aklimatisasi 9 hari (2 hari menetap+7 hari aklimatisasi) 7 hari aklimatisasi). Rekomendasi 14 hari 24-48 jam puasakan terlebih dahulu sebelum diuji 24-48 jam puasakan terlebih dahulu sebelum diuji jika terdapat kematian 10 % saat aklimatisasi, harus diganti semua hewannya jika terdapat kematian 10 % saat aklimatisasi, harus diganti semua hewannya jika terdapat kematian 5 -10 % saat aklimatisasi, waktu aklimatisasi ditambah 7 hari jika terdapat kematian 5 -10 % saat aklimatisasi, waktu aklimatisasi ditambah 7 hari jika terdapat kematian < 5% saat aklimatisasi, dilanjutkan ke pengujian jika terdapat kematian < 5% saat aklimatisasi, dilanjutkan ke pengujian lama pengujian 96 jam 96 jam konsentrasi 5 konsentrasi+ 1 kontrol min 5 konsentrasi + 1 kontrol jumlah hewan uji minimal 7 ikan untuk 1 konsentrasi minimal 10 organisme untuk 1 konsentrasi ( pengulanan duplo ) jenis hewan uji semua ikan (zebra fish, ikan mas, guppy. rainbrow trout (salmon) (organisme air tawar dan laut baik udang maupun ikan (Daphnia, pimephales, Mysidopsis bahia, Artemia salina (setiferus penaeus, duorarum penaeus) umur dan berat badan ikan mas panjang 2-4 cm, max tidak boleh 2x lipat panjang terpendek dr populasi umur 1-5 hari. rangkaian pengujian tidak ada tes pencarian jarak ( berapa saja konsentrasi yang digunakan) mis :0.1 ,10, 100 % tes definitif (menentukan kurva konsentrasi dan respon kematian selama 96 jam) umum tidak ada digunakan 6.25%, 12,5%, 25%, 50%, dan 100% tidak ada uji batas (memastikan LC50 96 jam berada dibatas atas tertentu) 96 jam validasi ya ya asal usul hewan uji ya ya Ph 6.0-8.5 7.5-8.3 DO Tidak boleh kurang dari 60% 4,0 mg/l Suhu Tergantung organisme yang digunakan tergantung organisme yang digunakan Salinitas Tergantung organisme yang digunakan 25% Fotoperiode tidak ada 16 jam gelap 8 jam terang ada transisi selama 30 menit