METODE IMUNOKROMATOGRAFI

A. KELEBIHAN DAN KEKURANGAN

Kelebihannya :

 Kemudahan persiapan perangkat dan biaya murah

 Stabilitas penyimpanan kit pada berbagai kondisi lingkungan dan umur
simpan yang sangat lama. 
 Kemudahan dalam penggunaan strip serta penginterpretasian hasil
pemeriksaan dan ramah pengguna
 Dapat menangani volume kecil dari beberapa jenis sampel
 Waktu analisis yang lebih singkat

Kekurangan :

 Metode bersifat kualitatif

 Kurangnya data tentang sensitivitas pathogen
 Peningkatan risiko pengguna terinfeksi
 Perlunya melakukan tindakan untuk pengendalian quality control
 Jika waktu pemeriksaan dengan strip melebih atau kurang dari waktu yang
ditentukan, interpretasi hasil yang muncul bukan hasil sebenarnya.
 APPLICATION

Bagian utama dari aplikasi imunocromatography terletak pada analisis klinis. Ini mencakup deteksi
berbagai analit klinis dalam plasma, serum, urin, sel, jaringan dan sampel biologis lainnya. Table
dibawah menunjukkan aplikasi LFA untuk mendeteksi analit klinis dan non-klinis
 Application area Analyte Label Sample type Detection Limit Time of detection Ref.
Clinical Analysis Thrombin Gold Nanoparticles Plasma 2.5nM – [73]
Ramos cells Gold Nanoparticles Blood 800 Ramos cells 15min [82]
Cardiac Troponin I Superparamagnetic nanobeads 0.01ng/mL <15min [79]
Alpha fetoproteins Quantum dots Serum 1ng/mL 10min [123]
Troponin I Dual gold nanoparticle Serum 0.01ng/mL 10min [124]
C-jun Gold nanoparticles Standard 0.2 footprint unit 10min [125]
Influenza antigen Fluorescently doped silica particles Allantoic fluid 250ng/mL 30min [63]
miRNA Gold nanoparticles Cell lysate 60pM 20min [77]
HBs antigens SiO2 modified magnetic nanoparticles Serum 0.1pg/mL [126]
Toxins and Pathogens Clenbuterol Fluorescent Nanosilica Urine 0.037ng/L – [104]
Clenbuterol Gold Nanoparticles Urine 0.1ng/mL 10min [127]
1-Aminohydantoin Gold Nanoparticles Meat 1.4ng/mL 1min [128]
Aflatoxin B(1) Gold nanoparticles Pig feed 5lg/kg 10min [129]
T-2 toxins Gold nanoparticles Wheat and oat 100lg/kg 4min [130]
Escherichia coli mRNA Liposome Drinking water 5fmol 15–20min [131]
Salmonella enteritidis Gold nanoparticles 10CFU [97]
Pesticides Carbofuran Gold nanoparticles Water 32lg/L 8–10min [108]
Triazophos Gold nanoparticles Water 4lg/L 8–10min [108]
Atrazine Gold nanoparticles Water 1.0ppb 5min [132]
Paraxon methyl Magnetic Fe3o4 aggregate 1.7ng/mL [13]
Carbaryl Gold nanoparticles Agricultural products 100lg/L [41]
Endosulfan Gold nanoparticles Agricultural products 10lg/L [41]
Carbaryl HRP Agricultural products 10lg/L [41]
Endosulfan HRP Agricultural products 1lg/L [41]
Trichloropyridinol HRP Plasma 0.1ng/mL [133]
Triazophos residues Gold nanoparticles Standard 4ng/mL 10min [134]
Chlorpyrifos-methyl Gold nanoparticles Water 50ng/mL 10min [135]
Dichlorodiphenyltrichloroethane Gold nanoparticles Food 27ng/mL [136]
Thiabendazole Standard 0.08ng/mL 10min [137]
Methiocarb Carbon nanoparticles Surface water 0.5ng/mL 10min [69]
Metal Ions Hg2 + Gold nanoparticles Water 0.1nM – [114]
Cr3 + Gold nanoparticles Water and serum 5ng/mL 5min [138]
Hg2 + Gold nanoparticles Water 6nM 5min [139]
Cd2 + Gold nanoparticles Drinking and tap water 0.4ppb [116]
Cu2 + Gold nanoparticles Water 10nM [140]
Pharmaceuticals and drugs Enrofloxacin Gold nanoparticles Chicken muscles 0.138lg/kg 5–10min [141]
Sulfonamides Gold nanoparticles Eggs and Chicken Muscles 10ng/mL 15min [142]
Morphine Gold nanoparticles Urine 2.5ng/mL [143]
Chloramphenicol Gold nanoparticles Milk 10ng/mL 10min [144]
Ofloxacin Gold nanoparticles Swine urine 10ng/mL <10min [145]
Ofloxacin Gold nanoparticles Milk, chicken and pork meat 30ng/mL 10min [146]

A. RNA/DNA detection

MicroRNA terdeteksi dalam lisat sel menggunakan LFA berbasis DNA-AuNP dalam
waktu 20 menit. DNA dikuantifikasi dalam plasma dengan menggunakan biosensor asam
nukleat reagen kering menggunakan manik-manik lateks yang didoping pewarna biru sebagai
label. Deteksi didasarkan pada hibridisasi antara konjugat DNA dan urutan DNA target
spesifik dalam plasma. LFA dikembangkan untuk mengidentifikasi asam nukleat dengan
menggunakan pengenalan sifat molekul beacon dan sifat optik nanopartikel emas dan batas
deteksi yang sangat rendah dicapai. Oligonukleotida jepit rambut yang dimodifikasi dengan
urutan DNA pengikat target ganda dan nanopartikel emas digunakan di LFA untuk
mendeteksi ketidakcocokan basa tunggal dalam DNA dengan pengamatan visual.target ganda
sekuens pengikatan DNA telah menyebabkan peningkatan kecenderungan probe ini untuk
membedakan antara ketidakcocokan basa sempurna dan basa tunggal dalam DNA.

B. Proteins and cells

Protein berfungsi sebagai biomarker untuk mengungkap beberapa penyakit dan
analisisnya memiliki kunci penting dalam diagnosis klinis Radioimmunoassay, chip protein,
fluoresensi, dan metode lain digunakan untuk mendeteksi tingkat protein yang rendah dalam
matriks biologis. Kerugian dari metode ini termasuk pembuangan zat radioaktif,langkah-
langkah persiapan sampel yang melelahkan, instrumentasi yang mewah, perlunya analis yang
terampil prosedur pencucian dan inkubasi. Penanda jantung Kardiak troponin I adalah protein,
konsentrasinya dalam aliran darah sangat penting dalam menentukan dan mendiagnosis infark
miokard akut (IMA). Pada orang sehat, konsentrasi troponin I jantung adalah 20,4 pg/mL
tetapi saat IMA dimulai, tingkat penanda protein ini meningkat seiring waktu dan setelah
beberapa jam mencapai nilai puncaknya 195,9 ng/mL.
Karena laboratorium klinik pusat menghabiskan banyak waktu dalam pendeteksian,
diperlukan metode yang cepat dan sensitif. Xu dkk. mengembangkan metode sensitif untuk
mendeteksi troponin I jantung menggunakan superparamagnetik manik-manik nano sebagai
label untuk LFA. Batas deteksi adalah 0,01 ng/ mL dan waktu analisis kurang dari 15 menit.
 173 spesimen diperoleh dari pasien yang muncul dengan gejala AMI dan disaring untuk
troponin I jantung dan mioglobin dengan menggunakan electrochemiluminescence
immunoassay, strip aliran lateral yang tersedia secara komersial dan strip aliran lateral yang
dimodifikasi dengan nanopartikel. Semua metode menunjukkan hasil kuantitatif yang sama
tetapi strip modifikasi nanopartikel ditemukan lebih sensitif.Baru-baru ini, LFA digunakan
untuk mendeteksi sel induk berpotensi majemuk manusia menggunakan nanopartikel emas
sebagai label dan mampu mendeteksi hingga 10.000 sel dengan inspeksi visual dan 7000 sel
dengan pembaca strip. Strip berbasis LFA disiapkan dengan menggabungkan sifat
pengenalan molekul aptamers dan sifat optik emas untuk mendeteksi sel kanker. Sel Ramos
dipilih sebagai model analit untuk penelitian ini. Batas deteksi visual turun menjadi 4000 sel
Ramos sementara pembaca strip mampu mendeteksi minimal 800 sel Ramos.

C. Analisis klinis lain

Diagnosis yang melibatkan tes pada serum darah disebut sebagai serodiagnosis. Ini
melibatkan diagnosis penyakit dengan mendeteksi antibodi atau antigen. LFA digunakan
untuk mendeteksi antibodi imunoglobulin M (IgM) spesifik Leptospira dalam serum darah
manusia dan hasil yang dilaporkan sesuai dengan ELISA yang digunakan secara rutin [83].
Brucellosis manusia didiagnosis dengan deteksi LFA dari antibodi IgM spesifik brucella
dalam serum.
Antibodi terhadap glikolipid-I fenolik (PGL-I) dari Mycobacterium leprae dideteksi
menggunakan LFA untuk klasifikasi pasien kusta dan hasilnya menunjukkan kesesuaian
yang baik dengan ELISA. Antigen spesifik prostat yang dianggap sebagai penanda yang
dapat diandalkan untuk diagnosis dini kanker prostat ditentukan dalam serum manusia
menggunakan nanopartikel emas sebagai reporter dan sistem deteksi elektrokimia. Sebuah
strip aliran lateral komersial digunakan untuk mendeteksi konsentrasi tetap dari virus
vaccinia dan virus monkeypox yang ditumbuhkan di laboratorium. Ini menunjukkan
reproduktifitas yang baik dan 9 dari 11 sampel klinis diidentifikasi dengan benar. Rendah
atau tinggi hormon perangsang tiroid (TSH) yang dengan hipotiroidisme dan hipertiroidisme
pada manusia.kadar Sistem deteksi berbasis ponsel digunakan dengan LFA untuk mengukur
TSH dalam serum. Rotavirus terdeteksi dalam sampel tinja sapi menggunakan LFA, uji
aglutinasi lateks komersial (LAT) dan mikroskop elektron. Dibandingkan dengan mikroskop
elektron, sensitivitas LFA dan LAT masing-masing adalah 70% dan 80% tetapi kedua tes
menunjukkan spesifisitas 100%

D. Patogen dan toksin bawaan

Makanan Kualitas makanan dipengaruhi selama setiap tahap dari transportasi hingga
pemrosesan. Komunitas ilmiah berfokus pada kualitas nutrisi makanan dan kemungkinan
hubungannya dengan kesehatan manusia. PO yang cepat dan nyaman diinginkan untuk
mendeteksi patogen dan toksin bawaan makanan. Produk makanan memerlukan pelabelan
ekstensif dari konstituen utama dan minor. Saat ini metode berbasis budaya konvensional
sedang digunakan dalam industri makanan. Meskipun mereka memiliki sensitivitas dan
selektivitas yang wajar, prosedur pengujian yang membosankan dan waktu analisis yang
diperpanjang adalah kelemahan utama mereka.
Teknologi LFA telah menghasilkan banyak keuntungan seperti keandalan dan waktu
pengujian yang singkat. 72% studi deteksi pathogen terutama berfokus pada industri
Makanan dan Air & Lingkungan. Selain itu 60% dari metode deteksi berurusan dengan
Salmonella dan E. coli. Botulinum neurotoxins (BoNT) adalah neurotoksin yang paling
 berbahaya. Mereka diproduksi oleh Clostridium botulinum, yang secara alami membentuk
spora obligat anaerob, terjadi di tanah. BoNts dibagi menjadi tujuh jenis.Ini bertindak untuk
menghambat pelepasan asetilkolin dan mengakibatkan kelumpuhan dan kematian. LFA
yang sangat sensitif dirancang untuk mendeteksi dan membedakan antara BoNT/A dan B
yang diketahui beracun dan bertanggung jawab atas 80% penyakit yang disebabkan oleh
susu dan jus apel. Jagung, bahan pakan dan gandum disaring untuk deteksi simultan
mikotoksin zearale- none dan fumonisin B1 dengan menggunakan jalur aliran lateral koloid
emas . Hasilnya sesuai dengan ELISA danLC-MS.
E. Pestisida
Pestisida mewakili kelas yang luas dari bahan kimia termasuk senyawa organik yang
bersifat volatil, semi-volatil atau non-volatil. Beberapa senyawa anorganik dan organologam
juga digunakan sebagai pestisida tetapi kasus seperti itu jarang terjadi. Pestisida memiliki
aplikasi yang luas di divisi pertanian untuk menanam tanaman dan bahan makanan yang
berbeda. Melalui rantai makanan, pestisida ini menemukan jalan mereka ke tubuh manusia
dan hewan liar. Dua strip LFA untuk deteksi simultan karbofuran dan triazofos dalam
sampel air dikembangkan berdasarkan konjugat imunogold. Tidak seperti strip lainnya, strip
tersebut berisi dua jalur uji dan satu jalur kontrol. Total waktu analisis adalah 10 menit.

Pestisida organofosfat dapat dideteksi dengan menggunakan metode tidak langsung.

Paparan mereka menghasilkan peningkatan jumlah total kolinesterase terfosforilasi yang
dapat menjadi biomarker untuk mendeteksi dan mengukur pestisida ini. Imunokromatografi
strip digabungkan dengan layar sekali pakai elektroda dicetak digunakan untuk mengukur
enzim ini dalam sel darah merah in vitro dan dapat mendeteksi rendah hingga 0,02 Nm
dalam waktu singkat. Format khas LFA digunakan untuk mendeteksi metil paraokson
menggunakan agregat Fe3O4 sebagai label dan pembaca strip fluoresensi sebagai detector.