JURNAL

PRAKTIKUM KIMIA ANALISIS INSTRUMEN

JUDUL PERCOBAAN 1

( PENENTUAN PANJANG GELOMBANG MAKSIMUM MENGGUNAKAN

SPEKTROFOTOMETER UV-VIS )

Oleh:

Nama : Putri Romasih Simbolon Tgl Praktikum :

NIM : F1061211043 Dikumpulkan Tgl :
Prodi : Pendidikan Kimia Diterima Oleh :
Kelompok :3 Dikoreksi Tgl :
Nilai : Asisten
a. Disiplin :

b. Sistematika :

c. Isi :

Total : ( )

LABORATORIUM KIMIA
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA
JURUSAN PENDIDIKAN MIPA
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS TANJUNG PURA
2023
 PERCOBAAN 1
PENENTUAN PANJANG GELOMBANG MAKSIMUM MENGGUNAKAN
SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

A. DASAR TEORI
Panjang gelombang maksimum adalah panjang gelombang di mana eksitasi
elektronik terjadi, sehingga memberikan serapan maksimum. Pengukuran dilakukan
pada panjang gelombang maksimum karena pada panjang gelombang maksimum
perubahan serapan per satuan konsentrasi paling besar sehingga menghasilkan
sensitivitas analisis yang paling tinggi. Spektrofotometer tampak (UV-VIS) adalah
pengukuran energi cahaya suatu sistem pada panjang gelombang tertentu.
Spektrofotometer UV Vis digunakan untuk mempelajari sifat serapan bahan pada
rentang panjang gelombang radiasi ultraviolet (±200 nm), termasuk semua panjang
gelombang cahaya tampak (hingga ±700 nm). Spektrum UV-VIS sangat berguna
untuk mengukur konsentrasi. Pengukuran konsentrasi suatu larutan dapat ditentukan
dengan mengukur serapan pada panjang gelombang tertentu (Asiska, 2019).
Spektrofotometer harus dikalibrasi sebelum digunakan. Penting untuk
diklarifikasi bahwa instrumen yang dikalibrasi belum tentu dapat digunakan, namun
merupakan perangkat yang deviasinya ditentukan. Kalibrasi sendiri mengacu pada
pekerjaan dalam kondisi tertentu yang menentukan hubungan antara nilai besar dan
ketidakpastian yang diberikan oleh standar pengukuran, serta pembacaan yang sesuai
dari ketidakpastian yang sesuai . Adanya komponen zat warna dalam suatu larutan
menentukan pada panjang gelombang manakah larutan zat warna tersebut dapat
menghasilkan puncak gelombang serapan (Asiska, 2019). Penyerapan terjadi ketika
foton yang masuk bertabrakan langsung dengan atom-atom material dan mentransfer
energinya ke elektron-elektron atom. Foton-foton tersebut melambat dan kemudian
berhenti sehingga menyebabkan pancaran cahaya pada material menjadi lebih kecil
dibandingkan saat masuk ke dalam material.
Penyerapan energi cahaya dapat menyebabkan elektron tereksitasi ke tingkat
energi yang lebih tinggi jika energi yang diserap lebih besar dari tingkat energi
elektron (Mardiana, dkk. 2015). Spektrofotometer UV-VIS adalah salah satu metode
instrumental yang paling banyak digunakan dalam analisis kimia untuk mendeteksi
senyawa (padat/cair) berdasarkan serapan foton. Agar sampel dapat menyerap foton
pada rentang UV-VIS (panjang gelombang foton 200 nm-700 nm), biasanya sampel
harus diolah atau diderivatisasi, seperti menambahkan reagen untuk membentuk
garam kompleks, dll. Unsur diidentifikasi berdasarkan senyawa kompleksnya.
Spektrofotometer UV-VIS merupakan alat yang paling penting sehingga harus
dikalibrasi. Kalibrasi instrumen spektrofotometer meliputi: ketelitian panjang
gelombang, ketelitian fotometrik, resolusi, fluks cahaya nyasar, kestabilan garis dasar,
kerataan garis dasar, dan ketelitian detektor. Kalibrasi menentukan selisih (deviasi)
dan (perkiraan) nilai riil antara nilai alat ukur dengan bahan ukur (standar). Tujuan
kalibrasi spektrofotometer adalah untuk mengetahui nilai selisih pembacaan alat
dengan membandingkan nilai standar untuk menjamin kebenaran dan keakuratan data
(Mardiana, dkk. 2015).
Prinsip kerja spektrometer secara singkat adalah sebagai berikut: larutan
pembanding, misalnya sampel kosong, ditempatkan pada sel pertama, sedangkan
larutan yang akan dianalisis ditempatkan pada sel kedua. Kemudian pilih fotosel yang
sesuai 200-650 nm (650-1100 nm) untuk mencakup rentang λ yang diperlukan dengan
ruang fotosel ditutup dengan galvanometer tombol arus gelap "nol". Pilih apa yang
Anda inginkan, bukan mata fotografis, dan arahkan berkas cahaya ke benda kerja, dan
"nol" galvanometer diperoleh dengan memutar tombol sensitif. Gunakan tombol lulus
lalu atur ukurannya menjadi 100%. Arahkan berkas cahaya melalui larutan sampel
yang akan dianalisis. Skala serapan menunjukkan serapan larutan uji (Vogel Svela, G.
1985). Perubahan warna mencerminkan perubahan serapan cahaya larutan setelah
terjadi perubahan konsentrasi zat penyerap. Titrasi visual sebenarnya menggunakan
semua aspek titrasi fotometrik otomatis, cahaya dilewatkan melalui larutan ke dalam
mata, yang merupakan sensor fotosensitif yang merespons isyarat dan cocok untuk
arus elektromekanis. sistem suspense. Titik akhir kemudian ditempatkan sedemikian
rupa sehingga perpotongan garis yang diekstrapolasi ditarik melalui titik-titik yang
diambil secukupnya sebelum dan sesudah bagian lingkaran. Kurva titrasi seperti itu
mudah untuk dihitung, cukup hitung konsentrasi penyerap pada titik mana pun
menggunakan konstanta kesetimbangan reaksi, kemudian hitung kontribusi masing-
masing spesies terhadap serapan larutan menurut Hukum Beer (Underwood). , 1981).
B. METODOLOGI PERCOBAAN

1. Alat dan Bahan

 Alat
No Nama Alat Ukuran Jumlah
1. Spektrofotometer UV-Vis Standar 1 Buah
2. Kuvet Standar 2 Buah
3. Labu Ukur 50 mL 1 Buah
4. Neraca Analitik Standar 1 Buah
5. Kaca Arloji Standar 1 Buah
6. Pipet Tetes Standar 2 Buah

 Bahan
No Nama Bahan Konsentrasi Jumlah
1. Quercetin - 5 mg
2. Methanol PA - 50 mL

2. Skema Kerja
A. Membuat larutan induk queretin 100 ppm dan aliquot

Quercetin

Ditimbang 5 mg queretin
menggunakan neraca analitik

Didapat quercetin
sebanyak 5 mg

Dilarutkan 5 mg quercetin kedalam

50 mL methanol dalam labu ukur
hingga tanda batas

Quercetin telah larut

dalam methanol
B. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

Spektrofotometer UV
Visible

Dinyalakan alat spektrofotometer

UV Visible

Alat Spektrofotometer telah

menyala

Ditunggu sampai proses warming

up selesai hingga dialat
spektrofotometri UV Visible
menunjukkan tulisan ready

Proses warming up telah selesai dan

menunjukkan tulisan ready pada
spektrofotometer UV Visible

Dinyalakan PC yang akan

dihubungkan dengan alat
spektrofotometer UV Visible

PC telah menyala dan siap dihubungkan

dengan alat Spektrofotometer UV Visible

Dihubungkan dengan PC dengan

menekan “ PC Connector “

PC telah terhubung dengan

Spektrofotometri UV Visible

Dibuka program aplikasi

Spektrofotometri UV Visible
yang terinstal di PC
Program aplikasi Spektrofotometri UV
Visible telah terbuka

Dipilih “connecting” pada program

aplikasi, tunggu hingga koneksi
selesai sehingga alat spektrofotometri
UV Visible dan perangkat
pendukungnya siap digunakan

Program aplikasi dan alat spektrofotometri

telah terhubung

Diisi dua buah kuvet dengan larutan

blanko (methanol) dan dibersihkan
permukaan luar kuvet menggunakan
tisu

Dua buah kuvet telah berisi larutan blanko

(methanol) dan telah dibersihkan
permukaannya

Dimasukan kuvet ke dalam sel blanko

dan sel sampel

Kuvet telah berada di dalam sel blanko dan

sel sampel

Dilakukan “baseline” pada aplikasi

Proses baseline sudah selesai

Diambil kuvet pada sel sampel dan

digantikan dengan Quercetin

Kuvet telah digantikan dengan Quercetin

Dibersihkan permukaan luar kuvet

dengan tisu
 Permukaan luar kuvet telah bersih

Dimasukan kembali kuvet

kedalam sampel

Kuvet berada dalam sampel

Ditentukan panjang gelombang

maksimum Quercetin ( literature
maks = 380 nm ) pada absorbansi
tertinggi

Panjang gelombang telah ditentukan

 DAFTAR PUSTAKA

Asiska Permata Dewi, PENETAPAN KADAR VITAMIN C DENGAN

SPEKTROFOTOMETRI UV-Vis PADA BERBAGAI VARIASI BUAH
TOMAT , JOPS (Journal Of Pharmacy and Science): Vol 2 No 1 (2019):
Journal Of Pharmacy and Science

Mardiana Prasetyani Putri, Yunita Herwidiani Setiawati, ANALISIS KADAR VITAMIN C

PADA BUAH NANAS SEGAR (Ananas comosus (L.) Merr) dan BUAH
NANAS KALENG DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS,
Jurnal Wiyata Penelitian Sains & Kesehatan : Vol 2 No 1 (2015)

Underwood, A.L and R.A Day,Jr.1981. Analisa Kimia Kuantitatif. Erlangga : Jakarta.

Vogel. 1985. ”Teks Analisis Anorganik Kualitatif Makro dan Semimikro”. edisi ke lima”.
Kalman Media Pustaka. Jakarta