ANALISIS KONSENTRASI EFEK

HASIL UJI TOKSISITAS AKUT

METODE YANG DIGUNAKAN :

1. METODE GRAFIS
2. METODE RATA-RATA SUDUT BERGERAK
3. METODE LITCHFIELD-WILCOXON
4. ANALISIS PROBIT
 ANALISIS KONSENTRASI EFEK
DENGAN METODE GRAFIS

 Digunakan untuk interpretasi umum data uji toksisitas

tanpa ketentuan/kondisi tertentu.
 Tujuan : untuk menentukan kosentrasi penyebab efek
50 % (LC50 atauLD50)

 Kelemahan : tidak memperhitungkan batas-batas

kepercayaan kosentrasi efek
 PROSEDUR KERJA METODE GRAFIS

1. Sediakan kertas semilogaritmik

2. Plot data, kosentrasi zat ditempatkan pada absis logaritmik dan
mortalitas (efek) ditempatkan pada ordinat aritmatrik
3. Buat garis penghubung koordinat kosentrasi efek, dengan teknik :
a. Umum : deviasi data adalah terkecil terhadap garis
b. Khusus : dalam hal data beda kosentrasi menghasilkan efek
sama maka ambil 1 koordinat koordinat kosentrasi terbesar pada
efek terkecil, dan 1 koordinat kosentrasi terkecil pada efek
terbesar
4. Tetapkan titik 50 % kematian biota dan buat garis memotong
garis korelasi kosentrasi efek, kemudian tarik menuju absis
sehingga didapat kosentrasi yang menyatakan LC50
 Contoh hasil uji toksisitas

KOSENTRASI MORTALITAS (%)

6,25 0

12,5 0

25,0 0

50,0 100

100 100
Prosedur analisis :
1. Siapkan kertas semilog
2. Plot data kosentrasi zat ditempatkan pada absis
logaritmik mortalitas (efek) ditempatkan pada ordinat
aritmatrik
grafik
K 6,25 12,5 25 50 100
E 0 0 0 100 100
 PROSEDUR ANALISIS PROBIT
1. Buat tabel bantu sbb :
Jumlah JL. biota % Koreksi Probit
Konsentrasi (%) Log Konsentrasi
biota uji mati mortalitas mortalirtas mortalitas
 0    10  1  10    
 3  0,48  10  2  20  11,1  
 5  0,71  10  3  30    
     10        
             
             

2. Masukkan data hasil uji toksisitas pada tabel tersebut

3. Koreksi % mortalitas jika pada kontrol ada yang mati
(1 s.d 20 %), sbb :
% mortalitas_Obs – % mortalitas_Control
Koreksi mortalitas = x 100
100 - % mortalitas_Control
 4. Transformasi % mortalitas yang sudah dikoreksi dengan
probit, dengan menggunakan tabel transformasi probit :

  0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
0   2,67 2,96  3,12   3,25  3,35 3,44  3,52  3,59  3,66 
10 3,72 3,77  3,82  3,87  3,92  3,96  4,01  4,05  4,08  4,12
20 4,16 4,19  4,23  4,26  4,29  4,33  4,36  4,39  4,42  4,45
30 4,48 4,50  4,53  4,56  4,59  4,62  4,64  4,67  4,70  4,72
40 4,75  4,77  4,80  4,82  4,85  4,87  4,90  4,92  4,95  4,98 
50 5 5,03  5,05  5,08  5,10  5,13  5,15  5,18  5,20  5,23
60 5,25 5,28  5,31  5,33  5,36  5,38  5,41  5,44  5,47  5,50
70 5,52 5,55  5,58  5,61  5,64  5,67  5,71  5,74  5,77  5,81
80 5,84 5,88  5,92  5,95  5,99  6,04  6,08  6,13  6,18  6,23
90 6,28 6,34  6,41  6,48  6,56  6,66  6,75  6,88  7,05  7,33

Contoh : jika mortalitas yang sudah dikoreksi 47 % maka probit = 4,92

5. Tentukan persamaan garis linear antara log konsentrasi
dengan nilai probit dengan menggunakan program excel :
a. Buka program excel
b. Masukkan data log konsentrasi dan nilai probit
c. Sorot kedua data tersebut
d. Klik insert, pilih scatter dan pilih garis
e. Pilih chart lay out yang paling kiri, pilih yang ada tanda fx nya
f. Tulis persamaan garis linear yang muncul pada grafik
6. Tentukan LC50 dengan menggunakan persamaan garis
tersebut. Contoh : Y = 4,334 X + 0,748
Y = probit mortality ; X = log kosentrasi

LC50 Y =5 5 = 4,334 X + 0,748 4,334 X = 5 – 0,748

X = 4,252 / 4,334

LC50 = anti log 0,98 100,98 = 9,55 % (10^0,98)

 Contoh Soal :

Hasil uji toksisitas limbah tahu pada ikan nila didapatkan hasil sebagai berikut

Konsentrasi Jumlah
JL. biota mati
Limbah tahu (%) biota uji
0 10  1
5 10  1
10 10  2
15 10  3
20  10  4
 25  10  5
30 10 6

Berdasarkan data tersebut tentukan LD50 limbah tahu terhadap ikan nila !
 Tabel Bantu Analisis Probit
Konsentrasi (K) Log K Jl. Biota Jl. Mati % Motalitas (M) Koreksi M Probit M
0 0 10 1 10    
5 0,7 10 1 10 0 0
10 1 10 2 20 11,1 3,77
15 1,2 10 3 30 22,2 4,23
20 1,3 10 4 40 33,3 4,56
25 1,4 10 5 50 44,4 4,85
30 1,5 10 6 60 55,6 5,13

Contoh perhitungan koreksi mortalitas untuk konsentrasi 10 :

20 – 10 10
Koreksi mortalitas = x 100 = x 100 = 11,1
100 – 10 90
 Log K Probit M
a. Buka program excel
b. Masukkan data log konsentrasi dan nilai probit 0,7 0
c. Sorot kedua data tersebut 1 3,77
d. Klik insert, pilih scatter
e. Pilih tanda +, contreng semua yang diinginkan 1,2 4,23
f. Pilih trendline, pilih more options, pilih display
1,3 4,56
Equation on chart dan display R-squared value
on chart 1,4 4,85
g. Tulis persamaan garis linear yang muncul pada
grafik 1,5 5,13

y = 6,039 X- 3,3891
5 =6,039 X -3,389 Grafi k Probit Analysis
6
6,039 X = 5 + 3,389 5
f(x) = 6.04 x − 3.39
R² = 0.86
X= 8,389/6,039

Probit Mortality
4

3
X = 1,389 2

LC50 = antilog 1,389 1

LC50 = 10^1,389 0
0.6 0.7 0.8 0.9 1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6
Log Konsentrasi
LC50 = 24,5
 Contoh Toksisitas berbagai toksin/racun

Racun LD50 (g/Kg)

Botulin toksin A 0,00005
Aflatoksin B1 600
Nikotin 1000
Metil-Hg 1000
Endrin 3000
HCN 7000
DDT 120 000
CCl4 570 000
NaCl 4 000 000
Catatan : Hewan uji : mencit
Sumber : McKinney, 1981
Nilai LD50 untuk Cypermethrin pada berbagai hewan uji.

Hewan Uji LD50 (mg/kg)

Tikus besar (rat) 251
Tikus 82
Hamster siria 400
Hamster cina 203
Anak sapi 500
Anak babi 142 – 284
kambing >600
283 - 586

Sumber : Shaw & Chadwick, 1998

 Soal Latihan

Hasil uji toksisitas limbah tahu pada ikan nila didapatkan hasil sebagai berikut

Konsentrasi Jumlah
JL. biota mati
Limbah tahu (%) biota uji
0 20  1
10 20  2
20 20  3
30 20  5
40  20  7
 50  20  8
60 20 10

Berdasarkan data tersebut tentukan LD50 limbah tahu terhadap ikan nila !