PENGHITUNGAN VIRUS

Berdasarkan sifat virus :

►Sebagai bahan kimia yg komplex  dihitung secara
kimiawi & alami
►Sebagai mikroorganisme hidup  dihitung
berdasarkan akibat interaksinya dgn sel hidup
(infektivitas)

Penghitungan scr kimiawi & alami :

►Mikroskop elektron  virion dihitung scr langsung
►Hemaglutinasi (misal mixovirus)

Penghitungan ini tdk membedakan antara

partikel infeksius & non infeksius
Virologi - Nanik Sianita
 PENGHITUNGAN BERDASARKAN
INFEKTIVITAS
► Kekuatan virus dlm menginfeksi ditentukan
oleh sejumlah kecil virus yg terkandung dlm
suatu bahan yg diperlukan u/ menimbulkan
respon spesifik pd induk semang
► Penentuan scr kuantitatif kekuatan virus 
titrasi
► Diperlukan suatu metode biologik u/ menilai
daya infeksi virus (Infectious unit, IU)
IU dinyatakan dlm ID50, EID50, LD50, TCID50
► Titer virus dapat juga dinyatakan dgn : PFU
Virologi - Nanik Sianita
 TITRASI VIRUS

10 –1
10 –2
10 –3
10 –4
10 –5

PBS /
PZ
Suspensi
Virus

Kultur
Jaringan

Virologi - Nanik Sianita Diamati CPE

 TITRASI VIRUS

10 –1
10 –2
10 –3
10 –4
10 –5

PBS /
PZ
Suspensi Virus

Telur
Berembrio

Diamati Ada/Tidak Infeksi

EID50
Virologi - Nanik Sianita
 Rumus Reed and Muench
Pengenceran CPE CPE Jum lah Ratio Persen

Virus Pos Neg Pos Neg Positif Positif

10-1 4 0 13 0 13/13 100

10-2 4 0 9 0 9/9 100

10-3 3 1 5 1 5/6 83

10-4 2 2 2 3 2/5 40

10 -5
Virologi - Nanik Sianita
0 4 0 7 0/7 0
 83  50
PD = Proportionate distance
83  40
 0,77
50 % DEP = 10-3 – 0,77
= 10-3,77
TCID50 = 50% DEP x dosis inokulum
= 10-3,77 x 10-1
= 10-4,77 ml
Titer Virus = 104,77 TCID50 / ml
Virologi - Nanik Sianita
 Rumus Spearman – Karber
Pengenceran Virus Proporsi Reaksi Pos

10-1 4/4 = 1
10-2 4/4 = 1
10-3 3/4 = 0,75
10-4 2/4 = 0,5
10-5 0/4 = 0

Log TCID50 = L – d (S – 0,5)

L = log lower dilution
d = difference between log dilution steps
Virologi - Nanik Sianita S = sum of proportions of tubes showing cytopathic effects
► Log TCID50 = -1 – 1 (3,25 – 0,5)
= - 3,75
► TCID50 = 10-3,75 x 10-1 ml
= 10-4,75 ml

► Titer Virus = 104,75 TCID50 / ml

Virologi - Nanik Sianita

Latihan Soal no. 2 :
Suspensi 10 % dari jaringan paru-paru
ayam yang terinfeksi virus ND dititer pada
telur ayam berembryo dan memberikan
hasil sbb :
10 –1 10 –2 10 –3 10 –4 10 –5
4/4 4/4 3/4 1/4 0/4

► Berapa ELD50 yang terkandung dlm tiap

gram jaringan, bila dosis inokulum 0,1 ml ?
(Kerjakan perhitungan titer virus
berdasarkan rumus Reed & Muench atau
rumus Spearman & Karber)
Virologi - Nanik Sianita