“PRINSIP KERJA DAN

INSTRUMENTASI
SPEKTROPOTOMETER
UV-VIS”
Dosen Pengampuh : apt. Nasrawati Basir, S.Farm., M.Si.
BORIS KLEMENSIO P. G. (D1B121205)

FARIDA TASIK MADIKA (D1B121213)

ISMAYANTI (D1B121216)

NANA SULFIANA (D1B121217)

ANDI ULFA NURHIKMAH (D1B121221)

AYUSTIRA (D1B121222)

DEBBY TITIN RUPIDARA (D1B121223)

AFNI MARGARET PABISA (D1B121224)

MUHAMMAD ADRIANSYAH S (D1B120313)

2
 PETA KONSEP :
Hal-Hal Yang Harus
Definisi
01 Spektrofotometri
Diperhatikan Dalam
Analisis
UV-Vis Spektrofotometri Uv–
Vis
Kalibrasi
Spektrofotometri Uv- Kelebihan dan
Vis kekurangan
Spektrofotometri
Uv-Vis
Sumber Sinar dalam
Spektrofotometer UV-Vis
 02

Prinsip kerja
Spektrofotometri
Uv-Vis
03
04
Bagian-bagian dan fungsi
Spektrofotometri Uv-
Vis Prosedur Pemakaian
Spektrofometer UV-VIS
 DEFINISI SPEKTROFOTOMETRI Uv-VIS

Spketrofotometri Sinar Tampak (UV-Vis) adalah

pengukuran energi cahaya oleh suatu sistem kimia pada
panjang gelombang tertentu. Sinar ultraviolet (UV)
mempunyai panjang gelombang antara 200-400 nm, dan
sinar tampak (visible) mempunyai panjang gelombang 400-
750 nm. Pengukuran spektrofotometer yang melibatkan
energi elektronik yang cukup besar pada molekul yang
dianalisis, sehingga spektrofotometer UV-Vis lebih banyak
dipakai untuk analisis kuantitatif dibandingkan kualitatif.
Spektrum UV-Vis sangat berguna untuk pengukuran secara
kuantitatif. Konsentrasi dari analit di dalam larutan bisa
ditentukan dengan mengukur absorban pada panjang
gelombang tertentu dengan menggunakan hukum Lambert-
Beer.
 HAL-HAL YANG HARUS DIPERHATIKAN DALAM
ANALISIS SPEKTROFOTOMETRI UV– VIS

Pembentukan
Pemilihan
Molekul yang Dapat
Menyerap Sinar Uv-
Panjang
Vis Gelombang

Waktu Pembacaan Nilai

Operasional Absorbansi
(Operating Time) Sampel
KELEBIHAN & KEKURANGAN SPEKTROFOTOMETRI Uv-Vis

kelebihan
Kelebihan dari instrumen Spektrofotometer UV-Vis yaitu dapat
digunakan untuk menganalisis banyak zat organik dan
anorganik, selektif, mempunyai ketelitian yang tinggi dengan
kesalahan relatif sebesar 1%-3%, analisis dapat dilakukan
dengan cepat dan tepat, serta dapat digunakan untuk
menetapkan kuantitas zat yang sangat kecil.

kekurangan
Adapun kekurangan dari penggunaan instrumen spektrofotometer UVVis
ini diantaranya yaitu senyawa yang akan dianalisa harus memiliki gugus
kromofon (gugus pembawa warna), dan memiliki ikatan rangkap
terkonjugasi serta mempunyai panjang gelombang yang terletak pada
daerah ultraviolet atau visible. Selain itu, hasil absorbansi yang terukur
dapat dipengaruhi oleh pH larutan, suhu, adanya zat pengganggu dan
kebersihan dari kuvet
SUMBER SINAR DALAM SPEKTROFOTOMETRI Uv-Vis

Mampu mencakup semua kisaran pengukuran di daerah UV-Vis

Mempunyai intensitas sinar yang kuat dan stabil pada

keseluruhan kisaran panjang gelombang sehingga penguatan
sinyal yang ekstensif dari detektor dapat dihindari

Intensitas sumber sinar harus tidak bervariasi secara signifikan

pada panjang gelombang yang berbeda

Intensitas sumber sinar tidak berfluktuasi (naik turun) pada

kisaran waktu yang lama

Intensitas sumber sinar tidak berfluktuasi (naik turun) pada

kisaran waktu yang singkat. Fluktuasi dalam jangka waktu yang
singkat ini disebut dengan flicker.
 KALIBRASI SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

Dengan menggunakan perbandingan absorbansi

sampel dengan absorbansi baku secara langsung.
Teknik semacam ini biasa disebut dengan kalibrasi
standar tunggal (single point calibration) karena
hanya melibatkan satu titik kalibrasi atau hanya
menggunakan satu konsentrasi larutan baku.

Dengan menggunakan persamaan regresi linier yang menyatakan

hubungan antara konsentrasi baku dengan absorbansinya.
Teknik ini juga dapat dimaknai sebagai kalibrasi banyak titik
(multiple point calibration) karena kita menyiapkan lebih dari satu
titik konsentrasi untuk menghasilkan persamaan garis kurva
kalibrasi. Persamaan kurva kalibrasi selanjutnya digunakan untuk
menghitung kadar dalam analit sampel.
PRINSIP KERJA SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
 BAGIAN-BAGIAN DAN FUNGSI
SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

Spketrofotometri UV-Vis terdiri dari

enam komponen utama yaitu :

❖ Sumber radiasi
❖ Wadah sampel
❖ Monokromator
❖ Detektor
❖ Amplifier
 BAGIAN-BAGIAN DAN FUNGSI
SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Sumber radiasi Wadah sampel monokromator

Lampu deuterinum Lampu wolfarm berfungsi untuk mengerakkan

suatu alat yang cahaya polikromatis menjadi
untuk mengukur digunakan untuk digunakan sebagai beberapa komponen panjang
sampel yang mengukur sampel tempat contoh atau gelombang tertentu
terletak pada pada daerah cuplikan yang akan (monokromatis) yang berbeda
daerah uv tampak dianalisis (terdispersi)
 BAGIAN-BAGIAN DAN FUNGSI
SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

detektor amplifier

Amplifier dibutuhkan pada saat

sinyal listrik elektronik yang
dilahirkan setelah melewati
detektor untuk menguatkan
karena penguat dengan resistensi
masukan yang tinggi sehingga
rangkaian detektor tidak terserap
habis yang menyebabkan
keluaran yang cukup besar untuk
Memberikan respon terhadap cahaya dapat dideteksi oleh suatu alat
pada berbagai panjang gelombang pengukur
PROSEDUR PEMAKAIAN SPEKTROFOMETER UV-VIS

Pastikan komputer terhubung ke sumber listrik

↓
Ambil silica gel yang terdapat pada tabung analisis
↓
Nyalakan spketrofotometer dengan menekan tombol "ON" pada bagian sisi
kanan bawah spektrofotometer
↓
Tunggu sampai layar spektrofotometer selesal melakukan initialization dan
menunjukkan semua aspek "OK" dan tidak ada yang menujukkan "NG"
↓
Tekan tombol "ENTER"
↓
 Buka aplikasi UV Probe 2.34 pada dekstop dikomputer
↓
Klik "CONNECT"
↓
Masukkan blanko pada masing-masing kuvet,dan masukkan pada tabung
analisis
↓
Klick "READ UNK"
↓
Ambil kuvet
↓
Tekan "RETURN"
↓
Matikan spektrofotometer dengan menekan tombol "OFF" pada bagian sisi
kanan bawah spektrofotometer
NEXT VIDEO
Thanks…
Alternative resources