Mammaglobin

EKPRESI m-RNA MAMMAGLOBIN PADA DARAH
PENDERITA KANKER PAYUDARA DENGAN METASTASE

DI KOTAMADYA MEDAN
TESIS
OLEH
SURJADI RIMBUN
087008004/BM
PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013
Universitas Sumatera Utara

EKPRESI m-RNA MAMMAGLOBIN PADA DARAH
PENDERITA KANKER PAYUDARA DENGAN METASTASE
DI KOTAMADYA MEDAN
TESIS
Diajukan untuk melengkapi persyaratan memperoleh

Gelar Magister Biomedik
Dalam Program Studi Magister Ilmu Biomedik
Pada Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara
Oleh
SURJADI RIMBUN
087008004/BM
PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013

Judul Penelitian : Ekspresi mRNA mammaglobin pada darah penderita
kanker payudara dengan metastase di Kotamadya Medan
Nama Mahasiswa : Surjadi Rimbun
Nomor Pokok : 087008004/BM
Program Studi : Studi Biomedik
Menyetujui
Komisi Pembimbing
dr. Yahwardiah Siregar Ph.D

Ketua
dr. Emir T. Pasaribu SpB-Onk

Anggota
Ketua Program Studi Dekan Fakultas Kedokteran USU
(dr. Yawardiah S. Ph.D) (Prof.dr. Gontar A. Siregar SpPD-KGEH)

Telah diuji pada
Tanggal : Maret 2013
PANITIA PENGUJI TESIS
Ketua : dr. Yahwardiah Siregar, Ph.D
Anggota : 1. dr. Emir T. Pasaribu, Sp.B.Onk (K)
2. Prof. dr. Azmi S.Kar, Sp.PD. KHOM
3. dr. Sry Suryani Widjaja, M.Kes

Abstrak
Kanker payudara adalah salah satu masalah utama pada wanita di seluruh dunia.
Meskipun reseksi kuratif jelas, penyebaran metatasis selanjutnya menjadi masalah
klinis utama pada sekitar 30% dari semua pasien kanker payudara.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menilai keandalan klinis m-RNA
mammaglobin sebagai penanda sirkulasi sel kanker pada pasien kanker payudara dan
untuk mempelajari relevansi ekspresinya dalam darah. Untuk menentukan baik
potensi dan batas-batas penanda untuk tujuan diagnostik, darah yang positif dianalisa
dalam kaitannya dengan karakteristik klinis dan patologis.
Penelitian ini dilakukan terhadap 29 pasien kanker payudara yang dibagi menjadi
dua kelompok yaitu 13 pasien kanker payudara dengan metastase dan 16 pasien
kanker payudara tanpa metastase. 28 pasien kanker payudara adalah jenis karsinoma
duktal invasif dengan 1 pasien berjenis karsinoma lobular invasif adalah. Pasien
kanker payudara telah direklasifikasi sesuai dengan kelas histologis ke kelas I (5
pasien), kelas II (4 pasien) dan kelas III (13 pasien). Semua individu dalam studi ini
menjadi sasaran deteksi MAG m-RNA dalam sirkulasi sel tumor dalam darah perifer
menggunakan tehnik RT-PCR.
Hasil positif untuk mammaglobin dalam sampel darah terlihat pada 38%(5/13)
pasien dengan metastasis tetapi tidak pada pasien non metatstatik. Ekspresi m-RNA
mammaglobin berkorelasi dengan tumor metastatik (P = 0,011).MAG berlebih pada
jaringan payudara secara signifikan positif pada tumor grade rendah (I dan II)
dibandingkan yang grade tinggi (III).
Mammaglobin adalah penanda tumor spesifik kanker payudara yang dapat

memprediksi prognosis kanker payudara dan hasil penelitian kami menunjukkan
bahwa penanda bisa sebagai pemeriksaan yang kurang-invasif dalam mendeteksi
kanker payudara metastase.
Kata kunci: kanker payudara, mRNA mammaglobin, darah perifer, RT-PCR

ABSTRACT
Breast cancer is a major problem among females all over the world. Despite
apparent curative resection, subsequent development of metastatic spread presents a
major clinical problem in about 30% of all breast cancer patients.
The aim of this study was to investigate the clinical reliability of mammaglobin
m-RNA (MAG m-RNA) as a marker of circulating cancer cells in breast cancer
patients and to study the relevance of its expression in blood. To define better the
potential and limits of the marker for diagnostic purposes, blood positivity was
analyzed in relation to clinical and pathological characteristics.
This study was conducted on 29 breast cancer patients divided into two groups,
13 breast cancer patients with metastase and 16 patients with non metastase. Most of
the breast cancer patients were of the invasive ductal carcinoma type and 28 of them
had associated areas of intraductal carcinoma with 1 was invasive lobular carcinoma
type. Breast cancer patients were reclassified according to the histologic grade into
grade I (5 patients),grade II (4 patients) and grade III (13 patients). All individuals
included in this study were subjected to detection of MAG m-RNA in circulating
tumor cells in peripheral blood using RT-PCR technique.
Positivity for mammaglobin in blood samples was observed in 38% of patients
with metastatic but not in the non metatstatic patients. The presence of mammaglobin
was correlated with metastatic tumor (P = 0.011).
MAG overexpression in breast tissue was significantly positive in low grade tumors (I
and II) than in high grade ones (III).
MAG is a promising specific tumor marker of breast cancer that could predict the
prognosis of breast cancer and Our results indicate that the marker could represent a
potentially useful noninvasive tool to detect metatstatic breast cancer.
Key words: breast cancer, mRNA mammaglobin , peripheral blood, RT-PCR

UCAPAN TERIMA KASIH
Puji dan syukur saya panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala
rahmat dan kasih karuniaNya sehingga tesis ini dapat diselesaikan.
Dengan selesainya tesis ini, perkenankanlah saya mengucapkan terima kasih yang
sebesar-besarnya kepada:
Rektor Universitas Sumatera Utara, Prof. Dr. dr. Syahril Pasaribu, DTM&H,
M.Sc(CTM), Sp.A(K). serta seluruh jajaran terkait, atas kesempatan dan fasilitas di
Universitas Sumatera Utara yang diberikan untuk mengikuti dan menyelesaikan
pendidikan program magister Biomedik di Universitas Sumatera Utara, Medan.
Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara, Prof. dr. Gontar A.
Siregar, Sp.PD, KGEH, dan Ketua Program Studi Biomedik, dr. Yahwardiah Siregar,
Ph.D, atas kesempatan dan fasilitas yang diberikan untuk mengikuti dan
menyelesaikan pendidikan program Magister Biomedik Fakultas Kedokteran
Universitas Sumatera Utara.
Terima kasih yang tak terhingga dan penghargaan yang setinggi-tingginya saya
sampaikan kepada dr. Yahwardiah Siregar, Ph.D, selaku pembimbing utama yang
dengan penuh perhatian telah memberikan dorongan, bimbingan dan semangat dan
saran-saran yang sangat bermanfaat mulai dari persiapan penelitian hingga penulisan
tesis ini.

Penulis mengucapkan terima kasih yang tak terhingga kepada dr. Emir T. Pasaribu
Sp.B Onk(K), selaku anggota komisi pembimbing, atas bimbingan, masukan, dan
saran-sarannya yang sangat berharga dalam penelitian dan penulisan tesis ini.
Terima kasih juga saya ucapkan kepada dr. Arlinda Sari Wahyuni, Mkes, yang
telah memberikan bimbingan statistik dalam menyelesaikan tesis ini. Juga kepada
para dosen di program magister Biomedik yang telah membimbing saya selama
mengikuti program S2.
Kepada Dr. Gino Tann, Ph.D, saya mengucapkan terima kasih yang tak terhingga
atas dorongan, semangat dan bimbingan yang sangat bermanfaat sehingga
memberikan inspirasi untuk menggali lebih dalam tentang semua aspek yang
berkaitan dengan penelitian ini.
Saya juga mengucapkan terima kasih yang tak terhingga dan rasa hormat yang
sebesar-besarnya kepada Ayah dan Ibu tercinta, Bapak Muralim Rimbun dan Ibu
Holly Martok, yang senantiasa memberikan dukungan, semangat dan dorongan
selama saya menjalani pendidikan di Program Magister S2 Biomedik Fakultas
Kedokteran Universitas Sumatera Utara Medan.
Kepada istri tercinta, dr. Rita Kusuma, penulis menyampaikan terima kasih yang
tak terhingga atas segala pengertian dan pengorbanannya dalam penulisan tesis ini
hingga selesai. Terima kasih juga kepada anak-anakku tercinta Tania, Dimitri, untuk
segala pengertian dan pengorbanannya dalam mendukung cita-cita penulis.

Akhir kata, saya mengucapkan terima kasih kepada segenap staf Laboratorium
Klinik Terpadu FK USU Medan, dan semua pihak lainnya yang tidak disebutkan satu
persatu di sini, yang telah banyak membantu serta mendukung penelitian dan
penulisan tesis ini hingga selesai.
Semoga Tuhan Yang Maha Esa membalas semua budi baik yang telah diberikan.
Medan, Maret 2013
Penulis
Surjadi Rimbun

RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan pada tanggal 16 April 1966 di Medan. Menikah dengan dr. Rita
Kusuma, dan mempunyai anak: Tania dan Dimitri. Menyelesaikan pendidikan
kedokteran di Universitas Methodist Indonesia pada tahun 1992 dan lulus Ujian
Negara di Universitas Sumatera Utara, Medan pada tahun 1993. Menjalankan masa
bakti sebagai dokter Pegawai Tidak Tetap di Kabupaten Deli Serdang pada tahun
1994 – 1997. Menjalankan praktek pribadi sejak tahun 1997 – hingga sekarang.

DAFTAR ISI
ABSTRAK...............................................................................................................i
ABSTRACT.............................................................................................................ii
UCAPAN TERIMA KASIH................................................................................iii
RIWAYAT HIDUP...............................................................................................vi
DAFTAR ISI.........................................................................................................vii
DAFTAR GAMBAR..............................................................................................x
DAFTAR TABEL..................................................................................................xi
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................xii
DAFTAR SINGKATAN.....................................................................................xiii
BAB I PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang............................................................................................1
1.2. Perumusan Masalah....................................................................................3
1.3. Tujuan Penelitian........................................................................................3
1.3.1. Tujuan umum..........................................................................................3
1.3.2. Tujuan khusus.........................................................................................4
1.4. Manfaat Penelitian......................................................................................4
BAB II TINJAUAN KEPUSTAKAAN

2.1. Gambaran umum Kanker Payudara............................................................5
2.1.1. Epidemiologi Kanker Payudara..................................................................5
2.1.2. Faktor-faktor resiko Kanker Payudara........................................................7
2.1.2. a Riwayat keluarga.....................................................................................8
b Kanker pada payudara lain......................................................................8
c. Penyakit yang sebelumnya jinak.............................................................9
d. Umur........................................................................................................9
e. Riwayat menstruasi dan status menopausa.............................................9
f. Riwayat reproduksi dan menyusui........................................................10
g. Hormon Eksogen...................................................................................10
h. Faktor resiko akibat gaya hidup............................................................11
i. Paparan radiasi pengion........................................................................12
2.1.3. Dasar genetika kejadian kanker payudara.................................................13
2.1.3.a. Mutasi gen pada kanker payudara familial..........................................13
a.1. BRCA1 dan BRCA2............................................................................13
a.2. Gen p53................................................................................................14
a.3. ATM.....................................................................................................17

a.4. Gen PTEN............................................................................................17
2.1.4. Klasifikasi kanker payudara.....................................................................17
2.1.4.a. Histopatologi jenis kanker payudara....................................................17
2.1.4.b. Klasifikasi TNM...................................................................................18
2.1.5. Staging Kanker payudara.........................................................................19
2.1.6. Diagnosa kanker payudara.......................................................................20
2.1.6.a. Diagnosa klinis....................................................................................21
a.1. Riwayat medis.....................................................................................21
a.2. Pemeriksaan fisik.................................................................................22
2.1.6.b. Diagnosa secara radiologis..................................................................23
2.1.6.c. Aspirasi Jarum halus...........................................................................24
2.1.6.d. Biopsi..................................................................................................24
2.1.6.e. Diagnosa Laboratorium.......................................................................24
2.1.7. Program penapisan (Skrining).................................................................26
2.2. Penanda Tumor pada Kanker Payudara..................................................26
2.2.1. Definisi....................................................................................................26
2.2.2. Kepentingan klinis...................................................................................26
2.2.3. Klasifikasi................................................................................................27
2.2.3.a. Penanda konvensional.........................................................................27
a.1. CEA.....................................................................................................28
a.2. CA 15-3...............................................................................................28
2.2.3.b. Penanda diagnostik..............................................................................29
2.2.3.c. Penanda prognosis...............................................................................29
2.2.3.d. Penanda prediktif.................................................................................30
d.1. Penanda predisposisi...........................................................................31
d.2. Prediksi respons...................................................................................31
2.3. Mammaglobin........................................................................................32
2.3.1. Gen mammaglobin.................................................................................33
2.3.2. Kimia protein mammaglobin.................................................................33
2.3.3. Kegunaan klinis......................................................................................34
2.3.3.a. Marker kanker payudara.....................................................................34
a.1. Spesifitas mammaglobin....................................................................35
a.2. Sensitivitas mammaglobin.................................................................37
2.3.4. Mammaglobin dengan marker payudara lain.........................................41
2.3.5. Metode Assay.........................................................................................42
2.3.5.a. Pewarnaan IHC.......................................................................................42
2.3.5.b. RT-PCR..................................................................................................42
BAB III METODOLOGI PENELITIAN
3.1. Jenis Penelitian........................................................................................45

3.2. Tempat Penelitian....................................................................................45
3.3. Waktu Penelitian.....................................................................................45

3.4. Populasi Penelitian..................................................................................46
3.5. Sampel Penelitian....................................................................................46
3.6. Variabel Penelitian..................................................................................47
3.7. Kerangka konsep.....................................................................................48
3.8. Definisi Operasional................................................................................49
3.9. Rancangan Penelitian..............................................................................50
3.10. Pelaksanaan Penelitian............................................................................51
BAB IV HASIL PENELITIAN
4.1 Hasil Penelitian.......................................................................................57

4.2 Analisa Hasil Penelitian..........................................................................61
BAB V PEMBAHASAN.....................................................................................64
BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan............................................................................................67
6.2 Saran.......................................................................................................67
DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................69

DAFTAR GAMBAR
Nomor Judul Halaman
1. Gambar anatomi payudara..................................................................................5
2. Gambar kanker payudara....................................................................................7
3. Gambar kerangka Apoptosis.............................................................................16
4. Gambar gen Mammaglobin..............................................................................32
5. Gambar mesin PCR..........................................................................................44
6. Gambar kerangka konsep.................................................................................48

DAFTAR TABEL
Nomor Judul Halaman
1. Tabel gen yang terlibat pada kanker payudara...........................................8
2. Tabel sistem TNM pada staging Kanker..................................................20
3. Tabel daftar Tumor Marker......................................................................25
4. Tabel bahan dan alat isolasi m-RNA.......................................................51
5. Tabel komposis sintesis cDNA................................................................53
6. Tabel bahan dan alat isolasi gen cDNA...................................................54
7. Tabel komposisi dan reaksi cDNA..........................................................54
8. Tabel karakteristik subjek penelitian........................................................58
9. Tabel gambaran hasil rontgen dan USG..................................................58
10. Tabel Histopatologi sampel......................................................................59
11. Tabel Uji Chi Square................................................................................60
12. Tabel Hasil uji Fisher...............................................................................60

DAFTAR LAMPIRAN
No Judul Halaman
1. Lembar penjelasan mengenai penelitian.................................................76
2. Lembar inform consent............................................................................77
3. Lembar kuesioner....................................................................................78
4. Lembar data klinis dan histopatologi penderita......................................80
5. Persetujuan komisi etik...........................................................................81

DAFTAR SINGKATAN
AJCC : American Joint Committee on Cancer Staging System

ASCO : American Society of Clinical Oncology
ATM : Ataxia Telangiectasia Mutation
BM : Bone Marrow
BRCA1 : BReast Cancer gene 1
BRCA2 : BReast Cancer gene 2
CA 15-3 : Carbohydrate Antigen 15-3
CEA : Carcino Embryonic Antigen
CK-19 : CytoKeratin 19
CT-Scan : Computed Tomography Scan
cDNA : Complementary Deoxyribo Nucl Acid
DNA : Deoxyribonucleic Acid
EDTA : Ethylene Diamine Tetra acetic Acid
EGTM : European Group on Tumor Markers
ER : Estrogen Receptor
FNA : Fine Needle Aspiration
G1 : Gap 1(Cell Cycle)
h-Mam : human Mammaglobin
HER2 : Human Epidermal growth factor Receptor 2
IHC : Immuno Histo Chemistry
IL : InterLeukin
IUAC : International Union Against Cancer
MRI : Magnetic Resonance Imaging
P-53 : tumor Protein 53
PB : Peripheral Blood
PTEN : Phosphatase and tensin homolog
PUFA : Poly Unsaturated Fatty Acid
RNA : Ribonucleic Acid
RT-PCR : Reverse Trancriptase Polymerase Chain Reaction
SLN : Sentinel Lymph Node
SPSS : Statistical Product and Service Solutions
TAQ DNA : Terminus AQuatus Deoxyribo Nucleic
Acid uPA : Urokinase Plasminogen Activator
USG : Ultra Sono Graphy

BAB I
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Kanker payudara merupakan salah satu penyebab kematian yang tinggi pada
wanita di seluruh dunia (Canda et al., 2004). Insidensi kanker payudara cukup
meningkat, baik di negara maju maupun negara berkembang. Walau angka
kematiannya meningkat tidak sepesat insidennya, yang dikarenakan adanya upaya
deteksi dini dan kemajuan pengobatan namun metastase ke organ lain merupakan hal
yang menjadi masalah sangat serius (Notani, 2001).
Insiden kanker payudara pada wanita di seluruh dunia mencapai angka 23%
(1,38juta kasus) dari semua kasus baru kanker dan 14% dari seluruh kematian akibat
kanker pada tahun 2008. Dimana separuh dari kasus kanker payudara dan 60%
kematian diestimasi terjadi di negara-negara berkembang (Jemal et al.,2011)
Di Indonesia sendiri, angka kesakitan kanker pernah dilaporkan oleh Didid
Tjindarbumi tahun 2002, antara tahun 1988 sampai tahun 1991, angka kesakitan
kanker payudara (18%) menduduki peringkat 2 setelah kanker leher rahim (29%)
Oakley K.L. and Going J.J, 1995 menyebutkan bahwa pemeriksaan histopatologi
merupakan metode terpercaya dalam mendiagnosa lesi pada payudara, namun hal ini
sangat bergantung kepada cara pengambilan sampel dan kemampuan pembacaan
hasil oleh ahli patologinya. Karenanya, kesahihan hasil pemeriksaan masih subjektif

bergantung pada orang-perorang. Oleh karena itu diperlukan upaya yang
berkesinambungan untuk memperoleh biomarker yang lebih spesifik.
Identifikasi biomarker yang sensitif dan spesifik dari sel kanker payudara dalam
sirkulasi dan penentuan stadium berperan penting dalam manajemen terapi. Sampai
saat ini, beberapa macam tumor marker telah diteliti untuk mendeteksi sel kanker
payudara akibat banyaknya kasus metastase, tetapi banyak yang tidak spesifik karena
terekspresi pada kanker selain payudara. Karenanya, nilai diagnostiknya menjadi
terbatas (El-Sharkawy et al., 2007) Perkembangan alat pemeriksaan yang lebih
spesifik dan sensitif diharapkan akan dapat mendeteksi residu sel tumor yang
mungkin bermetastase dan untuk mengevaluasi hasil pengobatan (Bitisik et al.,2010)
Berbagai upaya telah dilakukan untuk mendeteksi keberadaan residu sel kanker,
antara lain dengan memanfaatkan Reverse transcriptase PCR dengan bahan dasar
epitel sel kanker payudara (CytoKeratin 19/CK-19, Cytokeratin 20/CK-20) dan juga
pemakaian marker khusus seperti Maspin. Namun pada penelitiannya, gen-gen ini
sangat rendah kadarnya pada darah tepi sehingga hasil transkripsinya sangat
diragukan (Cerveira et al.,2004)
Gen Human Mammaglobin (hMAM) ditemukan tahun 1996, merupakan anggota
uteroglobin. Dikenal sebagai mammaglobin-A, yakni glikoprotein yang mengandung
93 asam amino polipeptida. Fungsi selulernya tidak jelas diketahui. Namun
menariknya, ekspresinya hanya terbatas dalam epitel payudara. Hal yang paling
menarik dari gen ini adalah pemeriksaannnya cukup dengan menggunakan darah tepi

sehingga menjadikannya pemeriksaan yang kurang invasif bila dibandingkan dengan
pemeriksaan jaringan/biopsi (Bernstein et al, 2005)
Mammaglobin mRNA ada pada level yang tinggi dalam sel tumor payudara bila
dibandingkan dengan jaringan payudara yang bukan maligna (Raynor et al., 2002).
Deteksi hMAM dengan menggunakan RT-PCR diharapkan akan menjadi
pemeriksaan yang spesifik untuk mengidentifikasi sel maligna dalam sirkulasi darah
penderita kanker payudara dan akan menjadi target untuk mendiagnosa metastase
kanker payudara. Karenanya, akan dapat diharapkan akan menjadi marker kanker
payudara di masa mendatang (Ronchella et al., 2005)
1.2. Perumusan Masalah
Masalah dalam penelitian ini adalah: bagaimana gambaran ekspresi h-Mam di
dalam darah penderita kanker payudara di kota Medan?
1.3. Tujuan Penelitian
1.3.1. Tujuan umum adalah
Untuk mendeteksi keberadaan h-Mam-RNA dengan PCR pada penderita baru
kanker payudara di kota Medan sebagai alat bantu diagnostik untuk mendeteksi
metastase kanker payudara.

1.3.2. Tujuan khusus adalah :
a. Untuk mengetahui gambaran ekspresi h-Mammaglobin pada populasi penelitian.
b. Untuk mengetahui frekuensi stadium penderita pada populasi penelitian.
c. Untuk mengetahui hubungan antara ekspresi h-Mammaglobin dengan
stadium kanker payudara pada populasi penelitian.
1.4. Manfaat Penelitian
Hasil penelitian diharapkan bermanfaat untuk:
- Menambah wawasan bidang kesehatan untuk diagnostik, prognostik dan
prediktif serta penatalaksanaan terapi bagi penderita kanker payudara
- Memberi kemudahan bagi penderita dan dunia medis mengingat pemeriksaan
dengan menggunakan darah tepi, diperkirakan akan dapat menggantikan
pemeriksaan biopsi.

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Gambaran umum Kanker Payudara
2.1.1. Epidemiologi Kanker payudara
Kanker payudara merupakan salah satu jenis kanker yang paling umum pada
wanita dan merupakan penyebab kematian no 2 setelah kanker paru-paru (Canda et
al., 2004 dan Jemal et al., 2007).
Gambar 1, Anatomi payudara

Kejadian tahunan kanker payudara di seluruh dunia diperkirakan mencapai angka
satu juta kasus dengan sekitar 200,000 kasus di Amerika Serikat (27% dari semua
kanker pada wanita) dan sekitar 320,000 kasus di Eropa (31% dari semua kanker
pada wanita) (Stewart et al., 2004).
Di Amerika Serikat, kanker payudara masih merupakan jenis kanker yang paling
sering pada wanita, dengan sekitar 212,600 kasus baru didiagnosa setiap tahunnya
dan mengakibatkan kematian sebesar 15% dari semua kematian akibat kanker.
Sebagian besar kematian ini sebagai akibat dari metastase (Cristofanilli et al., 2005
dan Smigal et al., 2006).
Pada tahun 2007, diperkirakan ada 178.480 kasus baru kanker payudara invasif
terdiagnosis pada wanita. Jumlah kanker payudara baru pada tahun 2007 ini lebih
rendah dari perkiraan untuk tahun 2005. Hal ini mungkin disebabkan karena
penggunaan metode perhitungan yang baru, adanya alat estimasi baru yang lebih
akurat dan juga penurunan tingkat kejadian kanker payudara (American Cancer
Society, 2008).
Di Indonesia, kasus kanker payudara dilaporkan oleh Didid Tjindarbumi, 2002
menduduki peringkat kedua setelah kanker leher rahim, dimana angka kesakitan
berkisar 18%.

Kanker payudara pada pria jarang terjadi, adapun jumlah kasusnya hanya 1% dari
semua kanker pada pria dan kurang dari 1% dari semua kasus kanker payudara yang
terdiagnosa. Etiologi kanker payudara laki-laki tidak jelas, diperkirakan tingkat
hormonal mungkin memainkan peranan penting dalam perkembangan penyakit ini
(Giordano, 2005).
2.1.2. Faktor-faktor resiko Kanker Payudara
Etiologi kanker payudara tidak diketahui secara jelas meskipun sejumlah faktor
resiko telah diidentifikasikan akan mempengaruhi perkembangan kanker payudara.
Faktor-faktor ini termasuk riwayat keluarga penderita kanker payudara, predisposisi
genetik, status menopause, riwayat menstruasi dan riwayat reproduksi (American
Cancer Society, 2008).

Gambar 2, Kanker Payudara.
2.1.2.a. Riwayat Keluarga:
Adanya riwayat keluarga merupakan faktor resiko yang paling penting dalam
perkembangan kanker payudara. Keturunan dari penderita kanker payudara
memiliki resiko peningkatan penyakit ini. Resiko ini meningkat sejalan dengan usia
saat terkena. Selain itu, ada kecenderungan individu keturunan tingkat pertama
akan beresiko lebih tinggi dibandingkan dengan keturunan tingkat dua (Loman et al.,
2003).

2.1.2.b. Kanker pada payudara Lain:
Armstrong et al. (2000) mengemukakan bahwa faktor resiko utama untuk
terkena kanker payudara primer adalah adanya riwayat pribadi kanker sebelumnya
pada payudara sisi yang lain. Namun, kanker kedua ternyata juga bisa muncul pada
payudara yang sama. Kebanyakan kanker payudara bisa timbul kembali dalam lima
tahun pertama setelah pengobatan. Pasien dengan tumor primer yang berdiameter
kurang dari 1 cm dan nodul aksila negatif mempunyai tingkat kekambuhan yang
rendah.
2.1.2.c - Penyakit Payudara yang sebelumnya jinak:

Wanita dengan tumor jinak payudara mempunyai peningkatan resiko terkena
kanker payudara. Resiko ini bervariasi sesuai dengan gambaran subkategori
histologis seperti proliferatif atipik yang mungkin merupakan pencetus dari kanker
payudara (Terry and Rohan, 2002).
2.1.2.d. Umur:
Dewasa ini, wanita Amerika memiliki resiko terkena kanker payudara sebesar
12,3% (1 dari 8 wanita) selama kehidupannya. Sementara pada tahun 1970-an,
resiko seumur hidup terdiagnosa menderita kanker payudara adalah 1 dari 11
wanita. Peningkatan ini terjadi karena harapan hidup yang lebih lama, serta
penggunaan terapi sulih hormone (HRT-Hormon Replacement Therapy) jangka
panjang dan meningkatnya prevalensi obesitas (American Cancer Society, 2008).
2.1.2.e Riwayat Menstruasi dan Status Menopause :
Insiden kanker payudara meningkat sejalan dengan bertambahnya usia wanita,
tetapi lebih umum terjadi pada wanita pascamenopause (Miksicek et al., 2002).
Menopause yang tertunda akan mengakibatkan jumlah siklus ovulasi lebih panjang,
yang meningkatkan resiko kanker payudara. Pada sisi lainnya, pembedahan yang
mencetuskan menopause (ovariektomi atau histerektomi) sebelum usia 35 tahun
ternyata menurunkan resiko kanker payudara (Ursin et al., 2005).
2.1.2.f Riwayat Reproduksi dan Menyusui:

Meningkatnya usia menarche, usia yang muda pada kelahiran anak pertama dan
jumlah paritas yang tinggi mempunyai kaitan yang erat dengan penurunan resiko
kanker payudara pada populasi umum (Tryggvadottir et al, 2003). Wanita yang
menyusukan bayi selama 12 bulan atau lebih akan berkurang resiko terkena kanker
payudara. Namun, wanita yang melahirkan tetapi tidak menyusukan bayinya
mempunyai resiko lebih tinggi untuk terkena kanker payudara. Peningkatan resiko
juga terjadi pada wanita yang belum pernah hamil (Wrensch et al., 2003).
2.1.2.g - Hormon Eksogen:
Estrogen eksogen, baik dalam bentuk kontrasepsi oral kombinasi (COC-
Combined Oral Contraception) atau terapi sulih hormon (HRT), juga mengakibatkan
peningkatan resiko kanker payudara, namun hal ini tergantung pada durasi paparan
dan apakah estrogen digunakan tunggal atau dalam bentuk kombinasi dengan
progesteron (Antoine et al., 2004). Sebuah studi meta-analisis menunjukkan bahwa
pasca penggunaan COC selama 10 tahun, ditemukan adanya peningkatan resiko
sebesar 24% terkena kanker payudara (Connor dan Stuenkel, 2001).
2.1.2.h Faktor Resiko akibat gaya hidup:
h.1 Konsumsi Alkohol :
Pöschl dan Seitz (2004) mengemukakan bahwa alkohol dapat bertindak secara
tidak langsung melalui metabolitnya yaitu asetaldehida utama, suatu karsinogen

yang dapat bertindak sebagai bahan mutagen, dan atau sendiri merupakan
promotor tumor, menyebabkan peningkatan aktivasi prokarsinogen.
h.2. Obesitas:
Peningkatan resiko terkena kanker payudara pada wanita dengan obesitas
diakibatkan oleh jumlah estrogen endogen yang lebih tinggi, sebab jaringan adiposa
merupakan sumber yang penting dari estrogen (McTiernan et al, 2003).
h.3. Kebiasaan diet:
Konsumsi tinggi lemak terutama lemak jenuh dikaitkan dengan peningkatan
resiko kanker payudara. Sementara jenis tertentu dari asam lemak tak jenuh ganda
(PUFA), omega-3 PUFA, tampaknya menjadi pelindung (Elahi et al., 2004)
Di sisi lain, konsumsi buah dan sayuran yang merupakan sumber bahan yang kaya
antioksidan alami, terbukti menurunkan resiko kanker secara umum, dan kanker
payudara pada khususnya. Efek protektif dilaporkan lebih menonjol pada wanita
pasca menopause (American Cancer Society, 2008).
h.4. Kurangnya aktivitas fisik:
Aktivitas fisik yang dilakukan mulai masa remaja sampai dewasa (12 - 50 tahun)
menurunkan angka kesakitan kanker payudara sebesar 27%. Aktivitas fisik dapat

mengurangi resiko dengan cara menunda berlangsungnya menarche dan
memodifikasi kadar hormon secara biologis (Lee et al., 2001).
h.5. Penggunaan dan paparan Tembakau:
Yang terkait dengan tembakau adalah bahan karsinogeniknya (misalnya,
hidrokarbon aromatik polisiklik dan amina aromatik), memberikan hubungan yang
positif antara merokok dan resiko terkena kanker payudara (American Cancer
Society, 2008).
2.1.2.i Paparan Radiasi Pengion:
Di antara korban bom atom dan wanita yang terkena radiasi pengion sebagai
bagian dari pengobatan mereka, mempunyai peningkatan resiko terkena kanker
payudara bila usia muda telah terkena paparan (Frazier et al, 2003). Hal ini
disebabkan setelah usia menopause tercapai, maka terjadi penurunan proliferasi
jaringan, dimana sel yang rusak, gagal berkembang menjadi sel kanker setelah
terkena paparan. Sebaliknya, ketika seorang gadis usia muda terkena radiasi, ia
masih memiliki siklus menstruasi selama beberapa dekade, sehingga lebih mungkin
terjangkit semua jenis kanker termasuk kanker payudara
2.1.3. Dasar Genetika Kejadian Kanker Payudara dan Progresivitasnya:

Karena kanker payudara adalah kanker yang paling sering didiagnosis pada
wanita dengan sekitar 7% dari kanker payudara diyakini berkaitan erat dengan
faktor keturunan, maka pengetahuan tentang kontrol genetik pertumbuhan sel
adalah penting, tidak hanya untuk memahami evolusi tumor tetapi juga untuk
diagnosis yang tepat, pengobatan, pemantauan, dan untuk pencegahannya (Ergul
and Sazci. 2000).
2.1.3.a – Mutasi gen pada Kanker Payudara familial.
Penelitian klinis agregasi kanker payudara familial mengidentifikasikan
setidaknya ada lima sindroma genetik dengan pola dominan autosomal yang
berkaitan dengan kanker payudara. Sindrom ini masing-masing memiliki kaitan
mutasi genetik yang muncul secara konsisten . Gen-gen yang terlibat termasuk gen
BRCA1 dan BRCA2 (sindroma kanker payudara - ovarium 1 dan 2), p53 (Sindroma Li-
Fraumeni) , gen ATM (mutasi ataksia telangiectasia), dan PTEN (penyakit Cowden’s)
(Ergul and Sazci., 2000 dan Axilbund et al., 2011).
a.1. BRCA1 dan BRCA2:
Sebuah analisis yang diterbitkan pada tahun 1990 memperlihatkan bahwa ada
gen pada kromosom 17 yang mengakibatkan kanker payudara dalam sebuah
keluarga dengan beberapa yang melibatkan payudara dan ovarium. Pemetaan
genetik selanjutnya dan studi kloning molekuler mengidentifikasikan adanya gen

(Kanker Payudara) BRCA1 pada tahun 1994. Identifikasi gen BRCA2 yaitu gen kanker
payudara lainnya ada pada kromosom 13, dilaporkan sekitar 1 tahun kemudian.
(Brekelmans et al., 2001 dan Egul and Sazci., 2000).
Meskipun mutasi pada gen BRCAl dan BRCA2 telah dikaitkan dengan tingginya
insiden kanker payudara, fungsi yang tepat dari protein ini belum sepenuhnya
diketahui. Ada data yang mendukung pendapat bahwa fosforilasi protein (ATM)
akan mengaktifkan protein BRCAl sebagai respon atas kerusakan DNA. Selanjutnya,
BRCA1 mengalami fosforilasi membentuk kompleks dengan BRCA2 dan RAD 51,
mengaktifkan perbaikan DNA oleh rekombinasi homolog (Grebenchtchikov et al.,
2004).
Oleh karena itu asosiasi protein BRCAl dan BRCA2 dengan Rad 51 akan
mengontrol integritas genomik dan stabilitas ,karena Rad 51 diperlukan untuk
rekombinasi mitosis meiosis dan perbaikan kerusakan untaian ganda DNA (de la
hoya et al., 2006).
a.2. gen p53:
Gen P53 (protein 53kDa), terletak di kromosom 17 pada regio p13.1,
mengkodekan faktor transkripsi p53, yang merupakan regulator kunci dari pos
pemeriksaan Gl dari siklus sel (De Jong et al., 2002) .

Kerusakan DNA, mengaktifkan p53, yang mengatur regulasi berbagai gen target
yang terlibat di dalam:
(I) Kontrol siklus sel: Biasanya dengan kerusakan atau stres pada DNA, p53
berakumulasi, mengtransaktivasi gen yang mengkode inhibitor p21 cyclin
dependent kinase, sehingga merangsang terjadi penghentian siklus sel.
(II) Perbaikan DNA: keberhasilan perbaikan DNA akan memungkinkan sel untuk
terus berfungsi secara normal.
(III) Apoptosis: Sel yang gagal memperbaiki kerusakan DNAnya akan mengalami
apoptosis.
Pada kanker payudara, mutasi p53 berkaitan erat dengan penyakit yang lebih
agresif dan memperburuk kelangsungan hidup secara keseluruhan, namun,
frekuensi ini lebih rendah pada kanker payudara dibandingkan tumor padat lainnya
(Gasco et al., 2002).
Pada kasus yang jarang, mutasi pada p53 menyebabkan kanker payudara yang
didiagnosa pada wanita sebelum usia 35 tahun. Bentuk kanker payudara familial ini
dikaitkan dengan sindrom Li-Fraumeni, yang selain terkena kanker payudara, juga
memiliki kaitan dengan kanker yang lain, seperti sarkoma jaringan lunak, tumor
otak, osteosarkoma, leukemia, dan karsinoma adrenokortikal. Tumor ini sering

multipel dan onset awalnya, terjadi pada masa kecil (De Jong et al., 2002 dan
Collado et al. 2004).
Gambar Apoptosis dari: http://www.genome.jp/keggbin/show_pathway?

scale=0.82&query=&map=hsa04210&scale=1.0& show_description=show&multi_query=

a.3 Gen telangiectasia Ataksia (ATM) bermutasi:
Ataksia telangiectasia (AT) adalah gangguan resesif autosomal yang ditandai
dengan ataksia cerebellar, telangiektasis, cacat imunitas, dan adanya kecenderungan
untuk keganasan. Gen ATM mengkode protein yang terlibat dalam kontrol siklus sel
dan perbaikan DNA namun gen tunggal pada 11q dapat menyebabkan penyakit
(Ergul and Sazci., 2000 dan Axilbund et al., 2011).
a.4. Gen PTEN :
Mutasi pada gen PTEN(fosfatase dan homologi TENsin) bertanggung jawab
menyebabkan penyakit Cowden, yang di samping kanker payudara tampak adanya
beberapa hamartomas di kulit dan saluran pencernaan. Gen PTEN, terletak pada
kromosom 10Q, mengkode protein tirosin fosfatase dengan homologi tensin. Mutasi
somatik pada gen PTEN jarang terjadi pada kanker payudara (Ergul and Sazci., 2000
dan Axilbund et al., 2011)
2.1.4. Klasifikasi kanker payudara:
Kanker payudara dapat diklasifikasikan sesuai dengan jenis histopatologi dan
menurut sistem staging TNM.

2.1.4.a - Histopatologi Jenis Kanker Payudara
WHO classification of Carcinoma of the
breast
1. NonInvasive
Carcinoma Ductal
Carcinoma in situ Lobular
Carcinoma in situ
2. Invasive Carcinoma
Invasive ductal carcinoma
Invasive lobular carcinoma
Mucinous carcinoma
Medullary carcinoma
Papillary carcinoma
Tubular carcinoma
Adenoid cyst carcinoma
Secretory (juvenile) carcinoma
Apocrine carcinoma
Carcinoma with metaplasia
Inflamatory carcinoma
Other (specify)
3.1. Paget’s Disease of the Nipple
(Wood W.C. et al., 2005)
2.1.4.b Klasifikasi TNM :
Tumor-node-metastasis (TNM) adalah sistem yang dikembangkan oleh Pierre
Denoix pada tahun 1942 dan mewakili upaya untuk mengklasifikasikan kanker

berdasarkan atribut morfologi utama tumor ganas yang dianggap mempengaruhi
prognosis penyakit: ukuran tumor primer (T), keberadaan dan tingkat keterlibatan
kelenjar getah bening regional (N), serta adanya metastasis jauh (M). International
Union Against Cancer (IUAC) menyajikan klasifikasi klinis kanker payudara
berdasarkan sistem TNM pada tahun 1958, dan American Joint Committee on
Cancer (AJCC) menerbitkan sebuah sistem staging kanker payudara berdasarkan
TNM dalam manual stadium kanker pertama mereka pada tahun 1977. Dan sejak
saat itu, revisi reguler telah dilakukan untuk memperlihatkan kemajuan besar dalam
diagnosis dan pengobatan. Dalam revisi tahun 1987, perbedaan antara versi AJCC
dan IUAC dari sistem TNM dihapuskan (Singletary and Connolly, 2006).
2.1.5. Staging Kanker Payudara:
Staging atau stadium kanker payudara bergantung pada kriteria klinis dan
patologis dimana hal ini berguna dalam pengobatan dan prognosis penyakit. Metode
staging yang digunakan saat ini tergantung pada sistem TNM.
Karena sistem TNM merupakan penggabungan dari AJCC dan IUAC (Singletary
and Connoly., 2006), maka tidak ada lagi perbedaan di antara keduanya.
TNM Staging System for Breast Cancer (American Joint Committee on Cancer
Staging System, 2003)

2.1.6. Diagnosa Kanker Payudara
Diagnosa kanker payudara didasarkan pada interpretasi atas informasi dari
jaringan histologis. Diagnosis dapat dibantu dari sejarah medis, pemeriksaan fisik,

mamografi, ultrasonografi, pemeriksaan sitologi dan sejumlah teknik lainnya, tetapi
hasil dari masing-masing akhirnya memerlukan konfirmasi dengan pemeriksaan
histologis jaringan yang relevan (Margolese et al., 2003).
2.1.6.a. Diagnosa Klinis:
a.1. Riwayat medis:
Sebagian besar keluhan tentang payudara bukan terkait kanker. Kondisi jinak
jauh lebih sering dari kondisi ganas, tetapi tanda-tanda dan gejala kanker tidak unik
sehingga sukar dibedakan dengan kondisi jinak. Untuk alasan ini, setiap gejala yang
berkaitan dengan payudara meningkatkan kemungkinan akan adanya kanker
(Margolese., 2003).
Riwayat medis meliputi evaluasi keluhan yang terkait dengan payudara, ini
meliputi:
a. Gejala pada lesi primer:
• Massa pada payudara termasuk durasi, perubahan ukuran, dan sensasi nyeri.
• Puting / areola yang berdarah.
• Ulkus atau kemerahan pada kulit payudara.
b. Data informatif lainnya

• Informasi tentang masalah payudara sebelumnya, aspirasi ataupun biopsy
payudara.
• Jika pasien telah mengalami histerektomi, alasan untuk operasi dan apakah
ovarium telah diangkat.
• Riwayat terapi sulih hormon dan kontrasepsi oral saat ini atau sebelumnya.
• Riwayat reproduksi, usia menarche dan menopause serta tanggal periode
menstruasi terakhir.
• Riwayat keluarga yang cermat sangat penting, terutama mengenai payudara dan
kanker ovarium, ini berkaitan dengan sindrom genetik kanker keluarga yang
mempengaruhi kanker payudara. (Margolese et al., 2003)
a.2. Pemeriksaan fisik:
Pemeriksaan fisik payudara meliputi inspeksi dan palpasi payudara dan dinding
dada serta kelenjar getah bening aksila supraklavikula. Ini harus dilakukan secara
sistemik dan profesional dengan lingkungan yang nyaman dan santai serta menjamin
privasi pasien. Pada wanita premenopause yang terbaik diperiksa adalah satu
minggu setelah onset haid terakhir mereka, yaitu ketika kekenyalan dan
pembengkakan payudara paling minimal (Winchester., 1992).

Tanda-tanda fisik pada pasien dengan kanker payudara dapat mencakup satu
atau beberapa hal berikut:
a.2.1. Massa payudara:
Terdeteksi adanya massa payudara adalah keluhan yang paling umum yang
membuat wanita mencari nasihat medis. Kuadran luar atas payudara adalah tempat
lesi kanker yang paling sering. Kekenyalan massa, ketidakteraturan, perlekatannya
pada kulit, dan edema atau retraksi dari kulit di atasnya mengarah pada keganasan
(Raina et al., 2005).
a.2.2. Discharge pada puting:
Discharge puting spontan, baik dari satu payudara saja, dan terbatas pada satu
saluran meningkatkan kemungkinan kanker. Discharge akibat kanker biasanya
mengandung darah. Perubahan puting terkait dengan kanker berupa retraksi,
infiltrasi langsung, atau penyakit Paget. Penyakit Paget pada puting susu terjadi
karena sel-sel ganas yang menyerang epidermis puting. (Margolese et al., 2003).
a.2.3. Perubahan kulit:
Retraksi kulit diakibatkan pemendekan ligamen Cooper karena diinfiltrasi oleh
kanker. Lesi kulit lainnya termasuk ulserasi kulit dan edema (peau d'orange) yang

mungkin disertai dengan kemerahan. Juga nodul satelit dermal menandakan
penyebaran ke kulit (Margolese et al., 2003).
2.1.6.b. Diagnosa secara radiologis:
b.1. Mammografi:
b.2. USG (sonografi):
b.3. Magnetic Resonance Imaging (MRI):
2.1.6.c. Aspirasi Jarum Halus:
Aspirasi jarum halus (FNA) dilakukan untuk membedakan kista dengan tumor
padat dan untuk memperoleh spesimen sitologi. Jika cairan yang diperoleh, maka
kista dievakuasi total. Hilangnya massa yang teraba secara keseluruhan tanpa
perdarahan (haemocult-negatif) merupakan indikasi dari kista sederhana (Giard and
Herman, 1992).
2.1.6.d. Biopsi:
Biopsi dapat berupa
-. Biopsi kulit:
-. Biopsi inti:
-. Biopsi inti dipandu USG:
-. Biopsi bedah terbuka:
2.1.6.e - Diagnosis Laboratorium:

Pemeriksaan laboratorium yang digunakan untuk mendiagnosa kanker payudara
biasanya diklasifikasikan sebagai berikut:
e.1. Pemeriksaan laboratorium umum:
Ini digunakan untuk mengetahui kondisi umum pasien. Pemeriksaan ini
termasuk hitung darah lengkap, laju endap darah, fungsi ginjal dan fungsi hati, asam
urat, dan penanda tulang seperti kalsium, fosfor dan fosfatase alkali (Margolese et
al., 2003).
e.2. Tumor marker payudara (Harris et al.,2007)
Tabel berikut memuat tumor marker yang lazim diperiksa untuk membantu
menegakkan diagnosa pada sangkaan suatu kanker payudara:
Tumor Marker kanker payudara Kegunaan klinis
1. CA 15-3 dan CA 27.29 - Skrining, diagnosa

dan staging awal
penyakit
- Pemantauan setelah terapi
primer.
- Pemantauan rekurensi kanker
payudara
2. CEA - Skrining, diagnose dan
staging awal penyakit
-Tidak untuk pemantauan setelah
terapi primer
3. ER/ PR - Pemantauan reseptor endokrin
ER/ PR penderita kanker
payudara yang diperkiraan
berfaedah bila mendapat terapi

endokrin.
4. HER2/Neu - Pemantauan ekspresi dari setiap
kasus tumor invasif,
penentu perlu tidaknya
terapi dengan anti
HER2/Neu.
- Perkiraan prognosa
5. P-53 - Marker yang tidak spesifik
untuk kanker payudara
6. uPA dan UPA-1 Diperiksa dari jaringan

payudara Level rendah
menggambarkan kemungkinan
kecil untuk rekurens
Kemoterapi tidak efektif
pada level tinggi
2.1.7. Program penapisan (Skrining):
Karena kanker payudara adalah kanker yang menyebabkan kematian yang tinggi
pada wanita di negara-negara di seluruh dunia, maka program skrining telah
diperkenalkan untuk memfasilitasi temuan kasus di kalangan wanita tanpa gejala
terutama yang teridentifikasi dengan faktor risiko(Elmore et a.l, 2002. Dan Smigal et
al., 2006).
Tujuan dari skrining kanker payudara adalah deteksi dini keganasan pada tahap
yang diharapkan dapat menurunkan angka kematian (Autier, 2002).
2.2. PENANDA TUMOR KANKER PAYUDARA
2.2.1. Definisi:

Tumor marker adalah suatu zat yang dapat dideteksi dalam jumlah yang lebih
tinggi pada urin, darah atau jaringan dari pasien penderita kanker. Zat ini dapat
berupa protein, enzim, bahan biokimia atau antigen (Henry and Hayes, 2006).
2.2.2. Kepentingan klinis:
Tumor marker dapat dihasilkan baik oleh kanker sendiri atau oleh tubuh sebagai
respon terhadap kanker. Secara umum, kadar penanda tumor lebih rendah pada
tahap awal penyakit (tapi masih lebih tinggi dari normal) dan meningkat pada
penyakit tahap lanjut. Selanjutnya, titernya turun sebagai respon terhadap
pengobatan dan meningkat kembali ketika kanker berkembang (Henry and Hayes,
2006).
Namun, Perkins et al. (2003) menyatakan bahwa penanda tumor tidak cukup
spesifik untuk digunakan sendiri dalam mendiagnosa kanker. Kadar penanda tumor
dapat meningkat pada orang dengan penyakit jinak, selain itu mereka tidak
meningkat pada setiap orang dengan kanker, terutama mereka dengan stadium
awal penyakit.
2.2.3. Klasifikasi:
Sejumlah besar penanda ada pada kanker payudara .Penanda ini dapat
diklasifikasikan ke dalam penanda konvensional, penanda diagnostik, skrining dan
penanda prognostik:

2.2.3.a. Penanda Konvensional:
Ada beberapa penanda tumor berbasis serum untuk kanker payudara, seperti CA
15-3, CA 27-29, CEA, dan CA 19-9, namun penanda konvensional ini tidak sensitif
dan tidak spesifik. Selain itu, mereka tidak dapat digunakan sebagai faktor
prognostik independen. Penanda yang paling banyak digunakan adalah CA 15-3 dan
CEA (Duffy, 2006).
a.1. Carcinoembryonic Antigen (CEA):
Antigen Karsino Embrionik diidentifikasi pada tahun 1965 oleh Gold dan
Freedman, sebagai antigen pertama manusia yang terkait dengan penyakit kanker,
dan merupakan salah satu penanda tumor yang paling banyak digunakan sampai
saat ini. Awalnya dianggap spesifik untuk kanker usus besar tetapi penelitian
berikutnya membuktikan keragaman fungsinya. Dihasilkan oleh jaringan kanker
payudara yang kemudian disekresikan ke dalam darah dan cairan tubuh. Ditemukan
juga bahwa CEA konsentrasi tinggi preoperatif, berhubungan dengan prognosa yang
buruk pada kanker payudara (Duffy, 2006).
a.2. Karbohidrat antigen (CA 15-3):
CA 15-3 bernilai rendah untuk deteksi dini kanker payudara karena
sensitivitasnya rendah (33%), dengan demikian tidak dapat digunakan untuk tujuan
skrining (Guadagni et al., 2001). Meskipun aplikasi utama CA 15-3 adalah untuk

memantau dan mendeteksi kekambuhan pada pasien yang didiagnosa dengan
kanker payudara, namun American Society of Clinical Oncology (ASCO) tidak
membenarkan penggunaan rutin CA 15-3 pada pasien yang sebelumnya terdiagnosis
asimtomatik karena kurangnya kepekaan dan efektivitas rendah CA 15-3 untuk
deteksi dini kekambuhan (30% dari pasien dengan penyakit berulang ternyata
levelnya tidak meningkat, sementara 8% tanpa kekambuhan terdeteksi ada) (Duffy,
2006)
CA 15-3 ternyata juga terdeteksi pada pasien dengan kanker saluran
pencernaan, kanker paru-paru, kanker ovarium, kanker serviks, kanker prostat dan
kanker pankreas. Oleh karena itu, CA 15-3 tidak cukup spesifik sebagai penanda
untuk mendeteksi kasus kanker payudara (Jones, 1999).
2.2.3.b. Penanda Diagnostik:
O'Brien (2002) mengemukakan bahwa penanda baru seperti mammaglobin, telah
memberikan harapan sebagai penanda tambahan kanker payudara primer dan juga
digunakan untuk mendeteksi metastase tersembunyi. Sensitivitasnya mencapai 86%.
Deteksi dini sel-sel kanker payudara yang beredar dalam sirkulasi dengan metode
morfologi telah ditingkatkan menjadi metode sensitif berbasis PCR (Bae et al.,2000).
Lacroix (2006) melaporkan bahwa deteksi sel tumor dalam sirkulasi
menggunakan kombinasi penanda epigenetik mungkin tidak hanya meningkatkan

wawasan tentang perilaku biologis dari tumor primer individu, tetapi juga dapat
memberikan informasi prognostik yang berharga yang dapat dengan mudah
dipantau sepanjang perjalanan penyakit. Penanda epigenetik, seperti sekuens
metilasi DNA, akan memungkinkan deteksi kanker payudara tanpa bantuan
mammografi.
2.2.3.c. Penanda prognosis:
Penanda prognosis menunjukkan kemungkinan hasil seperti kekambuhan tumor
atau kelangsungan hidup pasien, terlepas dari pengobatan yang diterima pasien
(Ross et al., 2003.).
Duffy (2006) menyatakan bahwa fitur kunci dari penanda prognostik yang
berguna secara klinis termasuk kemudahan dan keandalan pemeriksaan; konfirmasi
bahwa jenis perawatan yang digunakan tidak mempengaruhi makna prognostiknya;
dan bahwa penanda menyediakan informasi hasil penyakit yang independen dari
status faktor klasik lainnya.
Gen HER-2 diamplifikasi atau diekspresikan sebesar 20-30% dari semua kanker
payudara invasif. Amplifikasi atau ekspresi berlebihan umumnya dikaitkan dengan
prognose yang buruk (Ross et al., 2003).
Penanda lain yang digunakan untuk menentukan prognosis pada kanker
payudara adalah reseptor estrogen (ER). Meskipun penggunaan utama dari ER

adalah untuk melihat respon hormon pada kanker payudara, namun pasien dengan
ER positif cenderung memiliki prognosis yang lebih baik daripada ER-negatif pasien,
setidaknya untuk 5-6 tahun pertama setelah diagnosis awal (Duffy, 2006).
Pasien dengan nodul negatif pada aksila dan dengan UPA dan PAI-1 level rendah,
memiliki probabilitas rendah terkena penyakit berulang dan dengan demikian akan
dapat mengurangi biaya kemoterapi tambahan. (Harbeck et al., 2002).
2.2.3.d. Penanda prediktif:
Sebuah penanda prediktif dapat didefinisikan sebagai faktor yang menunjukkan
sensitivitas atau resistensi terhadap pengobatan tertentu. Ada dua jenis penanda
prediktif: Penanda yang memprediksi kemungkinan bahwa kanker payudara akan
berkembang pada wanita yang saat ini bebas penyakit (penanda predisposisi); dan
penanda yang dapat memprediksi apakah suatu kasus baru atau kasus kekambuhan
dapat merespon terapi tunggal atau kombinasi (Ross et al, 2003 dan Duffy., 2005).
d.1. Penanda predisposisi:
Peto (2002) menyatakan bahwa kanker payudara familial meliputi sekitar 25%
dari semua kasus penyakit pada wanita yang berusia kurang dari 30 tahun. Kelainan
genetik baik BRCA 1 atau BRCA2 tampaknya mengakibatkan sekitar 90-95% dari
kasus kanker payudara keluarga dengan sisanya disebabkan oleh lain, terutama gen
supresor tumor.

d.2. Prediksi respon terhadap terapi:
Status HER-2/neu pada kanker payudara yang baru didiagnosa dapat berfungsi
baik sebagai faktor prognostik yang berdiri sendiri dan sebagai faktor prediktif untuk
respons terhadap terapi trastuzumab (Ross et al., 2003). Antibodi monoklonal yang
diarahkan terhadap HER-2. Ketika diberikan dengan kemoterapi untuk kanker
payudara lanjut yang HER-2-positif, menunjukkan untuk peningkatan maupun
kelangsungan hidup secara keseluruhan (25,1 vs 20,3 bulan, p = 0,046) dibandingkan
dengan kemoterapi saja (Slamon et al., 2001).
Menurut pedoman Eropa (EGTM) dan Amerika (ASCO), pemeriksaan ER harus
dilakukan pada semua pasien dengan kanker payudara (Molina et al, 2005). PR harus
diperiksa bersama dengan ER, karena pasien yang memiliki kedua reseptor lebih
mungkin menerima manfaat dari terapi hormon dibandingkan mereka yang memiliki
ER tapi kurang PR. Juga penemuan modulator respon estrogen dan aromatase
inhibitor, telah menambahkan strategi baru untuk mengevaluasi tumor pada terapi.
2.3. Mammaglobin
Gen mammaglobin manusia (h-MAM) mengkode sekresi protein mammaglobin-
A, yang berkaitan dengan kanker payudara manusia. Selain itu, ekspresinya juga
hanya terbatas pada epitel payudara. Mammaglobin hanya dikonservasi pada

manusia dan simpanse dan tidak ada pada genom mamalia lain (Watson et al.,
1998).
buah gen baru

yang
.3.1. Gen Mammaglobin manusia:
Watson dan Fleming tahun 1996, mengidentifikasikan
hanya terdapat dalam jaringan payudara. Gen ini, yang dikenal sebagai
mammaglobin (MG), mengkodekan protein dengan 93 asam amino dan massa
molekul seberat 10.5kDa (Watson and Fleming, 1996).
Gen h-MAM dipetakan pada kromosom 11q12.3-q13.1; kromosom yang
berkaitan dengan kanker payudara dan mengkode glikoprotein 10,5 kDa. Gen h-

MAM terdiri dari tiga ekson (119 bp, 188 bp dan 199 bp) dan dua intron (603 bp dan
1888 bp) (Watson et al., 1998 dan Cerveira et al. 2004).
Gen h-MAM menampilkan dua karakteristik yang menunjukkan bahwa
ekspresinya relevan dengan biologi kanker payudara. Pertama, analisa Nothern blot
dan analisa RT-PCR menunjukkan bahwa ekspresi gen h-MAM terbatas pada kelenjar
air susu. Kedua, kadar mRNA mammaglobin yang tinggi hanya muncul pada sel
tumor payudara (Watson et al., 1998. dan Raynor et al., 2002) .
2.3.2. Kimia dari Protein Mammaglobin:
Mammaglobin-A berukuran sangat kecil, terglikosilasi tinggi,dan secara aktif
mensekresi 10,5 kDa glikoprotein. Mammaglobin-A memiliki 93-asam amino urutan
polipeptida dan dengan 19 asam amino hidrofobik urutan sinyal peptida (Span et al,
2004).
Mammaglobin-A adalah anggota dari keluarga protein sekretori epitel, dikenal
dengan nama uteroglobin, terletak pada kromosom 11q12.2 (Span et al., 2004). Ada
dua fungsi utama uteroglobin dan sekretoglobin lain yang paling sering dipelajari.
Fungsi pertama adalah pengikatan ligan, karena mereka dapat mengikat steroid dan
fibronektin. Fungsi kedua adalah sifat anti-inflamasi, yang mana kurangnya
uteroglobin dikaitkan dengan peningkatan ekspresi sitokin inflamasi seperti
interleukin-4 (IL-4) dan IL-13 (Sjödin, 2005).

Mammaglobin-A alamiah membentuk suatu heterodimer dengan lipophilin-B
(anggota keluarga uteroglobin yang diekspresikan dalam jaringan payudara dan
jaringan lain), yang dikenal sebagai kompleks protein mammaglobin (mammaglobin
/ lipophilin-B) dalam suatu ikatan kovalen, dan dimerisasi ini sangat penting untuk
stabilisasi protein mammaglobin-A. Lipophilin-B mRNA diekspresikan dalam 70%
tumor payudara dan menunjukkan korelasi kuat dengan profil ekspresi mRNA dari
mammaglobin (Carter et al., 2003).
2.3.3. Kegunaan klinis:
2.3.3.a. Mammaglobin-A sebagai Marker untuk Kanker Payudara:
Ekspresi Mammaglobin-A merupakan penanda sensitif dan spesifik untuk sel-sel
epitel payudara neoplastik dan memberikan bukti yang cukup menjanjikan sebagai
penanda molekuler untuk deteksi dini, staging, prognosis, dan/atau pemantauan
kekambuhan kanker payudara(El-Sharkawy et al., 2007; Bernstein et al., 2005; Silva
et al., 2002).
Ekspresi Mammaglobin merupakan faktor prognostik independen yang kuat
untuk kekambuhan atau bebasnya pasien dari kanker payudara primer. (Núñez-Villar
et al., 2003 dan Span et al., 2004).
a.1. Spesifisitas dari Mammaglobin:

a.1.a Ekspresi spesifik pada Payudara:
Ekspresi gen Mammaglobin tidak terdeteksi pada jaringan epitel rahim, prostat,
kolon, paru maupun ovarium. Selain dari kelenjar susu pada payudara, mRNA
mammaglobin tidak dapat dideteksi dalam jaringan non neoplastik lainnya. Hasil ini
menunjukkan potensi penggunaan ekspresi gen mammaglobin sebagai penanda
yang sangat spesifik untuk kanker payudara (Bernstein et al., 2005).
Pada tumor payudara primer, peningkatan ekspresi mammaglobin bertepatan
dengan kejadian metaplasia. Dalam jaringan payudara jinak dengan epitel apokrin
metaplastik, immunoreaktivitas mammaglobin tampak di dalam epitel maupun
dalam cairan kista apokrin. Kekhususan pola-pola pewarnaan imunohistokimia (IHC)
yang positif didokumentasikan oleh sinyal yang berasal dari spesimen identik yang
diinkubasi dengan serum kelinci praimun atau antiserum prainkubasi
antimammaglobin (Watson et al., 1999 and Gillanders, 2005).
Ada beberapa penelitian yang menggunakan mammaglobin untuk mendeteksi
sel-sel metastase tumor payudara dalam darah, kelenjar getah bening, sumsum
tulang (Zehentner et al., 2004) dan paru-paru (Koga et al., 2004). Penelitian-
penelitian ini menunjukkan hasil yang menjanjikan untuk penggunaan mammaglobin
sebagai penanda molekul untuk sel kanker payudara. Ekspresi Mammaglobin yang
terbatas pada jaringan payudara menghasilkan ide tentang strategi pengobatan

kanker payudara berbasis mammaglobin, misalnya dengan menargetkan tumor
kanker payudara dengan antibodi mammaglobin, imunoterapi dengan target
mammaglobin dan terapi vector gen dengan mammaglobin sebagai promotor
ekspresi Bax, yang akan membantu apoptosis sel tumor payudara (Sjödin, 2005).
a.1.b. Kontrol ekspresi pada subyek sehat dan payudara non-kanker:
Penanda molekuler selain h-MAM, terekspresi pada sel-sel normal dalam darah
tepi (Peripheral Blood/PB) atau sumsum tulang (Bone Marrow/BM) subyek sehat,
dan pada pasien dengan keganasan hematologi. Tidak seperti h-MAM, mereka
tampaknya tidak cukup spesifik untuk digunakan untuk mendeteksi sel-sel kanker
payudara bekas (Corradini et al., 2001).
Transkripsi h-MAM tidak dapat dideteksi dalam sampel PB dari 180 orang wanita
sehat, sehingga, ia tidak memiliki hasil positif palsu (spesifisitas 100%) dalam
kelompok tersebut. Selain itu, transkripsi h-MAM menunjukkan spesifisitas 97%
pada pasien dengan keganasan lain di luar kanker payudara. 3% positif palsu yang
tersisa di miliki keganasan limfoid (Leukemia limphobalstik akut, limfoma sel mantel
dan karsinoma timus (Grunewald et al., 2000; Silva et al., 2002; Cerveira et al., 2004;
dan Zehentner et al., 2004.).
a.2. Sensitivitas mammaglobin:
a.2.a. Ekspresi mammaglobin pada kanker payudara primer:

Menggunakan metode pewarnaan IHC, Watson et al. (1999) menunjukkan bahwa
80% dari karsinoma sel duktal memperlihatkan pewarnaan yang kuat pada protein
mammaglobin. Menariknya, hasil penelitian juga mengungkapkan bahwa pewarnaan
dapat membedakan mana tumor yang berdiferensiasi baik (78%), berdifensiasi
sedang (67%), dan berdiferensiasi buruk(63%).
Menggunakan RT-PCR assay, Corradini et al. (2001) mempelajari ekspresi HER-2
dan h-MAM dari tiga puluh spesimen bedah yang diperoleh dari kasus yang
didiagnosa secara histologi merupakan kanker payudara primer. Ekspresi penanda
yang ada, berkisar 63% untuk HER-2 dan 97% untuk h-MAM, hal mana menunjukkan
sensitivitas superior dari h-MAM atas penanda lainnya.
a.2.b. mRNA Mammaglobin dalam darah perifer pasien kanker payudara:
Insiden terdeteksinya transkripsi mRNA h-MAM sampel darah tepi pasien kanker
payudara dipelajari oleh Zach et al. (1999). Hasil positif dicatat dalam 28% pasien
pada saat diagnosis, 49% pasien dengan penyakit metastase, dan 6% dari pasien
yang terbebas penyakit setelah kemoterapi jangka panjang untuk stadium I hingga
III.
Grunewald et al. (2000) menunjukkan bahwa ekspresi h-MAM berkorelasi secara
signifikan dengan status nodul, peningkatan serum CA15-3, dan terjadinya
metastase jauh pada saat diagnosis. Sementara ekspresi penanda lainnya seperti

HER-2 dan CK-19 tidak berkorelasi dengan salah satu fitur klinis atau patologi kanker
payudara ini. Dalam konteks spesifisitas diagnostik, transkripsi h-MAM tidak tampak
pada sampel darah relawan sehat atau pasien dengan keganasan hematologi.
Sebaliknya, HER-2 dan CK-19 yang diperiksa dengan nested RT-PCR memperlihatkan
hasil positif palsu yang tinggi. Transkripsi HER-2 dan CK-19 terdeteksi pada 25% dan
10% masing-masing pada pasien dengan keganasan hematologi serta CK-19
ditemukan dari 39% sukarelawan yang sehat.
Penelitian lebih lanjut juga dilakukan oleh Zehentner et al. (2004). Menggunakan
real time RT-PCR, mRNA mammaglobin terdeteksi pada 61% sampel darah perifer
(PB) dari pasien yang secara histologis terbukti kanker payudara. Deteksi
Mammaglobin tidak berkorelasi dengan usia, paritas, atau status menopause
penderita kanker payudara yang diperiksa.
a.2.c. Sirkulasi protein Mammaglobin dalam serum pasien kanker payudara:
Zehentner et al. (2004) mencatat bahwa protein mammaglobin yang beredar
terdeteksi pada 54/142 sampel serum wanita dengan kanker payudara dengan
spesifisitas 97% pada kontrol sehat.
a.2.d. Ekspresi mammaglobin pada kelenjar getah bening dari pasien kanker
payudara:

Mammaglobin, suatu penanda spesifik mRNA jaringan, terdeteksi lebih dari 60%
kelenjar getah bening pasien dengan kanker payudara metastatik, tapi tidak pada
kelenjar getah bening normal dari pasien non-kanker (Watson et al., 1999).
Hasil biopsi sentinel kelenjar getah bening (SLN) sangat prediktif menunjukkan
keterlibatan kelenjar getah bening aksila pada kanker payudara. Analisa SLN saat
operasi dapat mengurangi biaya dan komplikasi, namun, metode histopatologi yang
ada kurang standar dan menunjukkan kurangnya sensitivitas. Metode molekuler
yang cepat dapat meningkatkan diagnose metastase SLN intraoperatif (Backus et al.,
2005).
Backus et al. (2005) mengidentifikasi tujuh penanda untuk mendeteksi metastase
kanker payudara. Hasilnya dipakai untuk mengidentifikasi metastase klinis dalam
kelenjar getah bening dengan menggunakan analisa RT-PCR pada SLN dari 254
pasien kanker payudara. Kombinasi optimal dua gen, mammaglobin dan cytokeratin
19, terdeteksi secara klinis bermetastase dalam pemeriksaan pada SLN payudara
dengan sensitivitas 90% dan spesifisitas 94%. Mereka menyarankan pemeriksaan
molekuler intraoperatif menggunakan penanda tersebut yang memiliki potensi
secara signifikan mengurangi kebutuhan operasi kedua untuk pasien yang menjalani
pembedahan SLN.
a.2.e. Ekspresi Mammaglobin dalam sumsum tulang pasien kanker payudara:

mRNA Mammaglobin terdeteksi pada 64% dari aspirasi sumsum tulang dari
pasien kanker payudara dengan metastase (Corradini et al., 2001 dan Silva et al,
2002). Ekspresi menggunakan RT-PCR untuk penanda kanker payudara dari aspirasi
sumsum tulang(BM) berkisar dari 0% untuk CEA dan 63% untuk CK-19. Tidak seperti
h-MAM, penanda lainnya menunjukkan hasil positif palsu yang tinggi (Mikhitarian et
al., 2008).
a.2.f. Ekspresi Mammaglobin pada efusi serosa:
Passebosc-Faure et al. (2005) mengevaluasi panel penanda molekuler untuk
deteksi sel kanker pada efusi serosa dan untuk menentukan nilai mereka sebagai
penunjang transkripsi RT-PCR pada pemeriksaan sitologi. Pada RT-PCR sebanyak 114
pasien dengan efusi serosa yang berasal dari 71 pasien dengan tumor dan 43 pasien
dengan penyakit jinak dinilai ekspresi antigen Carcinoembryonic (CEA), sel epitel
molekul adhesi (Ep-CAM), E-kaderin (CDH1), mammaglobin B, musin 1 (MUC1)
isoform MUC1/REP, MUC1 / Y dan MUC1 / Z, calretinin (CALB2), dan gen tumor
Wilms. CEA dan mammaglobin secara khusus terekspresi pada keganasan epitel, dan
mammaglobin terutama terekspresi pada efusi dari payudara karsinoma (spesifitas
97,3%).

Mereka menyimpulkan bahwa analisa RT-PCR dari CEA, Ep-CAM, dan
mammaglobin-B pada efusi serosa bisa menjadi tambahan yang bermanfaat untuk
sitologi diagnosa keganasan (Passebosc-Faure et al., 2005).
2.3.4. Mammaglobin dalam Perbandingan dengan Penanda Kanker Payudara yang
digunakan saat ini:
Mammaglobin menjadi penanda yang sangat menjanjikan untuk aplikasi
pengelolaan kanker payudara. Sangat spesifik untuk jaringan epitel payudara,
sementara penanda lain menunjukkan ekspresi dalam jaringan selain payudara
(Corradini et al., 2001).
Overekspresi HER-2 juga ditemukan dalam keganasan yang lain selain payudara,
seperti karsinoma ovarium(25-30%), adenokarsinoma duktus pankreas (24%),
karsinoma sel skuamosa kepala dan leher(24%), adenokarsinoma lambung (15,2%),
dan karsinoma kolorektal (3%) (Hellstrom et al., 2001).
Namun demikian, penanda di luar mammaglobin diekspresikan secara positif
palsu dalam kontrol negatif; karenanya, penggunaannya sebagai penanda untuk
kanker payudara masih dipertanyakan, dimana saat ini sangat dibutuhkan penanda
khusus payudara untuk aplikasi klinis (Corradini et al., 2001). Mengingat sensitivitas
diagnostik, mammaglobin tampaknya juga menjadi penanda yang cukup
menjanjikan untuk aplikasi klinis.

2.3.5. Metode Assay:
2.3.5.a. Pewarnaan pada imunohistokimia (IHC):
Analisis imunohistokimia rutin dilakukan melalui sisntesa peptida yang sesuai
dengan peptida 16-residu (EVFMQLIYDSSLCDLF) pada urutan protein terminal C
mammaglobin yang berkonjugasi pada karier(Carrier) yang kemudian disuntikkan ke
kelinci untuk menghasilkan antibodi antimammaglobin pada kelinci poliklonal.
Reagen ini digunakan dalam survei besar tumor payudara primer dari berbagai kelas
dan jenis histologi. Kekhususan dari antibodi yang dihasilkan dikonfirmasi dengan
analisis Western blot dari beberapa cell-line tumor payudara manusia dan kanker
payudara primer manusia yang diperiksa sebelumnya untuk ekspresi mRNA
mammaglobin(Watson et al, 1999 dan Gillanders, 2005).
Pola pewarnaan mammaglobin dominan tersebar dalam sel tumor dan
sitoplasma, meskipun beberapa sel menunjukkan pewarnaan lokal yang intens
berdekatan dengan nukleus. Dalam jaringan payudara nonneoplastik, sel-sel epitel
positif terlihat jarang dan tersebar dalam lobulus asinus tipe I dan tipe II dan dalam
sel-sel kolumnar dari duktus terminal (Watson et al, 1999 dan Gillanders, 2005).
2.3.5.b. RT-PCR:
Cerveira et al. pada tahun 2004 mengevaluasi sensitivitas teknik RT-PCR standar
(sintesis cDNA oleh primer acak diikuti amplifikasi dengan nested-PCR tunggal)

dengan pendekatan yang lebih lugas: satu langkah RT-PCR(Sintesis cDNA dengan
primer spesifik MGB –I dan PCR tunggal dalam reaksi yang sama, diikuti oleh nested-
PCR dengan primer MG3 dan MG4 dalam tabung reaksi dingin yang sama sepanjang
waktu untuk mencegah amplifikasi non-spesifik). Semua kasus yang dipelajari dalam
rangkap dua, dengan analisa simultan dari kontrol negatif (donor darah), kontrol
positif (jaringan payudara) dan kontrol air. Primer untuk nested-PCR dan PCR tunggal
berasal dari sekwens dengan nomor akses Genbank U3314710 dan dirancang
membatasi rentang ekson-ekson untuk mencegah amplifikasi DNA genomik.
Untuk memeriksa integritas setiap sampel mRNA dan cDNA, dilakukan amplifikasi
gen kontrol beta-2-mikroglobulin (B2M; Genbank nomor akses NM004048) satu
putaran tunggal PCR dengan kondisi yang identik untuk primer spesifik MGB-I
(Cerveira et al., 2004).
Kemampuan deteksi metastase tersembunyi oleh RT-PCR sangat sensitif, yakni
mampu mendeteksi sedikitnya satu salinan RNA untuk dikopi menjadi gen yang
diekspresikan sampai 1.000 kopi / sel. Penggunaan kuantitatif real-time-PCR
berdasarkan ambang batas pada sampel klinis, mengakibatkan ekspresi signifikan
tingkat klinis RNA sehingga hasil positif palsu menjadi minimal (Backus et al., 2005).
Kuantitasi h-MAM mRNA berhasil dicapai dengan realtime RT-PCR kuantitatif,
berdasarkan aktivitas 5'-nuklease polimerase TAQ-DNA. Teknik ini memungkinkan

kuantitasi otomatis dari amplifikasi produk.. Nilai m-RNA yang diukur, dibandingkan
dengan nilai dari h-MAM yang mengekspresikan kurva standar cDNA yang diperoleh
dari cell-line EFM-192 yang spefifik terhadap adenokarsinoma payudara (Zehentner
et al., 2004 and Backus et al., 2005 ).
TaqMan probe dirancang untuk annealing regio internal dari produk PCR, dan
mereka mengandung pewarna reporter berpendar yang letaknya berdekatan
dengan pewarna quencher. Ketika probe TaqMan berpendar pada panjang
gelombang yang tepat, pewarna reporter teraktivasi, sehingga, fluoresensi ini
ditangkap oleh quencher sepanjang probe utuh. Quenching ini disebabkan energi
resonansi transfer fluoresensi (FRET), di mana energi fluoresensi dari fluorophore
ditransfer ke quencher. Namun, ketika polimerase TAQ-DNA dengan aktivitas
5'exonuklease yang menyentuh probe, pewarna reporter dilepaskan dari quencher
dan dapat mulai berpendar. Deteksi akumulasi produk PCR dipantau oleh
peningkatan fluoresensi. Yang penting, pembelahan probe hanya terjadi jika probe
dihibridisasi pada target, yang memungkinkan amplifikasi hanya terjadi bila ada yang
terdeteksi(Sjödin, 2005). Gambar 5, Mesin PCR

BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
3.1. Jenis Penelitian
Penelitian ini adalah suatu penelitian deskriptif analitik dengan menggunakan
desain cross sectional.
3.2. Tempat Penelitian
Pengisian kuesioner oleh subjek penelitian, pengambilan data hasil pemeriksaan
imaging (foto rontgen, USG dan hasil lainnya),pengambilan darah tepi, tanda tangan
informed consent dilakukan di Rumah Sakit Pirngadi dan praktek dokter swasta.
Pemeriksaan ekspresi mRNA Mammaglobin dengan metode PCR (Polymerase Chain
Reaction) dilakukan di Laboratorium Terpadu FK USU.
3.3. Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan dari bulan November 2012 hingga Maret 2013.

3.4 Populasi Penelitian
Populasi penelitian adalah wanita yang terdiagnosa kanker payudara dengan
metastase dan non metastase yang berkunjung ke praktek dokter yang menangani
terapi kanker dan RS Pirngadi. Subjek mendapatkan informasi tentang penelitian ini
serta bersedia menjadi subjek penelitian.
3.5. Sampel Penelitian
Penentuan sampel dengan menggunakan tehnik consecutive sampling. Subjek
harus memenuhi persyaratan kriteria inklusi dan eksklusi yang diperoleh dengan
metode wawancara, hasil pemeriksaan klinis dan imaging, hasil histopatogi serta
pengisian kuesioner (Lembar wawancara)
Kriteria inklusi:
 Wanita penderita baru kanker payudara dengan metastase yang belum
menjalani kemoterapi berdasarkan riwayat klinis, histopatologi dan hasil
imaging seperti foto X-Ray, USG, CT Scan.
 Wanita penderita non metastase yang belum maupun sudah menjalani
kemoterapi
 Menandatangani informed consent.
Kriteria eksklusi:
 Wanita bekas penderita kanker payudara yang telah selesai menjalani terapi.

Besar sampel:
Besar sampel ditentukan dengan menggunakan rumus
n :
n = 27,31822 digenapkan menjadi 28
sampel Keterangan :
Zα = nilai distribusi normal baku (table Z) pada α tertentu =
1,96 P = proporsi kategori variable yang diteliti = 80% (0,8)
Q = 1 – P = 1-0,8 = 0,2
d = presisi 15% (0,15)
3.6. Variabel Penelitian
3.5.1. Variabel bebas, yaitu ekspresi dan non ekspresi mRNA mammaglobin.
3.5.2. Variabel tergantung, yaitu kanker payudara metastase dan non metastase.
3.7. Kerangka Konsep (terlampir di halaman berikut)

3.7. Kerangka Konsep
Pemeriksaan Laboratorium/ Histopatologi

fisik Tumor Marker
Diagnosa
Kelainan
Genetika Eksp
mR
Stadium I-
III (Non mamma
Faktor metastase pos
Lingkungan Wanita penderita
Kanker Payudara
Hormon,
Menarche Eksp
mR
1. Stadium
IV mamma
Usia, (Metastas
neg
Menopause
Komplikasi
Perdarahan Infeksi Metastase Kematian
Keterangan : Bagian yang ditel iti

Variabel bebas : Ekspresi mRNA mammaglobin
Variabel terikat : Stadium kanker payudara

DEFINISI OPERASIONAL
N Variabel Definisi Alat Ukur Cara Ukur Hasil Ukur Skala

o Ukur
1 Stadium Stadium Pemeriksaan fisik Membaca hasil Stadium I- Nominal

I-III dan penunjang pada rekam III
Non
yang (CT Scan, medis
Metastase
ditetapka Mammografi, X-
n sesuai Ray, USG, MRI,
dengan Mikroskop)
data pada
rekam
medis
2 Stadium IV Stadium Pemeriksaan fisik Membaca hasil Stadium IV Nominal

(Metastase) IV yang dan penunjang pada rekam
ditetapka (CT Scan, medis
n sesuai Mammografi, X-
data pada Ray, USG, MRI)
rekam
medis
3 Gen mRNA Alat untuk isolasi Ekspresi m- Band yang Nominal

Mammaglobi spesifik mRNA & PCR RNA terbaca
n hanya cDNA Mammaglobin pada
terdapat pada
pada 402 bp
Elektroforesis
jaringan
payudara

3.9. Rancangan Penelitian
Penelitian ini adalah suatu penelitian deskriptif analitik dengan pendekatan cross
sectional study. Semua kegiatan penelitian termasuk lembaran informed consent
(Persetujuan Setelah Penjelasan) terlebih dahulu telah melalui persetujuan Majelis
Komite Etik Penelitian (Ethical Clearance).
Populasi sampel diambil secara consecutive sampling dengan target populasi
wanita penderita kanker payudara dengan usia mulai dari 30 tahun sampai 70 tahun di
kota Medan yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Setiap subjek telah
dijelaskan tentang penelitian yang akan dilakukan, serta tujuan, prosedur, manfaat
dan risiko sebagai subjek dalam penelitian (perasaan tidak nyaman sewaktu
pengambilan darah) (Lampiran 1). Semua subjek yang setuju ikut serta dalam
penelitian, kemudian menandatangani informed consent, yaitu persetujuan secara
tertulis sebagai subjek dalam penelitian (Lampiran 2). Lalu dilakukan pengumpulan
data dengan cara pengisian kuesioner (Lampiran 3), Juga dilakukan pengumpulan
hasil pemeriksaan Histopatologi, Imaging seperti foto Rontgen, USG, CT-Scan, MRI
ataupun PET CT bila ada (Lampiran 4).
Darah vena sebanyak 3 ml diambil dengan spuit dari area fossa cubiti. Sampel
darah dimasukkan kedalam tabung yang berisi EDTA sebagai anti pembekuan, lalu
disimpan dan dilengkapi dengan label identitas masing-masing peserta pada suhu -
20˚C hingga hari uji dilakukan.

Dari data yang diperoleh, dipilih yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi,
Pada hari uji, sampel yang memenuhi kriteria seperti yang telah ditentukan, diperiksa
ekspresi mRNA Mammaglobin dengan menggunakan mesin PCR.
Semua data dikumpulkan, dikelompokkan dan dilakukan analisa statistik
menggunakan menggunakan software SPSS dengan uji Chi Square dan bila tidak
terpenuhi, akan dilakukan uji Fisher sebagai alternatif. Kemaknaan yang dinilai
adalah bila p<0,05. Dinilai apakah ekspresi mRNA Mammaglobin mampu
membedakan kelompok metastase dan non-metastase.
3.10. Pelaksanaan Penelitian
Dari data histopatologi dan hasil imaging (X foto rontgen, USG maupun CT
Scan, MRI dan lainnya), yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi diperoleh
sebanyak 29 subjek , dibagi menjadi dua kelompok : yaitu yang metastase sebanyak
13 orang dan yang non metastase sebanyak 16 orang.
3.10.1. Prosedur pemeriksaan Ekspresi mRNA Mammaglobin :
3.10.1.1. Isolasi RNA
Menggunakan reagent Instagene Matrix dari BioRad, dengan protokol sebagai
berikut :
Alat dan Bahan yang perlu disiapkan :

Alat Bahan
Sentrifugasi Nuclease free water
Vortex Microtube 1,5 mL
Mikropipet ukuran berbagai ukuran Tips berbagai ukuran
Cara Kerja :
Step Pertama
Disiapkan tabung Microtube 1,5 mL
Dimasukkan 100 uL darah kemudian tambahkan 350 uL Lysis Solution dari Norgen
Lalu diVortex selama 15 detik untuk melarutkan darah
Selanjutnya ditambahkan 200 uL Etanol 96% ke dalam Lisat
Lisat yang telah tercampur lalu diVortex kembali selama 10
detik. Step kedua
Dari tabung Microtube diatas, diambil 600 uL Lisat dan dimasukkan ke dalam tabung
Columm
Kemudian disentrifugasi selama 1 menit agar semua cairan Lisat melewati saringan
pada tabung Columm
Dilakukan pemeriksaan ulangan untuk melihat bila masih ada cairan Lisat tersisa,
sentrifugasi kembali sampai cairan lewat semua, kemudian buang cairan yang
tertampung dari tabung kolektor.

Step ke tiga
Dimasukkan 400 uL Wash Solution ke dalam tabung Columm di step 2
Lalu sentrifugasi selama 1 menit dan cairan dalam tabung kolektor
dibuang.
Ditambahkan 400 uL Wash Solution sekali lagi dan sentrifugasi selama 1 menit
Lalu semua cairan yang tersisa dalam tabung kolektor dibuang dan disentrifugasi
selama 2 menit lagi sampai tabung Columm benar benar kering.
Step ke empat
Tabung Columm selanjutnya ditempatkan pada tabung Elution
Kemudian ditambahkan 50 uL Elution Solution ke tabung Columm tadi.
Lalu sentrifugasi selama 2 menit dengan kecepatan 2000 Rpm, dengan kecepatan
13.000 Rpm selama 1 menit.
Sentrifugasi dilakukan berulang sampai Elution Solution lewat semua yang tampak
sebagai cairan di dasar tabung sebagai RNA.
RNA siap di pakai, boleh disimpan pada suhu – 20 C
3.10.1.2. Pembuatan cDNA total dengan RT-PCR
Menggunakan reagent iScript cDNA synthase dari BioRad. Adapun protokol
pengerjaan sebagai berikut :
a. Semua komponen untuk reaksi cDNA dimasukkan pada tabung mikro
steril/ tube PCR seperti tabel 1

Tabel 1. Komposisi sintesis cDNA
Komponen Percontoh (sampel)

RNA total (20 ng) 10 uL
iScript reaction mix 4 uL
iScript reverse transcriptaseenzyme 1 uL
Nuclease-free water 5 uL
Volume total 20 uL
b. Kemudian tube PCR tersebut dimasukkan ke dalam mesin PCR dan mengikuti
profil PCR sebagai berikut : 250C selama 5 menit, dilanjutkan pada suhu 420C
selama 30 menit dan 850C selama 5 menit.
Catatan : jika sudah dilakukan isolasi RNA, maka harus dilanjutkan hingga cDNA
synthesis.
3.10.1.3. Isolasi Gen spesifik dari cDNA total:
Menggunakan reagents IQ Supermix dari BioRad. Adapun protokol pengerjaan
sebagai berikut ini :
Tabel 2, Alat dan Bahan yang perlu disiapkan :
Alat Bahan
PCR Nuclease free water
Mikropipet ukuran 1-10 uL PCR tube
Mikropipet ukuran 10 -100 uL Tips berbagai ukuran
Mikropipet ukuran 100-1000 uL primer

Cara Kerja :
a. Semua komponen pada tabel 3 untuk reaksi cDNA spesifik dicampur dalam
tabung mikro steril/ tube PCR
b. Primer yang dipergunakan adalah :
Primer forward 5’-CAG CGG CTT CCT TGA TCC TTG-3’

Primer Reverse 5’-ATA AGA AAG AGA AGG TGT GG-3’(Grunewald., 2000)
Tabel 3. Komposisi Reaksi PCR spesifik

Komponen reaksi Konsentrasi Awal Konsentrasi Akhir Volume
Nuclease free water 14,8
PCR Buffer 10x 1x 2
dNTP mix 10 µM 0,5 µM 0,4
MgCl2 2x 1x 0,6
Primer F (10uM) 10 uM 0,25 uM 0,5
Primer R (10 uM) 10 uM 0,25 uM 0,5
cDNA/Plasmid template 1
iTag DNA Polymerase 5 U/uL 1 Unit 0,2
Volume total 20 µL
Tube PCR tersebut selanjutnya dimasukkan ke dalam mesin PCR
Adapun Profil PCR yang sebelumnya sudah dilakukan optimasi adalah:
1. 95,0 C selama 3 menit

2. 95,0 C selama 10 detik
3. Gradient 57,0 C selama 30 detik
4. 72,0 C selama 30 detik
5. Kembali ke step 2 sebanyak 35 X
6. 72,0 C selama 7 menit

3.10.1.4. Elektroforesis
Sampel DNA hasil amplifikasi diambil sebanyak 5 μl dan dicampurkan masing-
masing dengan 2 μl loading buffer. Campuran ini selanjutnya dimasukkan ke dalam
sumur-sumur gel agarose. Untuk mengamati kehadiran larik (band) DNA, dilakukan
pewarnaan menggunakan GelRed dari Biotium.
Pada elektroforesis ini, digunakan Certified PCR Low Melt Agarose dari BioRad.
Hal ini dikarenakan agarose ini memiliki kemampuan pemisahan yang tinggi dan
menghasilkan resolusi yang sangat baik dari fragmen dengan ukuran rendah < 1000
bp.
Hasil elektroforesis dibandingkan dengan ukuran ladder sehingga diperoleh
ukuran kasar dari gen yang sudah diperoleh. Adanya kehadiran larik (band) dari
cDNA spesifik dan memiliki ukuran yang sesuai dengan gen yang diinginkan
menunjukan adanya kehadiran gen tersebut.

BAB IV
HASIL PENELITIAN
4.1 HASIL PENELITIAN
Telah dilakukan penelitian deskriptif analitik dengan pendekatan cross sectional
terhadap wanita penderita kanker payudara dengan dan tanpa metastase di Kotamadya
Medan yang mendapat penjelasan tentang tujuan, prosedur, risiko dan manfaat
penelitian. Penelitian ini dimulai dari bulan November 2012 sampai Maret 2013.
Subjek terdiagnosa kanker payudara diambil dari RS. Pirngadi dan praktek dokter/
onkologis (Medikal-Onko, Bedah-Onko maupun Hemato-Onko) sebanyak 29 orang
yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Subjek yang berpartisipasi juga telah
menandatangani inform consent (Persetujuan setelah penjelasan) dan penelitian ini
telah mendapatkan persetujuan dari Komite Etik Penelitian Bidang Kesehatan USU
(Lampiran 2).
Tabel 4.1 Karakteristik umum subjek penelitian
Karakteristik sampel
Jumlah kasus 29 wanita

Rerata Umur 51,5 tahun (34-69 tahun)
Kasus Metastase 13 kasus
Kasus Non Metastase 16 kasus
Dengan H-Mam + 5 kasus
Dengan H-Mam - 24 kasus

Tabel 4.2 Karakteristik subjek penelitian
Nama Umur Metast Non Meta H-Mam + H-Mam - histopatologi Xphoto USG
1. N 47 ya tidak tidak ya invasif/ poordiff Nodul & efusi paru
2. HW 56 ya tidak tidak ya invasif/ undiff nodul pada paru
3. V 34 ya tidak tidak ya invasif/ poordiff osteoporosis
4. R 57 ya tidak ya tidak invasif/ welldiff Nodul-efusi duplex
5. A 47 ya tidak tidak ya invasif/ poordiff nodul hepar
6. I 54 tidak ya tidak ya invasif/ undiff
7. Id 55 tidak ya tidak ya invasif/ poordiff
8. I G 43 tidak ya tidak ya invasif duktal
9. A 52 tidak ya tidak ya invasif duktal
10. A 51 tidak ya tidak ya invasif /poordiff
11. Idh 50 tidak ya tidak ya invasif/welldiff
12. S S 69 tidak ya tidak ya invasif/moderate
13. L C 67 tidak ya tidak ya invasif duktal
14. Ym 54 tidak ya tidak ya invasif duktal
15. Y 57 tidak ya tidak ya invasif/welldiff
16. J 44 tidak ya tidak ya invasif /poordiff
17. Rm 49 tidak ya tidak ya invasif/ poordiff
18. L 42 tidak ya tidak ya invasif duktal
19. KH 40 tidak ya tidak ya invasif/moderatel
20. C S 44 tidak ya tidak ya invasif duktal
21. Ch 41 ya tidak tidak ya invasif/ undiff nodul hepar
22. P 40 ya tidak tidak ya invasif/ undiff nodulhepar
23. Ls 47 ya tidak ya tidak invasif/ moderat nodul paru+effusi
24. Pus 40 ya tidak tidak ya invasif/ poordiff nodul ke2 paru
25. D 38 ya tidak ya tidak invasif/ welldiff Osteoporosis vertebra
26. Ag 56 ya tidak ya tidak invasif/ welldiff Effusi & nodul paru nodul hepar
27. M 39 ya tidak tidak ya invasif/ undiff nodul hepar
28. Af 51 ya tidak ya tidak invasif/ moderat nodul paru
29. L F 52 tidak ya tidak ya lobular invasif

Gambar 4.1 Hasil Elektroforesis Mammaglobin (sampel 1-14)
1000 BP
600 BP
H-mam 402 BP
X C 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Keterangan
X : Ladder
C : kontrol negatif
1-5 ; Sampel metastase
6-14 ; Sampel non-metastase
Hasil Elektroforesis Mammaglobin (sampel 15-29)
1000 BP
600 BP
H-
mam
X 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 3

Keterangan.
X : Ladder
16-21 ; Sampel non-
metastase 22-28 ; Sampel
metastase
29 ; Sampel non-metastase
30 ; Sampel Actin
Dari table 4.1, terlihat usia populasi penelitian rata-rata berusia 51,5 Tahun
dengan usia termuda 34 Tahun dan tertua 69 Tahun. Kasus kanker payudara yang
mengalami metastase meliputi 13 orang dan non metastase sebanyak 16 orang.
Dari tabel 4.2, sampel no 1-5 dan 21-28 adalah subjek dengan metastase. Dari
sampel yang metastase ini, sampel no 4, 23, 25, 26 dan 28 menunjukkan gambaran
Mammaglobin +(positif). Sementara itu, 16 sampel lainnya adalah sampel non
metastase.
Dari tabel 4.2 terlihat juga bahwa sampel dengan Mammaglobin positif
mempunyai gambaran histopatologi Duktal karsinoma yang well differentiated dan
moderate differentiated. Dari ke 5 sampel dengan Mammaglobin positif, 4 sampel
dengan gambaran nodul paru dan effusi pleura, 1 sampel dengan gambaran tulang
vertebra osteoporosis. Sampel no 26 mengalami metastase pada paru dan hati, ini
terlihat dari adanya gambaran nodul pada USG abdomen selain foto rontgen paru.
Dari gambar 4.1 hasil pada gel elektroforosis menunjukkan ekspresi H-mam
(402 bp) tampak pada sampel no 4, 23, 25, 26 dan 28. Ke 5 sampel yang
menunjukkan ekspresi H-mammaglobin positif berasal dari sampel dengan riwayat

metastase, sementara 24 sampel yang tidak berekspresi, berasal dari sampel yang
metastase dan non-metastase.
Dari sampel yang diperiksa, penderita kanker payudara metastase sebanyak 13
orang, belum mendapatkan terapi sistemik (kemoterapi). Sementara itu, sebanyak 10
dari 16 penderita kanker yang non metastase telah menjalani terapi pembedahan dan
terapi sistemik
Tabel 4.3 Gambaran Rontgen, USG pada populasi dengan metastase
Hasil Rontgen/ USG (n=13)
Nodul multipel lapangan paru 7 kasus

Effusi paru 3 kasus
Tulang-tulang osteoporotik 2 kasus
Nodul multipel di hati 5 kasus
Dari tabel 4.3 didapatkan dari 13 kasus yang mengalami metastase, ada 7 kasus
dengan gambaran multiple nodul pada kedua lapangan paru. Diantara kasus dengan
nodul diparu-paru didapatkan 3 kasus yang mengalami effusi pleura.
4.2. ANALISA HASIL PENELITIAN
Hasil penelitian yang disajikan dalam bentuk tabel dan diuji secara statistik
dimana ada 2 variabel yang menjadi bahan penelitian ini yaitu:
Variabel bebas : Ekspresi mammaglobin yang positif dan negatif
Variabel terikat : Kanker dengan dan tanpa metastase

Tabel 4.4 Uji Chi Square
Metastase
tidak ya Total
Hmam tidak Count 16 8 24
Expected Count 13.2 10.8 24.0
ya Count 0 5 5
Total Count 16 13 29
Karena pada tabel 4.4 didapatkan nilai ekspetasi < 5 yakni pada kolom c (2,8) dan
d(2,2) maka tidak memenuhi kriteria untuk diuji dengan Chi Square, karenanya uji
statistik yang tepat adalah dengan uji Fisher.
Tabel 4.5 Tabel hasil uji Chi Square
Chi-Square Tests
Asymp. Sig. (2- Exact Sig. (2- Exact Sig. (1-

Value df sided) sided) sided)
Pearson Chi-Square 7.436a 1 .006

Continuity Correction b
4.985 1 .026
Likelihood Ratio 9.339 1 .002
Fisher's Exact Test
.011 .011
N of Valid Cases 29

a. 2 cells (50,0%) have expected count less than 5. The minimum expected count is 2,24.
b. Computed only for a 2x2 table
Dari hasil output dengan menggunakan SPSS pada tabel 4.5 dihasilkan angka
signifikansi sebesar 0,011. Karena nilai 0,011< 0,05 maka dapat disimpulkan bahwa H-
mammaglobin bisa merupakan faktor pembuktian metastase kanker payudara pada
subjek yang diteliti.
Ada hal yang menarik dijumpai pada hasil penelitian ini , yaitu adanya band-band
tambahan selain 402bp.
Deskripsi dari band-band tersebut adalah sebagai berikut:
 1000bp 4 sampel
 Antara 400-1000bp beberapa band
 Antara 100-400bp beberapa band
Band band yang tampak tersebut masih belum dapat dijelaskan

BAB V
PEMBAHASAN
Hasil penelitian terhadap populasi sampel wanita penderita kanker payudara
dengan dan tanpa metastase didapatkan adanya ekspresi mRNA H-mammaglobin
pada populasi dengan metastase, sementara tidak ada satupun penderita tanpa
metastase yang mengekspresikan mRNA H-mammaglobin.
Gen mammaglobin pertama sekali diidentifikasikan oleh Watson dan Fleming
tahun 1996, gen ini hanya terekspresi pada kelenjar air susu dan kadar mRNA yang
tinggi hanya muncul pada sel tumor payudara (Watson et al., 1996 dan Raynor et al.,
2002)
Dari penelitian El-Sharkawy 2007; Bernstein 2005 dan Silva 2002, didapatkan
Ekspresi mammaglobin dapat merupakan penanda sensitif dan spesifik untuk sel
epitel payudara neoplastik.
Sementara itu penelitian oleh Nunez-Villar 2003 dan Span 2004 menggambarkan
ekspresi mammaglobin pada penderita kanker payudara merupakan faktor prognostik
independen yang kuat atas kekambuhan maupun bebasnya pasien dari kanker
payudara primer.
Transkripsi H-mammaglobin tidak terdeteksi pada sampel wanita sehat, hal ini
dikemukakan oleh Grunwald 2000; Silva 2002; Cerveira 2004 dan Zehentner 2004.
Zach 1999 mendeteksi transkripsi h-mammaglobin pada sampel darah tepi pasien
kanker payudara. Lanjutan penelitian dengan sampel darah tepi dilakukan oleh

Zehentner 2004. Selain dari darah tepi, ekspresi mammaglobin juga terdeteksi pada
kelenjar getah bening, sumsum tulang bahkan di paru-paru (Koga et al., 2004).
Roncella pada tahun 2006 mendapatkan ekspresi Mammaglobin pada penderita
kanker payudara dengan gambaran Histopatologi grade I-II, sementara penderita
dengan III tidak mengekspresikannya. Corradini tahun 2001 mengemukakan tentang
spesifitas mammaglobin pada kanker payudara, penelitiannya dengan menggunakan
penanda kanker payudara lain memperlihatkan bahwa penanda lain ternyata
terekspresi juga pada kanker lainnya. Seperti ekspresi HER2 ternyata juga ditemukan
pada karsinoma ovarium, adenokarsinoma duktus pankreas, adenokarsinoma lambung
dan karsinoma kolorektal (Hellstrom et al., 2001).
Sementara itu Silva 2001 menggunakan RT-PCR untuk memeriksa ekspresi
mRNA Mammaglobin dan mendapatkan yang paling sensitif bila dibandingkan
dengan tehnik pemeriksaan lain seperti pewarnaan IHC. Karena itu, pemeriksaan
ekspresi mRNA H-mammaglobin dengan menggunakan metode PCR menjadikannya
suatu standar yang diterima hasilnya disemua pusat riset.
Hasil penelitian ini didapatkan adanya ekspresi mRNA Mammaglobin positif
pada 5 dari 13 sampel penderita dengan metastase, yang setelah diuji secara statistik,
diperoleh nilai p= 0,01 hal mana memberikan arti adanya signifikansi karena p<0,05.
Artinya ekspresi mRNA Mammaglobin bisa sebagai faktor pembuktian adanya
metastase. Namun bila dilihat dari persentasenya yang 5/13(38%), hasil penelitian ini
belum cukup memuaskan mengingat peneliti mengharapkan hasil keseluruhan sampel

metastase akan mengekspresikan mRNA Mammaglobin. Bila dilihat dari
karakteristik histopatologi jaringan kanker payudara sampel, maka terlihat bahwa
yang tidak positif adalah sampel yang secara histopatologi memberikan gambaran
Karsinoma yang undifferentiated ataupun poorlydifferentiated yang oleh peneliti
Roncella( 2006) didapatkan hasil yang mirip.
Kehadiran band-band (larik) selain 402bp belum dapat dijelaskan sepenuhnya
bagaimana hal ini dapat terjadi. Penelitian oleh Grunewald tahun 2000 yang menjadi
dasar penelitian ini memperlihatkan bahwa Grunewald menggunakan Inner Primer di
367bp untuk mendapatkan hasil band yang lebih tegas dan jelas.

BAB VI
KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian “ekspresi mRNA mammaglobin pada darah
penderita kanker payudara dengan metastase di Kotamadya Medan” dengan analisa
statistik dan pembahasan, maka disimpulkan bahwa:
1. Mammaglobin terekspresi secara signifikan pada hasil penelitian ini dengan
p=0,011< 0,05
2. Pada wanita penderita kanker payudara tanpa metastase, mammaglobin tidak
terekspresi sama sekali.
3. Diagnosa metastase didasarkan atas gambaran/ hasil pemeriksaan dengan
menggunakan rontgen maupun USG (Ultra Sonografi)
4. Hasil Histopatologi penderita yang dominan adalah karsinoma duktal invasif
sebanyak 28 kasus dengan pembagian : 8 kasus karsinoma poorly
differentiated, 5 kasus karsinoma undifferentiated, 4 kasus karsinoma
moderate differentiated dan 5 kasus dengan karsinoma weel differentiated,
serta 6 kasus dengan laporan duktal invasif saja. Sementara hanya 1 kasus
karsinoma lobular invasif.
5. Ada band-band lain selain 402 bp yang belum dapat dijelaskan

6.2 Saran
1. Diusulkan untuk melanjutkan penelitian ini dengan menggunakan inner
Primer untuk mendapatkan gambaran band/larik yang lebih tegas/ jelas.
2. Diadakan penelitian lanjutan pada band-band lain yang muncul pada hasil
elektroforesis, untuk mengetahui apakah ada gen-gen lain terdeteksi selain
mammaglobin.
3. Mengembangkan penelitian berbasis sampel menggunakan darah tepi, yang
kurang invasif untuk membantu penegakan diagnosa maupun prediksi ada
atau tidaknya metastase.

DAFTAR PUSTAKA
American Cancer Society (2010): Breast Cancer Facts and Figures 2009-2010.
http://www.cancer.org/acs/groups/content/@nho/documents/document
/f861009final90809pdf.pdf
Antoine, C., Leibens, F., Carly, B., Pastijn, A. and Rozenberg, S. (2004):
Influence of HRT on prognostic factors for breast cancer: a systematic review after
the women's health initiative trial. Hum. Reprod., 19: 741-56.
Armstrong, K., Eisen, A., and Weber, B. (2000): Assessing the risk of breast
cancer. New Engl. J. Med., 342: 564-71.
Autier, P. (2002): A breast cancer screening program operating in a liberal health

care system: the Luxembourg Mammography Program, 1992-1997. Int. J. Cancer, 97:
828-32.
Axilbund, J.E., Gross, A.L., Visvanathan, K. ( 2011): Chapter 5 in Early diagnosis

and treatment of cancer Series: Breast Cancer. Jacobs L. and Finlayson C.A (Ed)
Saunders Elsevier: pp 71-88.
Backus, J., Laughlin, T., Wang, Y., Belly, R., Robert, W., Baden, J., Min, C. J.,
Mannie, A., Tafra, L., Atkins, D. and Verbanac, K.M. (2005): Identification and
characterization of optimal gene expression markers for detection of breast cancer
metastasis. Journal of Molecular Diagnostics, 7:327–336.
Bae J.W., Choi K.H., Kim H.G., Park S.H. (2000): The detection of circulating
breast cancer cells in peripheral blood by Reverse Transcriptase-Polymerase Chain
Reaction. J. Korean Med Sci, 15: 194-8.
Bernstein J.L., Godbold J.H., Raptis G., Watson M.A., Levinson B., Aaronson
S.A., Fleming T.P.(2005): Identification of Mammaglobin as a Novel Serum Marker
for Breast Cancer. Clin Cancer Res, 11:6528-6535
Bitisik, O., Saip, P., Saglam, S., Derin, D. And Dalay, N. (2009): Mammaglobin
and maspin transcripts in blood may reflect disease progression and the effect of
therapy in breast cancer. Genetics and Molecular Research 9(1): 97-106
Brekelmans, C.T., Seynaeve C., Bartels, C.C., Verhoog, L.C., Van Den, O.A.,
Obdeijn, I.M. and Klijin, J.G. (2001): Effectiveness of breast cancer surveillance in

BRCA 1/2 gene mutation carriers and women with high familial risk. J. Clin. Oncol.,
19: 924-30.
Canda, M.S., Gury, M., Erbayraktar, R.S., Acar, F. and Canda, T. (2004):
Association of invasive breast Carcinoma and Glioblastoma multiforme: a case
report with histological and immunohistochemical features. Turk. J. Med. Sci., 34:
131-135.
Carter, D., Dillon, D.C., Reynolds, L.D., Retter, M.W., Fanger , G., Molesh,
D.A., Sleath, P.R., McNeill, P.D., Vedvick, T.S., Reed, S.G., Persing, D.H. and
Houghton, R.L.( 2003): Serum antibodies to lipophilin-B detected in late stage breast
cancer patients. Clin. Cancer Res., 9:749-754.
Cerveira, N., Torres, L., Rocha, P., Bizarro, S., Pereira, D., Abreu, J., Teixeira,
M.R. and Castedo, S. (2004): Highly sensitive detection of the MGB1 transcript
(mammaglobin) in the peripheral blood of breast cancer patients. Int. J. Cancer, 108:
592–595.
Collado, M., Landt, O., Barragán, E., Lass, U., Cervera, J., Sanz, M. A. And
Bolufer, P. (2004): Locked nucleic acid-enhanced detection of 1100delC*CHEK2
germ-line mutation in Spanish patients with hematologic malignancies. Clin. Chem.,
50: 2201 - 2204.
Connor, E. and Stuenkel, C.A. (2001): Hormone replacement therapy (HRT)-risks

and benefits. Int. J. Epidemiol., 30: 423-6.
Corradini, P., Voena, C., Astolfi, M., Dell´Oro, S., Pilotti, S., Arrigoni, G., Bregni,
M., Pileri, A. and Gianni, A.M. (2001): Maspin and mammaglobin genes are specific
markers for RT-PCR detection of minimal residual disease in patients with breast
cancer. Ann. Oncol., 12: 1693–1698.
Cristofanilli, M., Hayes, D.F., Budd, G. T., Ellis, M.J., Stopeck, A., Reuben, J.M.,
Doyle, G.V., Matera, J., Allard, W.J., Miller, M. C., Fritsche, H.A., Hortobagyi, G.N.
and Terstappen, L.W.M.M. (2005): Circulating Tumor Cells: A novel prognostic
factor for newly diagnosed metastatic breast cancer. Journal of Clinical Oncology,
23(7): 1420-1430.
De Jong, M.M., Nolte, I. M., te Meerman, G.J., Van Der Graaf, W.T.,
Oosterwikjk, J.C., Kleibeuker, J.H., Schaapveld M. and De Vries E. G. (2002): Genes
other than BRCA1 and BRCA2 involved in breast cancer susceptibility, J. Med.
Genet., 39: 225-42.

De la Hoya, M., Gutiérrez-Enríquez, S., Velasco, E., Osorio, A., de Abajo, A.S.,
Vega, A., Salazar, R., Esteban, E., Llort, G., Gonzalez-Sarmiento, R., Carracedo, A.,
Benítez, J., Miner, C., Díez, O., Díaz-Rubio, E. and Caldes, T. (2006): Genomic
Rearrangements at the BRCA1 Locus in Spanish families with breast ovarian cancer .
Clin. Chem., 52: 1480-1485
Duffy, M.J. (2005): Predictive markers in breast and other cancers. Clin. Chem.,
51: 494–503.
Duffy, M.J. (2006): Serum tumor markers in breast cancer: Are they of clinical
value? Clin. Chem., 52: 345-51.
Elahi, M., Norat, T., Goudable, J. and Riboli, E. (2004):Biomarkers of dietary fat
intake and the risk of breast cancer: A meta-analysis. Int. J. Cancer, 111: 584-91.
Elmore, J.G., Miglioretti, D.L. and Carney, P.A. (2005): Does practice make
perfect when interpreting mammography? part II. J. Natl. Cancer Inst., 95:250-2.
El-Sharkawy S.L., El-Aal W.S.A., El-Shaer M.A.M., Abbas N.F., Youssef, M.F.
(2007): Mammaglobin: A novel tumor marker for breast cancer,Turkish Journal of
Cancer 37 (3) : 89-97.
Ergul E. and Sazci A.(2001): Molecular Genetics of Breast Cancer. Turk J Med
Sci 31: 1-14
Frazier, A.L., Ryan, C.T., Rockett, H., Willett, W.C. and Colditz, G.A. (2003):
Adolescent diet and risk of breast cancer. Breast Cancer Res., 5: R59-R64.
Gasco, M., Shami, S. and Crook, T. (2002): The p53 pathway in breast cancer.
Breast Cancer Res., 4: 70-76.
Giard, R.W.M. and Hermans, J. (1992): The value of aspiration cytology of the
breast. Cancer, 69: 2104-2110.
Gillanders, W.E. (2005): Clinical translation of a Mammaglobin-A DNA vaccine

for Breast Cancer Therapy. Ph.D. Thesis, Washington University School of
Medicine.
Giordano, S.H. (2005): A review of the diagnosis and management of male breast
cancer. Oncologist, 10: 471-9.
Grebenchtchikov, N., Brinkman, A., van Broekhoven, S. P.J., de Jong, D., Geurts-
Moespot, A. , Span, P. N., Peters, H. A., Portengen, H. , Foekens, J.A., Sweep, C.G.J.

(Fred) and Dorssers, L.C.J. (2004): Development of an ELISA for measurement of
BCAR1 protein in human breast cancer tissue . Clinical Chemistry, 50:1356-1363.
Grünewald, K., Haun, M., Urbanek ,M., Fliegl, M., Mueller-Holzner, E.,
Gunsilius, E., Dünser, M., Marth, C. and Gastl, G. (2000): Mammaglobin gene
expression: a superior marker of breast cancer cells in peripheral blood in
comparison to epidermal-growth-factor and cytokeratin-19. Lab. Invest., 80: 1071–
1077.
Guadagni, F., Ferroni, P., Carlini, S., Mariotti, S., Spila, A., Aloe, S., D
´Alessandro, R., Carone, M.D., Cicchetti, A., Riccoiotti, A., Venturo, I., Perri, P.,
Filippo, F. D., Cognetti, F., Botti, C. and Roselli, M. (2001): A reevaluation of
carcinoembryonic antigen (CEA) as a serum marker for breast cancer. Clin. Cancer
Res., 7: 1257- 2362.
Harbeck, N., Kates, R.E., Look, M.P., Gelder, M.M., Klijn, J.G.M. and Kruger, A.
(2002): Enhanced benefit from adjuvant chemotherapy in breast cancer patients
classified high-risk according to urokinase-type plasminogen activator (uPA) and
plasminogen activator inhibitor type 1 (N = 3424). Cancer Res., 62: 4617–4622.
Harris L., Fritsche H., Mennel R., Norton L., Ravdin P., Taube S., Somerfield
M.R., Hayes D.F.,and Bast Jr R.C.(2007): American Society of Clinical Oncology
2007 Update of Recommendations for the Use of Tumor Marker in Breast Cancer. J.
of Clin. Onc. 25(33): 5287-5312.
Hellström, L., Goodman, G., Pullman, J., Yang, Y. and Hellström, K. E. (2001):
Overepreesion oh HER-2 in ovarian carcinoma. Cancer Research, 61: 2420-2423
Henry, N.L. and Hayes, D.F. (2006): Uses and abuses of tumor markers in
the diagnosis monitoring and treatment of primary and metastatic breast cancer.
Oncologist, 11(6)541-52.
Jemal, A.; Siegel, R.; Ward, E.; Murray, T.; Xu, J. And Thun, M. J. (2007):
Cancer statistics, 2007. CA Cancer J. Clin., 57:43-66.
Jones G. (1999): CA 15-3. SydPath. gjones@stvincents.com.au
Koga, T., Horio, Y., Mitsudomi, T., Takahashi, T. and Yatabe, Y. (2004):
Identification of MGB1 as a marker in the differential diagnosis of lung tumors in
patients with a history of breast cancer by analysis of publicly available SAGE data.
J. Mol. Diagn, 6(2): 90-95.

Lacroix M.(2006): Significance, detection and markers disseminated breast
cancer cells. Endocrine-Related Cancer, 13: 1033–1067.
Lee I.M., Cook N.R., Rexrode K.M. and Buring J.E. (2001): Lifetime physical
activity and risk of breast cancer. British Journal of Cancer., 85(7), 962–965
Loman, N., Bladström, A. Johannsson, O., Borg, A. And Olsson, H. (2003):

Cancer incidence in relatives of a population- based set of cases of early- onset
breast cancer with a known BRCA1 and BRCA2 mutation status. Breast Cancer Res.,
5: R175- R186.
Margolese R.G., Fisher B., Hortobagyi G.N. and Bloomer W.D.(2003): Chapter
118 Neoplasms of the Breast: Cancer Medicine, 6th Edition"
McTieranan, A., Rajan, K.B., Tworoger, S.S., Irwin, M., Bernstein, L.,
Baumgartner, R., Gilliland, F., Stanczyk, F.Z., Yasui, Y. and Ballard-Barbash, R.
(2003): Adiposity and sex hormones in postmenopausal breast cancer survivors.
Journal of Clinical Oncology, 21: 1961-6.
Mikhitarian, K., Martin, R.H., Ruppel, M. B., W.E. Gillanders, W.E., Hoda, R.,
Schutte, D.H., Callahan, K., Mitas, M. and Cole, D.J. (2008): Detection of
mammaglobin mRNA in peripheral blood is associated with high grade breast
cancer: Interim results of a prospective cohort study. BMC. Cancer, 8:55.
Miksicek, R.J., Myal, Y., Watson, P.H., Walker, C., Murpohy,L.C. and Leygue, E.
(2002): Identification of a novel breast-and salivary gland-specific, Mucin-like gene
strongly expressed in normal and tumor human mammary epithelium. Cancer Res.,
62: 2736-2740.
Molina, R., Barak, V., van Dalen, A., Duffy, M.J., Einarsson, R. and Gion, M.
(2005): Tumor markers in breast cancer: European Group of Tumor Markers
(EGTM) recommendations. Tumor Biol., 26: 281–293.
Notani, P.N.(2001): Global variation in cancer incidence and mortality. Current

science, Vol. 81, No. 5
Núñez-Villar, M.J., Martinez-Arribas, F., Pollan, M., Lucas, A.R., Sánchez, J.,
Tejerina, A. and Schneider, J. (2003): Elevated mammaglobin (h-MAM) expression in
breast cancer is associated with clinical and biological features defining a less
aggressive tumor phenotype. Breast Cancer Res.,5(3): R65-70.

Oakley, K.L., Going, J.J. (1995): Specimen slice radiography of cancer in breast
conserving excisions. J.Clin. Pathol 48:1028-30
O'Brien, N., Maguire, T.M., O'Donovan, N., Lynch, N., Hill, A. D.K., McDermott,
E., O’Higgins, N. and Duffy, M.J.(2002): Mammaglobin A: a promising marker for
breast cancer. Clin. Chem., 48(8): 1362-1364.
Passebosc-Faure, K., Li, G., Lambert, C., Cottier, M., Gentil-Perret, A.,
Fournel, P.; Pérol, M. and Genin, C. (2005): Evaluation of a panel of molecular
markers for the diagnosis of malignant serous effusions. Clin. Cancer Res.,11(19).
Perkins G.L., Slater E.D., Sanders G.K., Prichard J.G.(2007): Serum Tumor
Markers. American Family Physician, 68 (6): 1075-82.
Peto, J. (2002): Breast cnacer susceptibility: A new look at an old model.,Cancer

Cell, 1: 411-2.
Poschl, G. and Seitz, H.K. (2004): Alcohol and cancer. Alcohol, 39: 155-65.
Raina, V., Bhutani, M., Bedi, R., Sharma, A., Deo, S.V., Shukla, N.K., Mohanti,
B.K. and Rat, G.K. (2005): Clinical features and prognostic factors of early breast
cancer at a major cancer center in North India. Indian J. Cancer, 42: 40-5.
Raynor, M., Stephenson, S.A., Walsh, D.C.A., Pittman, K.B. and Dobrovic, A.
(2002): Optimization of the RTPCR detection of immunomagnetically enriched
carcinoma cells. Cancer, 2:14-21.
Roncella, S., Ferro, P., Bacigalupo, B., Pronzato, P., Tognoni, A., Falco, E., et al
(2005): Human mammoglobin m-RNA is a reliable molecular marker for detecting
occult breast cancer cells in peripheral blood. J. Exp. Clin. Cancer Res., 24.2
Roncella, S., Ferro, P., Bacigalupo,B., Dessanti, P., Giannico A., Gorji, N., et al
(2006): Relationship between Human Mammaglobin mRNA Expression in Breast
Cancer Tissue and Clinico-Pathology features of the Tumor. J. Exp. Clin. Cancer
Res., 25.1
Ross, J.S., Fletcher, J.A., Linette, G.P., Clark, E., Ayers, M. And Symmans, W.F.
(2003): The HER-2/neu and protein in breast cancer 2003: biomarker and target of
therapy. Oncologist, 8: 307–325.

Silva, A.L., Tome, M.J., Correia, A.E., and Passos-Coelho, J.L. (2002): Human
mammaglobin RT-PCR assay for detection of occult breast cancer cells in
hematopoietic products. Ann. Oncol., 13: 442–429.
Singletary, S.E., Greene, F.L., Sobin, L.H. (2003): Classification of

Isolated Tumor Cells Clarification of the 6th Edition of the American Joint on
Cancer Staging Manual. American Cancer Society.
Singletary, S. E. and Connolly, J.L. (2006): Breast Cancer Staging: Working with
the sixth edition of the AJCC Cancer Staging Manual. CA Cancer J. Clin., 56:37-47.
Sjödin, A. (2005): Human Secretoglobins in Normal and Neoplastic Cells and

Tissues. Medical dissertation, University of Umeå, Sweden.
Slamon, D.J., Leyland-Jones, B., Shak, S., Fuchs, H., Paton, V. and Bajamonde,
A. (2001): Use of chemotherapy plus a monoclonal antibody against HER- 2 for
metastatic breast cancer that overexpress HER-2. N. Engl. J. Med., 344:783–92.
Smigal, C., Jemal, A., Ward, E., Cokkinides, V., Smith, R., Howe, H. L. And
Thun, M. (2006): Trends in breast cancer by race and ethnicity: Update 2006. CA
Cancer J.Clin., 56:168-183.
Span, P.N., Waanders, E., Manders, P., Heuvel, J., Foekens, J.A., Waston, M.A.
and Sweep, F. (2004): Mammaglobin is associated with low-grade, steroid receptor-
positive breast tumors from postmenopausal patients, and has independent
prognostic value for relapse free survival time. J. Clin. Oncol., 22(4): 691-698.
Stewart, S.L., King, J.B., Thompson, T.D., Friedman, C and Wingo, P.A. (2004) :
Cancer mortality surveillance United States, 1990-2000. Morbidity and mortality
WeeklyReport, 53: 1-108.
Terry, P.D. and Rohan, T.E. (2002): Cigarette smoking and the risk of breast
cancer in women. Cancer Epidem., 11: 953-971.
Tjindarbumi D and Mangunkusumo R.(2002): Cancer in Indonesia, Present and

Future. Jpn J. Clin. Oncol; 32(Supplement 1)S17-S21
Tryggevadottir, L., Olafsdottir, E.J., Gudlaugsdottir, S., Jonasson, J.G. and

Tulinius, H. (2003): BRCA2 mutation carriers, reproductive factors and breast
cancer risk. BreastCancer Res., 5: R121-R128.

Ursin, G., Bernstein, L., Lord, S., Karim, J.R., Deapen, D., Press, M.F., Daling,
J.R., Norman, S.A., Liff, J.M. and Marchbanks, P.A. (2005): Reproductive factors
and subtypes of breast cancer defined by hormone receptor and histology. Br. J.
Cancer, 93: 364-71.
Watson, M.A. and Fleming, T.P. (1996): Mammaglobin, a mammary-specific

member of the uteroglobin gene family, is overexpressed in human breast cancer.
Cancer Res., 56(4): 860-865.
Watson, M.A., Darrow, C., Zimonjic, D.B., Popescu, N.C. and Fleming, T.P.
(1998): Structure and transcriptional regulation of the human mammaglobin gene, a
breast cancer associated member of the uteroglobin gene family localized to
chromosome 11q13. Oncogene, 16(6): 817-824.
Watson, M.A., Dintzis, S., Darrow, C.M., Voss, L.E., Pipersio, J., Jensen, R. and
Fleming, T.P. (1999): Mammaglobin expression in primary, metastatic, and occult
breast cancer. Cancer Res., 59(13): 3028-3031.
Winchester D.P. (1992): Physical Examination of the Breast. Cancer Supplement,

Volume 69, No. 7
Wood, W.C., Muss, H.B., Solin, L.J., Olopade, O.I. (2005): Malignant Tumors of
the breast Cancer. In: Principles and Practice of Oncology.7th Ed, V.T. DeVita, S.
Hellman, S.A. Rosenberg(Eds). Philadelphia, Lippincott Williams & Wilkins, pp:
1415-77
Woodward, W.A., Strom, E.A., Tucker, S.L., McNeese, M.D., Perkins, G.H.,
Schechter, N.R., Singletary, S.E., Theriault, R.L., Hortobagyi, G.N., Hunt, K.K. and
Thomas A. Buchholz (2003): Changes in the 2003 American Joint Committee on
Cancer Staging for Breast Cancer Dramatically Affect Stage-Specific Survival.
Journal of Clinical Oncology, 21 (17): 3244-3248
Wrensch, M.,Chew, T., Farren, G., Barlow, J., Belli, F., Clarke, C., Erdmann,
C.A., Lee, M., Moghadassi, M., Peskin-Mentzer, R., Quesenberry Jr, C.P., Souders-
Mason, V., Spence, L., Suzuki, M. and Gould, M. (2003): Risk factors for breast
cancer in a population with high incidence rates. Breast Cancer Research, 5 (4)
Zach, O., Kasparu, H., Krieger, O., Hehenwarter, W., Girschikofsky, M. and Lutz,
D. (1999): Detection of circulating mammary carcinoma cells in the peripheral blood
of breast cancer patients via a nested reverse transcriptase polymerase chain
reaction assay for mammaglobin mRNA. J. Clin. Oncol., 17: 2015–2019.

Zehentner, B. K., Persing, D. H., Deme, A., Toure, P., Hawes, S. E., Brooks, L.,
Feng, Q., Hayes, D. C., Critichlow, C. W., Houghton, R. L.and Kiviatet, N. B.
(2004): Mammaglobin as a Novel Breast Cancer Biomarker: Multigene Reverse
Transcription-PCR Assay and Sandwich ELISA. Clinical Chemistry, 2069–2076.
Zhang, S.M., Manson, J.E., Rexrode, K.M., Cook, N.R., Buring, J.E. and Lee, I.M.
(2007): Use of oral conjugated estrogen alone and risk of breast cancer. Am. J.
Epidemiol.,165(5):524-529.

Lampiran 1.
PENJELASAN MENGENAI PENELITIAN:
LEMBAR PENJELASAN KEPADA CALON SUBJEK PENELITIAN
Selamat pagi/siang Ibu/Saudari sekalian
Nama saya dr. Surjadi Rimbun dan akan melakukan penelitian dengan judul:
Ekspresi m-RNA mammaglobin pada wanita penderitaa kanker payudara
dengan metastase di Kotamadya medan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
Ekspresi m-RNA mammaglobin. Dengan diketahuinya ekspresi m-RNA
mammaglobin maka diharapkan akan dapat menambah modalitas terapi terhadap
kanker payudara.
Jika Ibu/Saudari bersedia mengikuti penelitian ini maka akan dilakukan pemeriksaan
terhadap Ibu/Saudari dengan cara melakukan wawancara, pengambilan darah vena
daerah cubiti/ siku untuk diperiksa di laboratorium.Kami sangat mengharapkan keikut
sertaan Ibu/Saudari dalam penelitian ini, karena selain bermanfaat untuk diri sendiri,
juga bermanfaat untuk orang lain.
Selama penelitian ini, Ibu/Saudari tidak dibebankan biaya apapun. Semua
data/keterangan dari Ibu/Saudari bersifat rahasia, tidak diketahui orang lain. Apabila
keberatan, Ibu/Saudari bebas untuk menolak mengikuti penelitian ini, tanpa khawatir
akan mengurangi pelayanan yang kami berikan.
Jika sudah mengerti dan bersedia mengikuti penelitian ini maka Ibu/saudari dapat
mengisi lembar persetujuan. Pemeriksaan yang akan dilakukan diatas pada lazimnya
tidak akan menimbulkan hal yang berbahaya bagi Ibu/Saudari sekalian, Namun bila
terjadi hal-hal yang tidak diinginkan yang disebabkan oleh perlakuan penelitian ini,
maka Ibu/Saudari dapat menghubungi saya.
Nama : dr. Surjadi Rimbun
Alamat kantor : Jl. Krakatau 57-C Medan (telp-HP 0616614923-0811632515)
Demikian penjelasan ini saya sampaikan, kiranya hasil dari penelitian ini bermanfaat
bagi kita semua.
Medan, Oktober 2012......

Peneliti,
(dr. Surjadi Rimbun)

Lampiran 2.
LEMBAR PERSETUJUAN SETELAH PENJELASAN

(INFORMED CONSENT)
Saya yang bertanda tangan dibawah

ini: Nama :
Umur :
Jenis kelamin :
Alamat :
No.Telp./ HP :
Setelah mempelajari dan mendapatkan penjelasan yang sejelas-jelasnya mengenai

penelitian yang berjudul Ekspresi m-RNA mammaglobin pada wanita penderita Kanker
payudara dengan metastase di Kotamadya Medan, dan setelah mengetahui dan menyadari
sepenuhnya risiko yang mungkin terjadi, dengan ini saya menyatakan bahwa saya bersedia
dengan sukarela menjadi subjek penelitian tersebut dan patuh akan ketentuan-ketentuan yang
dibuat peneliti. Jika sewaktu-waktu ingin berhenti, saya berhak untuk tidak melanjutkan
mengikuti penelitian ini tanpa ada sanksi apapun.
Yang menyatakan Saksi
( ) ( )
Peneliti
(Dr. Surjadi Rimbun)

Lampiran 3.
Kuesioner subjek
DATA SUBJEK INISIAL SUBJEK : ░░░░░░░░

Nama : ...................................................................... Jenis kelamin :
P
Umur : ....... tahun ; Tanggal lahir : ..........................
Pekerjaan : ………………………………………………..
Alamat : .........................................................................
Telp. : ............................ HP : ..................................
Tempat/ tgl : Medan,/ .............. ..........................................
1. Apakah Ibu/saudari sekarang ini sedang menderita penyakit kanker
payudara?
□ YA  TIDAK
2. Jika YA,apakah Ibu/saudari sedang dalam masa pengobatan kanker

payudara?
□ YA  TIDAK
Jika YA, apa jenis pengobatan yang sedang berjalan sekarang?
□ Operasi
□ Radiasi
□ Kemoterapi
3. Jika TIDAK, apakah Ibu/saudari sudah selesai menjalani terapi lebih dari
5 tahun?
□ YA  TIDAK
4. Jika TIDAK, apakah ini kanker yang kambuh kembali menurut dokter
yang merawat Ibu/ saudari?
□ YA  TIDAK
5. Apakah Ibu/saudari selama masa pengobatan, rutin menjalani

pemeriksaan darah?
□YA  TIDAK
Jika YA, pemeriksaan darah rutin apa yang pernah atau sedang dijalani?
……………………………………………………………………………………
…..................................................................................................................
.........................................................................................................................
6. Apakah dokter yang merawat pernah memberitahukan keadaan

penyakit kanker payudara Ibu/ saudari?

□ YA  TIDAK
7. Jika YA, apakah Ibu/ saudari tahu tentang stadium penyakit

kanker payudara?
□ YA  TIDAK
8. Apakah juga Ibu/ saudari tahu tentang stadium penyakit kanker payudara
yang sedang/ pernah diderita?
□ YA  TIDAK
9. Stadium penyakit kanker payudara adalah : (beri tanda  pada bagian

yang dirasa benar, jawaban boleh lebih dari satu)
□ Stadium dini adalah bila kanker hanya mengenai salah satu payudara
□ Stadium dini adalah bila kanker masih dapat diobati
□ Stadium terdiri dari I sampai IV
□ Stadium lanjut adalah bila kanker telah menyebar ke organ lain (metastase)
□ Stadium lanjut sama dengan stadium IV

Lampiran 4.
Data Klinis dan histopatologi serta hasil imaging penderita kanker payudara
DATA SUBJEK INISIAL SUBJEK : ░░░░░░░░

Nama :........................................................................Jenis kelamin : P
Umur : ....…. tahun ; Tanggal lahir : ...................... ….
Pekerjaan : ………………………………………………...
Alamat : ......................................................................... .
Telp. : ............................ HP : ............................... ....
Tempat/ tgl : Medan,/ ...................................................... ....
No. Med Rekod : ..........................................................................
1. Diagnosa klinis :
……………………………………………………......
2. Hasil Histopatologi
:………………………………………………………….
3. Hasil Foto X-Ray

:………………………………………………………….
4. Hasil USG
:………………………………………………………….
5. Hasil CT-Scan
:…………………………………………………………..
6. Hasil MRI/PET CT
:…………………………………………………………..


Mammaglobin

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Mammaglobin

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

EKPRESI m-RNA MAMMAGLOBIN PADA DARAH

PENDERITA KANKER PAYUDARA DENGAN METASTASE

PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

Universitas Sumatera Utara

Diajukan untuk melengkapi persyaratan memperoleh

PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

Universitas Sumatera Utara

kanker payudara dengan metastase di Kotamadya Medan

Nama Mahasiswa : Surjadi Rimbun

Nomor Pokok : 087008004/BM

Program Studi : Studi Biomedik

dr. Yahwardiah Siregar Ph.D

dr. Emir T. Pasaribu SpB-Onk

Ketua Program Studi Dekan Fakultas Kedokteran USU

(dr. Yawardiah S. Ph.D) (Prof.dr. Gontar A. Siregar SpPD-KGEH)

Universitas Sumatera Utara

Tanggal : Maret 2013

PANITIA PENGUJI TESIS

Ketua : dr. Yahwardiah Siregar, Ph.D

Anggota : 1. dr. Emir T. Pasaribu, Sp.B.Onk (K)

2. Prof. dr. Azmi S.Kar, Sp.PD. KHOM

3. dr. Sry Suryani Widjaja, M.Kes

Universitas Sumatera Utara

Mammaglobin adalah penanda tumor spesifik kanker payudara yang dapat

Kata kunci: kanker payudara, mRNA mammaglobin, darah perifer, RT-PCR

Universitas Sumatera Utara

Key words: breast cancer, mRNA mammaglobin , peripheral blood, RT-PCR

Universitas Sumatera Utara

rahmat dan kasih karuniaNya sehingga tesis ini dapat diselesaikan.

Universitas Sumatera Utara yang diberikan untuk mengikuti dan menyelesaikan

pendidikan program magister Biomedik di Universitas Sumatera Utara, Medan.

Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara, Prof. dr. Gontar A.

menyelesaikan pendidikan program Magister Biomedik Fakultas Kedokteran

Universitas Sumatera Utara.

Universitas Sumatera Utara

mengikuti program S2.

atas dorongan, semangat dan bimbingan yang sangat bermanfaat sehingga

berkaitan dengan penelitian ini.

Holly Martok, yang senantiasa memberikan dukungan, semangat dan dorongan

selama saya menjalani pendidikan di Program Magister S2 Biomedik Fakultas

Kedokteran Universitas Sumatera Utara Medan.

segala pengertian dan pengorbanannya dalam mendukung cita-cita penulis.

Universitas Sumatera Utara

penulisan tesis ini hingga selesai.

Medan, Maret 2013

Universitas Sumatera Utara

Kusuma, dan mempunyai anak: Tania dan Dimitri. Menyelesaikan pendidikan

Universitas Sumatera Utara

BAB II TINJAUAN KEPUSTAKAAN

Universitas Sumatera Utara

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

3.1. Jenis Penelitian........................................................................................45

Universitas Sumatera Utara

BAB IV HASIL PENELITIAN

4.1 Hasil Penelitian.......................................................................................57

BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN

Universitas Sumatera Utara

Nomor Judul Halaman

1. Gambar anatomi payudara..................................................................................5

2. Gambar kanker payudara....................................................................................7

3. Gambar kerangka Apoptosis.............................................................................16

4. Gambar gen Mammaglobin..............................................................................32

5. Gambar mesin PCR..........................................................................................44

6. Gambar kerangka konsep.................................................................................48