FORMULATION AND EVALUATION OF MULTIPLE

EMULSION OF VALSARTAN
Reviewer :

PENDAHULUAN
Emulsi merupakan system koloid yang banyak terdapat pada bahan pangan,
kosmetik dan obat-obatan. Seperti juga pada sistem minyak utuh, reaksi oksidasi
lipid juga dapat terjadi dalam sistem emulsi minyak-air, bahkan dilaporkan sistem
emulsi lebih mudah mengalami oksidasi atau mempunyai stabilitas oksidatif lebih
rendah dibandingkan minyak utuh. Emusi ada dua macam yaitu air dalam lemak
atau emulsi water in oil (w/o) dan emulsi lemak dalam air atau emulsi oil in water
(o/w). jika minyak yang merupakan fase terdispersi dan larutan air merupakan
fase pendispersi, maka sistem ini disebut emulsi minyak dalam air. Sebaliknya,
jika air merupakan fase terdispersi dan minyak merupakan fase pendispersi, maka
sistem ini disebut emulsi air dalam minyak. Untuk menstabilkan sistem biasanya
ditambahkan emulsifier. Emulsifier atau zat pengemulsi adalah zat-zat yang dapat
mempertahankan sistem emulsi atau zat untuk membantu menjaga kestabilan
emulsi minyak dan air. Umumnya emulsifier merupakan senyawa organik yang
memiliki dua gugus fungsi baik yang polar maupun nonpolar sehingga kedua zat
tersebut dapat bercampur. Gugus nonpolar emulsifier akan mengikat minyak
(partikel minyak dikelilingi) sedangkan air akan terikat kuat oleh gugus polar
pengemulsi tersebut. Bagian polar kemudian akan terionisai menjadi bermuatan
negatif. Hal ini menyebabkan minyak juga menjadi bermuatan negatife. Partikel
minyak kemudian akan tolak menolak sehingga dua zat yang pada awalnya tidak
dapat larut tersebut kemudian menjadi stabil.
Sifat unik dari emulsi ganda W/O/W dibandingkan dengan emulsi W/O
sederhana adalah difusi air melalui fase minyak karena tekanan osmotik yang
tidak seimbang antara fase air internal dan eksternal. Lapisan minyak bertindak
sebagai membran yang memisahkan kedua fase berair ini. Molekul polar yang
terlarut baik dalam fase air internal atau fase air kontinyu eksternal dapat
melewati lapisan minyak melalui difusi karena gradien konsentrasi. Dalam kasus
air ini didorong oleh tekanan osmotik. Molekul sering diangkut melalui misel
surfaktan hidrofobik yang ada dalam fase minyak. Difusi air menyebabkan
pembengkakan, pecah, atau penyusutan tetesan air internal. Secara farmasetik,
proses emulsifikasi memungkinkan ahli farmasi dapat membuat suatu preparat
yang stabil dan rata dari campuran dua cairan yang tidak saling bisa bercampur.
Untuk emulsi yang diberikan secara oral, tipe emulsi m/a memungkinkan
pemberian obat yang harus dimakan tersebut mempunyai rasa yang lebih enak
walaupun yang diberikan sebenarnya minyak yang tidak enak rasanya, dengan
menambahkan pemanis dan pemberi rasa pada pembawa airnya, sehingga mudah
dimakan dan ditelan sampai ke lambung. Ukuran partikel yang diperkecil dari
bola-bola minyak dapat mempertahankan minyak tersebut agar lebih dapat
dicernakan dan lebih mudah diabsorpsi. karena banyaknya tantangan yang timbul
dari aspek farmakokinetik pemberian obat oral. Valsartan memiliki
bioavailabilitas oral hanya sekitar 25% dengan kisaran 25-40% pada manusia
dengan variabilitas antar dan intra-subjek yang besar. Valsartan juga memiliki
kelarutan yang bergantung pada pH dimana ia berkisar dari sangat sedikit larut
dalam lingkungan asam hingga larut dalam lingkungan netral saluran pencernaan.
Permeabilitas valsartan rendah dan juga tergantung pada pH di mana ia
menurun ketika pH lingkungan meningkat dari nilai pH asam ke pH netral di
saluran pencernaan. Sebagai hasil dari sifat biofarmasi yang kompleks ini,
pengembangan bentuk sediaan valsartan yang lebih dapat dirilis dan tersedia
secara hayati dengan variabilitas antar dan intrasubjek yang lebih sedikit menjadi
tantangan. Oleh karena itu formulasi dosis emulsi ganda dari valsartan yang
memiliki sifat pelepasan dan bioavailabilitas yang ditingkatkan dengan
variabilitas antar dan intrasubjek yang lebih sedikit akan diinginkan. Dengan
demikian tujuan dari penelitian ini adalah untuk untuk mengembangkan dan
mengevaluasi beberapa emulsi valsartan untuk pemberian obat oral. Studi
Preformulasi obat dilakukan seperti studi FTIR untuk mengetahui bahwa berbagai
gugus fungsi sama dengan obat standar dan ditemukan tidak ada interaksi antara
obat dan surfaktan. UV maxima obat diketahui dengan menggunakan
spektrofotometer Systronic UV.
BAHAN
Span 40 dibeli dari laboratorium Hymedia, span 60 dan span 80 dari
laboratorium Merch, dan Tween 80 juga dari laboratorium Merch, minyak parafin
berat dari Rankem. Obat Valsartan dari span 40, 60, 80, dan Tween digunakan
sebagai surfaktan Emulsifying agent, surfaktan nonionik. Minyak parafin
digunakan sebagai emolien, pelumas.
METODE PENELITIAN
Metode Persiapan:
Beberapa emulsi dibuat dengan dua langkah proses emulsifikasi:
a) Pembuatan emulsifikasi primer
b) Emulsifikasi sekunder
Emulsifikasi primer: 10 ml air suling yang mengandung 25 mg obat
ditambahkan secara bertahap ke 14 ml fase minyak yang mengandung pengemulsi
primer (Span40, Span60, dan Span 80) dan 25mg obat dengan pengadukan terus
menerus pada 5000 rpm selama 5 menit. Ini memberikan emulsi utama.
Emulsifikasi sekunder: 20 ml emulsi primer kental diemulsi lebih lanjut
dengan fase berair eksternal yang mengandung pengemulsi sekunder (Tween80)
dan 50 mg obat dengan pengadukan terus menerus pada 1000 rpm selama 10
menit. Semua formulasi disiapkan dengan mengikuti prosedur yang sama.
Pengaruh pengemulsi primer diamati dengan mengevaluasi beberapa formulasi.
Eksperimental:
Penampilan fisik: Serbuk obat (Valsartan) diperiksa sifat organoleptiknya
seperti warna dan bau. Jumlah obat dalam lapisan anorganik Jumlah obat dalam
lapisan air Koefisien Partisi, K-Spektroskopi Infra Merah Fourier-Transform
(FTIR) Spektrum IR zat obat diautentikasi menggunakan spektroskopi IR.
Studi kelarutan: Sampel diuji secara kualitatif kelarutannya dalam
berbagai pelarut. ditentukan dengan mengambil 10 mg sampel obat dalam 10 ml
pelarut sebagai air, metanol, etanol, asetonitril, buffer pH 6,8 dalam tabung reaksi
kecil dan dilarutkan dengan baik dengan pengocokan.
Penentuan titik leleh: Titik lebur ditentukan dengan metode kapiler
menggunakan Digital Melting point apparatus. Tabung kapiler disatukan dan diisi
dengan cara menekan ujung yang terbuka secara perlahan ke dalam sampel obat
murni dan dikemas dengan cara mengetuk bagian bawah kapiler pada permukaan
yang keras sehingga obat terbungkus ke dasar tabung. Ketika obat dikemas ke
bagian bawah tabung, tabung ditempatkan ke dalam celah alat, alat dinyalakan
dan dicatat suhu saat obat meleleh.
Persiapan kurva kalibrasi : (panjang gelombang sebenarnya kira-kira
248 nm-255 nm) Larutan Valsartan dipindai dalam rentang UV 200-400 nm
menggunakan spektrofotometer UV Sinar Systronic Double beam. Penentuan
Panjang Gelombang Maksimum Absorbansi (Λmax) 10 mg obat ditimbang akurat
dan dipindahkan ke 10 ml labu ukur. Kemudian buffer fosfat 6,8 (pelarut yang
sesuai) ditambahkan untuk melarutkan obat sepenuhnya. Volume dibuat hingga
10 ml dengan pelarut. Sampel yang disiapkan adalah 1000μg/ml. 1ml larutan di
atas kemudian dipindahkan ke labu ukur 100 ml lainnya dan diencerkan sampai
tanda garis dengan dapar fosfat 6,8. Sampel adalah 10 μg / ml.
Persiapan Kurva Kalibrasi Valsartan: Kurva kalibrasi diplot antara
konsentrasi dan absorbansi. Dilakukan kurva kalibrasi 2-20μg/ml. Penentuan
koefisien partisi 25 mg obat dan 25 ml air suling dan 25 ml metanol dimasukkan
ke dalam corong pisah, corong pisah dikocok selama 2 jam dalam pengocok
pergelangan tangan untuk kesetimbangan. Dan didiamkan selama 1 jam,
kemudian kedua fase dipisahkan dan jumlah obat dalam fase air maupun fase
lipofilik dianalisis secara spektrofotometri. Koefisien partisi dari rumus sebagai
berikut:
Jumlah obat dalamlapisan anorganik
Koefisien Partisi,K =
Jumlah obat dalam lapisan air
Spektroskopi Infra Merah Fourier-Transform (FTIR): Spektrum IR
zat obat diautentikasi menggunakan spektroskopi IR.
Evaluasi Ukuran globul: Dalam penelitian ini, ukuran globul dari
beberapa emulsi yang disiapkan ditentukan dengan menggunakan cahaya
mikroskop dilengkapi dengan kamera digital untuk emulsi yang baru disiapkan
dan untuk emulsi yang disimpan pada kondisi berbeda selama 28 hari
 Efisiensi jebakan: Persentase Entrapment Efficiency (% EE) ditentukan
dengan mengambil yang baru disiapkan W/O/W multiple emulsi dan segera
disentrifugasi pada 4000 rpm selama 10 menit. Kemudian 1 ml fase berair
(lapisan bawah) ditarik dengan tepat melalui jarum suntik 2 ml dan diencerkan
dengan benar dengan buffer fosfat 6.8. Larutan disaring dengan filter Millipore
(berukuran pori 0,22 mm) dan kandungan obat dianalisis pada spektrofotometer
UV pada 247,6 nm. Efisiensi Enkapsulasi ditentukan dengan persamaan berikut:
Total obat dimasukkan – Obat Gratis
% OEE = x 100
Obat total
Tes stabilitas: Uji stabilitas dilakukan pada kondisi penyimpanan yang
berbeda untuk emulsi primer dan multipel. Pengujian dilakukan pada sampel yang
disimpan pada suhu 8 ± 0,1 OC (dalam lemari es), 25 ± 0,1HAIC (dalam oven),
40 ± 0,1 HAIC (dalam oven) dan 40 ± 0,1HAIC pada kelembaban relatif (RH)
75%).
Potensi Zeta: Besarnya potensial zeta memberikan indikasi kestabilan
potensial sistem koloid. Jika semua partikel dalam suspensi memiliki potensial
zeta negatif atau positif yang besar maka mereka akan cenderung saling tolak dan
tidak akan ada kecenderungan partikel untuk bersatu. Namun, jika partikel
memiliki nilai potensial zeta yang rendah maka tidak akan ada gaya untuk
mencegah datangnya partikel tersebut bersama-sama dan berflokulasi. Garis
pemisah umum antara suspensi stabil dan tidak stabil umumnya diambil pada +30
atau -30 mV. Partikel dengan potensi zeta lebih positif dari +30 mV atau lebih
negatif dari -30 mV biasanya dianggap stabil. Namun, jika partikel memiliki
densitas yang berbeda dari dispersan, mereka pada akhirnya akan mengendap
membentuk lapisan yang padat.
Karakteristik organoleptik. Emulsi primer dan multipel yang baru disiapkan
diselidiki secara organoleptik (warna, pencairan, dan pemisahan fasa).
Karakteristik organoleptik dari emulsi primer dan multipel yang disimpan pada
kondisi penyimpanan yang berbeda, yaitu warna, pencairan dan pemisahan fase
dicatat pada berbagai interval, yaitu 0 jam, 1 jam, 1 hari, 3 hari, 7 hari, 14 hari, 21
hari dan 28 hari. hari selama 28 hari.
 Tes mikroskopis: Beberapa emulsi dianalisis di bawah mikroskop untuk
mengkonfirmasi beberapa karakter. Setetes emulsi ganda ditempatkan pada slide
kaca, diencerkan dengan air dan ditutup dengan penutup kaca. Setetes minyak
imersi ditempatkan pada slide penutup dan diamati di bawah mikroskop.
Penentuan Ph: Nilai pH dari emulsi yang baru disiapkan dan emulsi yang
disimpan pada kondisi yang berbeda ditentukan oleh pengukur pH digital.
Pengukuran pH diulang untuk beberapa emulsi setelah 1, 3, 7, 14, 21 dan 28 hari
persiapan
Studi pelepasan obat in vitro: dilakukan pada sel disolusi sederhana
menggunakan membran selofan (ketebalan-200mm, kekuatan putus-2,7 kgf/cm).
Sebelum penelitian pelepasan, membran selofan direndam dalam air suling selama
6 jam, sering dicuci 4 kali dengan mengganti air suling, kemudian direndam
dalam larutan gliserol 5% v/v selama minimal 60 menit dan terakhir dicuci
dengan 5 bagian air suling. 15 ml multiple emulsi yang baru disiapkan
ditambahkan ke ruang donor, terdiri dari tabung gelas berongga (diameter 2,5 cm
dan panjang 10 cm) dan membran diikat di ujung bawah tabung dengan tali nilon.
Tabung ini dicelupkan ke dalam bejana 250 ml yang berisi 100 ml PBS pH 6,8
dan diaduk dengan kecepatan 100 rpm di atas magnetic stirrer dan dipertahankan
pada suhu 37 °C yang berfungsi sebagai ruang penerima.
HASIL PENELITIAN
Penampilan fisik: Serbuk obat (Valsartan) diperiksa sifat organoleptiknya
seperti warna dan bau. Dan diamati bahwa Valsartan adalah bubuk kristal
keputihan. Studi kelarutan: Sampel diuji secara kualitatif kelarutannya dalam
berbagai pelarut. Itu ditentukan dengan mengambil 10 mg sampel obat dalam 10
ml pelarut sebagai air, metanol, etanol, asetonitril, buffer pH 6,8 dalam tabung
reaksi kecil dan dilarutkan dengan baik dengan pengocokan. Studi kelarutan
dalam pelarut yang berbeda pada suhu kamar mengungkapkan bahwa itu larut
dalam, etanol, metanol, penyangga fosfat 6.8 dan sedikit larut dalam air. (IP
2003). Data kelarutan ditunjukkan pada Meja 2. Penentuan titik leleh:Titik leleh
Valsartan ditemukan pada 115±2 ºC.
 Persiapan kurva kalibrasi: Larutan valsartan dipindai dalam rentang UV
200-400 nm menggunakan spektrofotometer Systronic UV Visible. Metode
spektrofotometri analisis Valsartan di -maks247,6 nm ditemukan dapat
direproduksi dan sangat sensitif. Kurva standar Valsartan disiapkan dalam larutan
penyangga Metanol dan Fosfat (pH 6,8), pada -maks247,6 nm. Data diregresi
untuk mendapatkan garis lurus. Koefisien korelasi lebih besar dari 0,99 diamati
dalam semua kasus, yang menunjukkan bahwa obat mengikuti hukum Beer-
Lambert dalam kisaran konsentrasi 10mg/10mldiberikan dalam tabel dibawah ini:

Pembuatan Kurva Kalibrasi: Valsartan dalam buffer fosfat 6.8 Kurva

kalibrasi diplot antara konsentrasi dan absorbansi. Kurva kalibrasi 10mg/10ml
dilakukan. Kemiringan dan perpotongan kurva kalibrasi adalah 0,017 dan 0,034
masing-masing. Koefisien korelasi 'r2' nilai dihitung sebagai 0,995 seperti yang
ditunjukkan dalam gambar dibawah ini:

Penentuan koefisien partisi: Studi koefisien partisi dilakukan untuk

mengetahui sejauh mana transfer obat dalam lapisan berair dan non berair lainnya.
Fenomena ini biasanya dilakukan untuk mendapatkan konsentrasi obat pada kedua
lapisan tersebut. Nilai koefisien partisi Valsartan juga mengungkapkan sifat
hidrofobiknya yang diberikan dalam tabel dibawah ini:

Spektroskopi Infra Merah Fourier-Transform (FTIR): Spektrum IR

zat obat diautentikasi menggunakan spektroskopi IR. Kehadiran puncak
karakteristik yang terkait dengan karakteristik struktural spesifik dari molekul
obat telah dicatat. Berbagai puncak obat ditampilkan digambar dibawah ini:

Warna: Emulsi primer yang baru disiapkan berwarna putih krem. Tidak
terjadi perubahan warna pada kondisi penyimpanan yang berbeda. Hal ini
menunjukkan bahwa emulsi primer stabil pada berbagai kondisi penyimpanan
hingga 28 hari. Beberapa emulsi yang baru disiapkan berwarna putih. Ada sedikit
perubahan warna pada sampel yang disimpan pada 400C (dalam oven) warnanya
menjadi putih kekuningan. Perubahan warna muncul pada hari ke-21 dan bertahan
hingga 28 hari. Perubahan warna pada akhir periode pengamatan mungkin
disebabkan oleh pemisahan fasa berminyak yang terjadi pada temperatur tinggi31
Warna Emulsi primer yang baru disiapkan berwarna putih krem. Tidak terjadi
perubahan warna pada kondisi penyimpanan yang berbeda. Hal ini menunjukkan
bahwa emulsi primer stabil pada berbagai kondisi penyimpanan hingga 28 hari.
Beberapa emulsi yang baru disiapkan berwarna putih. Ada sedikit perubahan
warna pada sampel yang disimpan pada 400C (dalam oven) warnanya menjadi
putih kekuningan. Perubahan warna muncul pada hari ke-21 dan bertahan hingga
28 hari. Perubahan warna pada akhir periode pengamatan mungkin disebabkan
oleh pemisahan fasa berminyak yang terjadi pada temperatur tinggi.
Pemisah fase: Dalam kasus emulsi primer, tidak ada pemisahan fasa yang
diamati pada sampel mana pun. Hal ini menunjukkan bahwa emulsi primer stabil
pada semua kondisi penyimpanan selama 28 hari. Untuk beberapa emulsi, tidak
ada fase Pemisahan terlihat pada sampel yang disimpan pada semua kondisi
penyimpanan, kecuali sedikit pemisahan fasa yang dimulai pada hari ke-21.
Ukuran globul: Ukuran globul dari beberapa emulsi yang disimpan pada
kondisi penyimpanan yang berbeda disajikan secara grafis. Ukuran globul sistem
emulsi dapat ditentukan dengan mikroskop cahaya, metode difraksi laser,
mikroskop elektron atau dengan coulter counter. Mikroskop cahaya digunakan
dalam penelitian ini. Peningkatan atau penurunan ukuran globul menunjukkan
ketidakstabilan. Tetesan ganda dapat menyatu dengan tetesan minyak lainnya,
tetesan berair internal dapat dikeluarkan secara individual, lebih dari satu tetes
dapat dikeluarkan, butiran internal dapat menyatu sebelum dikeluarkan
menghasilkan penyusutan tetesan internal atau air dapat keluar dari fase eksternal
ke fase berair internal yang mengakibatkan pembengkakan tetesan internal diikuti
dengan pecahnya tetesan.
Pemeriksaan mikroskopis: Gambar mikroskopis dari berbagai formulasi
seperti yang ditunjukkan pada gambar dibawah ini:
 Nilai PH: Nilai pH kulit berkisar antara 5 dan 6, dan 5,5 dianggap sebagai
pH rata-rata kulit. Oleh karena itu, formulasi yang ditujukan untuk aplikasi kulit
harus memiliki nilai pH sekitar kisaran ini.
Efisiensi jebakan: Data efisiensi penjebakan ditunjukkan pada dibawah
ini:

Pelepasan obat in vitro Hasilnya menunjukkan lebih banyak pelepasan formulasi

F3 akan memiliki profil pelepasan yang lebih tinggi dibandingkan dengan
formulasi lain dan data ditampilkan dalam angka 9,10,11,12,13.
Potensi Zeta Laporan potensi zeta ditampilkan pada gambar dibawah ini:
KESIMPULAN
Beberapa emulsi telah diusulkan untuk memiliki banyak kegunaan
termasuk penggunaannya untuk peningkatan bioavailabilitas atau sebagai sistem
penghantaran obat yang berkepanjangan. Tetapi ketidakstabilan yang melekat
pada sistem ini perlu diatasi sebelum mereka menemukan aplikasi potensial dalam
obat-obatan. Beberapa emulsi sering distabilkan menggunakan kombinasi
surfaktan hidrofilik dan hidrofobik. Rasio surfaktan ini penting dalam mencapai
beberapa emulsi yang stabil. Valsartan memiliki bioavailabilitas rendah; beberapa
penelitian telah dilaporkan untuk peningkatan Bioavailabilitas obat yang larut
dalam air buruk dengan memformulasi sebagai emulsi ganda. Penelitian ini
didasarkan pada hipotesis bahwa peningkatan profil disolusi in vitro dan ex vivo
akan mencerminkan peningkatan bioavailabilitas obat.
Dapat disimpulkan bahwa bahwa beberapa emulsi dibuat menggunakan
valsartan dan surfaktan non-ionik seperti Tween80, span40, span60, span80
dengan metode emulsifikasi dua langkah. Profil pelepasan in vitro diterapkan
pada berbagai model kinetika berorde seperti orde pertama orde nol, persamaan
Higuchi, dan persamaan Peppas. Untuk mengetahui mekanisme pelepasan obat
dari beberapa emulsi. Kesesuaian terbaik dengan koefisien korelasi regresi
tertinggi ditemukan dengan orde nol konstanta laju dihitung dari kemiringan plot
masing-masing mekanisme pelepasan emulsi berganda. Valsartan yang dengan
demikian mengurangi frekuensi dosis, mengurangi efek samping dan
meningkatkan kepatuhan pasien.