Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

(Ma'arif, Agil & Widyowati, 2019) Farmasains : Jurnal Farmasi dan Ilmu Kesehatan 4(2), 7-10.

FARMASAINS: JURNAL FARMASI DAN ILMU KESEHATAN

Jilid 4, Nomor 2, 2019. p-ISSN : 2086-3373 | e-ISSN : 2620-987X https:
ejournal.umm.ac.id/index.php/farmasains

Artikel Penelitian

Isolasi senyawa terpenoid ekstrak n-heksana

Marsilea crenataPresl.
Burhan Ma'arif[1]*, Mangestuti Agil[2], Retno Widyowati[2]
1Jurusan Farmasi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri Maulana Malik
Ibrahim, Malang, Indonesia.
2Jurusan Farmakognosi dan Fitokimia, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya,
Indonesia
*
Email: burhan.maarif@farmasi.uin-malang.ac.id Telepon : +62 813 3555 5725

INFORMASI ARTIKEL ABSTRAK

Sejarah Artikel Isolasi, identifikasi, dan penjelasan struktur senyawa terpenoid dari ekstrak
Diterima 21 Oktober 2019 n-heksanaMarsilea crenataPresl., telah dilakukan. Daun dariM. crenata
Revisi 27 Desember 2019 diekstraksi menggunakan pelarut n-heksana. Ekstrak kemudian dipisahkan
Diterima 5 Januari 2020 dengan kromatografi kolom vakum dan kromatografi kolom terbuka untuk
mendapatkan isolatnya. Selanjutnya isolat diidentifikasi dan dielusidasi
Kata kunci menggunakan UV-Vis, FT-IR,1H-NMR,13C-NMR, dan 2D-NMR (COSY, HMQC,
Marsilea crenataPresl. dan HMBC). Identifikasi dan penjelasan struktur yang diisolasi dari ekstrak
Isolasi n-heksanaM. crenatadaun menunjukkan isolat adalah triterpenoid
Senyawa Terpenoid pentasiklik.

doi
10.22219/farmasains.v4i2.10717

Bagaimana mengutip: Ma'arif, B., Mangestuti, A., & Widyowati, R. (2019). Isolasi senyawa terpenoid dari n-heksana
ekstrak dariMarsilea crenataPresl.Farmasiins : Jurnal Farmasi dan Ilmu Kesehatan, 4(2), 11-15. Doi:
https://doi.org/10.22219/farmasains.v4i2.10717.

PENGANTAR polifenol, dan senyawa antioksidan (Yacoeb dkk.,

semanggi (Marsilea crenataPresl.) merupakan jenis
tumbuhan air yang tersebar luas di Asia Tenggara dan
tumbuh liar di persawahan, bendungan, saluran air, talang
air, dan daerah genangan air (Ma'arif & Agil, 2018).
Meski telah dikenal dan digunakan selama puluhan
tahun oleh masyarakat Surabaya, namun keberadaanM.
crenata sekarang sangat jarang, meskipunM. crenata
memiliki potensi yang sangat baik untuk dikembangkan
menjadi obat tradisional Indonesia. Beberapa penelitian
telah dilakukan padaM. Crenatadan daunnya diketahui
mengandung saponin, terpenoid, steroid,
2010; Nurjanah dan Abdullah, 2010). Ekstrak etanol
dariM. crenatadaun telah diuji melalui teknik
radioimmunoassay (RIA) dan menunjukkan bahwa
konsentrasi zat mirip estrogen yang terdeteksi cukup
tinggi (Laswati, 2011). Hasil uji aktivitas in vivo pada
tulang trabekular vertebra dan femur mencit betina
juga menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% dariM.
crenatadaun dapat menghambat osteoporosis
dengan meningkatkan mekanisme remodeling
tulang pada tahap pembentukan tulang (Laswati,
2011; Adityara, 2017; Widiasari, 2017; Agil, Ma'arif &
Aemi, 2018). Studi in vitro lainnya tentang

13
(Ma'arif, Agil & Widyowati, 2019)
Sel osteoblas MC3T3-E1 menunjukkan bahwa ekstrak dan
fraksi n-heksana yang dihasilkan dari pemisahanM.
crenatadaun dapat meningkatkan proliferasi dan
diferensiasi sel osteoblas MC3T3-E1 (Ma'arif, Agil &
Laswati, 2018). Studi lain menggunakan analisis Gas
Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)
menunjukkan bahwa:M. crenatadaun mengandung
beberapa jenis senyawa yang dapat meningkatkan
proses pembentukan tulang (Ma'arif, Agil & Laswati, 2019
). Manfaat tersebut muncul karena adanya efek metabolit
sekunder yang terkandung di dalamnyaM. crenata(
Manitto, 1992). Senyawa steroid dan triterpenoid dalam
M. crenata diketahui memiliki aktivitas estrogenik (Ososki
& Kennelly, 2003).
Berdasarkan data tersebut, diperlukan penelitian lebih lanjut
mengenai senyawa fitoestrogen yang terkandung dalamM.
crenatadengan isolasi dan identifikasi strukturnya
menggunakan UV-Vis, FT-IR, H-NMR, dan C-NMR sehingga dapat
memberikan data ilmiah yang bermanfaat tentang
pemanfaatannya sebagai tanaman obat.
METODE PENELITIAN
Bahan:
Bahan Tumbuhan
M. crenataPresl., yang digunakan dalam penelitian ini
diperoleh dari daerah Benowo, Surabaya, Jawa Timur,
dan ditentukan di LIPI Purwodadi Pasuruan Jawa Timur
dengan kode determinasi 1a-17b-18a-1
Bahan kimia
N-heksana, petroleum eter, toluena, kloroform,
metanol, etil asetat, kalium hidroksida, natrium
sulfat anhidrat, silika gel 60 GF254, anisaldehida,
asam sulfat, asam asetat anhidrat, dan air suling
(Merck.)
Metode
Ekstraksi dan Fraksinasi
M. crenataserbuk daun diekstraksi menggunakan pelarut
nheksana. Selanjutnya dilakukan penapisan fitokimia
pada ekstrak n-heksana dengan metode kromatografi
lapis tipis (KLT). Asam sulfat dan anisaldehida digunakan
sebagai visualisasi noda. Ekstrak kemudian disiapkan
untuk dipisahkan dengan metode kromatografi kolom
vakum (VCC), fase diam silika gel GF254, dan fase gerak
n-heksana:etil asetat dengan elusi gradien. Uji KLT
terhadap fraksi yang dipisahkan dengan VCC, dan fraksi
terpilih yang menghasilkan noda merah-ungu atau ungu
dengan penampakan noda anisaldehida H2SO4 spesifik
menunjukkan senyawa golongan terpenoid. Fraksi yang
dipilih kemudian digabungkan, disiapkan, dan
dipisahkan
14
Farmasains : Jurnal Farmasi dan Ilmu Kesehatan 4(2), 7-10.
menggunakan kromatografi kolom lambat (KMP)
dengan diameter 1,5 cm dan tinggi 50 cm, fase
diam silika gel Merck 60 (0,200-0,500 mm), dan fase
gerak n-heksana:etil asetat dengan elusi isokratik
(4: 1) (Sarker, Latief & Gray, 2006).
Identifikasi Senyawa
Isolat yang diperoleh dilarutkan dengan kloroform dan
diidentifikasi dengan spektrofotometer single beam
diode array HP 8452 A UV-Vis menggunakan panjang
gelombang 200-500 nm. Isolat tersebut dicampur
dengan KBr anhidrat dan ditekan hingga membentuk
pelat bundar transparan, kemudian diamati dengan
Spektrofotometer Jasco FTIR 5300. Penjelasan struktur
dilakukan dengan 500 MHz1H-NMR dan13C-NMR (Sarker,
Latief & Gray, 2006).
HASIL DAN DISKUSI
1,6 kgM. crenataserbuk daun diekstraksi dengan
nheksana dengan metode maserasi sehingga diperoleh
ekstrak seberat 80 g dengan rendemen 5%. Metode
maserasi dipilih karena merupakan metode ekstraksi
senyawa dari tumbuhan yang relatif lebih aman dan
efektif. Profil pewarnaan ekstrak n-heksana diidentifikasi
menggunakan KLT dengan kenampakan pewarnaan
H2SO4 anisaldehida, dan beberapa pewarnaan spesifik
ungu, merah, merah muda, dan biru menunjukkan
gugus terpenoid (Gambar 1).
Ekstrak n-heksana 11 g dipisahkan dengan metode
VCC dengan fase diam GF254 silika gel 150 g dan
gradien fase gerak nheksana:etil asetat. Berat ekstrak
n-heksana yang digunakan dalam pemisahan dengan
VCC didasarkan pada jumlah fase diam dalam kolom.
Kolom VCC yang digunakan memiliki diameter 7,5 cm
dan tinggi 7,5 cm, ukuran kolom ini memiliki kapasitas
diam maksimal 70 g, sehingga jumlah ekstrak yang
diambil untuk dipisahkan adalah 5% dari 70 g yaitu
3,5 g dari n-ekstrak heksana. Penentuan bobot
ekstrak ini bertujuan untuk menghasilkan pemisahan
yang baik dengan VCC, dan jika jumlah ekstrak
berlebihan maka akan menghasilkan pemisahan yang
kurang baik. Hasil ekstrak n-heksanaM. crenatadaun
dengan VCC menghasilkan 11 fraksi (Tabel 1).
Fraksi tersebut kemudian dikelompokkan menjadi
tiga kelompok fraksi besar berdasarkan kedekatan
Rf dan kesamaan warna noda. Fraksi 2 (kombinasi
fraksi 4 dan 5) kemudian diseleksi dan dipisahkan
dengan metode MPA dengan serbuk silika gel
Merck 60 dan fase gerak n-heksana:etil asetat (4:1).
Fraksi yang dihasilkan dari MPA selanjutnya
dikelompokkan berdasarkan profil KLT, dan
diperoleh enam kelompok fraksi (Meja 2)
(Ma'arif, Agil & Widyowati, 2019) Farmasains : Jurnal Farmasi dan Ilmu Kesehatan 4(2), 7-10.

Gambar 1. Profil noda dariM. crenataEkstrak presl n-heksana Gambar 2. Profil pewarnaan fraksi 2.4 dengan anisaldehida H2JADI4
dengan anisaldehida H2JADI4penampakan noda dan penampakan noda dan fase gerak nheksana:etil
fase gerak n-heksana:etil asetat (4:1). asetat (4:1).

Tabel 1. Profil KLT fraksi hasil pemisahan ekstrak n-heksana isolat, yang memberikan absorbansi rendah pada 232 nm.
daun M. crenata dengan anisaldehida H2JADI4
penampakan noda dan fase gerak n-heksana:etil Analisis isolat dengan spektrofotometer FT-IR
asetat (4:1). menunjukkan serapan melebar pada daerah 3434 cm .-1
pecahan
Tempat Noda Warna Rf Berat (mg) daerah, yang dianggap penyerapan dari gugus
n OH ( 3500-3200 cm-1). Luas daerah 2956, 2917,
1 - - - 159.1
dan 2849 cm-1, terdapat serapan yang diduga
2 1 Biru kehijauan 0,75 -
merupakan vibrasi ulur gugus CH pada CH3. Pita
3 1 Ungu 0,75 1958.9
4 1 Merah keunguan 0.38 4164.9
serapan pada 1631 cm-1
5 1 Merah keunguan 0.38 1901.6 menunjukkan vibrasi regangan gugus C=C
6 1 Ungu 0,23 454.9 (1700-1600 cm-1), yang menunjukkan ikatan
7 1 Ungu 0.00 79,4 rangkap pada isolat, sedangkan serapan pada
8 1 Cokelat 0.00 32.1 1472, 1462, dan 1379 cm-1menunjukkan vibrasi
9 1 Cokelat 0.00 24.7 ulur gugus CH pada CH3. Dalam 1094 cm-1
10 1 Cokelat 0.00 23 daerah, terjadi serapan kuat, yang muncul
11 - - - -
sebagai vibrasi regangan dari gugus CO
Tabel 1.Profil KLT dari fraksi dihasilkan dari (1320-1000 cm-1), dan di daerah 800, 730, dan
pemisahan fraksi 2 daun M. crenata dengan
719 cm-1, terdapat serapan yang menunjukkan
pewarnaan anisaldehida H2SO4 dan ponsel
fase n-heksana:etil asetat (4:1). vibrasi regangan = CH (1000-650 cm-1). Dari
interpretasi data spektrofotometer FT-IR di atas,
Pecahan Tempat Noda Warna Rf Berat (mg)
2.1 - - - -
diduga isolat memiliki senyawa hidroksi (OH),
2.2 1 Biru kehijauan 0,85 513 alkil (CH3), gugus alkenil (C = C), =CH, dan CO.
2.3 1 Ungu 0,77 - Langkah selanjutnya adalah mengisolasi analisis
2.4 1 Merah 0.38 482
menggunakan spektrometer NMR. Analisis dari1
2.5 1 Ungu kecoklatan 0,25 391
Spektrum H-NMR isolat menunjukkan adanya 11 jenis
2.6 1 Cokelat 0.31 -
atom H, tiga metin pada 1,1398 (H-25), 1,5795 m (H
Dari fraksi tersebut dipilih 2,4 fraksi untuk dianalisis - 18) dan 1,9894 m (H-26), tiga eter pada 4,1595 d
lebih lanjut dengan spektrofotometri, fraksi 2,4 (6,5) (H-27), 3,6380 t (7,15; 6,45) (H-28), dan 5,4099
dipilih karena memiliki bercak pada Rf 0,38 dengan t (7,15; 1, 3) (H-29), satu gugus metoksi pada
warna merah dan ungu intensif yang sesuai dengan 1,2527 s (H-14), dan beberapa metil pada 0,8493 m (H
karakteristik senyawa golongan triterpenoid (Gambar - 1), 0,8584 m (H-3), 0,8635 m (H-5), dan 1,0672
2). m (H-2). Analisis dari13Spektrum C-NMR isolat
menunjukkan bahwa isolat terdiri dari 30 atom
Isolat (fraksi 2.4) dilarutkan dengan pelarut kloroform
C. Atom-atom diidentifikasi berdasarkan wilayah
dan dianalisis dengan spektrofotometer UV-Vis (λ)
pergeseran kimianya dan di antaranya
dengan panjang gelombang 200-450 nm. Isolat
membentuk metoksi, gugus metil, dan
menunjukkan serapan maksimum pada 232 nm dan
beberapa atom karbon kuartener.
242 nm, hal ini menunjukkan adanya ikatan rangkap
sebagai gugus kromofor pada isolat, sehingga dapat 2D-NMR kemudian digunakan untuk melengkapi
dideteksi pada sinar UV. Isolat memiliki maksimal 2 isolasi struktur isolasi menggunakan Heteronuclear
diduga karena adanya pengotor pada Multiple Quantum Coherence (HMQC), Heteronuclear
Correlated Spectroscopy (COSY), dan

15
(Ma'arif, Agil & Widyowati, 2019)
Gambar 1.Spektrum HMBC dari isolat daun M. crenata
Konektivitas Ikatan Ganda Heteronuklear (HMBC).
Dari rangkaian proses isolasi dan identifikasi,
diperoleh senyawa golongan terpenoid yaitu
triterpenoid pentasiklik dengan jumlah atom C
sebanyak 30 atom, atom O 11, dan atom H sebanyak
35, dengan nama kimia 14-(1-hidroksietil)-3-isopropil-
8- metoksi-6,11-dimetil-1,2,3,4,4a,5,6,
6a,6b,7,9,10,11,12b,13,14,14a,14boctadecahydropicene-1,2,4,5,7,9,10,12,13-
nonaol (Gambar 3).
KESIMPULAN
Proses pemisahan dan isolasi ekstrak n-heksana
dariM. crenatadaun menghasilkan isolat yang
termasuk dalam senyawa triterpenoid pentasiklik.
Walaupun masih perlu dilakukan penelitian lebih
lanjut mengenai aktivitas estrogenik isolat,
struktur hasil isolasi yang diperoleh termasuk
dalam senyawa golongan fitoestrogen.
REFERENSI
Nurjanah, AA, Abdullah, A. (2012). aktivitas
antioksidan dan komponen bioaktif semanggi
air (Marsilea crenata). Jurnal Inovasi dan
Kewirausahaan,1(3), 152-158.
Yacoeb, AM, Arifin, M., Sulistiono, W., & Kristiono,
SS (2010). Deskripsi histologis dan
perubahan komposisi kimia daun dan
tangkai semanggi (Marsilea crenataPresl.,
Marsileaceae) akibat perebusan.Jurnal
Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, 13(2),
81-95.
Laswati, H. (2011). Potensi Semanggi Hijau
Menunda Peningkatan Proses Remodeling Tulang
Ketidakseimbangan pada Wanita
Pascamenopause.Folia Medica Indonesiana, 47
(2), 112-117.
Agil, M., Ma'arif, B., Aemi, NY (2018).
16
Farmasains : Jurnal Farmasi dan Ilmu Kesehatan 4(2), 7-10.
Aktivitas antiosteoporosis fraksi n-heksana dari
Marsilea crenataPresl. daun dalam
meningkatkan kepadatan tulang trabecular
vertebrae mencit betina.Jurnal Tumbuhan Obat
Indonesia,11(2), 1-7.
Adityara, RA (2017).Uji aktivitas antiosteoporosis
fraksi etil asetat daun Marsilea crenata
Presl. dalam meningkatkan kepadatan
tulang trabekula femur mencit betina.
(Skripsi). Universitas Airlangga, Surabaya,
Indonesia.
Widiasari, FA (2017).Uji aktivitas antiosteoporosis
fraksi etil asetat daun Marsilea crenata
Presl. dalam meningkatkan kepadatan
tulang trabekula vertebra mencit betina
(Skripsi). Universitas Airlangga, Surabaya,
Indonesia.
Ma'arif, B., Agil, M., & Laswati, H. (2016).
Penilaian Fitokimia Pada Ekstrak n-
Heksana Dan Fraksi DariMarsilea crenata
Presl. Daun Melalui GC-MS.Majalah Obat
Tradisional, 21(2), 77-85.
Ma'arif, B., Agil, M., & Laswati, H. (2018). alkali
aktivitas fosfataseMarsilea crenataPresl.
ekstrak dan fraksi sebagai penanda
diferensiasi sel osteoblas MC3T3-E1.Jurnal
Ilmu Farmasi Terapan, 8(3), 55-59.
Ma'arif, B., & Agil, M. (2018). Profil Metabolit dari
Ekstrak Etil Asetat dari Marsilea crenata
Presl. Menggunakan UPLC-QToF-MS/MS.
Dalam Prajogo, B., Wolfender, J., Ismail, NH,
Calderon, A., Wahyuni, TS, Suciati., ... &
Widiandhani, T (Eds.).Konferensi Bromo.
Prosiding Konferensi Bromo (hal. 50-57).
Surabaya, Indonesia.
Manitto, P. (1992).Biosintesis Metabolisme Sekunder.
Semarang, Indonesia: IKIP Semarang Press.
Ososki, AL, & Kennelly, EJ (2003).
Fitoestrogen: review State of Research
saat ini.Penelitian Fitoterapi,17(8), 845-869.
Sarker, SD, Latif, Z., & Gray, AI (2006).Sebuah
Gambaran Umum Isolasi Produk Alami.
Isolasi Produk Alami(2danEd). Totowa, NJ:
Humana Press Inc.