Laporan Praktikum Mikrobiologi Akuatik - Kelompok G - Kelas B - Akuakultur

LAPORAN PRAKTIKUM
MIKROBIOLOGI AKUATIK
Disusun Oleh:
KELOMPOK G
AKUAKULTUR B
Adil Fatwa S L1B021014

Intan Adelia L1B021028
Rena Wulandari L1B021036
Via Angelica S L1B021074
Tania Isma W L1B021094
Asisten:
Deandra Aurel Azeli
PROGRAM STUDI AKUAKUKULTUR
FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
PURWOKERTO
2022
i
DAFTAR ISI
Cover .............................................................................................................................. i
Daftar Isi ........................................................................................................................ ii
Cover Acara 1 ................................................................................................ 1
I. Pendahuluan ..................................................................................................... 2
1.1. Latar Belakang ........................................................................................ 2
1.2. Tujuan ....................................................................................................... 4
II. Materi dan Metode........................................................................................... 5
2.1. Materi ....................................................................................................... 5
2.2. Metode...................................................................................................... 5
III. Hasil dan Pembahasan .................................................................................... 7
3.1. Hasil .......................................................................................................... 7
3.2. Pembahasan ............................................................................................. 13
IV. Kesimpulan dan Saran .................................................................................... 31
4.1. Kesimpulan .............................................................................................. 31
4.2. Saran ......................................................................................................... 31
Daftar Pustaka ......................................................................................................... 32
Cover Acara 2 ............................................................................................................... 33
I. Pendahuluan ..................................................................................................... 34
1.1. Latar Belakang ........................................................................................ 34
1.2. Tujuan ....................................................................................................... 36
2.1. Materi ....................................................................................................... 37
2.2. Metode...................................................................................................... 37
3.1. Hasil .......................................................................................................... 39
3.2. Pembahasan ............................................................................................. 41
4.1. Kesimpulan .............................................................................................. 56
4.2. Saran ......................................................................................................... 56
Daftar Pustaka ......................................................................................................... 57
ii
Cover Acara 3 ............................................................................................................... 58
I. Pendahuluan ..................................................................................................... 59
1.1. Latar Belakang ........................................................................................ 59
1.2. Tujuan ....................................................................................................... 61
2.1. Materi ....................................................................................................... 62
2.2. Metode...................................................................................................... 62
3.1. Hasil ..................................................................................................... 64
3.2. Pembahasan ............................................................................................. 74
4.1. Kesimpulan .............................................................................................. 80
4.2. Saran ......................................................................................................... 81
Daftar Pustaka ......................................................................................................... 82
Cover Acara 4 ............................................................................................................... 84
I. Pendahuluan ..................................................................................................... 85
1.1. Latar Belakang ........................................................................................ 85
1.2. Tujuan ....................................................................................................... 89
2.1. Materi ....................................................................................................... 90
2.2. Metode...................................................................................................... 90
3.1. Hasil .......................................................................................................... 93
3.2. Pembahasan ............................................................................................. 93
4.1. Kesimpulan .............................................................................................. 97
4.2. Saran ......................................................................................................... 97
Daftar Pustaka........................................................................................................ 98
Tabel Kinerja Kelompok........................................................................................99
iii
ACARA I
PENGENALAN DAN PERSIAPAN ALAT
DISUSUN OLEH:
KELOMPOK G
AKUAKULTUR B
Adil Fatwa S L1B021014
Via Angellica S L1B021074
Tania Isma W L1B021094
Asisten
Deandra Aurel
PROGRAM STUDI AKUAKULTUR
PURWOKERTO
2022
1
I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari tentang mikroorganisme
yang tidak dapat dilihat dengan mata telanjang untuk meneliti apa saja yang
terkandung di dalam mikroorganisme. Dalam meneliti mikroorganisme
diperlukan teknik atau cara–cara khusus untuk mempelajarinya serta untuk
bekerja pada skala laboratorium untuk meneliti mikroorganisme baik sifat
maupun karakteristiknya, tentu diperlukan adanya pengenalan alat yang akan
digunakan serta mengetahui cara penggunaan alat – alat yang berhubungan
dengan penelitian unutk memudahkan dalam melakukan penelitian
(Dwidjoseputro, 2003).
Alat – alat yang digunakan dalam penelitian harus dalam keadaan steril
atau bebas dari kuman, bakteri, virus dan jamur. Perlu adanya pengetahuan
tentang cara–cara atau teknik sterilisasi. Hal ini dilakukan karena alat – alat
yang digunakan memiliki teknik sterilisasi yang berbeda (Dwidjoseputro,
2003).
Terdapat 5 teknik dasar bekerja di laboratorium mikrobiologi yang
penting untuk dipahami, anatara lain inokulasi, isolasi, inkubasi, eksaminasi,
dan identifikasi. Inokulasi disebut juga dengan menanam mikroorganisme
seperti bakteri dan jamur pada suatu medium pertumbuhan. Secara definitif
penanaman mikroba adalah suatu pekerjaan memindahkan mikroba dari
media lama ke media baru dengan tingkat ketelitian yang tinggi dan terlebih
2
dahulu diusahakan agar semua alat yang berhubungan dengan media agar
tetap steril, hal ini untuk menghindari terjadinya kontaminasi (Dwidjoseputro,
2002). Inokulasi dilakukan dengan beberapa metode yaitu goresan atau streak
menggunakan jarum ose, metode tuang atau pour plate, dan metode sebar
spread plate. Isolasi merupakan kegiatan memisahkan mikroorganime dari
campurannya (koloni) untuk diperoleh kultur murni (Sudjadi, 2006). Kultur
murni adalah mikroorganisme yang terdiri dari satu spesies dengan karakter
sama. Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan atau memindahkan
mikroba tertentu dari lingkungannya di alam dan menumbuhkannya di media
buatan sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni (Mikdarullah,
2017). Inkubasi adalah proses pertumbuhan biakan bakteri atau perbanyakan
biakan bakteri dengan menyediakan keadaan lingkungan yang sesuai (Javetz,
et al., 1990). Inkubasi dilakukan menyesuaikan dengan habitat asli
mikroorganisme saat dilakukan isolasi. Keadaan lingkungan yang perlu
diperhatikan saat melakukan inkubasi diantaranya suhu, pH, salinitas,
konsentrasi oksigen dll. Eksaminasi merupakan teknik dasar yang meliputi
pengujian dan pengamatan kultur mikroorganisme yang telah dimurnikan
(Irianto, et al., 2012). Eksaminasi juga disebut pengujian untuk mengetahui ciri-
ciri dan sifat-sifat mikroorganisme. Identifikasi merupakan kegiatan untuk
mengenali dan mendeterminasi suatu biakan murni bakteri hasil isolasi.
Identifikasi dilakukan diawali dengan mengamati sifat-sifat morfologi, fisiologi
dan genetika (Murray, 2005). Output identifikasi adalah untuk menentukan
3
nama suatu spesies dengan membandingkan data penelitian yang telah
dilakukan sebelumnya atau melalui buku kunci determinasi.
1.2. Tujuan
1. Mengenal alat-alat dalam teknik dasar mikrobiologi dan cara
penggunaannya.
2. Mengetahui cara mempersiapkan alat-alat yang digunakan dalam
teknik dasar mikrobiologi.
4
II. MATERI DAN METODE
2.1. Materi
2.1.1. Alat
Alat yang digunakan pada praktikum acara ini adalah autoclave, kawat
ose, spreader atau hockey stick, petri dish, tabung reaksi, pinset atau forcep,
mikropipet, lampu Bunsen, incubator, mikroskop, oven, vortex, erlenmeyer,
gelas ukur, mikro pestle, timbangan digital, kompor listrik, spatula, sentrifuge,
dan objek glass atau cover glass.
2.2. Metode
2.2.1. Cara kerja
Perhatikan setiap alat yang disediakan. Kemudian, gunakan jarum ose,
petridish, tabung reaksi, dan lampu bunsen. Lalu, bungkus petridish dengan
kertas payung sesuai cara yang akan ditunjukkan asisten. Kemudian,
Masukkan petridish pada autoclave dan tutup autoclave, letakkan autoclave di
atas kompor. Lalu, nyalakan kompor dan amati udara yang keluar dari katup.
Kemudian, tutup katup ketika sudah banyak uap air yang keluar dan amati
jarum penunjuk temperature, saat jarum menunjukkan temperatur 121oC,
kecilkan nyala api kompor sehingga temperatur stabil pada posisi tersebut.
Setelah lima belas menit, matikan nyala api kompor. Tunggu jarum penunjuk
sampai kondisi awal dan buka katup. Setelah tidak ada uap air yang keluar,
5
buka tutup autoclave. Setelah itu, ambil petridish dan simpan di tempat
penyimpanan
2.2.2. Waktu dan Tempat
Praktikum mikrobiologi pengenalan alat dan persiapan dilaksanakan
pada tanggal 24 April 2022 pukul 09.00 WIB di Laboratorium Fakultas
Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Jenderal Soedirman.
6
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1. Hasil
Tabel 1. Nama Alat
No Nama Alat Gambar
1. Autoclave
2. Kawat ose atau loop
3. Spreader atau hockey
stick
7
4. Petri dish
5. Tabung reaksi
6. Pinset atau forcep
7. Mikropipet
8
8. Lampu Bunsen
9. Inkubator
10. Mikroskop
9
11. Oven
12. Vortex
13. Erlenmeyer
10
14. Gelas ukur
15. Mikro pestle
16. Timbangan digital
11
17. Kompor listrik
18. Spatula
19. Sentrifuge
12
20. Objek glass atau
cover glass
3.2. Pembahasan
1. Autoclave
Gambar 3.2.1. Autoclave
13
Autoclave adalah suatu alat pemanas tertutup yang digunakan untuk
mensterilkan suatu alat dan benda dengan menggunakan uap bersuhu dan
bertekanan tinggi biasanya suhu yang digunakan yaitu 121°C dan bertekanan
15 lbs. Jadi tekanan yang bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon
tiap inchi2 (15 Psi = 15 pounds per square inch) yang dilakukan selama kurang
lebih 15 menit. Adanya penurunan tekanan pada autoclave tidak dimaksudkan
untuk membunuh mikroorganisme, melainkan untuk meningkatkan suhu
dalam autoclave. Dengan adanya suhu tinggi, akan menyebabkan
mikroorganisme dapat terbunuh atau mati. Autoclave digunakan terutama
untuk membunuh endospora, yaitu sel resisten yang diproduksi oleh bakteri.
Sel ini tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan antibiotik. Pada spesies
yang sama, endospora dapat bertahan pada kondisi lingkungan yang dapat
membunuh sel vegetatif bakteri tersebut. Endospora mati pada suhu 100 °C,
yang merupakan titik didih air pada tekanan atmosfer normal. Pada suhu 121
°C, endospora dapat dibunuh dalam waktu 4-5 menit, dimana sel vegetatif
bakteri dapat dibunuh hanya dalam waktu 6-30 detik pada suhu 65 °C (Sinta,
2013).
Sumber uap panas yang dihasilkan oleh autoclave berasal dari uap
panas yang dihasilkan oleh api. Autoclave dapat dioperasionalkan pada suhu
115- 1500˚C. Sterilisasi akan efektif bila dilakukan pada lamanya waktu,
misalnya pada media nutrisi yang volumenya 25-50 mL disterilisasikan di
autoclave dengan suhu 121˚C selama 15-20 menit pada tekanan 1.5 kg/cm2.
14
Pemeliharaan dan perawatan autoclave harus selalu diperhatikan agar
autoclave dapat digunakan dalam waktu yang lama (Sinta, 2013).
Penggunaan autoclave dapat dilakukan dengan cara sebagai berikut
yaitu sebelum melakukan sterilisasi, harus cek terlebih dahulu banyaknya air
didalam autoclave. Apabila air kurang dari batas yg telah ditentukan, maka
dapat ditambah air sampai batas tersebut. Air yang digunakan adalah air dari
hasil destilasi, untuk menghindari terbentuknya kerak dan karat. Kemudian
masukkan peralatan dan bahan yang digunakan. Jika mensterilisasi botol
bertutup sulit, maka tutup harus dikendorkan. Tutup autoclave dengan rapat
lalu baut pengaman dikencangkan agar tidak ada uap yang keluar dari bibir
autoclave. Klep pengaman jangan dikencangkan terlebih dahulu. Lalu nyalakan
autoclave, kemudian timer diatur dengan waktu minimal 15 menit pada suhu
121°C. Tunggu sampai air mendidih sehingga uapnya memenuhi
kompartemen autoclave dan terdesak keluar dari klep pengaman. Kemudian
klep pengaman ditutup (dikencangkan) dan tunggu sampai selesai.
Penghitungan waktu 15 detik dimulai sejak tekanan mencapai 2 atm. Apabila
alarm tanda selesai berbunyi, maka tunggu tekanan dlm kompartemen turun
hingga sama dengan tekanan udara di lingkungan (jarum pada preisure gauge
menunjuk ke angka nol). Kemudian klep-klep pengaman dibuka dan keluarkan
isi autoclave dengan hati-hati (Sinta, 2013).
2. Kawat Ose atau Loop
15
Gambar 3.2.2. Kawat Ose atau Loop
Ose adalah batang kaca yang ujungnya terdapat kawat panjang, ada
yang berbentuk lurus dan adapula yang bulat. Berfungsi untuk memindahkan
atau mengambil koloni suatu mikrobia ke media yang akan digunakan
kembali. Prinsip kerjanya yaitu ose disentuhkan pada bagian mikrobia
kemudian menggosokkan pada kaca preparat untuk diamati (Sinta, 2013).
3. Spreader atau hockey stick
Gambar 3.2.3. Spreader atau hockey stick
Spreader atau hockey stick memiliki fungsi yaitu untuk menyebarkan
cairan di permukaan media supaya bakteri yang tersuspensi dalam cairan
16
tersebut tersebar merata. Prinsip kerjanya yaitu dengan menggunakan bagian
yang berbentuk L untuk menyebarkan permukaan cairan (Ririn, 2016).
4. Petridish
Gambar 3.2.4. Petridish
Cawan petri atau petridish yaitu wadah yang menyerupai mangkuk
dengan dasar rata. Cawan ini digunakan sebagai wadah penyimpanan dan
pembuatan kultur media. Prinsip kerjanya yaitu medium dapat dituangkan ke
cawan bagian bawah dan cawan bagian atas sebagai penutup (Andriani, R,
2016).
Cara penggunaannya misalkan akan mengamati pertumbuhan bakteri,
media agar kita isikan ke dalam cawan petri. Media agar ini mengandung
nutrisi, garam, indikator, dan anti biotik untuk membantu mikroorganisme
tumbuh dan berkembang. Selanjutnya, simpan cawan petri ke dalam refrigrafor
(Andriani, R, 2016).
5. Tabung Reaksi
17
Gambar 3.2.5. Tabung Reaksi
Tabung reaksi digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme baik
dalam medium padat maupun cair, untuk kegiatan pengenceran serta uji-uji
biokimiawi. Prinsip kerja tabung reaksi terbuat dari kaca yang tahan terhadap
panas dan tekanan tinggi, karena hampir dalam semua kegiatan mikrobiologi
digunakan tabung reaksi dalam keadaan steril (Sinta, 2013).
Cara penggunaan pada saat proses pemanasan bahan kimia
menggunakan tabung reaksi umumnya terdapat ada 2 cara yaitu tabung reaksi
ini dipanaskan dahulu ke dalam gelas kimia yang berisi air dan selanjutnya
dipanaskan menggunakan kompor/heater pembakar spiritus dan memegang
tabung reaksi harus dijepit oleh penjepit tabung reaksi atau kita menggunakan
sarung tangan anti panas agar tangan kita tidak terkena dampak panas dari
tabung dan selanjutnya dibakar langsung di atas api (Sinta, 2013).
6. Pinset atau Forcep
Gambar 3.2.6. Pinset
18
Pinset memiliki banyak fungsi diantaranya adalah untuk mengambil
benda dengan menjepit misalnya saat memindahkan cakram antibiotik. Prinsip
kerjanya yaitu dengan menjepitkan bendanya, misalkan bendanya
cakramantibotik. Cara penggunaan pinset dengan cara mengoperasikan pinset
menggunakan ibu jari dan dua atau tiga anak jari dalam satu tangan dengan
mekanan bagian tengah dari kedua bilah atas dan bawah (Sinta, 2013).
7. Mikropipet
Gambar 3.2.7. Mikropipet
Mikropipet adalah alat untuk memindahkan cairan yang bervolume
cukup kecil, biasanya kurang dari 1000 μl. Banyak pilihan kapasitas dalam
mikropipet, misalnya mikropipet yang dapat diatur volume pengambilannya
(adjustable volume pipette) antara 1μl sampai 20 μl atau mikropipet yang tidak
bisa diatur volumenya hanya tersedia satu pilihan volume (fixed volume
pipette) misalnya mikropipet 5 μl dalam penggunaannya, mukropipet
memerlukan tip. Prinsip kerja mikropipet biasanya digunakan bersama
mikrotip. Sebelum mengambil larutan bagian atas mikropipet lalu diambil
19
volume yang diinginkan dan ditekan kembali. Baru dapat digunakan
mengambil larutan dengan menekan satu kali bagian atasnya (Sinta, 2013).
8. Lampu Bunsen
Gambar 3.2.8. Lampu Bunsen
Bunsen berfungsi sebagai alat untuk mensterilkan bahan yang terbuat
dari kaca dan juga dipakai mensterilkan alat lainnya seperti jarum ose dengan
cara memanaskan, cara penggunaan bunsen yaitu dengan cara menyalakan
sumbu yang terdapat pada Bunsen. Prinsip kerjanya yaitu dengan api yang
menyala digunakan untuk membakar jarum ose serta bagian mulut alat-alat
gelas agar tidak terkontaminasi saat melakukan pemindahan atau penanaman
mikroba (Sinta, 2013).
9. Inkubator
Gambar 3.2.9. Inkubator
20
Inkubator adalah alat dengan suhu atau kelembaban tertentu yang
digunakan untuk menginkubasi atau memeram mikroba. Kisaran suhu untuk
inkubator produksi Heraeus B5042 misalnya adalah 10-70oC. Suhu di
dalam inkubator konstan dan dapat diatur sesuai dengan tujuan inkubasi. Di
dalam laboratorium mikrobiologi digunakan untuk menumbuhkan bakteri
pada suhu tertentu, menumbuhkan ragi dan jamur, menyimpan biakan murni
mikroorganisme I pada suhu rendah. Adapun ciri dari inkubator adalah
memiliki sekat untuk menumbuh kembangkan mikroba, dalam inkubator
terdapat sekat kaca pada pintunya yang berfungsi untuk mempermudah
melihat mikroba yang sedang diinkubasi tanpa membuka dan benutup bagian
dalam dari inkubator sehingga suhunya tetap terjaga. Prinsip kerjanya yaitu
mengubah energi listrik menjadi energi panas. Kawat nikelin akan
menghambat aliran elektron yang mengalir sehingga mengakibatkan
peningkatan suhu kawat. Prinsip kerjanya suhu ruangan di dalam incubator
dapat diatur secara otomatis sesuai dengan biakan yang akan diinkubasi.
Untuk menyimpan medium biasanya inkubator diatur dengan suhu 0 derajat
celcius (Hafsah, 2009).
10. Mikroskop
Gambar 3.2.10. Mikroskop
21
Mikroskop adalah alat yang paling khas dalam laboratorium
mikrobiologi yang memberikan perbesaran yang membuat kita dapat melihat
struktur mikroorganisme yang tidak dapat dilihat oleh mata telanjang.
Mikroskop yang tersedia memungkinkan jangkauan perbesaran yang luas dari
beberapa kali hingga ribuan kali. Mikroskop memiliki prinsip kerja yakni
dengan memantulkan cahaya melalui cermin, lalu diteruskan hingga lensa
objektif. Di lensa objektif bayangan yang dihasilkan adalah maya, terbalik, dan
diperbesar. Kemudian bayangan akan diteruskan dan menghasilkan bayangan
yang tegak, nyata dan di perbesar oleh mata pengamat. Mikroskop memiliki
fungsi sebagai alat bantu pengelihatan untuk mengamati preparat mikroskopis
(Ririn, 2016).
11. Oven
Gambar 3.2.11. Oven
Oven berfungsi untuk mensterilkan alat-alat gelas yang tahan terhadap
panas. Digunakan pada sterilisasi udara kering dengan membebaskan alat-alat
dari segala macam kehidupan (mikroba) tanpa kelembaban. Cara
menggunakannya yaitu dengan memasukkan alat-alat yang telah dibungkus
dengan kertas yang akan disterilkan ke dalam oven dan menyusunnya pada
22
rak, kemudian memanaskannya diatas api. Prinsip kerja oven menggunakan
daya listrik, suhu dan lama waktu sterilisasi dapat diatur secara otomatis. Oven
hanya dapat digunakan untuk sterilisasi kering dengan menggunakan suhu
yang tinggi, sehingga dapat membunuh mikroba (Hadiutomo, 1990).
12. Vortex
Gambar 3.2.12. Vortex
Fungsi vortex digunakan untuk menghomogenkan suatu larutan.
Prinsip kerja alat ini yaitu dengan meletakan tabung reaksi diatas wadah
penyimpanan kemudian mengatur putaran yang diinginkan sampai larutan
menjadi homogen (Sinta, 2013).
Cara penggunaan vortex adalah sebagai berikut nyalakan alat dengan
memindahkan tombol merah ke posisi (=). Kemudian, letakkan wadah sampel
di atas alat vortex yang terbuat dari karet dengan tetap memegang dan
menekannya ke tempat selama vortex bekerja. Lalu atur kecepatan vortex
dengan memutar kNop berwarna hitam kearah kanan (ini sekaligus mengatur
kecepatan pemutaran alat vortex). Posisikan kNop ke posisi mati (sampel tidak
23
berputar lagi) setelah selesai digunakan, lalu matikan power on ke posisi (-).
Terakhir cabut kabel dari aliran arus listrik.
13. Erlenmeyer
Gambar 3.2.13. Erlenmeyer
Labu erlenmeyer berfungsi untuk menampung larutan, bahan atau
cairan yang digunakan untuk meracik dan menghomogenkan bahan-bahan
komposisi media, menampung aquades, kultivasi mikroba dalam kultur cair
dan sebagainya. Labu erlemeyer terdapat beberapa pilihan berdasarkan volume
cairan yang dapat ditampungnya yaitu 25 ml, 50 ml, 100 ml, 250 ml, 300 ml, 500
ml, 1000 ml dan sebagainya. Prinsip kerja erlenmeyer adalah larutan atau
medium yang akan disimpan dituang melalui mulut erlenmeyer, selanjutnya
mulut erlenmeyer disumbat dengan kapas dan dilapisi aluminium foil atau
kertas, baru kemudian disterilisasi. Cara Menggunakan Erlenmeyer dalam
proses titrasi adalah pegang leher erlenmeyer, masukkan larutan yang akan
dititrasi, kemudia diguncangkan dengan perlahan - lahan dan hati - hati serta
lihat perubahan warna yang terjadi (Sinta, 2013).
14. Gelas Ukur
24
Gambar 3.2.14. Gelas Ukur
Gelas ukur berfungsi untuk mengukur volume suatu cairan, seperti labu
erlenmeyer, gelas ukur memiliki beberapa pilihan berdasarkan skala
volumenya. Pada saat mengukur volume larutan, sebaiknya volume tersebut
ditentukan berdasarkan meniskus cekung larutan tersebut. Gelas ukur
berbentuk silinder, terbuat dari jenis gelas boroksilikat. Kapasitas volume gelas
ukur 5 – 2000 mL. Prinsip kerja gelas ukur adalah mengukur cairan secara tidak
teliti dan tidak masuk perhitungan. Cara menggunakan gelas ukur yaitu gelas
ukur dipegang dengan tangan dan ibu jari menuju batas volume yang di
kehendaki. Gelas ukur diangkat sehingga batas volume setinggi mata dan
cairan dituangkan sampai batas volume. (Sinta, 2013).
15. Mikro pestle
Gambar 3.2.15. Mikro pestle
25
Mikro pestle digunakan untuk mengancurkan atau menumbuk media
atau bahan. Prinsip kerjanya yaitu menumbukkan ke media atau bahan yang
akan digunakan (Sinta, 2013).
16. Timbangan Digital
Gambar 3.2.16. Timbangan Digital
Fungsi timbangan digital di laboratorium adalah untuk menimbang
suatu zat atau bahan kimia. Timbangan laboratorium ini tentu sangat
berbeda dengan timbangan pada umumnya. Timbangan digital memiliki
tingkat akurasi dan sensisitifitas yang sangat tinggi, bahkan sampai 0,0001
mg.
Cara penggunaan timbangan digital adalah sebagai berikut, pastikan
posisi neraca sudah benar dan setting water sudah pas sesuai petunjuk.
Sebaiknya neraca digital diletakkan di tempat yang jauh dari hembusan angin
atau panas berlebih. Kalibrasi neraca sebelum digunakan. Gunakan sarung
tangan saat menggunakan neraca, apalagi saat menyentuh piringan. Hal ini
untuk menghindari menempelnya debu atau zat lain yang bisa memengaruhi
26
proses ukur neraca. Hindarkan neraca dari medan magnet sekitar. Pastikan
pintu pelindung angin selalu tertutup sebelum dan sesudah penggunaan
neraca digital. Gunakan ionizer pada neraca untuk menjamin kebersihan dan
memastikan tidak ada zat lain yang menempel di piringan. Bersihkan neraca
setelah digunakan. Lalu, matikan neraca jika tidak berencana untuk dipakai
dalam waktu dekat. Jika neraca tidak digunakan, sebaiknya disimpan di
ruangan yang bersuhu 18-20 derajat celcius (Mega, 2011).
17. Kompor Listrik
Gambar 3.2.17. Kompor Listrik
Kompor listrik adalah alat untuk memanaskan media dimana membantu
dalam proses percampuran sehingga media menjadi homogen. Sumber tenaga
alat ini adalah listrik dan suhu dapat ditentukan sedemikian rupa sesuai
dengan keinginan. Cara menggunakan kompor listrik yaitu dengan cara
menghubungkan kompor listrik dengan sumber listrik (Mega, 2011).
18. Spatula
27
Gambar 3.2.18. Spatula
Spatula berupa sendok panjang dengan ujung atasnya datar, terbuat dari
stainless steel atau alumunium, alat untuk mengambil obyek. Spatula yang
sering digunakan di laboratorium biologi atau kimia berbentuk sendok kecil,
pipih dan bertangkai. Fungsi spatula yaitu untuk mengambil bahan kimia yang
berbentuk padatan dan dipakai untuk mengaduk larutan. (Andriani, R, 2016).
19. Sentrifuge
Gambar 3.2.19. Sentrifuge
Sentrifuge digunakan untuk memisahkan larutan atau mengendapkan
partikel-partikel dari suatu larutan. Prinsip kerjanya larutan yang akan
diendapkan partikelnya dimasukkan ke dalam tabung sentrifuge. Harus
28
terdapat paling sedikit dua tabung sentrifuge dengan volume yang sama dan
diletakkan sejajar agar terjadi keseimbangan jika sentrifuge berputar.
Cara penggunaan sentrigue tempatkan tabung reaksi di dudukan
sentrifuge, kemudian seimbangkan dengan tabung reaksi lain dengan larutan
yang berbeda yang sudah di taruh pada ruang test tube yang berlawanan. Lalu,
tutup kaca centrifuge dan putar tombol serta atur waktu dan kecepatan
centrifuge (Mega, 2011).
20. Objek Glass atau Cover Glass
Gambar 3.2.20. Objek Glass atau Cover Glass
Objek glass atau cover glass digunakan untuk membuat preparat
mikroskopik untuk kemudian diberi warna. Prinsip kerjanya kaca benda harus
digunakan bersamaan dengan kaca penutup. Kaca benda memiliki dua tipe
yaitu kaca datar dan cekung, keduanya memiliki fungsi yang berbeda.
Cara penggunaannya letakkan preparat atau bahan yang akan diamati di
permukaan objek glass, kemudian tetesi dengan aquades 1-2 tetes. Setelah itu,
29
tutup menggunakan cover glass atau kaca penutup. Pastikan tidak ada
gelembung udara di dalam preparatnya. Kemudian, letakkan objek glass di
bagian bawah lensa pada alat mikroskop, lalu amati bentuk dari objek tersebut
(Mega, 2011).
30
IV. KESIMPULAN DAN SARAN
4.1. Kesimpulan
Dapat mengenal alat-alat dalam teknik dasar mikrobiologi dan cara
penggunaannya, serta mengetahui cara mempersiapkan alat-alat yang
digunakan dalam teknik dasar mikrobiologi
4.2. Saran
Saran untuk praktikum mikrobiologi kali ini adalah peralatanya masih
ada beberapa yang kurang steril.
31
DAFTAR PUSTAKA
Adrian, Ririn. 2016. Pengenalan Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi Untuk
Mengatasi Keselamatan Kerja dan Keberhasilan Praktikum. Jurnal
Mikrobiologi Vol. 1 No. 1. ISSN: 01A114084
Dwidjoseputro. 2003. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Djambatan, Jakarta.
Hadiutomo. 1990. Mikrobiologi Dasar Jilid I. Jakarta: Erlangga.
Hajoeningtijas. O. D, 2012. Mikrobiologi Pertanian. Graha Ilmu. Yogyakarta
Hafsah, 2009. Mikrobiologi Umum. Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar;
Makassar.
Irianto, A., et al. 2012. Petunjuk Praktikum Mikrobiologi. Fakultas Biologi
UNSOED, Purwokerto.
Javetz, E., Melnick, J.L., dan Elberg, E.A. 1990. Agrobiology. Buku Kedokteran,
EGC, Jakarta.
Mikdarullah dan Nugraha, A. 2017. Teknik Isolasi Bakteri Proteolitik Dari
Sumber Air Panas Ciwidey, BANDUNG. Buletin Teknik Litkayasa
Akuakultur, Vol. 15 No. 1.
Mega. 2011. Laporan Mikrobiologi Pengenalan Alat. Fakultas Sains dan Teknologi
UIN: Makassar.
Murray. 2005. Biokimia Harper. EGC, Jakarta.
Sinta. 2013. Laporan Mikrobiologi Pengenalan Alat-Alat Laboratorium. Fakultas
pertanian Universitas Lampung, Lampung.
Sudjadi, B., dan Laila, S. 2006. Biologi Sains dan Kehidupan. Yudhistira, Bandung.
32
ACARA II
PENGENALAN DAN PERSIAPAN MEDIA
Disusun Oleh:
KELOMPOK G
AKUAKULTUR B
Adil Fatwa Syabana L1B021014

Via Angellica Santoso L1B021074
Tania Isma Wardani L1B021094
Asisten:
Deandra Aurel
PURWOKERTO
2022
33
I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Mikrobiologi berasal dari kata dalam Bahasa Yunani yaitu mikros artinya
kecil, bios artinya hidup, dan logos artinya ilmu. Mikrobiologi adalah ilmu yang
mempelajari mengenai organisme yang berukuran mikroskopis. Sedemikan
kecilnya sehingga keberadaan mereka hanya dapat dilihat dengan alat yang
disebut mikroskop. Dunia mikroorganisme terdiri dari lima (5) kelompok
organisme, yaitu: bakteri, protozoa, virus, algae serta cendawan (jamur)
mikroskopik. Dengan demikian lingkup mikrobiologi meliputi Bakteriologi,
yaitu ilmu yang mempelajari tentang bakteri, Virologi yaitu Ilmu yang
mempelajari tentang virus, Mikologi yaitu ilmu yang mempelajari tentang
jamur dan algae dan Parasitologi yaitu ilmu yang mempelajari tentang Parasit
(Meganada et al., 2017).
Mikroorganisme merupakan suatu kelompok organisme yang tidak
dapat dilihat dengan menggunakan mata telanjang, sehingga diperlukan alat
bantu untuk dapat melihatnya seperti mikroskop, lup dan lain-lain. Menyusun
sistematik dalam dunia mikroorganisme bukanlah pekerjaan yang mudah
kesulitan pertama yang kita hadapi ialah menentukan apakah mikroba itu
golongan hewan atau golongan tumbuhan. Setelah Leeuwenhoek menyelami
dunia mikroorganisme, sarjana Zoologi seperti Muller (1773) dan Erlenberg
(1838) menggolongkan bakteri pada protozoa. Baru pada tahun (1873), Cohn
sarjana botani bangsa Jerman, mengetahui adanya ciri-ciri yang menyebabkan
34
ia lebih condong menggolongkan bakteri (salah satu mikroorganisme) pada
tumbuhan. Klasifikasi bakteri secara agak lengkap pada tahun 1875, dan sejak
itu diadakan penyempurnaan secara berangsur-angsur sampai sekarang
Pada pembiakan/penanaman mikroba perlu diperhatikan kebutuhan
nutrisi untuk mikroba tersebut sehingga dapat tumbuh dengan baik. Teknik
untuk menanam bakteri yaitu Spread plate method (cara tebar/sebar), teknik
isolasi mikroba dengan cara menginokulasi kultur mikroba dengan cara
dipulas atau disebar pada permukaan media agar padat. Metode ini dilakukan
dengan mengencerkan biakan kultur mikroba. Streak plate method (cara gores)
yaitu teknik isolasi koloni bakteri dengan cara ini dilakukan dengan cara
menggoreskan suspensi bahan yang mengandung mikroba pada permukaan
media agar padat. Pour plate method (cara tabur) yaitu teknik isolasi koloni
bakteri dengan cara ini dilakukan dengan cara menggoreskan suspensi bahan
yang mengandung mikroba pada permukaan media agar padat (Yusmaniar et
al., 2017).
Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri
atas campuran nutrisi (nutrient) yang digunakan oleh suatu mikroorganisme
untuk tumbuh dan berkembang biak pada media tersebut. Mikroorganisme
memanfaatkan nutrisi pada media berupa molekul-molekul kecil yang dirakit
untuk menyusun komponen sel-nya. Media pertumbuhan juga bisa digunakan
untuk mengisolasi mikroorganisme, identifikasi dan membuat kultur murni.
35
Komposisi media pertumbuhan dapat dimanipulasi untuk tujuan isolasi dan
identifikasi mikroorganisme tertentu sesuai dengan tujuan masing-masing
pembuatan suatu media (Meganada et al., 2017).
Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat hara
(nutrient) yang berguna untuk membiakkan mikroba. Dengan mempergunakan
bermacam-macam media dapat dilakukan isolasi, perbanyakan, pengujian
sifat-sifat fisiologis dan perhitungan jumlah mikroba. Media untuk kultur
bakteri dalam mikrobiologi ada banyak jenisnya dan dapat dibagi berdasarkan
bentuk, komposisi/susunannya. Berdasarkan bentuknya, media dibagi menjadi
media padat, semi padat, dan cair. Berdasarkan komposisi/ susunannya dibagi
menjadi media alami, semi sintetis, dan sintetis (Meganada et al., 2017).
1.2. Tujuan
Tujuan praktikum acara pengenalan alat dan persiapan media adalah :
1. Mengetahui beberapa jenis media untuk kultivasi mikro organisme
2. Mengetahui cara menyiapkan media sebelum digunakan untuk kultivasi
mikro organisme
36
2.1. Materi
2.1.1. Alat
Alat yang digunakan pada praktikum acara ini antara lain timbangan
digital, erlemeyer 100 ml, kompor listrik, tabung reaksi, autoclave dan
petridish.
2.1.2. Bahan
Bahan yang digunakan pada praktikum acara ini antara lain media
bakteri seperti TSA (Triptone Soya Agar), Glutamate Starch Phenol Red Agar Base,
Lactobacillus MRS Agar, Potato Dextrose Agar, Agar-Agar, Tryptic Soy Broth, TCBS
Agar, Difco Marine Broth, Difco Marine Agar, dan akuadest.
2.2. Metode
2.2.1. Cara Kerja
Dibaca dan diperhatikan petunjuk yang ada pada kemasan setiap media.
Kemudian dicatat komposisi setiap media dan cara penyiapannya. Ditimbang
media untuk 50 mL akuadest dan dicampurkan media dan akuadest dalam
erlenmeyer (100 mL). Dipanaskan erlenmeyer menggunakan kompor listrik
sampai media larut sempurna atau mendidih. Lalu dituang media cair pada
tabung reaksi sebanyak 5 mL/tabung. Disterilkan media menggunakan
autoclave. Setelah temperatur turun (hangat), dituang media agar pada
petridish hingga ketebalan 2-3 mm. Ditunggu media agar menjadi padat.
37
2.2.2. Waktu dan Tempat
Praktikum mikrobiologi pengenalan alat dan persiapan dilaksanakan
pada tanggal 22 April 2022 pukul 09.00 WIB - selesai di Laboratorium Fakultas
Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Jenderal Soedirman.
38
3.1. Hasil
Tabel 1. Hasil
No Nama Media Gambar
1. TSA ( Triptone Soya Agar)
2. Glutamate Starch Phenol Red

Agar Base (GSP)
3. Lactobacillus MRS Agar
39
4. Potato Dextrose Agar
5. Agar-Agar
6. Tryptic Soy Broth
40
7. TCBS Agar
8. Difco Marine Broth
9. Difco Marine Agar
3.2. Pembahasan
3.2.1. Komposisi Media
Komposisi Media TSA ( Triptone Soya Agar)
41
 Tryptone : 17 gram
 Soya peptone : 3 gram
 Sodium chloride : 5 gram
 Dextrose (Glucose) : 2.5 gram
 Dipotassium hydrogen phosphate : 2.5 gram
 Agar : 15 gram
(Himedia, 2019)
Komposisi Media Glutamate Starch Phenol Red Agar Base
 Sodium L-glutamate : 10 gram
 Starch, soluble : 20 gram
 Potassium dihydrogen phosphate : 2 gram
 Magnesium sulfate : 0.5 gram
 Phenol red : 0.36 gram
 Agar : 12 gram
(Sifin, 2014)
Komposisi Media Lactobacillus MRS Agar
 Proteose peptone : 10 gram
 HM Peptone B # : 10 gram
 Yeast extract : 5 gram
 Dextrose (Glucose) : 20 gram
42
 Tween 80 (Polysorbate 80) : 1 gram
 Ammonium citrate : 2 gram
 Sodium acetate : 5 gram
 Magnesium sulphate : 0.1 gram
 Manganese sulphate : 0.05 gram
 Dipotassium hydrogen phosphate : 2 gram
 Agar : 12 gram
(Himedia, 2022)
Komposisi Media Potato Dextrose Agar
 Potatoes, infusion from : 200 gram
 Dextrose : 20 gram
 Agar : 15 gram
(Himedia, 2019)
Komposisi Media Agar-Agar
 Peptone : 5 gram
 HM peptone B# : 1.5 gram
 Yeast extract : 1.5 gram
 Agar : 15 gram
(Himedia, 2021)
43
Komposisi Media Tryptic Soy Broth
 Tryptone : 17 gram
 Soya peptone : 3 gram
 Dextrose (Glucose) : 2.5 gram
 Dipotassium hydrogen phosphate : 2.5 gram
(Himedia, 2019)
Komposisi Media TCBS Agar
 Proteose peptone : 10 gram
 Sodium thiosulphate : 10 gram
 Sodium citrate : 10 gram
 Bile : 8 gram
 Sucrose : 20 gram
 Ferric citrate : 1 gram
 Bromo thymol blue : 0.04 gram
 Thymol blue : 0.04 gram
 Agar : 15 gram
(Himedia, 2019)
44
Komposisi Media Difco Marine Broth
 Peptone : 5 gram
 Ferric citrate : 0.1 gram
 Sodium chloride : 19.45 gram
 Magnesium chloride : 8.8 gram
 Sodium sulphate : 3.24 gram
 Calcium chloride : 1.8 gram
 Potassium chloride : 0.55 gram
 Sodium bicarbonate : 0.16 gram
 Potassium bromide : 0.08 gram
 Strontium chloride : 0.034 gram
 Boric acid : 0.022 gram
 Sodium silicate : 0.004 gram
 Sodium fluorate : 0.0024 gram
 Ammonium nitrate : 0.0016 gram
 Disodium phosphate : 0.008 gram
 Agar : 15 gram
(Himedia, 2019)
3.2.2. Preparasi Media
 TSA ( Triptone Soya Agar)
45
TSA (Triptone Soya Agar) direkomendasikan untuk budidaya dan
pemeliharaan Salmonella Typhimurium. Preparasi media adalah dengan
menuang 45 gram dalam 1000 ml air murni/suling. Panaskan sampai mendidih
untuk melarutkan media sepenuhnya. Sterilkan dengan autoklaf pada tekanan
15lbs (121°C) selama 15 menit. Dinginkan hingga 45-50°C. Aduk rata dan
tuang ke dalam cawan petri steril (Himedia, 2019).
 Glutamate Starch Phenol Red Agar Base
Digunakan untuk mendeteksi Pseudomonas sp. dan Aeromonas sp.
Berbentuk bubuk berwarna merah. Penyimpanan di tempat kering, tertutup
rapat, pada 10-25 °C. Umur simpan 5 tahun. Cara penggunaan yaitu tuang 44,9
g dalam 1 liter air suling dan panaskan sampai benar-benar larut. Autoklaf
pada 121 °C selama 15 menit. Dinginkan hingga 45-50 °C dan campurkan
dalam 100 000 i.U/liter natrium penisilin G dan, jika diperlukan, 0,01 g/liter
pimaricin. Tuangkan ke cawan (Sifin, 2014).
 Lactobacillus MRS Agar
Digunakan untuk budidaya semua spesies Lactobacillus dari sampel
klinis dan non-klinis. Cara penggunaan yaitu tuang 67,15 gram dalam 1000 ml
air murni/suling. Panaskan sampai mendidih untuk melarutkan media
sepenuhnya. Sterilkan dengan autoklaf pada tekanan 15 lbs (121°C) selama 15
46
menit. Dinginkan hingga 45-50°C. Aduk rata dan tuang ke dalam cawan petri
steril (Himedia, 2022).
 Potato Dextrose Agar
Potato Dextrose Agar direkomendasikan untuk isolasi dan
penghitungan ragi dan jamur dari air, susu, makanan lain produk dan sampel
klinis. Preparasi media adalah dengan menuang 39,00 gram dalam 1000 ml air
suling/murni. Panaskan sampai mendidih untuk melarutkan media
menit. Aduk rata sebelum dikeluarkan. Dalam pekerjaan tertentu, ketika pH
3,5 adalah diperlukan, mengasamkan media dengan asam tartarat 10% steril.
Jumlah asam yang dibutuhkan untuk 100 ml steril, didinginkan sedang kurang
lebih 1 ml. Jangan panaskan media setelah penambahan asam (Himedia, 2019).
 Agar-Agar
Nutrient Agar digunakan sebagai media tujuan umum untuk budidaya
mikroorganisme yang kurang teliti, dapat diperkaya dengan darah atau cairan
biologis lainnya. Preparasi media adalah dengan menuang 28,0 gram dalam
1000 ml air murni/suling. Panaskan sampai mendidih untuk melarutkan media
sepenuhnya. Mensterilkan dengan autoklaf pada tekanan 15 lbs (121°C) selama
15 menit. Dinginkan hingga 45-50°C. Jika diinginkan, media dapat diperkaya
47
dengan 5-10% darah atau cairan biologis lainnya. Aduk rata dan tuang ke
dalam cawan petri steril (Himedia, 2021).
 Tryptic Soy Broth
Direkomendasikan sebagai media tujuan umum yang digunakan untuk
budidaya berbagai macam mikroorganisme dan direkomendasikan untuk
pengujian sterilitas jamur dan bakteri yang lebih rendah. Preparasi media
adalah dengan menuang 30,0 gram dalam 1000 ml air suling/murni. Panaskan
jika perlu untuk melarutkan media sepenuhnya. Aduk rata dan keluarkan
dalam tabung atau termos seperti yang diinginkan. Sterilkan dengan autoklaf
pada tekanan 15 lbs (121°C) selama 15 menit. Catatan: Jika ada serat yang
diamati dalam larutan, disarankan untuk menyaring larutan melalui filter 0,22
mikron untuk menghilangkan kemungkinan adanya serat (Himedia, 2019).
 TCBS Agar
Direkomendasikan untuk isolasi selektif dan budidaya Vibrio cholerae
dan Vibrio enteropatogenik lainnya menyebabkan keracunan makanan dari
spesimen klinis dan makanan. Preparasi media adalah dengan menuang 89,08
gram dalam 1000 ml air suling/murni. Panaskan sampai mendidih untuk
melarutkan media sepenuhnya. Jangan menggunakan autoclave. Dinginkan
hingga 45-50°C. Aduk rata dan tuang ke dalam cawan petri steril (Himedia,
2019).
48
 Difco Marine Broth
Direkomendasikan untuk budidaya, isolasi dan enumerasi bakteri laut
heterotrofik. Preparasi media adalah dengan menuang 55,25 gram dalam 1000
ml air murni/suling. Panaskan sampai mendidih untuk melarutkan media
menit. Dinginkan hingga 45-50°C. Aduk rata dan tuang dalam cawan petri
steril (Himedia, 2019).
 Difco Marine Agar
Pepton 5 gr/L, yeast extract 3 gr/L, agar 15 gr/L air laut 750 ml/L, dan
aquades 250 ml/L, lalu dihomogenkan dengan batang pengaduk diatas
kompor listrik hingga mendidih. Mulut erlenmeyer ditutup dengan kapas dan
aluminium foil, lalu disterilkan di autoklaf dengan alat-alat yang lainnya pada
suhu 121°C selama 15 menit (Ifani, 2016).
3.2.3. Spesifikasi Media
 TSA (Triptone Soya Agar)
Tryptic Soy Agar (TSA) adalah media plating tujuan umum yang digunakan
untuk isolasi, budidaya, dan pemeliharaan berbagai mikroorganisme rewel dan
non-rewel. Keserbagunaan TSA dengan membudidayakan mikroba aerob dan
anaerob menggunakan TSA. TSA diakui dan direkomendasikan oleh banyak
lembaga di seluruh dunia. Formulasi standar kami disiapkan sesuai dengan
49
Farmakope Amerika Serikat (USP) dan direkomendasikan untuk berbagai
aplikasi berbeda yang diajukan oleh Association of Official Analytical Chemists
(AOAC), International Dairy Federation (IDF), Departemen Pertanian Amerika
Serikat (USDA), dan Asosiasi Kesehatan Masyarakat Amerika (APHA). Tryptic
Soy Agar adalah bahan dasar bergizi tinggi yang memenuhi persyaratan
pertumbuhan berbagai jenis mikroorganisme termasuk bakteri, ragi, dan jamur.
Banyak modifikasi telah dilakukan pada formulasi TSA untuk meningkatkan
sifat nutrisi dan selektifnya (Leavitt et al., 1955).
 Glutamate Starch Phenol Red Agar Base
Aeromonas umumnya mencemari ikan dan produk makanan laut terkait
karena mereka ditemukan secara luas di lingkungan perairan. Aeromonas
motil juga telah dikaitkan dengan produk hewani yang didinginkan seperti
ayam, sapi, babi dll. Organisme dominan yang ditemukan dalam makanan ini
adalah spesies Pseudomonas dengan motil aeromonas hadir dalam jumlah
rendah. Glutamat Starch Phenol Red Agar Base digunakan untuk mendeteksi
spesies Pseudomonas dan Aeromonas dalam bahan makanan, air limbah dan
peralatan di industri makanan. Medium ini merupakan modifikasi dari Korths
Medium, seperti yang dijelaskan oleh Keilwein. Glutamat Starch Phenol Red
Agar Base didasarkan pada kemampuan Aeromonas untuk memanfaatkan pati
dengan produksi asam berikutnya, terdeteksi indikator pH yaitu phenol red.
Fenol merah berubah dari merah menjadi warna kuning dalam kondisi asam.
Pseudomonas tidak memanfaatkan pati dan karena itu tidak membentuk
50
koloni kuning. Media dirancang untuk mendukung pertumbuhan spesies
Pseudomonas dan Aeromonas. L-glutamat adalah sumber nutrisi penting. Pati
adalah sumber karbon. Fosfat menyangga media sedangkan magnesium sulfat
adalah sumber ion esensial. Antibiotik membantu meningkatkan selektivitas
media. Media dapat diinokulasi permukaan atau digunakan dalam teknik
filtrasi membrane (Himedia, 2021).
 Lactobacillus MRS Agar
MRSA merupakan media yang diperkenalkan oleh De Mann, Rogosa, dan
Shape (1960) untuk memperkaya, menumbuhkan, dan mengisolasi jenis
Lactobacillus dari seluruh jenis bahan. MRS agar mengandung polysorbat,
asetat, magnesium, dan mangan yang diketahui untuk beraksi/bertindak
sebagai faktor pertumbuhan bagi Lactobacillus, sebaik nutrien diperkaya
 Potato Dextrose Agar (PDA)
PDA digunakan untuk menumbuhkan atau mengidentifikasi ragi dan
kapang. Dapat juga digunakan untuk enumerasi ragi dan kapang dalam suatu
sampel atau produk makanan. PDA cocok untuk pertumbuhan jamur. PDA
mengandung sumber karbohidrat dalam jumlah cukup yaitu terdiri dari 20%
ekstrak kentang dan 2% glukosa sehingga baik untuk pertumbuhan kapang
51
dan khamir tetapi kurang baik untuk pertumbuhan bakteri (Meganada et al.,
2017).
 Agar-Agar
Nutrien agar adalah medium umum untuk uji air dan produk dairy. NA
juga digunakan untuk pertumbuhan mayoritas dari mikroorganisme yang
tidak selektif, dalam arti mikroorganisme heterotrof. Media ini merupakan
media sederhana yang dibuat dari ekstrak beef, pepton, dan agar. NA
merupakan salah satu media yang umum digunakan dalam prosedur
bakteriologi seperti uji air biasa, uji air limbah, produk pangan, untuk
membawa stok kultur, untuk pertumbuhan sampel pada uji bakteri, dan untuk
mengisolasi organisme dalam kultur murni (Meganada et al., 2017).
 Trypticase Soy Broth (TSB)
TSB adalah media broth diperkaya untuk tujuan umum, untuk isolasi, dan
penumbuhan bermacam mikroorganisme. Media ini banyak digunakan untuk
isolasi bakteri dari spesimen laboratorium dan akan mendukung pertumbuhan
mayoritas bakteri patogen. Media TSB mengandung kasein dan pepton kedelai
yang menyediakan asam amino dan substansi nitrogen lainnya yang
membuatnya menjadi media bernutrisi untuk bermacam mikroorganisme
52
 TCBS Agar
TCBS Agar dikembangkan oleh Kobayashi et al., yang memodifikasi media
selektif Nakanishi. Meskipun media ini awalnya dirancang untuk isolasi
V.cholerae dan V. parahaemolyticus, sebagian besar Vibrio tumbuh menjadi
koloni besar yang sehat dengan banyak morfologi koloni yang berbeda. TCBS
Agar juga direkomendasikan oleh APHA untuk isolasi selektif V. cholerae dan
V. parahaemolyticus. Enrichment in Alkaline Peptone Water (M618), dilanjutkan
dengan isolasi pada TCBS Agar secara rutin digunakan untuk isolasi
V.cholerae. Pepton proteosa dan ekstrak ragi menyediakan senyawa nitrogen,
vitamin B kompleks dan nutrisi pertumbuhan penting lainnya. Empedu,
turunan dari garam empedu dan natrium sitrat menghambat bakteri gram
positif dan koliform. Sodium tiosulfat berfungsi sebagai sumber belerang yang
baik, yang dalam kombinasi dengan besi sitrat mendeteksi produksi hidrogen
sulfida. Untuk metabolisme Vibrio, sukrosa ditambahkan sebagai karbohidrat
yang dapat difermentasi. Vibrio yang mampu memanfaatkan sukrosa akan
dari koloni berwarna kuning. Bromotimol biru dan biru timol adalah indikator
pH. PH basa media meningkatkan pemulihan V. kolera. Strain V. cholerae
menghasilkan koloni kuning pada TCBS Agar karena fermentasi sukrosa. V.
alginolyticus juga menghasilkan koloni berwarna kuning. V. parahaemolyticus
adalah organisme non-fermentasi sukrosa dan karena itu menghasilkan koloni
biru-hijau, seperti halnya V. vulnificus (Himedia, 2019).
53
 Difco Marine Broth
Mikroorganisme dalam lingkungan akuatik dapat terjadi pada semua
kedalaman mulai dari daerah permukaan sampai ke dasar perairan parit laut.
Lapisan atas dan sedimen bawah mengandung konsentrasi mikroorganisme
yang lebih tinggi. Mikroorganisme laut sangat penting untuk siklus ekologi
karena mereka membentuk dasar dari banyak rantai makanan. Zobell Marine
Agar diformulasikan oleh Zobell, memiliki komposisi yang menyerupai air laut
dan dengan demikian membantu bakteri laut untuk berkembang biak dengan
baik. Media ini telah digunakan untuk pertumbuhan bakteri laut. Zobell
Marine Agar 2216 mengandung nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan
bakteri laut. Media ini memiliki mineral seperti dalam air laut dan ekstrak
pepton dan ragi sebagai sumber nutrisi bagi bakteri laut seperti dilansir Jones.
Kandungan garam dalam jumlah tinggi digunakan untuk mensimulasikan air
laut. Mineral lain digunakan untuk meniru komposisi mineral air laut. Teknik
pour plate dan spread plate dapat digunakan untuk enumerasi. Dalam teknik
pelat tuang, agar-agar harus didinginkan hingga 42°C sebelum diinokulasi
untuk mendukung sifat termosensitif sebagian besar bakteri laut. Pada teknik
spread plate, media dituangkan saat masih panas dan dibiarkan dingin dan
memadat sebelum inokulasi (Himedia, 2019).
54
 Difco Marine Agar
Marine agar biasanya digunakan untuk isolasi, kultivasi dan klasifikasi
bakteri laut heterotropik. Marine agar juga biasanya sangat dibutuhkan untuk
pertumbuhan, perkembangan sejumlah besar spesies bakteri laut (Ifani, 2016).
55
4.1. Kesimpulan
Dapat mengetahui beberapa jenis media untuk kultivasi mikroorganise
serta mengetahui cara menyiapkan media sebelum digunakan untuk kultivasi
mikro organisme
4.2. Saran
Mahasiswa sebaiknya memperhatikan setiap penjelasan dari asisten
sebaik mungkin agar mengerti setiap materi dengan baik. Pada saat membuat
media, alat yang akan digunakan harus steril sehingga meminimalisir
kegagalan saat praktikum.
56
DAFTAR PUSTAKA
Himedia. 2019. Potato Dextrose Agar. Laporan Penelitian. HiMedia Laboratories
Pvt. Ltd., India, 3 hal.
Himedia. 2019. Soyabean Casein Digest Medium (Tryptone Soya Broth).
Laporan Penelitian. HiMedia Laboratories Pvt. Ltd., India, 4 hal.
Himedia. 2019. TCBS Agar. Laporan Penelitian. HiMedia Laboratories Pvt. Ltd.,
India, 4 hal.
Himedia. 2019. Tryptic Soya Agar. Laporan Penelitian. HiMedia Laboratories Pvt.
Ltd., India, 2 hal.
Himedia. 2019. Nutrient Agar. Laporan Penelitian. HiMedia Laboratories Pvt.
Ltd., India, 3 hal.
Himedia. 2019. Zobell Marine Agar 2216. Laporan Penelitian. HiMedia
Laboratories Pvt. Ltd., India, 3 hal.
Himedia. 2021. Nutrient Agar. Laporan Penelitian. HiMedia Laboratories Pvt.
Ltd., India, 3 hal.
Himedia. 2022. Lactobacillus MRS Agar. Laporan Penelitian. HiMedia
Laboratories Pvt. Ltd., India, 3 hal.
Ifani. 2016. Buku AjarMikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran.
Jakarta: EGC.
63
Leavitt, J. M., Naidorf, I. J., Shugaevsky, P. 1955. The undetected anaerobe in
endodontics; a sensitive medium for detection of both aerobes and
anaerobes. NY J Dentist, 25:37-82.
Meganada, P. H., Sukini, Yodong. 2017. Mikrobiologi. Jakarta: Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia. 401 hal.
Sifin. 2014. GSP Agar Base. Berlin: Sifin Diagnostics gmbh. 1 hal.
Yusmaniar, Wardiyah, Khairun, N. 2017. Mikrobiologi dan Parasitologi. Jakarta:
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. 77 hal.
64
ACARA III
MINI-PROJECT : Keragaman Bakteri
Disusun Oleh:
KELOMPOK G
AKUAKULTUR B

Via Angellica Santoso L1B021074
Asisten:
Deandra Aurel

PURWOKERTO
2022
65
I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Mikroorganisme merupakan jasad hidup yang mempunyai ukuran
sangat kecil. Setiap sel tunggal mikroorganisme memiliki kemampuan untuk
melangsungkan aktivitas kehidupan antara lain dapat mengalami
pertumbuhan, menghasilkan energi dan bereproduksi dengan sendirinya.
Mikroorganisme ini tidak memerlukan tempat yang besar, mudah
ditumbuhkan dalam media buatan dan tingkat pembukaanya relative cepat.
Oleh karena aktivitasnya tersebut, maka setiap mikroorganisme memiliki
peranan dalam kehidupan, baik yang merugikan maupun yang
menguntungkan (Fifendy, 2017). Identifikasi bakteri dapat dilakukan dengan
du acara baik secara morfologi ataupun secara fisiologi, identifikasi yang
dilakukan secara morfologi dapat meliputi bentuk koloni, struktur koloni,
bentuk sel, ukuran sel, dan pewarnaan bakteri. Pengamatan morfologi
kemudian dapat dibagi menjadi dua yaitu pengamatan secara makroskopis dan
mikroskopis, pengamatan makroskopis dilakukan dengan cara mengamati
mikroorganisme pada bagian-bagian yang nampak dan dapat dilihat dengan
mata telanjang, seperti bentuk koloni, tepian koloni, elevasi koloni dan
permukaan koloni.sedangkan pengamatan mikroskopis digunakan pada saat
ingiin mengamati pergerakan, dan pembelahan secara biner, mengamati bentuk
dan ukuran sel yang alami, yang pada saat mengalami fiksasi panas serta
selama proses pewarnaan mengakibatkan beberapa perubahan. Pengamatan
66
secara fisiologi dapat dilakukan dengan uji biokimia, pengamatan fisiologi
dapat dilakukan dengan cara pengujian seperti fermentasi karbohidrat,
pengujian Metyl red, pengujian Vogest Paskauer, pengujian oksidase, pengujian
protase dan lain-lain (Koes, 2006).
Penanaman bakteri atau biasa disebut juga inokulasi adalah pekerjaan
memindahkan bakteri dari medium yang baru dengan tingkat ketelitian yang
tinggi. Untuk melakukan penanaman bakteri (inokulasi) terlebih dahulu
diusahakan agar semua alat yang ada dalam hubungannya dengan medium
agar tetap steril, hal ini agar menghindari terjadinya kontaminasi. Penanaman
bakteri atau inokulasi bakteri dilakukan dengan metode spread plate, streak
plate dan pour plate (Yunita et al., 2015).
Isolasi bakteri merupakan proses pengambilan bakteri dari medium atau
lingkungan asalnya, dan menumbuhkan pada medium buatan sehingga
diperoleh biakkan atau kultur murni hasil isolasi tersebut. Populasi bakteri
dapat diisolasi menjadi biakkan atau kultur murni, terdiri dari satu jenis bakteri
yang dapat dipelajari morfologi, sifat, dan kemampuan biokimianya. Dalam
memindahkan bakteri dari satu tempat ke tempat lain harus menggunakan
prosedur aseptic (Singleton dan Sainsbury, 2006). Kultur murni merupakan
kultur yang sel-sel mikrobanya berasal dari pembelahan dari suatu sel tunggal.
Kultur murni atau biakan murni sangat berguna didalam mikrobiologi, yaitu
untuk menelaah dan mengidentifikasikan mikroorganisme, termasuk
67
penelaahan ciri-ciri cultural, morfologis, fisiologis, maupun serologis (Torben,
2007).
1.2. Tujuan
Tujuan dari praktikum acara Mini-project: Keragaman Bakteri adalah:
1. Melakukan inokulasi mikroorganisme dari sampel yang diperoleh dari
lingkungan perairan.
2. Melakukan isolasi mikroorganisme yang diperoleh dari kegiatan
inokulasi.
3. Mengetahui cara mengamati dan mengenal karakteristik morfologi
koloni bakteri.
4. Mengetahui cara untuk menentukan sifat Gram suatu isolate bakteri.
68
2.1. Materi
2.1.1. Alat
Alat yang digunakan pada praktikum kali ini adalah jarum ose, wadah
sampel, milimeter blok, spreader, incubator, tabung reaksi, gunting, pinset,
bunsen, kaca preparat, kaca pembesar, pipet tetes, petri dish, waterbath, dan
mikropipet.
2.1.2. Bahan
Bahan yang digunakan pada praktikum kali ini adalah usus ikan mujair,
media kultur bakteri (TSA), larutan fisiologis steril, detergen, alcohol 95%,
sampel bakteri dari koloni, akuadest, kristal violet, larutan iodine, alcohol 95%
atau aseton, safranin, minyak imersi, dan KOH 3%.
2.2. Metode
2.2.1. Cara Kerja
a. Metode Streak dan Spread Plate
Metode streak plate adalah metode untuk penempatan mikroorganisme
pada permukaan media padat menggunakan kawat ose (loop). Sebelum
digunakan kawat ose distrerilisasi terlebih dahulu dengan dibakar di lampu
Bunsen sampai membara. Setelah itu kawat ose dibiarkan sampai dingin dan
dimasukkan ke dalam sampel. Kawat ose digerakkan perlahan dalam sampel
untuk meningkatkan peluang semua jenis mikroorganisme yang ada untuk
menempel pada kawat ose tersebut. Setelah itu kawat ose digunakan untuk
69
melakukan pola goresan pertama di permukaan media agar. Kawat ose
disterilisasi lagi dan digunakan untuk membuat pola goresan kedua. Kegiatan
ini diulang sampai pola goresan terakhir.
Metode spread plate, dalam metode ini suspensi mikroorganisme dengan
volume dituangkan di atas permukaan media padat. Setelah itu dengan
menggunakan spreader atau hockey stick, suspensi mikroorganisme diratakan
di atas permukaan media.
b. Inokulasi dan Isolasi Bakteri
Sampel usus ikan mujair diambil dari tubuh ikan dengan gunting dan
pinset, kemudian sampel dimasukan ke dalam wadah yang telah disterilkan
untuk di inokulasi bakteri dengan metode streak plate. Pertama-tama jarum ose
dibakar sampai membara kemudian ose didinginkan dengan cara
menyentuhkannya pada permukaan media yang akan digunakan. Saat masih
panas maka ose akan membuat bagian media yang tersentuh menjadi leleh. Ose
dipastikan sudah dingin dengan menyentuhkannya pada bagian lain di
permukaan, ose yang telah dingin tidak melelehkan media padat. Selanjutnya
ujung jarum ose dimasukkan pada sampel usus ikan mujair, ose digoreskan
pada permukaan media dengan pola sesuai kemampuan. Setelah itu ose
dibakar dan didinginkan Kembali untuk goresan berikutnya.
c. Pengamatan Karakteristik Morfologi Bakteri
Bentuk umum, bentuk tepi, dan elevasi koloni bakteri yang diperoleh dari
kultur murni diamati. Kaca pembesar atau sistem zoom pada kamera
70
digunakan jika diperlukan. Kemudian karakteristik morfologi koloni
ditentukan.
d. Pengamatan Sifat Gram
Pada pewarnaan gram, preparat bakteri digenangi dengan larutan kristasl
violet (Gram A) selama 1 menit. Kemudian preparat dicuci dengan air mengalir
(dari kran air sumur, dengan aliran kecil). Selanjutnya pada Gram B preparat
digenangi dengan larutan iodine selama 1 menit, kemudian preparat dicuci
dengan air mengalir. Setelah itu pewarna dilutuhkan dengan alcohol 95% atau
aseton (Gram C) selama 10-15 detik atau sampai pewarna tidak liruh dalam
jumlah banyak, segera cuci dengan air mengalir. Selanjutnya pada Gram D
preparat digenangi dengan safranin selama 30 detik, kemudian preparat dicuci
dengan air mengalir. Setelah itu preparat dibiarkan dalam kondisi suhu ruang
hingga kering. Preparat diamati dengan mikroskop perbesaran 100x (objective)
dengan minyak imersi. Kemudian kelompok Gram dari isolate bakteri yang
diperoleh ditentukan berdasarkan warna sel , diamati dan dicatat bentuk sel
isolate bakteri yang diperoleh.
Pada uji gram dengan KOH 3%, kaca preparat dibersihkan lalu ditetesi
sedikit larutan KOH 3% di atas permukaan kaca preparat. Selanjutnya bakteri
secara aseptis diambil menggunakan ose dari satu koloni bakteri dan
didekatkan pada tepi tetesan KOH 3%. Bakteri tersebut dicampurkan dengan
71
sedikit larutan KOH 3% dan diamati apakah terbentuk lendir (Gram negative)
atau tidak (Gram positif).
2.2.2. Waktu dan tempat
Praktikum mikrobiologi acara ini dilaksanakan pada tanggal 17 Mei 2022 pukul
09.00-11.00 dan dilanjutkan pada tanggal 18 Mei 2022 pukul 13.00-14.00 di
Laboratorium Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Jenderal
Soedirman.
72
3.1. Hasil
Tabel 1. Hasil Inokulasi Sampel Bakteri usus Ikan Mujair
No. Metode Inokulasi Hasil Inokulasi Keterangan
1. Streak plate Tumbuh Koloni
Tabel 2. Morfologi Koloni Bakteri
No Identifikasi Morfologi Koloni

1  Bentuk Koloni Circular
 Elevasi Convex
 Bentuk Tepi Entire
2  Bentuk Koloni Irregular
 Elevasi Flat
3  Bentuk Spindle
 Elevasi Umbonate
4  Bentuk Koloni Spindle
 Elevasi Umbonate
Tabel 3. Uji Pewarnaan Gram
No. Gambar Keterangan Gram Bakteri
73
1. Setelah diuji Gram positif
pewarnaan gram
bakteri berubah
warna menjadi ungu
2. Bakteri berubah Gram negatif

warna menjadi merah
setelah dilakukan uji
pewarnaan gram
3 Bakteri berubah Gram positif

warna menjaadi ungu
4 Bakteri berubah Gram positif

warna menjadi ungu
Tabel 4.Uji Gram KOH
No. Hasil Keterangan

1 Positif Tidak terbentuk lendir
4 positif Tidak terbentuk lendir
3.2. Pembahasan
Percobaan kali ini dilakukan untuk inokulasi dan isolasi bakteri. Pada
saat melakukan inokulasi bakteri, menggunakan tiga metode yaitu spread
plate, streak plate dan pour plate. Media yang digunakan sebagai media
74
pertumbuhan bakteri adalah TSA (Trip Soy Agar). TSA merupakan media
umum untuk pertumbuhan mikroorganisme. Cara yang dilakukan untuk
menginokulasi yaitu langkah pertama pada metode spread plate dilakukan
pengenceran sampel air yaitu dengan 0,5 ml sampel air bievlok ditambahkan
pada 4,5 ml larutan fisiologis yang steril. Tujuan dari pengenceran ini adalah
untuk mengurangi kepadatan bakteri yang ada di dalam air. sampel agar saat
dilakukan inokulasi hasilnya tidak ngeblok menjadi satu koloni akibat dari
padatnya bakteri pada suatu sampel.
Setelah dilakukan pengenceran, selanjutnya dilakukan penuangan
dengan metode spread plate. Hal yang paling utama adalah selalu aseptis. Lalu
buka cawan petri yang sudah berisi media agar padat dan masukkan sebanyak
0,1 ml sampel air yang sudah mengalami pengenceran ke dalam cawan petri.
Air sampel diratakan dengan spreader agar koloni bakteri dapat menyebar.
Setelah itu dimasukkan ke dalam inkubator selama 1 x 24 jam. Hasil dari
inokulasi adalah terbentuknya koloni-koloni bakteri yang memenuhi cawan
petri. Pada bagian tengah cawan terlihat koloni yang saling terikat atau
menggerombol. Hal itu dapat dikarenakan masih padatnya koloni yang ada
dalam air sampel pengenceran. Namun pada bagian samping juga terlihat
banyak koloni yang saling terpisah sehingga dapat diidentifikasi bentuk
morfologinya. Koloni yang terlihat umumnya berbentuk circullar dan irregular.
75
Sama seperti metode spread plate, metode yang kedua yaitu metode
streak plate. Metode ini dilakukan dengan menggores mediapadat. Sampel
bakteri yang digunakan berasal dari insang ikan. Langkah awalnya jarum ose
dipanaskan lalu didinginkan dan digunakan untuk mengambil sampel bakteri
pada insang ikan. Setelah sampel bakteri diambil, lalu digoreskan pada media
agar, dan diusahakan jangan sampai sobek. Hasil dari metode ini yaitu
terbentuk koloni bakteri yang mengikuti garis goresan, dan terlihat menyatu
satu sama lain. Hal ini dikarenakan masih terlalu padatnya sampel bakteri yang
digunakan. Sedangkan bakteri yang tumbuh di luar garis goresan dapat
dikarenakan terjadi kontaminasi.
Metode ketiga yang dilakukan adalah metode pour plate. Metode ini
berbeda dengan 2 metode yang sebelumnya karena media yg digunakan masih
dalam bentuk cair. Sampel yang digunakan yaitu I em usus ikan yang
dihaluskan, lalu di letakkan pada cawan petri kosong yang sudah steril.
Apabila sampel sudah dimasukkan, lalu media agar dituang ke dalam cawan
petri dengan ketebalan 2-3 mm. setelah itu dihomogenkan dengan cara
digoyang secara perlahan. Terakhir yaitu didiamkan sampai media agar
mengeras lalu dimasukkan kedalam inkubator selama 24 jam. Hasil yang
didapat yaitu terbentuk banyak koloni pada bagian bawah media, tengah dan
atas. Karena terjadi penghomogenan saat media dalam keadaan cair.
Hal ini sudah sesuai dengan referensi, yaitu pada metode spread plate
terlihat koloni tersebar pada seluruh permukaan cawan. Teknik spread plate
76
(cawan sebar) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan mikroorganisme di
dalam media agar dengan cara menuangkan stok kultur bakteri atau
menghapuskannya di atas media agar yang telah memadat, sedangkan pour
plate kultur dicampurkan ketika media masih cair (belum memadat), Kelebihan
teknik ini adalah mikroorganisme yang tumbuh dapat tersebar merata pada
bagian permukaan agar (Dwidjoseputro, 1998). Metode streak plate
menguntungkan jika ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu, tetapi
memerlukan ketrampilan-ketrampilan yang diperoleh dengan latihan.
Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah.
Inokulum digoreskan di permukaan media agar nutrien dalam cawaan petri
dengan jarum pindah (lup inokulasi).
Diantara garis-garis goresan akan terdapat sel-sel yang cukup terpisah
sehingga dapat tumbuh menjadi koloni (Winami, 1997). Cara penggarisan
dilakukan pada medium pembiakan padat bentuk lempeng. Bila dilakukan
dengan baik teknik inilah yang paling praktis. Dalam pengerjaannya terkadang
berbeda pada masing-masing laboratorium tapi tujuannya sama yaitu untuk
membuat goresan sebanyak mungkin pada lempeng medium pembiakan (Kus
Irianto, 2006).
Dalam percobaan isolasi bakteri, dilakukan dengan metode streak plate.
Metode yang dilakukan sama dengan pada saat melakukan inokulasi metode
streak plate. Perbedaannya hanya terdapat pada sampel yang digunakan. Saat
isolasi, sampel yang digunakan adalah media agar yang sudah ditumbuhi
77
bakteri atau hasil inokulasi. Karena tujuan dari isolasi ini adalah
menumbuhkan kultur bakteri murni. Jadi pada satu cawan diharapkan akan
tumbuh satu jenis bakteri. Hasil dari isolasi bakteri terlihat bakteri yang
mengikuti garis goresan. Karena terlalu padat, jadi koloni bakteri sulit untuk di
identifikasi. Kriteria sampel bakteri yang digunakan untuk isolasi yaitu bakteri
yang dipilih merupakan bakteri koloni yang tidak bergabung dengan koloni
lain karena jika memilih koloni yang bergabung ditakutkan koloni itu berbeda
satu sama lain.
Menurut referensi yang telah didapat, hasil percobaan sudah sesuai.
Kultur mumi merupakan kultur yang sel-sel mikrobanya berasal dari
pembelahan satu sel tunggal. Biakan murni diperlukan karena semua metode
mikrobiologis yang digunakan untuk menelaah dan mengidentifikasi mikroba
termasuk penelaahan ciri-ciri kultur, morfologis, maupun serologis
memerlukan suatu populasi yang terdiri dari satu macam mikroba saja
(Waluyo 2004). Karakteristik koloni bakteri hasil inokulasi merupakan salah
satu bagian dalam identifikasi bakteri. Dalam pemilihan sampel untuk isolasi
bakteri dapat melihat dari morfologi bakteri yang dihasilkan dari inokulasi
yaitu dari bentuk koloni bakteri, warna bakteri, bentuk tepi koloni bakteri
sehingga dihasilkan kultur mumi bakteri (Sutedjo, 1996).
78
4.1. Kesimpulan
Berdasarkan praktikum kali ini dapat disimpulkan bahwa:
1. Cara inokulasi bakteri pada sampel di lingkungan perairan dapat
dilakukan dengan tiga metode diantaranya adalah metode spread plate,
streak plate, dan pour plate.
2. Cara isolasi bakteri dilakukan dengan metode strak plate dan digunakan
sampel dari media agar hasil inokulasi. Pengambilan bakteri untuk
isolasi dipilih salah satu koloni sesuai dengan morfologinya untuk
ditumbuhkan pada media agar yang baru dan hasilnya diperoleh kultur
murni.
3. Cara mengamati dan mengenal karakteristik morfologi koloni bakteri
yaitu dengan mengamati bentuk umum, bentuk tepi, dan elevasi koloni
bakteri yang diperoleh dari kultur murni. Kemudian karkateristik
morfologi koloni ditentukan dengan melihat gambar morfologi bakteri.
4. Cara menentukan sifat gram suatu isolate bakteri dapat dilakukan
dengan dua acara uji gram diantaranya uji perwarnaan gram untuk
membedakan sel bakteri menjadi dua kelompok, yaitu gram positif dan
gram negatif dan uji gram KOH.
79
4.2. Saran
Diharapkan pada praktikum selanjutnya praktikan bekerja sesuai
dengan prosedur yang aseptis, teliti dalam menggores menggunakan ose, serta
menjaga kesterilan alat.
80
DAFTAR PUSTAKA
Dwidjoseputro. 1998. Dasar – Dasar Mikrobiologi. Jakarta : Djambatan.
Irianto, Koes. 2006. Mikrobiologi. Bandung: Yrama Widya
Irianto, koes. 2006. Mikrobiologi Menguak Dunia Mikroorganisme. Jakarta: EGC.
Singleton Paul. 2006. Dictionary of Microbiology and Molecular Biology Third
Edition. John & Sons Inc. : England.
Skou Torben dan Sogaard Jensen Gunnar. 2007. Microbiologi. Forfattern Og
Systeme: England.
Sutedjo, M. 1996. Mikrobiologi Tanah. Jakarta : Rineka Cipta.
Waluyo, L. 2004. Mikrobiologio Umum. Malang : Universitas Muhammadiyah
Malang.
Winarni, D. 1997. Diktat Teknik Fermentasi Program Studi D3 Teknik Kimia.
Surabaya : FTI-ITS.
Yunita, M., Y. Hendrawan, dan R. Yulianingsih. 2015. Analisis Kuantitatif
Mikrobiologi Pada Makanan Penerbangan (Aerofood ACS) Garuda
Indonesia Berdasarkan TPC (Total Plate Count) Dengan Metode Pour
Plate. Jurnal Keteknikan Pertanian Tropis dan Biosistem. 3(3):239.
83
ACARA IV
UJI HIDROLISIS BAKTERI
Disusun Oleh:
KELOMPOK G
AKUAKULTUR B
IntanAdelia L1B021028
Via Angellica S. L1B021074
Asisten:
Deandra Aurel
PURWOKERTO
2022
84
I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Mikroba melakukan proses metabolisme yang merupakan serangkaian
reaksi kimia yang luar biasa banyaknya. Proses ini terdiri atas katabolisme
yang merupakan proses perombakan bahan disertai pembebasan energi (reaksi
eksergonik), dan anabolisme yaitu merupakan proses biosintesis yang
memerlukan energi (reaksi endergonik). Energi yang berasal dari cahaya harus
diubah menjadi energi kimia sebelum digunakan dalam reaksi endergonik
(Yani S. dan Opi T., 2021). Metabolisme bakteri merupakan semua reaksi
biokimia yang terjadi pada sel bakteri, termasuk anabolisme dan katabolisme
yang dikatalisis oleh enzim metabolik. Reaksi kimia yang membebaskan energi
melalui perombakan nutrien disebut reaksi disimilasi atau peruraian yang
merupakan kegiatan katabolik sel, sedangkan reaksi kimia yang menggunakan
energi untuk sintesis dan fungsi-fungsi sel lainnya disebut reaksi asimilasi atau
anabolik. Jadi, reaksi disimilasi menghasilkan energi, dan reaksi asimilasi
menggunakan energi. Proses katabolisme menghasilkan energi dalam bentuk
ATP. Mikroorganisme, terutama bakteri menghasilkan energi melalui
pemindahan elektron, yang dibagi dalam tiga kategori, yaitu produksi energi
secara anaerob, produksi energi secara aerob, dan produksi energi secara
fotosintetik (Meilisa, 2016).
Reaksi metabolisme membutuhkan bantuan enzim tertentu untuk
mengubah suatu senyawa kimia Reaksi metabolisme termasuk dalam reaksi
biokimia yang terdiri reaktan dan produk. Reaktan adalah senyawa yang akan
85
direaksikan, sedangkan produk adalah hasil dari reaksi. Berdasarkan
kebutuhan energinya, reaksi metabolisme dapat dibagi menjadi dua: reaksi
yang membutuhkan energi (katabolisme) dan reaksi yang menghasilkan energi.
Dalam kehidupan, mahluk hidup memerlukan energi yang diperoleh
dari proses metabolisme. Metabolisme adalah suatu ciri yang dimiliki makhluk
hidup yang merupakan serangkaian reaksi kimia di dalam sel. Reaksi-reaksi ini
tersusun dalam jalur-jalur metabolisme yang rumit dengan mengubah molekul-
molekul melalui tahapan-tahapan tertentu. Secara keseluruhan metabolisme
bertanggung jawab terhadap pengaturan materi dan sumber energi dari sel.
Metabolisme terjadi pada semua mahluk hidup termasuk kehidupan mikroba.
(Ameilia Siregar, 2010)
Metabolisme merupakan serentetan reaksi kimia yang terjadi dalam sel
hidup. Dalam metabolisme ada dua fase yaitu katabolisme dan anabolisme.
Secara menyeluruh sebagian besar katabolisme adalah respirasi seluler di mana
glukosa dan bahan bakar organik yang lain dipecah menjadi karbon dan air
dengan membebaskan energi. Energi yang diperoleh disimpan dalam molekul-
molekul organik dan digu nakan untuk melakukan kerja dari sel. Kebalikan
dari katabolisme adalah anabolisme, yang merupakan serangkaian reaksi-
reaksi kimia yang membutuhkan energi untuk membentuk molekul-molekul
besar dari molekul-molekul yang lebih kecil, misalnya pembentukan protein
dari asam amino. (Ameilia Siregar, 2010)
Enzim adalah senyawa organik yang dihasilkan oleh sel-sel hidup. Inilah
sebabnya enzim disebut katalis hayati atau sarana katalitik. Katalis juga
86
menampakkan spesifisitas atau kekhususan. Dikenal dua tipe enzim yaitu
enzim ekstraselular atau eksoenzim (berfungsi di luar sel) dan enzim
intraselular atau endoenzim (berfungsi di dalam sel). Fungsi utama eksoenzim
ialah melangsungkan perubahan-perubahan pada nutrien di sekitarnya
sehingga memungkinkan nutrien tersebut memasuki sel. Enzim intraselular
berfungsi mensintesis bahan selular dan menguraikan nutrien untuk
menyediakan energi yang dibutuhkan oleh sel (Meilisa, 2016). Beberapa metode
dapat digunakan untuk mengidentifikasi suatu bakteri, diantaranya metode
pewarnaan gram, pewarnaan kapsul dan pewarnaan tahan asam. Identifikasi
mikroorganisme yang baru saja diisolasi sangat memerlukan perincian,
deskripsi, dan perbandingan yang sangat rinci dan jelas dengan deskripsi yang
telah dipublikasikan sebelumnya untuk jasad-jasad renik lain yang mempunyai
kesamaan jenis (Pelczar et al., 2008)
Uji biokimia bakteri merupakan suatu metode atau perlakuan yang
dilakukan untuk mengidentifikasi dan mendeterminasi suatu biakan
murni bakteri hasil isolasi melalui sifat fisiologinya. Anggota biokimia ketat
kaitannya dengan metabolisme sel, yaitu selama reaksi kimiawi yang dilakukan
oleh sel yang menghasilkan energi maupun yang menggunakan energi untuk
sintesis komponen- komponen sel dan untuk keaktifan selular, pergerakan.
Karakterisasidan klasifikasi sebagian mikroorganisme seperti bakteri
berdasarkan pada reaksi enzimatik maupun biokimia. Mikroorganisme dapat
tumbuh pada beberapa tipe media yang menghasilkan tipe metabolit yang
dapat dideteksi dengan reaksi selang mikroorganisme dengan reagen test yang
87
dapat menghasilkan perubahan warna reagen. uji biokimia yg dilakukan secara
umum yakni Uji Hidrolisis Pati,Uji Reduksi Nitrat,Uji Peptonasi,Uji Indol,Uji
Fermentasi Karbohidrat. (Petczar, Michael J. dan E.C.S Chan 2010).
1.2. Tujuan
1. Mengetahui cara mengamati dan mengenal karakteristik morfologik
koloni bakteri
2. Mengetahui cara mengamati dan mengenal karakteristik morfologik sel
bakteri
3. Mengetahui cara untuk menentukan sifat Gram suatu isolat bakteri
88
2.1. Materi
2.1.1. Alat
Alat yang digunakan kaca preparat, kaca pembesar, pipet tetes, kawat
ose, bunsen, kamera, bunsen dan kawat ose.
2.1.2. Bahan
Bahan yang digunakan adalah detergen, alkohol 95%, larutan fisiologis
steril, sampel bakteri dari koloni, akuadest, kristal violet, larutan iodine,
alkohol 95% atau aseton, safranin, minyak imersi, KOH 3%
2.2. Metode
2.2.1. Cara Kerja
Diamati bentuk umum, bentuk tepi, dan elevasi koloni bakteri yang
diperoleh dari kultur murni. Gunakan kaca pembesar atau sistem zoom pada
kamera jika diperlukan. Tentukan karakteristik morfologi koloni. Buat preparat
tipis bakteri. Bersihkan kaca preparat dengan deterjen, keringkan, bilas dengan
alkohol 95%, dan keringkan kembali, Letakkan setetes kecil akuadest atau
larutan fisiologis steril pada permukaan kaca preparat ,Ambil sedikit sampel
bakteri dari koloni menggunakan kawat ose secara aseptis, Suspensikan sampel
bakteri pada akuadest atau larutan fisiologis,Jika warna keruhnya sampai
terlihat maka artinya sampel bakteri terlalu banyak dan prosedur perlu
diulang.Lebarkan suspensi bakteri dengan menggunakan kawat ose hingga
sekitar 2 cm2 f. Setelah kering-angin, lewatkan kaca preparat di atas api bunsen
89
2-3 kali hingga ulasan bakteri berwarna putih. Lakukan prosedur pewarnaan
Gram dan pengamatan morfologi sel a. Genangi preparat bakteri dengan
larutan kristal violet (Gram A) selama menit Cuci preparat dengan air
mengalir (dari kran air sumur, dengan aliran kecil) c. Genangi preparat dengan
larutan iodine (Gram B, mordant) selama 1 menit d. Cuci preparat dengan air
mengalir e. Luruhkan pewarna dengan alkohol 95% atau aseton (Gram C)
selama 10-15 detik atau sampai pewarna tidak luruh dalam jumlah banyak,
segera cuci dengan air mengalir f. Genangi preparat dengan safranin (Gram D)
selama 30 detik, Cuci preparat menggunakan air mengalir h. Biarkan preparat
alam kondisi suhu ruang hingga kering Amati preparat dengan menggunakan
mikroskop perbesaran 100x (objective) dengan minyak imersi Berdasarkan
warna sel, tentukan kelompok Gram dari isolat bakteri yang diperoleh Amati
dan catat bentuk sel isolat bakteri yang diperoleh Lakukan uji Gram dengan
KOH (3%) Bersihkan kaca preparat yang disediakan Teteskan sedikit larutan
KOH (3%) di atas permukaan kaca preparat 22 Ambil se ose bakteri secara
aseptis dari satu koloni bakteri dan dekatkan pada tepi tetesan KOH (3%)
Campurkan bakteri tersebut dengan sedikit larutan KOH (3%) dan amati
apakah terbentuk lendir (Gram negatif) atau tidak (Gram positif).
2.2.2. Waktu dan tempat
Praktikum mikrobiologi Uji Hidrolisis dilaksanakan pada hari Selasa-
rabu tanggal 17-18 Mei pukul 09.00 di Laboratorium Fakultas Perikanan dan
Ilmu Kelautan Universitas Jenderal Soedirman.
90
3.1. Hasil
Tabel 1. Perhitungan Diameter Zona Bening
No. Uji Diameter zona Diameter Diameter zona bening –

bening (mm ) koloni (mm) Diameter koloni
1. Proteolitik 53,90 37,98 15, 92
17,11 5,07 12,04
20,06 11,05 9,01
16,75 8,04 8,71
2. Amilolitik 7,29 2,25 5,04
14,52 4,91 9,61
21,02 10,31 10,71
32,42 8,19 24,23
Tabel 2. Perhitungan Indeks Aktivitas Enzim (IAE) dan Persentase Uji
Hidrolisis
No. Uji IAE Persentase (%)

1. Proteolitik 0,419
2,374 38%
0,815
1,083
2. Amilolitik 2,240
1,957 59%
1,038
2,958
3.2. Pembahasan
Hidrolisis adalah dekomposisi kimia menggunakan bantuan air untuk
memisahkan ikatan kimia dari substansinya (Ratna, 2015). Uji hidrolisis berati
pengujian terhadap suatu zat dengan menambahkan akuadest atau air. Asam
yang biasanya digunakan dalam proses hidrolisis yaitu asam asetat, asam
91
fosfat, asam Uji hidrolisis pati merupakan salah satu karakteristik sifat
bikokimia BAL. Uji hidrolisis pati ini digunakan untuk mengetahui
kemampuan suatu isolat BAL dalam menghasilkan enzim amilase. Pengujian
ini dilakukan dengan menggunakan media MRS agar yang ditambahkan
dengan pati sebanyak 1% sebagai sumber karbohidrat.( Dewi,2017)
Klorida dan asam sulfat. Proses hidrolisis akan semakin cepat jika
konsentrasi asam yang digunakan semakin tinggi (Safitri, 2015). Protease
(enzim proteolitik) merupakan enzim yang mampu menguraikan atau
memecah molekul protein. Uji aktivitas proteolitik pada media agar dengan
menggunakan 1% skim milk (Nespolo et al., 2010). Aktivitas proteolitik tampak
dari terbentuk zona bening di sekitar kertas cakram. Uji aktivitas proteolitik
dilakukan selama tujuh hari (Ardiansyah et al., 2021). Enzim protease
ekstraseluler secara alami diproduksi oleh mikroba untuk menghidrolisis
polipeptida dalam media menjadi peptida dan asam amino (Wilson and
Remigio, 2012). Uji aktivitas amilolitik bertujuan untuk mengetahui aktivitas
enzim amilase ekstraseluler pada media agar dengan 1% amilum. Kemampuan
isolat dalam menghasilkan enzim amilase ekstraseluler ditunjukkan terbentuk
zona jernih pada media agar dengan 1% amilum (Sjofjan and Ardyati, 2011). Uji
aktivitas lipolitik dilakukan pada media MRS agar dengan penambahan 2 ml
minyak zaitun dalam 100 ml media MRS agar. Uji aktivitas lipolitik dilakukan
dengan cara kultur cair isolat bakteri fakultatif mixotrofik diinokulasikan ke
kertas cakram lalu ditempatkan pada media MRS agar dengan penambahan 2
ml minyak zaitun. Inkubasi pada suhu 30ºC selama 24-48 jam (Benson, 2001).
92
Selulotik merupakan proses pemecahan selulosa menjadi senyawa atau unit-
unit glukosa yang lebih kecil (Anand et al, 2009). Aktivitas enzim selulolitik
diamati dengan melihat pertumbuhan kapang uji pada media selektif CMC
agar (Susilowati, 2020).
Berdasarkan hasil praktikum uji hidrolisi bakteri pada acara 4 ini di
dapatkan kesimpulan bahwa uji proteolitik diameter zona bening dan diameter
koloni yaitu,Diameter zona bening 1). 53,90mm 2). 17,11mm 3). 20,06mm 4).
16,75mm .Diameter zona koloni 1). 37,98mm 2). 5,07mm 3). 11,05mm 4).
8,04mm .
Lalu pada uji Amilolitik di dapat diameter zona bening dan diameter
koloni yaitu sebagai berikut Diameter zona bening 1). 7,29mm 2). 14,52mm 3).
21,02mm 3). 32,42mm. Diameter koloni 1). 2,25mm 2). 4,91mm 3). 10,31mm 4).
8,19mm
Lalu setelah perhitungan indeks aktivitas enzim (IAE) di dapat pada uji
proteolitik di dapatkan IAE berikut 0,419mm 2,374mm 0,815mm 1,083mm
dengan presetase 38%. Lalu pada uji Amilolitik di dapatkan IAE berikut 2,240
1,957 1,038 2,958 dengan presentase 59%
93
4.1. Kesimpulan
1. Mahasiswa dapat mengetahui cara mengamati dan mengenal
karakteristik morfologik koloni bakteri
2. Mahasiswa dapat mengetahui cara mengamati dan mengenal
karakteristik morfologik sel bakteri
3. Mahasiswa dapat mengetahui cara untuk menentukan sifat gram suatu
isolat bakteri
4.2. Saran
Praktikum ini sudah sangat baik karena praktikan bisa
melaksanakannya secara offline. Acara praktikum juga berjalan dengan baik
dan lancar tanpa terkendala apapun. Semoga kedepannya lebih baik lagi.
94
DAFTAR PUSTAKA
Ardiansyah , Andi Asdar Jaya , Amrullah , Dahlia , Indrayani. 2021.
Karakteristik Probiotik Bakteri Fakultatif Mixotrofik yang Diisolasi dari
Tambak Udang. Jurnal Perikanan dan Ilmu Kelautan, 2(2):112-117
Pelczar, Michael, J., dan Chan, E. C. S. (2008). Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid I. UI
Press
Ratna dan Yulistiani. 2015. Pembuatan Gula Cair dari Pati Singkong Dengan
Menggunakan Hidrolisis Enzimatis . Jurnal Fluida, 11(2):9-14
Sjofjan, O. and T. Ardyati. 2011. Extracellular Amylase Activity of Amylolytic
Bacteria Isolated from Quail’s (Coturnix japonica) Intestinal Tract in Corn
Flour Medium. International Journal of Poultry Science, 10 (5) : 411-415
Suhartono dan Wiwit Artika. 2017. Isolasi dan uji aktivitas protease dari
aktinobakteri isolat lokal (AKJ-09) Aceh. Bioleuser, 1(3):116-120
Wilson, P. and Z. Remigio. 2012. Production and Characterisation of Protease
Enzyme Produced by a Novel Moderate Thermophilic Bacterium
(EP1001) Isolated from an Alkaline Hot Spring, Zimbabwe. African
Journal of Microbiology Research, 6 (27) : 5542-5551.
95
TABEL KINERJA KELOMPOK
No Nama NIM Tugas Praktikan saat Praktikum &

Pengerjaan Laporan
1. Adil Fatwa Syabana L1B021014 - Memperhatikan asisten dalam
menjelaskan acara 1 dan 2 (cara kerja
alat praktikum) dan mempraktekannya
- Melakukan sterilisasi dan inokulasi
isolasi bakteri pada acara 3 dan 4
- Mengerjakan hasil dan kesimpulan
acara 1
- Mengerjakan cover dan pendahuluan
acara 2
- Mengerjakan materi dan metode
acara 3
- Mengerjakan daftar pustaka, edit,
perhitungan acara 4
2. Intan Adelia L1B021028 - Memperhatikan asisten dalam
- Mengerjakan pembahasan acara 1
acara 2
acara 3
acara 4
3. Rena Wulandari L1B021036 - Memperhatikan asisten dalam
96
- Sebagai notulensi pada acara 3 dan 4
acara 1
- Mengerjakan daftar pustaka dan edit
acara 2
acara 4
4. Via Angelica S L1B021074 - Pada acara 1 dan 2 praktikan
mengikuti praktikum online
acara 1
acara 3
acara 4
5. Tania Isma W L1B021094 - Memperhatikan asisten dalam
- Melakukan bedah ikan pada acara 3
dan 4
acara 1
acara 2
acara 3
97

Laporan Praktikum Mikrobiologi Akuatik - Kelompok G - Kelas B - Akuakultur

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Praktikum Mikrobiologi Akuatik - Kelompok G - Kelas B - Akuakultur

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN PRAKTIKUM

Adil Fatwa S L1B021014

Deandra Aurel Azeli

PROGRAM STUDI AKUAKUKULTUR

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN

Daftar Isi ........................................................................................................................ ii

Cover Acara 1 ................................................................................................ 1

Daftar Pustaka ......................................................................................................... 32

Cover Acara 2 ............................................................................................................... 33

Daftar Pustaka ......................................................................................................... 57

Daftar Pustaka ......................................................................................................... 82

Cover Acara 4 ............................................................................................................... 84

Tabel Kinerja Kelompok........................................................................................99

PROGRAM STUDI AKUAKULTUR

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN

1.1. Latar Belakang

Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari tentang mikroorganisme

terkandung di dalam mikroorganisme. Dalam meneliti mikroorganisme

diperlukan teknik atau cara–cara khusus untuk mempelajarinya serta untuk

bekerja pada skala laboratorium untuk meneliti mikroorganisme baik sifat

maupun karakteristiknya, tentu diperlukan adanya pengenalan alat yang akan

digunakan serta mengetahui cara penggunaan alat – alat yang berhubungan

dengan penelitian unutk memudahkan dalam melakukan penelitian

yang digunakan memiliki teknik sterilisasi yang berbeda (Dwidjoseputro,

Terdapat 5 teknik dasar bekerja di laboratorium mikrobiologi yang

penting untuk dipahami, anatara lain inokulasi, isolasi, inkubasi, eksaminasi,

dan identifikasi. Inokulasi disebut juga dengan menanam mikroorganisme

penanaman mikroba adalah suatu pekerjaan memindahkan mikroba dari

tetap steril, hal ini untuk menghindari terjadinya kontaminasi (Dwidjoseputro,

spread plate. Isolasi merupakan kegiatan memisahkan mikroorganime dari

campurannya (koloni) untuk diperoleh kultur murni (Sudjadi, 2006). Kultur

sama. Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan atau memindahkan

mikroba tertentu dari lingkungannya di alam dan menumbuhkannya di media

buatan sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni (Mikdarullah,

2017). Inkubasi adalah proses pertumbuhan biakan bakteri atau perbanyakan

biakan bakteri dengan menyediakan keadaan lingkungan yang sesuai (Javetz,

et al., 1990). Inkubasi dilakukan menyesuaikan dengan habitat asli

mikroorganisme saat dilakukan isolasi. Keadaan lingkungan yang perlu

diperhatikan saat melakukan inkubasi diantaranya suhu, pH, salinitas,

konsentrasi oksigen dll. Eksaminasi merupakan teknik dasar yang meliputi

pengujian dan pengamatan kultur mikroorganisme yang telah dimurnikan

ciri dan sifat-sifat mikroorganisme. Identifikasi merupakan kegiatan untuk

mengenali dan mendeterminasi suatu biakan murni bakteri hasil isolasi.

Identifikasi dilakukan diawali dengan mengamati sifat-sifat morfologi, fisiologi

dan genetika (Murray, 2005). Output identifikasi adalah untuk menentukan

dilakukan sebelumnya atau melalui buku kunci determinasi.

1. Mengenal alat-alat dalam teknik dasar mikrobiologi dan cara

2. Mengetahui cara mempersiapkan alat-alat yang digunakan dalam

teknik dasar mikrobiologi.

mikropipet, lampu Bunsen, incubator, mikroskop, oven, vortex, erlenmeyer,

dan objek glass atau cover glass.

2.2.1. Cara kerja

Perhatikan setiap alat yang disediakan. Kemudian, gunakan jarum ose,

kertas payung sesuai cara yang akan ditunjukkan asisten. Kemudian,

Masukkan petridish pada autoclave dan tutup autoclave, letakkan autoclave di

jarum penunjuk temperature, saat jarum menunjukkan temperatur 121oC,

2.2.2. Waktu dan Tempat

Praktikum mikrobiologi pengenalan alat dan persiapan dilaksanakan

pada tanggal 24 April 2022 pukul 09.00 WIB di Laboratorium Fakultas

Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Jenderal Soedirman.

Tabel 1. Nama Alat