LABORATORIUM MIKROBIOLOGI PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS SUMATERA UTARA 2023 Isi Rangkuman Video
Berdasarkan video praktikum tersebut, pertumbuhan bakteri dengan
menggunakan kerapatan optik pada panjang gelombang tertentu, jadi kita harus melakukan pembacaan kultur bakteri tersebut selama 30 menit. Yang dilakukan adalah kultur semalaman dimasukkan sedikit atau inokulum ke media yang masih segar lalu setelah itu dihitung jam nol lalu dimasukkan sedikit ke dalam tabung lalu setelah itu media yang ada inokulumnya diinkubasi selama 30 menit 30 menit kemudian ambil sebagian, lalu pasang tabung berikutnya dan kemudian uh 30 menit jadi yang berarti uh persalinan satu jam dan kemudian 30 menit kemudian satu setengah jam dan kemudian 30 menit kemudian yaitu dua jam. Jadi kita akan lakukan pembacaan selama dua jam saja tetapi sebaiknya kita melakukan pembacaan selama 24 jam atau setidaknya 18 jam untuk mendapatkan grafik kurva pertumbuhan yang sangat baik. Jadi sebelum memasukkan inokulum kultur semalam ke media segar, akan memberi label tabungnya jadi tabung ini saya beri label nol pada jam nol lalu pada 30 menit atau setengahnya lalu pada satu jam lalu pada satu setengah jam lalu selama dua jam. Jadi sekarang saya akan memindahkan kultur bakteri ke media segar jadi kita ambil 10 mil karena saya menggunakan mikropipet 1000 mikrolit, jadi saya harus mengambil 10 kali karena kita harus mengambil 10 ml jadi setelah Anda memindahkan kultur semalam 10 menit ke media segar Anda mencampurnya dengan benar, lalu kalian harus mengambil empat kali makan kultur pada jam nol, ambil empat jadi setelah kalian mengambil kultur pada jam nol kalian tutup dengan hati-hati bagian atasnya jadi ini kita inkubasi pada suhu 37 derajat celcius selama 30 menit lalu 30 menit kemudian, jadi ini eh inkubasi shaker sekarang masukkan patchernya ke dalam shaker, jadi kita kocok kulturnya dengan kecepatan 250 rpm dan 37 derajat celcius oke jadi sekarang suhunya naik dan kecepatannya naikkan ke 250 rpm oke dan saya yakin suhunya akan naik ke 37 jadi kita tunggu 30 menit kita ambil benang berbentuk kerucut lalu kita ambil empat kali makan lagi dari kultur lalu masukkan ke dalam tabung setengahnya yaitu 30 menit sehingga kita ambil pembacaannya di spektrofotometer dan setelah itu masukkan kembali ke dalam incubator shaker lalu lakukan pembacaan lagi satu jam kemudian dan kita lakukan berulang kali selama dua jam. Karena kita ingin mengambil kerapatan optik atau serapan kita atur spektrofotometernya di serapan, jadi serapannya lalu kita tekan enter lalu kita atur panjang gelombangnya jadi panjang gelombang untuk bakteri adalah 600 nanometer kita tekan enter oke dan kemudian diperlukan pengukuran nol yang berarti kita harus mengosongkan spektrofotometer jadi biasanya kita menggunakan blank tersebut karena kita menggunakan media sebagai blank, jadi ini latar belakangnya karena kulturnya sendiri seperti yang kalian lihat jadi yang backgroundnya medianya jadi medianya blanko jadi kita anggap ini panjang ke nol bacaannya jadi kita lap dengan tisu sebelum kita masukkan ke dalam tempat kuvet oke lalu kita tekan 0 untuk mengedipkan spektrofotometer dengan media, sudah nol dan mulai pengukuran lalu tekan tombol start jadi yang harus dilakukan adalah transfer budayanya ke nol oke kita pindahkan ke kuvet oke lalu tentu saja kita bersihkan itu dengan tisu jadi tidak ada bekas jari sehingga menghambat pembacaan kepadatan optik jadi kita taruh di dudukan yang sama dan apa bacaannya jadi kita tekan ini mulai oke jadi bacaannya 0,286 jadi kamu catat dan ini bacaannya di jam nol oke jadi saya lanjutkan menghitung pembusukan menghitung jamur sehingga seperti yang terlihat di sini ini adalah jamur dan yang hitam adalah spora dan ini adalah aspergillus niger oke jadi untuk memanen bola ini untuk dihitung menggunakan hematometer kita ambil 10 juta air steril ambil waktu 10 menit dan pindahkan ke jembatan besar sekian banyak jadi setelah itu kita pakai kaca slide bersihkan slide untuk mengikis tiang ini banyak sekali yang kecil-kecil disini jadi hati-hati anda mengikis bola ini setelah itu kita tuang spool ke piring lain biar lebih kecil jadi cobalah untuk mendapatkan volume sebanyak dan kekuatan ini untuk ditransfer sehingga dapat memanggil spa, karena titiknya agak terlalu terkonsentrasi seperti yang terlihat di sini jadi saya memutuskan untuk membuat pengenceran dua kali oke jadi apa yang saya lakukan apakah saya ambil seperti uh contoh lima kali makan olahraga di sini saya pindahkan ke cawan petri baru dan saya masukkan lagi lima juta air suling di sini sehingga menjadi pengenceran dua kali jadi sekarang hanya saya pindahkan suspensi sejauh ke hemostatometer jadi ini gaya hematoma jadi ini meteran martil dimana pada slide ini terdapat kisi-kisi dan terdapat dua ruang ruang atas dan ruang atas dan kedalaman ruang 0,1 milimeter jadi saya pasang kaca penutup semua sudah dibersihkan dengan baik plus kaca penutupnya jadi aku taruh disini jadi aku ambil uh 10 ml spoolnya untuk dipindahkan ke hema centimeter jadi aku campur dulu dengan benar, jadi aduk rata jadi baru aku pindahkan ke master meter, jadi sudah taruh di ruang bawah jadi sekarang diaduk rata lagi lalu saya masukkan ke ruang lain, jadi setelah itu taruh ini di mikroskop untuk dihitung di bawah mikroskop.