BIOKIMIA TEKNIK (BTK)

MAK 4133
Ruang: MC4.7
 Capaian Pembelajaran:
1. Menerangkan cara cara preparasi dan
kapasitas larutan bufer biologi
2. Menjelaskan prinsip isolasi biomolekul dari
sel prokariot dan eukariot
3. Menjelaskan prinsip analisa kualitatif dan
kuantitatif biomolekul
 Silabus:
1. Preparasi larutan bufer biologi
2. Isolasi biomolekul dari sel prokariot dan eukariot
3. Analisis kualitatif dan kuantitatif biomolekul
4. Elektroforesis
5. PCR
6. Kromatograf
7. Spektrofotometri
8. Elisa
9. Imunokimia dan imunohistokimia
10.blotting
 Pustaka:
• Mikkelsen,S.R. And Corton,E., 2016 2nd Ed.,
Bioanalytical Chemistry, John Eiley&Sons, Inc.,
Hoboken, New Jersey, USA
• Wilson,K. And Walker,J.,2000, 5th Ed., Principles
and Techniques of Practical Biochemistry,
Cambridge University Press, New York: USA
• Newton,C.R. And Graham,A., 1994, PCR:
Introduction to Biotechniques, Bioscientifc
Publisher, New Delhi: India
Larutan buffer adalah larutan yg terdiri dari:
1. asam lemah/basa lemah dan
2. garam dari asam lemah/basa lemah
Keduanya harus ada!

Larutan buffer memiliki kemampuan mempertahankan pH

ketika ada penambahan sedikit asam/basa.

Misalkan campuran CH3COOH dan CH3COONa dengan molar

yang sama
Tambahkan asam kuat
H+ (aq) + CH3COO- (aq) CH3COOH (aq)
Tambahkan basa kuat
OH- (aq) + CH3COOH (aq) CH3COO- (aq) + H2O (l)
17.2
 Definisi lain:
Larutan buffer mengandung asam
lemah dan basa konjugatnya, atau
basa lemah dan asam konjugatnya.

Manakah yang termasuk larutan buffer? (a) KF/HF

(b) KBr/HBr, (c) Na2CO3/NaHCO3, (d) NH3/NH4Cl

17.2
 Perhatikan campuran garam NaA dan asam lemah HA.

NaA (s) Na+ (aq) + A- (aq)

[H+][A-]
Ka =
HA (aq) H+ (aq) + A- (aq) [HA]

Ka [HA]
[H ] =
+
[A-] Persamaan
Henderson-Hasselbalch
[HA]
-log [H+] = -log Ka - log
[A-] [basa konjugat]
- pH = pKa + log
-log [H ] = -log Ka + log
+ [A ] [asam]
[HA]
-
pH = pKa + log [A ] pKa = -log Ka
[HA]

17.2
 Bagaimana Larutan Buffer Bekerja
Misalkan larutan buffer dibuat dengan cara memasukkan 0,25 mol
asam asetat dan 0,25 mol natrium asetat dalam tiap 1 liter larutan.

 Berapakah pH dari larutan buffer tersebut?

Berapakah pH dari 1000,0 mL larutan buffer itu setelah ditambah

1,00 mL HCl (12,0 M)?

Berapa jika ditambah1,00 mL NaOH (6,00 M)?

Berapa perubahan pH dari 1000 mL air murni jika ditambah1,0 mL

HCl (12,0 M)?

                            
Kapasitas Bufer / Kemampuan larutan bufer untuk
mempertahankan nilai pH:
Defnisi: Jumlah mol/L H+ atau OH- yang diperlukan
untuk terjadinya perubahan pH sebesar 1 unit
β maks bila [HA] = [A-] atau [H+] = Ka
 Larutan Bufer:
1. Berapa konsentrasi HOAc dan Oac- terdapat pada
larutan bufer asetat 0,2M, pH 5? Diketahui Ka
asam asetat 1,7 x 10-5 (pKa = 4,77)
2. Diskripsikan bagaimana cara membuat larutan
bufer asetat 0,2 M, pH 5,0 sebanyak 3 L; bila
tersedia bahan padatan natrium asetat trihidrat
(MM 136) dan larutan asam asetat 1 M
3. Diskripsikan bagaimana cara membuat larutan
bufer asetat 0,3 M, pH 4,47 sebanyak 5 L, bila
tersedia bahan larutan asam asetat 2 M dan
larutan KOH 2,5 M
4. Hitung kapasitas bufer Trisin 0,05 M pH 7,5.
diketahui pKa = 8,15