STERILISASI:

KINETIKA PROSES
STERILISASI (2)
CONTOH SOAL
PENENTUAN
Z-VALUE
SOAL

Tentukan D-value dan z-value dari data

residu aktivitas enzim lipase pada T =70; 80
dan 82oC seperti yang ditunjukkan tabel
berikut. Gunakan metode Stumbo, average
D-value dan pers regresi untuk menentukan
D-value, sementara z-value ditentukan
berdasarkan metode TDT. Jumlah aktivitas
lipase sebelum proses inaktivasi adalah
1,17 U/ml
TABEL INAKTIVASI LIPASE PADA BERBAGAI SUHU

Aktivitas lipase (U/ml)

Waktu
(min) T=70oC T=80oC T=82oC
4 1,44 0,67 2,00
7 1,10 0,89 0,67
10 0,89 0,38 0,22
13 0,44 0,11 0,11
16 0,11 0,33
PENYELESAIAN
Dari soal telah diperoleh:
T = 70oC  D-value = 12,66 min
T = 80oC  D-value = 9, 71 min
T = 82oC  D-value = 8,33 min

z-value dapat ditentukan dari kurva D-value

•Plot data-data D-value –vs- temperatur. Tarik garis
lurus dan perpanjang hingga sumbu horizontal dan
vertikal
•Ambil D-value = 10 min  T = ..?
•Ambil D-value = 1 min  T = ..?
•z-value = T pada D-value 1 min – T pada D-value 10 min
= 105 -78
= 27oC

T=78oC
T=105oC
MODE OPERASI MENAIKKAN T
SEBESAR Z
STERILISASI T = 97oC 
NORMAL D-value = 1,266
T = 70oC  min
MENURUNKAN D-value = 12,66 T = 107oC 
min D-value = 0,971
T SEBESAR Z min  1 min
T = 80oC 
T = 43oC  D-value = 9, 71 T = 109oC 
D-value = 126,6 min D-value = 0,833
min T = 82oC  min  1 min
T = 53oC  D-value = 8,33
D-value = 97,1 min min
T = 55oC 
D-value = 83,3 z-value = 27oC
min
 APLIKASI D-VALUE
• Penulisan simbol D-value:
𝒛 2𝟕
𝐷𝑻𝑜𝐶 𝐷𝟕𝟎𝑜 𝐶 = 12,66 min
• Sterilisasi dapat dilakukan dalam 1 tahap
• Jika populasi mikroorganisme atau aktivitas
enzim sangat tinggi sehingga zero
population atau zero activity sulit dicapai
dalam 1 kali sterilisasi, maka dilakukan
sterilisasi secara bertahap.
 CONTOH
STERILISASI 3 TAHAP
No N1

Nt
N2

D D D
Zero
population
TOTAL D-value = 3D
LATIHAN
Tentukan z-value dari proses inaktivasi lipase dalam
CPO dari data berikut

D-value(min) T (oC)
14 75
13 78
12 80
17 70
15 76
CONTOH SOAL
Tentukan safety margin untuk - carotene dalam
Crude Palm Oil. Nilai D-value untuk  carotene
diperoleh dari data literatur, sedangkan data D-
value sudah diperoleh dari perhitungan terdahulu.

Menurut Fratianni et al.(2010):

D-value 𝛽-carotene T
99,7 min 60oC
24,6 min 70oC
3,5 min 75oC
PENYELESAIAN

• Telah diperoleh z-value untuk inaktivasi enzim

lipase dalam CPO dari perhitungan sebelumnya
• z-value untuk preservasi -carotene diambil dari
data literatur berdasarkan variasi nilai D-value
dan T dari experimen Fratianni et al.(2010)
• Plot data D-value untuk inaktivasi enzim lipase
dalam CPO
• Plot data D-value untuk preservasi -carotene
• Untuk mendapatkan perpotongan kedua garis
tersebut  diperbanyak titik data
 SAFETY MARGIN UNTUK STERILISASI CPO DAN
PRESERVASI -CAROTENE
80
70 B
60 β-carotene (z=10.9)
D-value (min)

50 (Fratianni et al., 2010)

40
30
20 A C D
10
Lipase (z=27)
0
64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75
Temperature (oC)
 4 KEMUNGKINAN KONDISI STERILISASI

Mode operasi D-value (min) Temperatur (oC)

A 14 65

B 64.5 65

C 9 73.5

D 10 74
KETERANGAN
Kondisi operasi
D-value 14 min, T = 65oC
D-value 64,5 min, T = 65oC
D-value 9 min, T = 73.5oC
D-value 10 min, T = 74oC
Penjelasan
Menonaktifkan lipase, menjaga
kandungan karoten (max)
Menonaktifkan lipase, tetapi hampir
seluruh karoten hilang  prolong
heating
Menonaktifkan lipase, menjaga
kandungan karoten (min).
Total destruksi lipase dan karoten

C : This typical process is suitable for microwave sterilization that aims to

yield palm oil with minimum carotene content. Actually, the fact that palm
oil mill removes carotene from palm oil in deodorizing process added
other advantage of this process as to facilitate deodorizing process.
STERILISASI
BIOREAKTOR
Fluids and process equipment (filtration equipment,
reactors, etc) can be sterilized by heat, microfiltration,
radiation, chemical agents, UV light
Death- a cell, spore, or virus that is dead will not reproduce
(cells and viruses) or germinate (spores) under
conditions favorable for growth (opposite is “viable”).
TYPICAL SURVIVAL CURVES FOR
SPORES OF BACILLUS
SURVIVAL CURVES
(MULTISPECIES)
D = sum
A, B, C = individual
populations
SPECIFIC AGENTS
Thermal sterilization a common method.
Ethylene oxide is common for the insides of
reactors that can’t be heat or steam sterilized.
Media that can’t be heat sterilized (heat labile
vitamins, proteins, sugars) must be filter
sterilized using filters with narrow pore-size
distributions.
70% v/v ETOH in water with HCl to pH 2 is a good
sterilizing fluid.
Weak (3%) sodium hypochlorite solution is
commonly used to sterilize filtration
equipment.
THERMAL STERILIZATION

  E 0,d 
k d  Aexp  
 RT 

kd is often assumed to be a function of temperature (as

before):
Where E0,d is the activation energy for death. For
vegetative cells, 50<E0,d<150 kcal/mol. At common
autoclave temperatures (121˚C), kd>1010 /min
THERMAL STERILIZATION
but for spores, 0.5<kd<5 /min.
For vitamins, 2<E0<20 kcal/mol so
timing of heat sterilization of media is
important.
Factors for success:
time, temperature, N0
Probability of failure:

prob. of failure  1  P0 t   1  1  e 
k d t N0
 EXAMPLE
Let n0 be the concentration of contaminant
organisms:
For a 1 L tank: 
1  P0 t   1  1  e 
 k d t 1n 0

For a 10,000 L tank: 

1  P0 t   1  1  e 
 k d t 10,000n0

For kdt= 15 and n0= 104 organisms/L…

1L 1  P0 t   0.003 or 3 failures in 1000

batches

10,000 L 1  P0 t   1 or 1000 failures in

1000 batches
STERILIZATION TIME PLOTS
BATCH STERILIZATION

Note: can not count the cooling and heating

periods for sterilization.
CONTINUOUS
STERILIZATION

High temperature, short exposure time