OLEH:
AYU ANDRIAYANI
NIM.1981019
Ayu Andriayani
NIM.1981019
Pembimbing
i
HALAMAN PENGESAHAN
Oleh:
AYU ANDRIAYANI
NIM.1981019
Skripsi Ini Telah Di seminarkan dan Di Terima Sebagai Salah Satu Syarat Untuk
Menyelesaikan Program Pendidikan Diploma DIV Teknologi Laboratorium Medik
Tahun Akademik 2022/2023 Dalam Memperoleh Gelar Sarjana Terapan
Kesehatan.
Disahkan Oleh:
ii
LEMBAR PERYATAAN
SKRIPSI
Ayu Andriayani
NIM.1981019
iii
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
I. IDENTITAS PRIBADI
Nama : Ayu Andriayani
Tempat/ Tanggal Lahir : Sei.Pinang, 8 Januari 2001
Anak ke : 6 (Enam) Dari 7 (Tujuh) Bersaudara
Agama : Islam
Nama Ayah : Paino
Nama Ibu : Ngatinem
Alamat : Dusun VII Sei. Pinang, Desa Sei.Siarti Kec.
Panai Tengah
iv
Program Studi Teknologi Laboratorium Medik
Fakultas Farmasi
Institut Kesehatan Medistra
ABSTRAK
v
Medical Laboratory Technology Study Program
Pharmacy Faculty
Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam
ABSTRACT
vi
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT, atas segala karunia
dan limpahan rahmat, karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan
Skripsi dengan judul “Identifikasi Bakteri Coliform Dengan Metode MPN (Most
Probable Number) Pada Sampel Terasi” dapat terselesaikan tepat pada waktunya.
Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih
kepada:
1. Drs. Johannes Sembiring, M.Pd, M.Kes Selaku Ketua Yayasan Institut
Kesehatan Medistra Lubuk Pakam.
2. Ns. Rahmad Gurusinga, S.Kep, M.Kep Selaku Rektor Institut Kesehatan
Medistra Lubuk Pakam.
3. Dr. apt. Samran, S.Si. M.Si. Selaku Dekan Fakultas Farmasi Institut Kesehatan
Medistra Lubuk Pakam.
4. Sa’adah Siregar, S.Si., M.Kes Selaku Ketua Program Studi Teknologi
Laboratorium Medis Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam.
5. Vincentia Ade Rizky, S.Si.T., M,Biomed Selaku Dosen Pembimbing yang telah
banyak meluangkan waktu untuk membimbing dan memberi arahan kepada
peneliti.
6. apt. Yosi Darmirani, S.Farm., M.K.M., M.Farm selaku penguji I dan apt. Debi
Dinha Octora Sitepu, S.Farm., M.Farm selaku penguji II yang telah memberikan
saran dan masukannya untuk kelengkapan skripsi ini.
7. Asvia Rahayu, S.ST., M,Biomed Selaku wali tingkat yang telah banyak
memberikan ilmu, arahan dan nasihat untuk terselesaikannya skripsi ini.
8. Seluruh Dosen dan Staf pegawai Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam yang
telah banyak memberikan pengetahuan, bimbingan, dan arahan selama mengikuti
pendidikan.
9. Teristimewa dan tak terhingga penulis ucapkan terima kasih kepada Ayahanda
Paino dan Ibunda Ngatinem yang telah mencurahkan kasih sayangnya,
vii
mendukung dalam suka maupun duka, dan selalu mendoakan yang terbaik untuk
putrinya. Terimakasih pula kepada semua saudara-saudaraku tersayang, atas do’a
dan dukungan yang telah diberikan.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangannya, oleh
karena itu saran dan kritik yang bersifat membangun sangat penulis harapkan
untuk perbaikan selanjutnya. Demikian, semoga skripsi ini bisa bermanfaat dan
menambah wawasan bagi penulis dan para pembaca pada umumnya.
Ayu Andriayani
NIM.1981019
viii
DAFTAR ISI
HALAMAN PERSETUJUAN.........................................................................................
HALAMAN PENGESAHAN.........................................................................................
LEMBAR PERNYATAAN...........................................................................................
RIWAYAT HIDUP........................................................................................................
ABSTRAK........................................................................................................................
ABSTRACT....................................................................................................................
KATA PENGANTAR...................................................................................................vii
DAFTAR ISI...................................................................................................................
DAFTAR GAMBAR.....................................................................................................xii
DAFTAR TABEL.........................................................................................................xiii
DAFTAR LAMPIRAN................................................................................................xiv
BAB I PENDAHULUAN................................................................................................
1.1 Latar Belakang.............................................................................................................
1.2 Rumusan Masalah........................................................................................................
1.3 Tujuan Penelitian.........................................................................................................
1.3.1 Tujuan Umum........................................................................................................
1.3.2 Tujuan Khusus.......................................................................................................
1.4 Manfaat Penelitian......................................................................................................
1.4.1 Manfaat Teoritis.....................................................................................................
1.4.2 Manfaat Praktisi.....................................................................................................
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.....................................................................................
2.1 Tinjauan Umum Terasi................................................................................................
2.1.1 Pengertian Terasi......................................................................................................
2.1.2 Proses Pembuatan Terasi..........................................................................................
2.1.3 Mutu Terasi...............................................................................................................
2.1.4 Kriteria Terasi Yang Aman......................................................................................
ix
2.1.5 Kegunaan Terasi.......................................................................................................
2.2 Bakteri Pada Makanan...............................................................................................10
2.3 Bakteri Coliform ......................................................................................................15
2.3.1 Pengertian Bakteri Coliform...................................................................................15
2.3.2 Metode MPN (Most Probable Number).................................................................17
2.4 Kerangka Teori ......................................................................................................2
2.5 Kerangka Konsep....................................................................................................2
2.6 Hipotesis Penelitian...................................................................................................23
BAB III Metode Penelitian...........................................................................................2
3.1 Jenis Penelitian..........................................................................................................2
3.2 Lokasi Dan Waktu Penelitian....................................................................................2
3.2.1 Lokasi Penelitian....................................................................................................2
3.2.2 Waktu Penelitian.....................................................................................................2
3.3 Populasi Dan Sampel.................................................................................................2
3.3.1 Populasi ..................................................................................................................2
3.3.2 Sampel ..................................................................................................................24
3.3.3 Penentuan Besar Sampel........................................................................................25
3.4 Variabel Penelitian dan Defenisi Operasional...........................................................25
3.4.1 Variabel Penelitian.................................................................................................25
3.4 2 Defenisi Operasional..............................................................................................26
3.5 Instrumen Penelitian..................................................................................................26
3.5.1 Alat ......................................................................................................................26
3.5.2 Bahan......................................................................................................................26
3.6 Prosedur Penelitian....................................................................................................27
3.6.1 Tahap Pengambilan Sampel...................................................................................27
3.6.2 Tahap Sterilisasi.....................................................................................................27
3.6.3 Tahap Pengenceran Sampel....................................................................................28
3.6.4 Tahap Pembuatan Media........................................................................................28
3.7 Pengujian...................................................................................................................29
3.7.1 Uji Pendugaan (Presumtive test)............................................................................29
x
3.7.2 Uji Penegasan (Confirmative test)..........................................................................29
3.7.3 Uji Pelengkap (Completed test)..............................................................................30
3.8 Jenis Data...................................................................................................................30
3.8.1 Data Primer.............................................................................................................30
3.8.2 Data Sekunder.........................................................................................................30
3.8.3 Pengelolaan Data....................................................................................................31
BAB IV Hasil Dan Pembahasan...................................................................................32
4.1 Hasil ..........................................................................................................................32
4.1.1 Hasil Pengujian Media LB (Lactose Broth)...........................................................32
4.1.2 Hasil Pengujian Media BGLB (Brilliant Green Lactose Broth)............................33
4.1.3 Hasil Pengujian Media EMBA (Eosin Methylen Blue Agar).................................36
4.2. Pembahasan..............................................................................................................37
BAB V Penutup..............................................................................................................40
5.1 Kesimpulan................................................................................................................40
5.2 Saran..........................................................................................................................40
DAFTAR PUSTAKA....................................................................................................41
xi
DAFTAR GAMBAR
xii
DAFTAR TABEL
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
xiv
BAB I
PENDAHULUAN
1
2
dapat menjadi penyebab diare infeksi salah satunya adalah bakteri Coliform (Riri,
2014).
Berdasarkan data Badan Pengawasan Obat dan Makanan (BPOM), kasus
keracunan tingkat nasional salah satu sebabnya oleh minuman dimana terhitung 757
kasus keracunan disebabkan oleh minuman. Dari kasus yang telah tercatat tidak
dijelaskan secara langsung apakah penyebab keracunan disebakan oleh kontaminasi
bakteri atau bahan kimia (BPOM, 2019). Namun, secara teori Bakteri Coliform juga
menyebabkan kontaminasi makanan dan minuman, yang menyebabkan salah satu
gejala yaitu diare. Makanan yang kurang terjamin kebersihannya akan sangat mudah
terkontaminasi. Penyimpanan yang lama akan menyebabkan tumbuhnya bakteri
pathogen seperti Coliform. Bakteri Coliform merupakan mikroorganisme yang sering
digunakan sebagai indikator untuk menentukan suatu sumber air terkontaminasi
pathogen atau tidak. Bakteri Coliform dapat tumbuh dan berkembang baik pada suhu
penyimpanan 7 0C hingga 60 0C. Pengolahan makanan minuman yang tidak higienis
dan saniter dapat mengakibatkan adanya bahan-bahan yang dapat menimbulkan
gangguan kesehatan pada konsumen. Makanan dan minuman dapat menimbulkan
penyakit disebabkan dua hal, yaitu mengandung komponen beracun (logam berat dan
bahan kimia beracun) dan terkontaminasi mikroorganisme patogen. Makanan yang
terkontaminasi dapat menimbulkan penyakit. Gangguan kesehatan yang terjadi
berupa gangguan pada saluran pencernaan dengan gejala mual, perut mulas, muntah
dan diare (Irianto, 2014).
Menurut Hasanah (2018) makanan yang telah tercemar mikroba seringkali
tidak tampak secara kasat mata, bahkan tidak menyebabkan kerusakan fisik seperti
kerusakan berasal segi warna, rasa, dan penampilan, sehingga membuat rakyat tetap
mengkonsumsi makanan tersebut tanpa terdapat rasa curiga sedikitpun. Beberapa
faktor yang mengakibatkan terjadinya kontaminasi pada makanan, salah satunya
terkait menggunakan pengolahan makanan, tidak memperhatikan prinsip higiene baik
berasal perlengkapan alat-alat yang dipergunakan dan kebersihan para tangan penjual.
Menurut Isnaeni (2014) ada beberapa bakteri pathogen penyebab penyakit
pada makanan yaitu seperti Salmonella sp., Vibrio sp., Shigella sp., Streptococcus
3
faecalis, Bacillus cereus, dan golongan bakteri Coliform yakni Escherichia coli. Oleh
karena itu sebab penting untuk mengetahui tingkat keamanan yang berasal dari suatu
makanan untuk menghindari penyakit yang akan disebabkan, baik yang berasal dari
perlakuan kebersihan maupun dari lingkungan disekitar.
Setyorini (2013) mengatakan bahwa jika dalam suatu makanan sudah
tercemar bakteri Coliform sebanyak >1100 dari 750 ml sampel, memungkinkan
terjadinya penyakit yang berhubungan menggunakan mekanisme pertahanan tubuh,
baik itu mengakibatkan diare atau infeksi-infeksi lain. Adanya kandungan bakteri
Coliform dalam suatu makanan menandakan bahwa terjadi kontaminasi cemaran tinja
manusia yang ada dalam sumber air maupun makanan tersebut, yang bisa
ditimbulkan berasal dari peralatan dan juga pengerjaan yang kurang higienis.
Penelitian sebelumnya yang dilakukan Darna, dkk (2017), tentang Analisis
cemaran Bakteri Coliform pada makanan tradisoinal sotong pangkong di jalan
merdeka kota Pontianak berdasarkan nilai Most Probable Number (MPN)
menunjukan bahwa cemaran bakteri Coliform berdasarkan nilai MPN sampel sotong
pangkong sebelum dan sesudah dipanggang melebihi batas maksimum yang telah
ditentukan oleh badan regulasi pangan BPOM No HK.00.06.1.52.4011 Tahun 2009
yaitu <3 MPN gram.
Dan pada penelitian yang dilakukan Taufik (2022), mengenai Analisis
cemaran Bakteri Coliform dan idenfikasi Bakteri Eschechia coli pada air gallon
didesa sungai danau menunjukkan bahwa diketahui 5 dari 5 sampel yang diuji tidak
memenuhi syarat yang telah ditentukan menurut PERMENKES No.
492/MENKES/PER/IV/2010 menyatakan bahwa parameter mikrobiologi terhadap
bakteri Coliform pada 100 ml air tidak boleh menggandung satu pun bakteri Coliform
atau 0 koloni/g (per 100 ml sampel).
Penelitian yang terdahulu telah dilakukan oleh Dita (2019), tentang
pemeriksaan jumlah kapang sebagai indikator kualitas terasi di pasar Tambaksari
Surabaya dapat disimpulkan bahwa persentase seluruh sampel terasi adalah 100%
berkualitas baik, sehingga terasi dipasar tersebut tergolong aman dikonsumsi.
Mengingat terasi merupakan bagian makanan (bumbu) yang digemari masyarakat di
4
Indonesia maka peneliti tertarik untuk melakukan penelitian terasi tentang identifikasi
bakteri Coliform dengan metode MPN (Most Probable Number) pada Sampel Terasi.
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan uraian latar belakang, maka rumusan masalah yang akan
dibahas dalam penelitian ini adalah:
1. Apakah terdapat cemaran bakteri Coliform pada terasi?
2. Bagaimana nilai bakteri Coliform pada terasi berdasarkan metode MPN
(Most Probable Number)?
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
1. Untuk mengetahui apakah terdapat cemaran bakteri Coliform pada terasi
berdasarkan metode MPN (Most Probable Number).
2. Untuk mengetahui Nilai Bakteri Coliform melalui tabel MPN (Most
Probable Number) pada Terasi.
1.3.2 Tujuan Khusus
1. Untuk mengindentifikasi bakteri Coliform pada terasi dengan metode
MPN (Most Probable Number).
1.4 Manfaat penelitian
1.4.1 ManfaatTeoritis
Menerapkan keilmuan bidang Bakteriologi tentang bakteri Coliform
yang terdapat pada bahan makanan khususnya Terasi dengan menggunakan
metode MPN (Most Probable Number).
1.4.2 Manfaat Praktisi
a. Bagi Institut Kesehatan Medistra
Penelitian ini diharapkan sebagai bahan acuan pembelajaran serta
bahan tambahan referensi bacaan untuk menambah ilmu pengetahuan pada
bidang Bakteriologi yaitu tentang identifikasi bakteri Coliform sebagai
kualitas terasi dengan metode MPN (Most Probable Number).
5
b. Bagi Masyarakat
Sebagai informasi pada masyarakat supaya dapat memilah serta
menentukan bahan pangan khususnya Terasi yang aman dikonsumsi dan
juga sesuai dengan ketetapan SNI (Standar Nasional Indonesia) oleh
Kemenkes sehingga saat dikonsumsi akan terhindar berasal penyakit yang
ditimbulkan berasal makanan yang tercemar bakteri.
c. Bagi Peneliti
Bagi peneliti untuk dapat mengaplikasikan langsung materi dan
praktikum yang telah dipelajari, dan untuk menambah informasi,
pengetahuan, wawasan serta pengalaman penelitian selama melakukan
penelitian.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
Terasi merupakan produk hasil olahan ikan dalam bentuk kering dan
terfermentasi. Banyak masakan khas Indonesia, yang dalam dalam proses
pembuatannya tidak dapat dipisahkan dari terasi sebagai salah satu komponen
bumbunya. Terasi sudah dikenal luas di Indonesia, terbukti dari banyak dan
beragamnya sebutan yang diberikan untuk produk terasi ini. Terasi tidak
dikenal di Indonesia saja, tetapi di negara lain juga terdapat produk semacam
terasi ini. Di Pilipina, terasi tersebut “bagoong” dan jika dibuat dari udang
kecil disebut “balanchan” atau “alanang”. Di Kamboja disebut Laos disebut
“padec” dan di Jepang disebut “gyoniso”.
Menurut Peraturan Kepala Badan POM Nomor 21 tahun 2016 tentang
Kategori Pangan, terasi udang adalah daging udang atau rebon segar atau
campurannya yang dicampur dengan adonan dan bahan tambahan lainnya
membentuk pasta kemudian dikeringkan dan di fermentasi. Terasi umumnya
terbuat dari udang kecil (rebon) dan dari ikan kecil atau teri. Bahan lainnya
adalah tepung terigu, tepung beras atau tepung lainya. Bahan-bahan campuran
6
7
inilah yang selanjutnya menentukan mutu dan cita-rasa terasi yang dihasilkan.
Terasi adalah bumbu masak yang dibuat dari udang yang difermentasikan,
berbentuk seperti pasta dan berwarna hitam-coklat, menjadi kemerahan bila
ditambah bahan pewarna. Terasi memiliki bau yang tajam dan biasanya
digunakan untuk membuat sambal terasi, tapi juga divariasikan dalam
berbagai resep tradisonal Indonesia. Ciri khas terasi adalah aromanya yang
agak tajam dan rasanya gurih (Hariyanto, 2013).
Terasi yang banyak diperdagangkan dipasar, secara umum dapat
diberbeda-bedakan sebagai dua macam sesuai bahan bakunya, yaitu terasi
yang dibuat berasal udang serta terasi yang dibuat berasal ikan. Udang
diklasifikasikan ke dalam filum Arthopoda, kelas Crustacea, dan bangsa
Decapoda. Setiap udang kemudian dibagi kembali atas suku, marga, dan jenis
yang berbeda-beda. Udang juga dikelompokkankan berdasarkan tempat
hidupnya yaitu udang laut dan udang darat (Khadijah, 2016).
Terasi dipergunakan menjadi bahan penyedap masakan untuk
menambah cita rasa makanan tersebut, seperti di masakan sayuran, sambal,
rujak, dan sebagainya sebagai bahan makanan setengah basah yang berkadar
garam tinggi, terasi bisa disimpan berbulan-bulan (Suwandi, 2015).
2.1 2 Proses Pembuatan Terasi
Proses pembuatan terasi dilakukan menggunakan metode fermentasi. Selama
fermentasi protein dihidrolisis menjadi turunan-turunannya, seperti pepton, peptida,
dan asam-asam amino. Fermentasi dapat menghasilkan amonia yang menimbulkan
terasi berbau menyengat. Di dalam masakan, terasi digunakan sebagai penyedap dan
menimbulkan cita rasa (flavouring agent) (Kemenristek, 2015).
Cara Pembuatan:
1. Udang rebon dicuci bersih, kemudian dijemur sampai kering di bawah
sinar matahari, Penjemuran dilakukan selama 2-3 hari.
2. Bahan tersebut kemudian dicampur dengan garam sebanyak 13% dan
tepung beras atau terigu, sambil diremas-remas. Pada terasi bermutu
8
tahan panas dan ada juga enterotoksin LT atau yang tidak tahan panas, apabila
strain-strain diatas dihasilkan maka akan menyebabkan diare berat.
3. Enterohemoragik Escherichia coli (EHEC)
Jenis bakteri ini dapat menimbulkan penyakit kolitis hemoragik pada
manusia yaitu diare yang disertai keluarnya darah. EHEC ditularkan melalui
foodborn disease dengan gejala yang ditimbulkan muntah, sakit perut yang
bersamaan dengan kram.
Berikut adalah klasifikasi dari bakteri Vibrio cholera menurut Faruque (2008):
Kingdom : Bacteria
Divisio : Proteobacteria
Kelas : Gamma proteobacteria
Ordo : Vibrionales
16
Famili : Vibrionaceae
Genus : Vibrio
Spesies : Vibrio cholera
Media selektif yang digunakan dalam uji ini yaitu media EMBA
(Eosin Methylen Blue Agar).
Adapun kandungan nutrisi yang terdapat pada media ini antara
lain: Pepton 10 g, Laktosa 5 g, Eosin 0,4 g sebagai indikator pH dan
menghambat pertumbuhan bakteri gram positif, Sukrosa 5 g sebagai
sumber karbohidrat, K2HPO4 (dipottasium phosphate) 2 g sebagai
sumber elektrolit dan untuk mnyeimbangkan secara osmotik, Agar
yang berfungsi sebagai bahan pemadat.
Adapun tahap dari uji pelengkap yaitu masing-masing biakan
positif pada uji penegasan diinokulasikan pada media EMBA (Eosin
Methylen Blue). Diinkubasi pada suhu 37 0C selama 24 jam. Adanya
bakteri E.coli didapati dengan tumbuhnya koloni bakteri yang
berwarna hijau metalik. (Akhwan, 2017).
Suspensi terasi
Uji Pendugaan (Presumtive test) Dengan media LB (Lactose Broth) jika hasil positif (+)
Uji Penegasan (Confirmative Test) dengan media BGLB (Brilliant Green Lactose Broth)
dilanjutkan ke uji penegasan
hasil media LB yang positif (+) dilanjutkan ke uji Pelengkap (Completed Test)
Uji Pelengkap (Completed Test) menggunakan media EMBA (Eosin Metilent Blue Agar)
Adanya bakteri Esherichia coli ditunjukkan dengan tumbuhnya koloni bakteri berwarna
hijau metalik
23
Biologi Kimia
Uji kualitas
Penyakit
Ada tidaknya terasi
yang terkontaminasi
mikroba
Keterangan :
: Variabel yang di teliti
------------- : Varibel yang tidak diteliti.
2.6 Hipotesis Penelitian
Berdasarkan perumusan masalah dan tujuan penelitian maka hipotesis peneliti
adalah :
1. Terdapat cemaran bakteri Coliform pada Terasi berdasarkan metode MPN
(Most Probable Number)
2. Nilai bakteri Coliform pada Terasi berdasarkan tabel MPN (Most Probable
Number).
BAB III
METODE PENELITIAN
24
25
4.1 Hasil
Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah terasi yang dijual di
Delimas Pasar Raya Lubuk Pakam. Sampel yang di ambil sebanyak 4 sampel terasi
yang dibeli langsung dari pasar. Pengambilan dilakukan dengan membeli terasi tidak
bermerek dan disimpan dalam wadah steril. Adapun metode yang digunakan yaitu
metode MPN (Most Probable Number) untuk mengetahui seberapa banyak
kandungan bakteri coliform yang terdapat dalam terasi. Metode MPN umumnya
digunakan menghitung bakteri khususnya bakteri coliform dan Escherichia coli Pada
metode ini dilakukan pengenceran sampel. Tujuan dari pengenceran sampel yaitu
mengurangi jumlah kandungan mikroba dalam sampel sehingga nantinya dapat
diamati dan diketahui jumlah mikroorganisme secara spesifik sehingga didapatkan
perhitungan yang tepat. Hasil dari penelitian menunjukkan bahwa dari 4 sampel
terdapat 3 sampel positif mengandung bakteri coliform sedangkan 1 sampel negatif
bakteri coliform. Adapun pengujian bakteri coliform menggunakan metode MPN
dengan 3 tahap, yaitu uji pendugaan, uji konfirmasi dan uji pelengkap. Berikut hasil
dari tahapan masing-masing uji:
4.1.1 Hasil Uji Pendugaan (Presumtive test)
Uji pendugaan merupakan pengujian tahap awal yang bertujuan untuk
mengetahui dugaan adanya keberadaan bakteri coliform berdasarkan terbentuknya
asam dan gas yang disebabkan karena fermentasi laktosa. Pada uji pendugaan ini
menggunakan media LB (Lactose Broth) sebagai nutrisi yang dapat diuraikan oleh
bakteri coliform. Sampel di uji dengan menggunakan metode MPN (Most Probable
Number) dengan seri 3 tabung setiap pengencerannya. Hasil positif ditandai dengan
terbentuknya gas atau kekeruhan warna pada media LB (Lactose Broth).
32
33
A B
4 S4 1 2 2 Positif
4.1.2 Hasil Uji Penegasan (Confirmative test)
Hasil positif dari uji pendugaan kemudian dilanjutkan uji penegasan yaitu
dengan cara diambil 1-2 ose dari tabung yang positif uji pendugaan kemudian
diinokulasikan ke tabung yang telah berisi media BGLB (Briliant Green Lactose
Broth) dan di inkubasi pada incubator pada suhu 370 C selama 2x24 jam. Media ini
dapat menghambat pertumbuhan bakteri gram positif dan meningkatkan pertumbuhan
bakteri Coliform Escherichia coli atau media ini mempunyai kemampuan membatasi
pertumbuhan mikroba yang tidak diharapkan yang dapat menganggu pengamatan.
Adanya bakteri Coliform ditandai dengan terbentuknya asam dan gas (CO2) yang
disebabkan fermentasi laktosa oleh bakteri golongan coli.
A B
Tabel 4.1.2 Data Hasil Pengujian Penegasan (Confirmative test) pada media
BGLB (Brilliant Green Lactose Broth) selama 2x 24 jam pada suhu
370 C
Hasil Uji Penegasan Jumlah Bakteri
No Sampel Keterangan
10 -1
10-2 10-3 MPN(MPN/g)
1 S1 2 2 2 Positif 31 Koloni
2 S2 0 2 1 Positif 19 Koloni
3 S3 0 0 0 Negatif -
4 S4 1 2 2 Positif 19 Koloni
Berdasarkan tabel diatas jumlah bakteri yang diperoleh berdasarkan pada tabel
MPN seri 3. Dimana angka yang diperoleh pada tabel MPN merupakan jumlah
bakteri Coliform dalam tiap gram/tiap mL sampel yang diperiksa. Pada uji penegasan
didapatkan hasil tabung positif dan setelah dirujuk pada tabel MPN.
Adanya bakteri Coliform Escherichia coli didalam sampel terasi menunjukkan
bahwa adanya kontaminasi serta adanya mikroba yang bersifat enteropatogenik yang
dapat mengganggu kesehatan. Hal ini dapat terjadi karena terjadinya cemaran seperti
penjual yang kurang memperhatikan kebersihan dalam pembuatan terasi serta lokasi
tempat penjualan yang tidak bersih. Untuk itu perlu diperhatikan kebersihan dan
sanitasi saat pengolahan atau pembuatan terasi.
4.1.3 Hasil Uji Pelengkap (Completed test)
36
Dari hasil uji pelengkap yang didapat positif dilakukan pewarnaan gram.
Pewarnaan gram ini berfungsi untuk mengetahui bahwa bakteri tersebut benar-benar
dalam golongan gram negatif atau gram positif, dan Escherichia coli merupakan
bakteri golongan gram negatif.
4.2 Pembahasan
37
dari para penjual. Diketahui bahwa bakteri fecal Coliform atau Escherichia coli dapat
tahan berbulan-bulan pada tanah dan di dalam air atau makanan, tetapi dapat mati
dengan pemanasan pada suhu 60 0C atau lebih selama 15 menit (Falamy, 2012).
Dan pada uji penegasan yang dilakukan didapatkan hasil positif pada sampel
S1, S2 dan S4. Dan dari pengujian ini didapatkan hasil jumlah koloni bakteri MPN
melalui tabel MPN seri 3 tabung yaitu: sampel ke 1 menunjukan nilai 31MPN/g,
sampel ke 2 menunjukan nilai 19MPN/g, dan sampel ke 4 menunjukkan nilai
19MPN/g.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa terasi yang dijual di pasar Delimas
Lubuk Pakam berpotensi menyebabkan terjadinya resiko gangguan kesehatan yang
diakibatkan oleh Cemaran bakteri Coliform. Hal ini dibuktikan dengan jumlah sampel
terasi yang memiliki jumlah koloni bakeri coliform lebih tinggi dan tidak memenuhi
syarat SNI NO 7388:2009 No.12.6 tentang batas maksimum cemaran
mikroorganisme dalam pangan, bahwa makanan jenis terasi seharusnya tidak
mengandung pathogen dan kadar maksimum cemaran mikroba pada terasi adalah
<3/100g sampel.
Hal ini juga sesuai dengan penelitian yang dilakukan Made (2019) tentang
pengaruh waktu penyimpanan terhadap tingkat cemaran bakteri Coliform pada
makanan tradisional Lawar Bali yang menyatakan bahwa hasil yang diperoleh dapat
diketahui bahwa tingkat cemaran bakteri Coliform pada makanan tradisional lawar
bali dalam waktu 2 jam setelah disimpan memiliki rata-rata tingkat cemaran 63/gr.
Jika dibandingkan dengan SNI 7388:2009 dalam daging olahan maka tidak
memenuhi persyaratan karena melebihi 10/gr. Bakteri Coliform dalam jumlah tertentu
dapat menjadi indikator suatu kondisi yang bahaya dan adanya kontaminasi bakteri
pathogen.
Penelitian sebelumnya yang dilakukan Taufik (2022), mengenai Analisis
cemaran Bakteri Coliform dan idenfikasi Bakteri Eschechia menunjukkan bahwa
diketahui 5 dari 5 sampel yang diuji tidak memenuhi syarat yang telah ditentukan
39
5.1 Kesimpulan
Dari penelitian yang telah dilakukan tentang Identifikasi Bakteri Coliform
dengan metode MPN pada sampel terasi ini dapat disimpulkan bahwa:
1. Hasil dari uji MPN terdapat 1 sampel yang tidak mengandung bakteri
Coliform. Sedangkan 3 sampel tercemar bakteri coliform Dimana didapatkan
jumlah bakteri MPN berdasarkan tabel MPN yaitu: pada sampel ke 1
didapatkan hasil 31 koloni, sampel ke 2 didapatkan hasil 19 koloni, dan
sampel ke 4 didapatkan hasil 19 koloni.
2. Dari hasil uji pelengkap pada media EMBA ditemukan jenis bekteri yaitu
bakteri Eschericia coli dimana ditandai dengan pertumbuhan koloni berwarna
hijau metalik.
5.2 Saran
Adapun saran yang dapat disampaikan terkait penelitian Identifikasi bakteri
Coliform dengan metode MPN pada sampel terasi ini yaitu:
1. Bagi masyarakat
Sebaiknya masyakat dapat mengkonsumsi terasi yang layak sesuai
dengan ketetapan SNI (Standar Nasional Indonesia) oleh Kemenkes dan
Badan POM.
2. Bagi penjual
Penjual hendaknya dapat mencantukan tanggal produksi pembuatan
untuk lebih menyakinkan masyarakat terkait kelayakan dan keamanan
terasi.
3. Bagi peneliti selanjutnya
Peneliti selanjunya diharapkan dapat menguji lebih lengkap mengenai
identifikasi pada terasi dari segi kimia seperti meneliti cemaran logam,
serta kriteria uji yang lain sehingga kelayakan terasi yang akan
41
42
44
45
18-24
Mirawati. (2014). Salmonella pada Jajanan yang dijual dikantin dan luar kantin
sekolah dasar. Jurnal Ilmu dan Teknologi Kesehatan. Vol 1(2), 145.
Muh. Ridho Syafarullah Kadir, A. S. (2020). Mutu Terasi Udang Rebon (Acetes
Indicus) Yang Diperdagangkan Di Beberapa Pasar Kota Kendari. Jurusan
Teknologi Hasil Perikanan,Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas
Halu Oleo, Kendari, 2.
Ningrum, I. (2020). Uji Kandungan Bakteri Koliform Pada Petis Ikan Tongkol
Dengan Menggunakan Metode MPN (Most Probable Number) Yang Terdapat
Di Pasar Klampis Bangkalan Madura. Fakultas Sains Dan Teknologi,
Universitas Islam Negeri Sunan Ampel, Surabaya: 2020, Skripsi.
Novita, L. N. (2018). Uji Bakteri Coliform dan Escherichia coli pada Air Minum Isi
Ulang dan Air Sumur di Kabupaten Cirebon. Jurnal Ilmu Alam Indonesia, 61-
62.
Oktira Roka Aji, N. N. (2021, September). Deteksi Keberadaan Coliform Dan
Escheriachia Coli Pada Es Batu Dari Penjual Minuman Di Sekitar Kampus 4
Univesitas Ahmad Dahlan. Jurnal Metamorfosa (Journal Of Biologycal
Scienes), 8(2), 223.
Peraturan Mentri Kesehatan RI. No. 17, 2015 Tentang ketahanan pangan dan gizi.
Peraturan Mentri Kesehatan RI. Jakarta.
Publish, D. (2023). Populasi Dan Sampel Penelitian Kuantitatif (Cara Menentukan).
https://deepublishstore.com/pengertian-populasi-dan-sampel
Rahayu, (2018). Escherichia coli: Patogenitas, Analisis dan Kajian Risiko. Bogor:
IPB Press
Riri Novita, S. (2014). Uji Kualitas Air Sumur Dengan Menggunakan Metode MPN
(Most Probable Number). Jurnal Bioilmi Vol. 1 No. 1. Available online:
http://jurnal.radenfatah.ac.id/index.php/bioilmi/article/view/1128
47
Saadah. (2017). Analisa Bakteri Coliform dalam es batu dari Berbagai kantin di
Universitas Islam Negri Raden Intan Lampung. Skripsi.FTK UIN Raden Intan
Lampung.
Sawasvirojwong, S., P. Srimanote, V. Chatsudthingpong, C. Muanprasat. (2013). An
Adult Mouse Model of Vibrio cholera-induced Diarrhea for Studying
Pathogenesis and Potential Therapy of Cholera. PLOS Neglected Tropical
Disease. Vol 7: 1-1
Sri Harti, A. (2015). Mikrobiologi Kesehatan. Yogyakarta: CV. ANDI OFFSET.
Soemarno. (2008). Isolasi dan Identifikasi Bakteri Klinik. Akademi Analis
Kesehatan. Yogyakarta.
Sopandi, Tatang. (2013). Mirobiologi Pangan. Yogyakarta: ANDI Yogyakarta
Taufik Kurahman, R. R. (2022). Analisis Cemaran Bakteri Coliform Dan Identifkasi
Bakteri Escherichia Coli Pada Air Galon Di Desa Sungai Danau. Journal Of
Pharmaceutical Care and Sciens,79-80.
Tambunan, Samuel. (2010). Hygiene Sanitasi dan Pemeriksaan Kandungan Bakteri.
Escherichia coli pada Es Kolak Durian yang Dijajakan Di Jalan Dr. Mansyur
Kelurahan Padang Bulan Kota Medan Tahun 2010. Skripsi FKM. USU
Medan.
Wardhany, S. (2015). Analisa Bakteri Coliform pada Air Minum dengan
Menggunakan Metode Most Probable Number (MPN). Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara.
Widodo T.S, Sulistiyanto B. dan Utama C.S. (2015). Jumlah Bakteri Asam Laktat
(BAI). Dalam Digesta Usus Halus dan Sekum Ayam Boiler yang Diberi
Pakam Ceceran Pabrik Pakam yang Difermentasi. Agripet: Vol (15) No. 2.
98-103.
48
LAMPIRAN
Lampiran 1
49
Lampiran 2
50
Lampiran 3
Tabel Rancangan Penelitian
Bulan
30 10 Agu
N Uraian 19 2 Apr- 20 - 28 Juni- 5 Juli stus
o kegiatan Nov 17 Jan- 1 Apr 25 Mei Juni Juli 2023 2023
2022 27 Mar 2023 2023 2023 2023
Pengajuan
1 Judul
Penyusunan
2 Proposal
Seminar
3 Proposal
Perbaikan
4 Proposal
5 Penelitian
Hasil dan
6 Data
Sidang
7 Skripsi
8 Pengumpulan
51
Lampiran 4
Dokumentasi Penelitian
Proses
pengenceran terasi dengan aquadest 10 mL
di hotplate
Mengambil 1-2 ose media BGLB yang positif lalu di inokulasi ke media EMBA
Hasil media EMBA dari sampel 1 Hasil media EMBA dari sampel 2
59
Hasil media EMBA dari sampel 3 Hasil media EMBA dari sampel 4
yang menunjukkan hasil negatif
Mengambil koloni
bakteri dari hasil media EMBA
yang positif untuk dibuat preparat
LAMPIRAN 5
Tabel MPN 333 menurut Formula Thomas sebagai berikut (Suanda, 2018)
0 0 0 0 2 0 0 10
0 0 1 3 2 0 1 14
0 0 2 6 2 0 2 19
0 0 3 9 2 0 3 24
0 1 0 3 2 1 0 15
0 1 1 6 2 1 1 20
0 1 2 9 2 1 2 25
0 1 3 12 2 1 3 30
0 2 0 6 2 2 0 21
0 2 1 9 2 2 1 26
0 2 2 12 2 2 2 31
0 2 3 16 2 2 3 37
0 3 0 9 2 3 0 27
0 3 1 13 2 3 1 33
0 3 2 16 2 3 2 38
0 3 3 19 2 3 3 44
1 0 0 4 3 0 0 29
68
1 0 1 7 3 0 1 39
1 0 2 11 3 0 2 49
1 0 3 14 3 0 3 60
1 1 0 2 3 1 0 46
1 1 1 1 3 1 1 58
1 1 2 1 3 1 2 72
1 1 3 18 3 1 3 86
1 2 0 12 3 2 0 76
1 2 1 12 3 2 1 95
1 2 2 19 3 2 2 116
1 2 3 23 3 2 3 139
1 3 0 15 3 3 0 190
1 3 1 19 3 3 1 271
1 3 2 23 3 3 2 438
1 3 3 27 3 3 3 1.898
69