ABSTRAK
Telah dilakukan pembuatan virgin coconut oil (VCO) dengan ekstrak jamur Aspergillus niger serta uji
antibakteri VCO dengan bakteri Staphylococcus aureus. Kualitas VCO ditentukan dengan uji kadar air, angka
asam, angka penyabunan, angka iod, uji organoleptik, dan analisis GC-MS. Ekstraksi VCO tanpa menggunakan
ekstrak jamur hanya mendapatkan VCO sebanyak 5,859 g. Penambahan ekstrak jamur A. niger 0,5% b/v
menghasilkan VCO sebanyak 8,832 g, menunjukkan terjadi kenaikan yang sangat signifikan (p<0,05). Hasil uji
kadar air, angka asam, angka penyabunan, dan angka iod masing-masing diperoleh: 0,1958; 0,2929; 5,0487; dan
0,2781, hasil ini sesuai dengan baku mutu VCO yang ditetapkan. Hasil uji organoleptik memberikan VCO yang
tidak berwarna dan tidak berbau, dan hasil analisis GC-MS diperoleh kandungan asam lemak rantai medium
dengan kandungan asam laurat sebagai komponen terbanyak. Hasil uji antibakteri terhadap bakteri
Staphylococcus aureus menunjukkan kemampuan VCO dalam menghambat pertumbuhan bakteri dengan zona
hambat 13,5 mm.
Kata kunci: antibakteri, Aspergillus niger, Staphylococcus aureus, virgin coconut oil.
ABSTRACT
Preparation of virgin coconut oil (VCO) with Aspergillus niger fungi extract and the antibacterial test
of the VCO with Staphylococcus aureus has been carried out. The quality test of the VCO included water content,
acid number, saponification number, iodine value, organoleptic test, and GC-MS analysis. VCO extraction
without using fungi extract only got 5.859 g of VCO. The addition of 0.5% w/v of A. niger fungi extracts produced
8.832 g of VCO, indicating a very significant increase (p <0.05). The water content, acid number, saponification
number, and iodine value obtained were 0.158; 0.2929; 5.0487; and 0.2781 respectively, which met the VCO
quality standard. The organoleptic test proved that the VCO was colourless and odourless. Meanwhile, the GC-
MS analysis showed the content of medium-chain fatty acids with lauric acid as the largest component. The
antibacterial test against Staphylococcus aureus indicated the ability of VCO to inhibit the growth of bacteria with
an inhibition zone of 13.5 mm.
33
JURNAL KIMIA (JOURNAL OF CHEMISTRY) 17 (1), JANUARI 2023: 33 – 39
amilase telah banyak dihasilkan dari jamur Aspergillus niger. Diambil bagian tanaman
tanah seperti Aspergilus, Penicillium dan yang terserang penyakit jamur dengan cara
Rhizopus (Sunitha et al., 2012; Damerco, memotong sekitar ukuran 1 x 1 cm, kemudian
2003). dicuci dengan akuades. dan dikeringkan dengan
Suganthi et al. (2012) telah dapat tisu. Kemudian direndam dengan
menghasilkan enzim amilase dan protease dari bayclean/NaOCl 5,25% selama sekitar 2 menit.
jamur Aspergillus niger yang dibiakkan dalam Kemudian dibilas dengan akuades sampai
media dedak gandum, dedak padi, dan minyak baycleannya terpisah. Sampel siap untuk
kacang tanah dengan tehnik fermentasi (solid ditumbuhkan jamurnya pada media PDA.
state fermentation). Enzim amilase dan
protease sangat penting dalam proses industri Menumbuhkan Jamur Aspergillus niger
makanan seperti produk keju, pelunak daging, Media Potato Dextrosa Agar (PDA)
industri kue, tekstil, dan industri kertas. dibuat dengan cara, kentang yang digunakan
Aspergillus niger merupakan jamur penghasil dicuci dengan air bersih kemudian dikupas
enzim ekstraselular seperti amilase, selulase, kulitnya hingga bersih, lalu dipotong-potong
dan lipase sangat penting dalam aplikasi kecil. Kemudian kentang ditimbang sebanyak
bioteknoligi karena kemampuannya dalam 100g dan ditambahkan air sebanyak 1 liter, lalu
mendegradasi polisakarida tanaman seperti direbus sampai warna kekuningan. Kemudian
selulosa, xilan, xiloglukan, galaktomannan dan disaring dengan kain kasa sehingga diperoleh
pektin (Bellaouchi et al., 2021). Berdasarkan filtrat. Filtrat kemudian didinginkan, setelah
latar belakang diatas maka dapat ditarik dingin ditambah dengan agar-agar sriti
permasalahan seperti: apakah ekstrak jamur sebanyak 20g sambil terus diaduk supaya agar-
Aspergillus niger dapat meningkatkan kualitas agar tidak menggumpal. Kemudian
dan kuantitas VCO yang diperoleh, dan apakah ditambahkan 20g dekstrosa dan 1 tablet
VCO yang diperoleh dapat menghambat antibiotik kloramphenikol, diaduk rata, dan
aktivitas bakteri Staphylococcus aureus?. ditambahkan air sampai volume mencapai 1L,
kemudian dipanaskan sampai mendidih. PDA
MATERI DAN METODE yang diperoleh kemudian dimasukkan ke dalam
botol, lalu dimasukkan ke dalam autoclap
Bahan untuk sterilisasi. Sterilisasi dilakukan pada
Dalam penelitian digunakan jamur tekanan 15 psi, temperatur 1210C selama 15
Aspergillus niger yang diperoleh dari hasil menit. Cawan Petri steril kemudian diisi media
isolasi pada tanaman terong yang terserang PDA, lalu isolat jamur diinokulasikan pada
patogen jamur. Buah kelapa diperoleh di Pasar media PDA, tunggu sampai jamur tumbuh.
Tradisional di Desa Binoh, Ubung Kaja, Jamur yang tumbuh kemudian dimurnikan
Denpasar. Bahan kimia yang digunakan dengan cara reisolasi sebanyak 3 kali dalam
seperti: dekstrosa, etanol 96%, akuades, Pb media PDA. Jamur murni yang diperoleh
asetat, NaOH, KOH, HCl, Na2S2O3, indikator kemudian dianalisis secara makroskopis dan
pp, Tween 10%. mikroskopis. Jamur kemudian diperbanyak
biakan murninya dalam media PDA dalam
Peralatan beberapa cawan Petri dengan cara 200 µL
Peralatan yang digunakan adalah: suspensi spora jamur dimasukkan ke dalam
seperangkat alat-alat gelas, lampu Bunsen, cawan petri, kemudian ditambahkan media
laminar flow, autoclave, cawan Petri, jarum PDA. Inokulasi dilakukan selama delapan hari
ose, alat GC-MS (Shimadzu), mikroskop pada suhu ruang (25 ± 20C).
(Olympus).
Ekstraksi Jamur Aspergillus niger
Prosedur Jamur biakan murni dalam media PDA
Preparasi Daging Buah Kelapa dan Jamur ditambahkan ammonium sulfat 0,1 M sebanyak
Aspergillus niger 50 mL, dilakukan ekstraksi secara maserasi
Buah kelapa yang digunakan adalah selama 8 jam kemudian disaring. Filtrat yang
buah kelapa yang sudah tua.. Buah kelapa diperoleh dilanjutkan disentrifugasi pada 6000
diambil daging buahnya kemudian diparut. rpm selama 20 menit, kemudian diambil
Jamur yang digunakan diperoleh dari tanaman supernatannya yang merupakan enzim kasar.
terong yang terserang patogen jamur Enzim diidentifikasi dengan uji belerang (PbS).
34
Pembuatan Virgin Coconut Oil dengan Ekstrak Jamur Aspergillus Niger serta
Uji Antibakteri VCO dengan Bakteri Staphylococcus Aureus
(I W. Suirta dan I. A. R. Astitiasih)
35
JURNAL KIMIA (JOURNAL OF CHEMISTRY) 17 (1), JANUARI 2023: 33 – 39
Uji Antibakteri VCO terhadap Bakteri Ekstraksi Virgin Coconut Oil dengan
Staphylococcus aureus. Ekstrak Jamur Aspergillus niger.
Sebanyak 1mL suspensi bakteri Dengan menggunakan ekstrak jamur A.
Staphylococcus aureus ditambahkan ke dalam niger dapat menghasilkan VCO dengan
media nutrient agar (NA), selanjutnya kuantitas yang meningkat. Ekstraksi VCO
campuran dihomogenkan menggunakan vortex, tanpa menggunakan ekstrak jamur hanya
lalu didinginkan dan dibiarkan memadat dalam mendapatkan 5,859 g. Terjadi kenaikan yang
cawan petri steril. Selanjutnya media NA yang sangat signifikan dengan penambahan ekstrak
sudah memadat dibuat sumur berdiameter 6 jamur A. niger, dengan ekstrak 0,5%
mm dengan menggunakan perforator. mendapatkan VCO sebanyak 8,832 g.
Sebanyak 20 µL VCO ditambah 5 µL tween Penambahan ekstrak 1% mendapatkan VCO
10% dimasukkan ke dalam sumur yang telah sebanyak 10,844g. Hasil uji statistik dengan
diberi tanda, kontrol positif (amoksisilin) dan SPSS diperoleh homogenitas data dengan
kontrol negative (tween 10%) dimasukkan signifikansi 0,081 (p>0,05) berarti data bersifat
dalam sumur yang lain, lalu diinkubasi selama homogen. Hasil uji normalitas diperoleh semua
24 jam pada suhu 370C. Zona bening yang data dengan signifikansi lebih besar dari 0,05
dihasilkan diamati dan diukur diameternya. (p>0,05) yang berarti data terdistribusi normal,
hasil uji ANOVA diperoleh signifikansi 0,000
HASIL DAN PEMBAHASAN (p<0,05) berarti terdapat perbedaan bermakna
antar perlakuan. Hasil uji post hoc dengan LSD
Isolasi dan Identifikasi Jamur Aspergillus diperoleh terdapat beda signifikan (p<0,05)
niger antara kontrol negatip dengan perlakuan
Secara makroskopis jamur Aspergillus. konsentrasi ekstrak 0,5; 1; 2; 3; 4, dan 5%,
niger terlihat sebagai koloni berbentuk bulat terdapat beda signifikan (p<0,05) antara
dengan tepi merata agak kasar dan berwarna konstrasi ekstrak 0,5% dengan 1; 2; 3; 4, dan
coklat kehitaman. Secara mikroskopis hifanya 5% dan terdapat beda signifikan (p<0,05)
bersepta, setiap konidiofora menyongkong satu antara konsentrasi 1% dengan 4, dan 5%.
konidia, konidiofora panjang berbentuk silinder Kualitas VCO secara organoleptik
serta tidak berwarna (hialin). Menurut Pit & menunjukkan hasil yang baik dengan VCO
Hotking (1997) jamur A. niger berbentuk yang dihasilkan tidak adanya warna dan tidak
koloni berwarna putih kehitaman, kepala berbau.
konidia berbentuk bulat dan berwarna coklat Kemampuan ekstrak jamur A. niger
tua sampai hitam. Ciri mikroskopis vesikel dalam meningkatkan hasil VCO tidak terlepas
yang berbentuk bulat dengan diameter yang dari kandungan enzim yang ada pada jamur
berkisar antara 17,52 sampai 23,4 µm. Menurut tersebut dalam mendegradasi selulosa
Bellaouchi et al. (2021), A. niger mempunyai pembungkus komponen VCO. Jamur A. niger
hifa bersepta, kolonia berwarna putih dan memiliki kemampuan dalam memproduksi
menjadi berwarna hitam saat terbentuk konidia. enzim hidrolitik seperti lipase, protease,
Secara makroskopis permukaan terlihat selulase, dan pectinase (Ratledge, 1994). Jamur
berwarna kehitaman dengan koloni berbentuk Aspergillus sp. mempunyai enzim khitinase dan
bulat, sebaliknya koloni berwarna putih ß-1, 3 glukanase yang dapat memecah
kekuningan. Identifikasi enzim pada ekstrak komponen dinding sel (Sudarma dan Suprapta,
jamur A. niger dengan uji belerang (PbS) 2011; Agrios, 1996). Hasil secara kuantitatif
menunjukkan uji positif dengan terbentuknya dan kualitatif VCO seperti pada Tabel 1.
endapan hitam pada larutan.
36
Pembuatan Virgin Coconut Oil dengan Ekstrak Jamur Aspergillus Niger serta
Uji Antibakteri VCO dengan Bakteri Staphylococcus Aureus
(I W. Suirta dan I. A. R. Astitiasih)
Uji Antibakteri VCO terhadap Bakteri senyawa aktif yang terkandung pada VCO yaitu
Staphylococcus aureus. asam laurat. Mekanisme kerja asam laurat
Hasil uji aktivitas antibakteri dengan merusak lapisan peptidoglikan
menunjukkan bahwa VCO mempunyai dinding sel bakteri sehingga bakteri mengalami
kemampuan yang baik dalam menghambat lisis (Sulastri et al., 2016; Maromon et al.,
pertumbuhan bakteri S. aureus dengan 2020). Asam laurat dapat membunuh bakteri
memberikan zona hambat 13,5 mm. gram positip dengan merusak membran sel
Kemampuan daya hambat VCO terhadap sehingga membran menjadi lisis (Lavine et al.,
bakteri S. aureus tidak terlepas dari komponen 2018). Noriko et al. (2014) telah meneliti
37
JURNAL KIMIA (JOURNAL OF CHEMISTRY) 17 (1), JANUARI 2023: 33 – 39
bahwa VCO aktif dalam menghambat Damerco, J. L., Valadares, S., M. C. S-inglis,
pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Lavine and Felix, C. R. 2003. Production of
et al. (2018) telah meneliti bahwa VCO dapat Hydrolytic Enzyme By Trichoderma
menghambat pertumbuhan bakteri Isolation With Antagonistic Activity
Actimomyces penyebab noda hitam gigi pada Against Crinipellis Perniciosa the Causal
anak-anak. Agent Of Witches ׳Broom Of Cocoa.
Brazilian J. of Micro. 34: 33-38.
SIMPULAN Dayrit, T. M., Buenafe, O. E. M., Chainani, E.
T., Vera, I. M. S., Dimzon, I. K .D.,
Hasil analisis kadar air, penentuan angka Gonzales, E. G., Santos, J. E. R. 2007.
asam, angka penyabunan, dan angka iod Standards for Essential Composition and
diperoleh hasil yang sesuai dengan standar Quality Factors of Commercial Virgin
mutu VCO yang ditetapkan. Sedangkan hasil Coconut Oil and its Differentiation from
organoleptis diperoleh menunjukkan VCO RBD Coconut Oil and Copra Oil.
yang tidak berwarna dan tidak berbau. Philippine Journal of Science. 132(2):
Ppenambahan ekstrak jamur Aspergillus niger 119-129
pada VCO menghasilkan peningkatan yang Lavine P., Fauzial, E., Rizal, M. F., Budiardjo,
signifikan terhadap berat VCO yang diperoleh. S. B. 2018. Antibacterial Effect of Virgin
Hasil analisis GC-MS menunjukkan adanya Coconut Oil on Actinomyces sp. that
asam lemak rantai medium. Sehingga dapat Causes Dental Black Stain in Children.
disimpulkan bahwa penambahan ekstrak jamur Asian Journal of Pharmaceutical and
Aspergillus niger dapat meningkatkan kuantitas Clinical Research. 11(2): 333-335
dan kualitas VCO. Hasil penelitian ini juga Maria, G. L., Sridhar, K. R., and Raviraja, N. S.
menunjukkan bahwa VCO dapat menghambat 2005. Antimicrobial and Enzyme Activity
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus of Mangrove Endophytic Fungi of
dengan zona hambat 13,5 mm. Southwest Coast of India. Journal of
Agricultural Technology. 1(7): 67–80
DAFTAR PUSTAKA Maromon, Y., Deviani, P. P., Agnes, M. E. D.
2020. Uji Aktivitas Antibakteri Minyak
Abast, M.A., Koleangan, H.S.J., Pontoh, J. Kelapa Murni (Virgin Coconut Oil)
2015. Analisis Asam Lemak dalam terhadap Pertumbuhan Bakteri
Minyak Kelapa Murni menggunakan Staphylococcus aureus secara in vitro,
Derivatisasi Katalis Basa, Jurnal MIPA Cendana Medikal Journal. 20(2): 250-
4(2):29-31 255
Agarwal, R.K., Bosco, S.J.D. 2017. Extraction Natalia, A., Natalia, D. R., Lukmanto, F., Ani,
Processes of Virgin Coconut Oil. MOJ I., Tarigan, I. L. 2019. Analysis Quality
Food Processing & Technology. 4(2):54– Characteristics of Virgin Coconut Oil
56. (VCO): Comparisons with Cooking
https://doi.org/10.15406/mojfpt.2017.04. Coconut Oil (CCO). Medical Laboratory
00087 Analysis and Sciences Journal. 1(1): 30-
Agrios G.N.1996. Plant Pathology, 3rd Ed., 36
terjemahan Munzir Busnia, Yogyakarta: Noriko, N., Masduki, A., Azhari, R.,
Gajah Mada University Press Nufadianti, G. 2014. Uji in Vitro Daya
Bellaouchi, R., Aboulolfa, H., Rokni, Y., Hambat Antibakteri Virgin Coconut Oil
Hasnaovi, A., Gabbor, N., Hakkov, A., (VCO) pada Salmonella typhi. Jurnal Al-
Bechchari, A., Asehraov, A. 2021. Azhar Indonesia Seri Sains and
Characterization and Optimization of Teknologi. 2(3): 188-192
Extracellular Enzymes Production by Pit, J.I. and Hocking, A.D., 1997. Fungi and
Aspergillus niger Strains Isolated from Food Spoiladge, 2nd Edition, Blackie
Date by-products. Journal of Genetic Academic and Professional Press.
Engineering Biotechnology. 19(50). Ratledge, C. 1994. Biochemistry of Microbial
Carmen S. M. and Maria E. Z. 2017. Enzyme- Degradation. Kluwer Academic
Assisted Extraction of Phenolic Publishers, London.
Compounds, Elsevier. 369-384 Sant’Anna, B. P. M., Freitas, S. P., & Coelho,
M. A. Z. 2003. Enzymatic Aqueous
38
Pembuatan Virgin Coconut Oil dengan Ekstrak Jamur Aspergillus Niger serta
Uji Antibakteri VCO dengan Bakteri Staphylococcus Aureus
(I W. Suirta dan I. A. R. Astitiasih)
39