5/3/2011

Teknologi Kultur Jaringan Tanaman materi kuliah pertemuan ke 7

Definisi Kultur Embrio

Isolasi secara steril embrio matang ataupun belum matang, dengan tujuan memperoleh tanaman yang viabel macam kultur embrio:
Kultur embrio yg belum matang, utk mencegah keguguran : embryo rescue Kultur embrio matang, utk merangsang perkecambahan : embryo culture

KULTUR ORGAN (kultur embrio)

Sri Sumarsih
Fakultas Pertanian UPN Veteran Yogyakarta Email: Sumarsih_03@yahoo.com Weblog: Sumarsih07.wordpress.com Website: agriculture.upnyk.ac.id

Kultur embrio

Contoh aplikasi kultur embrio

1. Memecahkan dormansi
Pd Musa balbisiana, tdk mungkin memperoleh perkecambahan secara normal Cherry, hazel, acer : tanaman yg memiliki dormansi panjang 2.Mencegah gugurnya embrio pd persilangan interspesifik Persilangan ini sering menghasilkan biji dengan endosperm yg tdk sempurna, atau embrio yg lemah, kecil. Contoh: Kacang, Kapas, Tomat, Padi.

Tujuan : membantu perkecambahan embrio mjd tanaman lengkap Diperlukan dlm embrio yg memp masalah :

Menunjukkan masa dormansi yang panjang Embrio hibrida hasil penyilangan interspesifik yg tidak kompatibel dg endospermnya Embrio dg endosperm yg rusak spt kelapa kopyor Embrio tanpa endosperm spt pd anggrek
Penting dlm ilmu fisiologi, dlm hal perkembangan embrio

3. Hibridisasi utk produksi triploid (buah tanpa biji)

Jeruk triploid Citrus sinensis
Diploid citrus X tetraploid citrus = jeruk tanpa biji

Pengertian ttg kebutuhan nutrisi embrio pd berbagai tahap perkembangan (Percobaan media perlakuan ) Kemampuan regenerasi dr potongan2 embrio
Sangat penting dlm pemuliaan tanaman

Pisang triploid
Musa acuminata (AA) X Musa balbisiana (BB) = pisang tanpa biji (AAB)

5/3/2011

Faktor yg mempengaruhi keberhasilan kultur embrio

1. Genotipe
Genotip menentukan mudah tidaknya embrio diisolasi dan ditumbuhkan

4. Media kultur embrio

Hara makro dan mikro Ph 5.0 6.0 Sukrosa sbg sumber energi. Embrio belum matang perlu 8 12%, matang perlu 3%. Auksin dan sitokinin tidak diperlukan. GA untuk memecahkan dormansi Vitamin (optional) Senyawa organik (opt), air kelapa, casein hydrolisate, glutamin (penting)

2. Tahap (stage) embrio diisolasi

prinsipnya embrio yang lebih besar akan lebih baik

3. Tanaman inang
Sebaiknya ditumbuhkan di rumah kaca/ kondisi terkontrol.

5. Lingkungan
Oksigen (perlu oksigen tinggi) Cahaya : kadang embrio perlu ditumbuhkan dlm gelap selama 14 hari, kemudian ditransfer ke cahaya untuk merangsang sintesa klorofil Suhu : kadang perlu perlakuan dingin (vernalisasi, 4oC) untuk memecah dormansi

Kultur untuk perkecambahan biji anggrek

Anggrek bulan (Phalaenopsis)

5/3/2011

Embryo rescue pada anggrek

Biji mrpkan sumber eksplan yg bagus 1 kapsul anggrek berisi 1500 3 juta biji Biji sangat kecil, hampir tdk memiliki cadangan makanan, shg benih sulit berkecambah di tanah. Mudah terancam kekeringan dan serangan hama penyakit Perbanyakan in vitro memberi alternatif lingkungan terproteksi, nutrisi yg cukup, dan bebas serangan bakteri atau jamur

Perkecambahan biji anggrek

Biji anggrek tanpa endosperm

Proses perkecambahan
Benih menyerap air melalui testa Embrio mengalami imbibisi, membengkak, pembelahan sel dimulai, dan embrio menembus kulit biji Protocorm terbentuk dari massa embrio Diferensiasi organ dimulai dg pembentukan meristem tunas & rhizoid Jk ada chy, daun terbentuk, diikuti oleh akar sejati. Rhizoid & protocorm tdk berfungsi lagi dan terdegenerasi

Perkembangan protocorm anggrek

Protocorm anggrek

5/3/2011

Perkembangan protocorm anggrek menjadi tunas pucuk

Teknik kultur embrio Anggrek:

1. Sterilisasi kapsul/benih anggrek:
Lebih baik menggunakan kapsul (buah anggrek) yg belum terbuka, karena sterilisasi lebih mudah. Sterilisasi kapsul yg belum terbuka dg cara merendam dlm 95% alkohol dan flaming Di dalam laminer, buka kapsul dg menggunakan skalpel steril. Biji dlm kapsul biasanya steril. Jk kapsul sdh terbuka, benih perlu disterilisasi. Rendam dlm 2% NaOCl.

2. Cara penanaman benih anggrek (Pierik)

Benih ditaburkan pd permukaan media padat dlm wadah dg permukaan luas, misal. Botol jam atau botol saus yang diletakkan mendatar. Jangan terlalu banyak benih yg ditanam, supaya setelah benih berkecambah tidak terlalu rapat Perlu subkultur 2 -3 kali sebelum ditransfer ke tanah