BioTrends Vol.11 No.

2 Tahun 2020

Pemilihan Sel yang Tepat Untuk Penelitian Kanker

Payudara
LAILATUL QODRIA dan MARSYA YONNA NURRACHMA
Pusat Penelitian Bioteknologi – LIPI
Kompleks Cibinong Science Center
Jl. Raya Jakarta Bogor KM 46, Cibinong, Kab. Bogor, Jawa Barat 16911
Tel. 021 – 8754587/ Fax. 021 8754588
Email: lailatul.qodria@mail.ugm.ac.id; marsya.yonna.n@mail.ugm.ac.id

Pendahuluan sel yang telah di-cryo lebih sulit diobati. Lebih

Kanker payudara
merupakan salah satu jenis
kanker dengan prevalensi
paling tinggi di dunia.
Menurut WHO pada tahun
2020, sebanyak 2,1 juta
wanita telah didiagnosis
menderita kanker payudara
setiap tahun. Oleh karena
itu, penelitian dan
penemuan obat kanker
payudara menjadi sangat
penting untuk dilakukan.
Berbagai pemodelan kultur
sel kanker payudara sering
digunakan untuk penelitian
laboratorium (in vitro).
Pengujian in vitro
menggunakan pemodelan
kultur sel ini menjadi salah
satu metode yang
diandalkan untuk
menemukan obat kanker.
Beberapa keuntungan
menggunakan pemodelan
kultur sel antara lain
penanganan yang mudah,
pertumbuhan sel yang terus
menerus dan tidak terbatas,
derajat homogenitas yang
tinggi, serta jika terjadi
kontaminasi dapat diganti
dengan stok sel beku atau
(Burdall et al., 2003).
Berdasarkan profil
ekspresi gen dan ekspresi
imunohistokimia dari
reseptor estrogen (estrogen
receptor - ERα), reseptor
progesteron (progesterone
receptor – PR) dan Human
Epidermal Receptor 2
(HER2), kanker payudara
dapat diklasifikasikan
menjadi lima subtipe, yaitu
subtype luminal A, luminal B,
basal (triple-negative), positif
HER2, dan claudin-low
(Perou et al., 1999; Perou et
al., 2000); Tabel 1). Setiap
subtipe kanker payudara ini
memiliki prognosis dan
respon pengobatan yang
berbeda (Sorlie et al., 2001).
Reseptor estrogen (ER)
menjadi salah satu target
dalam terapi kanker
payudara sehingga subtipe
luminal A dan luminal B bisa
menerima terapi hormon,
begitu pula dengan reseptor
HER2 yang merupakan target
dari terapi Trastuzumab.
Namun demikian, subtipe
basal tidak memiliki target
terapi yang dikenali,
sehingga subtipe tersebut
lanjut, kanker payudara
subtipe basal diketahui lebih
agresif secara biologis dan
sering kali memiliki
prognosis yang buruk (Badve
et al., 2011). Di Indonesia,
masing-masing subtipe basal
(TNBC) dan HER2 memiliki
prevalensi sebanyak 25,5%
dan 19,4% (Goldhirsch et al.,
2011; Rahmawati et al.,
2018), sehingga studi
pemodelan sel untuk kedua
subtipe kanker tersebut
menjadi sangat penting
untuk dilakukan. Oleh karena
itu, dalam review ini akan
dibahas mengenai kedua
pemodelan sel kanker
payudara tersebut, dengan
masing-masing menampilkan
dua contoh pemodelan
kultur sel yang paling sering
digunakan dalam studi
penemuan dan
pengembangan obat kanker.
A. Triple-Negative
Breast Cancer (TNBC)
Triple-Negative Breast
Cancer ditandai dengan
kurangnya ekspresi ER dan
PR, serta kurangnya ekspresi

17
 BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020

gen untuk HER2 (Burness et sebagai sel kanker payudara bergantian, penting untuk
al., 2010; Seal & Chia, 2010). basal (Toft & Cryns, 2011). dicatat bahwa keduanya
Oleh karena itu, subtipe Meskipun istilah TNBC dan tidak sama (Alluri &
TNBC juga digolongkan basal digunakan secara Newman, 2014).

Tabel 1. Klasifikasi molekuler kanker payudara (Holliday & Speirs, 2011)

Klasifikasi Imunoprofil Contoh kultul sel (diadaptasi dari (Neve et al.,
2006; Prat et al., 2010))
Luminal A ER+, PR+/-, HER2- MCF-7, T47D, SUM185
Luminal B ER+, PR+/-, HER2+ BT474, ZR-75
Basal ER-, PR-, HER2- MBA-MB-468, SUM190
Claudin-low ER-, PR-, HER2- BT549, MDA-MB-231, Hs578T, SUM1315
HER2 ER-, PR-, HER2+ SKBR3, MDA-MB-453

Berdasarkan studi yang penelitian antikanker secara antibiotik-antimikotik yang

dilakukan Bertucci et al.
(2008) ditemukan bahwa
71% kanker payudara triple-
negative memiliki profil gen
mirip basal, sedangkan 29%
tidak memiliki profil gen
tersebut. Disamping itu
dilaporkan juga bahwa 71%
dari TNBC ditemukan seperti
basal, sementara 77% dari
kanker mirip basal bersifat
triple-negative (Bertucci et
al., 2008). Kultur sel kanker
payudara 4T1 dan MDA-MB-
231 merupakan jenis sel
yang sering digunakan
sebagai model untuk
pengujian in vitro, terutama
untuk kanker payudara
subtipe TNBC.
A1. Sel Kanker
Payudara 4T1
Salah satu model sel
kanker payudara yang paling
banyak digunakan dalam
in vitro adalah sel kanker
payudara 4T1(Gambar 1).
Gambar 1. Morfologi sel
kanker payudara 4T1
(Čunderlíková et al., 2011)
Sel kanker ini merupakan
jenis adherent continuous
cell line yang diisolasi dari
kelenjar mammae mencit
(Mus musculus) dari galur
BALB/cfC3H. Sel kanker
payudara 4T1 ini dapat
tumbuh dalam media
pertumbuhan DMEM
(Dulbecco’s Modified Eagle’s
Medium) dengan
penambahan 10% v/v Fetal
Bovine Serum (FBS) dan 1x
diencerkan dari stok 100x
(Pulaski & Ostrand‐
Rosenberg, 2000).
Berdasarkan Yerlikaya (1998)
sel 4T1 memiliki doubling
time 22,9 jam.
Sel 4T1 ini merupakan
salah satu model syngeneic
xenograft mouse terbaik
untuk studi perkembangan
kanker pada manusia
(Kuperwasser et al., 2004).
Syngeneic xenograft mouse
adalah pemodelan mencit
yang dimanfaatkan untuk
transplantasi jaringan tumor
dari spesies yang sama (Li et
al., 2019). Sel 4T1 sering
digunakan dalam penelitian
karena mempunyai
kemiripan karakteristik
dengan kanker payudara
manusia stadium lanjut atau
metastasis (Tao et al., 2008).
Beberapa karakteristik
dari sel 4T1 yang
membuatnya bisa digunakan

18

sebagai pemodelan kanker
payudara manusia yaitu
kemudahan transplantasi ke
dalam kelenjar payudara
sehingga sel tumor primer
tumbuh pada lokasi yang
sesuai secara anatomi dan
dapat secara secara spontan
bermetastasis dari tumor
primer sebagaimana terjadi
pada kanker payudara
manusia. Selain itu,
penyebaran 4T1 yang
progresif ke nodus limfa dan
organ lain sangat mirip
dengan karakteristik pada
kanker payudara manusia
(Pulaski et al., 2000a; Pulaski
et al., 2000b). Sel kanker
Sel MDA-MB-231 bersifat
sangat agresif, invasif, dan
digolongkan sebagai TNBC
(Chavez et al., 2011; Liu et
al., 2003). Seperti sel kanker
invasif lain, sifat invasif dari
sel ini dimediasi oleh
kemampuan degradasi
proteolitik dari matriks
ekstraseluler. Lebih lanjut,
sel MDA-MB-231 diketahui
payudara 4T1 bersifat
agresif, metastatik kuat, dan
imunogenik rendah, (Zwolak
et al., 2008). Sel 4T1 ini
memiliki kemampuan
metastasis yang tinggi ke
jaringan lainnya seperti
nodus limfa, darah, hati,
paru-paru, otak, dan tulang
(Lelekakis et al., 1999;
Pulaski & Ostrand-
Rosenberg, 1998; Kaur et al.,
2012). Beberapa gen yang
mengalami peningkatana
ekspresi dan turut
bertanggung jawab pada
tingkat keparahan kejadian
metastasis pada sel 4T1
antara lain adalah MMP-9,
memiliki kekurangan
ekspresi ER dan PR, begitu
pula dengan amplifikasi
HER2, sehingga dimasukkan
dalam subtipe basal. Namun,
sel ini juga diklasifikasikan
sebagai claudin-low
molecular subtype karena
mencirikan down-regulation
dari claudin-3 dan claudinin-
4, rendahnya ekspresi
19
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
Bmp1, Serpina3g, Serpine2,
Plau, MMP-3, MMP-13,
Agrn, dan Lama5 (Tao et al.,
2008).
A2. Sel Kanker Payudara
MDA-MB-231
Sel kanker payudara
MDA-MB-231 (Gambar 2)
adalah sel kultur mesenkimal
yang diisolasi dari efusi
pleura seorang wanita
Kaukasia berusia 51 tahun
dengan kanker payudara
yang mengalami metastasis
(Cailleau et al., 1978).
Gambar 2. Morfologi
sel kanker payudara
MDA-MB-231 (ATCC,
2020)
penanda proliferasi Ki-67,
peningkatan penanda
epithelial-mesenchymal
transition dan ekspresi
penanda yang berhubungan
dengan cancer stem cells
(CSCs) payudara, seperti
CD44+CD24-/low phenotype
(Holliday & Speirs, 2011).
Kultur tiga dimensi (3D)
sel MDA-MB-231

menunjukkan morfologi
seperti endotel (Harrell et
al., 2014) dengan fenotip
yang invasif karena memiliki
projeksi stellate yang
menjembatani beberapa
koloni sel (Kenny et al.,
2007). Sel MDA-MB-231 ini
telah digunakan dalam
penelitian kanker yang
mengalami metastasis ke
tulang (Simmons et al.,
2015). Subkloning sel MDA-
MB-231 yang diinjeksi secara
intraverikuler ke mencit yang
kemudian mengalami
metastasis ke tulang, otak,
dan paru-paru, telah
diisolasi. Hal ini menjadikan
sel MDA-MB-231 relevan
untuk digunakan dalam
identifikasi gen dan jalur
yang berpotensi menjadi
mediator dalam metastasis
ke tempat-tempat spesifik
tertentu (Bos et al., 2009;
Chavez et al., 2011; Kang et
al., 2003; Minn et al., 2005a;
Minn, et al., 2005b).
Sel MDA-MB-231 dapat
ditumbuhkan dalam media
Leibovitz’s L-15 dengan
suplementasi glutamin 2 mM
dan 15% fetal bovine serum
(FBS) di suhu 37°C. Media ini
bisa mendukung
pertumbuhan sel di
lingkungan tanpa adanya
penambahan gas CO2. Sel
MDA-MB-231 sebaiknya
ditumbuhkan dalam
kepadatan 1-3 x 104 sel/cm2
dan disubkultur ketika sudah
mencapai 70-80% konfluen
(ECACC, 2017).
B. Kanker payudara
overekspresi HER2
Human Epidermal
Growth Factor Receptor 2
(HER2) adalah
transmembran tirosin kinase
dari keluarga reseptor
Epidermal Growth Factor
(EGF) yang memiliki potensi
onkogenik. Bentuk homo-
dan heterodimer HER2
dengan anggota reseptor
EGF lain menyebabkan
fosforilasi dan aktivasi
domain intraseluler HER2
yang dapat mengaktifkan
jalur sinyaling yang
meregulasi pertumbuhan,
proliferasi, survival dan
migrasi sel yang merupakan
kunci dalam perkembangan
kanker (Chung & Lam, 2013).
Ekspresi HER2 pada sel-sel
kanker payudara positif
HER2 dapat mencapai 10 kali
lipat dibanding sel normal
(Wong & Hurvitz, 2014).
Selain itu, overekspresi HER2
pada sel kanker diketahui
berhubungan dengan
malignansi (keganasan)
berbagai macam kanker,
termasuk kanker payudara.
Kanker payudara
overekspresi HER2
merupakan bentuk penyakit
agresif yang secara signifikan
berhubungan dengan
buruknya prognosis (Ross et
al., 2009), resistensi
terhadap kemoterapi
(Yokoyama et al., 2006),
pendeknya tingkat
keselamatan dan tingginya
mortalitas pasien (Incorvati
et al., 2013; Mendes et al.,
20
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
2015). Sekitar 20% dari kasus
kanker payudara memiliki
karakteristik overekspresi
HER2 dan lebih dari separuh
pasien dengan karakteristik
tersebut resisten terhadap
terapi tertarget Trastuzumab
(Ab monoklonal, inhibitor
HER2) atau bahkan tidak
menunjukkan respon terapi
sama sekali (Sahlberg et al.,
2013).
Fakta tingginya
prevalensi kanker payudara
overekspresi HER2 dan
kecenderungan resistensi
terhadap terapi membuat
HER2 menjadi target
menarik dalam penelitian
dan pengembangan
obat/terapi tertarget. Dalam
hal ini, pemilihan jenis cell
line menjadi langkah awal
yang perlu dipertimbangkan
sebelum melakukan
penelitian in vitro.
Berdasarkan sumber gennya,
ekspresi gen HER2 pada sel
kultur payudara dibedakan
menjadi dua, yakni ekspresi
secara endogen dan eksogen
(hasil transfeksi gen HER2).
Berikut adalah beberapa
contoh sel kultur payudara
overekpresi HER2 yang
sering digunakan dalam
penelitian kanker.
B1. Sel Kanker Payudara
SKBR3
Sel kanker SKBR3 adalah
kultur sel yang diisolasi dari
efusi pleura seorang wanita
Kaukasia berusia 43 tahun
dengan kanker payudara
yang mengalami metastasis

(Neve et al., 2006). Sel
SKBR3 memiliki fenotip
seperti sel epitel dengan
karakteristik molekuler
berupa ekspresi gen untuk
ER dan PR yang rendah serta
HER2 yang tinggi (ER-, PR-,
HER2+). Karena tingginya
ekspresi HER2 secara
endogen pada SKBR3, sel ini
sering kali digunakan sebagai
kontrol positif dalam
Sel SKBR3 diketahui memiliki
kemampuan adaptasi yang
tinggi terhadap berbagai
macam media pertumbuhan.
Sel ini dapat tumbuh dalam
media pertumbuhan DMEM
(Dulbecco’s Modified Eagle’s
Medium) (Cognart et al.,
2020; Mota et al., 2017);
Roswell Park Memorial
Institute (RPMI) – 1640 (Prat
et al., 2013; Emlet et al.,
2006) dan McCoy's 5a (Liu et
al., 2015), masing-masing
dengan 10% Fetal Bovine
Serum (FBS). Berdasarkan
Cell Line Service (CLS) GmbH,
sel SKBR3 memiliki doubling
time sekitar 30 jam.
pengujian terkait ekspresi
dan amplifikasi gen HER2
(Emlet et al., 2006). HER2
dapat memediasi aktivasi
jalur sinyaling MAPK dan
PI3K/AKT yang berperan
penting dalam migrasi dan
survival sel (Merkhofer et al.,
2010).
Karakteristik
pertumbuhan SKBR3 dalam
sel kultur dua dimensi (2D)
Sel SKBR3 diketahui
memiliki kemampuan
metastatik yang tinggi.
Kemampuan metastasis sel
SKBR3 telah teruji
berdasarkan kemampuan
deformasinya, yaitu dengan
cara memberikan tekanan
mekanik melalui saluran
microfluidic sebagai analogi
pergerakan sel dalam aliran
darah (Cognart et al. 2020).
Selain itu, sel SKBR3 mampu
melakukan perubahan
morfologi yang dikenal
dengan istilah epithelial-to-
mesenchymal transition
(EMT). Kemampuan EMT
dari sel SKBR3 ini juga
sejalan dengan peningkatan
21
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
berupa lapisan lapis tunggal
(monolayer) yang adherent
atau menempel pada dasar
flask (Gambar 3), sedangkan
dalam kultur sel 3D bentuk
morfologinya seperti anggur
dengan sedikit kontak
antarsel (ATTC, 2020; Kenny
et al., 2007).
Gambar 3. Morfologi
sel kanker payudara
SKBR3 (ATCC, 2020)
kerusakan DNA serta
tingginya ekspresi gen-gen
regulator EMT, seperti E-
cadherin, Snail1, Twist2,
ZEB1 dan ZEB2 (Cognart et
al. 2020).
Prevalensi pasien dengan
kanker payudara
overekspresi HER2 yang
mengalami resistensi
terhadap terapi tertarget
dengan inhibitor HER2
seperti Trastuzumab
diketahui cukup tinggi
(Sahlberg et al., 2013). Oleh
karena itu, penggunaan sel
SKBR3 dapat bermanfaat
untuk menjelaskan
mekanisme resistensi
terhadap Trastuzumab serta

menemukan mekanisme
target terapi alternatif.
Selain HER2, beberapa
marka biologis protein
kanker payudara juga
mengalami overekspresi
pada sel SKBR3 dan
berpotensi sebagai target
terapi, antara lain
cyclooxgenase-2 (COX-2),
cytosolic phospholipase A2α
(cPLA2α) dan ribosomal
protein L19 (RPL19),
ADP/ATP carrier protein
(Wang et al., 2017; Chiorazzo
et al., 2019; Leirdal et al.,
2004).
Beberapa penelitian
telah melaporkan target
molekuler selain HER2 yang
dapat menghambat
pertumbuhan sel SKBR3.
Sebagai contoh, perlakuan
dengan inhibitor histone
deacetylase berupa valproic
acid (VPA) pada sel SKBR3
mampu menghambat
pertumbuhan sel, salah
satunya melalui induksi
apoptosis (Mawatari et al.
2015). Selain itu,
penghambatan
pertumbuhan sel kanker
overekspresi HER2 juga
dapat dilakukan dengan cara
co-silencing beberapa gen
non-onkogenik, seperti
STARD3, GRB7, PSMD3 dan
PERLD1, pada sel HER2
(Sahlberg et al., 2013).
B2. Sel Kanker Payudara
MCF7/HER2
Sel MCF-7 sudah
digunakan lebih dari 40
tahun dalam penelitian
kanker payudara. Kultur sel
tersebut diisolasi dari pasien
kanker payudara yang
mengalami metastasis ke
pleura (Comşa et al., 2015).
Sel MCF-7 termasuk dalam
subtipe kanker payudara
luminal A yang memiliki
karakteristik molekuler ER+,
PR+ dan HER2- (Kao et al.,
2009; Subik et al., 2010;
Mota et al., 2017).
Sedangkan sel MCF-7/HER2
merupakan hasil transfeksi
sel MCF-7 dengan gen HER2,
sehingga memiliki
karakteristik overekspresi
HER2. Transfektan MCF-
7/HER2 diperoleh dengan
melakukan transfeksi cDNA
HER2 ke dalam sel MCF-7
melalui plasmid pRK5 dan
diseleksi menggunakan gen
marker neomisin
fosfotransferase, yang
kemudian disebut sebagai
MCF-7/HER-18 (Benz et al.,
1992). Disamping itu, sel
MCF-7/HER2 yang secara
stabil memiliki kemampuan
overekspresi HER2 juga
diperoleh dengan melakukan
transfeksi gen HER2 pada sel
MCF-7/HER2 melalui plasmid
pcDNA5/TO-HER2 dengan
serangkaian seleksi antibiotik
higromisin (Zhao et al.,
2013).
Sel MCF-7/HER2
(Gambar 4) dapat tumbuh di
media pertumbuhan RPMI
1640 dengan 10% FBS dan
500 mg/ml geneticin (Emlet
et al., 2006) atau DMEM
dengan 10% FBS (Amalina et
al., 2017). Sel ini dilaporkan
22
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
memiliki laju pertumbuhan
yang lebih lambat
dibandingkan sel MCF-7
sebagai parentalnya (Huang
et al., 2002; Emlet et al.,
2006). Sel MCF-7/HER2 yang
diperoleh dari hasil
transfeksi tersebut
menambah koleksi cell lines
untuk model penelitian
kanker payudara yang
mengalami overekspresi
HER2.
Gambar 4. Morfologi sel
kanker payudara MCF-
7/HER2 (Amalina et al.,
2017)
Sampai saat ini ada
beberapa jenis penggunaan
sel MCF-7/HER sebagai
model dalam penelitian
kanker payudara, antara lain
untuk studi mekanisme
resistensi tamoksifen (Shou
et al., 2004), modulasi
apoptosis (Simeone et al.,
2003), dan strategi tertarget
HER2 menggunakan antibodi
monoklonal anti-HER2
terkonjugasi nanosfer (Lee et
al., 2009). Temuan lain yang
dihasilkan dari penelitian
menggunakan sel MCF-
7/HER2 disajikan pada Tabel
2.
 BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020

Tabel 2. Penggunaan sel MCF-7/HER2 sebagai model kanker payudara positif HER2
Referensi Temuan Penelitian
Adam et Stimulasi heregulin memicu interaksi fisik PAK1, aktin dan HER2 serta
al., 1998 interaksi ketiganya bergantung pada aktivasi PI-3 kinase.

Tari et al., HER2/neu menginduksi resistensi all-trans retinoic acid (ATRA) pada
2002 kanker payudara dengan memanfaatkan protein Grb2 dan Akt.

Zhao et Peningkatan level ekspresi aryl hydrocarbon receptor (AhR)

al., 2013 meningkatkan pembentukan mamosfer/struktur 3D sel MCF-7/HER2
dibandingkan sel parentalnya, MCF-7.

Liu et al., β2-AR memediasi cathecolamine melawan efek anti-proliferatif

2016 Trastuzumab secara in vitro.

Chung et Overekspresi HER2 menyebabkan deformasi membran sel dan secara

al., 2016 terus-menerus menggangu sifat-sifat sel epitelial dengan mengganggu
substrat dan kontak sel.

Overekspresi HER2 pada kanker payudara sangat regulates cytoskeletal

sel MCF-7 mengakibatkan
adanya peningkatan ekspresi
protein Bcl-2 (protein anti-
apoptosis) yang diketahui
dapat menstimulasi
resistensi sel kanker
terhadap agen kemoterapi
(Siddiqa et al., 2008).
Penelitian oleh Amalina et al
(2017) menunjukkan
perlakuan doksorubisin
dengan dosis rendah
terhadap sel MCF-7/HER2
memicu pembentukan
lamelipodia yang mengarah
pada migrasi dan malignansi
sel.
Penutup
Berdasarkan paparan di
atas, pemahaman
karakteristik biologi dan
molekuler model sel kultur
dalam pengujian in vitro
untuk pengembangan obat
penting. Karakteristik
molekuler berhubungan erat
dengan mekanisme aksi dan
target molekuler obat,
sehingga pemilihan model
sel kultur harus disesuaikan
dengan target molekuler
obat yang akan
dikembangkan. Oleh karena
itu, hasil penelitian
menggunakan dua model sel
kanker payudara masing-
masing untuk kanker
payudara triple-negative dan
HER2 positif yang telah
disebutkan di atas dapat
menjadi gambaran dalam
mendesain penelitian terkait
kedua subtipe kanker
payudara tersebut.
Daftar Pustaka
Adam, L., Vadlamudi, R.,
Kondapaka, S. B., Chernoff,
J., Mendelsohn, J., & Kumar,
R. (1998). Heregulin
reorganization and cell
migration through the p21-
activated kinase-1 via
phosphatidylinositol-3
kinase. Journal of Biological
Chemistry, 273(43), 28238–
28246.
Amalina DN, Nurhayati IP,
Meiyanto IP. (2017):
Doxorubicin Induces
Lamellipodia Formation and
Cell Migration. Indonesian
Journal of Cancer
Chemoprevention, 8(2): 61 -
67
ATCC. (2020). MDA-MB-231
(ATCC® HTB-26™).
https://www.atcc.org/produ
cts/all/htb-26.aspx.
ATCC. (2020). SK-BR-3 [SKBR3]
(ATCC® HTB-30™) .
https://www.atcc.org/products/al
l/htb-30.aspx#characteristics.
Alluri, P., & Newman, L. A.
(2014). Basal-Like and Triple-
Negative Breast Cancers.
Surgical Oncology Clinics of
North America, 23(3), 567–
577.

23

Badve, S., Dabbs, D. J., Schnitt,
S. J., Baehner, F. L., Decker,
T., Eusebi, V., Fox, S. B.,
Ichihara, S., Jacquemier, J.,
Lakhani, S. R., Palacios, J.,
Rakha, E. A., Richardson, A.
L., Schmitt, F. C., Tan, P.-H.,
Tse, G. M., Weigelt, B., Ellis,
I. O., & Reis-Filho, J. S.
(2011). Basal-like and triple-
negative breast cancers: A
critical review with an
emphasis on the
implications for pathologists
and oncologists. Modern
Pathology, 24(2), 157–167.
Benz, C. C., Scott, G. K., Sarup,
J. C., Johnson, R. M.,
Tripathy, D., Coronado, E.,
Shepard, H. M., & Osborne,
C. K. (1992). Estrogen-
dependent, tamoxifen-
resistant tumorigenic
growth of MCF-7 cells
transfected with HER2/neu.
Breast Cancer Research and
Treatment, 24(2), 85–95.
Bertucci, F., Finetti, P., Cervera,
N., Esterni, B., Hermitte, F.,
Viens, P., & Birnbaum, D.
(2008). How basal are triple-
negative breast cancers?
International Journal of
Cancer, 123(1), 236–240.
Bos, P. D., Zhang, X. H.-F.,
Nadal, C., Shu, W., Gomis, R.
R., Nguyen, D. X., Minn, A. J.,
van de Vijver, M. J., Gerald,
W. L., Foekens, J. A., &
Massagué, J. (2009). Genes
that mediate breast cancer
metastasis to the brain.
Nature, 459(7249), 1005–
1009.
Burdall, S. E., Hanby, A. M.,
Lansdown, M. R., & Speirs,
V. (2003). Breast cancer cell
lines: Friend or foe? Breast
Cancer Research, 5(2), 89.
Burness, M. L., Grushko, T. A.,
& Olopade, O. I. (2010).
Epidermal Growth Factor
Receptor in Triple-Negative
and Basal-Like Breast
Cancer: Promising Clinical
Target or Only a Marker?
The Cancer Journal, 16(1),
23–32.
Cailleau, R., Olivé, M., &
Cruciger, Q. V. J. (1978).
Long-term human breast
carcinoma cell lines of
metastatic origin:
Preliminary characterization.
In Vitro, 14(11), 911–915.
Chavez, K. J., Garimella, S. V., &
Lipkowitz, S. (2011). Triple
negative breast cancer cell
lines: One tool in the search
for better treatment of
triple negative breast
cancer. Breast Disease,
32(1–2), 35–48.
Chiorazzo, M.G., Tunset, H.M.,
Popov, A.V., Johansen, B.,
Moestue, S, Delikatny, E.J.
(2019): Detection and
Differentiation of Breast
Cancer Sub-Types Using a
cPLA2α Activatable
Fluorophore. Scientific
Report, 9:6122.
Chung C. dan Lam MSH. (2013):
Pertuzumab for The
Treatment of Human
Epidermal Growth Factor
Receptor Type 2-Positive
Metastatic Breast Cancer.
American Journal of Health-
System Pharmacy, 70: 1579–
1587.
Chung, I., Reichelt, M., Shao, L.,
Akita, R. W., Koeppen, H.,
Rangell, L., Schaefer, G.,
Mellman, I., & Sliwkowski,
M. X. (2016). High cell-
surface density of HER2
deforms cell membranes.
Nature Communications, 7,
12742.
Cognart HA, Viovy JL, Villard C.
(2020): Fluid Shear Stress
24
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
Coupled With Narrow
Constrictions Induce Cell
Type-Dependent
Morphological And
Molecular Changes In SK-BR-
3 And MDA-MB-231 Cells.
Scientific Report. 10:6386.
Comşa, Ş., Cimpean, A. M., &
Raica, M. (2015). The story
of MCF-7 breast cancer cell
line: 40 years of experience
in research. Anticancer
Research, 35(6), 3147–3154.
Čunderlíková, B., Vasovič, V.,
Sieber, F., Furre, T., Borgen,
E., Nesland, J. M., & Peng, Q.
(2011). Hexaminolevulinate-
mediated photodynamic
purging of marrow grafts
with murine breast
carcinoma. Bone Marrow
Transplantation, 46(8),
1118–1127.
ECACC. (2017). Cell line profile:
MDA-MB-231 (ECACC
catalogue no. 92020424).
https://www.phe-
culturecollections.org.uk/pr
oducts/celllines/generalcell/
detail.jsp?refId=92020424&c
ollection=ecacc_gc
Emlet DR, Schwartz R, Brown
KA , Pollice AA, Smith CA,
Shackney SE. (2006): HER2
Expression As A Potential
Marker for Response to
Therapy Targeted to The
EGFR. British Journal of
Cancer, 94: 1144–1153.
Goldhirsch, A., Wood, W. C.,
Coates, A. S., Gelber, R. D.,
Thürlimann, B., & Senn, H.-J.
(2011). Strategies for
subtypes—dealing with the
diversity of breast cancer:
Highlights of the St Gallen
International Expert
Consensus on the Primary
Therapy of Early Breast
Cancer 2011. Annals of
Oncology, 22(8), 1736–1747.

Harrell, J. C., Pfefferle, A. D.,
Zalles, N., Prat, A., Fan, C.,
Khramtsov, A., Olopade, O.
I., Troester, M. A., Dudley, A.
C., & Perou, C. M. (2014).
Endothelial-like properties
of claudin-low breast cancer
cells promote tumor
vascular permeability and
metastasis. Clinical &
Experimental Metastasis,
31(1), 33–45.
Holliday, D. L., & Speirs, V.
(2011). Choosing the right
cell line for breast cancer
research. Breast Cancer
Research, 13(4), 215.
Huang G, Hobbs S, Walton M,
Epstein R (2002) Dominant
Negative Knockout Of P53
Abolishes Erbb2-Dependent
Apoptosis And Permits
Growth Acceleration In
Human Breast Cancer Cells.
British Journal of Cancer 86:
1104 – 1109.
Incorvati, J. A., Shah, S., Mu, Y.,
& Lu, J. (2013). Targeted
therapy for HER2 positive
breast cancer. Journal of
Hematology & Oncology,
6(1), 38.
Kang, Y., Siegel, P. M., Shu, W.,
Drobnjak, M., Kakonen, S.
M., Cordón-Cardo, C., Guise,
T. A., & Massagué, J. (2003).
A multigenic program
mediating breast cancer
metastasis to bone. Cancer
Cell, 3(6), 537–549.
Kao, J., Salari, K., Bocanegra,
M., Choi, Y.-L., Girard, L.,
Gandhi, J., Kwei, K. A.,
Hernandez-Boussard, T.,
Wang, P., Gazdar, A. F.,
Minna, J. D., & Pollack, J. R.
(2009). Molecular Profiling
of Breast Cancer Cell Lines
Defines Relevant Tumor
Models and Provides a
Resource for Cancer Gene
Discovery. PLoS ONE, 4(7),
e6146.
Kaur, P., Nagaraja, G. M.,
Zheng, H., Gizachew, D.,
Galukande, M., Krishnan, S.,
& Asea, A. (2012). A mouse
model for triple-negative
breast cancer tumor-
initiating cells (TNBC-TICs)
exhibits similar aggressive
phenotype to the human
disease. BMC Cancer, 12(1),
120.
Kenny, P. A., Lee, G. Y., Myers,
C. A., Neve, R. M., Semeiks,
J. R., Spellman, P. T., Lorenz,
K., Lee, E. H., Barcellos-Hoff,
M. H., Petersen, O. W., Gray,
J. W., & Bissell, M. J. (2007).
The morphologies of breast
cancer cell lines in three-
dimensional assays correlate
with their profiles of gene
expression. Molecular
Oncology, 1(1), 84–96.
Kumar, R., Mandal, M., Lipton,
A., Harvey, H., & Thompson,
C. B. (1996). Overexpression
of HER2 modulates bcl-2,
bcl-XL, and tamoxifen-
induced apoptosis in human
MCF-7 breast cancer cells.
Clinical Cancer Research,
2(7), 1215–1219.
Kuperwasser, C., Chavarria, T.,
Wu, M., Magrane, G., Gray,
J. W., Carey, L., Richardson,
A., & Weinberg, R. A. (2004).
From The Cover:
Reconstruction of
functionally normal and
malignant human breast
tissues in mice. Proceedings
of the National Academy of
Sciences, 101(14), 4966–
4971.
Lee, S., Chon, H., Lee, M., Choo,
J., Shin, S. Y., Lee, Y. H., Son,
S. W., & Oh, C. H. (2009).
Surface-enhanced Raman
scattering imaging of HER2
25
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
cancer markers
overexpressed in single
MCF7 cells using antibody
conjugated hollow gold
nanospheres. Biosensors
and Bioelectronics, 24(7),
2260–2263.
Leirdal M, Shadidy M, Røsok O,
Sioud M. (2004):
Identification Of Genes
Differentially Expressed In
Breast Cancer Cell Line
SKBR3: Potential
Identification Of New
Prognostic Biomarkers.
International Journal of
Molecular Medicine, 14 (2):
217-222.
Lelekakis, M., Moseley, J. M.,
Martin, T. J., Hards, D.,
Williams, E., Ho, P., Lowen,
D., Javni, J., Miller, F. R.,
Slavin, J., & Anderson, R. L.
(1999). A novel orthotopic
model of breast cancer
metastasis to bone. Clinical
& Experimental Metastasis,
17(2), 163–170.
Li, E., Lin, L., Chen, C.-W., & Ou,
D.-L. (2019). Mouse Models
for Immunotherapy in
Hepatocellular Carcinoma.
Cancers, 11(11), 1800.
Liu, D., Yang, Z., Wang, T.,
Chen, H., Hu, Y., Hu, C., Guo,
L., Deng, Q., Liu, Y., & Yu, M.
(2016). Β2-AR signaling
controls trastuzumab
resistance-dependent
pathway. Oncogene, 35(1),
47.
Liu, H., Zang, C., Fenner, M. H.,
Possinger, K., & Elstner, E.
(2003). PPARγ Ligands and
ATRA Inhibit the Invasion of
Human Breast Cancer Cells
in vitro. Breast Cancer
Research and Treatment,
79(1), 63–74.
Mawatari T, Ninomiya I,
Inokuchi M, Harada S,

Hayash H, et al. (2015):
Valproic Acid Inhibits
Proliferation Of HER2-
Expressing Breast Cancer
Cells By Inducing Cell Cycle
Arrest And Apoptosis
Through Hsp70 Acetylation.
International Journal Of
Oncology 47: 2073-2081
Mendes, D., Alves, C., Afonso,
N., Cardoso, F., Passos-
Coelho, J. L., Costa, L.,
Andrade, S., & Batel-
Marques, F. (2015). The
benefit of HER2-targeted
therapies on overall survival
of patients with metastatic
HER2-positive breast cancer
– a systematic review.
Breast Cancer Research,
17(1).
Merkhofer EC, Cogswell P,
Baldwin AS (2010) Her2
activates NF-kappaB and
induces invasion through
the canonical pathway
involving IKK alpha.
Oncogene 29: 1238–1248
Minn, A. J., Gupta, G. P., Siegel,
P. M., Bos, P. D., Shu, W.,
Giri, D. D., Viale, A., Olshen,
A. B., Gerald, W. L., &
Massagué, J. (2005a). Genes
that mediate breast cancer
metastasis to lung. Nature,
436(7050), 518–524.
Minn, A. J., Kang, Y., Serganova,
I., Gupta, G. P., Giri, D. D.,
Doubrovin, M., Ponomarev,
V., Gerald, W. L., Blasberg,
R., & Massagué, J. (2005b).
Distinct organ-specific
metastatic potential of
individual breast cancer cells
and primary tumors. Journal
of Clinical Investigation,
115(1), 44–55.
Mota, A. de L., Evangelista, A.
F., Macedo, T., Oliveira, R.,
Scapulatempo-Neto, C.,
Vieira, R. A. da C., &
Marques, M. M. C. (2017).
Molecular characterization
of breast cancer cell lines by
clinical
immunohistochemical
markers. Oncology Letters,
13(6), 4708–4712.
Neve, R. M., Chin, K., Fridlyand,
J., Yeh, J., Baehner, F. L.,
Fevr, T., Clark, L., Bayani, N.,
Coppe, J.-P., Tong, F., Speed,
T., Spellman, P. T., DeVries,
S., Lapuk, A., Wang, N. J.,
Kuo, W.-L., Stilwell, J. L.,
Pinkel, D., Albertson, D. G.,
Gray, J. W. (2006). A
collection of breast cancer
cell lines for the study of
functionally distinct cancer
subtypes. Cancer Cell, 10(6),
515–527.
Perou, C. M., Jeffrey, S. S., van
de Rijn, M., Rees, C. A.,
Eisen, M. B., Ross, D. T.,
Pergamenschikov, A.,
Williams, C. F., Zhu, S. X.,
Lee, J. C. F., Lashkari, D.,
Shalon, D., Brown, P. O., &
Botstein, D. (1999).
Distinctive gene expression
patterns in human
mammary epithelial cells
and breast cancers.
Proceedings of the National
Academy of Sciences, 96(16),
9212–9217.
Perou, Charles M., Sørlie, T.,
Eisen, M. B., van de Rijn, M.,
Jeffrey, S. S., Rees, C. A.,
Pollack, J. R., Ross, D. T.,
Johnsen, H., Akslen, L. A.,
Fluge, Ø., Pergamenschikov,
A., Williams, C., Zhu, S. X.,
Lønning, P. E., Børresen-
Dale, A.-L., Brown, P. O., &
Botstein, D. (2000).
Molecular portraits of
human breast tumours.
Nature, 406(6797), 747–752.
Prat, A., Parker, J. S., Karginova,
O., Fan, C., Livasy, C.,
26
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
Herschkowitz, J. I., He, X., &
Perou, C. M. (2010).
Phenotypic and molecular
characterization of the
claudin-low intrinsic subtype
of breast cancer. Breast
Cancer Research, 12(5), R68.
Pulaski, B. A., Clements, V. K.,
Pipeling, M. R., & Ostrand-
Rosenberg, S. (2000a).
Immunotherapy with
vaccines combining MHC
class II/CD80 + tumor cells
with interleukin-12 reduces
established metastatic
disease and stimulates
immune effectors and
monokine induced by
interferon γ. Cancer
Immunology,
Immunotherapy, 49(1), 34–
45.
Pulaski, B. A., & Ostrand-
Rosenberg, S. (1998).
Reduction of Established
Spontaneous Mammary
Carcinoma Metastases
following Immunotherapy
with Major
Histocompatibility Complex
Class II and B7.1 Cell-based
Tumor Vaccines. Cancer
Research, 58(7), 1486–1493.
Pulaski, B. A., & Ostrand‐
Rosenberg, S. (2000). Mouse
4T1 Breast Tumor Model.
Current Protocols in
Immunology, 39(1).
https://doi.org/10.1002/047
1142735.im2002s39
Pulaski, B. A., Terman, D. S.,
Khan, S., Muller, E., &
Ostrand-Rosenberg, S.
(2000b). Cooperativity of
Staphylococcal aureus
Enterotoxin B Superantigen,
Major Histocompatibility
Complex Class II, and CD80
for Immunotherapy of
Advanced Spontaneous
Metastases in a Clinically

Relevant Postoperative
Mouse Breast Cancer
Model. Cancer Research,
60(10), 2710–2715.
Rahmawati, Y., Setyawati, Y.,
Widodo, I., Ghozali, A., &
Purnomosari, D. (2018).
Molecular Subtypes of
Indonesian Breast
Carcinomas—Lack of
Association with Patient Age
and Tumor Size. Asian
Pacific Journal of Cancer
Prevention, 199(1), 161–166.
Ross, J. S., Slodkowska, E. A.,
Symmans, W. F., Pusztai, L.,
Ravdin, P. M., & Hortobagyi,
G. N. (2009). The HER-2
Receptor and Breast Cancer:
Ten Years of Targeted Anti-
HER-2 Therapy and
Personalized Medicine. The
Oncologist, 14(4), 320–368.
Sahlberg KK, Hongisto V,
Edgren H, Makela R,
Hellstrom K, Due EU. et al.
2013. The HER2 Amplicon
Includes Several Genes
Required for The Growth
and Survival of HER2
Positive Breast Cancer Cells.
Molecular Oncology, 7: 392-
401.
Seal, M. D., & Chia, S. K. (2010).
What Is the Difference
Between Triple-Negative
and Basal Breast Cancers?
The Cancer Journal, 16(1),
12–16.
Shou, J., Massarweh, S.,
Osborne, C. K., Wakeling, A.
E., Ali, S., Weiss, H., & Schiff,
R. (2004). Mechanisms of
Tamoxifen Resistance:
Increased Estrogen
Receptor-HER2/neu Cross-
Talk in ER/HER2-Positive
Breast Cancer. JNCI Journal
of the National Cancer
Institute, 96(12), 926–935.
Siddiqa A, Long LM, Li L,
Marciniak RA, Kazhdan I.
(2008): Expression of HER-2
in MCF-7 Breast Cancer Cells
Modulates Anti-Apoptotic
Proteins Survivin And Bcl-2
Via The Extracellular Signal-
Related Kinase (ERK) and
Phosphoinositide-3 Kinase
(PI3K) Signalling Pathways.
BMC Cancer, 8:129.
Simeone, A.-M., Broemeling, L.
D., Rosenblum, J., & Tari, A.
M. (2003). HER2/neu
reduces the apoptotic
effects of N-(4-
hydroxyphenyl)retinamide
(4-HPR) in breast cancer
cells by decreasing nitric
oxide production. Oncogene,
22(43), 6739–6747.
Simmons, J. K., Hildreth, B. E.,
Supsavhad, W., Elshafae, S.
M., Hassan, B. B., Dirksen,
W. P., Toribio, R. E., & Rosol,
T. J. (2015). Animal Models
of Bone Metastasis.
Veterinary Pathology, 52(5),
827–841.
Subik, K., Lee, J.-F., Baxter, L.,
Strzepek, T., Costello, D.,
Crowley, P., Xing, L., Hung,
M.-C., Bonfiglio, T., & Hicks,
D. G. (2010). The expression
patterns of ER, PR, HER2,
CK5/6, EGFR, Ki-67 and AR
by immunohistochemical
analysis in breast cancer cell
lines. Breast Cancer: Basic
and Clinical Research, 4,
117822341000400000.
Tao, K., Fang, M., Alroy, J., &
Sahagian, G. G. (2008).
Imagable 4T1 model for the
study of late stage breast
cancer. BMC Cancer, 8(1),
228.
Tari, A. M., Lim, S.-J., Hung, M.-
C., Esteva, F. J., & Lopez-
Berestein, G. (2002).
Her2/neu induces all-
27
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
transretinoic acid (ATRA)
resistance in breast cancer
cells. Oncogene, 21(34),
5224.
Toft, D. J., & Cryns, V. L. (2011).
Minireview: Basal-Like
Breast Cancer: From
Molecular Profiles to
Targeted Therapies.
Molecular Endocrinology,
25(2), 199–211.
Wang G, Li J, Zhang L, Huang S,
Zhao X, Zhao X. (2017):
Celecoxib Induced Apoptosis
Against Different Breast
Cancer Cell Lines By Down-
Regulated Wong, D. J., &
Hurvitz, S. A. (2014). Recent
advances in the
development of anti-HER2
antibodies and antibody-
drug conjugates. Annals of
Translational Medicine,
2(12).
Wong, D.J. dan Hurvitz, S.A.,
2014. Recent Advances in
The Development of Anti-
HER2 Antibodies and
Antibody-Drug Conjugates.
Annals of translational
medicine, 2:
WHO. (2020). Cancer: Breast
Cancer.
https://www.who.int/cancer
/prevention/diagnosis-
screening/breast-cancer/en/
Yerlikaya. (1998). Differential
sensitivity of breast cancer
and melanoma cells to
proteasome inhibitor
Velcade. International
Journal of Molecular
Medicine.
Yokoyama, H., Ikehara, Y.,
Kodera, Y., Ikehara, S.,
Yatabe, Y., Mochizuki, Y.,
Koike, M., Fujiwara, M.,
Nakao, A., & Tatematsu, M.
(2006). Molecular basis for
sensitivity and acquired
resistance to gefitinib in

HER2-overexpressing human
gastric cancer cell lines
derived from liver
metastasis. British Journal of
Cancer, 95(11), 1504.
Zhao, S., Ohara, S., Kanno, Y.,
Midorikawa, Y., Nakayama,
M., Makimura, M., Park, Y.,
& Inouye, Y. (2013). HER2
overexpression-mediated
inflammatory signaling
enhances mammosphere
formation through up-
regulation of aryl
hydrocarbon receptor
transcription. Cancer Letters,
330(1), 41–48.
Zwolak, P., Jasinski, P., Terai, K.,
Gallus, N. J., Ericson, M. E.,
Clohisy, D. R., & Dudek, A. Z.
28
BioTrends Vol.11 No.2 Tahun 2020
(2008). Addition of receptor
tyrosine kinase inhibitor to
radiation increases tumour
control in an orthotopic
murine model of breast
cancer metastasis in bone.
European Journal of Cancer,
44(16), 2506–2517.