Pembuatan Media dan

Kontrol Kualitas Media

Anggraeni Sih P., M.Sc

PROGRAM STUDI D IV TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIK

POLITEKNIK SANTO PAULUS SURAKARTA
2019
 Praktikum Pembuatan Media

 Jenis Media : Solid /padat

 Nama Media : Nutrient Agar (NA)
 PROSES
Pembuatan Media  Sterilisasi  Uji
kontrol kualitas
Buat untuk 3 jenis (5 ml tabung
reaksi untuk media agar miring, 10
ml untuk agar tegak, 15 ml untuk
plate agar)
 Praktikum Pembuatan Media

 Media dehidrasi ditimbang  dilarutkan dalam aquades 

suspensi homogen (bisa dipanaskan tapi hanya agar larutan
homogen, kecuali ada instruksi khusus pada label kemasan)
 autoklaf  cek pH (gunakan electrode permukaan utk
media agar)  tuang pada petri/tabung
Laporan Praktikum Pembuatan
Media Nutrient Agar (NA)

 Bentuk Media :
 Jenis Media : Universal / Selektif/ Diferensial
 Warna Media :
 Zat warna / indikator
 Volume :
 Kandungan :
Laporan Praktikum Pembuatan
Media Nutrient Agar (NA)

 Cara Pembuatan
Menuang Media ke cawan petri
(volumen media 15 ml)
 Kontrol Kualitas Media

 Makroskopis
 Secara visual : melihat warna, pH, kekeruhan
 Misal media gula-gula yang dilengkapi tabung durham terlihat udara dalam
tabung durham atau perubahan warna menjadi kuning  kontaminasi bakteri
 Warna tidak sesuai standar – curiga perubahan pH akibat pertumbuhan
mikrobia  cek pH. Jika asam  terjadi kontaminasi
 Kontrol Kualitas Media

 Uji Sterilisasi – pengecekan sterilitas media

 Dicek pertama kali sebelum menggunakan media
 Mengambil media yang telah disterilisasi secara acak per batch yang dibuat.
Minimal 1 media atau ditentukan jumlahnya (1-4% dari total media) 
inkubasi 37°C selama 2 x 24 jam atau 48°C untuk Coliform.
 Tetap steril/ tidak ada pertumbuhan bakteri – kualitas media baik
 Ada pertumbuhan bakteri  buang semua media, data yg dihasilkan tidak
valid
 Kontrol Kualitas Media

 Pengujian Kinerja Media

 Tujuan : verifikasi kualitas media setelah dibuat menggunakan
mikroorganisme kontrol yang sesuai dan kondisi yang telah diketahui
 Dilakukan :
 Setiap batch pembuatan media
 Kedatangan media baru
 Media yang dipakai meragukan (media mengalami perubahan fisik, kadaluwarsa)
 Kontrol Kualitas Media

 Caranya – ditumbuhkan bakteri kontrol positif (kultur uji positif) dan kontrol
negatif (kultur uji negatif)
 Jika media non selektif, tidak perlu kultur uji negatif
 Minimal 1 cawan/ tabung per batch
 Jikabakteri kontrol positif tumbuh & kontrol negatif tidak tumbuh – kualitas
media baik
 Mengamati pertumbuhan bakteri kontrol positif  sifat dan morfologi sesuai
– kualitas media baik
Kontrol Kualitas Media
 Penyimpanan Media Kultur

 Mediaagar plate disimpan pada suhu 2-8°C selama 2-4

minggu
 Media dalam tabung disimpan pada suhu 2-8°C selama 3-6
bulan
 Kesalahan dan Penyebab

Kesalahan Penyebab
Nilai pH tidak sesuai Terlalu lama dan panas proses sterilisasi
Jumlah air kurang
Penyimpanan media salah atau media
kadaluwarsa
 Kesalahan dan Penyebab

Kesalahan Penyebab
Terjadi kekeruhan dan pengendapan Kurang jumlah air
Terlalu lama dan panas proses sterilisasi
Tidak tepatnya nilai pH
Tidak lemgkapnya larutan
 Kesalahan dan Penyebab

Kesalahan Penyebab
Gel lembek Agar tidak larut, kurang mencampur
Terlalu lama penyimpanan
Kesalahan penimbangan
Terlalu banyak air
 Kesalahan dan Penyebab
Kesalahan
Penurunan pertumbuhan bakteri
Penyebab
Pemanasan berlebihan dan lama
Terdapat zat penghambat
Penyimpangan pH
Tidak lengkapnya larutan