KROMATOGRAFI

amran@chem.itb.ac.
id
amran@chem.itb.ac.id
PENGANTAR METODA KROMATOGRAFI
dari ekstraksi ke kromatografi

penggolongan kromatografi
teori dan besaran dasar kromatografi
• besaran retensi
• teori dasar proses kromatografi
DARI EKSTRAKSI KE KROMATOGRAFI
Pada ekstraksi terdapat dua fasa

(fasa bawah & fasa atas)
Pada kromatografi juga terdapat dua fasa

(fasa diam & fasa gerak)
Ada analogi antara kedua teknik pemisahan

ini
Pada sistem dua fasa (bifasa) seperti ini,

komponen akan terdistribusi/terpartisi
diantara kedua fasa tersebut dengan jumlah
yang tertentu.
Hukum Distribusi Nernst

A KD = [A]1 / [A]2
dimana:
A KD = koefisien distribusi
[A]1 = konsentrasi komponen A pada fasa 1
[A]2 = konsentrasi komponen A pada fasa 1
fasa atas dipindahkan
pelarut baru
PROSES EKSTRAKSI COUNTER CURRENT CRAIG
jumlah masing-masing komponen dalam setiap tabung setelah lima
kali pemindahan dapat digambarkan sebagai berikut :
12.500 25.000 12.50

KD(A) = 1, KD(B) = 3, 4.688 28.125 42.188
A0 = 100, B0 = 100 12.500 25.000 12.500
1.562 9.375 14.062
Tabung : 1 2 3 4 5
[A]or 50.000 6.250 18.750 18.75 6.250
[B]
g
or 75.000 1.170 10.550 31.640 31.640
g
[A]air 50.000 6.250 18.750 18.750 6.250
[B]air 25.000 0.390 3.520 10.550 10.550
25.000 25.000 3.125 12.500 18.750 12.500 3.125

18.750 56.250 0.290 3.520 15.825 31.640 23.730
25.000 25.000 3.125 12.500 18.750 12.500 3.125
6.250 18.750 0.100 1.170 5.275 10.550 7.910
Jumlah masing-masing komponen dalam fasa organik setelah lima kali
pemindahan dapat digambarkan sebagai berikut :
35
30
25
20
15
10
5
0
[B]org
1 2 3 [A]org
4 5
1 2 3 4 5
[A]org 3.125 12.5 18.75 12.5 3.125

[B]org 0.29 3.52 15.825 31.64 23.73
Jika jumlah tabung (jumlah pemindahan) diperbesar maka :
n=6 n = 25 n = 100
Semakin banyak jumlah tabung, komponen semakin terpisah
Puncak semakin melebar dan memendek
Kurva di atas sama dengan kromatogram yang diperoleh pada
metoda kromatografi
Perbedaan antaraksi atau afinitas antara komponen kompo-
nen campuran tersebut dengan kedua fasa akan menyebab-
kan komponen-komponen bergerak dengan kecepatan yang
berbeda-beda melalui kolom.
Dan seperti halnya pada ekstraksi countercurrent, perbedaan
kecepatan migrasi (differential migration) dari molekul mo-
lekul komponen akhirnya akan menyebabkan komponen-
komponen terpisah satu sama lainnya.
PENGGOLONGAN METODA KROMATOGRAFI
Jenis Mekanisme
Fasa gerak Fasa diam
Kromatografi distribusi/partisi
Adsorpsi pada permukaan
Cairan (L) Padat (S) Krom. CP (LSC)
zat padat
Reaksi penukaran ion
Cairan (L) Padat (S) Krom. CP (LSC)
(kromatografi penukar ion)
Distribusi akibat perbedaan
Cairan (L) Cairan (L) Krom. CC (LLC) kelarutan komponen di
dalam kedua fasa cair
Adsorpsi pada permukaan
Gas (G) Padat (S) Krom. GP (GSC)
zat padat
Partisi (distribusi) yang di-
tentukan oleh tekanan uap
Gas (G) Cairan (L) Krom. GC (GLC)
parsial komponen dalam fa-
sa diam yang cair
PENGGOLONGAN METODA KROMATOGRAFI
Partisi/distribusi komponen antara fasa diam dan fasa mobil
• kromatografi cair - cair

cairan A
Xterlarut dalam A  Xterlarut dalam B
cairan B
• kromatografi gas - cair

gas A Xgas  Xterlarut dalam B
cairan B kecenderungan X kecenderungan X

menguap melarut
• kromatografi gas - padat
gas A Xterdesorpsi dari A  Xteradsorpsil pada B
kecenderungan X
padatan B menguap
kromatografi adsorpsi kromatografi partisi
kromatografi penukar ion kromatografi eksklusi
TEORI DAN BESARAN DASAR KROMATOGRAFI
Waktu Retensi (Waktu Tambat), tR
tR
tO
injeksi
waktu
PROFIL KROMATOGRAM SUATU ANALIT
• VOLUME RETENSI, VR
VR = tR x m
m  kecepatan linier fasa gerak
• FAKTOR KAPASITAS, k’
Cs Vs Vs tR  t0 
k'  K 
Cm V m Vm t0
Cs : konsentrasi analit dalam fasa diam Vs : volume fasa diam

Cm : konsentrasi analit dalam fasa gerak Vm : volume fasa gerak
SELEKTIFITAS, a
a = k’2 / k’1
Merupakan ukuran daya pisah suatu kolom, digunakan mengkarakterisasi
jarak yang memisahkan dua puncak berdekatan
SELEKTIFITAS MAKIN BAIK
KOEFISIEN PARTISI/DISTRIBUSI (K)

WAKTU RETENSI (tR)
FAKTOR KAPASITAS (k’)
SELEKTIFITAS (a)
SIMULATION
Terdapat dua teori yang telah dikemukakan mengenai proses kroma-

tografi elusi yang bertujuan untuk lebih memahami apa yang terjadi
pada proses tersebut, sehingga dapat diramalkan kondisi-kondisi ba-
gaimana yang harus dipenuhi agar pemisahan dua atau lebih kompo-
nen dapat berlangsung dengan baik.
Martin & Synge

• TEORI PELAT (PLATE THEORY)
Van Deemter
• TEORI KECEPATAN (RATE THEORY)
TEORI DASAR PROSES KROMATOGRAFI
TEORI PELAT
Didasarkan pada model ekstraksi counter-current Craig
• Jumlah tabung pada ekstraksi Craig dianalogikan dengan suatu pelat

imajiner yang disebut pelat teori seperti yang telah dikenal pada tek-
nik destilasi.
• Makin banyak jumlah pelat teoritis (jumlah tabung makin banyak)
maka pemisahan akan semakin fisien.
• Tebal dari pelat teoritis ini disebut Tinggi Ekivalen Pelat Teoritis atau
Height Equivalent of Theoritical Plate, HETP.
Jumlah pelat teoritis (N) dan HETP mencerminkan efisiensi dari kolom.
HETP = L / N
tR 2 tR 2
N = 16 atau N = 5,54
w d
L : Panjang Kolom
N : Jumlah Pelat Teoritis
tR : Waktu Retensi
w : Lebar alas puncak
d : Lebar pada setengah tinggi puncak
Dalam hal tertentu,

jauh lebih mudah mengukur d
d
dari pada w
Karena N mencerminkan jumlah kesetimbangan yang terjadi di dalam

suatu proses kromatografi, maka HETP merupakan ukuran kemampuan
kolom untuk memisahkan komponen-komponen dari campurannya.
Besaran yang digunakan untuk mencerminkan daya pisah suatu kolom
atau resolusi adalah Rs
Rs = 2 DtR / (wA + wB)
Resolusi bergantung pada faktor kapasitas (k’), selektifitas (a) dan jumlah
pelat teoritis (N)
Rs = ¼ {(a-1)/a} {k’/(k’-1)} N
JUMLAH PELAT TEORITIS (N)

TINGGI EKIVALEN PELAT TEORITIS (HETP)
RESOLUSI (Rs)
SIMULATION
BESARAN PERCOBAAN
Besaran Notasi Sumber

Waktu mati t0 kromatogram
Waktu retensi tR kromatogram
Waktu retensi tereduksi (tR)’ (tR-t0)
Lebar alas puncak w kromatogram
Panjang kolom L pengukuran
Laju alir F pengukuran
Volume fasa diam VS
Konsentrasi C
Teori pelat mampu menjelaskan proses yang terjadi pada kromatografi,
namun tidak dapat memberikan petunjuk secara bagaimana kondisi kon-
disi percobaan kromatografi harus diatur supaya diperoleh nilai HETP
yang kecil agar didapatkan efisiensi kolom yang optimal.
Untuk memberikan pengertian yang lebih baik mengenai faktor-faktor

percobaan yang mempengaruhi kerja dan efisiensi kolom dilakukan
pendekatan yang dikenal dengan teori kecepatan (rate theory) yang
dipelopori oleh van Deemter dan kawan-kawan.
Perbedaan pokok antara pendekatan ini teori pelat adalah bahwa teori ini
memandang proses-proses yang terjadi di dalam kolom tidak atas dasar
kesetimbangan, melainkan atas dasar aspek-aspek kinetika yang menyang-
kut partisi komponen di dalam kolom. Yakni kondisi-kondisi yang sesuai
dengan kenyataan, di mana fasa gerak mengalir terus menerus atau
kontinu.
PERSAMAAN VAN DEEMTER
HETP = A + B/m + Cm
m : kecepatan linier fasa gerak
A = diffusi Eddy
B = diffusi Longitudional
C = koefisien transfer massa
Diffusi Eddy
Suku A atau suku difusi Eddy mencerminkan neka-alur dari isi

kolom. Fasa gerak dan komponen dapat bergerak melalui banyak
jalur diantara butiran-butiran isi kolom
Diffusi Longitudional
merupakan gaya-gaya difusi molekul yang menyebabkan mole-

kul molekul bergerak atau berdifusi dari bagian tengah pita ke
kedua tepi pita
diffusi semakin besar
Koefisien transfer massa

merupakan cerminan dari partisi komponen antara fasa diam
dan fasa gerak
HETP TEORI DASAR PROSES KROMATOGRAFI
Cm
B/m
A
KECEPATAN LINIER FASA GERAK
a > 1
N kecil
Rs < 1
a > 1
a > 1 k’ besar
N besar Rs > 1
Rs > 1
kesetimbangan distribusi/partisi
fasa diam
simetris
tailing
fronting
fasa gerak
PENGANTAR
komponen-komponen suatu cuplikan yang berupa uap di

fraksionasi sebagai hasil distribusi atau partisi komponen-
komponen tersebut antara fasa gerak yang berupa gas dan
fasa diam yang berada dalam kolom.
Berdasarkan wujud fasa diam,

• kromatografi gas-padat (gas-solid chromatography) dengan
fasa diam padatan
• kromatografi gas-cair (gas-liquid chromatography) dengan
fasa diam cairan
PENGANTAR
Pada kromatografi gas-padat, partisi komponen cuplikan

didasarkan atas fenomena adsorpsi (penyerapan) pada
permukaan zat padat yang berfungsi sebagai fasa diam
Pada kromatografi gas-cair, partisi komponen cuplikan dida-

sarkan atas kelarutan uap komponen bersangkutan pada fasa
cair tersebut, jadi bergantung pada kesetimbangan gas-cair
yang terjadi di dalam kolom
KOMPONEN UTAMA PERALATAN GC
Injektor Detektor
Gas inlet Detektor

Amplifier
Kolom
Pengatur
laju dan
tekanan
Oven
Terminal pengolah data
GAS PEMBAWA (CARRIER GAS)
• Harus bersifat inert, kering dan bebas dari oksigen.

Nitrogen, hidrogen dan helium merupakan gas pembawa yang umum
digunakan.
• Pemilihannya bergantung pada jenis fasa diam serta jenis detektor yang
digunakan.
Helium misalnya, sangat baik untuk pemisahan yang menggunakan
detektor daya hantar panas.
• Tingkat kemurnian 99,99% bahkan hingga 99,999% (disebut sebagai
tingkat kemurnian 99999, ditandai dengan 5 buah angka sembilan).
Adanya uap air, oksigen, sejumlah kecil hidrokarbon dapat menyebab-
kan bereaksinya gas pembawa dengan komponen yang dipisahkan.
Adanya pengotor pada gas pembawa juga dapat merusak gerbang
injeksi dan kolom serta dapat menurunkan kinerja dari detektor.
regulator
Perlu pemurnian lanjut
filter menggunakan penyerap
(filter)
silinder gas
uap air gunakan penyaring molekul

hidrokarbon gunakan serbuk arang/karbon
oksigen gunakan oksigen trap
PENGUKURAN LAJU ALIR
dapat dilakukan dengan menggunakan “bubble meter”, “rotameter”

atau dengan “flow meter elektronik/digital”
OVEN
Temperatur kolom harus dikontrol dengan akurat, karenanya kolom

ditempatkan dalam suatu pemanas/oven yang temperaturnya dapat
dikontrol dengan mudah dan tepat.
Oven yang baik :

 Cukup luas untuk pemasangan kolom
 Suhu dapat dikontrol dengan mudah dan akurat
 Respon suhu cepat dan akurat
 Dapat terjadi pendinginan yang cepat pada akhir analisis
syringe
GERBANG INJEKSI
gas pembawa
blok pemanas
glass wool
liner
kolom
TEKNIK INJEKSI
Umumnya dilakukan dengan menggunakan micro-syringe
Atau dengan menggunakan injektor automatis
TEKNIK INJEKSI MENGGUNAKAN SYRINGE
Cara yang baik harus mampu :

• menghasilkan luas puncak kromartografi yang boleh
ulang
• memberikan diskriminasi massa yang rendah
• tak terkontaminasi dengan penyuntikan sebelumnya
• memberikan bentuk puncak yang baik
TEKNIK INJEKSI MENGGUNAKAN SYRINGE
Agar diperoleh hasil yang baik, injeksi harus dilakukan dengan cepat
Injeksi dilakukan dengan lambat
Injeksi dilakukan dengan cepat
CARA MEMBERSIHKAN SYRINGE
Untuk menghindari terjadinya kontaminasi cuplikan, syringe harus

dibersihkan dengan baik sebelum digunakan.
Bilas berulang kali menggunakan pelarut yang sesuai seperti
aseton atau diklorometana.
Pembilasan ini terutama harus diperhatikan jika konsentrasi cuplikan
yang satu dengan yang lainnya mempunyai perbedaan yang sangat
besar.
Penggunaan ultrasonic-bath juga sangat dianjurkan untuk pencuian
syringe.
Biasakanlah membilas syringe segera setelah menggunakannya agar
tak terjadi kontaminasi akibat sisa yang mengering dalam syringe
CARA MENGISI SYRINGE
sample
sample+udara
udara+sample+udara
pelarut+udara+sample+udara
KOREKSI VOLUME INJEKSI
isi syringe dengan sample
baca volume sample
suntikkan dengan cepat, cabut syringe
tarik kembali piston syringe, baca volume tertinggal
perkurangkan pembacaan awal dengan akhir
KATUP INJEKSI CUPLIKAN GAS
Cuplikan gas selain dapat diinjeksikan menggunakan syringe khusus
untuk gas, juga dapat diinjeksikan dengan menggunakan katup injeksi
Katup injeksi mampu memberikan presisi yang lebih baik.
KATUP INJEKSI CUPLIKAN GAS
cuplikan
LOAD INJECT
gas pembawa
kolom
Volume yang diinjeksikan akan bergantung pada

volume “sample loop” yang digunakan
KOLOM
• Jantung dari pemisahan dengan kromatografi

• Berbagai macam bahan telah digunakan sebagai fasa diam
• Dapat diklasifikasi berdasarkan diameter dan jenis fasa diamnya
Kolom konvensional :
1/8 – ¼” OD, stainless steel atau gelas dengan panjang 6 – 20 feet
Kolom preparatif :
> ¼” OD, dengan panjang > 10 feet
Kolom kapiler :
0.1 – 0.5 mm ID, dengan panjang 10 – 100 m
COLUMNS
OPEN TUBULAR
PACKED
(CAPILLARY)
NON-POROUS COATED WITH

POROUS POROUS LAYER
PACKING
PACKED WITH
POROUS LAYER BOUND PHASE
LIQUID
PACKED
LIQUID COATED
PACKED WALL
CAPILLARY
KOLOM
Penampang lintang kolom
packed Open tube (capillary)
Porous Wall
Layer Coated
Open Open
bead column
Tube Tube
porous layer
conventional
KOLOM
Zat padat pendukung ideal adalah yang;

(a). bulat, merata, kecil (20-40m) dengan kekuatan mekanis yang
baik,
(b). inert pada suhu tinggi,
(c). mudah dibasahi oleh fasa cair dan membentuk lapisan merata.
Fasa diam yang ideal adalah fasa diam (cairan) yang;

(a). tidak mudah menguap (td. > 200oC) atau lebih tinggi dari suhu
operasi kolom,
(b). mempunyai kestabilan termik yang tinggi,
(c). inert secara kimia.
KOLOM
contoh berbagai kolom
¼” packed
fused silica capillary
SS capillary
1/8” packed
PEMILIHAN KOLOM
Pertimbangan pertama dalam memilih kolom adalah

memilih produsen/merek yang benar dengan
mempertimbangkan : konsistensi dari kualitas yang
tinggi dalam memproduksi kolom.
Pertimbangan kedua, memilih kolom yang ideal untuk

suatu analisis yang spesifik yaitu meliputi,
- pemilihan fasa diam yang benar
- diameter dalam dari kolom
- tebal lapisan film fasa diam
- panjang kolom
KEPOLARAN FASA DIAM
Kepolaran menunjukkan bagaimana komponen-komponen contoh

beriteraksi dengan fasa diam.
• Fasa non-polar memisahkan komponen-komponen terutama ber-
dasarkan titik didih.
• Fasa sedikit polar (intermediately polar phase) meretensi komponen
komponen berdasarkan titik didih dan interaksi dipol terinduksi atau
melalui ikatan hidrogen.
• Fasa polar dan sangat polar meretensi lebih kuat senyawa polar di-
banding senyawa non-polar akibat interaksi dipol-dipol antara gugus
fungsi dari komponen dengan fasa diam
KEPOLARAN RELATIF FASA DIAM
0 SQUALANE
SE-30
APIEZON
OV-1
SE-52
KEPOLARAN RELATIF
OV-101
DEXIL-380
OV-17
1
OV-25
OV-210
OV-225
2
CARBOWAX-20M
CARBOWAX-1500
3
DGES
KESTABILAN TERMAL FASA DIAM
Jika polaritas kolom meningkat maka kestabilan thermal menurun.
Kestabilan thermal yang baik dapat diperoleh dengan menggunakan
fasa yang berikatan silang terimmobilisasi. Namun ikatan silang
selain merubah sifat fisik juga dapat merubah sifat kimia dari fasa
diam
KAPASITAS KOLOM
Jika diameter dalam dari kolom membesar maka kapasitas suatu
kolom juga akan membesar, namun daya pisah akan menurun.
Untuk pemisahan campuran yang sangat rumit, diameter yang sempit
akan memberikan hasil yang baik.
Jika konsentrasi komponen dalam contoh sangat bervariasi maka
kolom dengan diameter besar harus digunakan untuk memperbesar
kapasitas kolom
KETEBALAN LAPISAN FASA DIAM
Lapisan tipis  retensi kecil

 untuk senyawa bertitik didih tinggi
Lapisan tebal  retensi besar

 untuk senyawa bertitik didih rendah
PANJANG KOLOM
Elusi isothermal  N dan waktu analisis proporsional

dengan L
Panjang kolom membesar  Resolusi membaik
Resolusi  N,
jika L diperpanjang 2 x lipat  Rs naik 40%
! tetapi waktu analisis naik dua kali lipat.
TEMPERATUR KOLOM
Isothermal  Temperatur kolom dibuat tetap selama analisis
Dengan teknik ini tak mungkin memisahkan campuran komponen dengan

titik didih/sifat fisiko kimia yang sangat bervariasi
Pada suhu rendah, komponen-komponen bertitik didih rendah mungkin

dapat terpisah dengan baik, tetapi yang bertitik didih tinggi akan teretensi
dengan kuat pada kolom.
Pada suhu tinggi, komponen-komponen dengan titik didih tinggi mungkin

terpisah dengan baik dengan waktu retensi yang tidak terlalu besar, tetapi
Komponen-komponen bertitik didih rendah tidak akan terpisah dan terelusi
pada awal pemisahan (didekat waktu mati dari kolom)
“DIPERLUKAN TEMPERATUR TERPROGRAM DALAM HAL INI”
TEMPERATUR KOLOM
Suhu Terprogram  Temperatur berubah selama analisis
Isotermal.
Komponen tak terpisah dengan baik.
Beberapa komponen terelusi pada saat yang
sama.
Puncak yang terakhir menunjukkan adanya
pelebaran puncak
Temperatur terprogram
Komponen terpisah dengan sempurna.
Tidak ditemui adanya pelebaran puncak
kromatogram.
JIKA TIDAK UNTUK KEPERLUAN KHUSUS ATAU
BUKAN UNTUK PENGEMBANGAN SUATU METODA BARU
PEMILIHAN KOLOM DAPAT DILAKUKAN MELALUI

BERBAGAI INFORMASI YANG TELAH TERSEDIA,
• KATALOG PRODUK GC
• BASIS DATA ELEKTRONIK
• APPLICATION NOTE
• JOURNAL ILMIAH
CONTOH PENGGUNAAN BASIS DATA ELEKTRONIK
DETEKTOR
R
b
Kepekaan, dR/dQ
dR Batas deteksi
dQ Daerah Linier
a
Q
KEPEKAAN DAN DAERAH LINIER DETEKTOR
DETEKTOR DAYA HANTAR TERMAL (TCD)
R1 R2
R3 R4
R5
A
R6
RANGKAIAN DETEKTOR DAYA HANTAR TERMAL
dari kolom gas pembawa

murni
R1 R2
Rangkaian tahanan peka temperatur (R1 dan R2) pada TCD
Gas Daya Hantar Kalor

Hidrogen (H2) 44,5
Helium (He) 36,0
Neon (Ne) 11,6
Metana (CH4) 8,18
Oksigen (O2) 6,35
Nitrogen (N2) 6,24
Karbon Dioksida (CO2) 3,96
Metanol (CH3OH) 3,68
DAYA HANTAR KALOR BEBERAPA JENIS GAS
DETEKTOR IONISASI NYALA (FID)
kolektor pemantik nyala
udara
recorder
hidrogen amplifier
kolom
Dibandingkan dengan TCD, detektor ini mempunyai beberapa

keunggulan seperti :
• kepekaannya yang lebih besar,
• waktu tanggap yang lebih singkat,
• cukup stabil dan tak peka terhadap suhu (hingga 400oC),
• memberikan respon yang linier pada rentang konsentrasi yang
cukup lebar (106) dan,
• memberi respon terhadap hampir semua senyawa organik.
tak memberi respon pada senyawa-senyawa anorganik seperti air,

nitrogen, oksigen, CO, CO2, gas-gas mulia dan sebagian senyawa
organik seperti asam format, karbon disulfida dan formaldehida.
merupakan detektor yang peka terhadap aliran massa
butana
asam pentanoat
propana
asam butanoat
asam propionat
etana
asam asetat
metana
asam format
Detektor TCD dan FID pada suatu kromatograf
Respon TCD dan FID untuk cuplikan yang sama
DETEKTOR PENANGKAP ELEKTRON (ECD)
anode purge
pembuangan
anoda (+)
sumber elektron
b (63 Ni) N2  N2+ + e-
gas makeup
kolom
DETEKTOR NITROGEN FOSFOR (NPD)
kolektor
(anoda, -ve)
rubidium
katoda, +ve
udara
hidrogen
kolom
DETEKTOR FOTOMETRI NYALA (FPD)
zona tabung
emisi pengganda
foton
udara filter
hidrogen
kolom
DETEKTOR FOTOIONISASI (PID)
lampu UV
elektroda
polarisasi insulator
ruang reaksi
elektroda
kolektor
kolom
DETEKTOR EMISI ATOM (AED)
170 N, P, S, C
250 Si, Hg, P, C
450
495 Br, Cl, H
generator 658 H, O
gelombang mikro 690 F
740 N
He 777 O
kolom
diode
array
plasma
ELECTROLYTIC CONDUCTIVITY DETECTOR (ELCD)
pelarut
reaktor
gas pereaksi
kolom
ANALISIS KUALITATIF DAN KUANTITATIF

KROMATOGRAFI

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

KROMATOGRAFI

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

amran@chem.itb.ac.

dari ekstraksi ke kromatografi

Pada ekstraksi terdapat dua fasa

Pada kromatografi juga terdapat dua fasa

Ada analogi antara kedua teknik pemisahan

Pada sistem dua fasa (bifasa) seperti ini,

Hukum Distribusi Nernst

fasa atas dipindahkan

PROSES EKSTRAKSI COUNTER CURRENT CRAIG

12.500 25.000 12.50

25.000 25.000 3.125 12.500 18.750 12.500 3.125

[A]org 3.125 12.5 18.75 12.5 3.125

Jika jumlah tabung (jumlah pemindahan) diperbesar maka :

Partisi/distribusi komponen antara fasa diam dan fasa mobil

• kromatografi cair - cair

• kromatografi gas - cair

cairan B kecenderungan X kecenderungan X

kromatografi penukar ion kromatografi eksklusi

Waktu Retensi (Waktu Tambat), tR

m  kecepatan linier fasa gerak

Cs : konsentrasi analit dalam fasa diam Vs : volume fasa diam

SELEKTIFITAS MAKIN BAIK

KOEFISIEN PARTISI/DISTRIBUSI (K)

Terdapat dua teori yang telah dikemukakan mengenai proses kroma-

Martin & Synge

Didasarkan pada model ekstraksi counter-current Craig

• Jumlah tabung pada ekstraksi Craig dianalogikan dengan suatu pelat

Dalam hal tertentu,

Karena N mencerminkan jumlah kesetimbangan yang terjadi di dalam

Rs = 2 DtR / (wA + wB)

JUMLAH PELAT TEORITIS (N)

Besaran Notasi Sumber

Untuk memberikan pengertian yang lebih baik mengenai faktor-faktor

PERSAMAAN VAN DEEMTER

Suku A atau suku difusi Eddy mencerminkan neka-alur dari isi

merupakan gaya-gaya difusi molekul yang menyebabkan mole-

diffusi semakin besar

Koefisien transfer massa

komponen-komponen suatu cuplikan yang berupa uap di

Berdasarkan wujud fasa diam,

Pada kromatografi gas-padat, partisi komponen cuplikan

Pada kromatografi gas-cair, partisi komponen cuplikan dida-

Gas inlet Detektor

Terminal pengolah data

• Harus bersifat inert, kering dan bebas dari oksigen.

uap air gunakan penyaring molekul

dapat dilakukan dengan menggunakan “bubble meter”, “rotameter”

Temperatur kolom harus dikontrol dengan akurat, karenanya kolom

Oven yang baik :

Atau dengan menggunakan injektor automatis

Cara yang baik harus mampu :

Injeksi dilakukan dengan lambat

Injeksi dilakukan dengan cepat

Untuk menghindari terjadinya kontaminasi cuplikan, syringe harus

isi syringe dengan sample

baca volume sample

suntikkan dengan cepat, cabut syringe

tarik kembali piston syringe, baca volume tertinggal

perkurangkan pembacaan awal dengan akhir

Volume yang diinjeksikan akan bergantung pada

• Jantung dari pemisahan dengan kromatografi

NON-POROUS COATED WITH

packed Open tube (capillary)