Machine Translated by Google

Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722

www.elsevier.com/locate/bbamcr

Tinjauan

Pengangkut seng dan perdagangan seluler seng

ÿ
David J.Eide
Departemen Ilmu Gizi, Universitas Wisconsin-Madison, 1415 Linden Drive, Kamar 340B, Madison, WI 53706-1571, AS

Diterima 13 Desember 2005; diterima dalam bentuk revisi 8 Maret 2006; diterima 16 Maret 2006
Tersedia online 18 April 2006

Abstrak

Seng adalah nutrisi penting untuk semua organisme karena logam ini berfungsi sebagai kofaktor katalitik atau struktural untuk berbagai protein. Protein
yang bergantung seng ditemukan di sitoplasma dan di dalam banyak organel sel eukariotik termasuk nukleus, retikulum endoplasma, Golgi, vesikel sekretorik,
dan mitokondria. Dengan demikian, sel membutuhkan mekanisme transpor seng untuk memungkinkan sel mengakumulasi ion logam secara efisien dan
mendistribusikannya di dalam sel. Pengetahuan kami saat ini tentang sistem transportasi pada eukariota adalah fokus dari ulasan ini. ©
2006 Elsevier BV Semua hak dilindungi undang-undang.

Kata kunci: Seng; Sel biologi; pengangkut; RITSLETING; CDF

Seng adalah kofaktor penting yang diperlukan untuk struktur dan
fungsi banyak protein. Studi tentang biologi sel seng mungkin berasal
dari penemuan protein cytosolic metallothionein (MT) pengikat seng
oleh Margoshes dan Vallee pada tahun 1957 [1]. Selama lebih dari 30
tahun setelahnya, studi tentang MT oleh banyak laboratorium mewakili
bidang terdepan. Itu berubah secara dramatis pada pertengahan 1990-
an dengan penemuan pengangkut seng pertama yang bertanggung
jawab atas pergerakan seng melintasi membran sel. Studi selanjutnya
selama 10 tahun terakhir telah memberi tahu kami banyak tentang
transporter ini dan aspek molekuler dari biologi sel seng. Dalam ulasan
ini, saya akan memeriksa banyak dari wawasan baru ini. Saya pertama-
tama akan mempertimbangkan tingkat dan bentuk seng di dalam sel
dan kemudian membahas mekanisme di mana sel mengangkut seng
melintasi membran plasma mereka dan bagaimana seng bebas
intraseluler didistribusikan di antara berbagai organel intraseluler.
1. Kuota seng, proteom seng, dan seng bebas intraseluler
Berapa banyak seng yang dibutuhkan sel untuk berkembang?
Konsep "kuota seng" pertama kali diusulkan oleh T. O'Halloran [2].
Kuota seng didefinisikan sebagai kandungan seng total sel yang
dibutuhkan untuk pertumbuhan optimalnya. Di Escherichia coli, kuota sengnya
ÿ Tel.: +1 608 263 1613; faks: +1 608 262 5860.
Alamat email: eide@nutrisci.wisc.edu.
sekitar 105 atom seng per sel [2]. Kuota seng ragi diperkirakan sekitar
107 atom per sel sementara banyak jenis sel mamalia tumbuh dalam
budaya membutuhkan sekitar 108 atom per sel [3-5]. Pada nilai
nominal, angka-angka ini tampak sangat berbeda karena bervariasi
dalam tiga kali lipat.
Namun, ketika disesuaikan dengan volume dari jenis sel yang berbeda
ini, terdapat kemiripan yang luar biasa dalam konsentrasi seng; masing-
masing sesuai dengan konsentrasi seng seluler total 0,1-0,5 mM.
Perhitungan ini memperlakukan sel yang dibatasi oleh membran
plasmanya sebagai "kantong penyangga" yang homogen; jelas, ini
tidak benar dan seng didistribusikan ke berbagai tingkat di antara
organel subseluler seperti yang akan dibahas di bawah.
Meskipun demikian, perhitungan ini memberikan perkiraan konsentrasi
seng intraseluler.
Pasti ada tipe sel yang tidak sesuai dengan aturan ini. Misalnya,
beberapa jenis neuron dan sel prostat mengakumulasi kadar seng
yang lebih tinggi daripada jaringan lain, dan ini mencerminkan peran
khusus seng dalam jenis sel tertentu ini [6,7]. Namun, untuk sebagian
besar jenis sel, konsentrasi seng total tampaknya sangat mirip. Saya
mengusulkan bahwa kesamaan ini kemungkinan mencerminkan peran
seng yang dilestarikan dalam biokimia seluler. Data ini juga membuat
dua poin penting lainnya tentang biologi sel seng. Pertama, meski
sering disebut sebagai "elemen jejak", seng jelas bukan elemen jejak
dariadalah
sudut pandang sel [2]. Kedua, data ini menyoroti kemampuan sel
untuk mengakumulasi dan memusatkan ion logam ekstraseluler.
Misalnya, E. coli dan ragi dapat mengakumulasi seng

0167-4889/$ - lihat front matter © 2006 Elsevier BV Semua hak dilindungi undang-
undang. doi:10.1016/j.bbamcr.2006.03.005
Machine Translated by Google
712 DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
sebanyak 2000 kali lipat dari tingkat ekstraseluler yang tersedia [2,8].
Pada sebagian besar jenis sel yang tumbuh dalam kondisi normal,
sebagian besar seng intraseluler terikat pada protein dan berfungsi
dalam peran struktural atau katalitik yang penting. Saya menyebut
populasi metaloprotein seng ini sebagai "proteom seng". Sementara
proteom seng belum dipertimbangkan secara rinci di seluruh genom,
ada cukup informasi yang tersedia dari organisme model sehingga
kita dapat mengetahui di mana seng ini dikaitkan dan pada tingkat
apa. Dalam ragi, misalnya, protein pengikat seng utama meliputi Cu/
Zn superoksida dismutase (SOD) dan isozim inan utama dari alkohol
dehidrogenase (Adh1). Cu/Zn SOD terakumulasi menjadi sekitar 5 ×
105 molekul per sel sementara Adh1 terakumulasi menjadi sekitar 7,5
× 105 molekul per sel (terhitung 1,5 × 106 atom seng) [9,10]. Demikian
pula, enam atom seng terikat pada setiap ribosom dengan total 6 ×
105 atom seng ribosom per sel [11]. Tiga contoh ini saja menyumbang
hampir 20% dari total kuota seng sel ragi. Selain situs afinitas tinggi
ini, situs pengikat seng afinitas rendah berlimpah di dalam sel. Ini
termasuk situs pengikatan yang lebih lemah pada protein, lipid, dan
DNA serta senyawa dengan berat molekul kecil seperti anion organik
(misalnya sitrat), asam amino (misalnya histidin), dan glutathione.
Mengingat faktor-faktor ini, kemungkinan seng bebas hadir pada
tingkat yang sangat rendah di dalam sel. Istilah "bebas" di sini
digunakan untuk menentukan seng labil yang tersedia secara bebas
untuk diikat oleh metaloprotein seng yang baru disintesis. Upaya
untuk mengukur seng bebas dalam sel telah menghasilkan rentang
konsentrasi yang luas (10ÿ5 hingga 10ÿ12 M) bergantung pada
pendekatan yang digunakan [4,12–17]. Salah satu sumber variabilitas
ini adalah bahwa ekstrak sitosol yang digunakan untuk pengukuran
langsung dapat terkontaminasi dengan seng organel dan seng yang
dilepaskan dari situs protein selama preparasi sampel akibat oksidasi
atau proteolisis. Selain itu, studi yang menggunakan fluorofor responsif
seng sulit untuk ditafsirkan karena masalah yang terkait dengan
penggunaan probe fluoresen tingkat tinggi untuk mengukur genangan
kecil seng [18]. Oleh karena itu, kami masih belum memiliki gagasan
yang jelas tentang apa sebenarnya kadar seng bebas intraseluler itu.
Banyak metaloprotein seng memiliki afinitas pengikatan logam dalam
kisaran nM hingga pM, dengan alasan bahwa seng bebas juga berada
dalam kisaran tersebut [19-22]. Satu nM setara dengan sekitar 30
atom seng per sel ragi dan sekitar 300 atom dalam sel mamalia. Jika
prediksi ini benar, sungguh luar biasa betapa rendahnya seng bebas
ketika seng total begitu tinggi. Misalnya, seng bebas 1 nM setara
dengan kurang dari 0,001% dari total konsentrasi seng sel.
Perbandingan ini menyoroti kontrol yang tepat dari seng bebas di
dalam sel dan keseimbangan halus antara transportasi seng (yaitu,
serapan, penghabisan, dan sekuestrasi organel) dan pengikatan seng oleh dan keluar dariyang
Sebuah analisis terbaru dari afinitas faktor transkripsi seng-
responsif E. coli telah sering dikutip sebagai bukti tidak adanya seng
bebas dalam sel. Faktor-faktor ini, Zur dan ZntR, merespons seng
dalam kisaran femtomolar (10ÿ15 M) yang jauh lebih rendah daripada
konsentrasi satu atom seng dalam sel E. coli [2]. Hasil ini menunjukkan
bahwa Zn2+ bebas tidak digunakan dalam transaksi seng seluler.
Sebaliknya, para penulis ini menyarankan bahwa seng mungkin
diperdagangkan di dalam sel yang terikat pada metalochaperones,
seperti halnya tembaga [23-
25], yang mengirimkan seng langsung ke metaloprotein melalui
interaksi protein-protein spesifik. Meskipun secara formal
memungkinkan, saya percaya bahwa interpretasi ini tidak mungkin
karena dua alasan. Pertama, sulit membayangkan populasi protein
metallochaperone yang berfungsi untuk mengantarkan seng ke
ratusan protein seng berbeda yang ditemukan di dalam sel. Ini akan
menjadi investasi besar genom suatu organisme dan investasi
semacam itu belum ditemukan. Bisa dibayangkan bahwa
metallochaperones seng yang relatif sedikit masing-masing
mengirimkan logam ke banyak metaloprotein seng yang berbeda. Jika
demikian, seseorang akan memprediksi bahwa mekanisme umum
interaksi protein-protein akan dilestarikan di antara protein target dari
metallochaperone tertentu. Konservasi urutan yang mungkin diperlukan
untuk memungkinkan interaksi protein-protein ini belum diamati di
antara kelompok besar protein seng, misalnya protein jari seng. Jadi,
sementara beberapa protein seng mungkin menjadi prioritas tinggi
dan memiliki metalochaperone spesifik untuk mempertahankan
metalasi dalam kondisi seng rendah, tampaknya tidak mungkin bahwa
metalochaperone adalah mekanisme umum perdagangan seng.
Selain itu, interpretasi bahwa tidak ada seng bebas di dalam sel
berdasarkan data ini mengasumsikan bahwa sel berada dalam
kesetimbangan dengan lingkungannya. Ini jelas tidak berlaku untuk
sel hidup yang tunduk pada fluktuasi kondisi lingkungan, metabolisme
intraseluler, dan respons regulasi. Sebaliknya, apa yang tampaknya
lebih mungkin adalah bahwa sel-sel E. coli individu (dan mungkin jenis
sel lainnya) dengan cepat bersiklus antara periode defisiensi seng
intraseluler dan replesi seng. Misalnya, sel E. coli yang kekurangan
seng merespons dengan peningkatan ekspresi pengangkut serapan
seng dan penurunan ekspresi pengangkut penghabisan seng. Seng
yang memasuki sel kemudian akan mematikan ekspresi transporter
serapan dan menginduksi aktivitas transporter efluks. Karena respons
ini tidak seketika, sel akan mengakumulasi seng melebihi tingkat
permintaannya sebelum perubahan responsif seng dalam aktivitas
transporter dapat terjadi. Setelah pengambilan berhenti, akumulasi
kelebihan seng kemudian digunakan oleh metaloprotein seng yang
baru dibuat atau dikeluarkan dari sel. Setelah bolus seng intraseluler
habis, siklus dapat dimulai lagi. Dengan demikian, afinitas tinggi faktor
transkripsi seperti ZntR dan Zur untuk seng masih akan memungkinkan
fungsinya sebagai "saklar sakelar" bergantian antara keadaan
kekurangan dan penuh seng. Skenario ini memberikan satu penjelasan
alternatif sederhana tentang bagaimana faktor transkripsi dengan
afinitas femtomolar dapat mempertahankan homeostasis seng.
2. Keluarga pengangkut seng eukariotik
Penyerapan seng ke dalam sel dan pengangkutannya ke dalam
metaloprotein organel
baruintraseluler
disintesis. membutuhkan protein pengangkut
yang menjangkau membran ini untuk memfasilitasi pergerakan seng.
Pengangkut seng milik setidaknya 6 keluarga pengangkut yang berbeda.
Tiga di antaranya, pengangkut ABC, pengangkut RND, dan protein
CorA telah terlibat dalam pengangkutan seng pada bakteri tetapi tidak
pada eukariota [26] dan tidak akan dibahas di sini. Demikian pula,
beberapa ATPase tipe-P telah ditemukan berperan dalam transportasi
seng eukariotik. Pengangkut seng eukariotik yang diketahui sebagian
besar berasal dari dua keluarga, protein ZIP (SLC39) dan CDF/ZnT
(SLC30). Kedua keluarga ini akan menjadi
Machine Translated by Google

DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722 713

dijelaskan secara singkat di sini dan pembaca dirujuk ke ulasan Zip2 (SLC39A2) transporter bukan [34,35]. Penyerapan seng oleh
ÿ

terbaru lainnya untuk informasi tambahan [27-31].
2.1. Keluarga ZIP pengangkut seng
Keluarga ZIP (Zrt-, Irt-like Protein) dinamai berdasarkan protein
ragi Zrt1 dan protein Arabidopsis Irt1. Ini adalah anggota pertama
yang diidentifikasi dari keluarga ini. Anggota mamalia dari famili ini
telah diberi sebutan sistematis “SLC39” [30]. Fitur utama dari
keluarga ZIP adalah bahwa, tanpa pengecualian yang diketahui,
protein ini mengangkut seng dan/atau substrat ion logam lainnya
dari ruang ekstraseluler atau lumen organel ke dalam sitoplasma.
Pengangkut ZIP ditemukan di semua tingkat filogenetik termasuk
bakteri, jamur, tumbuhan, dan mamalia [32]. Sebagian besar
protein ZIP memiliki delapan domain transmembran yang diprediksi
dan topologi yang diprediksi serupa dengan N- dan C-termini dari
protein yang terletak di permukaan ekstrasitoplasma membran
(Gbr. 1). Banyak anggota juga memiliki wilayah loop panjang yang
terletak di antara domain transmembran 3 dan 4, dan urutan kaya
histidin sering ditemukan di loop TM3-4 ini. Fungsi dari domain ini
tidak jelas, tetapi kemampuan pengikatan logam potensial
menunjukkan beberapa fungsi dalam transportasi seng atau pengaturannya.
Namun, mutasi pada residu ini pada transporter Zrt1 ragi tidak
memiliki efek nyata pada fungsi transporter tetapi mengubah
lokalisasi subselular protein [33]. Mekanisme transportasi yang
digunakan oleh ZIP tidak jelas. Transportasi seng oleh protein Zrt1 di loop sitoplasma antara domain transmembran 4 dan 5. Domain
ragi bergantung pada energi saat manusia
transporter mamalia ini mungkin didorong oleh gradien HCO3 yang
ada melintasi membran sel [35].
2.2. Keluarga pengangkut seng CDF / Znt
Penunjukan CDF adalah singkatan dari "fasilitator difusi kation"
[36]. Anggota mamalia diberi nama "ZnT" dan diberi nama
sistematik SLC30 [31]. Fitur utama dari keluarga ini adalah bahwa
mereka mengangkut seng dan / atau ion logam lainnya dari
sitoplasma ke dalam lumen organel intraseluler atau ke luar sel.
Dengan demikian, protein CDF bekerja berlawanan dengan
transporter ZIP.
Transporter CDF juga ditemukan di semua tingkat filogenetik
[32]. Sebagian besar anggota keluarga ini memiliki enam domain
transmembran yang diprediksi (Gbr. 1). Pengecualian penting
untuk aturan ini adalah protein Msc2 dan Znt5 yang membentuk
kompleks heteromerik untuk mengangkut seng ke dalam
kompartemen jalur sekretori. Kedua protein ini memiliki motif
domain enam transmembran kanonik dari keluarga CDF di terminal-
C mereka dengan beberapa (6–9) domain transmembran
tambahan di terminal N mereka. Fungsi domain transmembran
tambahan ini tidak diketahui tetapi mungkin terkait dengan
bagaimana protein ini berinteraksi dengan pasangannya di
kompleks heteromerik. Seperti protein ZIP, banyak anggota
keluarga CDF memiliki motif kaya histidin, dalam hal ini biasanya
ini juga dapat mengikat logam selama transportasi. Menariknya,
varian sambatan dari protein CDF tanaman (TgMTP1) yang tidak
memiliki domain kaya-Nya ditemukan telah mengubah spesifisitas
substrat relatif terhadap protein panjang penuh [37].
Banyak protein CDF telah terlibat berfungsi sebagai dimer
homomerik atau kompleks orde tinggi. Ini termasuk protein Znt1,
PtdMtp1, Mtp1, FieF, dan Znt7 [4,38–42]. Seperti disebutkan di
atas, dua kompleks CDF heteromer juga telah diidentifikasi, Msc2
dalam kompleks dengan Zrg17 dan Znt5 terikat pada Znt6 [40,43].
Mekanisme transpor banyak protein CDF tampaknya melalui
antiport seng/H+ atau K+ . Protein Zrc1 ragi berfungsi sebagai
antiporter Zn/H+ sedangkan protein CzcD dari Ralstonia dapat
berfungsi sebagai antiporter H+ atau K+ [44-46]. Oleh karena itu,
terlepas dari namanya, protein CDF tidak berfungsi sebagai
fasilitator difusi melainkan sebagai transporter aktif sekunder,
menggunakan gradien ion lain untuk mendorong pengangkutan
seng.

3. Transportasi seng melintasi membran plasma dalam ragi

Langkah pertama dalam biologi sel seng adalah pengangkutan

Gambar 1. Prediksi topologi membran keluarga ZIP/SLC39 dan CDF/Znt/SLC30
dari pengangkut ion logam. Domain transmembran diberi nomor 1, 2, dst.
ion melintasi membran plasma ke dalam sel. Selama beberapa
tahun terakhir, banyak pengangkut berbeda telah diidentifikasi
yang memainkan peran ini dalam berbagai organisme dan jenis
sel. Sebagian besar adalah anggota keluarga ZIP pengangkut seng
dengan hanya beberapa pengecualian. Di antara eukariota,
identifikasi transporter seng membran plasma paling maju dalam
ragi Saccharomyces cerevisiae di mana setidaknya empat trans
porter berbeda terlibat dalam penyerapan seng oleh organisme
bersel tunggal ini (Gbr. 2). Sistem penyerapan utama untuk seng adalah
Machine Translated by Google

714 DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722

Gambar 2. Tinjauan transportasi seng dan perdagangan di ragi S. cerevisiae. Pengangkut keluarga ZIP ditampilkan dengan warna biru dan pengangkut keluarga CDF ditampilkan dengan warna merah.
Pengangkut hipotetis atau protein yang diketahui dari keluarga pengangkut lain ditampilkan dalam warna abu-abu. Aktivator transkripsional Zap1, ditampilkan dalam warna hitam, bertanggung jawab
atas pengaturan banyak gen target dalam sel yang terbatas seng. Zn2+ dalam vakuola kemungkinan terikat oleh beberapa ligan (L) untuk memudahkan penyimpanan.

Transporter Zrt1 dari keluarga ZIP yang dibutuhkan untuk pertumbuhan
dalam kondisi seng rendah [47]. Tingkat ekspresi Zrt1 naik diatur
oleh defisiensi seng pada tingkat transkripsi oleh protein aktivator
responsif seng Zap1 [48]. Ekspresi Zrt1 dalam sel yang terbatas seng
diinduksi sekitar 100 kali lipat di atas tingkat ekspresi penuh seng. Zrt1
memiliki afinitas yang sangat tinggi terhadap seng dengan perkiraan
Km semu sebesar 10 nM untuk ion Zn2+ bebas . Protein ZIP kedua,
Zrt2, memiliki afinitas yang lebih rendah terhadap seng bebas ( Km
nyata =ÿ100 nM) dan berperan dalam akuisisi seng dalam kondisi
yang membatasi seng [34]. Zrt2 diinduksi oleh Zap1 dalam kondisi
pembatasan seng ringan tetapi kemudian ditekan oleh Zap1 dalam
kondisi pembatasan seng yang lebih parah [49]. Pola regulasi yang
menarik ini melibatkan penempatan tiga situs pengikatan Zap1 di
dalam promotor.
Dua situs pengikatan terletak di hulu kotak TATA dan berfungsi untuk
mengaktifkan ekspresi gen. Situs pengikatan ketiga terletak di hilir
TATA di dekat situs awal transkripsi, dan pengikatan Zap1 di situs ini
memblokir transkripsi Zrt2.
Inaktivasi mutasi Zrt1 dan Zrt2 mengungkapkan adanya sistem
serapan seng tambahan dengan afinitas yang lebih rendah.
Salah satu sistem tersebut ditemukan sebagai transporter Fet4 yang
terlibat dalam serapan besi dan tembaga serta seng dengan afinitas
rendah [50]. Fet4 bukanlah protein ZIP dan, yang mengejutkan, protein
terkait Fet4 hanya ditemukan pada jamur Ascomycete seperti S.
cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Candida albicans dan
Aspergillus fumigatus. Sistem keempat penyerapan seng dalam ragi
kemungkinan adalah transporter fosfat afinitas tinggi Pho84 [51].
Pho84 adalah anggota superfamili fasilitator utama transporter [52].
Mutasi gen PHO84 memberikan toleransi seng dan mengurangi
akumulasi seng yang konsisten dengan kemampuan Pho84 untuk
mengangkut seng selain fosfat.
Meskipun cenderung memiliki afinitas seng yang rendah, sistem ini
sangat diinduksi oleh batasan fosfat sehingga dapat berperan lebih
peran penting dalam homeostasis seng di bawah kondisi pertumbuhan
fosfat rendah [53].
4. Transporter serapan seng membran plasma pada organisme lain
Banyak pengangkut serapan seng telah diidentifikasi pada
organisme lain selama beberapa tahun terakhir. Keterbatasan ruang
mencegah penghitungan penuh penemuan ini, jadi saya akan fokus di
sini pada kemajuan terbaru di bidang pengangkut serapan seng
mamalia dengan permintaan maaf kepada rekan yang mempelajari
jenis organisme lain. Ada 14 anggota keluarga ZIP yang diketahui
dikodekan oleh genom manusia [30]. Transporter Zip1/SLC39A1
diekspresikan di mana-mana dalam jaringan tikus dan manusia [54,55].
Protein ini kemungkinan berperan dalam penyerapan seng oleh
banyak jenis sel. Zip1 telah terbukti menjadi sistem serapan seng
utama dalam sel eritroleukemia K562 dan sel prostat [54,56,57]. Zip1
terlokalisasi pada membran plasma pada beberapa tipe sel tetapi tidak
pada yang lain mungkin karena regulasi yang responsif terhadap seng
dari lokalisasi subselular protein ini [54,58]. Dalam sel yang kekurangan
seng, Zip1 bermigrasi ke membran plasma sementara itu ditemukan
terkait dengan kompartemen intraseluler dalam sel yang penuh seng
[59]. Selain Zip1, protein Zip2/SLC39A2 dan Zip3/SLC39A3 juga
terlibat dalam penyerapan seng oleh sel mamalia [35,60,61]. Lebih
khusus lagi, Zip3 telah terlibat dalam penyerapan seng oleh sel epitel
mammae untuk memasok seng ke susu [62,63].
Protein Zip4/SLC39A4 telah ditemukan sebagai transporter penting
untuk perolehan seng dari makanan.
Peran Zip4 dalam penyerapan seng makanan ini pertama kali
ditemukan oleh dua kelompok yang penelitiannya mengaitkan mutasi
pada gen SLC39A4 dengan penyakit genetik manusia, acrodermatitis
enteropathica (AE) [64-66]. AE adalah gangguan resesif penyerapan makanan.
Machine Translated by Google
DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
Pasien dengan AE ditemukan memiliki mutasi pada gen SLC39A4 yang
mengganggu fungsi transportasi seng protein [67].
Konsisten dengan tindakan yang diusulkan dalam penyerapan seng diet,
protein Zip4 terlokalisasi ke permukaan apikal (usus lumenal) enterosit
usus [60]. Selain itu, ekspresi Zip4 pada kantung kuning telur visceral
mencit menunjukkan bahwa protein ini juga dapat mengantarkan seng
ibu ke janin yang sedang berkembang [60]. Jelas bahwa Zip4 bukan satu-
satunya pengangkut seng yang bertanggung jawab atas penyerapan
seng dalam makanan. Banyak mutasi AE benar-benar mengganggu
fungsi transporter [67]. Meskipun demikian, AE umumnya menyerang
bayi dan bukan orang dewasa yang menunjukkan bahwa pengangkut
lain memainkan peran utama dalam penyerapan seng setelah masa
bayi. Selain itu, suplemen seng dengan mudah menekan gejala AE pada
bayi yang menunjukkan adanya transporter lain di permukaan apikal
enterosit. Protein Zip1 atau ZIP lain juga dapat berpartisipasi dalam
penyerapan seng makanan.
Berbeda dengan Zip4, protein Zip5/SLC39A5 diekspresikan pada
permukaan basolateral enterosit usus [68,69].
Oleh karena itu, sementara Zip4 bertanggung jawab atas penyerapan
seng dari usus, Zip5 dapat memediasi pengangkutan seng dari aliran
darah ke enterosit. Aktivitas Zip5 ini dapat melayani dua fungsi.
Pertama, Zip5 dapat mengirimkan seng yang dibutuhkan dari simpanan
tubuh ke enterosit saat tingkat makanan rendah. Sebagai alternatif, Zip5
dapat mengangkut seng ke dalam enterosit sebagai sarana untuk
mengomunikasikan kadar seng serum ke enterosit untuk mengontrol
tingkat penyerapan seng dari makanan.
Sebagai contoh terakhir, sebuah studi baru-baru ini menunjukkan
peran ZIP lain, Zip14/SLC39A14, dalam penyerapan seng ke dalam hati
sebagai respons terhadap peradangan dan infeksi akut [70-72].
Dalam kondisi ini, kadar seng serum turun dan kadar hati meningkat
dalam upaya yang mungkin untuk menahan nutrisi logam esensial ini
dari patogen yang menyerang. Ekspresi Zip14 di hati diinduksi sebagai
respons terhadap interleukin-6 (IL-6) selama respons fase akut. Hasil ini
menunjukkan bahwa induksi Zip14 oleh IL-6 bertanggung jawab atas
hipozinkemia serum yang terkait dengan infeksi.
5. Pengangkut penghabisan seng membran plasma
Transporter penghabisan membran plasma adalah komponen
penting dari homeostasis seng seluler dan organisme di banyak
organisme. Transporter ini memediasi penghabisan seng intraseluler
untuk mencegah akumulasi ion logam seluler yang berlebihan sehingga
menyelamatkan sel dari konsekuensi toksik kelebihan seng. Selain itu,
sistem penghabisan seng sangat penting untuk pergerakan seng
melintasi lapisan sel epitel terpolarisasi. Misalnya, selama penyerapan
seng di usus, resorpsi seng di ginjal, dan selama perkembangan embrio,
pengiriman seng ke aliran darah atau embrio bergantung pada
penyerapan seng pada satu permukaan sel epitel terpolarisasi dan
penghabisan sel epitel selanjutnya. logam di sisi lain sel tersebut.
Penghabisan seng adalah komponen penting dari homeostasis seng
di E. coli dan banyak bakteri lainnya [26]. Di antara eukariota, ragi
mungkin tidak biasa karena tidak memiliki sistem penghabisan seng. Sel-
sel ini mengangkut kelebihan seng ke dalam organel intraseluler untuk
penyimpanan dan detoksifikasi seng daripada melepaskan seng itu dari
sel (lihat di bawah). Dalam sel mamalia, anggota keluarga CDF
715
Znt1/SLC30A1 telah terlibat dalam pengeluaran seng untuk homeostasis
seng seluler dan perdagangan seng trans-epitel [4,73-75]. Peran
pengangkut penghabisan seng dalam homeostasis seng seluler mungkin
sangat penting di otak di mana kadar seng yang tinggi terakumulasi oleh
neuron setelah iskemia atau serangan epilepsi [73,76]. Pada tanaman,
protein CDF TgMtp1 dari Thlaspi goesense dan transporter Arabidopsis
Hma2 dan Hma4 dari keluarga ATPase tipe-P telah terlibat dalam
penghabisan membran plasma seng dari jaringan pembuluh darah akar,
batang, dan daun [77-79 ] .
6. Transportasi seng masuk dan keluar dari organel intraseluler
6.1. Jalur sekresi
Banyak metaloprotein seng disekresikan atau menetap di dalam jalur
sekretori. Contoh penting dari protein yang disekresikan yang
membutuhkan seng adalah matrix metalloproteases (MMPs). Aktivitas
proteolitik dari protein yang disekresikan ini diperlukan untuk proses
perkembangan seperti percabangan organ, morfogenesis, angiogenesis,
dan remodeling matriks ekstraseluler [80].
MMP juga memainkan peran penting dalam perkembangan dan
metastasis kanker dengan memungkinkan migrasi sel ke dalam jaringan
dan dengan mempromosikan angiogenesis dan vaskularisasi tumor.
Alkali fosfatase yang disekresikan juga bergantung pada seng [72].
Selain itu, lumen RE adalah tempat untuk pelipatan awal dan modifikasi
protein pasca-translasi yang ditujukan untuk sekresi atau tempat tinggal
dalam jalur sekretori, dan banyak dari proses ini bergantung pada seng.
Misalnya, glycosylpho sphatidylinositol phosphoethanolamine
transferases (GPI PETs) dalam retikulum endoplasma berperan dalam
biosintesis jangkar GPI yang menempelkan banyak protein ke permukaan
sel. PET GPI memiliki motif pengikatan seng yang serupa dengan yang
ditemukan pada alkalin fosfatase [81] dan, baik pada mamalia maupun
ragi, membutuhkan seng untuk fungsinya [82,83]. Homolog DnaJ ragi
Scj1 adalah co-chaperone protein di ER yang mengandung dua jari seng
dan membutuhkan seng untuk fungsinya [84]. Mengganggu fungsi Scj1
menyebabkan cacat pada pelipatan protein dan degradasi protein
menyimpang yang kurang efektif oleh mekanisme kontrol kualitas ER
[85].
Demikian pula, calnexin pendamping ER dan calreticulin membutuhkan
seng untuk interaksi mereka dengan ERp57 tiol oksidoreduktase [86].
Pendamping ini diperlukan untuk glikosilasi glikoprotein yang disekresikan
dan lumenal.
Golgi juga mengandung protein residen yang bergantung pada seng.
Misalnya, pembelahan protein Aÿ penyakit Alzheimer dari protein
prekursor amiloid di Golgi bergantung pada metalloprotease seng di
kompartemen itu [87]. Pengemasan insulin dalam butiran sekretori
bergantung pada seng. Insulin dikemas dalam struktur kristal dalam
vesikel ini dengan 2:1 Zn: stoikiometri insulin [88] (lihat di bawah).
Heksamerisasi proinsulin yang terjadi di Golgi, langkah awal dalam
pembentukan kristal Zn:insulin, juga bergantung pada seng [89].
Ada sangat sedikit informasi mengenai di mana di jalur sekretori seng
dikirim ke residen spesifik dan apoprotein yang disekresikan. Persyaratan
seng protein ER lumenal seperti pendamping seperti DnaJ dan GPI-PET
menunjukkan
Machine Translated by Google
716 DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
bahwa beberapa metalasi terjadi di UGD. Studi pengolahan insulin
menunjukkan bahwa beberapa seng dikirim ke kompartemen cis
aparatus Golgi [89]. Penggoda matriks metallopro, yang dihambat
oleh domain represi intramolekul, dapat diaktifkan di Golgi dengan
penghilangan proteolitik dari daerah penghambatan ini [90,91]. Karena
aktivitas MMP bergantung pada seng, pengamatan ini secara tidak
langsung menunjukkan bahwa seng terikat pada protein ini pada saat
mencapai Golgi. Dengan demikian, beberapa contoh ini menunjukkan
bahwa seng dikirim ke UGD dan kompartemen Golgi oleh protein
pengangkut seng.
Transporter seng yang bertanggung jawab untuk pengiriman seng
ke jalur sekretori telah diidentifikasi baru-baru ini, dan protein ini milik
keluarga CDF. Misalnya, dalam ragi, kompleks Msc2/Zrg17 heteromer
memediasi transpor seng ke ER [43,92,93] (Gbr. 2). Inaktivasi mutasi
salah satu atau kedua subunit kompleks ini menghasilkan defek
pleiotropik pada fungsi ER, termasuk induksi Unfolded Protein
Response (UPR) dan defek pada degradasi protein terkait ER.
Biogenesis dinding sel, suatu proses yang sangat bergantung pada
fungsi jalur sekretori, juga kemungkinan akan terganggu pada mutan
msc2 atau zrg17.
Kompleks transporter Msc2/Zrg17 penting untuk pengangkutan
seng ke UGD dalam kondisi seng rendah. Ketika kadar seng yang
lebih tinggi disediakan dalam medium, fenotipe mutannya benar-benar
ditekan. Ini menunjukkan bahwa ada mekanisme transportasi lain
untuk memasok seng ke UGD. Pengangkut CDF vakuolar Zrc1 dan
Cot1 (lihat di bawah) terbukti berkontribusi pada seng ER [92]. Protein
ini mungkin aktif dalam jalur sekresi awal segera setelah sintesisnya
dan sebelum berpindah ke vakuola. Anehnya, dalam mutan yang
terganggu untuk Msc2, Zrg17, Zrc1 dan Cot1, peningkatan seng
eksogen masih dapat menekan cacat pada fungsi ER. Dengan
demikian, jalur tambahan transportasi seng ER ada di ragi.
Pasokan seng ke Golgi dapat terjadi melalui perdagangan vesikuler
seng ER ke kompartemen tersebut. Atau, pengangkut seng juga dapat
aktif di Golgi. Dalam ragi, tidak semua kompleks Msc2/Zrg17
terlokalisasi ke ER yang menunjukkan bahwa beberapa fraksi mungkin
ada di Golgi. Pada sel vertebrata, kompleks Znt5/Znt6 terlokalisasi ke
Golgi dan diperlukan untuk mensuplai zinc ke alkaline phosphatase
dan mungkin ke protein zinc yang disekresikan lainnya [94-96].
Sebaliknya, protein Znt7/SLC30A7, yang juga terlokalisasi ke Golgi,
membentuk homo oligomer dan juga mengangkut seng ke Golgi
[40,97]. Sampai saat ini, tidak ada transporter CDF yang telah
dilokalkan secara khusus ke UGD pada vertebrata. Ini sangat kontras
dengan ragi di mana Msc2 dan Zrg17 sebagian besar terlokalisasi ke
UGD. Pasokan seng ke UGD dalam sel vertebrata mungkin melibatkan
aktivitas pengangkutan transporter yang terlokalisasi Golgi saat mereka
transit melalui UGD seperti yang diusulkan di atas untuk pengangkut
seng vakuolar ragi. Alternatifnya, perdagangan vesikuler retrograde
dari Golgi ke ER dapat membawa seng labil kembali ke UGD untuk
fungsi metaloprotein di kompartemen tersebut. Perdagangan ion
retrograde serupa telah diusulkan untuk Ca2+ [98].
Seng juga dapat diekspor dari Golgi. Protein Zip7/SLC39A7
mamalia terlokalisasi ke Golgi dan tampaknya memediasi transportasi
jalur sekretori seng kembali ke sitoplasma [99]. Ini mungkin sarana
untuk memulihkan seng yang tidak terpakai
dalam jalur sekretori sebelum kehilangannya oleh sekresi. Tidak jelas
apakah S. cerevisiae menggunakan strategi serupa tetapi transporter
ZIP ragi yang terkait dengan Zip7, yang disebut Yke4, dapat memenuhi
fungsi ini.
Akhirnya, vesikel sekretorik dari berbagai jenis juga telah terbukti
mengandung pengangkut seng di dalam membrannya. Misalnya,
protein Znt4/SLC30A4 diperlukan untuk transfer seng ke susu; cacat
mutasi pada Znt4 menyebabkan fenotip susu yang mematikan pada
tikus [100]. Transporter ini terlokalisasi pada vesikel dalam sel yang
mungkin terlibat dalam sekresi seng [101,102]. Demikian pula,
transporter Znt3/SLC30A3 terlokalisasi ke vesikel sinaptik pada jenis
neuron tertentu yang melepaskan seng tingkat tinggi bersama dengan
neurotransmiter seperti glutamat [103,104]. Menariknya, kumpulan
seng sinaptik mungkin merupakan faktor penting dalam perkembangan
penyakit Alzheimer seperti yang ditunjukkan menggunakan model
tikus dari penyakit ini [105]. Akhirnya, transporter Znt8/SLC30A8
dikaitkan dengan butiran sekretori sel ÿ pankreas [106,107]. Znt8
kemungkinan memasok seng yang dibutuhkan untuk pengemasan
insulin dalam butiran ini seperti yang dijelaskan di atas.
6.2. Vakuola jamur dan tumbuhan
Vakuola ragi dan tanaman berfungsi sebagai tempat utama
penyerapan seng dan detoksifikasi [108-110] (Gbr. 3). Misalnya, pada
S. cerevisiae, sel tipe liar dapat mentolerir konsentrasi seng eksogen
setinggi 5 mM. Ketika sistem transportasi untuk sekuestrasi seng
vakuolar terganggu (lihat di bawah), tingkat maksimum seng yang
dapat ditoleransi oleh sel turun ÿ100 kali lipat [3.111–113].
Paparan kronis terhadap seng pada tingkat milimolar yang dapat
ditoleransi oleh sel tipe liar tidak sering ditemui oleh ragi yang tumbuh
di lingkungan normalnya. Dengan demikian, urutan vacuolar
cenderung lebih penting bagi sel untuk pertumbuhan dalam kondisi
lain. Salah satu kondisi tersebut adalah "syok seng". Kejutan seng
terjadi ketika sel tumbuh di bawah kondisi yang membatasi seng dan
kemudian disuplai kembali dengan seng tingkat rendah.
Sel-sel yang kekurangan seng siap untuk mengakumulasi seng dalam
jumlah besar karena pengaturan yang meningkat dari transporter
membran plasma Zrt1. Ketika dipasok kembali dengan seng, sel-sel
ini mengakumulasi ion logam dalam jumlah besar sebelum mekanisme
transkripsi dan pasca-translasi yang mengatur Zrt1 dapat mematikan
penyerapan tambahan. Kami telah menunjukkan bahwa sel mutan
yang tidak dapat menyerap seng dalam vakuola selama syok seng
sensitif terhadap konsentrasi seng serendah 0,1 ÿM [114].
Mengingat bahwa sel mikroba yang tumbuh di lingkungan hidup
dengan ketersediaan nutrisi sporadis, kami percaya fungsi utama
vakuola dalam detoksifikasi seng adalah selama syok seng yang
disebabkan oleh fluktuasi ketersediaan seng.
Seng diasingkan dalam vakuola juga berfungsi sebagai kumpulan
penyimpanan seng yang dapat dimobilisasi dalam kondisi kekurangan
seng untuk digunakan oleh sel. Hasil terbaru kami menunjukkan bahwa
seng dapat terakumulasi dalam vakuola hingga tingkat milimolar (C.
Simm, A. LeFurgey, P. Ingram, dan D. Eide, pengamatan tidak
dipublikasikan). Ini adalah tingkat seng yang cukup untuk mendukung
banyak generasi sel ragi tanpa adanya pasokan eksogen.
Penyerapan seng ke dalam vakuola ragi dimediasi oleh dua anggota
Machine Translated by Google
DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
Gambar 3. Akumulasi seng dalam vakuola ragi. Fluorophore FuraZin-1 acetoxymethyl ester yang responsif terhadap seng dimasukkan ke dalam vakuola sel tipe liar
terbatas seng. Sel-sel ini kemudian dirawat dengan seng dan sinyal fluorofor dideteksi dengan epifluoresensi (Epi). Optik Nomarski (Nom) menunjukkan vakuola ragi
besar yang ada di banyak sel dan overlay gambar menunjukkan lokalisasi fluorofor ke vakuola. FuraZin-1 adalah probe yang berguna untuk deteksi kualitatif seng
vakuolar dalam ragi [114].
dari keluarga CDF, Zrc1 dan Cot1 (Gbr. 2). Zrc1 telah terbukti menjadi
antiporter Zn2+/H+ yang memungkinkan akumulasi seng dalam vakuola
didorong oleh gradien konsentrasi proton yang disediakan oleh H+
-ATPase vakuolar [44]. Protein Cot1 dapat bertindak dengan cara yang
sama, meskipun sifat biokimianya belum dianalisis. Pelepasan seng ke
sitosol dalam kondisi defisiensi seng dimediasi oleh Zrt3, anggota
keluarga pengangkut ZIP [3]. Ekspresi Zrt3 diatur dalam kondisi seng
rendah untuk memfasilitasi mobilisasi seng vakuolar ini.
Berbeda dengan S. cerevisiae, UGD mungkin merupakan tempat
utama detoksifikasi dan penyimpanan seng dalam ragi fisi, Schizosacchar
omyces pombe. Protein S. pombe Zhf dari keluarga CDF terlokalisasi ke
ER dan mutasi pada gennya menghasilkan penurunan akumulasi seng
seluler dan sensitivitas seng [115]. Efek ini mirip dengan yang terlihat
pada mutan zrc1 dan cot1 dari S. cerevisiae dan tidak teramati pada
mutan msc2 atau zrg17.
Pada tumbuhan, anggota keluarga pengangkut CDF telah terlibat
dalam akumulasi seng vakuolar. Misalnya, protein Arabidopsis Mtp1 telah
terlokalisasi pada membran vakuolar pucuk dan sel daun dan dapat
mengangkut seng ketika diekspresikan dalam oosit Xenopus laevis.
Ekspresi Mtp1 yang berkurang menghasilkan sensitivitas seng dan
akumulasi seng yang lebih rendah dalam jaringan tanaman [116-118].
Protein nabati yang bertanggung jawab untuk memobilisasi seng vakuolar
belum diidentifikasi. Namun, ada beberapa anggota keluarga ZIP yang
dikodekan oleh genom tanaman. Sebagai contoh, Arabidopsis memiliki
11 gen ZIP, dan satu atau lebih gen tersebut mungkin memainkan peran
yang analog dengan ragi Zrt3 [29].
Seng yang disimpan dalam vakuola mungkin tidak terakumulasi
sebagai ion Zn2+ bebas . Analisis spektroskopi serapan sinar-X dari seng
vakuolar pada tanaman menunjukkan bahwa Zn2+ justru terakumulasi
terikat pada anion organik. Misalnya, pada Arabidopsis halleri, spesies
tanaman yang mampu mengakumulasi seng dalam jumlah besar, logam
tersebut ditemukan kompleks terutama dengan fosfat dan/atau asam
organik seperti malat dan sitrat tergantung pada kondisi pertumbuhan
dan jaringan tanaman yang diperiksa [119 ] . Hasil serupa diperoleh
dengan Thlaspi caerulescens, spesies tanaman hiperakumulasi seng
lainnya [120]. Mengikat seng vakuolar oleh senyawa tersebut
717
dapat menyediakan sarana untuk mengumpulkan seng dalam jumlah
besar di dalam kompartemen vakuolar untuk penyimpanan dan detoksifikasi.
Demikian pula, tingkat glutamat dalam vesikel sinaptik sebanding dengan
akumulasi seng mereka, menunjukkan bahwa anion mempengaruhi
kapasitas pemuatan seng vesikel [121].
Tidak jelas saat ini apakah seng vakuolar dalam ragi juga terikat pada
anion di dalam vakuola, tetapi tampaknya ada kemungkinan.
6.3. Zincosom
Tempat penyimpanan vesikular untuk seng juga dapat ditemukan
pada sel mamalia. Beberapa studi telah menggunakan fluorophores seng-
responsif (misalnya, TSQ, zinquin, Zinpyr-1) untuk memeriksa distribusi
seng intraseluler labil [93,102,122-127]. Studi-studi ini secara konsisten
menunjukkan bahwa seng labil dapat dideteksi dalam vesikel yang terikat
membran dalam berbagai jenis sel mamalia. Vesikel-vesikel ini disebut
“zinkosom” [128.129], sebuah istilah yang akan saya gunakan di sini
untuk kenyamanan. Namun, hubungan zinkosom dengan organel yang
terbentuk tidak jelas. Palmiter dan rekannya menunjukkan bahwa,
setidaknya dalam satu jenis sel, vesikel yang mengandung seng ini
adalah endosom akhir [122.130]. Apakah sengosom sesuai dengan
endosom akhir di sel lain masih harus diuji.
Zincosomes juga telah diamati pada ragi [93.131]. Seperti yang
ditunjukkan pada Gambar. 4, sengosom terakumulasi dalam sel ragi
yang diberi seng. Akumulasi ini bergantung pada transporter serapan
seng Zrt1 tetapi tidak pada transporter seng vakuolar Zrc1 atau Cot1 juga
tidak bergantung pada endositosis [131]. Studi lokalisasi Co menunjukkan
bahwa zincosomes ragi tidak sesuai dengan vakuola, Golgi atau
kompartemen prevacuolar (C. MacDiarmid dan DE, hasil tidak
dipublikasikan). Dengan demikian, identitas dan fungsi dari kompartemen-
kompartemen tersebut masih belum diketahui.
Apa fungsi zinkosom dalam metabolisme dan homeostasis seng?
Beberapa penelitian menyarankan peran dalam mendetoksifikasi
kelebihan seng [122]. Misalnya, merawat sel ginjal bayi hamster dengan
seng yang tinggi sangat meningkatkan jumlah dan intensitas fluoresensi
vesikel, yang menunjukkan peningkatan kadar seng vesikular. Selain itu,
vesikel pewarnaan zinquin
Machine Translated by Google
718 DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
Gambar 4. Deteksi zinkosom ragi. Zinquin fluorofor yang responsif terhadap seng
dimasukkan ke dalam tipe liar terbatas seng atau sel ragi mutan. Sel-sel ini kemudian
dirawat dengan seng (100 ÿM selama 10 menit) dan sinyal fluorofor yang responsif
terhadap seng dideteksi oleh epifluoresensi (Epi). Optik Nomarski (Nom) menunjukkan
vakuola ragi besar yang ada di banyak sel. Pewarnaan zinquin tidak melokalisasi
bersama dengan vakuola. Sel tipe liar yang tidak dirawat (ditunjuk WT -zinc)
ditampilkan untuk perbandingan. Zinquin disediakan dengan baik oleh T. O'Halloran.
dilokalkan bersama dengan transporter seng Znt2/SLC30A2, sebuah
transporter CDF, yang ekspresinya diketahui memberikan toleransi seng.
Juga telah dicatat bahwa agen stres, seperti oksida nitrat (NO),
meningkatkan kadar seng labil mungkin karena pelepasan seng dari
protein [16,127-129,132]. Seng labil yang baru dirilis ini kemudian
terakumulasi dalam zincosomes. Dengan demikian, zincosome dapat
berfungsi untuk menyangga seng sitosol dari gangguan sementara
homeostasis seng seperti halnya vakuola dalam ragi. Studi lain
melibatkan zincosomes dalam penyimpanan seng yang nantinya dapat
dimobilisasi di bawah defisiensi seng. Misalnya, kandungan seng total
sel, dan intensitas fluoresensi vesikel pewarnaan zinquin semuanya
menurun ketika sel HL60 [133] atau hepatosit tikus [16] dipindahkan
dari seng penuh ke media kultur seng rendah. Hasil ini menunjukkan
bahwa seng telah disimpan dalam vesikel dan dimobilisasi untuk
digunakan selama masa transisi ini.
6.4. Mitokondria
Seng diperlukan dalam matriks mitokondria untuk fungsi protein di
dalam kompartemen tersebut. Dalam ragi, ini termasuk alkohol
dehidrogenase 3 (Adh3) yang mengubah asetaldehida menjadi etanol
sebagai sarana untuk mengangkut NADH melintasi membran dalam
[134]. Protein Leu4, alfa isopropilmalat sintase, memediasi langkah
pertama sintesis leusin. Leu4 ditemukan dalam matriks dan merupakan
metaloenzim seng [135]. Zim17 adalah protein matriks jari seng yang
diperlukan untuk impor protein [136]. Akhirnya, seng labil bisa
terdeteksi di mitokondria sel saraf mamalia menggunakan fluorofor
seng-responsif, RhodZin-3 [137].
Studi lebih lanjut oleh para penulis ini menunjukkan bahwa seng
mitokondria dalam neuron ditahan di kompartemen itu oleh potensial
membran mitokondria [138]. Gangguan potensi membran itu
menghasilkan pelepasan seng ke sitosol. Pelepasan seng labil
mitokondria ini dapat menjadi penyebab kematian sel saraf selama
iskemia atau epilepsi [139].
Contoh-contoh ini menunjukkan bahwa mekanisme harus ada untuk
memasukkan seng ke dalam mitokondria. Seng pertama-tama harus
melintasi membran luar, kemungkinan besar melalui saluran porin.
Kemudian, seng harus melewati membran dalam melalui protein pengangkut.
Studi sebelumnya menunjukkan bahwa seng dapat memasuki matriks
dria mitokondria melalui sistem uniporter Ca2+ . Sebagai contoh,
rhuthenium red, penghambat uniporter Ca2+ , melindungi mitokondria
dari efek buruk seng tinggi [140-142]. Namun, studi ini tidak memberikan
bukti langsung untuk serapan Zn2+ mitokondria .
Sebuah studi baru-baru ini tentang mitokondria otak tikus oleh
Reynolds dan rekannya menggunakan metode untuk secara langsung
memvisualisasikan akumulasi seng mitokondria menunjukkan jalur
Ca2+ yang bergantung pada uniporter dan tidak bergantung pada
uniporter [143]. Penyerapan seng sebagian tergantung pada potensi
membran mitokondria, dan aktivitas transporter ditemukan memiliki
afinitas tinggi dengan Km ÿ1 ÿM. Nilai ini mungkin terlalu tinggi dari nilai
Km sebenarnya karena pengikatan substrat oleh anion organik dalam
buffer uji pengambilan (glutamat, malat) tidak dipertimbangkan. Dengan
demikian, afinitas transporter ini cenderung lebih tinggi dan karena itu
dalam kisaran yang relevan secara fisiologis. Studi-studi ini juga
mendeteksi penghabisan seng dari mitokondria.
Apa substrat untuk pengangkut masuknya seng mitokondria?
Apakah substrat Zn2+ bebas, atau dapatkah kompleks seng-khelat
berfungsi sebagai substrat? Sebuah studi menarik yang membahas
pertanyaan ini baru-baru ini diterbitkan oleh Costello dan rekan [144].
Studi in vitro penyerapan seng ke dalam mitokondria yang diisolasi dari
sel prostat tikus mengungkapkan aktivitas transporter seng mitokondria
dengan Km sekitar 60 ÿM saat diuji menggunakan 65Zn yang disuplai
sebagai ZnCl2. Km setinggi itu berpendapat bahwa sistem ini tidak
mungkin relevan secara fisiologis. Anehnya, bagaimanapun, ditemukan
bahwa beberapa seng-khelat termasuk seng-sitrat, seng-aspartat, dan
seng histidin juga memiliki Km serupa untuk transportasi seperti yang
diamati dengan ZnCl2. Senyawa ini dapat mengikat seng relatif erat
dan dengan demikian mengurangi Zn2+ bebas yang tersedia untuk
transportasi. Fakta bahwa chelator ini tidak menghambat penyerapan
seng meskipun kemampuannya untuk mengurangi seng bebas
menunjukkan bahwa pengangkutan dapat terjadi melalui reaksi
pertukaran ligan antara kompleks seng-kelat dan pengangkut. Hipotesis
ini didukung oleh pengamatan bahwa seng melintasi membran
sementara chelator tidak [144]. Atau, telah diusulkan bahwa
metallothionein dapat berfungsi sebagai salah satu sumber seng untuk
penyerapan ke matriks mitokondria. MT dapat dideteksi di ruang
intermembran mitokondria [145], dan seng yang disuplai MT dapat
diambil ke dalam mitokondria terisolasi in vitro [146].
Machine Translated by Google
DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
7. Arah masa depan untuk studi biologi sel seng
Dalam ulasan ini, saya telah berusaha memberikan gambaran
tentang pengetahuan kita saat ini tentang biologi sel seng. Apa yang
mungkin paling jelas dari diskusi ini adalah semua yang belum kita ketahui.
Jelas, beberapa pertanyaan yang sangat penting masih perlu
ditangani. Pertama, apa bentuk seng labil intraseluler, dan bagaimana
seng itu dikirim ke metaloprotein seng? Apakah ada metalloprotein
seng yang mendapatkan sengnya dari metallochaperone?
Selain itu, apa mekanisme biokimia yang digunakan oleh protein ZIP
dan CDF untuk memediasi transpor seng melintasi membran sel?
Meskipun kami memiliki beberapa indikasi tentang cara kerja protein
CDF, kami masih belum mengetahui tentang ZIP. Apa berbagai fungsi
dari banyak anggota keluarga ini yang ditemukan pada organisme?
Misalnya, genom manusia mengkodekan 14 ZIP dan 9 CDF. Apa
yang dilakukan semua protein ini?
Bahkan dalam ragi yang relatif sederhana, kita masih belum mengetahui
fungsi dari semua protein ZIP dan CDF. Selain itu, kami masih
mempelajari peran baru untuk protein pengangkut yang dikarakterisasi
sebelumnya. Bagaimana seng masuk dan keluar dari mitokondria dan
organel lainnya? Kami memiliki gambaran yang berkembang, tetapi
masih sangat tidak lengkap. Apa itu "zincosomes" dan bagaimana
mereka berpartisipasi dalam homeostasis dan perdagangan seng?
Akhirnya, meskipun berada di luar cakupan ulasan ini, kita perlu
mempertimbangkan bagaimana berbagai sistem transportasi dan
perdagangan diatur oleh ketersediaan seng, kebutuhan metabolik untuk
seng, dan faktor lain untuk mempertahankan homeostasis seng dan
fungsi sel yang optimal. Jadi, meskipun kami telah belajar banyak
selama beberapa tahun terakhir, menarik untuk mempertimbangkan
cakrawala baru yang masih menunggu para peneliti di bidang ini.
Terima kasih
Saya ingin berterima kasih kepada anggota kelompok penelitian
saya atas kontribusi intelektual mereka yang terus-menerus
merangsang dan untuk membaca naskah secara kritis. Saya juga
ingin meminta maaf kepada banyak rekan yang karyanya tidak saya
sebutkan karena keterbatasan tempat. Penelitian yang dilakukan di
lab saya yang dijelaskan dalam ulasan ini didukung oleh hibah dari
National Institutes of Health, National Science Foundation, Departemen
Energi AS, dan Program Biologi Molekuler Universitas Missouri.
Referensi
[1] M. Margoshes, BL Vallee, Sebuah protein kadmium dari ginjal kuda
korteks, J. Am. kimia Soc. 79 (1957) 4813–4814.
[2] CE Outten, TV O'Halloran, Sensitivitas femtomolar dari protein metaloregulator
yang mengendalikan homeostasis seng, Science 292 (2001) 2488–2492.
[3] CW MacDiarmid, LA Gaither, D. Eide, Transporter seng yang mengatur
penyimpanan seng vakuolar di Saccharomyces cerevisiae, EMBO J. 19
(2000) 2845–2855.
[4] RD Palmiter, SD Findley, Kloning dan karakterisasi fungsional dari pengangkut
seng mamalia yang memberikan resistensi terhadap seng, EMBO J. 14
(1995) 639–649.
[5] DA Suhy, KD Simon, DI Linzer, TV O'Halloran, Metallothionein adalah bagian
dari mekanisme pemulungan seng untuk kelangsungan hidup sel dalam
kondisi kekurangan seng yang ekstrim, J. Biol. kimia 274 (1999) 9183–9192.
719
[6] CJ Frederickson, SW Suh, D. Silva, CJ Frederickson, RB
Thompson, Pentingnya seng dalam sistem saraf pusat: neuron yang
mengandung seng, J. Nutr. 130 (2000) 1471S–1483S.
[7] LC Costello, RB Franklin, Novel peran seng dalam pengaturan metabolisme
sitrat prostat dan implikasinya pada kanker prostat, Prostat 35 (1998) 285–
296.
[8] TJ Lyons, AP Gasch, LA Gaither, D. Botstein, PO Brown, DJ Eide, karakterisasi
genome dari regulon responsif seng Zap1p dalam ragi, Proc. Natl. Acad.
Sains. AS 97 (2000) 7957–7962.
[9] SP Gygi, B. Rist, SA Gerber, F. Turecek, MH Gelb, R. Aebersold, Analisis
kuantitatif campuran protein kompleks menggunakan tag afinitas berkode
isotop, Nat. Bioteknologi. 17 (1999) 994–999.
[10] S. Ghaemmaghami, WK Huh, K. Bower, RW Howson, A. Belle, N.
Dephoure, EK O'Shea, JS Weissman, Analisis global ekspresi protein dalam
ragi, Alam 425 (2003) 737–741.
[11] AA Rivlin, YL Chan, IG Wool, Kontribusi motif jari seng pada fungsi protein
ribosom ragi YL37a, J. Mol. Biol. 294 (1999) 909–919.
[12] TJ Simons, Seng bebas intraseluler dan penyangga seng dalam darah merah manusia
sel, J.Membr. Biol. 123 (1991) 63–71.
[13] F. Adebodun, JF Post, Peran Ca(II) dan Zn(II) bebas intraseluler dalam
apoptosis yang diinduksi deksametason dan resistensi deksametason dalam
lini sel CEM leukemia manusia, J. Cell. Fisik. 163 (1995) 80–86.
[14] ML Van Zile, NJ Cosper, RA Scott, DP Giedroc, Protein metaloregulatori seng
Synechococcus PCC7942 SmtB mengikat satu ion seng per monomer
dengan afinitas tinggi dalam geometri koordinasi tetrahedral, Biokimia 39
(2000) 11818–11829.
[15] SL Sensi, LM Canzoniero, SP Yu, HS Ying, JY Koh, GA
Kerchner, DW Choi, Pengukuran seng bebas intraseluler dalam neuron
kortikal hidup: rute masuk, J. Neurosci. 17 (1997) 9554–9564.
[16] JW Kleineke, IA Brand, Perubahan cepat pada Zn2+ intraseluler pada hepatosit
tikus, J. Pharmacol. Toksikol. Metode 38 (1997) 181–187.
[17] N. Romero-Isart, M. Vasak, Kemajuan dalam struktur dan kimia metallothionein,
J. Inorg. Biokimia. 88 (2002) 388–396.
[18] KE Dineley, LM Malaiyandi, IJ Reynolds, Evaluasi ulang pengukuran seng
neuron: artefak yang terkait dengan konsentrasi seng intraseluler yang tinggi,
Mol. Pharmacol. 62 (2002) 618–627.
[19] CA Fierke, RB Thompson, biosensing seng berbasis fluoresensi menggunakan
anhidrase karbonat, BioMetals 14 (2001) 205–222.
[20] A. Bird, K. McCall, M. Kramer, E. Blankman, D. Winge, D. Eide, Jari seng
dapat bertindak sebagai sensor Zn(II) untuk mengatur fungsi domain aktivasi
transkripsi, EMBO J. 22 (2003 ) 5137–5146.
[21] SF Michael, VJ Kilfoil, MH Schmidt, BT Amann, JM Berg, Sifat pengikatan dan
pelipatan logam dari peptida jari seng Cys2His2 minimalis, Proc. Natl. Acad.
Sains. AS 89 (1992) 4796–4800.
[22] LM Green, JM Berg, Interaksi ion protein-logam nukleokapsid Retroviral:
varian pelipatan dan urutan, Proc. Natl. Acad. Sains.
AS 87 (1990) 6403–6407.
[23] LS Field, E. Luk, VC Culotta, Pendamping tembaga: pendamping pribadi untuk
ion logam, J. Bioenerg. Biomembran 34 (2002) 373–379.
[24] I. Hamza, JD Gitlin, Pendamping tembaga untuk sitokrom c oksidase dan
penyakit manusia, J. Bioenerg. Biomembran 34 (2002) 381–388.
[25] DL Huffman, TV O'Halloran, Fungsi, struktur, dan mekanisme protein
perdagangan tembaga intraseluler, Ann. Pendeta Biokimia. 70 (2001) 677–
701.
[26] K. Hantke, Pengangkut dan pengatur seng bakteri, BioMetals 14
(2001) 239–249.
[27] JP Liuzzi, RJ Cousins, pengangkut seng mamalia, Annu. Pendeta Nutr. 24
(2004) 151–172.
[28] KM Taylor, RI Nicholson, Protein LZT; subfamili LIV-1 dari
pengangkut seng, Biochim. Biofisika. UU 1611 (2003) 16–30.
[29] ML Guerinot, Keluarga pengangkut logam ZIP, Biochim. Biofisika.
UU 1465 (2000) 190–198.
[30] DJ Eide, Keluarga pengangkut ion logam SLC39, Pflugers Arch.
447 (2004) 796–800.
[31] R. Palmiter, L. Huang, Penghabisan dan kompartementalisasi seng oleh
anggota keluarga pembawa zat terlarut SLC30, Pflugers Arch. 447 (2004)
744–751.
Machine Translated by Google
720 DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
[32] LA Gaither, DJ Eide, pengangkut seng eukariotik dan regulasinya, BioMetals
14 (2001) 251–270.
[33] RS Gitan, M. Shababi, M. Kramer, DJ Eide, Domain sitosol dari transporter
seng Zrt1 ragi diperlukan untuk inaktivasi pasca-translasinya sebagai respons
terhadap seng dan kadmium, J. Biol. kimia 278 (2003) 39558–39564.
[34] H. Zhao, D. Eide, Gen ZRT2 mengkode transporter seng afinitas rendah di
Saccharomyces cerevisiae, J. Biol. kimia 271 (1996) 23203–23210.
[35] LA Gaither, DJ Eide, Ekspresi fungsional seng hZIP2 manusia
pengangkut, J. Biol. kimia 275 (2000) 5560–5564.
[36] DH Nies, S. Silver, Sistem penghabisan ion yang terlibat dalam logam bakteri
resistensi. J.Ind. Mikrobiol. 14 (1995) 186–199.
[37] MW Persans, K. Nieman, DE Salt, Aktivitas fungsional dan peran anggota
keluarga penghabisan kation dalam hiperakumulasi Ni di Thlaspi goesense,
Proc. Natl. Acad. Sains. AS 98 (2001) 9995–10.000.
[38] D. Blaudez, A. Kohler, F. Martin, D. Sanders, M. Chalot, protein toleransi
logam Poplar 1 menganugerahkan toleransi seng dan merupakan pengangkut
seng vakuolar oligomer dengan motif ritsleting leusin esensial, Sel Tumbuhan
15 (2003 ) 2911–2928.
[39] BJ van der Zaal, LW Neuteboom, JE Pinas, AN Chardonnens, H.
Schat, JAC Verkleij, PJJ Hooykaas, Ekspresi berlebih dari gen Arabidopsis
baru yang terkait dengan gen pengangkut seng diduga dari hewan dapat
menyebabkan peningkatan resistensi dan akumulasi seng, Plant Physiol.
119 (1999) 1047–1055.
[40] T. Suzuki, K. Ishihara, H. Migaki, M. Nagao, Y. Yamaguchi-Iwai, T.
Kambe, Dua kompleks transpor seng yang berbeda dari protein fasilitator
difusi kation yang terlokalisasi di jalur sekretori beroperasi untuk mengaktifkan
alkali fosfatase dalam sel vertebrata, J. Biol. kimia 280 (2005) 30956–30962.
[41] Y. Wei, H. Li, D. Fu, keadaan Oligomer dari pengangkut logam Escherichia
coli YiiP, J. Biol. kimia 279 (2004) 39251–39259.
[42] T. Bloÿ, S. Clemens, DH Nies, Karakterisasi transporter seng ZAT1p dari
Arabidopsis thaliana dalam organisme model mikroba dan proteoliposomes
yang dilarutkan, Planta 214 (2002) 783–791.
[43] CD Ellis, CW Macdiarmid, DJ Eide, Kompleks protein heteromer memediasi
transpor seng ke jalur sekresi sel eukariotik, J. Biol. kimia 280 (2005) 28811–
28818.
[44] CW MacDiarmid, MA Milanick, DJ Eide, Sifat biokimia sistem transportasi seng
vakuolar dari Saccharomyces cerevisiae, J. Biol.
kimia 277 (2002) 39187–39194.
[45] AA Guffanti, Y. Wei, SV Rood, TA Krulwich, Mekanisme antiport untuk anggota
keluarga fasilitator difusi kation: penghabisan kation divalen sebagai ganti K+
dan H+, Mol. Mikrobiol. 45 (2002) 145–153.
[46] Y. Chao, D. Fu, Studi kinetik tentang mekanisme antiport dari transporter seng
Escherichia coli, ZitB, J. Biol. Kimia 279 (2004) 12043–12050.
[47] H. Zhao, D. Eide, Gen ragi ZRT1 mengkodekan protein transporter seng dari
sistem serapan afinitas tinggi yang diinduksi oleh pembatasan seng, Proc.
Natl. Acad. Sains. AS 93 (1996) 2454–2458.
[48] H. Zhao, DJ Eide, Zap1p, protein metaloregulatory yang terlibat dalam
regulasi transkripsi responsif seng di Saccharomyces cerevisiae, Mol.
Sel. Biol. 17 (1997) 5044–5052.
[49] AJ Bird, E. Blankman, DJ Stillman, DJ Eide, DR Winge, Aktivator transkripsional
Zap1 juga bertindak sebagai penekan dengan mengikat hilir kotak TATA di
ZRT2, EMBO J.23 (2004) 1123–1132.
[50] BM Waters, DJ Eide, Kontrol kombinatorial ekspresi gen FET4 ragi sebagai
respons terhadap zat besi, seng, dan oksigen, J. Biol. kimia 277 (2002)
33749–33757.
[51] LT Jensen, M. Ajua-Alemanji, VC Culotta, Transporter fosfat afinitas tinggi
Saccharomyces cerevisiae yang dikodekan oleh PHO84 juga berfungsi
dalam homeostasis mangan, J. Biol. kimia 278 (2003) 42036–42040.
[52] MH Saier, JT Beatty, A. Goffeau, KT Harley, WH Heijne, SC
Huang, DL Jack, PS Jahn, K. Lew, J. Liu, SS Pao, IT Paulsen, TT
Tseng, PS Virk, Superfamili fasilitator utama, J. Mol. Mikrobiol.
Bioteknologi. 1 (1999) 257–279.
[53] M. Bun-Ya, M. Nishimura, S. Harashima, Y. Oshima, Gen PHO84
dari Saccharomyces cerevisiae mengkodekan transporter fosfat anorganik,
Mol. Sel. Biol. 11 (1991) 3229–3238.
[54] LA Gaither, DJ Eide, Transporter ZIP1 manusia memediasi penyerapan seng
dalam sel erythroleukemia K562 manusia, J. Biol. kimia 276 (2001) 22258–
22264.
[55] J. Dufner-Beattie, SJ Langmade, F. Wang, D. Eide, GK Andrews, Struktur,
fungsi, dan pengaturan subfamili gen pengangkut seng tikus, J. Biol. kimia
278 (2003) 50142–50150.
[56] RB Franklin, J.Ma, J.Zou, Z.Guan, BI Kukoyi, P.Feng, LC
Costello, Human ZIP1 adalah transporter serapan seng utama untuk
akumulasi seng dalam sel prostat, J. Inorg. Biokimia. 96 (2003) 435–442.
[57] LC Costello, Y. Liu, J. Zou, RB Franklin, Bukti transporter serapan seng dalam
sel kanker prostat manusia yang diatur oleh prolaktin dan testosteron, J. Biol.
kimia 274 (1999) 17499–17504.
[58] B. Milon, D. Dhermy, D. Pountney, M. Bourgeois, C. Beaumont, Lokalisasi
subseluler diferensial dari hZip1 dalam sel yang patuh dan tidak patuh,
FEBS Lett. 507 (2001) 241–246.
[59] F. Wang, J. Dufner-Beattie, BE Kim, MJ Petris, G. Andrews, DJ Eide,
endositosis yang distimulasi seng mengontrol aktivitas pengangkut serapan
seng ZIP1 dan ZIP3 tikus, J. Biol. kimia 279 (2004) 24631–24639.
[60] J. Dufner-Beattie, F. Wang, Y. Kuo, J. Gitschier, D. Eide, GK Andrews, Gen
acrodermatitis enteropathica ZIP4 mengkodekan transporter seng yang
diatur oleh seng khusus jaringan pada tikus. J.Biol. kimia 278 (2003)
33474–33481.
[61] J. Dufner-Beattie, ZL Huang, J. Geiser, W. Xu, GK Andrews, Pembangkitan
dan karakterisasi tikus yang tidak memiliki transporter serapan seng ZIP3,
Mol. Sel. Biol. 25 (2005) 5607–5615.
[62] SL Kelleher, B. Lonnerdal, Zip3 memainkan peran utama dalam penyerapan
seng ke dalam sel epitel mammae dan diatur oleh prolaktin, Am. J. Physiol.:
Physiol Sel. 288 (2005) C1042–C1047.
[63] SL Kelleher, B. Lonnerdal, tingkat transporter Zn dan perubahan lokalisasi
sepanjang laktasi pada kelenjar susu tikus dan diatur oleh Zn dalam sel susu,
J. Nutr. 133 (2003) 3378–3385.
[64] K. Wang, B. Zhou, YM Kuo, J. Zemansky, J. Gitschier, Seorang anggota baru
dari keluarga pengangkut seng cacat pada acrodermatitis enteropathica, Am.
J.Hum. Genet. 71 (2002) 66–73.
[65] S. Kury, B. Dreno, S. Bezieau, S. Giraudet, M. Kharfi, R. Kamoun, JP
Moisan, Identifikasi SLC39A4, gen yang terlibat dalam acrodermatitis
enteropathica, Nat. Genet. 31 (2002) 239–240.
[66] S. Kury, M. Kharfi, R. Kamoun, A. Taieb, E. Mallet, JJ Baudon, C.
Glastre, B. Michel, F. Sebag, D. Brooks, V. Schuster, C. Scoul, B. Dreno, S.
Bezieau, JP Moisan, Spektrum mutasi SLC39A4 manusia pada panel pasien
dengan acrodermatitis enteropathica, Hum. Mutat. 22 (2003) 337–338.
[67] F. Wang, BE Kim, J. Dufner-Beattie, MJ Petris, G. Andrews, DJ Eide,
Acrodermatitis enteropathica mutasi mempengaruhi aktivitas transportasi,
lokalisasi dan perdagangan responsif seng dari transporter seng ZIP4 tikus,
Hum. Mol. Genet. 13 (2004) 563–571.
[68] J. Dufner-Beattie, YM Kuo, J. Gitschier, GK Andrews, Respons adaptif
terhadap diet seng pada tikus melibatkan lokalisasi seluler diferensial dan
regulasi seng dari pengangkut seng ZIP4 dan ZIP5, J. Biol. kimia 279 (2004)
49082–49090.
[69] F. Wang, BE Kim, MJ Petris, DJ Eide, Protein Zip5 mamalia adalah transporter
seng yang terlokalisasi ke permukaan basolateral sel terpolarisasi, J. Biol.
Kimia 279 (2004) 51433–51441.
[70] JP Liuzzi, LA Lichten, S. Rivera, RK Blanchard, TB Aydemir, MD
Knutson, T. Ganz, RJ Cousins, Interleukin-6 mengatur transporter seng Zip14
di hati dan berkontribusi pada hipozincemia pada respons fase akut, Proc.
Natl. Acad. Sains. AS 102 (2005) 6843–6848.
[71] KM Taylor, HE Morgan, A. Johnson, RI Nicholson, Analisis struktur-fungsi
anggota novel LIV-1 subfamili pengangkut seng, ZIP14, FEBS Lett. 579
(2005) 427–432.
[72] JE Coleman, Struktur dan mekanisme alkaline phosphatase, Annu.
Pdt. Biophys. Biomol. Struktur. 21 (1992) 441–483.
[73] C. Nolte, A. Gore, I. Sekler, W. Kresse, M. Hershfinkel, A. Hoffmann, H.
Kettenmann, A. Moran, ekspresi ZnT-1 dalam sel astroglial melindungi
Machine Translated by Google
DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
melawan toksisitas seng dan memperlambat akumulasi seng intraseluler, Glia
48 (2004) 145–155.
[74] GK Andrews, H. Wang, SK Dey, RD Palmiter, Gen pengangkut seng tikus 1
memberikan fungsi penting selama perkembangan embrionik awal, Genesis 40
(2004) 74–81.
[75] RJ McMahon, RJ Cousins, Regulasi transporter seng ZnT-1 oleh seng diet, Proc.
Natl. Acad. Sains. AS 95 (1998) 4841–4846.
[76] M. Tsuda, K. Imaizumi, T. Katayama, K. Kitagawa, A. Wanaka, M.
Tohyama, T. Takagi, Ekspresi gen pengangkut seng ZnT-1 diinduksi setelah
iskemia transien pada gerbil, J. Neurosci. 17 (1997) 6678–6684.
[77] D. Kim, JL Gustin, B. Lahner, MW Persans, D. Baek, DJ Yun, DE
Garam, Tumbuhan anggota keluarga CDF TgMTP1 dari hiperakumulator Ni/Zn
Thlaspi goesense bekerja untuk meningkatkan penghabisan Zn pada membran
plasma ketika diekspresikan dalam Saccharomyces cerevisiae, Plant J. 39
(2004) 237–251.
[78] E. Eren, JM Arguello, Arabidopsis HMA2, logam berat divalen yang mengangkut
P(IB)-type ATPase, terlibat dalam homeostasis Zn2+ sitoplasma , Plant Physiol.
136 (2004) 3712–3723.
[79] D. Hussain, MJ Haydon, Y. Wang, E. Wong, SM Sheson, J. Young, J.
Camakaris, JF Harper, CS Cobbett, transporter logam berat ATPase tipe-P
dengan peran dalam homeostasis seng esensial di Arabidopsis, Plant Cell 16
(2004) 1327–1339.
[80] C. Chang, Z. Werb, Banyak wajah metaloprotease: pertumbuhan sel, invasi,
angiogenesis dan metastasis, Trends Cell Biol. 11 (2001)
S37–S43.
[81] MY Galperin, MJ Jedrzejas, Struktur inti yang dilestarikan dan residu situs aktif
dalam enzim superfamili alkali fosfatase, Protein 45 (2001) 318–324.
[82] D. Sevlever, KJ Mann, ME Medof, Efek diferensial 1,10-phenan throline pada
mamalia, ragi, dan sintesis jangkar glikosilfosfatidlinositol parasit, Biochem.
Biofisika. Res. Komunal. 288 (2001) 1112–1118.
[83] KJ Mann, D. Sevlever, 1,10-Phenanthroline menghambat penahan glikosilfosfaQ
tidlinositol dengan mencegah penambahan fosfoetanolamina ke prekursor
jangkar glikosilfosfatidlinositol, Biokimia 40 (2001) 1205–1213.
[84] W. Tang, C. Wang, Jari seng dan aktivitas oksidoreduktase tiol-disulfida dari
pendamping DnaJ, Biokimia 40 (2001) 14985–14994.
[85] SI Nishikawa, SW Fewell, Y. Kato, JL Brodsky, T. Endo, Pendamping molekuler
dalam retikulum endoplasma ragi menjaga kelarutan protein untuk retrotranslokasi
dan degradasi, J. Cell Biol. 153 (2001) 1061–1070.
[86] MR Leach, MF Cohen-Doyle, DY Thomas, DB Williams, Lokalisasi lektin,
pengikatan ERp57, dan situs pengikatan polipeptida calnexin dan calreticulin, J.
Biol. kimia 277 (2002) 29686–29697.
[87] SS Mok, G. Evin, QX Li, AI Smith, K. Beyreuther, CL Masters, D.
H. Kecil, Sebuah metaloprotease baru dalam otak tikus membelah protein
prekursor amiloid dari penyakit Alzheimer menghasilkan fragmen amiloidogenik,
Biokimia 36 (1997) 156–163.
[88] G. Dodson, D. Steiner, Peran perakitan dalam biosintesis insulin, Curr. Opin.
Struktur. Biol. 8 (1998) 189–194.
[89] XF Huang, P. Arvan, Transportasi proinsulin intraseluler di pankreas b
sel, J.Biol. kimia 270 (1995) 20417–20423.
[90] T. Kang, H. Nagase, D. Pei, Aktivasi matriks metalloproteinase 3 zymogen tipe
membran oleh proprotein convertase furin dalam jaringan trans-Golgi, Cancer
Res. 62 (2002) 675–681.
[91] D. Pei, SJ Weiss, aktivasi intraseluler yang bergantung pada Furin dari
stromelysin-3 zymogen manusia, Nature 375 (1995) 244–247.
[92] CD Ellis, F. Wang, CW MacDiarmid, S. Clark, T. Lyons, DJ Eide, Zinc dan protein
pengangkut seng Msc2 diperlukan untuk fungsi retikulum endoplasma, J. Cell
Biol. 166 (2004) 325–335.
[93] L. Li, J. Kaplan, Gen ragi MSC2, anggota keluarga fasilitator difusi kation,
memengaruhi distribusi sel seng, J. Biol. kimia 276 (2000) 5036–5043.
[94] T. Kambe, H. Narita, Y. Yamaguchi-Iwai, J. Hirose, T. Amano, N.
Sugiura, R. Sasaki, K. Mori, T. Iwanaga, M. Nagao, Kloning dan karakterisasi
mamalia baru pengangkut seng, pengangkut seng
721
5, banyak diekspresikan dalam sel beta pankreas, J. Biol. kimia 277 (2002)
19049–19055.
[95] L. Huang, CP Kirschke, J. Gitschier, Karakterisasi fungsional dari transporter seng
mamalia baru, ZnT6, J. Biol. kimia 277 (2002) 26389–26395.
[96] T. Suzuki, K. Ishihara, H. Migaki, W. Matsuura, A. Kohda, K. Okumura, M. Nagao,
Y. Yamaguchi-Iwai, T. Kambe, Pengangkut seng, ZnT5 dan ZnT7, diperlukan
untuk aktivasi alkali fosfatase, seng membutuhkan enzim yang berlabuh
glikosilfosfatidilinositol ke membran sitoplasma, J. Biol. kimia 280 (2005) 637–
643.
[97] CP Kirschke, L. Huang, ZnT7, Pengangkut seng mamalia baru, mengakumulasi
seng di aparatus Golgi, J. Biol. kimia 278 (2003) 4096–4102.
[98] G. Durr, J. Strayle, R. Plemper, S. Elbs, SK Klee, P. Catty, DH Wolf, H.
K. Rudolph, Pompa ion medial-Golgi Pmr1 memasok jalur sekresi ragi dengan
Ca2+ dan Mn2+ yang diperlukan untuk glikosilasi, penyortiran, dan degradasi
protein terkait retikulum endoplasma, Mol.
Biol. Sel 9 (1998) 1149–1162.
[99] L. Huang, CP Kirschke, Y. Zhang, YY Yu, Gen ZIP7 (Slc39a7) mengkodekan
transporter seng yang terlibat dalam homeostasis seng dari aparatus Golgi, J.
Biol. kimia 280 (2005) 15456–15463.
[100] L. Huang, J. Gitschier, Sebuah gen baru yang terlibat dalam transportasi seng
kekurangan pada tikus susu yang mematikan, Nat. Genet. 17 (1997) 292–297.
[101] C. Murgia, I. Vespignani, J. Cerase, F. Nobili, G. Perozzi, Kloning, ekspresi, dan
lokalisasi vesikular transporter seng Dri 27/ZnT4 dalam jaringan usus dan sel,
Am. J. Physiol. 277 (1999) G1231–G1239.
[102] AA Michalczyk, J. Allen, RC Blomeley, ML Ackland, Ekspresi konstitutif transporter
seng hZnT4 dalam sel epitel payudara manusia, Biochem. J.364 (2002) 105–
113.
[103] RD Palmiter, TB Cole, CJ Quaife, SD Findley, ZnT-3, diduga sebagai pengangkut
seng ke dalam vesikel sinaptik. Proses Natl. Acad. Sains. AS 93 (1996) 14934–
14939.
[104] H. Wenzel, T. Cole, D. Born, P. Schwartzkroin, R. Palmiter, Lokalisasi ultrastruktural
transporter seng-3 (ZnT-3) ke membran vesikel sinaptik di dalam bouton serat
berlumut di hipokampus tikus dan monyet , Prok. Natl. Acad. Sains. AS 94
(1997) 12676–12681.
[105] JY Lee, TB Cole, RD Palmiter, SW Suh, JY Koh, Kontribusi oleh seng sinaptik
untuk pembentukan plak yang berbeda gender pada tikus transgenik APP mutan
Swedia manusia, Proc. Natl. Acad. Sains. AS 99 (2002) 7705–7710.
[106] F. Chimienti, A. Favier, M. Seve, ZnT-8, transporter seng khusus sel beta
pankreas, BioMetals 18 (2005) 313–317.
[107] F. Chimienti, S. Devergnas, A. Favier, M. Seve, Identifikasi dan kloning transporter
seng spesifik sel beta, ZnT-8, terlokalisasi ke dalam butiran sekretori insulin,
Diabetes 53 (2004) 2330–2337 .
[108] LM Ramsay, GM Gadd, Mutan Saccharomyces cerevisiae yang rusak dalam
fungsi vakuolar mengkonfirmasi peran vakuola dalam racun
detoksifikasi ion logam, FEMS Microbiol. Lett. 152 (1997) 293–298.
[109] H. Kupper, F. Jie Zhao, SP McGrath, Kompartemen seluler seng dalam daun
hiperakumulator Thlaspi caerulescens, Plant Physiol. 119 (1999) 305–312.
[110] JF Ma, D. Ueno, FJ Zhao, SP McGrath, Lokalisasi subselular Cd dan Zn pada
daun ekotipe Thlaspi caerulescens yang hiperakumulasi Cd, Planta 220 (2005)
731–736.
[111] A. Kamizono, M. Nishizawa, Y. Teranishi, K. Murata, A. Kimura, Identifikasi gen
yang memberikan resistensi terhadap seng dan ion kadmium dalam ragi
Saccharomyces cerevisiae, Mol. Jenderal Genet. 219 (1989) 161–167.
[112] DS Conklin, MR Culbertson, C. Kung, Interaksi antara produk gen yang terlibat
dalam transportasi kation divalen di Saccharomyces cerevisiae, Mol. Jenderal
Genet. 244 (1994) 303–311.
[113] S. Miyabe, S. Izawa, Y. Inoue, Zrc1 terlibat dalam sistem transportasi seng antara
vakuola dan sitosol di Saccharomyces cerevisiae, Biochem.
Biofisika. Res. Komunal. 282 (2001) 79–83.
[114] CW MacDiarmid, MA Milanick, DJ Eide, Induksi gen toleransi logam ZRC1 dalam
ragi yang terbatas seng memberikan ketahanan terhadap syok seng, J. Biol.
kimia 278 (2003) 15065–15072.
Machine Translated by Google
722 DJ Eide / Biochimica et Biophysica Acta 1763 (2006) 711–722
[115] S. Clemens, T. Blob, C. Vess, D. Neumann, DH Nies, U. Zur Nieden, Transporter
dalam retikulum endoplasma sel pombe Schizosaccharomyces memediasi
penyimpanan seng dan secara berbeda memengaruhi toleransi logam transisi,
J. Biol . kimia 277 (2002) 18215–18221.
[116] AG Desbrosses-Fonrouge, K. Voigt, A. Schroder, S. Arrivault, S.
Thomine, U. Kramer, Arabidopsis thaliana MTP1 adalah transporter Zn dalam
membran vakuolar yang memediasi detoksifikasi Zn dan mendorong akumulasi
Zn daun, FEBS Lett. 579 (2005) 4165–4174.
[117] DB Drager, AG Desbrosses-Fonrouge, C. Krach, AN Chardonnens, RC Meyer,
P. Saumitou-Laprade, U. Kramer, Dua gen yang mengkode protein transpor
logam Arabidopsis halleri MTP1 bersegregasi dengan toleransi seng dan
memperhitungkan tinggi Level transkrip MTP1, Plant J.39 (2004) 425–439.
[118] U. Kramer, MTP1 mengepel kelebihan seng dalam sel Arabidopsis, Trends
Plant Sci. 10 (2005) 313–315.
[119] G. Sarret, P. Saumitou-Laprade, V. Bert, O. Proux, JL Hazemann, A.
Traverse, MA Marcus, A. Manceau, Bentuk seng terakumulasi dalam
hyperaccumulator Arabidopsis halleri, Plant Physiol. 130 (2002) 1815–1826.
[120] DE Salt, RC Prince, AJM Baker, I. Raskin, IJ Pickering, Ligan seng dalam logam
hiperakumulator Thlaspi caerulescens sebagaimana ditentukan menggunakan
spektroskopi serapan sinar-X, Environ. Sains.
Technol. 33 (1999) 713–717.
[121] G. Salazar, B. Craige, R. Love, D. Kalman, V. Faundez, Vglut1 dan mekanisme
penargetan bersama ZnT3 mengatur penyimpanan seng vesikular dalam sel
PC12, J. Cell Sci. 118 (2005) 1911–1921.
[122] RD Palmiter, TB Cole, SD Findley, ZnT-2, protein mamalia yang memberikan
resistensi terhadap seng dengan memfasilitasi penyerapan vesikular, EMBO
J.15 (1996) 1784–1791.
[123] MS Nasir, CJ Fahrni, DA Suhy, KJ Kolodsick, CP Singer, TV
O'Halloran, Biologi sel kimia seng: struktur dan fluoresensi intraseluler
kompleks seng-quinolinesulfonamide, J. Biol. Inorg.
kimia 4 (1999) 775–783.
[124] LH Ho, RN Ratnaike, PD Zalewski, Keterlibatan seng labil intraseluler dalam
menekan aktivitas DEVD-caspase dalam sel neuroblastoma manusia, Biochem.
Biofisika. Res. Komunal. 268 (2000) 148–154.
[125] P. Coyle, PD Zalewski, JC Philcox, IJ Forbes, AD Ward, SF
Lincoln, I. Mahadevan, AM Rofe, Pengukuran seng dalam hepatosit dengan
menggunakan probe fluoresen, zinquin: hubungan dengan metallothionein dan
seng intraseluler, Biochem. J.303 (1994) 781–786.
[126] SC Burdette, GK Walkup, B. Spingler, RY Tsien, SJ Lippard, Sensor neon untuk
Zn(2+) berdasarkan platform fluorescein: sintesis, properti, dan distribusi
intraseluler, J. Am. kimia Soc. 123 (2001) 7831–7841.
[127] CM St Croix, KJ Wasserloos, KE Dineley, IJ Reynolds, ES
Levitan, BR Pitt, Perubahan oksida nitrat yang diinduksi dalam homeostasis
seng intraseluler dimediasi oleh metallothionein/thionein, Am. J. Physiol.
282 (2002) L185–L192.
[128] H. Haase, D. Beyersmann, Penyerapan dan distribusi intraseluler labil dan
Zn(II) total dalam sel glioma tikus C6 diselidiki dengan probe fluoresen dan
serapan atom, BioMetals 12 (1999) 247–254.
[129] H. Haase, D. Beyersmann, Distribusi dan transportasi seng intraseluler dalam
sel glioma tikus C6, Biochem. Biofisika. Res. Komunal. 296 (2002) 923–928.
[130] T. Kobayashi, M. Beuchat, M. Lindsay, S. Frias, RD Palmiter, H.
Sakuraba, RG Parton, J. Gruenberg, Membran endosomal akhir yang kaya
akan asam lysobisphosphatidic mengatur transportasi kolesterol, Nat. Bio Sel.
1 (1999) 113–118.
[131] C. Devirgiliis, C. Murgia, G. Danscher, G. Perozzi, Ion seng yang dapat ditukar
secara sementara terakumulasi dalam kompartemen vesikuler di ragi
Saccharomyces cerevisiae, Biochem. Biofisika. Res. Komunal. 323 (2004) 58–
64.
[132] PJ Smith, M. Wiltshire, S. Davies, SF Chin, AK Campbell, RJ
Errington, transien [Zn(2+)](i) yang diinduksi kerusakan DNA: korelasi dengan
penghentian siklus sel dan apoptosis dalam sel limfoma, Am. J. Physiol. 283
(2002) C609–C622.
[133] JY Duffy, CM Miller, GL Rutschilling, GM Ridder, MS Clegg, C.
L. Keen, GP Daston, Penurunan kadar seng intraseluler mendahului deteksi
indikator awal apoptosis pada sel HL-60, Apoptosis 6 (2001) 161–172.
[134] BM Bakker, C. Bro, P. Kotter, MA Luttik, JP van Dijken, JT Pronk, Alkohol
dehidrogenase mitokondria Adh3p terlibat dalam ulang-alik redoks di
Saccharomyces cerevisiae, J. Bacteriol. 182 (2000) 4730–4737.
[135] Humas Roeder, GB Kohlhaw, alpha-Isopropylmalate synthase dari ragi.
Metaloenzim seng, Biochim. Biofisika. UU 613 (1980) 482–487.
[136] L. Burri, K. Vascotto, S. Fredersdorf, R. Tiedt, MN Hall, T. Lithgow, Zim17,
protein jari seng baru yang penting untuk impor protein ke dalam mitokondria,
J. Biol. kimia 279 (2004) 50243–50249.
[137] SL Sensi, D. Ton-That, JH Weiss, A. Rothe, KR Gee, Sensor seng neon
mitokondria baru, Kalsium Sel 34 (2003) 281–284.
[138] SL Sensi, D. Ton-Itu, PG Sullivan, EA Jonas, KR Gee, LK
Kaczmarek, JH Weiss, Modulasi fungsi mitokondria oleh kumpulan Zn2+
endogen , Proc. Natl. Acad. Sains. AS 100 (2003) 6157–6162.
[139] SL Sensi, D. Ton-That, JH Weiss, sekuestrasi mitokondria dan pelepasan
sitosolik Zn(2+) yang bergantung pada Ca (2+) dimuat dalam neuron kortikal,
Neurobiol. Dis. 10 (2002) 100–108.
[140] GP Brierley, VA Knight, Pengangkutan ion oleh mitokondria jantung. X.
Penyerapan dan pelepasan Zn2+ dan hubungannya dengan akumulasi
magnesium terkait energi, Biokimia 6 (1967) 3892–3901.
[141] NE Saris, K. Niva, Apakah Zn2+ diangkut oleh uniporter kalsium mitokondria?
FEB Lett. 356 (1994) 195–198.
[142] D. Jiang, PG Sullivan, SL Sensi, O. Steward, JH Weiss, Zn(2+) menginduksi
pembukaan pori transisi permeabilitas dan pelepasan peptida pro-apoptosis
dari mitokondria neuronal, J. Biol. kimia 276 (2001) 47524–47529.
[143] LM Malaiyandi, O. Vergun, KE Dineley, IJ Reynolds, Visualisasi langsung dari
akumulasi seng mitokondria mengungkapkan mekanisme transpor uniporter
dependen dan independen, J. Neurochem. 93 (2005) 1242–1250.
[144] Z. Guan, B. Kukoyi, P. Feng, MC Kennedy, RB Franklin, LC
Costello, Identifikasi kinetik dari proses transportasi serapan seng mitokondria
dalam sel prostat, J. Inorg. Biokimia. 97 (2003) 199–206.
[145] B. Ye, W. Maret, BL Vallee, Zinc metallothionein yang diimpor ke mitokondria
hati memodulasi respirasi, Proc. Natl. Acad. Sains. AS 98 (2001) 2317–2322.
[146] LC Costello, Z. Guan, RB Franklin, P. Feng, Metallothionein dapat berfungsi
sebagai pendamping untuk transportasi serapan seng ke mitokondria prostat
dan hati, J. Inorg. Biokimia. 98 (2004) 664–666.