PROPOSAL

SKIM RISET TERAPAN UNIVERSITAS ANDALAS

TAHUN 2022

SUB TEMA PENELITIAN: KESEHATAN

SUB TOPIK PENELITIAN: KESEHATAN DAN OBAT

JUDUL PENELITIAN
PENGARUH PEMBERIAN SYNOVIAL MASENCYMAL STEM CELLS (SM-
MSCs) DAN PLATELET RICH PLASMA (PRP) UNTUK TERAPI
OSTEOARTRITIS (OA) SECARA IN VIVO

TIM PENGUSUL
(dr. Rizki Rahmadian, SpOT(K), M.Kes / 0024057705)
(Prof. apt. Marlina, MS, Ph.D / 0011036207)
(Riki Meksiko, S.S.T / 2021652002)
(Seprina Zulaini, S.ST / 2021652004)

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS ANDALAS
Padang
2022

HALAMAN PENGESAHAN
 PROPOSAL RISET TERAPAN UNIVERSITAS ANDALAS

Judul Penelitian :Pengaruh Pemberian Synovial Masencymal Stem

Cell Dan Platelet Rich Plasma Secara In Vivo
Terhadap Ekspressi Certillage Oligomeric Matrix
Protein (Comp), Interleukin-6 Dan Tnf Alfa Pada
Kasus Osteostritis

Skim : Riset Terapan

Sub Tema penelitian : Kesehatan
Ketua peneliti
a Nama lengkap : dr. Rizki Rahmadian, SpOT(K), M.Kes
b NIDN : 0024057705
c ID Sinta :
d ID Google Scholar :
e Jabatan fungsional : Lektor
f Prodi, Fak/PPs : Fakultas Kedokteran
g Nomor HP : 081218699561
h Alamat surel (e-mail) : rizki_md@yahoo.com
Anggota Peneliti
a Nama lengkap : Prof. apt. Marlina, MS, PhD
b NIDN : 0011036207
c Prodi, Fak/PPs : Fakultas Farmasi
Anggota Mahasiswa
a Nama Lengkap : Riki Meksiko, S.S.T
b No Bp : 2021652002
c Prodi, Fak/PPs : Bioteknologi, Pasca Sarjama
Anggota Mahasiswa
a Nama Lengkap : Seprina Zulaini, S.ST
b No Bp : 2021652004
c Prodi, Fak/PPs : Bioteknologi, Pasca Sarjana
Biaya penelitian keseluruhan : Rp. 29,986,500
Biaya penelitian
- Diusulkan ke Unand : Rp. 29,986,500
Menyetuji, Padang, 31 Januari 2021
Dekan Fakultas Kedokteran Yang menyatakan
Universitas Andalas

(Dr. dr. Wirsma Arif Harahap, SpB(K)-Onk) (dr. Rizki Rahmadian, SpOT(K), M.Kes)
NIP 196610211994121001 NIP 197705242006041003
 IDENTITAS DAN URAIAN UMUM

1. Judul penelitian: Pengaruh Pemberian Synovial Masencymal Stem Cells (SM-

MSCs) Dan Platelet Rich Plasma (PRP) Untuk Terapi Osteoartritis (OA)
Secara In Vivo

2. Tim Peneliti :

No Nama Jabatan Bidang Fak/PPs Alokasi

keahlian Waktu
(jam/minggu)
1 Dr. Rizki Ketua Ortopedi Kedokteran 8
Rahmadian
SpOT(K),
M.Kes
2 Prof. Dr. apt. Anggota 1 Bioteknologi Farmasi 8
Marlina, MS
3 Riki Meksiko, Mahasiswa Bioteknologi Pasca 5
S.S.T 1 Sarjana
4 Seprina Mahasiswa Bioteknnologi Pasca 5
Zulaini, S.ST 2 Sarjana

3. Objek Penelitian (jenis objek/material yang akan diteliti dan tema/topik

penelitian):
Pada penelitian ini dilakukan proses produksi PRP dengan antikoagulan
berbeda, untuk diindentifikasi lebih lanjut potensi aktivitas kondrogeniknya
pada sel punca mesenkimal secara in vitro.
4. Masa Pelaksanaan:
Mulai : bulan : Februari tahun: 2022
Berakhir : bulan : Februari tahun: 2023
5. Usulan biaya ke universitas andalas: Rp. 29,986,500
6. Lokasi penelitian (lab/studio/lapangan)
RSUP M.Djamil, UNAND
7. Produk temuan yang ditargetkan
Metode terapi OA dengan kombinasi terapi PRP dan sel punca mesenkimal asal
membrane synovial. Efektifitas terapi diamati dengan mengidentifikasi pengaruh
ekspresi gen certillage oligomeric matrix protein (comp), interleukin-6 dan tnf
alfa pada model hewan coba osteostritis.
8. Kontribusi mendasar pada suatu bidang ilmu
Platelet-rich plasma (PRP) adalah produk yang dihasilkan dari darah utuh
segar yang mengandung trombosit dalam konsentrasi tinggi di atas normal,
dengan sifat anti peradangan dan pro-regeneratif sehingga tubuh mampu
memperbaiki jaringan dengan lebih efisien. Sementara itu, sel punca (stem
sel) adalah sumber dari semua sel di dalam individu, dan ini merupakan
sebuah sumber bagi pengobatan sel yang sekarang ini merupakan sebuah
jalan revolusi untuk mengatasi berbagai penyakit dan kerusakan dengan
keuntungan medis yang luas.
Penelitian ini mimiliki potensi kontribusi yang besar di bidang ilmu
kesehatan yakni pada ketersediaan alternatif terapi regeneratif. Melalui
identifikasi potensi kombinasi penggunaan PRP dan terapi sel punca
mesenkimal dengan proses produksi yang optimal diharapkan akan diperoleh
alternatif tindakan terapi regeneratif yang efektif dan tepat sasaran dalam
penanganan berbagai penyakit secara umum, dan Osteoartritis secara khusus.

9. Kontribusi pada pencapaian pencapaian RIP dan roadmap sub tema penelitian
Unand
Penilitian yang diusulkan ini memiliki kesesuaian dengan Rencana Induk
Penelitian (RIP) Unand pada tema obat dan kesehatan, khusus nya pada sub
tema kesehatan, pada road map penelitian tahap ke IV yakni inovasi
pelayanan kesehatan yang prima dalam penanggulangan penyakit tropis tidak
menular. Adanya penelitian ini akan mendukung UNAND untuk bisa
mencapai tujuan tahap III pada akhir 2023 yakni masuknya Unand ke dalam
kategori 100 perguruan tinggi terbaik di Asia. Riset yang dikembangkan
harus memiliki output yang aplikatif, sehingga kemanfaatan dari hasil sebuat
riset dapat dirasakan secara nyata bagi masyarakat.
 Melalui penelitian ini tujuan RIP Unand tersebut dapat didukung dengan
baik, karena adanya penelitian mengenai potensi PRP dan sel punca
mesenkimal untuk aplikasi regeneratif terapi OA akan sangat aplikatif dalam
penentuan terapi yang tepat bagi pasien. Selain itu, penelitian mengenai sel
punca dan turunannya menjadi salah satu hot topic penelitian karena potensi
nya yang besar ssebagai alterantif terapi regeneratif untuk berbagai
pemasalahan penyakit.

10. Jurnal ilmiah atau prosiding seminar yang menjadi sasaran (International
Journal Of Stem Cells target tahun 2022)

11. Rencana luaran draft HKI tahun 2021

DAFTAR ISI

RINGKASAN...............................................................................................................3
BAB 1. PENDAHULUAN...........................................................................................4
1.1 Latar Belakang...............................................................................................4
1.2 Rumusan Masalah..........................................................................................5
1.3 Tujuan Penelitian...........................................................................................6
1.3.1 Tujuan Umum.........................................................................................6
1.3.2 Tujuan Khusus........................................................................................6
1.4 Manfaat Penelitian.........................................................................................6
1.5 Hipotesa Penelitian........................................................................................6
BAB 2. RENCANA INDUK DAN PETA JALAN PENELITIAN UNIVERSITAS
ANDALAS...................................................................................................................8
BAB 3. TINJAUAN PUSTAKA................................................................................10
3.1 Platelet Rich Plasma (PRP)..........................................................................10
3.2 Metode Preparasi PRP.................................................................................10
3.2.1 Metode Matsui-Tabata..........................................................................10
3.2.1 Metode Nugraha...................................................................................11
3.3 COMP..........................................................................................................11
3.4 IL-6...............................................................................................................12
3.5 Tnf Alfa........................................................................................................12
3.6 Osteoarthritis (OA)......................................................................................13
3.7 Osteoarthritis dan Terapi Sel Punca Mesenkimal........................................14
BAB 4. METODE PENELITIAN..............................................................................16
4.1 Tempat.........................................................................................................16
4.2 Bahan dan Alat.............................................................................................16
4.3 Prosedur Penelitian......................................................................................16
4.3.1 Proses Pembuatan PRP.........................................................................16
4.3.2 Penyiapan Medium Kultur....................................................................17
4.3.3 Thawing Sel..........................................................................................17
4.3.5 Uji In Vivo PRP pada Sel Punca Mesenkimal......................................18

1
 4.3.6 qPCR analisis Col II and Sox 9............................................................18
Kerangka Konseptual Penelitian.............................................................................19
Road Map Penelitian...............................................................................................19
BAB 5. BIAYA DAN JADWAL PENELITIAN.......................................................20
5.1 Anggaran Biaya Anggaran penelitian..........................................................20
5.2 Jadwal Penelitian..........................................................................................20
DAFTAR PUSTAKA.................................................................................................21
LAMPIRAN...............................................................................................................23
Lampiran 1. Justifikasi Anggaran Penelitian..........................................................23
Lampiran 2. Dukungan Sarana Prasarana penelitian..............................................26
Lampiran 3. Susunan organisasi tim peneliti dan pembagian tugas.......................27
Lampiran 4. Biodata ketua dan anggota tim pengusul............................................29

2
 RINGKASAN

Perkembangan ilmu pengetahuan di berbagai bidang ilmu semakin meningkat

dari waktu ke waktu, termasuk bidang kedokteran. Di bidang kedokteran banyak
sekali penemuan penemuan baru yang sangat membantu mengatasi persoalan
kesehatan di masyarakat. Mesenchymal stem cell dewasa merupakan fokus utama
penelitian di dalam bidang regenerasi jaringan. Jenis stem cell yang digunakan
adalah Synovial Mesenchymal Stem cell, yang berasal dari jaringan Synovial. Untuk
membatu pertumbuhan dan Percepatan Proliferasi Stem cell, diperlukan Serum yang
mengandung zat antibody dan mengandung hormon pertumbuhan dan juga dapat
digunakan untuk migrasi mesenchymal stem cell yang bisa diperoleh dari Platelet-
rich plasma untuk merangsang pelepasan faktor pertumbuhan. Pada penelitian ini
akan diindentifikasi Pengaruh Pemberian Synovial Masencymal Stem Cell Dan
Platelet Rich Plasma sebagai upaya penanganan pada kasus osteostritis.
Sel punca mesenkimal memiliki kemampuan multipotensi untuk
berdiferensiasi menjadi sel lain, sehingga sangat berpotensi untuk digunakan sebagai
alternatif terapi regeneratif. Pada penelitian ini PRP yang sudah di isolasi dan
diidentifikasi faktor pertumbuhannya, di uji invivo ke sel punca mesenkimal untuk
dilihat pengaruhnya terhadap aktivasi aktifitas diferensiasi sel punca mesenkimal.
Aktifitas diferensiasi sel punca mesenkimal akan di ukur melalui analisa qPCR
dengan mendeteksi level ekspresi gen certillage oligomeric matrix protein (comp),
interleukin-6 dan tnf alfa. Gen certillage oligomeric matrix protein (comp),
interleukin-6 dan tnf alfa adalah gen yang berperan penting dalam proses diferensiasi
sel punca terutama untuk proses inflamasi pada kasus osteoastritis. hipotesis pada
penelitian ini, penambahan prp dan masencymal stem cell akan menurunkan
ekpsressi gen terutama ekspressi certillage oligomeric matrix protein (comp),
interleukin-6 dan tnf alfa. sehingga akan diketahui apakah kombinasi antara terapi
prp dengan sel punca mesenkimal akan dapat berpotensi untuk aplikasi terapi
regeneratif yakni perbaikan pada penyakit osteoarthritis (OA).

3
 BAB 1. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Mesenchymal stem cell dewasa ini merupakan fokus utama penelitian di dalam
bidang regenerasi jaringan (Trounson et al., 2011). Stem sel memiliki kemampuan
untuk berdiferensiasi menjadi berbagai sel lain berdasarkan kondisi pertumbuhannya
secara spesifik (Abdulazeez, 2015). Beberapa penelitian melaporkan efektivitas
terapi stem cell masih tergolong kurang di karenakan viabilitas stem cell menurun
akibat sel yang tidak aktif (Coppes et al., 2011). Penelitian sebelumnya menyebutkan
bahwa keberhasilan terapi dengan MSC akan tercapai apabila terdapat keadaan yang
akan membuat stem cell menjadi aktif (Marr, 2010). MSC yang diaktifkan ini dapat
ditingkatkan dengan cara ditambahkan dengan mediator-mediator yang dapat
membantu pertumbuhan dan Percepatan Proliferasi Stem cell. Jenis stem cell yang
digunakan adalah Synovial Mesenchymal Stem cell, yang berasal dari jaringan
Synovial. Untuk membatu pertumbuhan dan Percepatan Proliferasi Stem cell,
diperlukan Serum yang mengandung zat antibody dan mengandung hormon
pertumbuhan dan juga dapat digunakan untuk migrasi mesenchymal stem cell yang
bisa diperoleh dari Platelet-rich plasma untuk merangsang pelepasan faktor
pertumbuhan (Dazzi dan Krampera, 2011; DelaRosa et al., 2012; Shi et al., 2010).
Penambahan PRP dengan stem cell bertujuan untuk membantu pertumbuhan
dan percepatan proliferasi stem cell karena Platelet-Rich Plasma (PRP) merupakan
plasma kaya platelet yang diperoleh dapat diperoleh dari darah pasien secara
langsung dan di donorkan kembali ke pada pasien (autologous) yang dikethaui
mengandung banyak faktor pertumbuhan sifat anti peradangan yang menyembuhkan
dan pro-regeneratif sehingga tubuh mampu memperbaiki luka pada jaringan dengan
lebih efisien (Eppley et.al., 2004; Zapata et al, 2009). Beberapa faktor pertumbuhan
yang terkandung dalam PRP diantaranya adalah PDGF (Platelet derived growth
factor), TGF-β (Transforming growth factor- β), dan VEGF (vascular endothelial
growth factor) (Okuda et al, 2013).

4
 Aktivasi MSC yang dikombinasikan dengan PRP akan meningkat lebih cepat.
Aktivasi MSC tersebut kemudian akan merangsang pengeluaran dari IL-6 (Dazzi dan
Krampera, 2011; Shi et al., 2010), yang berfungsi menekan proses inflamasi.
Penekanan proses inflamasi mempercepat penyembuhan terutama pada kasus luka
yang kronis. Sejauh ini, penelitian mengenai kadar IL-6 yang dihasilkan oleh MSC
yang distimulasi oleh TNF-α masih sedikit diteliti. MSC yang aktif mampu
mengeluarkan IL-6 dimana yang berfungsi menekan terjadinya proses inflamasi.
Kondisi inflamasi yang terjadi terus menerus pada jaringan memperlambat proses
penyembuhan dan meningkatkan jejas jaringan lokal (Robbins, 2007).
Pada saat jaringan mengalami luka terkhusus pada katrilago maka terjadi
fragmentasi cartilage oligometric martriks protein (COMP) akibat destruksi matriks
pada kasus OA. Kemudian COMP ini nanti akan dilepaskan ke jaringan synovial lalu
kedarah sehingga ditemukan konsentrasi COMP meningkat (>5 mikrogram/mL)
yang menunjukkan terjadinya kerusakan pada kartilago kasus OA. Ketika terjadi
aktivasi MSC maka dapat membantu menstabilkan konsentrasi COMP sehingga
tidak terjadi peningkatan serta kerusakan yang lebih parah pada kartillago.
Selain itu, pada saat jaringan mengalami luka maka mediator–mediator
inflamasi seperti TNF-α akan keluar yang dapat menciptakan kondisi homing dan
mengaktivasi MSC (Kang, 2012). Penelitian sebelumnya menyebutkan bahwa MSC
mampu melakukan homing ke berbagai jaringan (Maleshko et al., 2013). Keadaan
homing terjadi apabila terdapat TNF-α yang kemudian akan merangsang
angiogenesis di jaringan yang rusak (Kang,2012). Selain itu juga MSC memodulasi
sistem imun yang ada dengan mengeluarkan berbagai macam sitokin, salah satunya
IL-6 yang berfungsi menekan proses inflamasi. Penelitian yang dilakukan oleh
Zhang (2014) menyebutkan bahwa stimulasi lipopolysaccharide (LPS) terhadap
MSC meningkatkan kadar faktor antiinflamasi seperti IL-6 dan TGF-β1 selama 3 dan
72 jam (Zhang et al., 2014).
Oleh karena itu, pada penelitian ini dilakukan identifikasi Pengaruh Pemberian
SM-MSCs dan PRP Secara In Vivo terhadap ekspressi certillage oligomeric matrix
protein (comp), interleukin-6 dan tnf alfa pada kasus osteostritis. Aktifitas SM-MSCs
dan PRP tersebut dievaluasi dengan menggunakan metode analisis qPCR dengan
cara deteksi level ekspresi gen Certillage Oligomeric Matrix Protein (Comp),
5
Interleukin-6 Dan Tnf Alfa. Gen Certillage Oligomeric Matrix Protein (Comp),
Interleukin-6 dan Tnf Alfa merupakan gen-gen yang aktif dalam proses metabolisme
aktifitas kondrogenik sel punca mesenkimal.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan hal tersebut diatas maka dirumuskan masalah yang akan dijawab
dalam penelitian ini adalah:
1. Bagaimana efek penambahan PRP dan SM-MSCs secara in vivo terhadap ekspresi
gen Certillage Oligomeric Matrix Protein (Comp) pada hewan coba model OA?
2. Bagaimana efek studi in vivo penambahan PRP dan SM-MSCs secara in vivo
terhadap ekspresi gen Interleukin-6 pada hewan coba model OA?
3. Bagaimana efek studi in vivo penambahan PRP dan SM-MSCs secara in vivo
terhadap ekspresi gen Tnf Alfa pada hewan coba model OA?
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui “Pengaruh Pemberian PRP dan SM-
MSCs secara in vivo terhadap ekspressi Certillage Oligomeric Matrix Protein
(Comp), Interleukin-6 Dan Tnf Alfa pada hewan model OA.
1.3.2 Tujuan Khusus
1. Mengetahui efek terapi penambahan PRP pada sel punca mesenkimal
terhadap ekspresi gen Certillage Oligomeric Matrix Protein (Comp) secara in
vivo pada hewan model OA.
2. Mengetahui efek terapi penambahan PRP pada sel punca mesenkimal
terhadap ekspresi gen Interleukin-6 secara in vivo pada hewan model OA.
3. Mengetahui efek terapi penambahan PRP pada sel punca mesenkimal
terhadap ekspresi gen Tnf Alfa secara in vivo pada hewan model OA.

1.4 Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan memberikan informasi tambahan kepada pembaca
dan peneliti lainnya terkait pengaruh kombinasi terapi PRP dan SM-MSCs in vivo
terhadap ekspressi certillage oligomeric matrix protein (comp), interleukin-6 dan tnf
alfa pada hewan model OA. Sehingga dari penilitian ini diharapkan dapat diketahui
6
alternatif terapi regeneratif yang dapat meningkatkan peranan sel punca mesenkimal
untuk terapi regeneratif. Salah satunya dapat dilakukan dengan pemberian kombinasi
SM-MSCs dengan PRP sebagai upaya penanganan kasus OA.

1.5 Hipotesa Penelitian

1. Penambahan PRP pada sel punca mesenkimal akan menurunkan ekspresi gen
Certillage Oligomeric Matrix Protein (Comp)?
2. Penambahan PRP pada sel punca mesenkimal akan menurunkan ekspresi gen
Interleukin-6?
3. Penambahan PRP pada sel punca mesenkimal akan menurunkan ekspresi gen Tnf
Alfa?
No Jenis luaran Indikator capaian
Kategori Sub kategori TS TS+1 TS+2
1 Artikel ilmiah Internasional submitted
dimuat di jurnal bereputasi
Nasional Tidak ada
terakreditasi
2 Artikel ilmiah Internasional submitted
dimuat di terindeks
prosiding Nasional Tidak ada
3 Hak kekayaan paten Terdaftar
intelektual Paten sederhana Terdaftar
(HKI) Hak cipta Tidak ada
Merek dagang Tidak ada
Rahasia dagang Tidak ada
Desain produk Tidak ada
industry
Indikasi Tidak ada
geografis
Perlindungan Tidak ada
varietas

7
 tanaman
Perlindungan Tidak ada
topografi sirkuit
terpadu
4 Teknologi tepat guna Tidak ada
5 Tingkat kesiapan teknologi (TKT) 5

8
 BAB 2. RENCANA INDUK DAN PETA JALAN PENELITIAN
UNIVERSITAS ANDALAS
Pada penelitian ini, peneliti fokus pada topik penelitian di bidang kesehatan,
dengan sub tema kesehatan dan obat, lebih spesifiknya pada pengembangan terapi
regeneratif. Saat ini, beberapa terapi regeneratif menjadi alternatif baru untuk
menunjang proses pengobatan. Salah satunya adalah terapi regeneratif menggunakan
platelete rich plasma (PRP) untuk regenerasi pada jaringan yang mengalami
kerusakan, misalnya pada penyakit degenerative sendi (Osteoarthritis). Serta
penambahan PRP sebagai mediator. dapat membantu pertumbuhan dan Percepatan
Proliferasi Stem cell. Terapi konservatif yang saat ini tersedia seperti asetaminofen,
obat anti inflamasi non-steroid, dan opioid umumnya hanya efektif dalam menangani
nyeri dan mengurangi inflamasi pada penderita OA. Penggunaan PRP dan MSC
dapat menjadi alternatif karena tidak hanya mengurangi inflamasi namun juga
memiliki kemampuan untuk menginisiasi perbaikan dan meregenerasi jaringan yang
rusak. Hal ini dikarenakan PRP dan MCS adalah produk darah autolog dengan
kandungan platelet, faktor pertumbuhan, dan cytokine yang tinggi.
Hal menarik dari penelitian ini juga karena adanya kombinasi antara PRP
dengan sel punca mesenkimal. PRP dan MSC di ujikan secara in vivo pada sel punca
mesenkimal untuk dilihat pengaruh penambahan PRP dan MSC terhadap ekspresi
gen Certillage Oligomeric Matrix Protein (Comp), Interleukin-6 Dan Tnf Alfa. Gen
Certillage Oligomeric Matrix Protein (Comp), Interleukin-6 Dan Tnf Alfa. Dimana
pada penelitian sebelumnya sudah terlebih dahulu dilakukan pengujian secara in
vitro yang mendukung hipotesa bahwa kombinasi PRP dengan SM-MSCs sangat
berpotensi dalam proses perbaikan penyakit regeneratif osteoarthritis. Sel punca juga
merupakan salah satu metode regeneratif terapi yang saat ini menjadi fokus para
peneliti dan ahli kesehatan international maupun di Indonesia. Penelitian terkait sel
punca maupun PRP di Indonesia masih sangat terbatas, sementara peluang aplikasi
kedua bidang ini sangat besar untuk mengatasi berbagai penyakit di Indonesia. Oleh
karena itu, dengan adanya penelitian ini, artinya membuka peluang untuk UNAND
menjadi universitas yang memiliki riset di bidang yang sangat berkembang dan
terkini. Hal ini sejalan dengan capaian RIP UNAND untuk menjadi salah satu 100
dari universitas terbaik di Asia. Penelitian ini dapat mendukung RIP tersebut, karena
9
penelitian ini memiliki relevansi yang tinggi dengan permasalahan kesehatan yang
ada pada masyarakat. Sehingga hasil penelitian pun akan sangat berpotensi untuk di
aplikasikan secara klinis. Selain manfaat aplikasinya, data yang diperoleh pada
penelitian ini juga dapat digunakan untuk publikasi ilmiah international sebab ide
dan penelitian nya sangat potensial dan relevan dengan perkembangan penelitian
terbaru.

10
 BAB 3. TINJAUAN PUSTAKA

3.1 Platelet Rich Plasma (PRP)

Platelet rich plasma (PRP) merupakan konsentrat trombosit dalam jumlah
tinggi yang terkandung di dalam sejumlah plasma. PRP telah digunakan selama
beberapa tahun terakhir sebagai pengobatan yang efektif diberbagai bidang ilmu
bedah dan medis. Salah satu kelebihan yang dimiliki platelet rich plasma adalah
kemampuannya dalam merangsang penyembuhan tulang dan jaringan lunak
(Ronaldo, 2016). PRP adalah produk autolog yang diproduksi dari whole blood
melalui proses sentrifugasi sehingga menghasilkan konsentrasi platelet yang tinggi
dalam volume plasma yang rendah. Banyak teknik untuk membuat PRP yang
berbeda-beda tergantung pada jumlah, kecepatan dan lamanya putaran. Dengan
banyaknya faktor pertumbuhan (growth factor) yang terkandung di dalamnya, PRP
berfungsi mempercepat regenerasi endotel, epitel dan epidermal, menstimuli
angiogenesis, merangsang sintesa kolagen, mempercepat penyembuhan jaringan
lunak, menurunkan jaringan parut pada kulit, mempercepat respon homeostasis pada
cedera, sehingga merangsang proses penyembuhan luka, dan membalik
penghambatan penyembuhan luka yang disebabkan oleh glukokortikoid. Selain itu
juga merupakan fibrin adhesive dengan fungsi hemostatik. Karena merupakan bahan
yang autolog, sehingga PRP menjadi salah satu terapi yang sifatnya biokompatibel,
aman dan efektif. Selain itu, tingginya konsentrasi lekosit pada PRP juga menambah
efek anti mikroba.

3.2 Metode Preparasi PRP

3.2.1 Metode Matsui-Tabata
Metode pembuatan PRP yang dilakukan oleh Yasuhiko Tabata dan Makoto
Matsui (2011) adalah metode yang dilakukan dengan menggunakan prinsip
sentrifugasi atau pemutaran berdasarkan gaya sentrifugal. Darah dari pendonor
sebelumnya sudah dihitung jumlah whole blood (WB) atau jumlah darah murni
sebelum dilakukan preparasi. Sentrifugasi pertama pada metode ini dilakukan
pemutaran pada sampel darah yang sudah dicampur dengan antikoagulan ACD (Acid
Citrate Dextrose) dengan kecepatan 450 rcf/g dengan suhu 4 derajat celcius selama 7
11
menit. Proses sentrifugasi pertama ini akan memisahkan masing-masing komponen
darah dan mmenghasilkan suatu cairan bernama buffy coat (lapisan tipis) yang
berada diantara eritrosit dan plasma darah. Buffy coat ini diambil untuk dilakukan
sentrifugasi kedua. Sentrifugasi kedua dilakukan dengan kecepatan sebesar 1600
rcf/g dengan suhu 4 derajat celcius selama 5 menit dan akan menghasilkan cairan
ditengah yang disebut platelet-rich plasma (Matsui & Tabata, 2011).

3.2.1 Metode Nugraha

Metode pembuatan PRP yang dilakukan oleh Hans Kristian Nugraha et.al.,
(2012) adalah metode yang dilakukan dengan menggunakan prinsip sentrifugasi atau
pemutaran berdasarkan gaya sentrifugal. Darah dari pendonor sebelumnya sudah
dihitung jumlah whole blood (WB) atau jumlah darah murni sebelum dilakukan
preparasi. Sentrifugasi pertama pada metode ini dilakukan pemutaran pada sampel
darah yang sudah dicampur dengan antikoagulan CPD (Citrate Phosphate Dextrose)
dengan kecepatan 1300 rcf/g dengan suhu 4 derajat celcius selama 5 menit. Proses
sentrifugasi pertama ini akan memisahkan masing-masing komponen darah dan
menghasilkan suatu cairan bernama buffy coat (lapisan tipis) yang berada diantara
eritrosit dan plasma darah. Buffy coat ini diambil untuk dilakukan sentrifugasi kedua.
Sentrifugasi kedua dilakukan dengan kecepatan sebesar 2300 rcf/g dengan suhu 4
derajat celcius selama 7 menit dan akan menghasilkan cairan ditengah yang disebut
PRP.
3.3 Pengaruh Kecepatan Sentrifugasi pada PRP
Gaya gravitasi bumi cukup untuk memisahkan banyak jenis partikel dari
waktu ke waktu. Sebuah tabung anti-koagulasi dibiarkan berdiri di atas wadah
akhirnya akan terpisah menjadi fraksi plasma, RBC dan WBC. Namun, lamanya
waktu yang diperlukan menghalangi cara pemisahan ini untuk sebagian besar
aplikasi. Selain itu, potensi degradasi senyawa biologis selama penyimpanan yang
lama berarti diperlukan teknik pemisahan yang lebih cepat. Oleh karena itu, untuk
mempercepat sedimentasi, efek gravitasi diperkuat menggunakan 'gaya sentrifugal'
yang disediakan oleh sentrifugal dan bisa ribuan kali gaya gravitasi. Pemisahan
konstituen seluler dalam darah dapat dicapai dengan proses yang dikenal sebagai
sentrifugasi diferensial. Dalam sentrifugasi diferensial, gaya percepatan disesuaikan
12
untuk mengendapkan konstituen seluler tertentu dan membiarkan yang lain dalam
suspensi. Dalam sentrifugasi, RCF adalah gaya yang diperlukan untuk memisahkan
dua fase, gaya ini juga disebut medan sentrifugal relatif. Ini dinyatakan sebagai
kelipatan dari medan gravitasi bumi (g). Dengan mempercepat g, sedimentasi cepat
dapat dicapai. 'g' adalah gaya aktual yang diberikan pada isi rotor pemintal, yang
memisahkan larutan berair dalam centrifuge (Dhurat R & Sukesh M, 2014).
Sebuah penelitian yang dilakukan oleh Kececi et al., pada tahun 2014
menggunakan protokol sentrifugasi ganda, dengan memvariasikan gaya sentrifugal
selama sentrifugasi kedua. Sentrifugasi pertama dilakukan pada 250 x g selama 10
menit. Sentrifugasi kedua dilakukan pada 300, 500, 750, 1000, 1500, dan 2000 x g
selama 10 menit. Konsentrasi trombosit meningkat ketika gaya sentrifugal meningkat
dari 300 menjadi 2000 x g. Besarnya kenaikan adalah 1,92, 2,16, 2,80, 3,48, 3,67,
dan 3,76 kali nilai basal untuk gaya sentrifugal masing-masing 300, 500, 750, 1000,
1500, dan 2000 x g (Kececi Y, Ozsu S, Bilgir O, 2014).

Lalu Ehrenfest et al., melakukan studi dimana ia membandingkan empat

sentrifugal komersial (original L-PRF centrifuge®, A-PRF 12®, Salvin 1310® dan
LW -UPD8® untuk pemrosesan L-PRF. Semua sampel disentrifugasi sebanyak
sekali pada 400 x g selama 12 menit. Morfologi sel dan fitur matriks fibrin dijadikan
penilaian dalam proses ini. PRF yang diperoleh dengan sentrifugal Intra-Spin®
menunjukkan matriks fibrin yang sangat terpolimerisasi, dengan serat fibrin yang
tebal dan sel yang menunjukkan morfologi fisiologis. Sentrifugal lainnya
menghasilkan PRF dengan fibrin yang lebih tipis serat, dan sel-sel tubuh tidak teratur
dengan dimensi berkurang (Dohan et al, 2014).

Dalam penelitian pada tahun 2014 yang dilakukan oleh Perez et al., efek dari
berbagai gaya sentrifugal di kedua tahap protokol sentrifugasi ganda diselidiki.
Sentrifugasi pertama menerapkan gaya sentrifugal mulai dari 50 hingga 820 x g (50,
70, 100, 190, 280, 370, 460, 550, dan 820) selama 10 menit. Sentrifugasi kedua
menerapkan gaya 200, 400, 800, 1200, dan 1600 x g selama 10 menit, setelah
sentrifugasi pertama standar pada 100 x g selama 10 menit. Penulis menilai
konsentrasi trombosit dan integritas trombosit. Untuk sentrifugasi pertama,
konsentrasi trombosit terbesar diamati antara 70 hingga 100 x g, dengan penurunan

13
diamati diatas 190 x g. Tingkat pemulihan leukosit berkisar antara 5 sampai 10%,
terlepas dari gaya sentrifugal yang diterapkan selama sentrifugasi kedua. Protokol
yang paling efektif untuk mengoptimalkan konsentrasi trombosit (5 kali nilai basal)
adalah protokol sentrifugasi ganda, pada 100 x g selama 10 menit selama sentrifugasi
pertama, diikuti oleh sentrifugasi kedua pada 400 x g selama 10 menit. Protokol ini
juga dikaitkan dengan integritas trombosit (Perez et al, 2014).

3.4 Sel Punca Mesenkimal

Sel punca adalah sel yang menjadi awal mula dari pertumbuhan sel lain yang
menyusun keseluruhan tubuh organisme, termasuk manusia (Halim et al., 2010). Sel
punca merupakan sel khusus yang mempunyai potensi membelah diri dalam waktu
yang tidak terbatas dan dapat menghasilkan berbagai jenis sel spesifik (Rifati et al.,
2012). Sel punca merupakan sel yang belum memiliki bentuk dan fungsi spesifik
layaknya sel lainnya pada organ tubuh dan belum memiliki fungsi khusus, seperti
berdenyut, menghantarkan implus, menghasilkan hormon, ataupun fungsi lainnya
(Halim et al., 2010). Sel punca memiliki kemampuan untuk memperbanyak diri dan
menghasilkan sel-sel berkarakteristik sama dengan sel induknya yang tidak dimiliki
oleh sel tubuh lainnya. Kemampuan ini juga dipertahankan dalam jangka waktu yang
relatif lama (Halim et al., 2010). Kemampuan sel punca untuk dapat berdiferensiasi
dinilai lebih istimewa dibandingkan sel-sel lain, karena sel punca mampu
berdiferensiasi menjadi lebih dari 1 jenis sel tubuh.
Sel punca bersifat pluripoten bila mampu berdiferensiasi menjadi sel tubuh
apapun, yaitu yang berasal dari ketiga lapisan embrional (eksoderm, mesoderm, dan
endoderm). Sedangkan Sel punca yang bersifat multipoten hanya mampu
berdiferensiasi menjadi beberapa jenis sel yang berada dalam suatu golongan serupa,
seperti sel-sel sistem hematopoetik, ataupun sistem saraf (Halim et al., 2010).

14
3.5 Cartilage Oligometric Matriks Protein (COMP)
3.6.1 Pengertian
Cartilage Oligometric Matriks Protein (COMP) atau biasa disebut juga
Thrombospondin 5 merupakan suatu glikoprotein matriks ekstraseluler
dengan berat 524 kDa. COMP memiliki 5 subunit identik, dimana setiap
subunit terdiri dari 755 asam amino yang berinteraksi dengan bagian ujung
amino yang kaya akan sistein, sehingga membentuk 5 domain rantai terpilin.
Struktur ini diikuti dengan 4 domain seperti EGF (EGF-like domains) yang
sifatnya fleksibel dan 8 struktur ulangan seperti TSP Kalmodulin (TSP
Calmodulin-like repeats). Sedangkan untuk domain globuler ujung karboksil
berikatan dengan Kolagen Tipe I, II, dan IX serta fibronectin (Fater, 2018)

3.6.2 Fungsi
Fungsi dari COMP belum diketahui secara jelas, akan tetapi diduga
COMP memiliki fungsi struktural pada osifikasi endokondral serta
stabilisasi pada matriks ekstraselular melalui interaksinya dengan serat
kolagen dan komponen matriks (Herik, 2018). Selain itu, COMP diduga
berperan dalam proliferasi kondrosit dan resistensi terhadap stres
mekanik. COMP telah terbukti merangsang proliferasi dan kondrogenesis
kondrosit. Proliferasi kondrosit terjadi melalui interaksi domain EGF dari
COMP dengan Granulin-Epithelin Precursor (GEP), karena memblokir
interaksi ini akan menurunkan proliferasi. Selain itu, COMP juga
berfungsi dalam resistensi terhadap stress mekanik. Suatu penelitian yang
menggunakan tendon kuda menunjukkan bahwa COMP memainkan
peran penting dalam integritas mekanik. COMP didapatkan lebih banyak
dalam tendon yang menahan berat dibandingkan dengan tendon yang
tidak dibebani. Hal ini menunjukkan bahwa COMP dapat meningkatkan
kekuatan mekanik jaringan matriks ekstraseluler.

15
3.6.3 COMP sebagai Biomarker Diagnosis dan Evaluasi Terapi OA
COMP merupakan salah satu biomarker OA yang berkaitan dengan
protein non kolagen pada kartilago (16). Pada penelitian yang dilakukan
oleh Saberi dkk didapatkan bahwa COMP secara signifikan berkaitan
dengan insidensi dan progresivitas OA. Potensi COMP sebagai biomarker
OA saat ini telah banyak diteliti. Hal ini dikarenakan pada saat terjadi
inflamasi, terkhusus pada kartilago, terjadi fragmentasi COMP akibat
destruksi matriks ekstraseluler pada OA. COMP ini nantinya akan
dilepaskan ke cairan sinovial lalu ke darah. Sehingga temuan konsentrasi
COMP yang meningkat (>5 mikrogram/mL) pada serum dapat
menunjukkan terjadinya kerusakan pada kartilago pada kasus OA. Hal ini
dibuktikan dengan penelitian meta-analisis yang dilakukan oleh Junfeng
Zhang pada tahun 2018 menunjukkan bahwa terdapat peningkatan serum
COMP yang bermakna pada partisipan OA genu dibandingkan dengan
normal.

16
3.6 Interleukin – 6
Interleukin-6 merupakan sitokin proinflamasi yang berperan dalam
maturasi dan aktivasi neutrofil, maturasi makrofag, serta deferensiasi dari
limfosit-T sitotoksik dan sel NK.IL-6 adalah salah satu mediator yang paling
awal dan penting dalam induksi dan mengontrol sintesa protein fase akut
pada trauma, infeksi, pembedahan, dan luka bakar. Setelah terjadi cedera,
konsentrasi plasma IL-6 bisa dideteksi dalam 60 menit dengan konsentrasi
puncak antara 4 sampai 6 jam, dan dapat bertahan sampai 10 hari. IL-6
dipertimbangkan sebagai marker yang sangat relevan dari derajat kerusakan
jaringan dalam prosedur pembedahan yang berhubungan dengan morbiditas
pasca operasi (Oliveira.et al,2011).
IL-6merupakan sitokin yang memiliki banyak fungsi, sebagai sitokin
proinflamasi dan memiliki sifat regulasi yang lain. IL-6berefek pada sel target
dengan mengikat reseptor membran yang spesifik IL-6 (IL-6R), yang
mengaktifkan glikoprotein transduser 130 (gp130), subunit keduadari
komplek IL-6R. Neuron yang tidakterikat membran IL-6R,masih dapat
bereaksi terhadap IL-6 ketika IL-6 terikat dalambentuk IL-6Ryang terlarut
IL-6/ kompleksIL-6R terlarut mengaktifkan gp130, yang diekspresikanpada
sebagian besarsel-sel, termasuk neuron. Sementara peran fungsional
ekspresigen gp130pada neuron belumdiketahui secara pasti, protein ini
dikaitkan dengan sensitisasi sarafnyerimelalui aktivasi phosphoinositide 3
kinase, protein kinase C-delta dan Janus kinase/sinyal transduser
danjalursignaling aktivatortranskripsi 3 dan melalui regulasi TRPV1
(Andratsch, 2009).
Sehingga dari efek sensitisasi nyeri inilah yang memicu nyeri akut
pasca insisi yang dapat berlanjut menjadi nyeri kronis apabila tidak
mendapatkan tatalaksana yang tepat.Proses inflamasi setelah insisi
pembedahan di jaringan perifer diawali dengan adanya pelepasan mediator
inflamasi oleh sel residen, meliputi salah satunya sel mast. Beberapa mediator
inflamasi yang dilepaskan oleh sel mast, telah diketahui menghasilkan
nosisepsi selama periode pasca operasi (Yasuda.et al,2013).

17
 Sel mast yang teraktifasi dapat mengeluarkan histamin, berbagai
macammediator inflamasi seperti beberapa
eichosanoid,proteoglycan,protease, serta beberapa kemokin dan sitokin
proinflamasi seperti tumor necrosing factor-(TNF-interleukin IL-6, IL-4, IL-
13, dantransforming growth factor-.TNF-dan IL-10dari sel mast
meningkatkan migrasi lekosit dan memperberat lesi inflamasi. Walaupun
memiliki fungsi yang bermanfaat dalam hal pertahanan diri, sitokin
proinflamasi bisa memacu terjadinya kondisi patologis ketika diproduksi
secara berlebihan (Kim.et al,2006).Telah lama diketahui bahwa aktivasi
ekspresi gen IL-6 dapat dipengaruhi melalui jalur faktor transkripsi
NF-.Beberapa produk gen proinflamasi diidentifikasi memiliki peran penting
pada penekanan apoptosis,proliferasi,angiogenesis, invasi,dan metastasis.
Diantaranya produk gen tersebut adalah:TNF-, IL-6, IL-17, IL-
18,MMP-9, VEGF, COX-2 dan5-LOX.Ekspresi gen ini diatur oleh faktor
transkripsi NF-kB, aktif pada kebanyakan kanker (Lin and Karin, 2007) IL-6
telah lama dianggap sebagai sitokin proinflamasi yang diinduksi oleh LPS
bersama dengan TNF-a dan IL-1. IL-6 sering digunakan sebagai penanda
untuk aktivasi sistemik dari sitokin proinflamasi. Seperti banyak sitokin
lainnya, IL-6 memiliki kedua sifat,baik proinflamasi, maupun anti inflamasi.
Meskipun IL-6 adalah penginduksi kuat dari respon protein fase akut, ia juga
memiliki sifat anti inflamasi. Bukti terbaru yang dihasilkan dari tikus yang
dihilangkan IL-6telah menunjukkan bahwa IL-6, seperti anggota lain dari
family ligan reseptor gp130, terutama bertindak sebagai suatu sitokin anti
inflamasi.

18
3.7 Tumor Necrosis Factor α (TNF-α)
TNF-α berperan dalam pertahanan pejamu untuk infeksi bakteri, virus
dan parasit. TNF-α diproduksi oleh makrofag dan diaktifkan oleh sel T
limfosit, antigen, sel NK, dan sel mast. TNF-α biasanya tidak terdeteksi pada
individu sehat tapi sering ditemukan dalam kondisi inflamasi dan infeksi
dalam serum. TNF-α bekerja terhadap leukosit dan endotel, menginduksi
inflamasi akut pada kadar rendah9 karena TNF-α merupakan pirogen yang
kuat.TNF-α berperan pada inflamasi sistemikpadakadarsedang.TNF-α
menimbulkan kelainan patologis syok septikpadakadar yang tinggi9, sebab
TNF-α bersifat sitotoksik.
Efek biologis TNF-α sebagai berikut :
a. Pengerahan neutrofil dan monosit ke tempat infeksi serta mengaktifkan
sel- sel tersebut untuk menyingkirkan mikroba.
b. Memacu ekspresi molekul adhesi sel-sel endotel vaskuler untuk leukosit.
c. Merangsang makrofag mensekresi kemokin dan menginduksi kemotaksis
serta pengerahan leukosi
d. Merangsang fagosit mononuklear untuk mensekresi IL-1 dengan efek
seperti TNF-α.
e. Merangsang hipotalamus yang menginduksi panas, sehingga disebut
pirogen endogen.
f. Produksi TNF-α dalam jumlah besar dapat mencegah kontraktilitas
myokard dan tonus otot polos vaskuler yang menurunkan tekanan darah
atau syok dan sel lemah yang menimbulkan kaheksia (gangguan
metabolisme berat seperti gula darah turun sampai dengan kadar yang
tidak memungkinkan untuk hidup).
g. Komplikasi sindrom syok sepsis yang ditimbulkan bakteri gram negatif
atau gram positif yang ditandai dengan kolaps vaskuler (Hendrik, 2018).

3.8 Osteoarthritis (OA)

Osteoartritis (OA) merupakan penyakit degenerasi pada sendi yang
melibatkan kartilago, lapisan sendi, ligamen, dan tulang sehingga menyebabkan

19
nyeri dan kekakuan pada sendi (CDC, 2014). Terdapat 4 fase penting dalam proses
pembentukan osteoartritis yaitu fase inisiasi, fase inflamasi, nyeri, fase degradasi.
1. Fase inisiasi : Ketika terjadi degradasi pada rawan sendi, rawan sendi berupaya
melakukan perbaikan sendiri dimana khondrosit mengalami replikasi dan
memproduksi matriks baru. Terdapat beberapa faktor pertumbuhan yang
berperan penting membantu mengontrol proliferasi sel Insulin-like growth factor
(IGF-1), growth hormon, transforming growth factor b (TGF-b) dan coloni
stimulating factors (CSFs). Faktor-faktor ini menginduksi khondrosit untuk
mensintesis DNA dan protein seperti kolagen dan proteoglikan. IGF-1
memegang peran penting dalam perbaikan rawan sendi.
2. Fase inflamasi : Pada fase inflamasi sel menjadi kurang sensitif terhadap IGF-1
sehingga meningkatnya pro-inflamasi sitokin dan jumlah leukosit yang
mempengaruhi sendi. IL-1(Inter Leukin-1) dan tumor nekrosis faktor-α (TNF-α)
mengaktifasi enzim degradasi seperti collagenase dan gelatinase untuk membuat
produk inflamasi pada osteoartritis. Produk inflamasi memiliki dampak negatif
pada jaringan sendi, khususnya pada kartilago sendi, dan menghasilkan
kerusakan pada sendi.
3. Fase nyeri: Pada fase ini terjadi proses peningkatan aktivitas fibrinogenik dan
penurunan aktivitas fibrinolitik. Proses ini menyebabkan penumpukan trombus
dan komplek lipid pada pembuluh darah subkondral sehingga menyebabkan
terjadinya iskemik dan nekrosis jaringan. Hal ini mengakibatkan lepasnya
mediator kimia seperti prostaglandin dan interleukin yang dapat menghantarkan
rasa nyeri. Rasa nyeri juga berupa akibat lepasnya mediator kimia seperti kinin
yang dapat menyebabkan peregangan tendo, ligamen serta spasme otot-otot.
Nyeri juga diakibatkan oleh adanya osteofit yang menekan periosteum dan radiks
saraf yang berasal dari medulla spinalis serta kenaikan tekanan vena intramedular
akibat stasis vena pada pada proses remodelling trabekula dan subkondrial.
4. Fase degradasi : IL-1 mempunyai efek multipel pada sel cairan sendi yaitu
meningkatkan sintesis enzim yang mendegradasi rawan sendi. Peran makrofag
didalam cairan sendi juga bermanfaat, yaitu apabila terjadi jejas mekanis,
material asing hasil nekrosis jaringan atau CSFs akan memproduksi sitokin
aktifator plasminogen (PA). Sitokin ini akan merangsang khondrosit untuk
20
 memproduksi CSFs. Sitokin ini juga mempercepat resorpsi matriks rawan sendi.
Faktor pertumbuhan dan sitokin membawa pengaruh yang berlawanan selama
perkembangan OA. Sitokin cenderung merangsang degradasi komponen matriks
rawan sendi sedangkan faktor pertumbuhan merangsang sintesis (Sudoyo et. al,
2007).

3.9 Osteoarthritis dan Terapi Sel Punca Mesenkimal

Hingga saat ini terapi tradisional seperti akupuntur, penurunan berat badan
(diet) bagi penderita yang obesitas, maupun pemberian suplemen minyak ikan,
glukosamin, jahe, dan teh hijau (Healthline) belum mampu menghambat
perkembangan penyakit namun masih fokus pada usaha menurunkan efek nyeri.
Manajemen OA mencakup berbagai teknik dan prinsip, termasuk terapi non-medis
atau non-farmakologi seperti penurunan berat badan dan olahraga ringan maupun
terapi farmakologi yang mencakup beberapa obat-obatan seperti pemberian
analgesic, NSAID, ataupun injeksi kortikosteroid untuk menghilangkan nyeri pada
sendi. (Dipiro et al., 2015)
Selain itu, terapi lain yang biasanya dilakukan untuk pasien OA adalah
pembedahan lutut total (Total Knee Replacement (TKR)). (Raynauld et al., 2013)
Pelaksanaan operasi biasanya dilakukan terhadap pasien yang gejalanya tidak dapat
ditangani dengan pengobatan lainnya. Saat ini, operasi penggantian sendi lutut total
(TKR) telah menjadi pengobatan yang aman dan hemat biaya yang dapat meredakan
nyeri 90% hingga 95% dan memiliki tingkat komplikasi 1% hingga 2%. (Carr AJ et
al., 2012)
Namun, melakukan penggantian sendi tidak berarti mengurangi atau
menghilangkan kecacatan (remisi), tetapi hanya mengurangi keparahan penyakit.
Meski fungsi sendi sudah membaik, kebanyakan orang masih mengalami penurunan
fisik walaupun sudah dilakukan perbaikan fungsi sendi (OARSI, 2016). Oleh sebab
itu, selain operasi pembedahan untuk mempertahankan fungsi sendi, upaya lain telah
dilakukan dengan menggunakan terapi berbasis sel, seperti terapi sel punca (stem
cell). Sel punca adalah sel yang belum berdiferensiasi dan memiliki potensi yang
sangat tinggi untuk dapat berkembang biak melalui pembelahan (mitosis) menjadi

21
berbagai jenis sel di dalam tubuh (Ilic et al., 2011), serta juga mempunyai
kemampuan untuk berdiferensiasi dan berproliferasi (Broujeni et al., 2012).

22
 BAB 4. METODE PENELITIAN

4.1 Tempat
Penelitian ini akan dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi UNAND,
Biomedik UNAND, dan RSUP M.Djamil Padang.
4.2 Bahan dan Alat
Membran sinovial yang telah terkarakterisasi MSC, Medium MEM - ɑ, FBS
(Fetal Bovine Serum) (Gibco®, AS), antibiotik (streptomisin-penisilin) (Gibco®, AS),
trypsin-EDTA (Ethylene-diamine-tetra-acetic acid ) 0,1 dan 0,25% (Gibco®, AS),
PBS (Phosphate Buffer Saline), Aquabidest (double distillated water) (Bratacho,
Indonesia). COMP, Il-6 dan Tnf Alfa Elisa kit. Pipet Gun (Cleaver Scientific,
Inggris), Biosafety Cabinet (Thermo Scientific 1300 Series A2 Class II, AS), CO2
Incubator (Hanil Scientific, Korea Selatan), Refrigerated Centrifuge (Hanil
Scientific, Korea Selatan), Microscop Inverted (Invitrogen, AS), Flask T25 (Corning
430168), Tabung sentrifus 15 mL (SPL 50015), Pipet Serological 5mL (SPL 91005),
Pipet Serological 10 mL (SPL 91010), Scrapper (Corning, 3010), tabung Falcon 50
mL (TPP, Switzerland), tabung Eppendorf , Tips blue, yellow, white (Vertex, AS),
hemositometer, vial, botol infus 500 ml, batang pengaduk, timbangan analitik
(Shimadzu® , Jepang), heating magnetic stirrer (Arec® , Italy) , qPCR (Biorad) dan
alat gelas standar laboratorium lainnya.
4.3 Prosedur Penelitian
4.3.1 Proses Pembuatan PRP
a. Pengambilan sampel darah pada vena mediana cubiti sebanyak 10 ml dengan
ditambahkan antikoagulan sitrat
b. Darah yang ada di dalam tabung diletakkan pada rak tabung agar terhindar
dari guncangan dan tetap dalam posisinya. Sampel darah dapat bertahan
selama 2 jam pada suhu ruangan 25°C, diamkan darah sampel 15-20 menit.
c. Darah dilakukan sentrifus pertama selama 10 menit dengan kecepatan 1300
rpm setelah itu dipisahkan plasma, kemudian dilakukan proses sentrifugasi
kedua selama 10 menit dengan kecepatan 200 – 2500 rpm.

23
 d. Sampel plasma yang didapatkan dikirim peneliti ke Laboratorim Biomedik
Universitas Andalas dengan menggunakan cool box berisi gel ice (untuk
menghindari kerusakan harus dikirim dalam waktu 24 jam) pada jam kerja
laboratorium.
e. Selanjutnya sampel plasma disimpan di lemari pendingin dengan suhu -80°C
(dapat bertahan 6 bulan) sampai pemeriksaan dilakukan.
f. Setelah semua sampel terpenuhi kemudian dilakukan pemeriksaan ekspresi
growth faktor yang terkandung di dalam PRP (TGF-β, VEGF, dan EGF).
g. Produk PRP yang diperoleh akan selanjutnya di aplikasikan untuk terapi pada
hewan coba model OA.
4.3.2 Penyiapan Medium Kultur
Medium MEM - ɑ, FBS, antibiotik dihangatkan dengan waterbath pada suhu
37°C. Bahan – bahan tersebut dibuat aliquot dengan komposisi 20% FBS +
antibiotik (streptomisin-penisilin) dalam medium MEM - ɑ. Semua prosedur
dilakukan dalam kondisi steril di bawah biosafety cabinet. Medium kultur dapat
disimpan dalam lemari pendingin dan dihangatkan dengan waterbath sampai suhu
37°C apabila ingin digunakan kembali.
4.3.3 Thawing Sel
Sel MSCs (Mesenchymal Stem Cells) dikeluarkan dari tanki nitrogen cair (-
196oC) kemudian dimasukkan dalam waterbath yang telah diisi air dengan suhu 37oC
hingga mencair. Sel kemudian dimasukkan ke dalam tabung Falcon yang telah berisi
9 mL medium kultur. Sel lalu disentrifugasi dengan kecepatan 1600 rpm selama 5
menit.Sehingga didapatkan supernatan dan sel pelet, supernatan dibuang dan sel
pelet diresuspensi dengan 5 mL medium kultur, lalu dipindahkan ke flask T25. Kultur
sel diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37oC, 5% CO2. Selama perawatan sel,
medium kultur diganti dan ditambah setiap 2-3 hari sekali.
4.3.4 Perbanyakan Kultur Sel
Sel yang telah tumbuh pada flask T25 diamati dibawah mikroskop inverted
hingga konfluen sekitar 80%. Medium kultur kemudian dibuang dan dibilas dengan
PBS 1x. Sel kemudian diberikan tripsin EDTA kemudian diinkubasi pada suhu 37 ◦C
selama 3 menit untuk melepaskan ikatan antar sel dengan substrat polystiren di botol
kultur. Tripsinasi dihentikan dengan menambahkan 2 mL medium kultur baru.
24
Kemudian sel yang masih menempel dilepaskan dengan bantuan scapper. Dilakukan
pengecekan dengan menggunakan mikroskop inverted untuk memastikan sel sudah
benar-benar lepas dari dasar flask. Sel yang sudah terlepas dari flask kemudian
dimasukan ke dalam tabung sentrifus 15 mL lalu disentrifugasi dengan kecepatan
1600 rpm selama 5 menit. Sehingga didapatkan supernatan dan sel pelet, supernatan
dibuang dan sel pelet diresuspensi dengan 1 mL medium kultur. Suspensi sel dibagi
ke dalam 2 buah flask T25. Kemudian sel diinkubasi dalam inkubator CO 2 5% suhu
37ºC. Selama perbanyakan sel, medium kultur diganti setiap 2 hari sekali. Tiap
pergantian medium, medium dikumpulkan dan disentrifugasi 3000 rpm selama 10
menit untuk menghilangkan sisa-sisa sel , dan disaring melalui filter 0,22 µm.
4.3.5 Pembuatan hewan coba model OA dan aplikasi PRP dan SM-MSCs
Sebanyak 30 tikus yang dibagi menjadi 3 kelompok (kontrol, OA+SM-MSCs, dan
OA+SM-MSCs + PRP) dilakukan proses induksi OA terlebih dahulu. Prosedur nya
adalah tikus pertama-tama diinjeksikan xylazine sebanyak 0,3 ml secara intra
muskular yang dilanjutkan dengan menganastesi menggunakan ketamil sebanyak 0,3
ml secara intra muskular, xylazine berfungsi sebagai penenang sedangkan ketamil
berfungsi sebagai penganastesi. Kemudian dilakukan proses induksi setelah tikus
dirasa sudah tidak sadarkan diri, sebelum dilakukan proses induksi dilakukan
pemotongan bulu disekitar lutut agar mempermudah dalam melakukan injeksi
monoiodoacetate (MIA) secara intra-artikular. Setelah bagian lutut dibersihkan
dioleskan Alkohol 70% terlebih dahulu kemudian dilakukan injeksi secara intra
artikular pada lutut sebelah kiri dengan cara menekuk lutut tikus dan mencari ruang
kosong disekitar lutut. MIA yang diberikan sebanyak 0,05 ml untuk setiap tikus yang
setara dengan 1 mg MIA. Tikus kemudian dipelihara selama empat minggu.

Setelah dilakukan induksi model OA selama 3 minggu, dilanjutkan dengan aplikasi

SM-MSCs dan PRP dengan metode injeksi. Jumlah SM-MSCs yang di injeksikan
adalah 1x10^6 cell/mL sebanyak 60 uL dan PRP sebanyak 40 uL.

4.3.6 qPCR COMP, IL-6 dan Tnf Alfa

Setelah dilakukan uji in vivo, dilakukan ekstraksi RNA dari sampel jaringan
sendi yang sudah di berikan terapi PRP dan SM-MSCs dengan menggunakan RNA
extraction kit (Qiagen RNA easy preparation kit). Kemudian RNA hasil ekstraksi di

25
ukur konsentrasinya menggunakan nanodrop, dan di konversi menjadi cDNA dengan
menggunakan Reverse Transcript PCR. Selanjutnya cDNA di proses untuk analisa
dengan qPCR. Pada analisa qPCR akan dianalisa level ekspresi gen COMP, IL-6 dan
Tnf Alfa.

26
Kerangka Konseptual Penelitian

COMP

Uji In Vivo
PRP +MSC IL-6
pada Model OA

Tnf-α

Gambar 2 Kerangka Konseptual Penelitian

Road Map Penelitian

Isolasi PRP dan SM-MSCs

Analisa Elisa kandungan growth factor
dalam PRP

Aplikasi uji in vivo Analisis ekspresi gen COMP, Il-6 dan

kombinasi terapi PRP+ SM- Tnf-a dengan menggunakan metode
MSCs pada hewan model OA RT-qPCR dan Elisa

Gambar 3 Diagram Ikan Road Map Penelitian

27
 BAB 5. BIAYA DAN JADWAL PENELITIAN

5.1 Anggaran Biaya Anggaran penelitian

No. Keperluan Biaya
1 Honorium 8,750,000
2 Pembelian bahan habis pakai
3 Sewa alat laboratorium
Total

5.2 Jadwal Penelitian

Tahun I Tahun II Tahun II

Kegiatan
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Pembuatan PRP
Deteksi Faktor Pertumbuhan TGF-β dalam PRP
Uji In Vitro PRP pada sel punca mesenkimal
Analisis ekspresi gen Sox9 dan Col II dengan qPCR
Uji Pre klinis pada hewan model OA
Analisis histopatologi,radiologi dan qPCR
Analisis karakter turunan PRP

28
 DAFTAR PUSTAKA

Abdulazeez, S.S., 2015, Diabetes treatment: A rapid review of the current and future
scope of stem cell research, SPJ, 23, 333-340
BL Eppley,JE Woodell, dan J.Higgins,2004. “Jumlah trombosit analisis kation dan
faktor pertumbuhan dari plasma kaya trombosit: implikasi untuk
penyembuhan luka, “ Bedah Plastik dan Rekonstruksi, vol. 114, No. 6, hlm.
Calfo,Dennison DK, Vallone DR, Pinero GJ, Rittman B, Caffasse RG. 2013.
Differential effect of TGF- β1 and PDGF on proliferation of periodontal
ligament cells and gingival fibroblast. J Periodontol
Carr, A.J., & Higginson, I.J. 2012. Measuring Quality of Life: Are Quality of Life
Measures Patient Centred?.
CDC. Anopheles mosquito. 2014. USA: Center for Disease Control Prevention
Chosgun,, KN. 2014. Photometric of proline and ornithine. JBioChem
Dedianto. 2010. Use platelet growth factors in treating wounds and soft-tissue
injuries. Acta Dermatoven APA.
Dhurat R, Sukesh M. Principles and Methods of Preparation of Platelet-Rich Plasma:
A Review and Author’s Perspective. Journal of Cutaneous and Aesthetic
Surgery [Internet]. 2014 [cited 2021 Dec 14];7(4):189. Available from:
/pmc/articles/PMC4338460/
DiPiro J.T., Wells B.G., Schwinghammer T.L. and DiPiro C. V., 2015,
Pharmacotherapy Handbook, Ninth Edit., McGraw-Hill Education
Companies, Inggris
Dohan Ehrenfest DM, Andia I, Zumstein MA, Zhang C-Q, Pinto NR, Bielecki T.
Classification of platelet concentrates (Platelet-Rich Plasma-PRP, Platelet-Rich
Fibrin-PRF) for topical and infiltrative use in orthopedic and sports medicine: current
consensus, clinical implications and perspectives. Muscles, ligaments and tendons
journal. 2014 Jan;4(1):3–9.

Eppley BL, Woodell JE, Higgins J. 2004. Platelet quantification and growth factor
analysis from platelet-rich plasma : implications for wound healing, Plast
Reconstr Surg. 114:1502-8
Eren G, Gürkan A, Atmaca H, Dönmez A, Atilla G. Effect of centrifugation time on growth
factor and MMP release of an experimental platelet-rich fibrin-type product. Platelets
[Internet]. 2016 Jul 3 [cited 2021 Dec 14];27(5):427–32. Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26830681/

29
 Halim, Anitua B. Pelacho, R. Prado et al, 2015. “Infiltrasi plasma kaya akan faktor
pertumbuhan meningkatkan angiogenesis ini vivo dan meningkatkan
reperfusi dan pembentukan ulang jaringan setelah iskemia ekstremitas
belakang yang parah,” Jurnal Rilis Terkendali, Vol. 202
Halim, D., Murti, H., Sandra, F., Boediono, A., Djuwantono, T., Setiawan, B. 2010,
Stem Cell-Dasar-Teori & Aplikasi Klinis, Erlangga, Jakarta.
Kawase T, Okuda K, Wolff LF,Yoshie H. 2003. Platelet-rich plasma-derived fibrin
clot formation stimulates collagen synthesis in periodontal ligament and
osteoblastic cells in vitro. J Periodontol
Kececi Y, Ozsu S, Bilgir O. A cost-effective method for obtaining standard platelet-rich
plasma. Wounds : a compendium of clinical research and practice. 2014
Aug;26(8):232–8.

Marx RE. 2004. Platelet-rich plasma: Evidence to support its use. J Oral Maxillofac
Surg :489-96
Matsui, M. & Tabata, Y., 2011. Enhanced Angiogenesis by Multiple Release of
Platelet-Rich Plasma Contents adn Basic Fibroblast Growth Factor From
Gelatin Hydrogels. Acta Biomaterialia,
Matsui, T, Ingelsson ,M, Tabata et al. 2011. Expression of APP pathway mRNAs and
protein in Alzheimer’s disease. Brain research. 1161 (1);116-123.
Nugroho, A. E. 2006. Hewan Percobaan Diabetes Mellitus: Patologi dan Mekanisme
Aksi Diabetogenik. Biodiversitas, 7: 378-382.
Okuda, T., Baes, A.U., Nishijima, W., & Okada,M, 2003. Improvement of extraction
method of coagulation active components from Moringa Oleifara seed. Water
research 15, 3373 – 3378
Osteroarthritis Research Socity Internasional (OARSI) 2016. ‘Osteoarthritis year in
review’, International Jurnal, Vol. 1, No. 2
https://www.oarsijournal.com/article/S1063-4584(15)01324-2/abstract
Perez AGM, Lana JFSD, Rodrigues AA, Luzo ACM, Belangero WD, Santana MHA.
Relevant aspects of centrifugation step in the preparation of platelet-rich plasma.
ISRN hematology [Internet]. 2014 Mar 25 [cited 2021 Dec 14];2014:1–8. Available
from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25006472/

Resati NP, Nurhayati, Wirohadidjojo YW. 2010. Terapi parut atrofik varisela
dengan platelet-rich plasma[abstrak]. Laporan kasus dipresentasikan dalam
bentuk poster pada Pertemuan Ilmiah Tahunan XI PERDOKSI, Bali,
Sadikin, Muhammad,2002, Biokimia Darah., Jakarta,Widia Medika

30
 Sudoyo, Aru W, dkk. 2007. Buku Ajar Ilmu penyakit Dalam. Edisi 4, Jilid 1.
Jakarta : Departemen Ilmu Penyakit Dalam FKUI.
Sundman, EA, Cole, BJ,Fortier, LA 2011, “Growth factor and catabolic cytokine
concentration are influenced by the cellular composition of platelet-rich
plasma”, American Journal of Sports Medicine, vol.39, no.10
Yin W, Xu H, Sheng J, Zhu Z, Jin D, Hsu P, et al. Optimization of pure platelet-rich plasma
preparation: A comparative study of pure platelet-rich plasma obtained using
different centrifugal conditions in a single-donor model. Experimental and
therapeutic medicine [Internet]. 2017 [cited 2021 Dec 14];14(3):2060–70. Available
from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28962125/

31
 LAMPIRAN
Lampiran 1. Justifikasi Anggaran Penelitian
1. honorium
Honor per tahun (Rp)
Waktu
Honor/jam Tahu Tahu
Honor (jam/ Minggu Tahun ke-
(Rp) n ke- n ke-
minggu) 1
2 3
Riki meksiko, 25,000 5 35 4,375,000
S.S.T
Seprina 25,000 5 35 4,375,000
Zulaini, S.ST
Subtotal (Rp) 8,750,000
2. Pembelian
Harga peralatan penunjang
Harga (Rp)
Justifikasi kuantita
material satuan Tahu Tahu
pembelian s Tahun ke-
(Rp) n ke- n ke-
1
2 3
DMEM 500 Media 1 botol 1,320,000 1,320,000
mL pertumbuhan
PBS 500 mL Untuk washing 250 ml 935,000 / 467,500
sel dari media 500 ml
Fetal Bovine Untuk 50 ml 16,500,00 1,650,000
Serum tambahan 0
suplemen pada / 500 ml
sel punca
Penisilin Untuk 10 ml 1,078,000 107,800
streptomisin mencegah / 100 ml
tumbuhnya
jamur dan
bakteri

32
Tissue Culture Tempat 5 286,000 1,430,000
T25 tumbuh sel
punca
1 mL standart 1 case 562,100 562,100
tip
200 uL standart 1 case 342,100 342,100
tip
Microcentrifug Untuk sentrifus 1 case 275,000 275,000
e tube sel
EDTA 100 gr 150,000 150,000
Sitrat 1 kg 48,000 48,000
TGF-β Elisa 1 Kit 8,000,000 8,800,000
Kit
PRP 4 case 396,000 1,584,000
sentrifugasi
tube
Subtotal (Rp) 16,736,50
0
3.Sewa
Biaya per tahun
Harga
Justifikasi kuantita Tahu Tahu
material satuan Tahun ke-
pembelian s n ke- n ke-
(Rp) 1
2 3
Setrifugator Untuk 10 50,000 500,000
sentrifuge
sampel
Water bath Untuk 5 100,000 500,000
menghangatka
n media
qPCR Untuk cek 4 800,000 3,200,000
ekspresi gen

33
Elisa Untuk cek 2 150,000 300,000
Microplate protein
Reader
Subtotal (Rp) 4,500,000
TOTAL ANGGARAN YANG DIPERLUKAN 29,986,500
SELURUHNYA (Rp)

34
Lampiran 2. Dukungan Sarana Prasarana penelitian
ketersediaan
RSUP
Sarana Prasarana Bioteknologi - Biomedik -
M.Djamil
UNAND UNAND
Padang
Ruang kultur sel Tersedia
Incubator Tersedia
Centrifuge Tersedia
Hemasitometer Tersedia
Freezer (penyimpanan Tersedia
prp)
Elektroforesis Tersedia
waterbath Tersedia
qPCR Tersedia
Plate reader Tersedia

35
Lampiran 3. Susunan organisasi tim peneliti dan pembagian tugas
Susunan organisasi tim peneliti dan pembagian tugas
No Nama / NIDN Prodi / Fak Bidang Ilmu Alokasi Uraian tugas
waktu
(jam/minggu
)
1 dr. Rizki kedokteran ortopedi 5  Bertanggungjawab
rahmadian, terhadap desain
Sp.OT(K),M.Kes/ penelitian
0024057705  Bertanggung jawab
terhadap penetapan
karakteristik PRP
 Bertanggungjawab
terhadap pengolahan
data dan publikasi
2 Prof. apt. farmasi Bioteknologi 5  Bertanggungjawab
Marlina, MS, farmasi terhadap desain
PhD/ penelitian
0011036207  Bertanggungjawab
terhadap penetapan
karakteristik sel punca
mesenkimal
 Bertanggungjawab
terhadap pengolahan
data dan publikasi

36
Susunan organisasi tim pembantu atau pendukung termasuk mahasiswa
N Nama / No. Prodi/Fak Bidang Alokasi Uraian tugas
o Bp Ilmu Waktu
(jam/minggu
)
1 Riki Bioteknologi Bioteknolog 5  Bertanggungjawa
Meksiko, / Pasca i b dalam proses
S.S.T/ Sarjana pembuatan PRP
202165200 dan uji molekular
2 kandungan
growth faktor
dalam PRP
 Bertanggungjawa
b dalam proses
uji invitro PRP
pada sel punca
mesenkimal
2 Seprina Bioteknologi bioteknolog 5  Bertanggungjawa
Zulaini, / Pasca i b dalam proses
S.ST/ Sarjana pembuatan PRP
202165200 dan uji molekular
4 kandungan
growth faktor
dalam PRP
 Bertanggungjawa
b dalam proses
uji invitro prp
pada sel punca
mesenkimal

37
Lampiran 4. Biodata ketua dan anggota tim pengusul
CURRICULUM VITAE

A. Identitas Diri
1 Nama Lengkap (dengan gelar) dr. Rizki Rahmadian, SpOT(K), M.
Kes
2 Jenis kelamin Laki - laki
3 Jabatan Fungsional Lektor
4 NIP/NIK 19770524 200604 1 003
5 NIDN 0024057705
6 Tempat dan Tanggal Lahir Bukittinggi / 24 Mei 1977
7 Email rizki_md@yahoo.com
8 No. HP 081218699561
9 Alamat Kantor Jl. Perintis Kemerdekaan Jati,
Padang
Telp./Fax. +62 751 32838
Lulusan yang dihasilkan S1 Kedokteran
Mata kuliah yang diampu 1. Blok 3.2 (Gangguan
Muskuloskeletal)
2. Skill Lab
3. Preseptor
4. Pre Clerkship

B. Riwayat Penelitian
S-1 Profesi S-2
Nama Universitas Universitas Padjadjaran Universitas
Perguruan Andalas Padjadjaran
Tinggi
Bidang ilmu Kedokteran Spesialis Orthopaedi Magister Kesehatan
Tahun 1996-2002 2004-2009 2007-2009
masuk-Lulus
Judul Pengaruh Pengaruh Penggunaan Pengaruh Penggunaan
Skripsi/Tesis/ Quersetin yang Membran Amnion Membran Amnion
Disertasi Berasal dari Liofisasi Terhadap Liofisasi Terhadap
Casava (Manihot Pencegahan Pencegahan
Esculenta Crantz) Pembentukan Adhesi Pembentukan Adhesi
Terhadap Kadar Peritendinous pada Peritendinous pada
Malondialdehide Penyembuhan Ruptur Penyembuhan Ruptur
Tikus Sirrosis Tendon Achilles Tendon Achilles
Hepatis Kelinci Kelinci
Nama Dr. Yanwirasti PA Prof. Dr. dr. Darmadji Prof. Dr. dr. Darmadji
Pembimbing/ Dra. Gusti Revilla Ismono, SpB, Ismono, SpB,
Promotor M.Kes SpOT(K), FICS SpOT(K), FICS
38
C. Pengalaman Penelitian dalam 5 tahhun Terakhir
No Tahun Judul Penelitian Pendanaan
Sumber Jumlah (Rp.)
1. 2020 Pengembangan Teknologi LPDP/Ristek 1.475.000.000
Industri Produk Sel Punca BRIN
Sinovial Mesenkim Untuk
Terapi Penyakit Osteo
Artritis ( Nyeri Sendi)
2 2020 Pengaruh Penggunaan Sel PNBP 60.000.000
(Disertasi
Punca Mesenkimal Sinovial Doktor)
Terhadap Regenerasi
Tulang Rawan Sendi Lutut
Ditinjau Dari Perbaikan
Radiologis, Histopatologis
Dan Ekspresi Gen Col 2
Dan Enzim Matrix
Metalloproteinase 13
(Mmp13)

2. 2019 Pengembangan Teknologi PPTI-Program 500.000.000

Industri Produk Sel Punca Pengembangan
Sinovial Mesenkim Untuk Teknologi
Terapi Penyakit Industri
Osteoarthritis (Nyeri Kemenristek
Sendi) Dikti
3. 2018 Pengembangan Sel Punca Penelitian 110.000.000
Asal Jaringan Synovial Hibah Guru
untuk Pengobatan Osteo Besar
Arthristis
4. 2017 Pengembangan Sel Punca Penelitian 110.000.000
Asal Jaringan Synovial Hibah Guru
untuk Pengobatan Osteo Besar
Arthristis
5. 2016 Pengembangan Sel Punca Penelitian 110.000.000
Asal Jaringan Synovial Hibah Guru
untuk Pengobatan Osteo Besar
Arthristis

39
D. Pengalaman Pengabdian Kepada Masyarakat dalam 5 Tahun Terakhir
Tahun Judul Pengabdian Kepada Masyarakat Pendanaan
Sumber Jumlah
1 2020 Pengabdian Masyarakat secara
Webinar dari Bagian Ilmu Bedah
dengan tema Penanggulangan Kasus
Bedah di Era New Normal untuk
Masyarakat Umum dan Tenaga
Kesehatan

E. Publikasi Artikel Ilmiah dalam 5 tahun terakhir

No Judul Artikel Ilmiah Nama Jurnal Volume/
Nomor/Tahun
1 Dextrose Prolotherapy for Muscle, Tendon Systematic 3030
and Ligament Injury or Pathology : A Review Article
Systematic Review
2 Trends on Primary TKA in Government The Hip & Vol. 1/No.
Tertiary-Reveral Hospital 2019 Knee Journal 1/2020
3 Isolation, Characterization, Proliferation and MCBS 2020
Differentiation of Synovial Membrane-
derived Mesenchymal Stem Cells (SM-
MSCs) from Osteoarthritis Patients
4 Perbandingan Efek Samping Pemberian Health & Vol. III/No.
Ketorolac 30 mg Intravena dengan Medical 1/2021
Tramadol 100 mg Intravena pada Nyeri Journal
Pasca Bedah terhadap Perubahan Kadar
Hemoglobin Pasien Fraktur Shaft Femur
yang Dilakukan Reduksi Terbuka dan
Fiksasi Dalam RS M Djamil

F. Pemakalah Seminar Ilmiah (oral presentation) dalam 5 tahun terakhir

No Nama Temu Ilmiah / Judul artikel Ilmiah Waktu dan Tempat
Seminar
1

G. Karya Buku dalam 5 tahun terakhir

No Judul buku Tahun Jumlah Penerbit
halaman

40
 1

H. Perolehan HKI dalam 10 Tahun Terakhir

No Judul/Tema HKI Tahun Jenis Nomor
P/ID
1 Lembar registrasi pesien riptur 2020 Karya 000234317
ligament sendi lutut Tulis
2 Lembar registrasi pasien 2020 Karya 000234319
osteoarthritis genu Tulis
3 Lembaran registrasi pasien 2020 Karya 000234316
osteoarthritis/Nekrosis avaskuler Tulis
sendi panggul
4 Lembaran registrasi pasien 2020 Karya 000234314
fraktur proksimal femur Tulis

I. Penghargaan dalam 10 tahun Terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau

institusi lainnya)
No Jenis penghargaan Institusi pemberi Tahun
.
1

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar
dan dapat dipertanggungjawabkan secara hukum. Aapabila di kemudian hari ternyata
dijumpai ketidak-sesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.

Demikian biodata ini saya buat dengan ebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan Penugasan Risert Terapan

Padang, 5 Februari 2021

dr. Rizki Rahmadian, SpOT(K), M. Kes

41
NIP. 19770524 200604 1 003

42
 Surat pernyataan ketua peneliti
Yang bertanda tangan dibawah ini
Nama : dr. Rizki Rahmadian, SpOT(K), M.Kes
NIDN : 0024057705
Pangkat / Golongan : III/b – Penata Muda Tingkat I
Jabatan Fungsional : Lektor
Dengan ini menyatakan bahwa proposal saya dengan judul: Studi In Vitro Pengaruh
Penambahan PRP dalam Meningkatkan Aktivitas Kondrogenik Sel Punca
Mesenkimal untuk Aplikasi Terapi OA yang diusulkan dalam skema riset terapan
untuk tahun anggaran 2021 bersifat original dan belum pernah dibiayai oleh
lembaga/sumber dana lain.
Bilamana di kemudian hari ditemukan ketidaksesuaian dengan pernyataan ini, maka
saya bersedia dituntut dan dan diproses sesuai dengan ketentuan yang berlaku dan
mengembalikan selurruh biaya penugasan yang sudah diterima ke Kas Negara.

Demikian pernyataan ini dibuat dengan sesungguhnya dan dengan sebenar-benarnya.

Mengetahui, Padang, 31Januari 2021
Dekan Fakultas Kedokteran Yang menyatakan
Universitas Andalas

(Dr. dr. Wirsma Arif Harahap, SpB(K)- (dr. Rizki Rahmadian, SpOT(K),
Onk) M.Kes)
NIP 196610211994121001 NIP 197705242006041003

43