetapkan tingkat dosis, membuat tes
kulit, pemetaan informasi pelabelan, dan kategorisasi nilai zat (BPOM, 2014).
Sebuah tes yang dikenal sebagai tes toksisitas kulit subkronis digunakan
memberikan persiapan tes untuk menguji hewan hingga 10% dari hidup mereka
(BPOM, 2014).
transdermal setiap hari pada berbagai dosis. Ketika formulasi uji diberikan
kepada hewan, toksisitas harus diperiksa setiap hari. Hewan yang lulus uji
bobot kematian tetapi mati selama pengujian segera dibaptis, dan organ serta
dibaptis pada akhir waktu persiapan tes, dan kemudian dilakukan pengamatan
patologis utama dari setiap organ dan jaringan, serta tes hematologi, biokimia
mengidentifikasi efek toksik dari zat yang tidak dapat diidentifikasi dengan tes
penetrasi berulang dari sediaan uji melalui kulit untuk jangka waktu yang telah
1
ditentukan,
1
dan untuk menyelidiki kumulatif dan efek pembalikan setelah penetrasi
berulang dari preparasi uji selama jangka waktu tertentu (BPOM, 2014).
g. Uji Karsinogenisitas
sifat karsinogenik suatu obat uji setelah obat uji diberikan kepada hewan uji
dalam dosis berulang yang diberikan selama sebagian besar umur hewan sesuai
dosis yang berbeda untuk kelompok hewan yang berbeda sepanjang sebagian
besar hidup hewan sesuai dengan rute pemberian yang diinginkan. Hewan
Tujuan dari tes karsinogenisitas adalah untuk mempelajari lebih lanjut atau
tumor muncul, seberapa sering ganas, dan seberapa cepat mereka muncul;
efek samping yang tidak teramati (NOAEL) atau penentuan dasar dosis
1
2) Metode Penentuan Nilai LD50
LD50 mengacu pada ambang batas keamanan pertama suatu zat untuk manusia
pada dosis yang sama dengan setengah dari dosis tunggal untuk hewan uji.
Prosedur ini perlu untuk memberikan sejumlah dosis atau banyak kelompok
hewan uji yang sama, dan memodifikasi dosis sebaik mungkin untuk
Keterangan :
m = Log LD50
Memanfaatkan nilai kumulatif adalah dengan cara ini. Hewan yang mati
pada dosis tertentu juga akan mati pada dosis yang lebih besar, menurut teori,
dan hewan yang bertahan hidup pada tingkat tertentu juga akan bertahan dalam
kematian hewan uji yang disebabkan oleh dosis terbesar, yang menghasilkan
1
100% kematian hewan uji yang disebabkan oleh dosis terendah. Rumus berikut
Keterangan :
peringkat dosis yang sama; intervalnya harus kelipatan tetap; dan jumlah
Keterangan :
m = Nilai LD50
d. Metode Karber
Ide yang mendasari di balik strategi ini adalah untuk menghitung rata-rata
selama interval waktu untuk jumlah kematian di setiap kelompok hewan serta
varians dalam dosis. Produk dari perbedaan dosis dan kematian rata-rata pada
interval yang sama menghasilkan hasil perkalian. Nilai LD50, yang merupakan
1
dosis terendah di mana 50% hewan dalam satu kelompok mati, dihitung dengan
Keterangan :
b = Jumlah perkalian antara beda dosis dengan rata-rata kematian pada interval
yang sama
1) Klasifikasi
Kingdom : Animalia
Phylum : Chordata
Class : Mamalia
Ordo : Rodentia
Famili : Muridae
Genus : Mus
1
2) Karakteristik
Mencit (Mus musculus) ialah hewan pengerat yang memiliki ciri morfologi dan
fisiologis yang unik, mudah ditempatkan dalam jumlah besar, cepat berkembang
biak, dan memiliki keragaman genetik yang luas. Tikus "inbred" atau "inbred"
putih digunakan untuk membiakkan tikus yang digunakan dalam penelitian ilmiah.
Tikus galur murni akan dihasilkan dengan cara kawin dengan anggota generasi ke-
20 (Soewolo, 2010).
Mencit atau Mus musculus ialah hewan pengerat yang berkembang dengan
cepat, mudah dipelihara dalam jumlah besar, memiliki rentang genetik yang cukup
luas, serta memiliki karakteristik anatomis dan fisiologis yang dapat dipahami
2
3. Ekstraksi
Ekstraksi merupakan proses penarikan senyawa dari matriks atau simplisia dengan
menggunakan pelarut yang sesuai. Peran ekstraksi dalam analisis fitokimia sangat
penting karena sejak tahap awal hingga akhir menggunakan proses ekstraksi, termasuk
fraksinasi dan pemurnian. Ada beberapa istilah yang banyak digunakan dalam
ekstraksi, antara lain ekstraktan (pelarut yang digunakan untuk ekstraksi), rafinat
(larutan senyawa atau bahan yang akan diekstraksi), dan linarut (senyawa atau zat yang
diinginkan terlarut dalam rafinat). Metode ekstraksi yang digunakan tergantung pada
jenis, sifat fisik, dan sifat kimia kandungan senyawa yang akan diekstraksi (Hanani,
2015).
Ekstrak adalah sediaan cair, kental atau kering yang merupakan hasil dari proses
ekstraksi atau penyarian suatu matriks atau simplisia menurut cara yang sesuai. Ekstrak
cair diperoleh dari ekstraksi yang masih mengandung sebagian besar cairan penyari.
Ekstrak kental akan didapat apabila sebagian besar cairan penyari sudah 13 diuapkan,
sedangkan ekstrak kering akan diperoleh jika sudah tidak mengandung cairan penyari
(Hanani, 2015).
Tujuan ekstraksi adalah menarik atau memisahkan senyawa dari campurannya atau
simplisia. Ada berbagai cara ekstraksi yang telah diketahui, masing-masing cara
memerhatikan antara lain sifat senyawa, pelarut yang digunakan, dan alat tersedia.
Beberapa metode ekstraksi yang umum digunakan antara lain maserasi, perkolasi,
2
Jenis-jenis metode ekstraksi yang dapat digunakan dalam penelitian adalah sebagai
berikut :
2
1) Ekstraksi Secara Dingin
Metode ekstraksi ini tidak memerlukan pemanasan dan dapat digunakan untuk
bahan alami dengan tekstur halus dan komposisi kimia yang peka terhadap panas.
a. Metode Maserasi
perendaman bubuk simplisia selama beberapa hari dalam cairan pada suhu
b. Metode Perkolasi
bawah, dan cairan saring dituangkan melalui serbuk dari atas ke bawah. Filter
cair akan melarutkan bahan aktif dalam sel simplisia, melalui mana sampel
Berikut ini adalah beberapa contoh ekstraksi panas yang dapat digunakan
dalam penelitian:
a. Metode Sokhletasi
cair dipanaskan hingga menguap; uap dari filter cair kemudian dikondensasikan
2
menjadi molekul air dengan pendinginan kembali; kemudian turun untuk
mencari simplisia dalam casing; dan akhirnya, setelah melewati pipa siphon,
masuk kembali ke labu alas bulat. Saringan cair yang melalui pipa siphon
jernih, atau jika terdeteksi dengan kromatografi lapis tipis tidak menghasilkan
b. Metode Refluks
yang akan diekstraksi dilarutkan dalam pelarut cair dalam labu dengan dasar
Filter cair akan mengering, uap dalam pendingin akan mengembun dan kembali
ke bahan aktif simplisia, dan seterusnya. Biasanya, ekstraksi ini dilakukan tiga
Tanaman rumput kancing ungu adalah herba, berbentuk tabung, dan polimorfisme
terkait ukuran fitur. Tumbuhan yang termasuk spesies liar ini merupakan tumbuhan
1) Klasifikasi
sebagai berikut:
2
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Superdivisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Subkelas : Asteridae
Ordo : Rubiales
Famili : Rubiaceae
Genus : Borreria
2) Nama Daerah
3) Morfologi
Gambar 2. Tanaman Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.), (Dokumentasi pribadi, 2022).
2
1) Akar
Akar kancing ungu memiliki banyak bulu-bulu halus. Akar kancing ungu
memiliki tudung akar atau kaliptera. Akar kancing ungu berwarna kecoklatan.
2) Batang
Batang kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) tumbuh tegak tingginya 15-
berambut halus, pada buku-bukunya tumbuh dua helai daun yang berhadapan.
3) Daun
Daun kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) berbangun daun bulat panjang
lanset, bagian pangkal melebar dan ujungnya runcing, ukuran panjangnya 2,5-
5,5 cm dan lebarnya 0,75-2 cm, tepi daun terasa kasar bila diraba karena
adanya bulu-bulu halus yang keras, permukaan atas berwarna hijau gelap
4) Bunga
panjangnya 3-3,75 mm, berwarna putih dengan corak ungu dibagian ujung
kepala bunga kecil, terdapat di ketiak daun dan di ujung batang, ukuran
2
5) Buah
buah kancing ungu terbelah membujur atau longitudinal atas dua belahan, buah
kancing ungu berambut di bagian atas, sekat atau septum yang persisten jelas
4) Kandungan Kimia
Tanaman mungil yang satu ini digunakan juga dalam mengobati berbagai
macam penyakit. Bunga kancing ungu kaya akan antioksidan (anti radikal bebas)
saponosides dalam bunga kancing ungu dapat meringankan gejala rematik. Bunga
Kandungan kimia ekstrak herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) adalah
Selain itu herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) juga mengandung minyak
atsiri, flavon atau saponin yang biasa digunakan sebagai peluruh dahak selain itu
efek farmakologis dari tumbuhan ini dinilai mampu mengobati asma, batuk, radang
(Wenny, 2020).
2
5) Manfaat
Manfaat dari tanaman daun kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) secara
sesak napas, mengobati dysuria (kencing tidak lancar), mengobati radang mata,
mengobati insomnia. Bagian tanaman daun kancing ungu (Borreria laevis Lamk.)
yang dimanfaatkan sebagai sumber zat kimia adalah daun, akar, batang, buah, biji
(Hendrawati, 2021).
C. Kajian Empiris
Secara empiris belum banyak penelitian yang menggunakan tanaman ini sebagai
sampel, pada penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Maria (2012) yaitu Borreria
laevis (Lamk.) adalah ramuan yang ditemukan di daerah tropis Asia dan Meksiko, dimana
rebusan daun digunakan untuk mengobati sakit ginjal dan mencegah menstruasi. Studi
ilmiah telah mengkonfirmasi bahwa ekstrak dari spesies Borreria dan Spermacoce juga
Pada peneltian yang di lakukan oleh Sidarima (2020) dari hasil skrining fitokimia
menunjukkan bahwa ekstrak herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk..) mengandung
golongan metabolit Flavanoid, Saponin, Fenolik, Tanin, dan Steroid sementara hasil
penentuan kadar total ekstrak herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) menggunakan
2
etanol 70% di peroleh kadar Fenolik total 898,90 mgGAE/g, Flavanoid total sebesar
28,27 mgQE/g, Saponin total sebesar 6,853%, dan Tanin total 0,194 mgTAE/g.
didapatkan dalam ekstrak daun kancing ungu (Borreria laevis Lamk) senyawa alkaloid,
ekstrak etanol herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) mengandung golongan
2
BAB III
pengetahuan tentang keamanan dan efektivitas jamu sebagian besar hanya berdasarkan
tradisi lisan yang belum melalui pengujian ilmiah yang ketat. Tanaman kancing ungu
merupakan salah satu contoh obat tradisional yang terbuat dari bahan alam yang dapat
memberikan khasiat terapeutik yang lebih tinggi dan diharapkan memiliki efek samping
Pengujian toksisitas akut adalah prosedur pra-klinis yang digunakan untuk menilai
seberapa berbahaya suatu zat dalam jangka waktu yang telah ditentukan setelah pemberian
dosis tunggal. Dalam pengujian toksisitas akut, LD50 adalah standar kuantitatif yang
Jumlah hewan uji yang mati dalam 24 jam pertama setelah menerima dosis tunggal
obat yang sedang diteliti dihitung untuk menentukan LD50 dalam pengujian toksisitas akut
dengan metode yang disarankan oleh para ahli. Namun, karena proses keracunan mungkin
3
B. Bagan Kerangka Konsep Penelitian
Keterangan :
dependen
pada penelitian ini adalah Ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.)
2.
Variabel Terikat (Dependent)
variabel bebas (Christalisana, 2018). Adapun Variabel dependent pada penelitian ini
adalah Efek toksisitas akut yang diukur dari nilai LD50 terhadap mencit (Mus
musculus).
3
D. Definisi Operasional & Kriteria Objektif
Ekstrak Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.) adalah hasil ekstraksi dari
Ekstrak Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.) dengan menggunakan etanol
96%.
Kriteria objektif : Ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.)
Uji toksisitas akut merupakan uji pra klinik yang bertujuan mengukur derajat efek
toksik suatu senyawa dalam waktu tertentu setelah pemberian dosis tunggal atau dosis
berulang yang diberikan dalam waktu 24 jam dan diamati selama 14 hari. Tolak ukur
kuantitatif yang sering digunakan untuk menyatakan kisaran dosis letal pada uji
Kriteria objektif :
1) Gejala Toksisitas
2) LD50
b. Tidak memiliki efek toksisitas jika tidak menyebabkan kematian pada mencit.
3
E. Hipotesis Penelitian
1. Ha = Ada efek toksisitas ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.)
terhadap mencit.
H0 = Tidak ada efek toksisitas ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis
3
BAB IV
METODE PENELITIAN
Jenis penelitian ini adalah penelitian analitik eksperimental yang bertujuan untuk
mengetahui efek toksisitas akut dari ekstrak etanol Herba Kancing Ungu (Borreria laevis
Lamk.) yang diukur dari nilai LD50 terhadap mencit (Mus musculus).
Keterangan :
HKU = Herba Kancing Ungu
EEHKU = Ekstrak Etanol Herba Kancing Ungu
UTA = Uji Toksisitas Akut
K1 = Kelompok kontrol negatif Na-CMC 1%
K2 = Kelompok ekstrak dosis (5mg/kgBB)
K3 = Kelompok ekstrak dosis (50mg/kgBB)
K4 = Kelompok ekstrak dosis (300mg/kgBB)
K5 = Kelompok ekstrak dosis (2000mg/kgBB)
K6 = Kelompok ekstrak dosis (5000mg/kgBB)
KP1 = Kelompok kontrol negatif Na-CMC 1%
KP2 = Kelompok Perlakuan ekstrak dosis (5mg/kgBB)
3
KP3 = Kelompok Perlakuan ekstrak dosis (50mg/kgBB)
KP4 = Kelompok Perlakuan ekstrak dosis (300mg/kgBB)
KP5 = Kelompok Perlakuan ekstrak dosis (2000mg/kgBB)
KP6 = Kelompok Perlakuan ekstrak dosis (5000mg/kgBB)
ETA1 = Efek Toksisitas Akut Na-CMC 1%
ETA2 = Efek Toksisitas Akut ekstrak dosis (5mg/kgBB)
ETA3 = Efek Toksisitas Akut ekstrak dosis (50mg/kgBB)
ETA4 = Efek Toksisitas Akut ekstrak dosis (300mg/kgBB)
ETA5 = Efek Toksisitas Akut ekstrak dosis (2000mg/kgBB)
ETA6 = Efek Toksisitas Akut ekstrak dosis (5000mg/kgBB)
AD = Analisis Data
B. Lokasi dan Waktu Penelitian
Prodi Farmasi Universitas Mandala Waluya Kendari. Penelitian ini dimulai pada bulan
Populasi pada penelitian ini adalah Tumbuhan Kancing Ungu (Borreria laevis
Lamk.) yang diperoleh dari Daerah Unaaha, Kabupaten Konawe, Sulawesi Tenggara.
Sampel pada penelitian ini adalah Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.)
Alat – alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah blender, rotary evaporator,
mortir dan stamfer, kandang mencit, timbangan analitik, jarum oral, pipet tetes, kapas,
gelas kimia, gelas ukur, spoit injeksi, cawan porselen, penangas air, pinset, batang
pengaduk, gunting, toples, sendok tanduk, kertas saring, aluminium foil, stopwatch.
3
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak Herba Kancing
Ungu (Borreria laevis Lamk.), hewan coba mencit (Mus musculus), aquadest, Na. CMC
E. Prosedur Penelitian
1. Determinasi
sehingga dapat menghindari kesalahan dalam pengumpulan bahan yang akan diteliti.
Waluya Kendari.
1) Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel pada penelitian ini adalah sampel herba kancing ungu
2) Pengolahan Sampel
Sampel Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.) diambil dan dicuci
cara diangin-anginkan tanpa sinar matahari langsung. Sampel yang telah kering
3) Ekstraksi Sampel
Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini yaitu maserasi. Herba
3
96%
3
sebanyak 500 gram selama 3 x 24 jam. Sampel dimasukkan ke dalam bejana
Sebanyak 200 ml aquadest dipanaskan pada suhu 70 oC. Dimasukkan Na. CMC
sebanyak 2 gram sedikit demi sedikit sambil diaduk hingga terbentuk larutan
koloid yang homogen, kemudian volumenya dicukupkan dengan air panas hingga
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit putih jantan
(Mus musculus). Berbadan sehat sebanyak 30 ekor mencit dengan berat badan tidak
kurang 20 gram dan umur 35-60 hari. Mencit dibagi dalam 6 kelompok, tiap
kelompok terdiri dari 5 ekor mencit jantan. Kelompok I (Na. CMC) sebagai
kelompok kontrol, sedangkan kelompok II-VI (dosis 5, 50, 300, 2000 dan 5000
Perlakuan uji toksisitas dilakukan berdasarkan metode OECD 420 fixed dose
procedure (BPOM, 2014) yang dimulai dari uji pendahuluan dan dilanjutkan maint
test (uji utama). Sebelum perlakuan, hewan uji mencit betina diadaptasi pada
kandang uji selama 7 hari, kemudian ditimbang berat badannya dan dipuasakan
3
tapi
3
tetap diberi minum. Tujuan dilakukan uji pendahuluan adalah untuk mencari dosis
awal yang sesuai untuk uji utama dengan 5 ekor mencit. Berdasarkan metode
OECD 420 fixed dose procedure (BPOM, 2014), dosis pendahuluan dapat dipilih
dari tingkatan fixed dose 5, 50, 300, 2000 dan 5000 mg/kgBB. Sampai saat ini
belum ada penelitian yang menunjukkan LD50 dari ekstrak herba kancing ungu,
dilakukan tahap pertama dalam rangka mencari kisaran LD50 maka dimulai pada
Uji utama bertujuan untuk mengetahui kisaran nilai LD 50 suatu senyawa dengan
5 ekor mencit pada setiap tingkatan dosis yaitu 5, 50, 300, 2000 dan 5000
mg/kgBB. Dosis awal yang telah ditentukan dari uji pendahuluan adalah 5
setiap 4 jam selama 24 jam sehari sekali dan untuk peralihan pemberian dosis
berikutnya 3-4 hari selama 14 hari. Dosis tersebut dapat dinaikkan menjadi 50
mg/kgBB apabila tidak terdapat kematian, tetapi jika dosis awal diberikan 5
mg/kgBB lalu hewan uji mati, sehingga nilai cutt-off LD50 adalah 5 mg/kgBB
(masuk kategori 1 GHS) maka penelitian harus dihentikan, atau jika tidak terdapat
bukti toksisitas maka dosis dinaikkan menjadi 300 mg/kgBB, jika tidak terjadi
toksisitas maka dosis dinaikkan menjadi 2000 mg/kgBB dan jika tidak terjadi
toksisitas maka dosis dinaikkan lagi menjadi dosis tertinggi yaitu 5000 mg/kgBB.
Pemberian ekstrak etanol herba kancing ungu pada uji utama dilakukan bersama
dengan kelompok kontrol (Na CMC 1%) yang terdiri dari 5 ekor mencit.
4
4) Pengamatan Gejala Toksik
Hewan uji diamati terlebih dahulu sebelum diberi perlakuan. Hal ini bertujuan
untuk mengetahui perubahan gejala yang terjadi setelah hewan uji diberi perlakuan,
dengan cara membandingkan gejala atau perilaku hewan uji sebelum dan sesudah
perlakuan. Pengamatan gejala klinis yang terjadi dilakukan pada 24 jam pertama
seperti; gromming, diare, salivasi, jalan dengan perut, lemas, tremor, urinasi dan
5) Penentuan Dosis
Volume maksimal larutan uji yang dapat diberikan pada mencit dengan berat
kelompok dosis kontrol. Dosis sediaan uji yang digunakan pada penelitian ini
menggunakan metode fixed dose yaitu 5, 50, 300, 2000, dan 5000 mg/kgBB
mencit.
1. Pengolahan Data
Data yang dikumpulkan dalam penelitian ini adalah hasil pengamatan hewan
coba, baik kelompok kontrol maupun kelompok perlakuan. Data yang diperoleh berupa
data kuantitatif dan kualitatif. Data kuantitatif yang akan diperoleh yaitu jumlah hewan
coba yang mati dan data kualitatif yang akan diperoleh yaitu gejala-gejala toksik
yang menyertai pada hewan coba. Adapun langkah-langkah dalam pengolahan data
4
pengisian, kejelasan pengisian, dan konsistensi dalam penelitian ini.
4
2) Entri data, yaitu memasukkan data kuantitatif dalam peneltian ini ke komputer.
3) Cleaning data, yaitu mengecek data yang sudah di entri untuk pengolahan data ini
2. Analisis Data
1) Analisis Deskriptif
dan proporsi variabel bebas. Analisis dilakukan secara deskriptif dengan penentuan
nilai LD50 dalam uji toksisitas akut menggunakan metode Thompson dan Weil
Log m = log D + d (f + 1)
Keterangan:
m = Nilai LD50
2) Analisis Inferensial
Analisis data didasarkan pada normalitas dan distribusi data. Jika data
terdistribusi normal maka analisis data bisa dilanjutkan (program SPSS 23),
b. Uji Hipotesis
4
G. Etika Penelitian
Etika dalam melakukan suatu penelitian dengan hewan coba harus memperhatikan
aspek perlakuan yang manusiawi terhadap hewan-hewan tersebut, sesuai dengan prinsip
5F (Freedom) yaitu bebas dari rasa lapar dan haus, bebas dari rasa tidak nyaman, bebas
dari rasa lapar, bebas dari rasa nyeri, trauma dan penyakit, bebas dari ketakutan dan stress
jangka panjang, bebas mengekspresikan tingkah laku alami, diberikan ruang dan fasilitas
yang sesuai (pengayaan lingkungan yang sesuai). Seluruh perlakuan terhadap hewan
percobaan dituangkan secara rinci didalam protokol penelitian yang dianalogikan sebagai
informed consent pada penelitian yang menggunakan relawan manusia (Ridwan, 2013).
4
BAB V
pertama dilakukan proses ekstraksi pada Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.) di
Laboratorium Farmasi Haluoleo Kendari dan yang kedua dilakukan Uji Toksisitas Akut di
Mandala Waluya merupakan salah satu kampus yang berada dikota Kendari Provinsi
Sulawesi Tenggara yang terletak di Jl. Nasution No. G-37 Kambu Kecamatan Poasia yang
telah terakreditasi B.
B. Analisis Data
1. Analisis Deskriptif
a) Hasil Determinasi
Hasil determinasi ini gunakan untuk menunjukkan dan menjamin keberadaan jenis
atau spesies tumbuhan. Hasil determinasi ini menunjukkan bahwa tumbuhan yang
digunakan pada penelitian ini merupakan herba kancing ungu (Borreria laevis
Lamk.)
Adapun hasil dari ekstraksi herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.)
sebanyak 500 g menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 96% dapat
4
Tabel 5. Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak Herba Kancing Ungu (Borreria
laevis Lamk.)
toksik sebagai berikut ; Gromming, salivasi, jalan dengan perut, lemas, dan tremor.
Hasil pengamatan yang telah dilakukan secara kuantitatif selama 24 jam dan 14
hari terhadap jumlah kematian hewan coba mencit setelah pemberian ekstrak herba
kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) dapat dilihat pada tabel berikut:
4
Tabel 7. Hasil Pengamatan Jumlah Kematian Hewan Coba Dalam 24 Jam Dan
Jumlah Kematian Dalam 14 Hari
Kelompok Dosis Mencit Jumlah Kematian Jumlah Kematian
(n) Dalam 24 Jamm (n) Dalam 14 Hari (n)
Na. CMC 1% 5 - -
EEHKU 5 1 -
5 mg/kgBB
EEHKU 5 - 1
50 mg/kgBB
EEHKU 5 - 1
300 mg/kgBB
EEHKU 5 - -
2000 mg/kgBB
Keterangan :
(n) = Jumlah mencit
(-) = Tidak ada kematian
EEHKU = Ekstrak Etanol Herba Kancing Ungu
2. Analisis Inferensial
Test, dan menunjukkan hasil nilai P signifikasi (0,425 > 0,05) sehingga data
terdistribusi normal.
4
b) Uji Hipotesis
1) Uji T Parsial
gromming, salivasi, jalan dengan perut, lemas, dan tremor), adapun susunan
dalam pengujian ini melibatkan uji t, dan uji f yang dapat dilihat pada tabel
berikut:
Keterangan:
Terdapat pengaruh : Jika nilai sig < 0,05, atau t hitung > t tabel maka terdapat
pengaruh variabel
Tidak terdapat pengaruh : Jika nilai sig > 0,05, atau t hitung < t tabel maka tidak terdapat
pengaruh variabel
4
Berdasarkan dari distribusi tetap untuk nilai t tabel dalam SPSS, angka
dengan t (0,025 : 23) memiliki nilai sebesar 2,069, sehingga nilai t tabel dalam
Jadi berdasarkan hasil uji t, didapatkan hasil bahwa nilai P signifikasi (0,586
> 0,05) dan nilai t hitung (0,552 < 2,069), yang berati hasil data kelompok uji
Penyelesaian:
f tabel = f (k : n x k)
= f (1 : 25 x 1)
= f (1 : 25)
4
Berdasarkan dari distribusi tetap untuk nilai f tabel dalam SPSS, angka
dengan f (1 : 25) memiliki nilai sebesar 3,39, sehingga nilai f tabel dalam uji f
Jadi berdasarkan hasil uji f, didapatkan hasil bahwa nilai P signifikasi (0,586
> 0,05) dan nilai f hitung (0,305 < 3,39), yang berarti hasil data kelompok uji
2) Uji T Independent
untuk melihat apakah data yang berbeda signifikan atau tidak signifikan.
Dimana bila nilai p > 0,05 maka tidak terdapat perbedaan atau hampir sama,
konsentrasi.
5
3) Uji ANOVA
didapatkan nilai signifikansi p>0,05 yaitu 0,067 yang menandakan data hasil
Untuk mengetahui gejala toksisitas apa saja yang tidak berbeda signifikan
dilakukan dengan uji lanjutan yaitu uji LSD. Dimana bila nilai p > 0,05 maka
tidak terdapat perbedaan atau hampir sama. Sedangkan bila p < 0,05 maka
Nilai P
Kelompok Kelompok Pembanding Keterangan
Signifikansi
Gromming Salivasi 0,071 Tidak Signifikan
Jalan Dengan Perut 0,071 Tidak Signifikan
Lemas 0,639 Tidak Signifikan
Tremor 0,071 Tidak Signifikan
Salivasi Gromming 0,071 Tidak Signifikan
Jalan Dengan Perut 1,000 Tidak Signifikan
Lemas 0,067 Tidak Signifikan
Tremor 1,000 Tidak Signifikan
Jalan Dengan Gromming 0,071 Tidak Signifikan
Perut Salivasi 1,000 Tidak Signifikan
Lemas 0,067 Tidak Signifikan
Tremor 1,000 Tidak Signifikan
Lemas Gromming 0,639 Tidak Signifikan
Salivasi 0,067 Tidak Signifikan
Jalan Dengan Perut 0,067 Tidak Signifikan
Tremor 0,067 Tidak Signifikan
Tremor Gromming 0,071 Tidak Signifikan
Salivasi 1,000 Tidak Signifikan
Jalan Dengan Perut 1,000 Tidak Signifikan
Lemas 0,067 Tidak Signifikan
Keterangan:
Tidak Signifikan : Nilai p>0,05, maka tidak terdapat perbedaan atau hampir sama.
Signifikan : Nila p<0,05 maka terdapat perbedaan dari masing-masing perlakuan
5
C. Pembahasan
Telah dilakukan penelitian uji toksisitas akut dengan parameter pengujian yaitu
melihat gejala-gejala toksisitas yang terjadi dan jumlah kematian pada mencit. Sampel
yang digunakan pada penelitian ini adalah Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.).
Sampel herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) yang digunakan yaitu dari seluruh
bagian tumbuhan, hal ini dilakukan berdasarkan penggunaannya secara tradisional yang
memanfaatkan seluruh bagian tumbuhan kancing ungu (Borreria laevis Lamk.). Untuk
memastikan kebenaran spesies dari herba kancing ungu maka dilakukan determinasi
tumbuhan herba kancing ungu yang akan digunakan dalam penelitian ini yang diambil
dari Daerah Unaaha, Kabupaten Konawe, Sulawesi Tenggara. Hasil determinasi ini
mengkonfirmasi bahwa tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini adalah benar herba
Pengambilan sampel pada penelitian ini yaitu sampel herba kancing ungu (Borreria
laevis Lamk.) diambil dari seluruh bagian tumbuhan kemudian dicuci hingga bersih
menggunakan air mengalir, lalu dipotong-potong kecil dan simplisia dikeringkan dengan
cara diangin-anginkan tanpa terkena sinar matahari langsung. Pengeringan ini bertujuan
untuk menurunkan kadar air pada bahan agar tidak mudah ditumbuhi mikroba selama
penyimpanan (Pratiwi et al., 2019). Selanjutnya simplisia yang telah kering diserbukkan
maserasi. Keuntungan metode maserasi yaitu prosedur dan peralatan yang akan
digunakan relatif sederhana, metode ekstraksi tidak dipanaskan sehingga bahan alam
tidak menjadi terurai, ekstraksi cara dingin memungkinkan banyak senyawa terekstraksi
5
meskipun
5
beberapa senyawa memiliki kelarutan terbatas dalam pelarut ekstraksi pada suhu kamar
Proses maserasi pada penelitian ini dilakukan dengan cara merendam serbuk
simplisia Herba Kancing Ungu (Borreria laevis Lamk.) dalam bejana maserasi dengan
menggunakan pelarut etanol 96% yang dilakukan selama 3 x 24 jam dan tiap 1 x 24 jam
maserasi memiliki kelebihan yaitu terjaminnya zat aktif yang diekstrak tidak akan rusak
(Pratiwi, 2010). Pelarut yang digunakan pada proses ekstraksi dalam penelitian ini adalah
pelarut etanol 96%. Alasan penggunaan pelarut etanol 96% adalah bersifat lebih selektif
yaitu hanya menarik zat berkhasiat yang dikehendaki, absorbsinya baik, kapang dan
khamir sulit tumbuh, mudah menguap, dan mendapatkan ekstrak kental lebih cepat
Hasil maserasi dari sampel herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) berupa
ekstrak cair yang kemudian diuapkan menggunakan rotary evaporator, setelah itu ekstrak
cair diangin-anginkan menggunakan hair dryer untuk memisahkan ekstrak dari sisa
pelarut sehingga menghasilkan ekstrak kental yang akan ditimbang dan dihitung
rendemennya. Hasil nilai rendemen dari herba kancing ungu yaitu 7,72% dan hasil
tersebut memenuhi syarat karena nilai persen rendemen dengan berat simplisia awal 500
gram tidak kurang dari 3,6% kemudian jika berat simplisia awal 1000 gram maka nilai
persen rendemen tidak kurang dari 7,2% (Depkes, 2000). Menurut Ukieyanna (2012)
yang tertarik oleh pelarut tersebut namun tidak dapat menentukan jenis senyawa yang
terbawa.
5
Selanjutnya dilakukan uji toksisitas akut ekstrak etanol herba kancing ungu
(Borreria laevis Lamk.) terhadap mencit. Prinsip uji toksisitas akut oral yaitu sediaan uji
dalam beberapa tingkat dosis diberikan pada beberapa kelompok hewan uji dengan satu
dosis per kelompok, kemudian dilakukan pengamatan terhadap adanya efek toksik dan
Metode yang dilakukan pada uji toksisitas akut adalah metode fixed dose. Metode
ini merupakan metode untuk menentukan toksisitas dari suatu senyawa, prinsip dari
metode ini adalah sekelompok hewan uji yang digunakan berjenis kelamin yang sama dan
diberikan dosis bertingkat antara lain; 5, 50, 300, dan 2000 mg/kgBB (dosis dapat
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan hewan uji mencit berjenis kelamin
jantan sebanyak 30 ekor. Alasan menggunakan mencit berjenis kelamin jantan adalah
karena kondisi biologisnya stabil bila dibandingkan dengan mencit betina yang kondisi
biologisnya dipengaruhi dengan masa siklus estrus. Hal ini bertujuan untuk memperkecil
variabilitas biologis antar hewan uji yang digunakan, sehingga dapat memberikan respon
yang relatif lebih seragam terhadap rangsang kimia yang digunakan dalam penelitian
(Tuhu, 2007).
dahulu selama 7 hari yang bertujuan untuk mengkondisikan hewan uji dalam suasana di
laboratorium dan juga untuk menghilangkan stres pada hewan uji akibat transportasi.
Kemudian hewan uji mencit dibagi menjadi 6 kelompok yang terdiri dari kelompok
kontrol dan kelompok dosis yaitu 5 mg/kgBB, 50 mg/kgBB, 300 mg/kgBB, 2000
mg/kgBB dan 5000 mg/kgBB yang masing-masing terdapat 5 mencit disetiap kelompok
5
uji. Kemudian
5
mencit dipuasakan terlebih dahulu sebelum perlakuan selama 3-4 jam tetapi air minum
boleh diberikan. Tujuan mencit dipuasakan yaitu agar tidak ada asupan makanan yang
dapat mempengaruhi proses pengujian. Setelah hewan uji dipuasakan, hewan ditimbang
dan diberikan sediaan uji melalui oral. Pemberian sediaan uji pada hari pertama dilakukan
pada kelompok kontrol Na.CMC 1% dan kelompok perlakuan dosis yang dimulai dari
dosis terendah yaitu 5 mg/kgBB dan dosis selanjutnya diberikan setalah 3 hari.
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dalam uji toksisitas akut
terhadap gejala-gejala toksisitas dengan parameter berdasarkan (BPOM RI, 2014) seperti
gromming, salivasi, jalan dengan perut, lemas, dan tremor yang diamati selama 24 jam
setelah pemberian uji. Hasil pengamatan dapat dilihat pada Tabel 6 dimana pada
kelompok kontrol tidak terjadi gejala-gejala toksisitas seperti gromming, salivasi, jalan
dengan perut, lemas, dan tremor. Sedangkan pada kelompok dosis, dimana dosis 5
mg/kgBB pada mencit 1 terjadi gejala toksisitas yaitu lemas (diam), pada mencit 2 dan 3
terjadi gejala toksisitas yaitu gromming sedangkan pada mencit 4 dan 5 tidak terjadi
gejala toksisitas. Kelompok dosis 50 mg/kgBB pada mencit 1 dan 4 terjadi gejala
toksisitas yaitu gromming dan pada mencit 2, 3 dan 5 tidak terjadi gejala toksisitas.
Kelompok dosis 300 mg/kgBB pada mencit 1 dan 3 terjadi gejala toksisitas yaitu lemas
(diam) dan pada mencit 2, 4 dan 5 tidak terjadi gejala toksisitas. Kelompok dosis 2000
mg/kgBB pada mencit 2 dan 3 terjadi gejala toksisitas yaitu lemas (diam) dan pada
SPSS (Statistical Package For the Social Sciences). Untuk melihat apakah data yang
diperoleh dalam penelitian terdistribusi normal atau tidak dilakukan uji normalitas
5
menggunakan metode One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test yang menunjukkan hasil
5
nilai P signifikasi (0,425 > 0,05) sehingga data terdistribusi normal, kemudian data akan
dilanjutkan dengan pengujian T Parsial dan T Independent untuk mengetahui lebih lanjut
apakah data kelompok uji (kelompok dosis yaitu 5 mg/kgBB, 50 mg/kgBB, 300
mg/kgBB, 2000 mg/kgBB) dan hasil pengamatan (gejala toksisitas seperti gromming,
salivasi, jalan dengan perut, lemas, dan tremor) memiliki pengaruh atau tidak. Dari hasil
uji parsial melalui uji t dan f didapatkan bahwa hasil data kelompok uji tidak terdapat
pengaruh terhadap hasil pengamatan, hal ini menunjukan bahwa ekstrak etanol herba
kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) tidak mempunyai efek toksik terhadap
perbandingan hasil pengamatan gejala toksisitas seperti gromming, salivasi, jalan dengan
perut, lemas, dan tremor, selanjutnya dilakukan uji t independent untuk melihat kelompok
hasil pengamatan memiliki data yang berbeda signifikan atau tidak signifikan.
Pada hasil uji T Independent kelompok data salivasi, lemas, dan tremor hanya bisa
dibandingkan dengan kelompok data gromming dan lemas, dikarenakan kelompok data
salivasi, lemas, dan tremor tidak bisa dibandingkan karena memiliki data yang sama
semua, berbeda dengan angka data gromming dan lemas bisa dibandingkan dengan
kelompok data salivasi, jalan dengan perut, lemas, dan tremor. Berdasarkan hasil pada
Tabel 11, didapatkan hasil bahwa keseluruhan pengujian mendapatakan hasil nilai p
signifikasi > 0,05, sehingga dapat diambil kesimpulan bahwa tidak ada perbedaan
signifikan pada hasil pengamatan gejala toksisitas pada mencit antara kelompok kontrol
dengan kelompok yang diberi perlakuan. Hasil ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol
herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) tidak mempunyai efek toksik terhadap hasil
5
Pada uji ANOVA digunakan variabel kelompok hasil pengamatan untuk melihat
apakah datanya berbeda signifikan atau tidak signifikan, dimana didapatkan nilai
signifikansi p>0,05 yaitu 0,067 yang menandakan data hasil pengamatan tidak berbeda
signifikan dari masing-masing gejala toksisitas. Untuk mengetahui gejala toksisitas apa
saja yang tidak berbeda signifikan dilakukan dengan uji lanjutan yaitu uji LSD.
Berdasarkan hasil pada Tabel 12, didapatkan hasil bahwa keseluruhan pengujian untuk
variabel hasil pengamatan didapatakan hasil dengan nilai p signifikasi > 0,05, sehingga
dapat diambil kesimpulan bahwa tidak ada perbedaan signifikan pada hasil pengamatan
gejala toksisitas pada mencit antara kelompok kontrol dengan kelompok yang diberi
perlakuan. Hasil ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol herba kancing ungu (Borreria
laevis Lamk.) tidak mempunyai efek toksik terhadap hasil pengamatan gejala toksisitas
pada mencit.
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dalam uji toksisitas akut herba
kancing ungu (Borreria laevis Lamk.) terhadap kematian pada mencit, dimana hasil
pengamatan menunjukkan tidak ada kematian pada kelompok kontrol (Na. CMC 1%) dan
kelompok dosis 2000 mg/kgBB sedangkan pada kelompok dosis 5 mg/kgBB terdapat
kematian 1 ekor mencit dalam waktu pengamatan 24 jam, pada dosis 50 mg/kgBB
terdapat kematian 1 ekor mencit dan 3000 mg/kgBB juga terdapat kematian 1 ekor mencit
dalam waktu pengamatan 14 hari. Penentuan nilai LD50 diperoleh menggunakan rumus
Thompson dan Weil. Metode ini dipilih karena mempunyai tingkat kepercayaan yang
cukup tinggi dan merupakan metode yang paling sering digunakan, metode ini juga
menggunakan daftar perhitungan LD50 sehingga hasil yang diperoleh lebih akurat (Nonci
et al., 2014). Perhitungan LD50 memperlihatkan tidak adanya nilai R pada tabel Weil
6
karena hanya 1 ekor mencit ditiap kelompok dosis 5, 50, 300 mg/kgBB yang mati
6
didapat 1,1,1,0. Hasil tersebut dapat diabaikan karena hanya terjadi pada 1 ekor mencit
tiap kelompok dosis 5, 50, 300 mg/kgBB (tidak mencapai 50%) yang mungkin
disebabkan oleh faktor lain diluar efek yang disebabkan oleh sediaan uji herba kancing
ungu. Kematian tersebut dapat disebabkan adanya kesalahan pada saat pemberian sediaan
(Armansyah et al., 2016). Hal ini sesuai dengan kriteria uji toksisitas akut yang dilakukan
untuk menilai LD50 bahwa berdasarkan kesepakatan yang diambil para ahli, jika dosis
maksimal yang diberikan tidak menimbulkan kematian hewan uji, maka LD 50 dinyatakan
dengan LD50 semu atau bukan LD50 yang sesungguhnya (Loomis, 1978). Bila pada dosis
maksimal tidak ada kematian pada hewan uji, maka jelas senyawa tersebut masuk dalam
Penelitian uji toksisitas akut pada dosis 5000 mg/kgBB tidak lanjutkan atau tidak
dilakukan perlakuan terhadap hewan uji karena berdasarkan (BPOM RI, 2014) mengenai
uji batas dalam metode fixed dose bahwa jika pada uji utama (5 mg/kgBB) hanya 1 ekor
hewan uji yang mengalami kematian atau tidak ada hewan yang mati pada tingkat dosis
2000 mg/kgBB, maka tidak perlu diberikan dosis melampaui 2000 mg/kgBB.
6
BAB VI
A. Kesimpulan
1. Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol herba kancing ungu (Borreria laevis Lamk.)
tidak mempunyai efek toksik terhadap hasil pengamatan gejala toksisitas pada mencit
2. Hasil pada pemberian dosis 5, 50, dan 300 mg/kgBB menyebabkan kematian hanya 1
ekor tiap kelompok dosis sedangkan pada dosis 2000 mg/kgBB tidak menyebabkan
kematian mencit tetapi hasil tersebut dapat diabaikan karena hanya terjadi pada 1 ekor
mencit tiap kelompok dosis 5, 50, 300 mg/kgBB (tidak mencapai 50%).
B. Saran
Sebaiknya dilakukan penelitian lebih lanjut dengan pemeriksaan berat relatif organ
6
DAFTAR PUSTAKA
Akbar, B. 2010. Tumbuhan dengan Kandungan Senyawa Aktif yang Berpotensi sebagai Bahan
Antifertilitas. Jakarta: Adabia Press.
Ari, S, A., and Nuryanti, S., 2012. Skrining fitokimia ekstrak herba kancing ungu (Borreria
laevis Lamk). Jurnal Fitofarmaka Indonesia.
Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia. 2014. Pedoman Uji Toksisitas
Nonklinik Secara In Vivo. Jakarta: BPOM RI.
Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia. 2014. Peraturan Kepala Badan
Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor 12 Tahun 2014 tentang
Persyaratan mutu obat tradisional. Jakarta : Badan Pengawas Obat dan Makanan.
Departemen Kesehatan RI, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat,
Cetakan Pertama, 3-11, 17-19, Dikjen POM, Direktorat Pengawasan Obat Tradisional.
Depkes RI., 1979. Farmakope Indonesia, Edisi III, Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, Jakarta.
Eka Juniarsyih Inawade S, 2020. Skrining Fitokimia Dan Penenetuan Kadar Polifenol Total,
Flavonoid Total, Saponin Total Dan Tanin Total Herba Kancing Ungu (Borreria
Laevis Lamk). Program Studi Si Farmasi Fakultas Sains Dan Teknologi Universitas
Mandala Waluya Kendari.
Aried Eriadi, Helmi Arifin, and Nirwanto., 2016. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Daun
Kirinyuh (Chromolaenodorata (L) R.M.King & H. Rob) Pada Mencit Putih Jantan.
Jurnal Farmasi Higea, Vol. 8, No. 2. Fakultas Farmasi Universitas Andalas Padang.
Fadli, Muhammad Yogie., 2015. Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Daun Sambang Nyawa
(Gynura procumbens (lour) merr) Terhadap Gambaran Hispatologi Lambung Pada
Tikus Galur Sprague Dawley. Fakultas Kedokteran Universitas Lampung.
Hanani E. Analisis Fitokimia. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran ECG; 2014.
Hendrawati, 2021. Uji Aktivitas Antidiare Ekstrak Etanol Daun Kancing Ungu (Borreria
Laevis) Pada Mencit (Mus-muscullus). Program Studi Si Farmasi Fakultas Sains Dan
Teknologi Universitas Mandala Waluya Kendari.
Henny Nurhasnawati, Sukarmi, and Fitri Handayani., 2017. Perbandingan Metode Ekstraksi
Maserasi dan Sokletasi Terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Jambu
Bol (Syzygium malaccense L.). Jurnal Ilmiah Manuntung. 3(1), 91-95.
Iwuanyanwu, U. M., 2012. Potensi penghambatan senyawa bioaktif allium sativum, nigella
sativa, dan zingiber officinale terhadap SARS-CoV-2 melalui in silico, Universitas
Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim
6
Jumain, Syahruni, and Farid F.T., 2018. Uji Toksisitas Akut Dan LD50 Ekstrak Etanol Daun
Kirinyuh (Euphatorium odoratum Linn) Pada Mencit (Mus musculus). Jurnal Media
Farmasi, Vol. XIV, NO.1. Jurusan Farmasi Universitas Pancasakti Makassar.
Kasih AL, Astrawan M. Khasiat WarnaWarni Makanan. Indonesia: Gramedia Pustaka Utama;
2008.
Loomis, T.A. 1978. Toksikologi Dasar, diterjemahkan oleh Imono Argo Donatus, Edisi III,
IKIP Semarang Press, Semarang
Maghfirah, 2020. Skrining Dan Uji Aktivitas Ektrak Etanol Herba Kancing Ungu (Borreria
Laevis Lamk) Terhadap Escherichia Coli, Pseudomonas Aeruginosa Dan
Staphylococcus Aureus. Program Studi Si Farmasi Fakultas Sains Dan Teknologi
Universitas Mandala Waluya Kendari.
Misna, M., and Diana, K., 2016, Aktivitas antibakteri ekstrak kulit bawang merah (Allium
cepa l.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Jurnal Farmasi Galenika (Galenika
Journal of Pharmacy)(e-Journal), 2(2), 138-144.
Nonci, F. Y., and Rusdi, M., 2014, Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Klika Jambu Mede
(Anacardium occidentale l.) Pada Mencit Jantan (Mus musculus). Jurnal farmasi UIN
Alauddin Makassar, 2(2), 62-68.
Nurhasnawati, Henny., Sukarmi, S., and Handayani, F., 2017, Perbandingan metode ekstraksi
maserasi dan sokletasi terhadap aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun jambu bol
(Syzygium malaccense L.). Jurnal Ilmiah Manuntung, 3(1), 91-95.
OECD. 1998. Organization for Economic Cooperation and Development Guidelines for The
Testing of Chemicals TG 408 Repeated Dose 90-dayOral Toxicity Study in Rodents.
Paris: Environment Directorate. Hal 2-4
OECD. (2008). Organization for Economic Cooperation and Development Guidelines for the
Testing of Chemicals.TG 407. Hal. 1-13.
Plasta, F. M., 2007. Tanaman Obat Keluarga (Revisi): Niaga Swadaya.
Pratiwi Amaliah, A., Sobari, E., and Mukminah, N. 2019. Rendemen Dan Karakteristik Fisik
Ekstrak Oleoresin Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) Dengan Pelarut Heksan."
Presented at Prosiding Industrial Research Workshop and National Seminar
Ridwan, E., 2013. Etika pemanfaatan hewan percobaan dalam penelitian kesehatan. J Indon
Med Assoc, 63(3), 112-116.
Soewolo, J., Syahruni, S., and Farid, F., 2010, Uji toksisitas akut dan ld50 ekstrak etanol daun
kirinyuh (Euphatorium odoratum Linn) pada mencit (Mus musculus). Media Farmasi,
14(1), 28-34.
Supriyono. 2007. Pengujian Lethal Dosis (LD50) Ekstrak Etanol Biji Buah Duku (Lansium
domesticum Corr) Pada Mencit (Mus musculus).
6
Syamsul, E.S., Dkk., 2015. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Daun Kerehau (Callicarpa
longifolia Lam.) Terhadap Mencit Putih. Jurnal Imiah Manuntung. Akademi Farmasi
Samarinda.
Tobo, F,.Mufidah, Taebe, B., Mahmud, A.I. 2011. Buku Pegangan Laboratorium Fitokimia 1.
Makassar: Universitas Hasanuddin.
Tuhu, P. F. S., Purwantiningsih, Wahyuni, A. S. 2007, Efek Analgetika Ekstrak Etanol Daun
Kayu Putih (Melaleuca leucadendron L.) Pada Mencit Jantan. Jurnal Pharmacon,
Volume 8, No. 2, 40-43.
Ukieyanna, E., 2012. Aktivitas Antioksidan, Kadar Fenolik Dan Flavonoid Total Tumbuhan
Suruhan (Peperomia Pellucida L. Kunth), Skripsi, Fakultas Matematika Dan Ilmu
Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor, Jawa Barat.
Weka Sidha Bhagawan, 2011. Penelitian Etnofarmasi Suku Tengger Kecamatan Senduro
Kabupaten Lumajang. Fakultas Farmasi Universitas Jember.
Zufami, Z., Dewi, E., and Maulinda, M., 2013, Keanekaragaman Jenis Tumbuhan Pekarangan.
Jurnal Agroristek, 3(2), 44-50.
6
LAMPIRAN
6
Lampiran 1. Surat Determinasi
6
6
7
Lampiran 2. Skema Kerja Pembuatan Ekstrak
Ekstrak kental
7
Lampiran 3. Skema Kerja Uji Toksisitas Akut
Perhitungan LD50
7
Lampiran 4. Perhitungan
= 7,72 %
b. Perhitungan Na. CMC 1% (Kontrol negatif)
1
Na. CMC 1% =
100 X 200 ml = 2 gram
c. Perhitungan Dosis Ekstrak
Dosis konversi mencit : 5 mg/kgBB
- Konversi = 5 mg x 0,0026 = 0,013 mg/20g
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 20g
0,5 ml = X
0,013 mg
X = 0,5 ml
= 0,026 mg/ml
- Larutan stok = 0,026 mg/ml x 20 ml
= 0,52 mg/20ml = 0,00052 g/20ml
1. Dosis untuk mencit 36 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 36g
= 0,026 mg/ml
= 0,9 ml
2. Dosis untuk mencit 29 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 29g
= 0,026 mg/ml
= 0,73 ml
3. Dosis untuk mencit 28 gram
- dosis X BB
Vp =
7
konsentrasi
7
0,013 mg/20g x 28g
= 0,026 mg/ml
= 0,7 ml
4. Dosis untuk mencit 23 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 23g
= 0,026 mg/ml
= 0,58 ml
5. Dosis untuk mencit 20 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 20g
= 0,026 mg/ml
= 0,5 ml
Dosis konversi mencit : 50 mg/kgBB
- Konversi = 50 mg x 0,0026 = 0,13 mg/20g
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,13 mg/20g x 20g
0,5 ml = X
0,13 mg
X = 0,5 ml
= 0,26 mg/ml
- Larutan stok = 0,26 mg/ml x 20 ml
= 5,2 mg/20ml = 0,0052 g/20ml
1. Dosis untuk mencit 35 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,13 mg/20g x 35g
= 0,26 mg/ml
= 0,88 ml
2. Dosis untuk mencit 29 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,13 mg/20g x 29g
= 0,26 mg/ml
7
= 0,73 ml
7
3. Dosis untuk mencit 27 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,13 mg/20g x 27g
= 0,26 mg/ml
= 0,68 ml
4. Dosis untuk mencit 38 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,13 mg/20g x 38g
= 0,26 mg/ml
= 0,95 ml
5. Dosis untuk mencit 30 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,13 mg/20g x 30g
= 0,26 mg/ml
= 0,75 ml
Dosis konversi mencit : 300 mg/kgBB
- Konversi = 300 mg x 0,0026 = 0,78 mg/20g
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,78 mg/20g x 20g
0,5 ml = X
0,78 mg
X = 0,5 ml
= 1,56 mg/ml
- Larutan stok = 1,56 mg/ml x 20 ml
= 31,2 mg/20ml = 0,0312 g/20ml
1. Dosis untuk mencit 39 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,78 mg/20g x 39g
= 1,56 mg/ml
= 0,98 ml
2. Dosis untuk mencit 26 gram
- dosis X BB
Vp =
7
konsentrasi
7
0,78mg/20g x 26g
= 1,56 mg/ml
= 0,65 ml
3. Dosis untuk mencit 39 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,78 mg/20g x 39g
= 1,56 mg/ml
= 0,98 ml
4. Dosis untuk mencit 27 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,78 mg/20g x 27g
= 1,56 mg/ml
= 0,68 ml
5. Dosis untuk mencit 33 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,78mg/20g x 33g
= 1,56 mg/ml
= 0,83 ml
Dosis konversi mencit : 2000 mg/kgBB
- Konversi = 2000 mg x 0,0026 = 5,2 mg/20g
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
5,2 mg/20g x 20g
0,5 ml = X
5,2 mg
X = 0,5 ml
= 10,4 mg/ml
- Larutan stok = 10,4 mg/ml x 20 ml
= 208 mg/20ml = 0,208 g/20ml
1. Dosis untuk mencit 33 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 33g
= 0,026 mg/ml
7
= 0,83 ml
8
2. Dosis untuk mencit 37 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 37g
= 0,026 mg/ml
= 0,93 ml
3. Dosis untuk mencit 36 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 36g
= 0,026 mg/ml
= 0,9 ml
4. Dosis untuk mencit 33 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 33g
= 0,026 mg/ml
= 0,83 ml
5. Dosis untuk mencit 36 gram
- dosis X BB
Vp = konsentrasi
0,013 mg/20g x 36g
= 0,026 mg/ml
= 0,9 ml
8
Lampiran 5. Dokumentasi Penelitian
8
5. Proses penimbangan sampel
9. Ekstrak kental
8
2. Perlakuan Terhadap Hewan Uji Mencit (Mus musculus)
8
7. Larutan Na. CMC 1% dan larutan Ekstrak
8
12. Proses pengamatan gejala-gejala
toksisitas selama 24 jam dan pengamatan
kematian hewan uji mencit selama 14
hari
8
Lampiran 6. Hasil Olah Data SPSS
1. Uji Normalitas (Kolmogorov-Smirnov Test)
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Unstandardized
Residual
N 25
Normal Parametersa,b Mean .0000000
Std. Deviation .75221894
Most Extreme Differences Absolute .425
Positive .425
Negative -.262
Test Statistic .425
Asymp. Sig. (2-tailed) .000c
a. Test distribution is Normal.
b. Calculated from data.
c. Lilliefors Significance Correction.
2. Uji T Parsial
Variables Entered/Removeda
Variables
Model Variables Entered Removed Method
1 Kelompok Ujib . Enter
a. Dependent Variable: Hasil Pengamatan
b. All requested variables entered.
Model Summary
Adjusted R Std. Error of the
Model R R Square Square Estimate
1 .114a .013 -.030 .768
a. Predictors: (Constant), Kelompok Uji
ANOVAa
Model Sum of Squares df Mean Square F Sig.
1 Regression .180 1 .180 .305 .586b
Residual 13.580 23 .590
Total 13.760 24
a. Dependent Variable: Hasil Pengamatan
b. Predictors: (Constant), Kelompok Uji
Coefficientsa
Standardized
Unstandardized Coefficients Coefficients
Model B Std. Error Beta t Sig.
1 (Constant) .540 .360 1.498 .148
Kelompok Uji -.060 .109 -.114 -.552 .586
a. Dependent Variable: Hasil Pengamatan
8
3. Uji Independent Samples Test
a) Hasil Pengamatan Kelompok Data Gromming
Independent Samples Test
8
b) Hasil Pengamatan Kelompok Data Salivasi
N Correlation Sig.
Pair 1 Salivasi & Gromming 5 . .
Pair 3 Salivasi & Lemas 5 . .
8
Independent Samples Test
N Correlation Sig.
Pair 1 Jalan Dengan Perut &
5 . .
Gromming
Pair 3 Jalan Dengan Perut & Lemas 5 . .
9
Pair Lemas - Tremor
4 1.000 1.000 .447 -.242 2.242 2.236 4 .089
9
e) Hasil Pengamatan Kelompok Data Tremor
N Correlation Sig.
Pair 1 Tremor & Gromming 5 . .
Pair 4 Tremor & Lemas 5 . .
4. Uji ANOVA
a) Hasil Uji ANOVA
ANOVA
Hasil Pengamatan
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 4.960 4 1.240 2.818 .067
Within Groups 8.800 20 .440
Total 13.760 24
9
b) Hasil Uji LSD
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Hasil Pengamatan
LSD
Mean 95% Confidence Interval
(I) Kelompok Uji (J) Kelompok Uji Difference (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
Gromming Salivasi .800 .420 .071 -.08 1.68
Jalan Dengan Perut .800 .420 .071 -.08 1.68
Lemas -.200 .420 .639 -1.08 .68
Tremor .800 .420 .071 -.08 1.68
Salivasi Gromming -.800 .420 .071 -1.68 .08
Jalan Dengan Perut .000 .420 1.000 -.88 .88
Lemas -900 .420 .067 -1.58 -.07
Tremor .000 .420 1.000 -.88 .88
Jalan Dengan Perut Gromming -.800 .420 .071 -1.68 .08
Salivasi .000 .420 1.000 -.88 .88
Lemas -900 .420 .067 -1.58 -.07
Tremor .000 .420 1.000 -.88 .88
Lemas Gromming .200 .420 .639 -.68 1.08
Salivasi -900 .420 .067 -1.58 -.07
Jalan Dengan Perut -900 .420 .067 -1.58 -.07
Tremor -900 .420 .067 -1.58 -.07
Tremor Gromming -.800 .420 .071 -1.68 .08
Salivasi .000 .420 1.000 -.88 .88
Jalan Dengan Perut .000 .420 1.000 -.88 .88
Lemas -900 .420 .067 -1.58 -.07
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
9
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
3. Agama : Kristen
6. Status : Mahasiswa
7. Pendidikan Formal
a. SD : SDN 1 PARAUNA
a. Ayah : Wiraswasta