W O R K B O O K

PROSEDUR ANALISIS
E. COLI DAN COLIFORM
SESUAI APHA

LabMania Learning Center

www.LabManiaIndonesia.id
 1 TENTANG KAMI

2 PRINSIP
ISI

3 ALAT DAN BAHAN

DAFTAR

4 CARA KERJA

5 PENJAMINAN MUTU

6 PAKET PENJUALAN
TENTANG KAMI
LABMANIA INDONESIA

Labmania Learning Centre adalah

lembaga pelatihan dan konsultasi di
bawah naungan Labmania Indonesia
Jaya yang berlokasi di Summarecon
Bekasi. Selama lebih dari 4 tahun, kami
memfokuskan diri pada peningkatan
pemahaman terhadap sistem
manajemen laboratorium sesuai
dengan SNI ISO/IEC 17025 :2017
termasuk untuk parameter analisis
mikrobiologi.

Sejak 2019 Labmania Indonesia telah

ditunjuk menjadi TUK (Tempat Uji
Kompetensi) sertifikasi BNSP untuk
personil laboratorium yang bekerja
sama dengan LSP TELAPI.
Pada tahun 2021 kami juga mulai
bekerja sama dengan LSP Daimaru
dalam bidang sertifikasi BNSP untuk
personil pengelolaan limbah air,
limbah udara, dan limbah B3.
 PRINSIP
PENGGUNAAN MEMBRAN FILTER

Sesuai dengan APHA 9222 B, metode ini dapat digunakan untuk mengukur total
coliform dalam air minum, air yang tidak dapat diminum, dan air lainnya dengan
menggunakan media jenis Endo. Ketika biakan bakteri coliform yang dimurnikan
diuji, bakteri tersebut akan menghasilkan sitokrom oksidase negatif dan reaksi
uji-galaktosidase positif. Koloni tipikal yang ditanam pada media tipe Endo dapat
diuji lebih lanjut untuk membedakan coliform termotoleran dan E. Coli
menggunakan metode partisi “E. coli dari MF Total Coliforms menggunakan NA-
MUG Agar"

Sesuai dengan APHA 9222 I, Escherichia coli adalah anggota kelompok

bakteri coliform termotoleran; kehadirannya merupakan indikasi
terkontaminasi tinja. Kuantisasi dan verifikasi cepat untuk E. coli dapat
dicapai untuk sampel MF positif total-coliform atau termotoleran-coliform
dengan menggunakan media yang mengandung 4-methylumbel liferyl--
D- glucuronide (MUG). Dalam metode ini, didefinisikan sebagai setiap
coliform yang menghasilkan enzim -glucuronidase dan menghidrolisis
substrat MUG untuk menghasilkan fluoresensi biru
ALAT DAN BAHAN
P E N G U J I A N M E M B R A N F I L T E R

ALAT LABORATORIUM

Botol sampel dan pengenceran

Cawan petri
Satu set alat filtrasi (Paket Membran Filter 1, Paket Membran
Filter 2, Paket PES Filtration Apparatus MF 31, MultiVac 310 - MS
- T, MultiVac 601 - MB - T )
Forceps
Inkubator
Rak tabung
Ose/ose disposible
Tabung reaksi ulir
Tabung durham
Lampu ultraviolet, gelombang panjang (365–366 nm)
Membran filter 47–50mm dengan diameter pori 0,45 μm (No.
katalog produk 7141-104)

BAHAN DAN MEDIA KULTUR

Larutan buffer phospat

W W W . L a b M a n i a I n d o n e s i a . i d
 ALAT DAN BAHAN
P E N G U J I A N M E M B R A N F I L T E R

BAHAN DAN MEDIA KULTUR

NO MEDIA No. Katalog

1 LES Endo-Agar 1112770500

2 ENDO agar 1040440500

3 Lauryl Triptose Broth 1102660500

4 NA MUG M1461

KULTUR BAKTERI UNTUK

UJI KINERJA MEDIA

NO MEDIA BAKTERI ATCC WDCM No. Katalog

1 LES Endo-Agar Escherichia coli 25922 00013 VT000133

Enterobacter aerogenes
13048 00175 VT001753
(klebsiella aerogenes)

Proteus mirabilis 14273 00023 VT000232

W W W . L a b M a n i a I n d o n e s i a . i d
ALAT DAN BAHAN
P E N G U J I A N M E M B R A N F I L T E R

NO MEDIA BAKTERI ATCC WDCM No. Katalog

2 Endo-Agar Escherichia coli 11775 00090 VT000902

Enterobacter cloacae 13047 00083 VT000834

Klebsiella pneumoniae 13883 VT000971

Salmonella typhimurium 14028 00031 VT000312

Lauryl Triptose
3 Escherichia coli 8739 00012 VT000122
Broth

Citrobacter freundii 43864 00006 VT000066

Enterococcus faecalis 19433 00009 VT000093

Enterococcus faecalis 29212 00087 VT000876

4 NA MUG Pseudomonas aeruginos 27853 00025 VT000256

Staphylococcus aureus 25923 00034 VT000343

W W W . L a b M a n i a I n d o n e s i a . i d
CARA KERJA MEMBRAN FILTER

1 Pasang membran filter pada unit filtrasi

2 Tuangkan sampel ke dalam corong

3 Hidupkan vakum hingga terhenti

Bilas corong dengan 20-30mL buffer steril.

4
Hidupkan vakum. Bilas corong dua kali lagi

Letakkan membran pada agar les-ENDO atau

5 m-ENDO yang mengandung Fuchsin basa
sebagai indikator.

6 Inkubasi cawan petri terbalik pada suhu 35 ±

0,5 °C selama 24 jam. Koloni merah dengan
kemilau metalik (emas) positif coliform.

Lakukan uji verifikasi terhadap Coliform

7
dengan cara pindahkan setiap koloni dan
tempatkan pada media single-strength lauryl
tryptose broth.

8 inkubasi media LTB pada 35+-0,5 ° C hingga 48

jam. Amati hasil pengamatan. Gas yang
terbentuk dalam media LTB dikonfirmasi
sebagai Coliform

W W W . L a b M a n i a I n d o n e s i a . i d
CARA KERJA MEMBRAN FILTER

9 Pindahkan filter membran secara aseptik

dengan setidaknya satu koloni positif
Coliform ke pelat NA-MUG

Inkubasi NA-MUG segera setelah transfer

10
pada suhu 35+-0,5°C selama 4 jam

11 Amati dengan sinar UV. Adanya

fluoresensi biru cerah di pinggiran (tepi
luar) dari koloni, atau diamati dari bagian
belakang cawan merupakan respon positif
untuk E. coli

W W W . L a b M a n i a I n d o n e s i a . i d
 PENJAMINAN
MUTU

· Sebelum penggunaan awal,

rakit unit filtrasi dan periksa
1
kebocoran.

2
Cuci dan bilas unit filtrasi secara
menyeluruh setelah digunakan, kemudian
bungkus dengan kertas atau foil yang tidak
beracun, dan sterilkan melalui autoklaf atau
oven panas kering

· Saat mengukur volume sampai

menggunakan corong dengan 3
tanda skala volumetrik, pertama-
tama periksa keakuratan tanda
menggunakan silinder ukur kelas A
atau pipet volumetrik
.

4 Untuk corong sekali pakai yang

telah disterilkan, periksa satu per lot
atau persentase yang ditetapkan
(misalnya 1 hingga 4%) untuk
megonfirmasi keakuratan tanda
sala volumetrik

Pemeriksaan sterlitas: lakukan uji

sterilitas media sebelum
5
penggunaan pertama untuk
memastikan tidak ada potensi
gangguan
li

W W W . L a b M a n i a I n d o n e s i a . i d
 PENJAMINAN
MUTU

· · Lakukan pengecekan
efektivitas sterilisasi autoclave 6
menggunakan indicator biologi

7
Lakukan pemeriksaan kinerja media
menggunakan kultur bakteri yang sesuai
dan tertelusur

· · Periksa setiap batch baru

(atau lot, jika disiapan secara 8
komersial) larutan buffer untuk
sterilitas sebelum digunakan
pertama kali dengan menambahkan
50 mL ke dalam 50 mL double
strength non-selective broth

9
(misalnya, tryseptic soy, trypticase
soy, or tryptose broth). Untuk setiap manifold yang
digunakan dalam pengujian filter
membran , periksa sterilitas seluruh
proses dengan menggunakan air
pengencer steril sebagai sampel di
awal dan akhir setiap sesi filtrasi
sampel dan uji pertumbuhan
· Jika proses penghentian
pemrosesan berlangsung selama
10
30 menit, gunakan corong baru
yang telah disterilkan dan ulangi uji
sterilitas

li

W W W . L a b M a n i a I n d o n e s i a . i d
 LABMANIA INDONESIA

Paket Membran Filter Rocker 1

Untuk meningkatkan hasil pengujian analisis mikrobiologi membran filter, kami
mengkombinasikan penjualan instrument untuk membran filter dengan training
validasi atau verifikasi metode pengujian mikrobiologi sesuai standar internasional.

FREE TRAINING: SCAN UNTUK FREE

VALIDASI ATAU VERIFIKASI METODE
MEMBRAN FILTER E. COLI DAN KOLIFORM WORKBOOK

FUNNEL

ROCKER 300

ERLENMEYER
1000 ML

SPESIFIKASI
HARGA PAKET MEMBRAN ROCKER 01
Rocker 300
Voltage 220V, Max. Power 60W, Max Vacuum Rp. 14.125.000
99mbar abs,
Max. Flow Rate 20 L/min @ 50 Hz, vacuum
regulator YES, overflow protection YES, Noise SEGERA HUBUNGI
Level 50 dB.
0821-2429-3839
Apparatus MF31
Funnel 300 ml, Receiver flask 1000 ml, Filter
diameter 47 mm, Drain device YES

www.LabManiaStore.id ghina@laboratoryexpert.id

LabMania Store Ruby Commercial TC 25 Summarecon Bekasi

 LABMANIA INDONESIA

Paket Membran Filter Rocker 2

Untuk meningkatkan hasil pengujian analisis mikrobiologi membran filter, kami
mengkombinasikan penjualan instrument untuk membran filter dengan training
validasi atau verifikasi metode pengujian mikrobiologi sesuai standar internasional.

FREE TRAINING: SCAN UNTUK FREE

VALIDASI ATAU VERIFIKASI METODE
MEMBRAN FILTER E. COLI DAN KOLIFORM WORKBOOK

4000 mL Heavy Duty PP

Waste Bottle

ROCKER 400

3 Places Manifold
3 Funnel 100 mL

HARGA PAKET MEMBRAN ROCKER 02

SPESIFIKASI Rp. 33.100.000
Rocker 400
Voltage 220V, Max. Power 60W, Max Vacuum
99mbar abs, Max. Flow Rate 20 L/min @ 50 Hz, SEGERA HUBUNGI
vacuum regulator YES, overflow protection YES,
Noise Level 50 dB.
0821-2429-3839

www.LabManiaStore.id ghina@laboratoryexpert.id

LabMania Store Ruby Commercial TC 25 Summarecon Bekasi

 LABMANIA INDONESIA

Paket Membran Filter Rocker 3

Untuk meningkatkan hasil pengujian analisis mikrobiologi membran filter, kami
mengkombinasikan penjualan instrument untuk membran filter dengan training
validasi atau verifikasi metode pengujian mikrobiologi sesuai standar internasional

SCAN UNTUK FREE FREE TRAINING:

VALIDASI ATAU VERIFIKASI METODE
WORKBOOK MEMBRAN FILTER E. COLI DAN KOLIFORM

ROCKER 400

6 FUNNEL
ERLENMEYER
1000 ML

Rocker 400
Voltage 220V, Max. Power 60W, Max Vacuum HARGA PAKET MEMBRAN ROCKER 03
99mbar abs, Max. Flow Rate 20 L/min @ 50 Hz, Rp. 44.135.000
vacuum regulator YES, overflow protection YES,
Noise Level 50 dB.
SEGERA HUBUNGI
Apparatus MF31
Funnel 300 ml, Receiver flask 1000 ml, Filter 0821-2429-3839
diameter 47 mm, Drain device YES

www.LabManiaStore.id ghina@laboratoryexpert.id

LabMania Store Ruby Commercial TC 25 Summarecon Bekasi

 CALL US NOW!
Hubungi kami untuk informasi tentang verifikasi metode pengujian
kimia serta peralatan dan bahan habis pakai yang diperlukan.

0821-2429-3839