UJI PERBANDINGAN EFEKTIVITAS TONIKUM MADU HITAM

DENGAN MADU COKLAT PADA MENCIT PUTIH JANTAN

DENGAN METODE ROTAROD

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Guana Menyusun Tugas Akhir

Skripsi Pada Jurusan Farmasi

************

DISUSUN OLEH:

WIDIYA AINUN ISLAMMIYAH

NIM. 01021255

PROGRAM PENDIDIKAN STRATA 1 (S.1) FARMASI

UNIVERSITAS YAYASAN PENDIDIKAN IMAM BONJOL

MAJALENGKA

2023
 BIODATA PENULIS

NAMA : WIDIYA AINUN ISLAMMIYAH

NIM : 0102155

TAHUN MASUK : 2021

TEMPAT LAHIR : JAYAPURA

ALAMAT : APO CAMAT

TELP : 081263666687

STATUS : BELUM MENIKAH

RIWAYAT PENDIDIKAN :

 TK TRIKORA 2 JAYAPURA 2004-2006

 SDN INPRES 1 APO JAYAPURA LULUSAN TAHUN 2006 - 2012

 SMP HIKMAH YAPIS JAYAPURA LULUSAN TAHUN 2013 - 2015

 MA DDI JAYAPURA LULUSAN TAHUN 2016 - 2018

 UNIVERSITAS NAHDLATUL WATHAN MATARAM LULUSAN

TAHUN 2018-2021

i
 LEMBAR PERSETUJUAN

Usulan Judul Penelitian : Uji Perbandingan Efektivitas Tonikum Madu Hitam

dengan Madu Coklat Pada Mencit Putih Jantan
Dengan Metode Rotarod
Nama Mahasiswa : Widiya Ainun Islammiyah
NIM : 01021255
Program Studi : S-1 Farmasi
Tanggal :

Telah disetujui

Pembimbing Utama Pembimbing Serta

apt. Ahmad Azrul Zuniarto., M.Farm apt. Meita Ayuditiyawati., M.farm

NIDN: 0426066902

Mengetahui
Dekan Farmasi Universitas YPIB Majalengka

apt. Ahmad Azrul Zuniarto., M.Farm

NIDN: 0426066902

ii
 KATA PENGANTAR

Bismillahirohmanirrahim

Assalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh.

Segala puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala

limpahan rahmat, hidayah, serta karunia-Nya yang telah memberikan kemudahan

sehingga penulis dapat menyelesaikan Proposal yang berjudul “ UJI

PERBANDINGAN EFEKTIVITAS TONIKUM MADU HITAM DENGAN

MADU COKLAT PADA MENCIT PUTIH JANTAN DENGAN METODE

ROTAROD” yang disusun sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan

program strata 1 (S1) Fakultas Farmasi YPIB Majalengka.

Terwujudnya Proposal ini tidak terlepas dari bantuan dan bimbingan dari

semua pihak, untuk itu pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terima

kasih kepada

1. Bapak H. Satmaja, BA selaku Ketua Pembina Yayasan Pendidikan

Imam Bonjol Cirebon.

2. Bapak Jejen Nurbayan, S.sos, selaku Ketua Yayasan Pendidikan Imam

Bonjol.

3. Bapak Apt.,H. Ahmad Azrul Zurianto., M.Farm Selaku Dekan Fakultas

Farmasi Universitas YPIB.

iii
 4. Bapak Apt.,H. Ahmad Azrul Zurianto., M.Farm selaku pembimbing

Utama yang memberi petunjuk dan bimbingan dalam menyelesaikan

Skripsi ini.

5. Ibu Apt. Meita Ayuditiyawati., M.Farm Selaku pembimbing Serta yang

memberi petunjuk, pengarahan, saran, dan bimbingan dalam

menyelesaikan Skripsi ini.

6. Kedua Orang tua, beserta keluarga besar yang telah memberi semangat,

kasih sayang, do’a serta dukungan penuh baik secara moral maupun

materil.

7. Seluruh Dosen dan Staf Fakultas Farmasi Universitas YPIB.

8. Rekan dan Teman-teman Fakultas Farmasi Universitas YPIB atas

kerjasama dan kebersamaan selama mengikuti pendidikan di Fakultas

Farmasi Universitas YPIB.

Semoga amal kebaikan dari semua pihak tersebut akan selalu mendapat

ridho dan pahala dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa penyusunan Skripsi

ini masih jauh dari sempurna, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan

kritik yang membangun dari semua pihak agar Skripsi ini dapat menjadi lebih

baik dan bermanfaat.

Wassalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh.

Cirebon, Oktober 2022

Penulis

(Widiya Ainun Islammiyah)

iv
 DAFTAR ISI

BIODATA PENULIS..............................................................................................i

LEMBAR PERSETUJUAN..................................................................................ii

KATA PENGANTAR..........................................................................................iii

DAFTAR ISI...........................................................................................................v

BAB I.......................................................................................................................1

PENDAHULUAN...................................................................................................1

1.1 Latar Belakang..........................................................................................1

1.2 Pembatasan Masalah.................................................................................3

1.3 Identifikasi Masalah..................................................................................3

1.4 Rumusan Masalah.....................................................................................4

1.5 Tujuan Penelitian.......................................................................................4

1.6 Manfaat Penelitian.....................................................................................5

1.6.1 Bagi Peneliti.......................................................................................5

1.6.2 Bagi Universitas YPIB Majalengka...................................................5

1.6.3 Bagi Institusi......................................................................................5

1.7 Tempat Dan Waktu Penelitian..................................................................6

1.7.1 Tempat Penelitian..............................................................................6

v
 1.7.2 Waktu Penelitian................................................................................6

1.8 Hipotesa.....................................................................................................7

BAB II.....................................................................................................................8

TINJAUAN PUSTAKA.........................................................................................8

2.1 Madu..........................................................................................................8

2.1.1 Pengertian Madu................................................................................8

2.1.2 Karakteristik Madu............................................................................9

2.1.3 Kualitas Madu..................................................................................12

2.1.4 Komposisi Madu..............................................................................14

2.1.5 Manfaat Madu..................................................................................16

2.1.6 Definisi Madu Hitam.......................................................................17

2.1.7 Kandungan Madu Hitam..................................................................17

2.1.8 Khasiat Dan Manfaat Madu Hitam..................................................19

2.1.9 Definisi Madu Coklat.......................................................................19

2.1.10 Manfaat Madu Coklat Hutan............................................................20

2.1.11 Komposisi dan kandungan madu coklat hutan................................22

2.2 Tonikum..................................................................................................23

2.2.1 Metode Uji Tonikum........................................................................24

2.2.2 Jenis-jenis Tonikum.........................................................................25

2.3 Kafein......................................................................................................26

vi
 2.4 Mencit (Mus musculus L.).......................................................................29

2.4.1 Klasifikasi Mencit (Mus musculus L.,)............................................31

2.4.2 Karakteristik Mencit (Mus musculus.,L)..........................................31

2.1 Metode Rotarod...................................................................................32

BAB III..................................................................................................................36

METODOLOGI PENELITIAN.........................................................................36

3.1 Objek Penelitian......................................................................................36

3.1.1 Populasi............................................................................................36

3.1.2 Sampel..............................................................................................36

3.1.3 Jumlah Media Eksperimen...............................................................36

3.1.4 Variabel Penelitian dan Operasional Variabel.................................37

3.2 Metodologi Penelitian.............................................................................40

3.3 Desain Penelitian.....................................................................................40

3.4 Alat dan Bahan Penelitian.......................................................................41

3.5 Langkah Kerja.........................................................................................42

3.5.1 Pengumpulan Bahan........................................................................42

3.5.2 Uji Kualitas Madu............................................................................42

3.5.3 Uji Efektivitas Madu Sebagai Tonikum...........................................43

3.6 Sumber Data dan Pengumpulan Data......................................................46

3.7 Teknik Pengolahan dan Analisis Data.....................................................47

vii
DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................54

viii
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Pengobatan secara tradisional sampai saat ini masih tetap digunakan dan

dipercaya oleh masyarakat salah satunya adalah madu. Sejak jaman dulu madu

sudah digunakan untuk pengobatan seperti luka, demam, panas dalam dan

dicampur dengan bahan makanan untuk menambah kebugaran tubuh. Secara

umum madu berkhasiat untuk menghasilkan energi, meningkatkan daya tahan

tubuh, dan meningkatkan stamina (Suranto, 2007)

Madu hitam berasal dari lebah hutan yang menghisap sari pohon

mahoni. Dari sisi rasa dan tekstur, madu hitam memiliki campuran rasa pahit

manis dengan warna lebih pekat dibandingkan madu lain. Madu hitam juga

dikenal dapat meningkatkan stamina (Suranto, 2007). Sementara madu coklat

(asli) adalah suatu zat kental manis yang dibuat oleh lebah dengan jalan

fermentasi dari nektar bunga di dalam saluran pencernaan lebah setelah

mengalami perubahan. (Suranto, 2004) menyatakan bahwa madu berkhahasiat

untuk menghasilkan energi, meningkatkan daya tahan tubuh dan

meningkatkan stamina. Madu juga mengandung unsur makanan yang luar

biasa walaupun kadarnya kecil, sehingga bisa digunakan sebagai tonik alami.

Madu memiliki 40% fruktosa dan 30% glukosa. Sementara gula mengandung

50% fruktosa maupun glukosa. (Baskharaa, 2008).

1
 2

Karakteristik fisik dan kimia madu berbeda-beda tergantung pada

faktor internal dan eksternal. Faktor internal diantaranya jenis bunga (Nayik,

G.A. dan Nanda, 2015). Faktor eksternal seperti musim (Saxena, S.,

Gautam.S.dan Sharma, 2010), kondisi tanah atau letak geografis (Buba

dkk.,2013), proses pengolahan dan penyimpanan (Babarinde, G.O.,

Babarinde, S.A., Adegbola, D.C Dan Ajayeoba, 2011).

Agama Islam telah mengajarkan banyak metode pengobatan

sebagaimana diajarkan oleh Rasulullah SAW. Salah satunya adalah

pengobatan dengan media madu. Rasulullah SAW bersabda, hendaknya kalian

menggunakan dua obat, yaitu: Madu dan Al-Qur’an. Madu adalah obat untuk

segala jenis penyakit, sedangkan Al-Qur’an adalah obat untuk penyakit yang

ada dalam jiwa. Allah berfirman dalam Q.S An-Nahl (16:68) yang berbunyi :

ِ َ‫ك ِإلَى ٱلنَّحْ ِل َأ ِن ٱتَّ ِخ ِذى ِمنَ ْٱل ِجب‬

ِ ‫ال بُيُوتًا َو ِمنَ ٱل َّش َج ِر َو ِم َّما يَع‬
َ‫ْر ُشون‬ َ ُّ‫ى َرب‬Fٰ ‫َوَأوْ َح‬

‘Dan Tuhanmu mewahyukan kepada lebah: Buatlah sarang-sarang di bukit-

bukit, di pohon-pohon kayu, dan di tempat-tempat yang dibikin

manusia”(Ihsan, 2011)

Tonikum adalah suatu obat yang dapat menambah tenaga atau energi

pada tubuh. Efek tonikum digolongkan kedalam golongan psikostimulansia.

Senyawa psikostimulansia tersebut dapat menghilangkan rasa kelelahan.

Sejauh ini penggunaan madu sebagai tonikum atau penguat tenaga didasarkan

atas pengalaman empiris sehingga perlu dilakkukan penelitian untuk mendapat

data ilmiah mengenai efek sebagai tonikum atau penguat tenaga.

 3

Menurut penelitian Dian Yanti dengan judul “Uji Perbandingan

Efektivitas Tonikum Berbagai Madu Sumbawa Pada Mencit Putih Jantan

(Mus musculus L.,)” mengatakan pemberian madu hitam Sumbawa dengan

dosis 0,5ml/20gBB mempunyai efektivitas paling baik dibandingkan dengan

madu kuning dan madu putih pada mencit putih jantan (Mus musculus L.,)

Adanya perbedaan karakteristik ini menjadi dasar peneliti tertarik

untuk melakukan pengujian efek tonik dari madu hitam dan madu coklat

dengan menggunakan metode Roratord

1.2 Pembatasan Masalah

Adapun batasan masalah pada penelitian ini yaitu:
1) Menguji perbandingan efektivitas tonikum madu hitam dan madu

coklat pada hewan uji mencit (Mus musculus) putih jantan Galur

Wistar dengan metode Rotarod dengan dosis 0,2 ml/20gBB, 04

ml/20gBB, 0,6 ml/20gBB

2) Madu hitam dan madu coklat yang berasal dari Kota Jayapura, Papua.

3) Uji madu meliputi, warna, rasa, aroma, pH dan kadar air (SNI)

4) Uji stabilitas madu menggunakan metode Cycling Test.

1.3 Identifikasi Masalah

Pada penilitian kali ini, penulis menggidentifikasi beberapa masalah

sebagai berikut:

1) Menguji efektivitas tonikum madu hitam dengan madu coklat pada

mencit putih jantan (Mus musculus) Galur Wistar dengan metode

Rotarod.
 4

2) Mengetahui perbandingan efektivitas tonikum madu hitam dan madu

coklat pada mencit putih jantan (Mus musculus) Galur Wistar dengan

metode Rotarod.

3) Menentukan Standar Nasional Indonesia madu hitam dan madu coklat.

4) Menguji stabilitas madu hitam dan madu coklat menggunakan metode

Cycling Test.

1.4 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang masalah di atas dapat dirumuskan masalah

sebagai berikut :

1) Apakah mempunyai efektivitas tonikum madu hitam dengan madu

coklat pada mencit putih jantan yang diuji dengan metode Rotarod ?

2) Apakah terdapat perbandingan efektivitas tonikum pada madu hitam

dengan madu coklat pada mencit putih jantan yang diuji menggunakan

metode Rotarod?

3) Apakah madu hitam dan madu coklat memenuhi persyaratan Standar

Nasional Indonesia?

4) Apakah uji stabilitas madu hitam dan madu coklat menggunakan

metode Cycling Test?

1.5 Tujuan Penelitian

1. Untuk mengetahui efektivitas tonikum madu hitam dengan madu

coklat pada mencit putih jantan yang diuji dengan metode Rotarod.
 5

2. Untuk mengetahui perbandingan efektivitas tonikum madu hitam

dengan madu coklat pada mencit putih jantan (Mus musculus) Galur

Wistar dengan metode Rotarod.

3. Untuk mengetahui Standar Nasional Indonesia madu hitam dan madu

coklat.

4. Untuk mengetahui stabilitas madu hitam dan madu coklat dengan

metode Cycling Test.

1.6 Manfaat Penelitian

1.6.1 Bagi Peneliti

1) Untuk menambah pengetahuan dan wawasan peneliti tentang uji

efek tonikum

2) Peneliti dapat menerapkan ilmu-ilmu yang telah didapat selama

pendidikan di Univeritas YPIB Majalengka

3) Peneliti mendapatkan pengalaman belajar dalam kegiatan penelitian.

1.6.2 Bagi Universitas YPIB Majalengka

Sebagai bahan referensi untuk keperluan penelitian selanjutnya

tentang madu hitam dan madu coklat

1.6.3 Bagi Institusi

Dapat meningkatkan wawasan masyarakat pada umumnya tentang

khasiat yang terkandung dalam madu sebagai efek tonikum.

 6

1.7 Tempat Dan Waktu Penelitian

1.7.1 Tempat Penelitian

Penelitian Ini Dilaksanakan Di Laboratrium Farmakologi

Universitas YPIB Majalengka yang beralamat di Jalan Perjuangan

No. 7 Majasem, Kota Cirebon.

1.7.2 Waktu Penelitian

Tabel 1.1 Waktu Penelitian

2022 2023
NO Mar Mei Sep
Waktu Penelitian
Feb s/d s/d s/d Desc Jan Feb Marc
Apr Agt Oct
1 Pengajuan judul
skripsi 
2 Penelusuran
Pustaka  
3 Penyusunan
proposal 
4 Seminar proposal

5 Penelitian 

6 Analisa dan
pengumpulan 
data
7 Penyusunan
skripsi 
8 Sidang skripsi

 7

1.8 Hipotesa
Hipotesa dalam penelitian ini antaranya adalah sebagai berikut:

Ho : Madu hitam dan madu coklat tidak ada perbedaan efektivitas

tonikum pada mencit putih jantan dengan metode Rotarod.

Ha : Madu hitam dan madu coklat ada perbedaan efektivitas tonikum

pada mencit jantan yang dengan metode Rotarod.

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Madu

2.1.1 Pengertian Madu

Madu adalah cairan alami yang umumnya memiliki rasa manis,

dihasilkan oleh lebah madu, dari sari bunga tanaman (floral nectar) atau

bagian lain dari tanaman (extra floral nectar) atau ekskresi serangga

yang berkhasiat dan bergizi tinggi (Anonim b., 2009)

Madu tersusun atas beberapa senyawa gula seperti glukosa dan

fruktosa serta sejumlah mineral seperti magnesium, kalium, kalsium,

natrium, klor, belerang, besi dan fosfat. Madu juga mengandung

vitamin B1, B2, C, B6 dan B3 yang komposisinya berubah-ubah sesuai

dengan kualitas nektar dan serbuk sari. Di samping itu, dalam madu

terdapat pula sejumlah kecil tembaga, yodium, dan seng serta beberapa

jenis hormon (Yahya. G., 2003).

Di Amerika Serikat, sekitar 12.500 ton madu dipanen setiap

tahunnya. Kebanyakan dari jumlah tersebut digunakan sebagai bahan

pemanis. Madu juga memiliki unsur-unsur bahan pengawet dan secara

empiris telah digunakan sebagai bahan antiseptik dan antibiotik (Walji,

2001).

8
 9

2.1.2 Karakteristik Madu

Madu memiliki keunggulan karena karakteristiknya,

karaktekristik madu adalah sebagai berikut :

1. Kekentalan (Viskositas)

Madu yang baru dipanen biasanya terlihat sangat kental.

Kekentalan ini tergantung dari kadar air dan temperatur,

bilamana suhu meningkat biasanya madu akan lebih cair dan

kembali mengental saat suhu kembali turun (Suranto, 2007)

2. Kepadatan (Densitas)

Madu memiliki kepadatan yang ditunjukkan dengan gaya

gravitasi sesuai berat jenis. Berat jenis madu lebih besar

dibandingkan air (Suranto, 2007)

3. Sifat menarik air (Higroskofonis)

Madu yang kaya akan fruktosa bersifat sangat higrofonis. Madu

akan menyerap kelembapan ketika wadah tidak tertutup dengan

baik. Hal ini yang dapat menyebabkan peningkatan kadar air

dan meningkatkan terjadinya fermentasi (Suranto, 2007)

4. Tegangan permukaan

Tegangan permukaan madu bervariasi tergantung sumber

nektarnya dan berhubungan dengan kandungan zat koloid. Sifat

tegangan permukaan yang rendah dan kekentalan yang tinggi

membuat madu memiliki ciri khas membentuk busa (Suranto,

2007)

5. Suhu
 10

Kapasitas penyebaran panas oleh madu bervariasi dari 0.56-

0.73 cal/g/derajat celcius sesuai dengan komposisi dan bentuk

kristalisasi. Sifat menghantar panas dan kekentalan yang tinggi

menyebabkan madu lebih muda panas (overheating) (Bogdanov,

2011)

6. Warna

Warna madu cair bervariasi mulai dari jernih sampai tidak

berwarna seperti air dan dari kuning kecoklatan sampai

berwarna hitam. Kebanyakan madu berwarna kuning

kecoklatan. Warna madu dipengaruhi oleh sumber nektar,usia

madu,dan penyimpanan. Madu yang berasal dari pengumpulan

banyak nektar dengan proses yang cepat akan berwarna lebih

terang dari pada yang prosesnya lambat. Warna madu juga

ditentukan oleh sub specsies lebah dan kualitas sarang madu

(Suranto, 2007)

7. Aroma

Aroma madu yang khas disebabkan oleh kandungan zat

organiknya yang mudah menguap. Aroma madu bersumber dari

zat yang dihasilkan sel kelenjar bunga yang tercampur dalam

nektar dan juga karena proses fermentasi. Zat aromatik madu

bisa berupa minyak esensial, campuran karbonil, ikatan alkohol,

dan ikatan eter. Jika penyimpanan madu tidak baik, maka aroma

madu akan menguap dan menghilang (Suranto, 2007)

 11

8. Rasa

Rasa manis dari madu bergantung dari kadar fruktosa dan

kandungan asam organiknya. Sebagian besar madu memberikan

rasa manis, beberapa tanaman menghasilkan madu yang berasa

pahit. Rasa madu bisa berubah tergantung suhu dan kelembaban

udara (Suranto, 2007)

9. Sifat Mengkristal

Kristalisasi madu merupakan proses yang alami, proses ini

tergantung pada kadar gula, suhu, kadar air, dan waktu

penyimpanan. Semakin tinggi kadar glukosa,semakin cepat

terjadinya kristalisasi. Madu dengan kadar glukosa lebih dari

28% mengkristal lebih cepat, suhu yang optimum untuk

terjadinya kristalisasi adalah antara 10-18 derajat celsius,

sedangkan kadar air yang optimum untuk terjadinya kristalisasi

pada madu adalah 15-18 derajat celsius. Adanya inti kristal pada

madu juga dapat menyebabkan terjadinya kristalisasi (Bogdanov,

2011)

Selain berdasarkan sumber nektar maupun bentuknya, madu juga

dapat diklasifikasi berdasarkan letak geografis produksi madu. Di

Indonesia jenis madu yang dipasarkan sering diberi nama

 12

menurut daerah asalnya, misal Madu Sumbawa, Madu

Kalimantan, Madu Sulawesi dan sebagainya (Suranto, 2007)

2.1.3 Kualitas Madu

Kualitas madu ditentukan oleh beberapa hal diantaranya waktu

pemanenan madu, kadar air, warna madu, rasa dan aroma madu.

Waktu pemanenan madu harus dilakukan pada saat yang tepat, yaitu

ketika madu telah matang dan sel-sel madu mulai ditutup oleh lebah.

Selain itu kadar air yang terkandung dalam madu juga sangat

berpengaruh terhadap kualitas madu. Madu yang baik adalah yang

mengandung kadar air sekitar 17-21 persen (Sihombing, 1997)

Warna merupakan salah satu kriteria mutu madu. Biasanya warna

madu cenderung akan mengikuti tanaman penghasil nektarnya,

misalnya madu dari tanaman lobak akan berwarna putih seperti air,

madu dari tanaman akasia dan apel akan berwarna kuning terang,

sedangkan madu dari tanaman lime akan berwarna hijau terang. Selain

itu, madu yang disimpan dalam jangka waktu yang relatif lama maka

warnanya akan cenderung menjadi lebih tua (Hamad., 2007)

Cita rasa madu ditentukan oleh zat yang terdapat dalam madu

diantaranya glukosa, alkaloid, gula, asam glukonat dan prolin. Rasa

dan aroma madu yang paling enak adalah ketika madu baru dipanen

dari sarangnya. Sesudah itu, senyawa-senyawa yang terdapat dalam

madu sedikit demi sedikit akan menguap. Hal ini disebabkan senyawa

yang terdapat dalam madu bersifat volatil (mudah menguap). Karena

 13

itu, untuk menjaga kualitas madu cara memanen dan menyimpan madu

perlu diperhatikan (Suranto, 2004).

Di Indonesia, kualitas madu ditentukan oleh Standar Nasional

Indonesia (SNI) nomor 01-3545-2004 tahun 2004 (Tabel 1). Standar

tersebut merupakan kriteria mutu madu yang ditetapkan oleh Badan

Standarisasi Nasional (BSN) dan merupakan revisi dari Standar

Nasional Indonesia nomor 01-3545-1994.

Tabel 2.1 Syarat Mutu Madu Nasional

Jenis uji Satuan Persyaratan

Aktifitas enzim diastase, DN 3
min. (Diastase Number)
Hidroksimetilfurfural, mg/kg 40
maks.
Air, maks. %b/b 22
Gula pereduksi (dihitung %b/b 60
sebagai glukosa), min.
Sukrosa, maks. %b/b 10
Keasaman, maks. ml NaOH 40
1 N/kg
Padatan yang tak larut %b/b 0.5
dalam air, maks.
Abu, maks. %b/b 0,5
Cemaran logam:
Timbal (Pb), maks. mg/kg 1,0
Tembaga (Cu), maks. mg/kg 5,0
Cemaran arsen (As), maks mg/kg 0,5
(Badan Standarisasi Nasional, 2004)
 14

2.1.4 Komposisi Madu

Zat-zat yang terkandung dalam madu sangatlah kompleks dan

kini telah diketahui tidak kurang dari 181 macam zat yang terkandung

dalam madu. Dari jumlah tersebut karbohidrat merupakan komponen

terbesar yang terkandung dalam madu, yaitu berkisar lebih dari 75%.

Jenis karbohidrat yang paling dominan dalam hampir semua madu

adalah dari golongan monosakarida yang biasanya terdiri levulosa dan

dekstrosa. Levulosa dan dekstrosa mencakup 85%-90% dari total

karbohidrat yang terdapat dalam madu, sisanya terdiri dari disakarida

dan oligosakarida (Sihombing, 1997).

Komposisi terbesar kedua setelah karbohidrat adalah air.

Jumlahnya biasanya berkisar dari 15%-25%. Bervariasinya kadar air

dalam madu disebabkan oleh beberapa hal, diantaranya kelembapan

udara, jenis nektar, proses produksi dan penyimpanan (Suranto, 2007).

Selain dua komponen diatas, madu juga mengandung banyak

mineral baik yang bersifat esensial maupun non esensial. Daftar mineral

yang terkandung dalam madu dapat dilihat pada (Tabel II) (Sihombing,

1997).

Tabel 2.2 Kandungan Mineral Dalam Madu

Esensial Non-essensial

Nama Satuan Nama Satuan

(ppm) (ppm)

Besi (Fe) 2,40 Aluminium (Al) 59,5

 15

Fosfor (P) 35 Antimoni (Sb) 1-2

Kalium (K) 205 Boron (B) 3,5

Kalsium (Ca) 49 Titanium (Ti) 1,36

Khlorin (CI) 52

Magnesium (Mg) 19

Natrium (Na) 18

Silikon (Si) 9

Sulfur (S) 58

Zink (Zn) 1,6

(Sihombing, 1997)

Vitamin- vitamin yang terdapat dalam madu adalah thiamin (B1),

riboflavin (B2), piridoksin (B6), asam askorbat (C), asam pantotenat dan

asam nikotinat. Daftar vitamin yang terkandung dalam madu beserta

jumlahnya dapat dilihat pada tabel 3 (Suranto, 2007).

Tabel 2.3 Kandungan Vitamin Dalam Madu

Nutrisi Unit Jumlah rata-rata dalam

100 gram madu

B1 (thiamin) mg 0,004-0,006

B2 (riboflavin) mg 0,002-0,06

B6 (piridoksin) mg 0,008-0,32

Asam nikotinat (niasin) mg 0,11-0,36

Asam panttotenat mg 0,02-0,11

Vitamin C IU 2,2-2,4
 16

(Suranto, 2007)

Sedangkan enzim penting yang terdapat dalam madu adalah enzim

diastase, invertase, glukosa oksidase, peroksidase dan lipase. Enzim

diastase adalah enzim yang mengubah karbohidrat komplek (polisakarida)

menjadi karbohidrat yang sederhana (monosakarida). Enzim invertase

adalah enzim yang memecah molekul sukrosa menjadi glukosa dan

fruktosa. Sedangkan enzim oksidase adalah enzim yang membantu

oksidasi glukosa menjadi asam peroksida. Enzim peroksidase melakukan

proses oksidasi metabolisme. Semua zat tersebut berguna untuk proses

metabolisme tubuh (Suranto, 2004).

Asam utama yang terdapat dalam madu adalah asam glutamat.

Sedangkan asam organik yang terdapat dalam madu adalah asam asetat,

asam butirat, format, suksinat, glikolat, malat, proglutamat, sitrat dan

piruvat. Dalam madu juga terdapat hormon gonadotropin yang

merangsang alat reproduksi lebah ratu dan membantu dalam proses

pematangan telur (Suranto, 2004),

2.1.5 Manfaat Madu

Dalam dunia kesehatan, madu berkhasiat untuk menghasilkan energi,

meningkatkan daya tahan tubuh dan meningkatkan stamina. Pada zaman

Romawi, para atlet diwajibkan mengonsumsi madu sebelum bertanding.

Efek madu sebagai penambah stamina ini kemungkinan disebabkan oleh

nutrisinya yang lengkap dan merupakan penghasil energi yang unik bagi

manusia. Madu sebagai sumber energi dan nutrisi dibuktikan dengan jumlah
 17

energi yang dikandungnya, yaitu 3280 kilokalori/kg madu yang setara

dengan 50 butir telur ayam, 5,7 liter susu, 25 buah pisang, 40 buah jeruk, 4

kg kentang dan 1,68 kg daging (Suranto, 2007)

Keunggulan lainnya yaitu madu mudah dicerna, hal ini dikarenakan

karbohidrat yang terkandung dalam madu sudah dicerna terlebih dahulu

dalam pencernaan lebah ketika masih berupa nektar (Sarwono, 2003). Selain

itu jika dicampur dengan air hangat, madu dapat berdifusi ke dalam darah

dalam waktu tujuh menit. Molekul gula bebasnya membuat otak berfungsi

lebih baik, karena otak merupakan pengonsumsi gula terbesar.

2.1.6 Definisi Madu Hitam

Madu adalah cairan manis alami yang berasal dari nektar

tumbuhanyang diproduksi oleh lebah madu. Nektar berasal dari bunga

mekar, cairan tumbuhan yang mengalir di daun dan kulit pohon. Setelah

nektar dihisap,lebah akan memfermentasikan dalam perutnya dengan

mengubah sukrosa menjadi glukosa dan fruktosa oleh enzim invertase yang

berasal dari tenggorokan. Madu disimpan di dalam sel-sel sarang kemudian

madu akan mengalami ekstraksi air, pembentukan monosakarida, dan

pengayaan dengan campuran aromatik. Setelah tig01006000000000000a

sampai tujuh hari, lebah menutup sel dengan malam yang mematangkan

madu (Adji, D., 2007).

2.1.7 Kandungan Madu Hitam

Madu mengandung karbohidrat kompleks, air serta komponen minor.

Madu juga banyak mengandung vitamin, mineral, enzim, senyawa organik,

 18

asam amino bebas dan senyawa volatil (Baroni, Maria, V., 2006). Madu

banyak mengandung mineral, baik yang esensial maupun nonesensial.

Setiap madu memiliki kandungan mineral yang berbedabeda yang dapat

dipengaruhi oleh kadar abu yang terdapat pada madu. Kadar abu untuk

madu yakni maksimal 0,5% b/b (Antary P.S.S., Ratnayani, K. &

Laksmiwatu, 2013). Kandungan lain yang terdapat pada madu yakni 80-85%

karbohidrat (glukosa dan fruktosa), 15-17% air, 0,1-04% protein, 0,2% abu,

sejumlah kecil asam amino, enzim, vitamin dan zat-zat lain (Buba, Fatimah,

Gidado, A. dan Shugaba, 2013). Komposisi pada madu dipengaruhi oleh

beberapa hal yakni oleh nektar bunga yang telah dikumpulkan dan

dikeluarkan oleh lebah yang menghisapnya, faktor iklim dan kematangan

madu.

Kandungan dalam madu juga sangat mempengaruhi sifat fisikokimia

pada madu. Kandungan mineral dalam madu diantaranya Al, Cr, Ni, V, Co,

Ca, Mg, K, Na, Zn, Fe, Cu dan Mn (Conti, M. E., Finoia, M. G., Fontana, L.,

Mele, G., Botre, F., dan Lavicoli, I., 2014). Madu mengandung sejumlah

asam, yaitu asam amino sebesar 0,05–0,1% dan asam organik sebesar 0,17–

1,17%. pH rata-rata madu 10 adalah 3,9 dengan rata-rata pH sebesar 3,4–

6,1. Persentase komposisi minor madu adalah asam sekitar 0,57%, protein

sekitar 0,266%, nitrogen sekitar 0,043%, asam amino sekitar 0,1%, mineral

sekitar 0,17%, dan beberapa komponen lain, seperti koloid, flavonoid yang

merupakan turunan senyawa fenol, dan vitamin yang semuanya membentuk

sekitar 2,1% dari seluruh komposisi madu (National Honey Board, 2007).
 19

2.1.8 Khasiat Dan Manfaat Madu Hitam

Secara umum madu berkhasiat menghasilkan energi, meningkatkan

daya tahan tubuh, dan stamina.Madu cepat berdifusi melalui darah, dankarena

itu madu merupakan sumber energi yang cepat.Madu mendukung

pembentukan darah serta membersihkan darah.Selain itu, 12 juga ada efek

positif dalam mengatur dan membantu peredaran darah tetap lancar.

Madu mengandung zat antibakteri sehingga baik untuk mengobati luka

bakar dan penyakit infeksi.Adanya rasio perbandingan karbon terhadap

nitrogen yang tinggi, kekentalan madu yang membatasi pelepasan oksigen,

oksidasi glukosa yang menghasilkan H2O2 dan sifat osmolaritas yang tinggi

membuat bakteri sulit untuk hidup (Rostita, 2007).

Madu yang alami bersifat preservatif atau mengawetkan.Selain itu,

madu juga memiliki sifat higroskopis yaitu menarik air dari lingkungan

sekitarnya. Sehingga madu dapat digunakan untuk mengompres luka luar

yang bersifat basah karena cairan dan nantinya akan ditarik oleh madu (Adji,

2008).

2.1.9 Definisi Madu Coklat

Madu coklat adalah bahan alami yang memiliki rasa manis yang

dihasilkan oleh lebah dari nektar atau sari bunga atau cairan yang berasal dari

bagian-bagian tanaman hidup yang dikumpulkan, diubah dan diikat dengan

senyawa tertentu oleh lebah kemudian disimpan pada sarang yang berbentuk

heksagonal (Al Fady, 2015). Madu merupakan salah satu bahan pangan yang
 20

memiliki rasa manis dan kental yang berwarna emas sampai coklat gelap

dengan kandungan gula yang tinggi serta lemak rendah (Wulansari, 2018).

Dibidang kedokteran, madu coklat mendapatkan perhatian untuk

digunakan sebagai agen antibakteri dalam perawatan ulserasi, luka, dan

infeksi lain akibat luka bakar maupun luka lainnya. Efektivitas dalam

mengatasi infeksi dan mempercepat proses penyembuhan disebabkan oleh

adanya aktivitas antibakteri yang terdapat pada madu. Aktivitas antibakteri

madu terjadi karena adanya hidrogen peroksida, flavonoid, dan konsentrasi

gula hipertonik. Hidrogen peroksida dibentuk di dalam madu oleh aktivitas

enzim glucose oxide yang memperoduksi asam glukonat dan hidrogen

peroksida dari glukosa. Enzim ini akan aktif apabila madu diencerkan.

Hidrogen peroksida yang terbentuk akan terakumulasi dalam medium biakan

yang akan menginhibisi pertumbuhan bakteri (Suranto, 2008).

2.1.10 Manfaat Madu Coklat Hutan

Madu coklat hutan terkenal di dunia kesehatan karena banyak

mengandung manfaat (khasiat) diantaranya yaitu:

1) Pengganti gula madu coklat hutan bisa dijadikan untuk pengganti gula

karena madu hutan lebih menyehatkan dibanding gula yang ada

dipasaran. Untuk meningkatkan rasa manisnya, bisa menambahkan susu

pada madu hutan. Campuran susu dan madu coklat hutan ini dapat

meningkatkan sistem kekebalan tubuh manusia (Sakri, 2015).

 21

2) Mudah dicerna Madu coklat hutan mudah dicerna oleh perut yang paling

sensitif sekalipun karena molekul gula pada madu dapat berubah menjadi

gula lain (fruktosa menjadi glukosa) (Sakri, 2015).

3) Sumber vitamin dan mineral Madu coklat hutan mengandung berbagai

vitamin dan mineral. Jenis vitamin dan mineral dan kuantitas mereka

tergantung pada jenis bunga yang digunakan untuk pemeliharaan lebah.

Umumnya madu coklat hutan mengandung vitamin C, kalsium, dan zat

besi (Sakri, 2015).

4) Sebagai penyembuhan Luka Pemberian madu coklat hutan pada proses

penyembuhan luka karena karena kemampuannya dalam proses

pembersihan infeksi yang cepat, debridemen luka, menekan peradangan

dan meminimalkan jaringan parut, serta angiogenesis, granulasi jaringan,

pertumbuhan epitel. Madu hutan efektif untuk menyembuhkan luka karena

tidak menyebabkan iritasi, tidak beracun, steril, bersifat bakterisida dan

banyak mengandung nutrisi (Wulansari, 2018).

5) Antioksidan Sebagai antioksidan madu hutan mengandung berbagai

senyawa fitokimia seperti asam organik, vitamin, dan enzim yang dapat

berfungsi sebagai sumber antioksidan makanan. Jumlah dan jenis

senyawa antioksidan ini sangat bergantung pada sumber atau variasi

bunga pada madu hutan. Madu yang lebih gelap lebih tinggi dalam

kandungan antioksidan dari padu madu yang lebih terang. Kandungan

fitokimia pada madu hutan salah satunya adalah polifenol dapat bertindak

sebagai antioksidan (Wulansari, 2018).

 22

6) Antimikroba Madu hutan memiliki efek sebagai antikmikroba terutama

pada bakteri gram positif, baik yang bersifat bakteriostatik maupun efek

bakterisida yang dapat melawan banyak bakteri yang bersifat patogen.

Glukosa oksidase yang terdapat pada madu hutan menghasilkan agen

antibakteri yaitu hidrogen peroksida. Efek antimikroba madu hutan

berkaitan dengan berbagai senyawa misalnya asam aromatik dan senyawa

dengan berbagai sifat kimia serta bergantung dari sumber tanaman

darimana madu itu berasal. Konsentrasi gula yang tinggi pada madu hutan

bertanggung jawab terhadap aktivitas antibakteri (Wulansari, 2018).

2.1.11 Komposisi dan kandungan madu coklat hutan

Madu coklat hutan adalah cairan kental yang dihasilkan oleh lebah

madu dari berbagai sumber nektar. Madu coklat hutan tersusun atas 17,1%

air; 82,4% karbohidrat total; 0,5% protein; asam amino; vitamin dan mineral

(Al fady, 2015). Madu coklat hutan mengandung banyak mineral seperti

natrium, kalsium, magnesium, alumunium, besi, fosfor dan kalium.

Vitamin-vitamin yang terdapat dalam madu adalah thiamin (B1), riboflavin

(B2), asam askorbat (C), piridoksin (B6), niasin, asam pantotenat, biotin,

asam folat, dan vitamin K. Enzim yang penting dalam madu hutan adalah

enzim diastase, invertase, glukosa oksidase, peroksidase, dan lipase. Enzim

diastase adalah enzim yang mengubah karbohidrat komplek (polisakarida)

menjadi karbohidrat yang sederhana (monosakarida). Enzim invertase

adalah enzim yang memecah molekul

 23

2.2 Tonikum
Tonikum adalah campuran bahan yang dapat memperkuat tubuh atau

tambahan tenaga atau energi psada tubuh. Kata tonik berasal dari Bahasa

Yunani yang berarti meregang. Tonikum dapat meregang atau memperkuat

system fisiologi tubuh sebagaimana halnya olahraga yang dapat memperkuat

otot-otot, yaitu dengan meningkatkan kelenturan alami, system pertahanan

tubuh maka semakin besar pula kemampuan untuk melenting kembali dari

setiap jenis tekanan atau cidera (Anonim, 2010).

Istilah tonik biasanya digunakan sebagai efek yang memacu dan

memperkuat semua sistem organ serta menstimulasi perbaikan sel-sel tonus

otot. Obat-obat yang menyebabkan efek tonik tersebut digolongkan sebagai

tonikum. Efek tonik ini terjadi karena efek stimulant yang dilakukan terhadap

sistem syaraf pusat (Wahyuni, A.S., dan Kusumawati, F., 2008).

Efek tonikum disebut efek tonik, yaitu efek yang memacu dan

memperkuat semua sistem dan organ serta menstimulan perbaikan sel-sel

tonus otot. Efek tonik ini terjadi karena efek stimulan yang dilakukan

terhadap sistem saraf pusat. Efek tonik ini dapat digolongkan ke dalam

golongan psikostimulansia. Senyawa psikostimulansia dapat meningkatkan

aktivitas psikis, menghilangkan rasa kelelahan dan penat, serta meningkatkan

kemampuan berkonsentrasi dan kapasitas yang bersangkutan (Mutscheler, E.,

1986).
 24

2.2.1 Metode Uji Tonikum

Pengujian efek tonikum dapat dilakukan dengan metode Rotarod

Test . Rotarod Test merupakan mencit diletakkan di atas silinder yang

dapat diatur kecepatan putarannya dan di bawah silinder tersebut terdapat

papan panel yang merupakan tombol penghitung waktu lamanya mencit

bertahan diatas silinder yang berputar. Bila mencit jatuh, mencit akan

menekan papan panel sehingga menghentikan hitungan waktu. Putaran

rotarod diatur pada kecepatan yang relatif lambat (10 rpm, 2,8 m/menit di

permukaan), untuk memudahkan tikus yang sedang beradaptasi. (Al,

2015).

Adapun prosedur rotarod test untuk menilai endurance berdasarkan

The University of Queensland Standard Operating Procedures Laboratory

Animal Research oleh Abernethy (2015) adalah sebagai berikut:

Uji coba 1 (T1): letakkan hewan coba di atas batang rota. Cobalah untuk

memastikan terlebih dahulu hewan coba dapat berjalan pada batang rota

untuk menjaga keseimbangan mereka. Pada permulaan uji coba, batang rota

diberi kecepatan konstan 4 rpm untuk memungkinkan terlebih dahulu semua

posisi hewan coba telah masuk pada jalur masing-masing. Setelah semua

hewan coba "siap" (yaitu periksa apakah mereka mampu untuk berjalan

maju selama beberapa detik dalam kecepatan 4 rpm), maka tekanlah tombol

start. Batang rota akan berputar dengan percepatan dari 4-40 rpm dalam 300

detik atau 5 menit.

 25

2.2.2 Jenis-jenis Tonikum

Kelelahan merupakan salah satu gejala umum pada penderita stres.

Kelelahan dapat di artikan sebagai kegagalan untuk mempertahankan

kekuatan yang dibutuhkan. Secara umum kelelahan adalah proses yang

mengakibatkan penurunan kesejahteraan, kapasitas kerja sebagai akibat

dari aktivitas. Kelelahan akan menyebabkan ketidaknyamanan dan

menurunkan efisiensi aktivitas yang dilakukan (Hardinge, M.G dan

Shrysock, H., 2003)

Jenis-jenis kelelahan berdasarkan proses dalam otot, kelelahan dapat

dibagi menjadi dua (Budiono Sugeng, 2003):

1. Kelelahan otot, fenomena berkurang nya kinerja otot setelah terjadi

tekanan melalui fisik untuk suatu waktu disebut kelelahan otot secara

fisiologis, yang ditunjukan tidak hanya dengan berkurang nya tekanan

fisik tetapi juga makin rendahnya gerakan.

2. Kelelahan umum, adalah suatu perasaan letih yang luar biasa. Semua

aktivitas menjadi terganggu dan biasanya akan menimbulkan rasa

kantuk. Menurut Workplace dan Safety dan Health Council

(WSHCouncil) (2010). Tipe kelelahan dibagi menjadi:

a. Kelelahan fisik (berkurangnya kemampuan untuk bekerja manual)

b. Kelelahan mental (penurunan tingkat konsentrasi dan kewaspadaan)

Gejala-gejala kelelahan

Gambar mengenai gejala kelelahan (fatigue symptom) secara

subjektif dan objektif antara lain: perasaan lesu, mengantuk dan

pusing, berkurangnya konsentrasi, berkurangnya tingkat

 26

kewaspadaan, persepsi yang buruk dan lambat, tidak ada atau

berkurangnya gairah untuk bekerja, menurun nya kinerja jasmani

dan rohani (Andiningsari.P., 2009).

2.3 Kafein
Kafein merupakan senyawa kimia alkaloid yang terutama terdapat

dalam teh (1- 4,8 persen), kopi (1-1,5 persen), dan biji kola (2,7-3,6 persen).

Selain dari alam, kafein juga diperoleh sebagai hasil tambahan pada proses

mengurangi kadar kafein dalam kopi dan juga dapat dibuat secara semi-

sintetik dari teobromin atau secara sintetik dari urea atau dimetilurea.

Kafein merupakan salah satu senyawa golongan teobromin dan teofilin

termasuk ke dalam senyawa kimia golongan xanthin. Struktur kimia dari

ketiga senyawa turunan metil xantin tersebut dapat dilihat pada gambar

berikut:

Gambar 2.3 Struktur Kimia Senyawa turunan metil santin (Mutscheler,

E., 1986)

Gambar di atas dapat dijelaskan lebih lanjut dengan Tabel 1. Yaitu

sebagai berikut:

Tabel 1. Senyawa turunan metil xantin

 27

R1 R2 R3 Senyawa

CH3 CH3 CH3 Kafein

CH2 CH2 H Teofilin

H CH3 CH3 Teobromin

Ketiga senyawa tersebut mempunyai daya kerja sebagai stimulan sistem

syaraf pusat, stimulan otot jantung, meningkatkan aliran darah melalui arteri

koroner, relaksasi otot polos bronki dan aktif sebagai diuretika, dengan

tingkatan yang berbeda. Daya kerja sebagai stimulan sistem syaraf pusat dari

kafein sangat menonjol jika dibandingkan dengan teobromin dan teofilin

sehingga umumnya digunakan sebagai stimulan sentral. Perbandingan

potensi pada ketiga senyawa xantin tersebut disajikan pada Tabel 2.

Tabel 2. Perbandingan potensi pada ketiga senyawa xantin (Kafein,

teofilin, dan teobromin) Witters & Witters, 1983

Efek fisilogis senyawa xantin Tingkat potensi (tertinggi ke terendah)

Stimulant sistem saraf pusat Kafein = teofilin > teobromin

Efek stimulant pada pusat pernapasan Kafein > teofilin > teobromin

Meningkatkan kapasitas kerja otot Kafein = teofilin > teobromin

Stimulant otot jantung Teofilin > teobromin > kafein

Aksi diuretic Teofilin > teobromin > kafein

Relaksasi otot polos pada bronkus Teofilin paling paten

Meningkatkan kecepatan metabolism basal Kafein paling paten

 28

Keterangan:

= : sama dengan

 : lebih dari

< : kurang dari

Meskipun kafein aman dikonsumsi, zat ini dapat menimbulkan reaksi

yang tidak dikehendaki seperti insomnia, gelisah, merangsang, delirium,

takikardia, ekstrasistole, pernapasan meningkat, tremor otot dan diuresis.

Kafein bekerja pada sistem syaraf pusat, otot termasuk otot jantung dan

ginjal. Pengaruh pada sistem syaraf pusat terutama pada pusat-pusat yang

lebih tinggi, yang menghasilkan peningkatan aktivitas mental dan tetap

terjaga atau bangun. Kafein meningkatkan kinerja dan hasil kerja otot,

merangsang pusat pernapasan, meningkatkan kecepatan dan kedalaman

napas. Daya kerja sebagai diuretika dari kafein didapat dengan beberapa

cara seperti meningkatkan aliran darah dalam ginjal dan kecepatan filtrasi

glomerulus, tapi terutama sebagai akibat pengurangan reabsorpsi tubuler

normal (Anonim, 2001).

Kafein mengurung reseptor adenosin di otak. Adenosin ialah senyawa

nukleotida yang berfungsi mengurangi aktivitas sel saraf saat tertambat pada

sel tersebut. Seperti adenosin, molekul kafein juga tertambat pada reseptor

yang sama, tetapi memiliki efek yang berlainan. Kafein tidak memperlambat

aktivitas sel saraf, namun sebaliknya menghalang adesonin untuk berfungsi.

Dampaknya aktivitas otak meningkat dan mengakibatkan hormon epinefrin

diserap. Hormon tersebut akan menaikkan detak jantung, meninggikan

 29

tekanan darah, menambah penyaluran darah ke otot-otot, mengurangi

penyaluran darah ke kulit dan organ dalam serta mengeluarkan glukosa dari

hati (Anonim b., 2009).

Efek farmakologi kafein adalah sebagai perangsang sistem saraf pusat,

jantung, dan pernapasan. Efek lain kafein adalah mengendurkan otot halus,

merangsang otot jantung, merangsang diuresis (aliran urin berlebih) dan

dipakai untuk menangani pening (Anonim, 2004)

2.4 Mencit (Mus musculus L.)

Mencit (Mus musculus L) merupakan salah satu hewan percobaan di

laboratorium yang biasa disebut tikus putih, hewan ini dapat berkembang biak

secara cepat dan dalam jumlah yang cukup besar. Mencit termasuk hewan

pengerat (Rodentia) yang cepat berbiak, mudah dipelihara dalam jumlah

banyak, variasi genetiknya cukup besar serta anatomi dan fisiologisnya

terkarakteristik dengan baik (Hasaaanah Ifnaini W, 2009). Hewan ini

memiliki karakteristik lebih aktif pada malam hari daripada siang hari

(Permatasari Aniatul A, 2014).

Tabel 2. 3 Data Biologis Mencit (Mus musculus L.)

Indikator Karakteristik

Lama hidup 1-2 tahun, bisa sampai 3 tahun

Lama bunting 19-21 hari

Umur disapih 21 hari

Umur dewasa 35 hari

 30

Umur dikawinkan 8 minggu (jantan dan betina)

Berat dewasa 20-40 g jantan; 18-35 g betina

Berat lahir 0,5 – 0,1 gram

Jumlah anak Rata- rata 6 bisa 15

Suhu (rektal) 36-39o C (rata-rata 37,9o C)

Konsumsi oksigen 2,38-4,48 ml/g/jam

Volume darah 75-80 ml/ kg

Sel darah merah 7,7 -12,5 X 103/ mm3

Sel darah putih 6,0 -12,6 X 103/ mm3

Trombosit 150-400 X 103/ mm3

Hb 13-16/ 100 ml

Kecepatan tumbuh 1 g/ hari

(Hasaaanah Ifnaini W, 2009)

Diantara spesies-spesies hewan lainnya, mencitlah yang paling banyak

digunakan untuk tujuan penelitian medis (60-80%) karena murah dan mudah

berkembang biak. Banyak keunggulan yang dimiliki oleh mencit sebagai

hewan percobaan, yaitu memiliki kesamaan fisiologis dengan manusia, siklus

hidup yang relatif pendek, jumlah anak per kelahiran banyak, variasi sifat

sifatnya tinggi dan mudah dalam penanganan (Permatasari Aniatul A, 2014).

Walaupun mencit mempunyai struktur fisik dan anatomi yang jelas berbeda

dengan manusia, tetapi mencit adalah hewan mamalia yang mempunyai

beberapa ciri fisiologi dan biokimia yang hampir menyerupai manusia

 31

terutama dalam aspek metabolisme glukosa melalui perantaraan hormon

insulin. Disumping itu, mempunyai jarak gestasi yang pendek untuk

berkembang biak (Syahrin, 2006).

2.4.1 Klasifikasi Mencit (Mus musculus L.,)

(Permatasari Aniatul A, 2014) menyatakan taksonomi mencit (Mus

musculus L.) diklasifikasikan sebagai berikut:

Kingdom : Animalia

Phylum : Chordata

Class : Mammalia

Order : Rodentia

Family : Muridae

Genus : Mus L.

Species : Mus musculus

2.4.2 Karakteristik Mencit (Mus musculus.,L)

Mencit (Mus musculus)Memiliki ciri-ciri berupa bentuk tubuh kecil,

berwarna putih, memiliki siklus estrus teratur yaitu 4 - 5 hari.Kondisi ruang

untuk pemeliharaan mencit Mus musculus harus senantiasa bersih, kering

dan jauh dari kebisingan.Suhu ruang pemeliharaan juga harus dijaga

kesehatannya antara 18 - 19ºC serta kelembaban udara antara 30 - 70%

(Akbar, 2010).

Mencit betina ataupun jantan dapat dikawinkan pada umur 8 minggu.

Lama kebuntingan 19 - 20 hari. Jumlah anak mencit rata-rata 6 - 15 ekor

dengan berat lahir antara 0,5 - 1,5 g (Akbar, 2010). Mencit sering digunakan
 32

dalam penelitian dengan pertimbangan hewan tersebut memiliki beberapa

keuntungan yaitu daur ekstrusnya teratur dan dapat dideteksi, periode

kebuntingan relatif singkat dan mempunyai anak yang banyak serta terdapat

keselarasan pertumbuhan dengan kondisi manusia (Akbar, 2010)

(Akbar, 2010)

Gambar 2.4 Mencit (Mus musculus L.)

2.1 Metode Rotarod

Rotarod secara luas digunakan untuk mengevaluasi koordinasi motoric

mencit, dan terutama sensitive dalam mendeteksi disfungsi serebelar Rotarod

memiliki kelebihan dibandingkan edurance test lain (swimming, voluntary

wheel running, treadmill running), yaitu merupakan tes yang sederhana dan

mudah untuk dilakukan. Metode uji rotarod ialah mencit diletakkan di atas

silinder yang dapat diatur kecepatan putarannya dan di bawah silinder tersebut

terdapat papan panel yang merupakan tombol penghitung waktu lamanya

mencit bertahan diatas silinder yang berputar. Bila mencit jatuh, mencit akan

menekan papan panel sehingga menghentikan hitungan waktu. Putaran rotarod

diatur pada kecepatan yang relatif lambat (10 rpm, 2,8 m/menit di
 33

permukaan), untuk memudahkan tikus yang sedang beradaptasi. Dalam

eksperimen mencit ditempatkan pada silinder berputar yang berorientasi

horizontal, yang diletakkan diatas lantai kendang dengan ketinggian cukup

rendah agar tidak melukai, mencit secara alami mencoba tetap berada di

silinder yang berputar, atau rotarod dan menghindari jatuh ke tanah. Lamanya

waktu yang diberikan hewan tertentu pada rotarod ini adalah ukuran

keseimbangan, koordinasi, kondisi fisik dan perencanaan motorik mereka.

Kecepatan rotarod digerakkan secara mekanis, dan dapat dipegang konstan

atau dipercepat (Al, 2015).

Adapun prosedur rotarod test untuk menilai endurance berdasarkan The

University of Queensland Standard Operating Procedures Laboratory Animal

Research oleh Abernethy (2015) adalah sebagai berikut: Hewan coba terlebih

dahulu diadaptasikan dengan rotarod sebelum pengujian untuk membiasakan

hewan coba dengan perangkat dan protokol uji yang akan dilakukan. Pada dua

hari pertama, hewan coba diberi 10 kali percobaan pada batang rota dengan

intertrial interval 30 detik (ITI). Kemudian, pada tiga hari selanjutnya secara

berturut-turut, hewan coba diaklimatisasi dengan 3 kali percobaan per harinya

dengan kecepatan 20 rpm/min untuk membiasakan hewan coba pada

perangkat rotarod.

Pada hari ke-4, dilakukan uji coba secara aktual pada hewan coba.

Menuliskan nomor pada ekor hewan coba dengan tinta tidak beracun sebelum

pengujian dengan tujuan untuk memudahkan identifikasi pada uji coba.Bawa

hewan coba ke ruangan (dengan tingkat pencahayaan seperti yang akan

 34

digunakan dalam percobaan dengan pintu tertutup) minimal 30 menit sebelum

memulai percobaan.Pemberian dosis obat/stimulan dilakukan pada waktu

penyerapan yang tepat sebelum mengenalkan hewan coba ke perangkat

rotarod.

Hidupkan perangkat rotarod. Tahap uji : terdiri dari tiga percobaan yang

dipisahkan oleh intertrial interval 15 menit (ITI) sehingga memungkinkan

untuk menjalankan uji coba pada hewan berikutnya secara berurutan dalam

satu percobaan sebelum berpindah ke uji coba selanjutnya. Tidak ada periode

pelatihan sebelum tahap uji coba. Atur perangkat rotarod ke mode percepatan

dari 4-40 rpm dalam 300 detik atau 5 menit. Tekan saat tombol start menyala.

Batang rota akan melaju dari 4 sampai 40 rpm, mengikuti lampiran waktu

yang telah ditentukan.

Uji coba 1 (T1): letakkan hewan coba di atas batang rota. Cobalah untuk

memastikan terlebih dahulu hewan coba dapat berjalan pada batang rota untuk

menjaga keseimbangan mereka. Pada permulaan uji coba, batang rota diberi

kecepatan konstan 4 rpm untuk memungkinkan terlebih dahulu semua posisi

hewan coba telah masuk pada jalur masing-masing. Setelah semua hewan

coba "siap" (yaitu periksa apakah mereka mampu untuk berjalan maju selama

beberapa detik dalam kecepatan 4 rpm), maka tekanlah tombol start. Batang

rota akan berputar dengan percepatan dari 4-40 rpm dalam 300 detik atau 5

menit. Jika hewan coba hanya menempel pada batang (putaran pasif penuh),

maka hentikan penghitung waktu untuk hewan coba tersebut dan catat

latensinya. Dalam hal ini, putaran pasif secara penuh dianggap sebagai
 35

kegagalan dalam performa seperti jatuh. Lepaskan hewan coba dan tempatkan

kembali ke kandangnya. Buat juga catatan rotasi pasif pada lembaran data.

Setelah semua hewan coba jatuh dari batang rota atau waktu uji coba

telah berlalu, maka hentikan pecepatan rotarod dan kembalikan hewan coba ke

kandangnya, setelah mencatat periode jatuh masing-masing hewan coba,

bersihkan rotarod dengan larutan etanol 70% dan biarkan hingga kering.

Ulangi prosedur untuk uji coba berikutnya seperti tahapan sebelumnya. Beri

intertrial interval (ITI) selama 15 menit antar uji coba secara berturut-turut

(misalnya T1 – ITI - T2 – ITI - T3). Pada akhir uji coba 3 (T3), timbanglah

setiap hewan coba dan catat bobot tubuh pada lembar data. Catat setiap

pengamatan selama pengujian pada lembar data.

Gambar 2.5 Rotarod Test

 BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Objek Penelitian

3.1.1 Populasi
Populasi adalah keseluruhan jumlah anggota dari suatu himpunan

yang ingin diketahui karakteristiknya berdasarkan inferensi dan

generalsiasi (Sugiono., 2012). Populasi dalam penelitian ini adalah madu

dan mencit putih jantan (Mus musculus).

3.1.2 Sampel
Sampel adalah sebuah gugus atau sejumlah anggota himpunan

yang dipilih dengan cara tertentu agar mewakili populasi (Sudibyo dan

Surahman., 2014). Sampel dalam penelitian ini adalah madu coklat dan

madu hitam yang berasal dari Kota Jayapura, Papua.

3.1.3 Jumlah Media Eksperimen

Jumlah media eksperimen dapat ditentukan apabila jumlah

replikasi atau pengulangan percobaan sudah diketahui yaitu dengan

menggunakan rumus Federer.

36
 37

(n-1) (t-1) ≥ 15
Keterangan :
n = Jumlah Sampel
t = Jumlah Perlakuan
(n-1) (t-1) ≥ 15

(n-1) (8-1) ≥ 15
n ≥ (15 / 7) + 1
n ≥ 3,1 = 3

3.1.4 Variabel Penelitian dan Operasional Variabel

1.2 Variabel Penelitian

Variabel penelitian pada dasarnya adalah segala sesuatu yang

berbentuk apa saja yang ditetapkan oleh peneliti untuk dipelajari

sehingga diperoleh informasi tentang hal tersebut, kemudian ditarik

kesimpulannya (Sugiono., 2012). Variabel dapat dibedakan menjadi

tiga macam yaitu :

a. Variabel Bebas

Variabel bebas adalah variabel yang menjadi sebab

timbulnya atau berubahnya variabel terikat. Variabel bebas yang

diduga sebagai penyebab atau pendahulu dari variabel yang lain

(Sugiono., 2012). Variabel bebas dalam penelitian ini adalah madu

coklat dan madu hitam dengan dosis 0,2 ml/20grBB, 0,4

ml/20gr/BB, 0,6 ml/20grBB

 38

b. Variabel Terikat

Variabel terikat merupakan variabel yang dipengaruhi oleh

variabel bebas (Sugiono., 2012). Variabel terikat dalam penelitian

ini adalah efektivitas madu sebagai tonikum pada mencit putih

jantan (Mus musculus) yang ditujukkan dengan waktu lelah

mencit.

c. Variabel Kontrol

Variabel kontrol adalah variabel yang dikendalikan atau

dibuat konstan sehingga pengaruh variabel bebas terhadap variabel

terikat tidak dipengaruhi oleh faktor luar yang tidak teliti

(Sugiono., 2012).

Variabel kontrol pada penelitian ini adalah :

a) Kontrol Positif

Variabel kendali positif yang mengendalikan atau sebagai

pembanding yang berkaitan dengan variable bebas. Kontrol positif

yang digunakan pada penelitian ini adalah kafein.

b) Kontrol Negatif

Kontrol negatif adalah variabel kendali negatif digunakan

sebagai variable netral atau variable dengan perlakuan netral dalam

penelitian. Kontrol Negatif yang digunakan pada penelitian ini

adalah aquadest.
 39

2.2 Operasional Variabel

X1

X2

X3

Z1 Y

Z2

Z3

K+

K-

Gambar 3.1 Bagan Operasional Variabel Penelitian

Keterangan :
X1 : Madu Coklat dosis 0,2 ml/20gBB
X2 : Madu Coklat dosis 0,4ml/20gBB
X3 : Madu Coklat dosis 0,6ml/20gBB
Z1 : Madu Hitam dosis 0,2 ml/20gBB
Z2 : Madu Hitam dosis 0,4ml/20gBB
Z3 : Madu Hitam dosis 0,6ml/20gBB
K + : Kafein
K - : Aquadest
Y : Efek madu sebagai tonikum
 40

3.2 Metodologi Penelitian

Metode Penelitian yang digunakan pada penelitian ini adalah

eksperimen. Eksperimen merupakan salah satu metode yang paling tepat

dalam menyelidiki hubungan sebab-akibat (Agus Riyanto,2011). Jenis

penelitian ini digunakan untuk melakukan percobaan yang bertujuan untuk

menguji perbandingan efek tonikum madu hitam dengan madu coklat pada

mencit putih jantan (Mus musculus) dengan metode Rotarod.

3.3 Desain Penelitian

Bagan desain penelitian dapat di lihat pada bagan 3.2 sebagai berikut:

Pengumpulan alat dan bahan

Uji kualitas madu

Uji efektivitas madu sebagai tonikum terhadap mencit putih

jantan (Mus musculus)

Pengumpulan dan pengolahan data

Analisis data

Pembahasan
 41

3.4 Alat dan Bahan Penelitian

Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah

sebagai berikut:

Tabel 3.1 Alat dan Bahan Penelitian

No. Alat No. Bahan

1. Sonde oral 1. Kafein

2. Rotarod Test 2. Aquadest

3. Timbangan analitik 3. Madu Hitam

4. Timbangan mencit 4. Madu Coklat

5 Gelas Ukur 5. Mencit

6 Beaker Glass

7 Batang Pengaduk

8 Stopwatch

9. Pipet Tetes

10. Oven

11. Stik pH

12. Moisture tester

13. Kertas Perkamen

 42

3.5 Langkah Kerja

3.5.1 Pengumpulan Bahan

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah madu

coklat dan madu hitam yang diambil dari daerah asal penelitian yaitu

dari daerah Kota Jayapura, Papua

3.5.2 Uji Kualitas Madu

Untuk mengetahui kualitas madu dilakukan beberapa

pengujian diantaranya uji kuantitatif meliputi uji pH, penentuan kadar

air, serta uji kualitatif meliputi uji organolepstis, dan uji stabilitas.

1) Uji pH

Uji kualitas madu dapat dilakukan dengan pemeriksaan

pH. Uji pH dilakukan dengan mengambil sampel sebanyak 50

ml diletakkan dibotol sampel di ukur kadar keasamannya

menggunakan pH meter dengan mencelupkan pH meter ke

dalam sampel ditunnggu 2-3 menit hingga angka yang tertera

stabil dimonitornya. pH madu biasanya berkisar antara 3,4

hingga 6,1 (Eleazu, C, O. Iroaganachi, M, A. Eleazu, K, C. dan

Okoronkwo, 2013).

2) Penentuan Kadar Air

Penentuan kadar air dapat dilakukan dengan

menimbang bobot cawan yang akan digunakan dan

menimbang masing-masing madu sebanyak 1 gram

 43

memasukkan ke dalam cawan yang telah diketahui bobotnya.

Sampel dimasukkan ke dalam oven pada suhu 105-1100C

selama 2 jam. Mendinginkan dalam desikator selama 1 jam

dan menimbang bobot sampel. Lakukan hal yang sama dengan

memanaskan sampel kembali di dalam oven dengan suhu yang

sama selama 1 jam, mendinginkan dalam desikator selama 30

menit dan menimbang bobotnya (Savitri dkk 2017). Kadar air

madu menurut SNI (Standar Nasional Indonesia) 2013 yaitu

maksimal 22%. Penentuan kadar air dapat dihitung

berdasarkan persamaan berikut:

% air = W1- W2 x 100%

Bobot sampel

Keterangan :W1 = Bobot kosong + bobot sampel

W2 = Bobot kering

3). Uji Organoleptik

Pengamatan Organoleptik dilakukan dengan

mengamati bentuk, warna, rasa, dan bau dari sediaan

madu hitam dan madu coklat

4). Uji Stabilitas Metode Cycling Test

 44

Sediaan disimpan pada suhu 4℃ selama 24 jam, kemudian

dipindahkan kedalam oven yang bersuhu 40℃ selama 24 jam

(satu siklus). Uji ini dilakukan sebanyak 6 siklus selama 12

hari. Selanjutnya tiap siklus dilakukan uji evaluasi yaitu uji

organoleptic, uji pH, dan uji kadar air.. (Rohmani,2016)

3.5.3 Uji Efektivitas Madu Sebagai Tonikum

1. Penentuan Dosis Kafein

Dosis untuk manusia (Kafein) = 50 mg

Faktor konversi dari manusia ke mencit : 0,0026 (untuk mencit 20 g )

Dosis untuk mencit = Dosis manusia x Faktor konversi

50 mg x 0,0026

= 0,13 mg

Dosis ini diberikan dalam volume = 0,5 mL

Dibuat larutan persediaan sebanyak = 10 mL

Jumlah kafein yang digunakan = (0,13 mg / 0,5mL)

= 0,26 mg

2. Uraian Skema Perlakuan Terhadap Hewan Uji

 45

a. Siapkan 24 ekor hewan uji mencit putih jantan berat sekitar

20-30 g

b. Dibagi 8 kelompok perlakuan masing- masing terdiri dari 3

ekor.

c. Perlakuan hewan uji

d. Kelompok 1 (K+) : Diberikan kafein sebagai kontrol

positif

e. Kelompok 2 (K-) : Diberikan aquades sebagai kontrol

negative

f. Kelompok 3:

(X1): Diberikan madu coklat dengan dosis 0,2 ml/20grBB

(X2): Diberikan madu coklat dengan dosis 0,4 ml/20grBB

(X3): Diberikan madu coklat dengan dosis 0,6 ml/20grBB

g. Kelompok 4:

(Z1): Diberikan madu hitam dengan dosis 0,2 ml/20grBB

(Z2): Diberikan madu hitam dengan dosis 0,4 ml/20grBB

(Z3): Diberikan madu hitam dengan dosis 0,6 ml/20grBB

h. Letakkan mencit pada rotarod test.

i. Amati dan catat waktu lelah mencit

j. Analisa dan pengolahan data

2. Pengamatan Waktu Lelah

 46

a. Uji coba 1 (T1): letakkan hewan coba di atas batang rota.

Cobalah untuk memastikan terlebih dahulu hewan coba dapat

berjalan pada batang rota untuk menjaga keseimbangan

mereka. Pada permulaan uji coba, batang rota diberi

kecepatan konstan 4 rpm untuk memungkinkan terlebih

dahulu semua posisi hewan coba telah masuk pada jalur

masing-masing. Setelah semua hewan coba "siap" (yaitu

periksa apakah mereka mampu untuk berjalan maju selama

beberapa detik dalam kecepatan 4 rpm), maka tekanlah

tombol start. Batang rota akan berputar dengan percepatan

dari 4-40 rpm dalam 300 detik atau 5 menit.

b. Jika hewan coba hanya menempel pada batang (putaran pasif

penuh), maka hentikan penghitung waktu untuk hewan coba

tersebut dan catat latensinya. Dalam hal ini, putaran pasif

secara penuh dianggap sebagai kegagalan dalam performa

seperti jatuh. Lepaskan hewan coba dan tempatkan kembali ke

kandangnya. Buat juga catatan rotasi pasif pada lembaran

data.

c. Setelah semua hewan coba jatuh dari batang rota atau waktu

uji coba telah berlalu, maka hentikan pecepatan rotarod dan

kembalikan hewan coba ke kandangnya, setelah mencatat

periode jatuh masing-masing hewan coba, bersihkan rotarod

 47

dengan larutan etanol 70% dan biarkan hingga kering. Ulangi

prosedur untuk uji coba berikutnya seperti tahapan

sebelumnya.

d. Beri intertrial interval (ITI) selama 15 menit antar uji coba

secara berturut-turut (misalnya T1 – ITI - T2 – ITI - T3).

Pada akhir uji coba 3 (T3), timbanglah setiap hewan coba dan

catat bobot tubuh pada lembar data.

e. Catat setiap pengamatan selama pengujian pada lembar data.

3.6 Sumber Data dan Pengumpulan Data

1) Sumber Data Primer

Data primer merupakan data yang diperoleh lansung dari objek

yang diteliti. Dalam penelitian ini data primer yang diperoleh dari hasil

penelitian langsung yang dilakukan di laboratorium kampus

Universitas YPIB Majalengka dengan menguji madu pada mencit

putih jantan (Mus musculus). Data primer berupa ketahanan mencit

pada perangkat rotarod test dalam hitungan satuan detik.

2) Sumber Data Sekunder

Data sekunder merupakan data yang diperoleh dalam bentuk data

yang sudah jadi, seperti data dalam dokumen dan publikasi. Adapun

sumber data yang diperoleh penulis yaitu data yang di dapatkan dari

berbagai bahan pustaka (Literatur studi) dan jurnal penelitian ilmiah

 48

yang berhubungan dengan uji perbandingan efektivitas madu coklat

dan madu hitam sebagai tonikum pada mencit putih jantan (Mus

muscullus).

3.7 Teknik Pengolahan dan Analisis Data

1) Pengolahan Data

a. Berupa durasi ketahanan mencit pada perangkat rotarod test dari

tiap mencit dalam hitungan detik dicatat, dikumpulkan dan

ditabulasikan.

b. Data durasi kemampuan berenang terdiri dari sebelum dan sesudah

pemberian sampel uji untuk tiap hewan uji.

c. Dari setiap perlakuan baik sebelum dan sesudah pemberian sampel

uji dihitung rata-ratanya.

d. Setiap nilai selisih yang diperoleh kemudian diproses dengan

analisa data untuk mengetahui normalitas dan homogenitasnya.

2) Analisa Data

Data diolah secara statistik dengan menggunakan SPSS

(Statistical Package for the Social Science). Analisis menggunakan

uji statistik One Way ANOVA pada tingkat 95% P adalah

data harus terdistribusi normal dan memiliki varian yang sama. Oleh

karena itu, data hasil penelitian terlebih dahulu dilakukan uji

 49

normalitas data menggunakan uji distribusi normal (uji shapiro –

wilk) atau menggunakan Kolmogrov – Smirnov dan selanjutnya uji

homogenitas (Levene). Data dikatakan terdistribusi normal dan

homogen apabila uji menunjukkan nilai signifikan lebih besar dari

0,05 (sig > 0,05). Apabila data yang diperoleh terdistribusi normal

dan homogen, maka uji selanjutnya yang diakukan adalah uji

parametrik ANOVA. Jika data hasil penelitian tidak terdistribusi

normal dan tidak homogen nilai siginifikan lebih kecil dari 0,05 (sig

< 0,05) maka uji selanjutnya yang dilakukan adalah uji non

parametrik Kruskal – Wallis pada tingkat kepercayaan 95% P

(Besral,2010).

Kriteria pembacaan hasil uji statistic adalah apabila

probabilitas < dari α 0,05 maka Ho ditolak dan H1 diterima, yang

berarti adanya perbedaan efektivitas madu hitam dengan madu coklat

sebagai tonikum terhadap mencit putih jantan (Mus musculus). Dan

apabila probabilitas > dari α 0,05 maka Ho diterima dan Ha ditolak,

artinya tidak adanya perbedaan efektivitas madu hitam dan madu

coklat sebagai tonikum terhadap mencit putih jantan (Mus musculus)

(Besral, 2010). Kemudian dilakukan uji statistic Post Hoc atau uji

beda antar perlakuan, bila nilai signifikansi < 0,05 maka terdapat
 50

perbedaan secara signifikansi antara perlakuan satu dengan yang lain

dan apabila nilai signifikansi > 0,05 maka tidak terdapat perbedaan

yang signifikan antara perlakuan satu dengan lainnya.

 51

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahu efektifitas madu sebagai

tonikum pada mencit putih jantan (Mus muscullus), adapun hasil penelitian

sebaggai berikut.

4.1.1 Hasil Uji Kuantitatif dan Kualitatif Madu

Untuk mengetahui kualitas madu dilakukan beberapa pengujian

diantaranya uji pH, kadar air, organoleptis. Berikut adalah table hasil

evaluasi uji kualitas madu hitam dan madu coklat.

Hasil uji kuantitatif madu hitam dan madu coklat meliputi uji pH

dan kadar air dapat dilihat pada table berikut:

Tabel 4.1 Hasil Uji pH Madu

NO pH Sampel pH Keterangan
Standar
1 3.4 – 6,1 X1 5 Memenuhi syarat
2 3,4 – 6.1 Z1 5 Memenuhi syarat
 52

Tabel 4.2 Hasil Uji Kadar Air Madu

NO Sampel Hasil Pengujian Syarat

1 Madu Coklat 4,1 % Maksimum 22%

2 Madu Hitam 2,7 %

Hasil uji kualitatif madu hitam dan madu coklat meliputi uji organoleptis dapat

dilihat pada table berikut:

Tabel 4.3 Hasil Uji Organoleptis

Uji

Sampel Organoleptik

Warna Bnetuk Rasa Bau

X1 Coklat Kental Manis Khas madu

coklat

Z1 Hitam Kental Pahit, Asam Khas madu

hitam
 53

4.1.2 Hasil Pengamatan Uji Perbandingan Efektifitas Tonikum Madu Hitam

Dengan Madu Coklat Pada Mencit Jantan Dengan Metode Rotarod

Data dibawah ini merupakan hasil pengamatan uji perbandingan efektifitas

tonikum madu hitam dengan madu coklat pada mencit jantan dengan metode

rotarod dapat dilihat pada tabel 4.4 sebagai berikut:

 54

Tabel 4.4 Hasil Pengamatan Waktu Lelah Mencit

Kelompok Mencitt Durasi Kemampuan jatuh mencit

Ke- (detik)

Sebelum Sesudah Selisih (sebelum-

perlakuan perlakuan sesudah)

X1 3

Rata-rata

X2 3

Rata-rata

X3 3

Rata-rata

Z1 3

Rata-rata
 55

Z2 3

Rata-rata

Z3 3

Rata-rata

K+ 3

Eata-rata

K- 3

Rata-rata
 56

Keterangan :
X1 : Madu Coklat dosis 0,2 ml/20grBB
X2 : Madu Coklat dosis 0,4 ml/20grBB
X3 : Madu Coklat dosis 0,6 ml/20grBB
Z1 : Madu Hitam dosis 0,2 ml/20grBB
Z2 : Madu Hitam dosis 0,4 ml/20grBB
Z3 : Madu Hitam dosis 0,6 ml/20grBB
K + : Kafein
K - : Aquadest

4.2 Analisis Data

4.3 Pembahasan

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas madu serta jenis

madu yang paling baik sebagai tonikum terhadap mencit putih jantan (Mus

musculus ). Dalam penelitian ini terdiri dari delapan kelompok yang terbagi atas

kelompok kontrol negatif yaitu dengan pemberian aquadest, kelompok kontrol

positif diberikan kafein, serta kelompok perlakuan diberikan 3 dosis yaitu 0,2

ml/20gBB 0,4 ml/20gBB dan 0,6 ml/20gBB pada jenis madu hitam dan 3 dosis

yaitu 0,2 0,4 0,6 ml/20gBB pada jenis madu coklat. Hewan uji yang digunakan

yaitu mencit putih jantan (Mus musculus) karena memiliki siklus hidup relatif

pendek, banyaknya jumlah anak per kelahiran, mudah ditangani, serta kondisi

hormonal pada mencit jantan lebih stabil. Setelah diberikan perlakuan terhadap

hewan uji selanjutnya dilakukan pengujian efektivitas bahan uji dengan

 57

menguji ketahanan fisik hewan uji, dalam penelitian ini digunakan metode

rotarod (metode ketahanan fisik) yang dilakukan untuk mengetahui sifat

kontrol saraf pusat melalui pengamatan pada gerak yang dilakukan oleh hewan

uji sebelum dan setelah diberi perlakuan uji.

Sebelum dilakukan pengujian terhadap hewan uji terlebih dahulu

dilakukan pengujian kualitas kedua sampel yang akan di ujikan yaitu dilakukan

uji kuantitatif meliputi uji pH dan kadar air, kemudian uji kulitatif yaitu uji

organoleptis pada sampel. Berdasarkan hasil penelitian pada tabel 4.1 yaitu

pengujian pH yang bertujuan untuk mengetahui nilai keasaman suatu sampel

diperoleh nilai pH dari kedua sampel madu menunjukkan perbedaan sebagai

berikut yaitu bila dilihat dari nilai pH madu hitam memiliki pH sebesar 5, madu

hitam 5. Tingkat keasaman larutan dapat ditentukan dengan nilai pH, dimana

semakin tinggi tingkat keasaman madu maka semakin kecil pH madu. Madu

bersifat asam dengan pH berkisar antara 3,4 – 6,1, dari kedua sampel tersebut

madu dapat memenuhi standar. Asam organik sangat menentukan citarasa, aroma

dan daya tahan madu terhadap mikroorganisma (Sihombing, 2005). Hasil analisis

laboratorium menunjukkan bahwa nilai pH kedua jenis madu tersebut rendah dan

bersifat asam. Tingkat pH yang rendah pada madu dapat mencegah pertumbuhan

berbagai macam bakteri karena bakteri dapat berkembang pada pH netral atau

basa (Chayati, 2008; Chua et al. 2012).

 58

Kadar air dalam madu menentukan kualitas madu, apabila kadar airnya

tinggi maka kualitas madu menjadi rendah. Kadar air madu dipengaruhi oleh

iklim, dan penanganan paska panen (Gairola et al. 2013). Standar Nasional

Indonesia (SNI 3545, 2013) menyebutkan bahwa kadar air madu yang baik

(maksimal 22%). Dari hasil penelitian pada tabel 4.2 di atas diperoleh kadar air

yaitu madu coklat 4,1%, madu hitam 2,7%. Tingginya kadar air madu tidak

mengindikasikasikan adanya pemalsuan madu dengan penambahan air, tetapi

disebabkan karena pada saat panen belum semua madu tertutup lilin. Pada

umumnya pemanenan madu dari jenis lebah A.dorsata yang biasa dilakukan

pemungut madu dengan mengambil semua sisiran tanpa memisahkan sisiran

madu yang sudah tertutup dan belum tertutup. Rendah atau tingginya kadar air

madu sangat berpengaruh terhadap fermentasi, dimana semakin rendah kadar air

madu akan menentukan keawetan madu dari kerusakan. Madu yang mempunyai

kadar air yang tinggi akan mudah terfermentasi oleh sel khamir atau yeast dari

genus zygosaccharomyces yang tahan terhadap konsentrasi gula tinggi, sehingga

dapat hidup dan berkembang dam madu.

Pengujian madu selanjutnya yaitu uji organoleptis yang dimana dilakukan

dengan mengamati bentuk, warna, rasa, dan bau dari sediaan madu hitam dan

madu coklat. Adapun hasil uji organoleptis secara visual dapat dilihat pada tabel

4.3. Hasil uji organoleptik menunjukkaan warna masing-masing sampel madu

yaitu berwarnahitam dan coklat. Warna madu tidak menentukan kualitas madu,
 59

hal ini karena warna madu sangat dipengaruhi oleh sumber pakan lebah madu

sebagai penghasil nektar (Wibowo et al. 2016). Warna madu bervariasi dengan

gradasi warna dari warna coklat hingga warna hitam. Menurut Suranto (2007),

warna madu dipengaruhi oleh sumber nektar, usia madu, dan proses

penyimpanan. Madu yang telah lama disimpan akan memiliki warna yang

semakin gelap. Berdasarkan data hasil tabel 4.3 pada parameter rasa di peroleh

hasil yaitu pada madu hitam memiliki manis asam sedikit pahit dan madu coklat

memiliki rasa manis yang cukup. Umumnya rasa pahit pada madu juga dapat

bersumber dari kandungan propolis didalam madu yang mana propolis tersebut

didapatkan lebah dari tanaman yang mengandung resin dan pollen seperti

kaliandra ataupun mahoni. Selain itu rasa pahit juga mengindikasikan adanya

senyawa fenolat seperti tanin dan flavonoid. Penelitian sebelumnya pada madu

Algeria menemukan tingginya kandungan fenolat, flavonoid, dan tanin total pada

madu pahit dibandingkan madu manis yang juga mengindikasikan khasiat yang

baik bagi kesehatan (Otmani etal. 2019). Perbedaan rasa madu ditentukan oleh

kandungan asam organik, karbohidrat, dan sumber nektar. Manisnya madu

ditentukan oleh rasio karbohidrat yang terkandung dalam nektar tanaman yang

menjadi sumber madu. Rasa madu bisa berubah bila disimpan pada kondisi yang

tidak cocok dan suhu yang tinggi (Suranto, 2007). Selanjutnya hasil pengujian

organoleptis dengan parameter aroma dan bentuk kedua sampel memiliki aroma

khas madu serta bentuk yang kental.

 60

Berdasarkan tabel 4.4 hasil pengamatan waktu lelah mencit terlihat

frekuensi durasi kemampuan berputar dibatang rotarod hewan uji terendah yaitu

pada kontrol negatif, pada kontrol negatif bahan uji yang diberikan adalah

aquadest yang digunakan hanya sebagai pembanding dan tidak memiliki zat aktif

yang dapat berperan sebagai tonikum sehingga tidak terlalu memberikan efek

sebagai tonikum pada hewan uji. Selanjutnya pada kelompok kontrol positif yang

diberikan kafein menunjukkan durasi kemampuan berputar pada batang rotarod

lebih baik dari semua kelompok karena kafein merupakan senyawa yang dapat

memberikan efek dengan cara menghambat aktivitas adenosine. Salah satu fungsi

adenosine adalah dapat menimbulkan rasa letih dan mengantuk, oleh karena itu

kafein dapat membantu menghambat keletihan dengan cara menghambat

penyerapan adenosine (Weinberg, B.A & Bealer BK.,2009). Sedangkan dari

kedua sampel dengan 3 dosis yang berbeda jika dilihat dari nilai rata-rata

berturut –turut pada sampel madu hitam menunjukkan nilai rata-rata selisih

waktu tertinggi yaitu (52,8 detik), kemudian urutan kedua yaitu madu kuning

sebesar (40,2 detik) dan terakhir pada madu putih yaitu sebesar (28 detik). Secara

umum madu dapat dipercaya

 61

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan dapat diperoleh

kesimpulan sebagai berikut.

1) Dari kedua jenis madu yaitu madu coklat dan madu hitam memiliki

efektivitas sebagai tonikum pada mencit putih jantan (Mus musculus)

2) Pada jenis madu hitam mempunyai efektivitas paling baik dibandingkan

dengan madu coklat pada mencit putih jantan (Mus muscullus)

5.2 Saran

1) Perlu adanya penelitian lebih lanjut mengenai uji kualitatif madu sebagai

tonikum pada mencit putih jantan (Mus muscullus)

2) Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai manfaat lain dari madu

Sumbawa
 DAFTAR PUSTAKA

Adji, D., dkk. (2007). Perbandingan Efektivitas Sterilisasi Alkohol 70%, Inframerah,

Otoklaf dan Ogan Terhadap Pertumbuhan Bakteri (Bacillus subtilis). Sain,

25(1).

Akbar, B. (2010). Tumbuhan dengan Kandungan Senyawa Aktif yang Berpotensi

sebagai Bahan Antifertilitas. adabia press UIN Syarif Hidayatullah.

Al, B. H. et. (2015). Evaluation of antiparkison activity of Elaeocarpus ganitrus on

haloperidol induced parkinson’s disease in mice. International Journal of Basic

and Clinical Pharmacology, 4(1), 102–106.

Andiningsari.P. (2009). Hubungan Faktor Internal dan Eksternal Terhadap

Kelelahan (fatigue) pada pengemudi travel x trans Jakarta trayak Jakarta-

bandung. Universitas Indonesia.

Anonim. (2001). Investaris Tanaman Obat Indonesia I. Badan Penelitian Dan

Pengembangan Kesehatan DepKes RI.,.

Anonim. (2004). Madu. Pusat Standarisasi Industri.

Anonim. (2010). Definisi Tonik.

Anonim b. (2009). Khasiat Madu Bagi Kesehatan.

Antary P.S.S., Ratnayani, K. & Laksmiwatu, A. A. I. A. M. (2013). Nilai daya hantar

listrik, kadar abu, natrium dan kalium pada madau bermerk di pasaran

dibandingkan dengan madu alam (lokal). Kimia, 7(2), 172–180.

Babarinde, G.O., Babarinde, S.A., Adegbola, D.C Dan Ajayeoba, S. . (2011). Efect of

62
 63

harvesting methods on physicochemical and microbial quality of honey. Of

Food Sciendceand Technolocy.

Badan Standarisasi Nasional. (2004). Madu.

Baroni, Maria, V., D. (2006). Determination of Volatile Organic Compound Patterns

Characteristic of Five Unifloral Honey by Solid-Phase Microextraction-Gas

Chromatography-Mass Spectrometry Couple to Chemometrics. Food Chem

Journal, 54, 7235–7241.

Baskharaa, A. . (2008). khasiat dan keajaiban madu untuk kesehatan dan kecantikan.

SMILE BOOKS.

Besral. (2010). Pengolahan dan Analisis Data-1 Menggunakan SPSS. Departemen

Biostatistika, FKM UI.

Bogdanov, S. (2011). Functional and Biological Oroperties of the Bee Products.

Review. Www.Bee-Hexagon.Net, Bee Product Science.

Buba, Fatimah, Gidado, A. dan Shugaba, A. (2013). Analysis of biochemical

composition of honey sampel from Nort-East Nigeria. Of Biochemistry and

Analytical Biochemistry, 2(3), 1–7.

Budiono Sugeng, R. M. . J. A. (2003). Bunga Rampai Hiperkes dan KK. Universitas

Diponegoro Semarang.

Conti, M. E., Finoia, M. G., Fontana, L., Mele, G., Botre, F., dan Lavicoli, I. (2014).

Characterization of Argentine Honeys on the Basis of their Mineral Content and

Some Typical QualityParameters. Chemistry Central J, 8(44), 1–10.

Eleazu, C, O. Iroaganachi, M, A. Eleazu, K, C. dan Okoronkwo, J. O. (2013).

 64

Determination of the physcohemicaal composition microbial quality and free

radical scavenging activities of some commercially sold honey samples in Aba

Nigeria. The effect of varying colours. Biomedical Research, 4(1), 32–41.

Hamad., S. (2007). Terapi Madu. Pustaka Iman.

Hardinge, M.G dan Shrysock, H. (2003). Mencapai Hidup Prima dan Bugar jilid I.

Pola Hidup Indonesia Publishing House.

Hasaaanah Ifnaini W. (2009). Pengaruh Ekstrak Daun Pegagan (Centella asiatica)

terhadap Spermatogenesis Mencit (Mus musculus). UIN Maulan Ibrahim.

Hendra Stevani. (2016). Praktikum Farmakologi. Kemenkes RI.

Ihsan, A. A. (2011). Terapi Madu Hidup Sehat Ala Rasul.

Mutscheler, E. (1986). Dinamika Obat : Buku Ajar Farmakologi dan Toksikologi.

Penerbit ITB.

National Honey Board. (2007). Learn About the Versatility of Honey. NBH.

Nayik, G.A. dan Nanda, V. (2015). Physico-chemical, enzymatic, mineral and colour

characterization of there different varieties of honey from khasmir valley of

India with a multivariate approach. Polish Journal of Food and Nutritions

Sciences, 65(2), 101–108.

Permatasari Aniatul A. (2014). Pengaruh Pemberian Jus Jambu Biji (Psidium

Guajava L) Terhadap Kadar Gula Darah Dan Histologi Pancreas Mencit (Mus

musculus) Yang Di Induksi Alaksan. UIN Maulan Ibrahim.

Rostita. (2007). Berkat Madu: Sehat, Cantik, dan Penuh Vitalitas. PT Mizan Pustaka.

Saxena, S., Gautam.S.dan Sharma, A. (2010). Physical Biochemical and Antioxidant

 65

Properties of Some Indian Honeys. Food Chemistry, 118(2), 391–397.

Sihombing, D. T. H. (1997). Ilmu Ternak Lebah Madu. Gadjah Mada University

Press.

Sudibyo dan Surahman. (2014). Metode Penelitian Untuk Mahasiswa Farmasi. Trans

Indo Media.

Sugiono. (2012). Metode Penelitian Kuantitatif Kualitatif dan R & D. Alfabeta.

Suranto, A. (2004). khasiat dan manfaat madu herbal. Agromedia Pustaka.

Suranto, A. (2007). Terapi Madu. Penebar Swadaya.

Syahrin, A. (2006). Kesan ekstrak etanol androgrpahis Panicula (burm. F.) Nees ke

atas Tikus betina diabetik aruhan streptozotosin. University Sains Malaysia.

Wahyuni, A.S., dan Kusumawati, F., 2008. (2008). Efek Tonik Ekstrak Air Biji Cola

(cola nitida Schott & Endl.) Pada Mencit Jantan,. Penelitian Sains & Teknologi,

9(2), 137--140.

Walji, H. (2001). Terapi Lebah. Prestasi Pustaka.

Yahya. G. (2003). Pangan dan Ilmu Gizi Untuk Kesehatan. Pt. Rajagarfindo Persada.