THIN LAYER CHROMATOGRAPHY I WAYAN MARTADI SANTIKA.

,
S.Farm., M.Si., Apt
PRINSIP THIN LAYER CHROMATOGRAPHY (TLC)
PRINSIP
Metode pemisahan campuran senyawa
berdasarkan perbedaan afinitas
senyawa antara fase diam dengan fase
gerak atau campuran fase gerak.

PARTISI ANTARA SENYAWA/ANALIT

DIANTARA FASE DIAM DAN FASE GERAK
DISTRIBUSI PENGUNAAN METODE TLC/HPTLC
GOOD NEWS …..
BAD NEWS…..
 FASE DIAM (PLAT TLC/HPTLC)
Terdiri dari sorben dengan ukuran partikel tertentu yang dilekatkan
pada plat datar.
Plat Al-TLC Silika GF 254????? Plat HPTLC Silika GF 254?????
PERBEDAAN TLC DENGAN HPTLC
FASE GERAK (ELUEN)
PENGEMBANGAN (ELUSI)

Elusi selama 30 menit

PERHITUNGAN HARGA RF

Rf = Zs/Zf

hRf = Zs/Zf x 100

hRfc = ……???
KOREKSI HARGA HRF
Harga hRf dipengaruhi oleh berbagai faktor seperti :
a) Fase diam yang digunakan,
b) Ukuran partikel dan ketebalan dari matriks fase diam,
c) Kadar analit yang ditotolkan,
d) Jarak pengembangan,
e) Suhu lingkungan,
f) Kejenuhan bejana

Harga hRf perlu distandarkan dengan sistem TLC

terstandarkan………….(DFG dan TIAFT)
 Metode
Poligonal

hRfc
CONT…
Metode Poligonal : Dimana :

Contoh :

Dari percobaan :
Dari literatur : hRf A = 8
hRfc A = 8 hRf B =16
hRfc B =16 hRfc X?? hRf C = 50
hRfc C = 50 hRf D = 89
hRfc D = 89 hRF X = 70
PENDETEKSIAN DENGAN
SPEKTROFOTODENSITOMETRI

Output dapat
digunakan untuk
analisis kualitatif dan
kuantitatif.

Output berupa:
*Kromatogram sampel
(hRf dan AUC)

Prinsip Kerja : *Spektra Analit Insitu

Prinsip kerja spektrofotodensitometri
berdasarkan interaksi antara radiasi
elektromagnetik dari sinar UV-Vis dengan
analit yang merupakan noda pada plat.
PERBANDINGAN SPEKTRUM….
IDENTIFIKASI SENYAWA OBAT
(ANALISIS KUALITATIF)
PENENTUAN KADAR SENYAWA OBAT
(ANALISIS KUANTITATIF)
AUC
Analit
Identitas Kurva
Analit Kalibrasi
Kadar
Analit
dalam
Sampel
 CONTOH PERHITUNGAN……
Suatu Larutan kalibrasi parasetamol dianalisis dengan metode HPTL-Spektrofotodensitometri memiliki data
sebagai berikut :

Konsentrasi (mg/100 mL) Luas Kromatogram (AUC)

0,5044 17994
1,009 36109
1,513 54121
2,018 71988
2,522 89984
Hitung Kandungan parsetamol dalam sediaan tablet yang mempunyai luas kromatogram 44519 dan dengan
data sebagai berikut :
*Berat 20 tablet = 12,2243 g
*Kandungan parasetamol tiap tablet = 500 mg
*Berat serbuk tablet yang digunakan untuk analisis = 152,5 mg
*Volume awal = 200 ml
*Tahap-tahap pengenceran :
-20 mL ke dalam 100 mL
-10 mL ke dalam 100 mL
TERIMAKASIH