Pengumpulan air mani:

Langkah pertama dalam program IB adalah pengumpulan semen secara manual (memerah susu).
Sebuah tim yang terdiri dari dua anggota harus dilibatkan dalam pengumpulan semen, satu untuk
menahan pejantan dan yang lainnya untuk mengumpulkan semen. Unggas harus dipegang dalam
posisi horizontal oleh seseorang pada ketinggian yang nyaman bagi operator yang berusaha
mengumpulkan semen. Untuk mengumpulkan air mani, operator harus meletakkan ibu jari dan jari
telunjuk tangan kiri di kedua sisi kloaka dan memijat dengan lembut. Dengan tangan kanan operator
harus memegang corong pengumpul dan dengan ibu jari dan jari telunjuk memijat bagian lunak
perut di bawah tulang panggul. Pijatan harus dilakukan dengan cepat dan terus menerus sampai
penis menonjol keluar papila dari kloaka. Setelah papila menonjol sepenuhnya, ibu jari dan jari
telunjuk tangan kiri yang ditempatkan sebelumnya digunakan untuk memeras air mani ke dalam
corong pengumpul. Hindari kontaminasi semen dengan feses dan bulu.

Semen harus dievaluasi setelah pengumpulan. Warna normal air mani berwarna putih mutiara atau
krem. Air mani kuning dan air mani yang terkontaminasi darah, urat, feses atau kotoran lainnya
harus dihindari. Air mani tidak boleh dibiarkan bersentuhan dengan air. Jika puing-puing atau
kontaminan diamati dalam semen yang terkumpul, aspirasi dengan hati-hati kontaminan dari sampel
sebelum dicampur dengan pengencer tambahan dengan semen. Air mani yang telah diencerkan
harus disimpan dalam pendingin atau kulkas (3 sampai 12°C) untuk mendinginkannya. Semen ayam
mulai kehilangan kemampuan membuahi bila disimpan >1 jam. Penyimpanan semen cair dingin
(4°C) dapat digunakan untuk mengangkut semen dan mempertahankan viabilitas spermatozoa
selama ~6–12 jam. Semen ayam mungkin dibekukan, tetapi pengurangan kesuburan membatasi
penggunaan untuk proyek pemuliaan khusus.

Inseminasi:

Semua peralatan yang akan digunakan untuk inseminasi harus dibersihkan dan dikeringkan secara
menyeluruh sebelum digunakan. Inseminasi harus dilakukan ketika sebagian besar burung telah
selesai bertelur karena telur yang bercangkang keras di ujung bawah saluran telur menghalangi
inseminasi dan menurunkan kesuburan. Dalam prakteknya, inseminasi ayam setelah jam 3 sore
mendapatkan hasil yang lebih baik. Sulit untuk membuahi ayam bukan petelur. Biasanya inseminasi
dilakukan saat flok mencapai 25% produksi telur. Ayam diinseminasi dua kali selama minggu
pertama, kemudian dengan interval mingguan. Dalam kondisi eksperimental, tingkat kesuburan 90%
telah diperoleh pada ayam yang diinseminasi pada interval 3 hari dengan 400-500 juta spermatozoa
ayam yang dibekukan. Pada ayam, jumlah semen encer yang diinseminasi berkisar antara ~100–200
juta sel sperma per inseminasi. Pada ayam, karena konsentrasi spermatozoa yang lebih rendah dan
durasi fertilitas yang lebih singkat, diperlukan 0,05 mL semen yang tidak diencerkan, dengan interval
7 hari. Perilaku jongkok ayam menunjukkan penerimaan dan waktu untuk inseminasi
pertama.Kesuburan cenderung menurun di akhir musim; oleh karena itu, dapat dibenarkan untuk
menginseminasi lebih sering atau menggunakan lebih banyak sel per dosis inseminasi seiring
bertambahnya usia ayam. Prosedur: Untuk inseminasi ayam dipegang dengan kaki tegak dengan
tangan kiri di bawah dan ekor diselipkan ke belakang dan menempel pada dada operator. Ibu jari
tangan kanan diletakkan di bibir atas lubang angin kemudian dengan gerakan memutar otot perut
ditekan, terutama di sisi kiri. Jangan meremas dengan jari tetapi berikan tekanan secara merata
dengan telapak tangan. Hal ini menyebabkan kloaka terbalik dan saluran telur menonjol, operator
kedua memasukkan jarum suntik atau sedotan plastik ~ 1 inci (2,5 cm) ke dalam saluran telur dan
jumlah semen yang sesuai disimpan di persimpangan vagina dan rahim. Saat air mani dikeluarkan
oleh inseminator, tekanan di sekitar lubang dilepaskan, yang membantu ayam betina menahan
sperma di vagina atau saluran telur.

Keuntungan : Beberapa keuntungan inseminasi buatan pada unggas adalah: 1. Biasanya satu ekor
ayam jantan dapat dikawinkan dengan enam sampai sepuluh ekor ayam. Dengan inseminasi buatan
rasio kawin ini dapat ditingkatkan empat kali lipat. Dengan cara ini, satu pejantan dengan
keunggulan genetik tinggi untuk sifat minat tertentu dapat digunakan untuk melayani lebih banyak
betina. 2. Pejantan yang lebih tua yang memiliki performa luar biasa dapat digunakan selama
beberapa generasi sedangkan di bawah perkawinan alami masa manfaat mereka terbatas. 3. Unggas
jantan berharga yang cedera kaki masih bisa digunakan untuk inseminasi buatan. 4. Bila ada
kesuburan yang buruk yang disebabkan oleh perkawinan preferensial, itu bisa dihilangkan.5.
Meskipun perkawinan silang sangat berhasil dalam kondisi alami, tetapi kadang-kadang ada
semacam diskriminasi warna karena beberapa ayam betina tidak akan kawin dengan pejantan yang
berbeda warna kecuali mereka dipelihara bersama. Dalam kondisi seperti itu AI membantu
keberhasilan persilangan. 6. AI memungkinkan individu yang tidak cocok untuk kawin;
ketidakcocokan muncul ketika jantan lebih berat dari betina dan di bawah perkawinan alami hal ini
dapat menyebabkan cedera pada betina. 7. IB memungkinkan penggunaan sistem pemberian makan
kandang yang lebih baik dalam operasi pembenihan, terutama ketika berhadapan dengan sejumlah
besar betina yang dibutuhkan untuk bertelur.

Fisiologi reproduksi ayam jantan Berbeda dengan mamalia jantan yang organ reproduksinya berada
di luar rongga tubuh, sistem reproduksi unggas jantan sepenuhnya berada di dalam tubuh burung,
tepat di depan ginjal, dan dihubungkan dengan dinding tubuh bagian dorsal (Brooks, 1990).
Akibatnya, spermatogenesis terjadi pada suhu 41 derajat Celcius pada burung, berlawanan dengan
24-26 derajat Celcius pada skrotum mamalia (Nickel et al., 1977). Salah satu aspek burung yang
paling menarik adalah sperma mereka dapat bertahan hidup pada suhu tubuh. Organ reproduksi
jantan terdapat di bagian luar tubuh karena sperma mamalia tidak bertahan hidup pada suhu tubuh
(Brooks, 1990). Sekresi Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH) dari hipotalamus, sekresi
Luteinizing Hormone (LH) dan Follicle Stimulating Hormone (FSH) dari lobus anterior hipofisis, dan
pelepasan steroid gonad semuanya berkontribusi pada produksi sperma. LH merangsang produksi
progesteron, yang kemudian diubah menjadi hormon seks pria testosteron, melalui kerja sel Leydig
di testis (Senger, 2003). Testosteron diperlukan untuk spermatogenesis di tubulus seminiferus, tetapi
jumlah LH yang tinggi menyebabkan sel Leydig menjadi tidak responsif (Senger, 2003).
Perkembangan sperma dapat dibagi menjadi tiga proses: spermatositogenesis, spermiogenesis, dan
spermiasi. Bobot testis lebih erat kaitannya dengan ukuran tubuh dibandingkan dengan tingkat
produksi sperma.Langkah pertama spermatogenesis berlangsung di sekeliling tubulus seminiferus
yang dilapisi spermatogonia (Zlotnik, 1947). Spermatogonia adalah sel diploid yang berproliferasi
mitosis yang menghasilkan spermatosit dan mempertahankan populasi sel punca yang stabil untuk
spermatogenesis. Tubulus seminiferus pada burung tersusun sebagai jaringan saluran-saluran yang
saling berhubungan yang mengalir ke dalam testis setelah semen terbentuk (Tingari, 1972). Tabung
acoil, vas deferens, muncul dari setiap epididimis dan berjalan ke posterior, melekat pada dinding
tubuh bagian dorsal sampai berakhir di lingga kecil di kloaka (Nickel et al., 1977). Vas deferens,
seperti seluruh saluran, membesar sesaat sebelum berakhir dan bertindak sebagai tempat
penyimpanan spermatozoa. Setiap vasdeferens memiliki papilla kecil di ujungnya yang
mengeluarkan sperma ke dalam kloaka (Nickel et al., 1977). Beberapa lipatan kecil di kloaka ventral
membesar dengan cairan limfatik dan menonjol selama rangsangan seksual, menghasilkan struktur
seperti palung untuk mengontrol keluarnya air mani (Nishiyama, 1955). Spermatozoa yang lebih
awal meninggalkan rete tubules, diferensiasi struktural dianggap lengkap (Tingari, 1973). Karena
motilitas sperma diperoleh di vasdeferens, penyelidikan awal menunjukkan bahwa sperma yang
diambil dari testis atau epididimis ayam mampu menghasilkan kesuburan pada tingkat yang sangat
rendah. Total waktu transit dari testis ke daerah terminal vasa deferential diperkirakan antara 1 dan
4 hari (Munro, 19). Air mani merupakan campuran sel sperma dan cairan getah bening (Nishiyama,
1955).

Karakteristik seksual sekunder pada Cockerel Karakteristik seks sekunder diperoleh saat ayam jantan
matang sebagai hasil sekresi hormonal dari testis, yang diatur oleh sekresi gonadotropin dari
kelenjar hipofisis anterior dan sekresi hormon pelepas gonadotropin (GnRH) dari hipotalamus
(Etches, 1996). Perkembangan jengger, bulu, dan pial adalah contoh ciri seks sekunder pria.
Meskipun capon dan betina maskulin akan melakukan upaya yang buruk untuk meniru jantan utuh,
androgen juga bertanggung jawab untuk produksi penuh suara unik ayam jantan (Etches, 1996).
Androgen diperlukan untuk mendorong pertumbuhan jengger dan pial pada ayam jantan. Pada
kedua jenis kelamin, perkembangan jengger bertepatan dengan peningkatan konsentrasi plasma
androgen (Etches, 1996). Mashaly dan Glick (1979) berspekulasi bahwa dihidrotestosteron mungkin
lebih penting daripada testosteron dalam mendorong pertumbuhan jengger. Rath et al. (1996),
sebaliknya, menemukan bahwa testosteron meningkatkan berat jengger. Ayam biasanya mulai
memproduksi sperma pada usia 16 minggu, namun potensi pembuahan sperma terbatas. Akibatnya,
ayam semuda 22 atau 24 minggu digunakan untuk mengumpulkan semen. Whi mutiara putih adalah
warna alami dari sperma unggas. Jantan dari breed berat dapat menghasilkan 0,75 hingga 1 ml
sperma, sedangkan jantan breed ringan dapat menghasilkan 0,4 hingga 0,6 ml. Seorang pria dapat
digunakan untuk pengumpulan air mani tiga kali seminggu dengan jeda satu hari di antara setiap
sesi. Walaupun pengumpulan sperma setiap hari tidak akan mempengaruhi kapasitas pembuahan,
volume sperma yang terkumpul akan rendah.

Ciri-Ciri Air Mani Pada Ayam Semen terdiri dari spermatozoa dan plasma mani. Sperma unggas
seringkali cukup pekat (3 hingga 8 miliar spermatozoa per ml untuk unggas broiler). Hal ini
disebabkan karena burung tidak memiliki sistem reproduksi ekstra, sehingga plasma mani dalam
jumlah terbatas. Plasma mani diproduksi oleh testis dan saluran keluar. Setelah ejakulasi, cairan
seperti getah bening yang berasal dari kloaka dapat ditambahkan ke air mani dalam berbagai jumlah.
Ketika cairan bening ditambahkan ke sperma setelah ejakulasi, itu bertindak sebagai media pengaktif
untuk spermatozoa yang sebelumnya non-motil, memastikan perjalanan mereka dari pengendapan
ke tempat tubulus penyimpanan sperma di persimpangan utero-vaginal saluran telur ayam. Jumlah
rata-rata ejakulasi semen yang diukur adalah 0,6 ml, dengan ayam jantan menghasilkan antara 0,1
dan 1,5 ml per ejakulasi (Cole dan Cupps, 1977). Pada periode yang berbeda, ayam jantan yang
berbeda dari spesies yang sama menghasilkan jumlah semen yang bervariasi (Anderson, 2001).
Dengan menggunakan teknik pijat perut, rata-rata volume ejakulasi adalah sekitar 0,25 ml (Gordon,
2005). Konsentrasi spermatozoa rata-rata adalah 3,5 juta per mililiter sperma. Karakteristik
pergerakan sperma meliputi kecepatan garis lurus, kecepatan melengkung, dan kecepatan jalur rata-
rata. Burrows dan Titus (1939) mengungkapkan adanya hubungan antara ukuran testis dan volume
semen yang dihasilkan.Dari usia 16 sampai 44 minggu, laki-laki dengan testis terbesar menghasilkan
semen paling banyak (de Reviersand Williams, 1984). Jantan besar pada umumnya memiliki testis
yang besar, sehingga jantan broiler breeder menghasilkan lebih banyak sperma dibandingkan jantan
Leghorn (de Reviers dan Williams, 1984). Kualitas spermatozoa merupakan faktor pembatas yang
lebih penting daripada berapa kali mereka diinseminasi. Volume dan konsentrasi semen, viabilitas
sperma, dan motilitas sperma biasanya digunakan untuk menentukan kualitas sperma unggas
(Parker et al., 2000). Brown dan McCartney (1983) menunjukkan, bagaimanapun, bahwa baik
volume semen yang dikumpulkan maupun berat testis tidak berpengaruh pada kesuburan telur atau
daya tetas. Dalam kawanan kawin alami, kesuburan berhubungan secara teratur dengan konsentrasi
dan volume sperma. (Wilson et al., 1979). Kualitas sperma juga dipengaruhi oleh cara
penanganannya dan lama penyimpanannya (Wishart, 1995). Motilitas sperma, metabolisme sperma,
dan fraksi sperma yang cacat atau mati semuanya telah dikaitkan dengan kesuburan (McDaniel dan
Craig, 1959).

Teknik Pengumpulan Air Mani dari Ayam Jantan Sampel air mani yang bersih dengan volume yang
cukup diperlukan secara teratur untuk melakukan inseminasi buatan dengan benar. Metode
pengumpulan semen tertua mengharuskan ayam jantan untuk kawin dengan ayam betina, setelah
itu ayam-ayam itu dibunuh dan semennya dikeluarkan dari saluran telur melalui pembedahan. Pada
kalkun, unggas domestik, ayam guinea, burung puyuh dan burung puyuh), dan burung, ereksi organ
sanggama dan refleks ejakulasi terjadi secara bersamaan sebagai respons terhadap pijatan, dan
sebagian besar spermatozoa diperoleh pada ejakulasi pertama (Lake dan Stewart, 1978, Marks dan
Lepore, 1965). Pada ayam ras ringan, rata-rata volume semen per koleksi berkisar antara 0,05-0,50
ml, sedangkan pada ayam jantan ras berat berkisar antara 0,1-0,9 ml (Lake dan Stewart, 1978).
Volume semen pada kalkun ringan adalah 0,08-0,30 ml, sedangkan pada jantan berat adalah 0,1-
0,33 ml (Lake dan Stewart, 1978). Kapasitas spermatozoa ayam sampai umur tiga tahun untuk
membuahi adalah sama; Namun, volume spermatozoa berkurang seiring bertambahnya usia. Untuk
memastikan kualitas semen yang baik, burung jantan harus dilatih secara rutin untuk pengumpulan
semen selama beberapa hari sebelum tanggal aplikasi inseminasi buatan yang sebenarnya. Oleh
karena itu, pakan harus dihentikan 12 jam sebelum pengumpulan semen untuk memastikan sampel
pengumpulan semen bersih.Sangat penting untuk diingat bahwa fraksi spermatozoa yang
mengalami degenerasi secara alami di vas deferens tumbuh seiring dengan waktu antara
pengumpulan semen yang semakin lama. Hal ini disebabkan adanya penyerapan kembali
spermatozoa (Tingari dan Lake, 1972). Semen harus dikumpulkan dari pejantan pada frekuensi
tertentu selama musim kawin untuk memastikan pasokan semen berkualitas baik, meskipun hal ini
bervariasi menurut ras dan spesies. Keluaran spermatozoa yang optimal dipertahankan pada
frekuensi tiga kali seminggu (bergantian hari), menghasilkan kesuburan yang baik pada ayam (Lake
dan Stewart, 1978).

Evaluasi Semen Pemeriksaan kualitas semen memiliki dua tujuan: pertama, untuk menjamin bahwa
hanya pejantan yang menghasilkan sperma berkualitas tinggi yang dipelihara di peternakan, dan
kedua, untuk mengevaluasi konsentrasi spermatozoa dan volume semen. Hal ini memungkinkan
dilakukan estimasi pengenceran yang tepat untuk menghasilkan 80-100 juta spermatozoa per dosis
inseminasi. Menggunakan konsentrasi sperma untuk menghitung kuantitas sperma per dosis
inseminasi dan sebagai ukuran kualitas sperma memiliki berbagai keuntungan (Senger, 2003).
Konsentrasi sperma yang khas pada sperma ayam jantan domestik adalah 5 miliar sel sperma per
mililiter (Gordon, 2005), sedangkan Hafez dan Hafez (2000) melaporkan 3-7 miliar sel sperma/ml.
Motilitas sperma merupakan indikator sperma hidup dan kualitas sampel semen. Sperma segar dan
encer digunakan untuk menguji motilitas sperma, yang biasanya dilakukan di bawah mikroskop
cahaya (Hafez dan Hafez, 2000). Pada unggas domestik, motilitas sperma merupakan faktor utama
kesuburan (Donoghue et al., 1998). Namun, pemeriksaan visual sperma harus diabaikan (Peters et
al., 2008). Sampel air mani yang berkualitas baik berwarna putih kental dan mutiara (Cole dan
Cupps, 1977), dan warna lain menunjukkan adanya kontaminasi; misalnya, air mani berwarna kuning
dan hijau menunjukkan adanya kontaminasi feses atau urin (Lake, 1983). Adanya darah ditandai
dengan pigmen merah kecoklatan atau warna kemerahan (Etches, 1996).Sebaliknya, semen unggas
domestik bervariasi konsistensinya dari suspensi padat buram hingga cairan encer/transparan
(Mohan dan Moudgal, 1996). Morfologi spermatozoa dapat digunakan untuk menilai kualitas
sperma. Blesbois (2007) menjelaskan bahwa teknik pemeriksaan morfologi sperma ayam jantan
menggunakan pewarnaan eosin-nigrosin. Secara tradisional, evaluasi sperma dilakukan oleh teknisi
laboratorium yang mengamati di bawah mikroskop dan menghitung sperma secara manual,
perkembangan motilitas (biasanya diberi nilai mulai dari 1 sampai 4), dan kualitas sperma (umumnya
diberi nilai mulai dari 1 sampai 4) dan morfologi spermatozoa (kerusakan dan cacat). Pengamatan ini
sepenuhnya pribadi. Pada ayam, sistem CASA digunakan dalam kombinasi dengan mikroskop fase
kontras (NikonEclipse model 50i; kontras negatif) dan perangkat lunak Sperm Class Analyzer untuk
mengukur motilitas dan konsentrasi sperma. Kecepatan garis lurus (VSL), kecepatan lengkung (VCL),
dan kecepatan jalur rata-rata adalah beberapa karakteristik pergerakan sperma yang dipelajari oleh
CASA. Berdasarkan kecepatan umumnya, spermatozoa diklasifikasikan sebagai lambat (10 m/detik),
sedang (10-50 m/detik), atau cepat (>50 m/detik).

Inseminasi ayam secara sintetik Air mani sering disimpan di lokasi yang dangkal di vagina ayam
selama sanggama alami. Untuk pembuahan optimal telur yang diletakkan setiap hari berturut-turut
oleh ayam selama minggu berikutnya, diperlukan untuk membalikkan bagian distal saluran telur
(vagina) dan menyimpan semen hingga kedalaman 2-4 cm selama inseminasi buatan. Sperma ayam
biasanya diinseminasi pada kedalaman 2-3 cm di liang vagina (Artemenko dan Tereshchenko, 1992).
Inseminasi ayam sebenarnya dapat dilakukan oleh dua orang setelah sampel semen yang baik
diperoleh (Quinn dan Burrows, 1936). Satu orang menerapkan tekanan yang tepat di sisi kiri perut
sehingga ayam berputar ke dalam lubang vagina luar melalui kloaka. Pada saat yang sama, air mani
diendapkan oleh orang kedua ke kedalaman lubang vagina bersamaan dengan penarikan tekanan
pada perut ayam. Inseminasi dapat dilakukan dengan sedotan steril, jarum suntik atau tabung
plastik. Sperma disimpan di sini selama beberapa hari atau minggu sebelum digunakan dalam proses
pembuahan. Menurut Hafez dan Hafez (2000), sperma menghabiskan waktu yang sangat singkat di
saluran betina pada mamalia, tetapi dapat bertahan lebih lama di saluran telur pada ayam dan
kalkun sebelum membuahi sel kuning telur (hingga 32 hari pada ayam dan 70 hari pada kalkun).
Spermatozoa akan bermigrasi dari SST ke lokasi penyimpanan kedua (sarang sperma) di
persimpangan magnum dan infundibulum di bagian atas saluran telur (Aisha dan Zain, 2010).
Masuknya ovum ke dalam infundibulum menyebabkan spermatozoa keluar dari sarang sperma
untuk terjadi pembuahan (Aisha dan Zain, 2010).

Waktu Inseminasi Pada ayam yang dikawinkan secara artifisial dan alami, waktu inseminasi yang
dilakukan memiliki dampak besar pada fertilitas. Terjadinya telur bercangkang keras di dalam rahim
ayam pada malam hari jarang terjadi. Akibatnya, inseminasi pada sore atau malam hari
menghasilkan kesuburan yang lebih tinggi dibandingkan pada pagi hari (Christensen dan Johnston,
1977; Aisha dan Zain, 2010). Adanya telur bercangkang keras di dalam rahim ayam pada atau
mendekati waktu IB mengakibatkan penurunan fertilitas. Mayoritas spermatozoa yang diinseminasi
pada ayam dan kalkun dalam waktu 1-3 jam setelah oviposisi dikeluarkan oleh kontraksi vagina yang
terlibat dalam proses oviposisi (Brillard dan Bakst, 1990).

Prosedur pengumpulan semen. Sebelum pengambilan semen, ayam perlu dilatih dan ini dicapai
melalui pijat perut dan punggung selama sekitar satu menit selama 3 hari berturut-turut. Metode
pijat perut adalah yang paling umum digunakan karena non-invasif dan memiliki tekanan minimal
pada ayam. Prosedurnya melibatkan menahan pejantan, diikuti dengan membelai perut dan
punggung dengan lembut namun cepat (testis terletak di wilayah ini) ke arah ekor. Ini merangsang
organ sanggama menyebabkannya menonjol. Pada titik ini, pawang dengan cepat mendorong
ekornya ke depan dengan satu tangan dan, pada saat yang sama, menggunakan ibu jari dan telunjuk
tangan yang sama untuk menekan dengan lembut daerah yang mengelilingi sisi kloaka untuk
“memerah” air mani dari saluran organ sanggama. Semen kemudian dapat dikumpulkan dalam
tabung kecil atau wadah seperti cangkir. Prosedur ini diulang dua kali, sekali sehari; putaran
tambahan dapat menyebabkan kerusakan pada testis dan daerah kloaka. Volume semen yang dapat
dikumpulkan dari seekor ayam jantan berkisar antara 0,7 sampai 1,0 ml, dengan konsentrasi
spermatozoon 3 sampai 4 milyar/ml. Namun, jumlah air mani tergantung pada faktor genetik dan
lingkungan seperti usia, berat badan, musim dan nutrisi. Sejauh mana laki-laki akan merespon teknik
pijat perut dan tekanan diterapkan pada saluran ejakulasi juga akan mempengaruhi jumlah air mani
yang dihasilkan. Semen ayam mulai kehilangan kemampuan membuahi bila disimpan lebih dari 1
jam; oleh karena itu harus disimpan di ayam dalam waktu 1 jam setelah pengumpulan. Dalam hal
penyimpanan dan pengangkutan semen dalam jangka pendek, perlu digunakan penyimpanan cair
dingin (4⁰c) untuk mempertahankan viabilitas spermatozoa hingga 24 jam.

Prosedur pengendapan semen. Inseminasi vagina biasanya digunakan untuk pengendapan semen
karena risiko cedera ayam lebih kecil. Membelai dan memijat bagian belakang dan perut terlebih
dahulu diperlukan untuk merangsang ayam. Ini diikuti dengan memberikan tekanan ke sisi kiri perut
ayam di sekitar lubang yang menyebabkan eversi kloaka sehingga tonjolan lubang vagina.
Inseminator yang berisi semen dimasukkan sedalam 2,5 cm ke dalam lubang ini untuk menyimpan
semen. Saat air mani dikeluarkan oleh inseminator, tekanan di sekitar lubang dilepaskan, sehingga
saluran telur dapat kembali ke posisi normalnya dan menarik air mani ke dalam ke sambungan
utero-vaginal. Inseminator seperti sedotan, jarum suntik atau tabung plastik dapat digunakan.
Selama inseminasi, volume semen yang dibutuhkan per ayam sekitar 0,1 ml yang mengandung
sekitar 100 hingga 200 juta sperma. Waktu inseminasi harus diperhatikan. Yang terbaik adalah
membuahi ayam pada sore hari (14:00 dan 16:00), karena pada pagi hari ayam mungkin memiliki sel
telur di saluran telur, sehingga sperma sulit untuk berenang ke ovarium. Ciri penting dari fisiologi
reproduksi ayam betina adalah kemampuannya untuk menyimpan spermatozoa yang subur hingga
14 hari di tubulus penyimpanan sperma yang terletak di persimpangan utero-vagina. Tubulus
melepaskan semen, perlahan-lahan dari waktu ke waktu, yang berenang ke tempat pembuahan dan
oleh karena itu memungkinkan ayam untuk diinseminasi secara berurutan selama dua hari untuk
pertama kalinya, dan selanjutnya dengan interval teratur selama 14 hari. Dua puluh empat jam
setelah inseminasi, analisis pelepasan telur dilakukan untuk menentukan kesuburan telur. Saat ini,
Smallholder Indigenous Chicken Improvement Program (InCIP) – unit penelitian di Universitas
Egerton menawarkan pelatihan kepada peternak yang berminat tentang inseminasi buatan pada
unggas. Pelatihan tidak membutuhkan latar belakang ilmu perunggasan, hanya minat individu. Hal
ini karena pelatihan mencakup dasar-dasar anatomi dan fisiologi reproduksi pria dan wanita, baik
secara teoritis maupun praktis. Setelah itu, para peserta dibawa melalui pelajaran praktis tentang
teknik pengumpulan dan pengendapan semen, serta analisis kesuburan telur. Pelatihan ini memakan
waktu dua minggu dan diharapkan pada akhirnya adalah individu memiliki kemampuan untuk
melakukan pengumpulan semen dari laki-laki (pijat perut, pemerahan semen dan penanganan
semen), pengendapan semen pada wanita (cloacal evertion, pengendapan semen) dan
membedakan telur fertil dari telur infertil.

Dosis dan Frekuensi Inseminasi Kesuburan telur pada ayam buras dipengaruhi oleh umur unggas,
jumlah sperma, dan jenis ayam baik broiler maupun layer (Talebi et al., 2009). Pada usia 52 minggu,
spermatozoa kalkun telah kehilangan 20% motilitasnya. Menurut para peneliti ini, laki-laki yang
mengalami AI antara usia 32-35 dan 39-42 minggu memiliki tingkat kesuburan yang lebih baik
daripada mereka yang mengalaminya setelah usia 44-47 minggu (masing-masing 93,90 dan 97,50
persen vs. 81,80 persen kesuburan). Kualitas sperma pria telah berkurang selama 44-52 minggu.
Kualitas semen lebih tinggi pada kalkun jantan 35-42 minggu dibandingkan kalkun jantan 63-73
minggu (Slanina et al., 2015). Ayam muda yang diinseminasi dengan interval mingguan dengan dosis
sperma sedang (125 juta) memiliki fertilitas tinggi (93,3 persen), tetapi dosis sperma besar (250 juta)
pada ayam tua tidak mampu mempertahankan fertilitas pada tingkat yang sama dengan ayam muda
(Brillard dan McDaniel, 1986). Ini menunjukkan bahwa ayam yang lebih tua memiliki insiden
kehilangan sperma yang lebih tinggi di kelenjar inang sperma daripada ayam yang lebih muda.
Faktor-faktor yang mempengaruhi produksi semen pada ayam jantan Pengumpulan, kualitas, dan
kesuburan sperma burung dipengaruhi oleh umur, musim, jadwal pencahayaan, berat badan, pola
makan, manajemen, dan spermatogenesis (Mohan et al., 2016). Individu dari strain dan breed yang
berbeda, serta spesies unggas yang berbeda, memiliki perbedaan yang melekat dalam produksi
semen (Lake, 1983). Terkecuali mamalia, sperma ayam biasanya tidak bergerak sebelum ejakulasi
(Hafez dan Hafez, 2000). Berbagai faktor dapat mempengaruhi produksi sperma (Anderson, 2001)
dan pemahaman menyeluruh tentang fisiologi reproduksi ayam sangat penting untuk menghargai
kesuburan pria. Produksi sperma pria dapat dipengaruhi oleh berbagai faktor eksternal dan internal.
Hipofisis, testis, dan sampai batas tertentu faktor ekstrinsik mempengaruhi aktivitas reproduksi pria.
Faktor eksternal yang mempengaruhi efisiensi reproduksi ayam bujang dapat dibagi menjadi dua
kategori: pengaruh langsung dari diet, manajemen, dan proses fisiologis normal yang mengatur
spermatogenesis, dan faktor yang mempengaruhi sejauh mana laki-laki akan merespon teknik pijat
selama pengumpulan semen (Maule, 1962).

Penerapan Inseminasi Buatan pada Unggas Inseminasi buatan merupakan pendekatan yang sangat
berharga untuk meningkatkan keberhasilan reproduksi unggas, khususnya peternak broiler dan
kalkun dengan fertilitas rendah karena bobot tubuhnya yang besar. Terlepas dari kenyataan bahwa
IB adalah teknik yang dikembangkan dengan baik pada ternak, namun kurang begitu pada unggas
karena kurangnya metode standar untuk menyimpan sperma unggas untuk jangka waktu yang lama.
Semen dapat dikumpulkan dan digunakan untuk inseminasi segera menggunakan proses yang ada,
dengan atau tanpa pengenceran, menggunakan pengencer semen dengan perbandingan 1:2.
Sperma seekor ayam dapat membuahi 5 sampai 10 ekor ayam, tergantung pada volume dan
konsentrasi sperma. Proses inseminasi sintetis memerlukan eversi vagina dan pengendapan semen.
Inseminasi buatan digunakan secara ekstensif dengan semen yang baru dikumpulkan. Ini digunakan
lebih intensif untuk pembibitan kalkun karena kawin sulit karena ukurannya yang besar. Semen
ayam segar yang dikumpulkan merupakan jenis semen pertama yang akan dibekukan. Namun,
sperma unggas yang diawetkan dengan cryopreserved kurang subur dan sperma unggas yang
dibekukan masih bersifat percobaan. Prosedur ini terdiri dari pengumpulan semen dari pejantan dan
inseminasi ke betina. Penggunaan utama inseminasi buatan adalah pada burung berat yang
fertilitasnya umumnya rendah di bawah kandang kawin. Ini Mengadopsi inseminasi buatan. Serta
pelayanan pria yang berharga dapat diperpanjang dapat meningkatkan kesuburan. Praktik
inseminasi buatan membutuhkan beberapa pelatihan dari pihak operator dan pejantan. Ini adalah
teknik yang berharga dalam spesies burung. Ini biasanya dipraktikkan ketika kawanan menunjukkan
masalah kesuburan yang nyata. Fekunditas yang lebih baik telah diperoleh dengan menggunakan
inseminasi buatan, lebih baik dalam banyak hal, daripada yang diperoleh dengan perkawinan alami.
Inseminasi buatan unggas domestik tidak banyak digunakan di peternakan komersial.

Manfaat Inseminasi Buatan Dibandingkan Perkawinan Alami Inseminasi buatan telah lama
dipandang sebagai alat yang bermanfaat dalam industri ayam (Benoffet al., 1981). Salah satu
keunggulan teknologi ini dibandingkan perkawinan alami adalah penggunaan pejantan secara
efisien. Akibatnya, biaya inseminasi buatan dipotong setengahnya dengan mengurangi jumlah ayam
yang dibutuhkan (Benoffet al., 1981). Inseminasi buatan dapat menjadi efektif dalam manajemen
breeder ayam pedaging dan dalam mengatasi masalah kompatibilitas jika fertilitas breed broiler
terus berkurang karena seleksi jantan untuk pertumbuhan dan masalah kompatibilitas antara breed
besar dan kecil (Reddy, 1995). Selain kegunaan perkembangbiakannya, inseminasi buatan penting
dalam pencegahan infeksi kelamin. Inseminasi buatan dapat memanfaatkan layanan jantan yang
lebih baik dengan menggunakan pengencer semen, yang tidak dapat dicapai dengan perkawinan
alami. Dari sudut pandang ekonomi, pengencer meminimalkan jumlah pejantan yang diperlukan
untuk inseminasi buatan, menghasilkan biaya pakan yang lebih rendah, serta mengurangi biaya
ruang, pemeliharaan, dan pengoperasian. Perkawinan alami membatasi jumlah pejantan dengan
betina menjadi kira-kira 1:10, namun inseminasi buatan memungkinkan peternak melayani 100 ekor
ayam dari satu pejantan. Laki-laki lebih sering digunakan sebagai akibatnya. Sperma segar (5,34 x
109 sperma/ml) yang diambil dari ayam jantan (0,5 ml) dapat diinseminasi ke 70 ekor ayam setiap
hari setelah pengenceran dengan pengencer CARI (1:6), memberikan 38 juta sperma per dosis untuk
inseminasi sintetis (Mohan dan Sharma (2017). Tingkat kesuburan lebih dari 90% atau lebih tinggi
dapat dicapai dengan cara ini sekitar 280 ekor ayam dapat ditutupi dengan menggunakan satu
jantan pada hari alternatif (empat kali seminggu ), sedangkan perkawinan alami mempertahankan
rasio ayam jantan dan ayam betina pada 1: 8. Pada spesies unggas, inseminasi buatan menghasilkan
keturunan yang lebih subur daripada perkawinan normal (Mohan et al., 2016).Meskipun perkawinan
alami dapat menghasilkan kesuburan yang baik, tingkat dapat ditingkatkan lebih jauh lagi dengan
memasukkan inseminasi buatan ke dalam proses produktif (Gee et al., 2004).Karena manfaat dari
tingkat pembuahan dan daya tetas secara keseluruhan, biaya per unit anak ayam umur sehari yang
ditetaskan berkurang(B rillard, 2003).Jika pendekatan inseminasi buatan unggas diperluas ke burung
yang terancam punah, manfaat serupa dalam hal keberhasilan reproduksi dapat dilihat.

Pengencer Semen Unggas CARI untuk Teknologi Inseminasi Buatan Semen unggas sangat
terkonsentrasi dan volumenya rendah. Lebih terkonsentrasi setelah ejakulasi karena penguapan air
dari air mani pada suhu kamar yang membuat tidak praktis untuk menanganinya dalam bentuk
murni. Peristiwa ini menyebabkan terbunuhnya spermatozoa dalam semen segar yang
membutuhkan pengenceran semen segera untuk mencapai fertilitas yang lebih tinggi pada unggas
melalui teknologi inseminasi buatan (AI). Detil Teknologi Untuk mengatasi masalah semen unggas di
atas dan pemanfaatannya secara maksimal menggunakan A.I. teknologi, pengenceran semen adalah
satu-satunya alternatif. Inilah alasan kami mengembangkan “pengencer semen unggas CARI”.
Pengencer merupakan media yang menyediakan lingkungan ideal bagi kelangsungan hidup
spermatozoa di luar tubuh. Dengan menggunakan pengencer ini, semen ayam/unggas yang sangat
pekat dari satu pejantan yang berharga atau terbukti dapat diencerkan beberapa kali lipat untuk
membuahi sejumlah besar betina melalui penerapan A.I. yang tidak mungkin dalam perkawinan
alami. Dengan cara ini, pengencer akan meningkatkan volume semen sehingga memungkinkan
pemerataan spermatozoa dalam media menghasilkan fertilitas IB yang sangat baik pada ayam. Selain
itu, pengencer memperpanjang kelangsungan hidup sperma dalam kondisi semen in vitro (24-48
jam). Dengan menggunakan pengencer semen unggas, jasa pejantan unggul dapat dimanfaatkan
secara maksimal oleh A.I. teknik. Tanpa aplikasi pengencer yang berhasil dari A.I. itu tidak mungkin.
AI adalah alat terbaik untuk perbaikan genetik. Berdasarkan pengencer, teknik A.I. saat ini digunakan
sebagai alat terbesar dan termurah untuk meningkatkan produksi unggas terkait dengan
pengurangan biaya pembibitan unggas dengan pemeliharaan jumlah pejantan yang lebih sedikit.
Dengan menggunakan teknik pengenceran semen, semen dapat disimpan selama beberapa jam
tanpa kehilangan kemampuan pembuahan yang berarti. Ini akan sangat bermanfaat dalam
mengangkut semen pejantan warisan yang berharga untuk hasil telur dan daging yang tinggi dari
satu tempat ke bagian lain negara/dunia. Di India, unggas 90% didominasi oleh ayam. Oleh karena
itu, pengencer ini terutama ditujukan untuk ayam. Namun, ini juga bekerja dengan baik pada spesies
unggas lain seperti kalkun, bebek, dan ayam guinea, dll. Inseminasi buatan (AI) adalah pemindahan
semen secara manual ke dalam vagina betina. Pada dasarnya, ini adalah prosedur dua langkah:
pertama, mengumpulkan air mani dari pejantan dan kedua, membuahi air mani ke dalam betina.
Inseminasi buatan pertama kali dipraktikkan di Amerika pada tahun 1920-an dan kemudian
digunakan secara luas di Australia dengan pengenalan kandang petelur pada akhir tahun 1950-an. AI
adalah metode pilihan ahli genetika untuk mempertahankan perkawinan keturunan. Kalkun berdada
lebar dihasilkan melalui seleksi genetik, yang secara fisik tidak mampu melakukan perkawinan alami
sehingga pada burung tersebut AI merupakan satu-satunya cara untuk kawin. IB dilakukan untuk
memperkecil ukuran flok jantan pada ayam guinea seperti pada ayam guinea satu jantan digunakan
untuk dua-tiga betina. Beberapa keuntungan inseminasi buatan pada unggas adalah: 1.
Meningkatkan rasio kawin: Normalnya satu ekor ayam jantan dapat dikawinkan dengan enam
sampai sepuluh ekor ayam. Dengan inseminasi buatan rasio ini dapat ditingkatkan empat kali lipat.
2. Laki-laki yang lebih tua yang memiliki kinerja luar biasa dapat digunakan selama beberapa
generasi. Sedangkan dalam perkawinan alami masa manfaat mereka terbatas. 3. Unggas jantan
berharga yang cedera kaki masih bisa digunakan untuk inseminasi buatan. 4. Penghapusan
perkawinan preferensial: Ketika ada kesuburan yang buruk yang disebabkan oleh perkawinan
preferensial, itu dapat dihilangkan. 5. Perkawinan silang yang berhasil: Meskipun persilangan sangat
berhasil dalam kondisi alami, tetapi terkadang ada semacam diskriminasi warna karena beberapa
ayam betina tidak akan kawin dengan pejantan yang berbeda warna kecuali mereka dipelihara
bersama. Dalam kondisi seperti itu AI membantu keberhasilan persilangan.

INSEMINASI BUATAN Induk ayam jantan berumur satu hari diberikan dubbing dan detoed. Pejantan
dipelihara secara terpisah dari umur 0-21 minggu. Mulailah dengan 12% pejantan untuk perkawinan
alami dan 8% untuk inseminasi buatan. Pada awal musim kawin (22 minggu), perkenalkan 8 jantan
per 100 betina. Segera ganti pejantan yang lemah, lumpuh, dan sakit. Dalam kasus A.I. pertahankan
setidaknya 5% pejantan yang dapat menghasilkan sekitar 0,5 ml semen murni per ejakulasi dengan
motilitas tidak kurang dari 60%. Inseminasi betina sekali dalam 5 hari, dengan 0,03 – 0,05 ml semen
bersih: dalam 30 menit setelah pengumpulan. Inseminasi Buatan (AI) merupakan alat penting untuk
meningkatkan performa reproduksi unggas khususnya peternak ayam pedaging yang fertilitasnya
rendah akibat bobot badan yang berat. Meskipun IB merupakan teknik yang dikembangkan dengan
baik pada ternak, namun tidak begitu berkembang pada unggas karena tidak ada teknik standar yang
tersedia untuk menyimpan semen unggas dalam jangka waktu yang lama. Teknik yang tersedia saat
ini memungkinkan untuk mengumpulkan semen dan menggunakannya untuk inseminasi segera
dengan atau tanpa pengenceran menggunakan pengencer semen dengan perbandingan 1:2. Semen
yang dikumpulkan dari satu ayam cukup untuk membuahi 5 sampai 10 ekor ayam tergantung pada
volume semen dan konsentrasi sperma. Di peternakan, di mana IB dipraktikkan, jantan disimpan
secara terpisah di kandang individu di mana tersedia ruang yang cukup untuk pergerakan burung.
Harus ada tim pekerja untuk mengasosiasikan pengumpulan dan inseminasi semen. Pergantian
personel yang sering dalam tim dapat memengaruhi perilaku normal burung. Penanganan yang kasar
harus dihindari, jika tidak dapat menimbulkan reaksi ketakutan, yang mempengaruhi volume air
mani saat ejakulasi.

Ciri-ciri semen unggas Biasanya ayam jantan mulai mengeluarkan air mani dari umur 16 minggu
tetapi kapasitas pembuahan air mani rendah. Jadi, ayam jantan dari umur 22 atau 24 minggu
digunakan untuk pengumpulan semen. Warna alami semen unggas adalah putih atau putih mutiara.
Laki-laki ras berat dapat menghasilkan 0,75 hingga 1 ml semen dan laki-laki ras ringan dapat
menghasilkan 0,4 hingga 0,6 ml semen. Laki-laki dapat digunakan tiga kali dalam seminggu untuk
pengumpulan semen dengan jarak satu hari. Meski pengumpulan semen setiap hari tidak akan
mengubah kapasitas pembuahan, namun volume semen akan rendah. Semen terdiri dari
spermatozoa dan plasma semen. Semen unggas umumnya sangat pekat (3 sampai 8 milyar
spermatozoa per ml untuk ayam pedaging). Hal ini disebabkan oleh adanya plasma mani dalam
jumlah terbatas karena organ reproduksi tambahan tidak ada pada spesies unggas. Plasma mani
berasal dari testis dan saluran keluar. Pada saat ejakulasi, cairan seperti getah bening (juga dikenal
sebagai cairan bening) yang berasal dari kloaka dapat ditambahkan ke air mani dalam jumlah yang
bervariasi. Penambahan cairan transparan ke semen pada saat ejakulasi bertindak sebagai media
pengaktif untuk spermatozoa yang sebelumnya non-motil, sehingga memastikan pengangkutannya
dari tempat pengendapan ke tempat tubulus penyimpanan sperma di persimpangan utero-vaginal
saluran telur ayam.

Peralatan yang dibutuhkan untuk A.I Corong kaca kecil dengan batang disumbat dengan lilin. Alat
suntik inseminasi Botol kaca bermulut lebar. Cangkir semen pyrex kecil Labu besar untuk
menampung air pada kisaran 180 C hingga 200 C untuk waktu penahanan semen yang singkat.
Langkah-langkah Inseminasi Buatan IB pada unggas adalah prosedur tiga langkah yang melibatkan
pengumpulan semen, pengenceran semen, dan inseminasi. Langkah kedua dapat dihilangkan jika
semen ‘rapi’ (murni) akan digunakan untuk inseminasi dalam waktu 30 menit setelah pengumpulan.
Pengumpulan air mani Langkah pertama dalam program IB adalah pengumpulan semen secara
manual (memerah susu). Untuk pengumpulan semen, tim yang terdiri dari dua anggota umumnya
dilibatkan, satu untuk menahan pejantan dan satu lagi untuk mengumpulkan semen. Burung itu
dipegang dalam posisi horizontal oleh seseorang pada ketinggian yang nyaman bagi operator yang
berusaha mengumpulkan air mani. Untuk mengumpulkan air mani, operator harus meletakkan ibu
jari dan jari telunjuk tangan kiri di kedua sisi kloaka dan memijat dengan lembut.
Dengan tangan kanan operator harus memegang corong pengumpul dan dengan ibu jari dan jari
telunjuk memijat bagian lunak perut di bawah tulang panggul. Pijatan harus dilakukan dengan cepat
dan terus menerus sampai penis menonjol keluar papila dari kloaka. Setelah papila menonjol
sepenuhnya, ibu jari dan jari telunjuk tangan kiri yang ditempatkan sebelumnya digunakan untuk
memeras air mani ke dalam corong pengumpul. Hindari kontaminasi semen dengan feses dan bulu.
Evaluasi semen pada saat pengumpulan Warna air mani normal berwarna putih mutiara atau krem.
Air mani kuning dan air mani yang terkontaminasi darah, urat, feses, atau kotoran lainnya harus
dihindari. Jangan biarkan semen bersentuhan dengan air. Jika terdapat kotoran atau kontaminan
dalam semen yang terkumpul, aspirasi dengan hati-hati kontaminan dari sampel sebelum dicampur
dengan pengencer tambahan dengan semen. Tempatkan semen yang telah diencerkan dalam
pendingin atau lemari es (3 hingga 12 derajat Celcius) untuk mendinginkannya.

Inseminasi Semua peralatan yang digunakan untuk inseminasi harus dibersihkan dan dikeringkan
secara menyeluruh sebelum digunakan. Inseminasi harus dilakukan ketika sebagian besar unggas
telah selesai bertelur karena telur yang bercangkang keras di ujung bawah saluran telur
menghambat inseminasi dan menurunkan kesuburan. Dalam praktiknya, inseminasi ayam setelah
jam 3 sore memperoleh hasil yang lebih baik. Sulit untuk menginseminasi ayam non-petelur.
Biasanya inseminasi dilakukan ketika produksi telur ayam mencapai 25%. Ayam diinseminasi dua kali
selama minggu pertama. Kemudian pada interval mingguan. Prosedur Burung dipegang dengan kaki
dengan tangan kiri ke bawah dan ekor diselipkan ke belakang dan menempel pada dada operator.
Ibu jari tangan kanan diletakkan di bibir atas ventilasi kemudian dengan gerakan membulat menekan
otot perut. Jangan meremas dengan jari tetapi berikan tekanan secara merata dengan telapak
tangan. Ketika saluran telur terbalik, operator kedua memasukkan jarum suntik ke saluran telur
sejauh masuk ke dalam tanpa memberikan tekanan. Alat inseminasi dimasukkan ke dalam vagina
sekitar 1 inci dan air mani disimpan di persimpangan vagina dan rahim. Dosis dan frekuensi
inseminasi Ayam: 0,05 ml, seminggu sekali Telah diamati bahwa pejantan menghasilkan lebih banyak
air mani berkualitas baik pada pagi hari dan betina menghasilkan telur yang lebih subur saat
diinseminasi sekitar jam 9 malam.

Kesimpulan: Manfaat IB untuk ayam pedaging antara lain: rasio jantan:betina akan meningkat dari
1:10 untuk kawin alami menjadi 1:25 dengan IB; dengan lebih sedikit laki-laki yang dibutuhkan, akan
ada tekanan seleksi yang lebih besar pada sifat-sifat laki-laki yang penting secara ekonomi dan
selanjutnya kemajuan genetik yang lebih besar per generasi. Mungkin saja di masa mendatang,
penelitian yang membahas biologi sperma unggas dan dasar seluler dan molekuler dari transportasi,
seleksi, dan penyimpanan spermatozoa oviduk akan menghasilkan inovasi berikut dalam teknologi AI
unggas: interval inseminasi meningkat menjadi 10–14 hari (versus 7 hari) dengan lebih sedikit
sperma per inseminasi; penyimpanan sperma in vitro selama 24-36 jam pada suhu sekitar dengan
kehilangan viabilitas sperma yang minimal.