1. Uji kejernihan (Lachman III, hal.

1356)
Produk dalam wadah diperiksa di bawah penerangan cahaya yang baik, terhalang
terhadap reflex dari mata, berlatarbelakang hitam dan putih dengan rangkaian isi
dijalankan dengan suatu aksi memutar.
Syarat: semua wadah diperiksa secara visual dan tiap partikel yang terlihat dibuang
dari infus volume besar, batas 50 partikel 10ųm dan lebih besar 5 partikel ≥25 ųm/ml
2. Uji pH
Cek pH larutan menggunakan pH meter atau pH indikator universal

1. Uji Sterilitas (FI ed. IV hal 861)

Menggunakan teknik penyaringan membran :
Bersihkan permukaan luar botol, tutup botol dengan bahan dekontaminasi yang
sesuai, ambil isi secara aseptik.
Pindahkan secara aseptik seluruh isi tidak kurang dari 10 wadah melalui tiap
penyaring dari 2 rakitan penyaring. Lewatkan segera tiap spesimen melalui penyaring
dengan bantuan pompa vakum/tekanan.
Secara aseptik, pindahkan membran dari alat pemegang, potong menjadi setengah
bagian (jika hanya menggunakan satu). Celupkan membran atau setengah bagian
membran ke dalam 100 ml media inkubasi selama tidak kurang dari 7 hari.
Lakukan penafsiran hasil uji sterilitas.
2. Uji Keseragaman Volume (FI ed. IV hal. 1044)
Pilih 1 atau lebih wadah bila volume  1m. Ambil isi tiap wadah dengan alat suntik
hipodemik kering berukuran tidak lebih dari 3 kali volume yang akan diukur dan
dilengkapi dengan jarum suntik no. 21 dengan panjang tidak kurang dari 2,5 µm.
Keluarkan gelembung udara dari jarum dan alat suntik.
Pindahkan isi dalam alat suntik tanpa mengosongkan bagian jarum ke dalam gelas
ukur kering volume tertentu yang telah dibakukan sehingga volume yang diukur
memenuhi sekurang-kurangnya 40% volume dari kapasitas tertera.
3. Uji kadar (FI IV, hal 648)
Pipet 1ml injeksi ke dalam labu tentukur 200ml, encerkan dengan air sampai tanda.
Pipet 3ml larutan ini ke dalam corong pisah, tambahkan 10ml air, basakan dengan
ammonium hidroksida 6N. Ekstraksi beberapa kali, tiap kali dengan 5ml kloroform P,
dan uapkan ekstrak hingga kering. Larutkan residu dalam asam klorida 0.1N,
encerkan dengan pelarut yang sama hingga 100.0ml (larutan uji).ukur serapan larutan
uji dan larutan baku dalam papaverin hidroksida BPFI dengan kadar lebih kurang
4.5µg per ml dalam asam klorida 0.1N. hitung jumlah dalam mg, C20H21NO4.HCl,
dalam injeksi yang digunakan dengan rumus:6.67 C (Au/As)C adalah kadar papaverin HCl BPFI
dalam µg per ml larutan baku; Au dan Asberturut-turut adalah serapan larutan uji dan larutan
baku.
Syarat: mengandung C20H21NO4.HCl tidak kurang dari 95,0% dan tidak lebih dari105,0% dari
jumlah yang tertera pada etiket.
4. Uji pirogenitas (FI IV, hal 908)
Lakukan pengujian dalam ruang terpisah yang khusus untuk uji pirogen dan dengan
kondisi lingkungan yang sama dengan ruang pemeliharaan , bebas dari keributan yang
menyebabkan kegelisahan. Kelinci tidak diberi makan selama waktu pengujian.
uji berupa sediaan yang bila perlu dikonstitusi seperti yang
tertera pada etiket maupun bahan uji yang diperlakukan seperti yang tertera pada
masing-masing monografi dan disuntikan dengan dosis seperti yang tertera. Untuk uji
pirogen alat atau perangkat injeksi, gunakan sebagai larutan uji hasil cucian atau
bilasan dari permukaan alat yang berhubungan langsung dengan sediaan parenteral,
tempat penyuntikan atau jaringan tubuh pasien. Semua larutan harus bebas dari
kontaminasi, hangatkan larutan pada suhu 37O± 20 sebelum penyuntikan. Rekam suhu
berturut-turut antara jam kesatu dan jam ketiga setelah penyuntikan dengan selang waktu 30
menit.Syarat:sediaan memenuhi syarat apabila tak seekor kelincipun menunjukan kenaikan suhu 0,5 O
atau lebih. Jika ada kelinci menunjukan kenaikan suhu 0,5O atau lebih, lanjutkan pengujian dengan
menggunakan 5 ekor kelinci. Jika tidak lebih dari 3 ekor dari 8 ekor kelinci masing-masing menunjukan
kenaikan suhu 0,5O atau lebih dan jumlah kenaikan suhu maksimum 8 ekor kelinci tidak lebih dari
3,3OC sediaan dinyatakan bebas dari pirogen.
5. Uji Kebocoran (Lachman Hal. 1354)
Letakkan ampul didalam zat warna (biru metilen 0,5 – 1,0 %) di dalam ruang vakum. Tekanan atmosfer
berikutnya menyebabkan zt warna berpenetrasi kedalam lubang dapat dilihat setelah ampul dicuci untuk
membersihkan zat warnanya. Masing-masing ampul diletakkan dalam keadaan terbalik. Dilihat apakah
ada larutan obat yang merembes keluar ampul.
6. Uji Kejernihan (Lachman III Hal. 1358)
Produk dalam wadah diperiksa di bawah penerangan cahaya yang baik, terhalang terhadap reflex dari
mata, berlatarbelakang hitam dan putih dengan rangkaian isi dijalankan dengan suatu aksi memutar.
Syarat: semua wadah diperiksa secara visual dan tiap partikel yang terlihat dibuang
dari infus volume besar, batas 50 partikel 10ųm dan lebih besar 5 partikel ≥25 ųm/ml
EVALUASI
IPC ( In Process Control )
Uji pH ( FI IV hal. 1039 – 1040 )
Cek pH larutan dengan menggunakan pH meter atau kertas indikator universal.
Dengan pH meter : Sebelum digunakan, periksa elektroda dan jembatan garam. Kalibrasi pH meter. Pembakuan pH
meter : Bilas elektroda dan sel beberapa kali dengan larutan uji dan isi sel dengan sedikit larutan uji. Baca harga pH.
Gunakan air bebas CO2 untuk pelarutan dengan pengenceran larutan uji.

Uji kejernihan ( Lachman hal. 1355 )

Pemeriksaan dilakukan secara visual biasanya dilakukan oleh seseorang yang memeriksa wadah bersih dari luar di
bawah penerangan cahay yang baik, terhalang terhadap refleksi ke dalam matanya, dan berlatar belakang hitam dan
putih, dengan rangkaian isi dijalankan dengan suatu aksi memutar, harus benar-benar bebas dari partikel kecil yang
dapat dilihat dengan mata.
QC ( QUALITY CONTROL )

Uji pH ( FI IV hal. 1039 – 1040 )

Cek pH larutan dengan menggunakan pH meter atau kertas indikator universal.
Dengan pH meter : Sebelum digunakan, periksa elektroda dan jembatan garam. Kalibrasi pH meter. Pembakuan pH
meter : Bilas elektroda dan sel beberapa kali dengan larutan uji dan isi sel dengan sedikit larutan uji. Baca harga pH.
Gunakan air bebas CO2 untuk pelarutan dengan pengenceran larutan uji.

Uji kejernihan ( Lachman hal. 1355 )

Pemeriksaan dilakukan secara visual biasanya dilakukan oleh seseorang yang memeriksa wadah bersih dari luar di
bawah penerangan cahaya yang baik, terhalang terhadap refleksi ke dalam matanya, dan berlatar belakang hitam dan
putih, dengan rangkaian isi dijalankan dengan suatu aksi memutar, harus benar-benar bebas dari partikel kecil yang
dapat dilihat dengan mata.

Uji keseragaman volume ( FI IV hal. 1044 )

Diletakkan pada permukaan yang rata secara sejajar lalu dilihat keseragaman volume secara visual.

Uji kebocoran (lachman III hal 1354)

Tidak dilakukan untuk vial dan botol karena tutup karetnya tidak kaku
 Uji kebocoran
Letakkan ampul di dalam zat warna ( biru metilen 0,5 – 1% ) dalam ruangan vakum. Tekanan atmosfer berikutnya
kemudian menyebabkan zat warna berpenetrasi ke dalam lubang, dapt dilihat setelah bagian luar ampul dicuci untuk
membersihkan zat warnanya.
Catatan penting : jangan ditulis di proposal ujian, uji kebocoran hanya untuk ampul

Uji sterilitas ( FI IV hal. 855 )

Asas : larutan uji + media perbenihan, inkubasi pada 20o – 25oC
Kekeruhan / pertumbuhan mikroorganisme ( tidak steril )
Metode uji :
Teknik penyaringan dengan filter membran ( dibagi menjadi 2 bagian ) lalu diinkubasi
Prosedur uji:
Inokulasi langsung ke dalam media perbenihan.
Volume tertentu spesimen ditambah volume tertentu media uji, inkubasi selama tidak kurang dari 14 hari, kemudian
amati pertumbuhan secara visual sesering mungkin sekurang-kurangnya pada hari ke-3 atau ke-4 atau ke-5, pada
hari ke-7 atau hari ke-8 dan pada hari terakhir dari masa uji.
Catatan : Jangan ditulis di proposal ujian, kalo sediaan itu ada pengawet, uji sterilitasnya menggunakan inokulasi
langsung, jika sediaan itu tidak mengandung pengawet uji sterilitasnya menggunakan filter membran
Penetapan kadar

Uji pirogenitas
Secara biologik (Metode Seibert 1920: USP XII 1942)
Asas :
Berdasarkan peningkatan suhu badan kelinci yang telah disuntikkan dengan larutan ≤ 10 mg/Kg BB dalam vena
auricularis.
Cara :
- Setiap penurunan suhu dianggap nol
- Memenuhi syarat : tak seekor kelinci pun menunjukkan kenaikan suhu 0,5ºC atau lebih
- Jika ada kelinci dengan kenaikkan suhu 0,5ºC atau lebih, lanjutkan dengan kelinci tambahan
- Memenuhi syarat : tidak lebih dari 3 ekor kelinci dari 8 kelinci masing-masing menunjukkan kenaikkan suhu 0,5ºC
atau lebih dan jumlah kenaikkan suhu maksimal 8 ekor kelinci tidak lebih dari 3,3ºC.
CARA KERJA
1. Alat–alat dan bahan yang akan digunakan disiapkan.
2. Kalibrasi vial 5 ml dan beaker glass 37,1 ml.
3. Alat-alat dan wadah yang akan digunakan disterilkan.
4. Aqua pro injeksi dibuat dengan cara mendidihkan aqua selama 30 menit, lalu didinginkan.
5. Bahan-bahan yang akan digunakan ditimbang.
6. Dibuat pengenceran benzetonium klorida dengan cara: sejumlah 10 mg benzetonium klorida ditimbang, kemudian
diencerkan dengan aqua pro injeksi hingga 5 ml.
7. Papaverin HCl dilarutkan dengan sebagian aqua pro injeksi didalam beaker glass.
8. Sebanyak 2,4 ml benzetonium klorida yang telah diencerkan dimasukkan ke dalam larutan papaverin HCl,
kemudian diaduk homogen.
9. Aqua pro injeksi ditambahkan hingga sebelum tanda kalibrasi.
10. Dilakukan pemeriksaan pH, hingga pH memenuhi antara 3-4.
11. Aqua pro injeksi ditambahkan ad tanda.
12. Larutan obat dimasukan ke dalam vial sampai tanda kalibrasi.
13. Ditutup dengan karet penutup, lakukan sterilisasi akhir dengan otoklaf dengan suhu 121°C selama 15 menit.
14. Dilakukan evaluasi kejernihan, pH, dan keseragaman volume.
15. Diberi etiket, brosur, lalu dikemas dan diserahkan.

XI. HASIL EVALUASI

Jenis Evaluasi Hasil Evaluasi
- Uji Kejernihan Jernih
Uji Fisika
- Uji Keseragaman Volume Seragam
Uji Kimia - Uji pH 4,5
 - Uji Sterilitas (FI ed. IV hal 861)
Menggunakan teknik penyaringan membran :
Bersihkan permukaan luar botol, tutup botol
dengan bahan dekontaminasi yang sesuai, ambil isi
secara aseptik.
Pindahkan secara aseptik seluruh isi tidak
kurang dari 10 wadah melalui tiap penyaring dari 2
rakitan penyaring. Lewatkan segera tiap spesimen
Uji Biologi - Uji Sterilitas
melalui penyaring dengan bantuan pompa
vakum/tekanan.
Secara aseptik, pindahkan membran dari alat
pemegang, potong menjadi setengah bagian (jika
hanya menggunakan satu). Celupkan membran atau
setengah bagian membran ke dalam 100 ml media
inkubasi selama tidak kurang dari 7 hari.
Lakukan penafsiran hasil uji sterilitas.

XII. PEMBAHASAN
1. Sebelum membuat sediaan Papaverin HCl dalam vial, seluruh alat yang digunakan disterilkan terlebih dahulu untuk
membebaskan alat-alat dari kontaminasi mikroorganisme.
2. Pelarut yang digunakan yaitu aqua pro injeksi bukan aquadest biasa karena air yang digunakan dalam larutan
parenteral dan irigasi harus bebas dari pirogen.
3. Dari hasil evaluasi kejernihan, didapatkan larutan yang jernih hasil ini didapat karena zat aktif (Papaverin HCl)
dapat larut dalam air sehingga tidak menimbulkan kekeruhan pada sediaan yang telah jadi.
4. Evaluasi keseragaman volume memberikan hasil semua sediaan memiliki volume yang seragam, keseragaman
volume ini dapat tercapai karena sebelum larutan dimasukkan ke dalam vial, terlebih dahulu dilakukan kalibrasi
pada vial.
5. pH dari sediaan yaitu 4,5 nilai tersebut sedikit berbeda dengan pH dari zat aktif yang digunakan, hal tersebut terjadi
karena bahan pengawet yang digunakan (benzetonium klorida) memiliki pH 4,8-5,5 yang mempengaruhi pH larutan.

XIII. DAFTAR PUSTAKA

1. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Direktorat Jendral
Pengawasan Obat dan Makanan; 1979.
2. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Direktorat Jendral
Pengawasan Obat dan Makanan; 1995.
3. Reynolds JEF, Martindale The Extra Pharmacopeia. 28 th edition. London: The Pharmaceutical Press; 1982.
4. Trissels, Lawrence A. Handbook on Injectable Drugs. 11th Edition.
5. Diktat Penuntun Praktikum Mikrobiologi II. Laboratorium Mikrobiologi. Fakultas Farmasi Universitas Pancasila.
Jakarta; 2014.
6. Rowe, Raymond C et.al. Handbook of Pharmaceutical Excipients 6 th Edition. London: Pharmaceutical Press; 2009.
7. Lachman, Leon. Teori dan Praktek Farmasi Industri Edisi III. UI-Press; 1994