Xanthomonas campetris sebagai penghasil Polisakarida (Xanthan Gum)

1. PEMBAHASAN Xasnthomonas Campetris Xanthomonas adalah bakteri yang berbentuk batang dengan kedua ujung membulat, berukuran pendek, dengan panjang berkisar antara 0,7-2.0 m dan lebar antara 0,4-0,7 m, memiliki satu flagel, tanpa spora, Ciri khas genus Xanthomonas adalah koloninya berlendir, dan menghasilkan pigmen berwarna kuning yang merupakan pigmen

xanthomonadin (Bradbury, 1984; Liu et al., 2006). Bentuk koloni pada medium biakan adalah bulat, cembung dan berdiameter 1-3 mm (Ou, 1985). Xanthomonas adalah genus dari keluarga PseudomonaceaeSemua organisme dalam genus ini patogen bagi tanaman. Para pathovars Xanthomonas menginfeksi banyak tanaman termasuk beberapa tanaman pertanian, misalnya kol, alfalfa, dan kacang. Bakteri ini

menyebabkan daun sayuran membusuk (yaitu warna hitam membusuk di kembang kol). Mikroorganismenya adalah chemiorganotrophic dan obligat aerob dengan tipe

pernapasan dimana metabolisme yang membutuhkan oksigen sebagai terminal elektron akseptor. Bakteri tidak dapat denitrify dan itu adalah katalase-positif dan oxidasenegative. Koloni ini biasanya berwarna kuning, halus, dan lengket. Xanthomonas sp.mampu

mengoksidasi glukosa dari jalur Entner-Doudoroff terutama digunakan untuk katabolisme glukosa(jalur fosfat pentosa juga terjadi tetapi hanya menggunakan 8 16% dari total glukosa yangdikonsumsi), baik asam trikarboksilat dan siklus glioksilat yang hadir. Struktur sel mirip dengan yang dari sel Gram-negatif pada umumnya. Pigmen kuning terdapat di semua spesies Xanthomonas tetapi warna kuning ini mungkin akan tidak akan ada ketikadegradasi strain terjadi. X.campestris adalah mikroorganisme yang paling umum digunakan padaindustri xanthan. X. campestris tumbuh pada media laboratorium standar dan beberapa variasi shear telah diamati baik dalam continue batch dan batch cultur

klasifikasi Menurut EPPO (2007) klasifikasi Xanthomonas adalah: Kingdom : Procaryotae Divisi : Gracilicutes

Kelas Famili Genus

: Proteobacteria : Pseudomonadaceae : Xanthomonas Umumnya genus Xanthomonas merupakan bakteri patogen. Pada awal tahun

1990,Xanthomonas terdiri dari 6 spesies yaitu: X. fragariae, X. populi, X. oryzae, X. albilineans, X. axonopodis dan X. campestris. Kemudian setelah setelah diklasifikasi ulang, terdiri dari 20 spesies yaitu: X. fragariae, X. populi, X. oryzae, X. albilineans, X. sacchari, X. vesicatoria, X. axonopodis, X. vasicola, X. codiaei, X. arboricola, X. hortorum, X. translucens, X. bromi, X. campestris, X. cassavae, X. cucurbitae, X. pisi, X. melonis, X. theicola, X. hyacinthi (Vauterin et al, 2000). Sebagai tambahan, kebanyakan dari anggota Xanthomonas digolongkan sampai dengan pathovar. Untuk Xanthomonas campestris berisi lebih dari 140 pathovar. Umumnya pengelompokan pathovar didasarkan pada jenis inang. Adapun spesies yang banyak dikenal sekarang adalah: X. axonopodis pv. citri, X. campestris pv. vesicatoria, X.

campestris pv.campestris, X. oryzae pv. Oryzae

Fungsi Xantomonas campetris Salah satu fungsi dari bakteri Xantomonas Campetris berfungsi sebagai penghasil polisakarida. Dimana hasil fermentasi nya akan menghasilkan poloisakarida yaitu Xanthan Gum. Suatu jenis polisakarida yang berfungsi sebagai penyetabil.

Xanthan Gum Xanthan Gum merupakan hasil fermentasi dari Xantromonas campetris yang merupakan rangkaian polisakarida yang tersusun atas rantai panjang tiga macam gula sederhana (heteropolimer).

Xanthan Gum secara komersil berbentuk bubuk dan berwarna krem,mengandung air sekitar11% dan setelah diabukan sekitar 9% dari residu xanthan tersebut merupakan residu anorganik. Gum xanthan memiliki viskositas yang cukup tinggi pada konsentrasi 1,0% dibandingkan denganemulsifier atau stabilizer lainnya pada konsentrasi yang sama. Larutan xanthan 1,0% memberikanviskositas sekitar 8001000 cP . salah satu Xanthan Gum dapat

Pembuatan Xanthan Gum

Bahan Baku Untuk Pembuatan Gum Xanthan Untuk menghasilkan gum xanthan, X. Campestris membutuhkan beberapa

nutrisi,termasuk zat gizi mikro (misalnya kalium, besi, dan garam kalsium) dan makronutrients sepertikarbon dan nitrogen. D-glukosa, sukrosa dan beberapa bentuk karbohidrat yang dapat digunakansebagai bahan baku substrat dan tergantung dari tingkat hasil yang diinginkan. Konsentrasisumber karbon mempengaruhi hasil xanthan; konsentrasi 2 4% lebih disukai. Konsentrasisubstrat yang tinggi akan menghambat pertumbuhan.

Beberapa bahan dasar yang mungkin dapat digunakan yang berasal dari limbah pengolahan hasil pertanian adalah molase, onggok,pulp kopi dan coklat.Glukosa merupakan bahan baku dalam fermentasi gum xanthan oleh bakteri Xanthomonas campestris. Kadar glukosa dan konsentrasi kultur bakteri Xanthomonas

campestris merupakan 2 faktor yang berpengaruh terhadap gum xanthan yang dihasilkan. Untukmemfermentasi bahan baku tersebut agar menghasilkan gum xanthan maka diperlukan bakteri Xanthomonas campestris. Bakteri Xanthomonas campestris dapat diisolasi dari berbagai varietastanaman kubis yang banyak terdapat di Indonesia. Bakteri Xanthomonas campestris diperbanyakpada media tabung agar miring NA sebagai stok inokulum (media cair dicampur bahanmakanannya atau nutrisi) sedangkan untuk memperbanyak dan menumbuhkan bakteri dilakukandengan cara 1-2 ose bakteri dari media NA ditumbuhkan dalam 60 ml media cair Nutrient Broth.Nitrogen, nutrisi esensial, dapat diberikan baik sebagai senyawa organik dan atau sebagaimolekul anorganik. Protein dan nitrogen inorganik adalah sumber nutrien tambahan yang sangatpenting untuk efisiensi produksi gum xanthan, fosfat dan magnesium juga dibutuhkan sertamineral. Penelitian lebih lanjut menunjukkan bahwa

ketika karbon dan fosfor membatasi nutrisixanthan gum, produksinya justru meningkat. Sumber karbon yang terbaik yang ditampilkan untukgula (glukosa dan sukrosa) dan sumber nitrogen terbaik adalah glutamat pada konsentrasi 15 mM(konsentrasi yang lebih tinggi menghambat pertumbuhan).

Biosintesis Xanthan Gum Proses biosintesis gum xanthan dapat dijelaskan sebagai berikut : Substrat akanberdifusi dan masuk kedalam sel dan terjadi perisitiwa fosporilasi. Substrat akan digunakan untukproses katabolik sebagai penghasil energi dan proses anabolik. Selanjutnya, substrat yangterfosporilasi akan dikonversi menjadi gula-gula nukleotida (dengan pertolongan enzim UDP-glukosa)fosporilase. Nukleotidanulkleotida inilah yang menjadi pemacu atau precursorpembentukan polimer. Penelitian in-vitro pada pembentukan gum xanthan oleh Xanthomonascampestris memperlihatkan bahwa UDP-glukosa, GDP-manosa,dan UDP-asam

glukoronatmemberikan sebagian gula kepada akseptor lemak untuk pembentukan pentasakrida-p-p lipid.Tahap selanjutnya adalah pembentukan residu piruvat dan asetat melalui transfer dari fosfoenol-piruvat kepada pentasakarida-p-p-lipid. Tahap ini merupakan tahap yang kritis,kegagalan tahapini menyebabkan polimer tidak mempunyai residu piruvat

Produksi xanthan gum Pada skala komersial, gum xanthan diproduksi melalui fermentasi aerobik dengan menggunakan isopropil alkohol. Kemudian dilanjutkan dengan pengeringan dan penggilingan. Kondisi optimal dalam proses produksi gum memerlukan aerasi tinggi dan suhu konstan. Olehkarena itu hasil fermentasi dengan cara tersebut jauh lebih banyak dibandingkan produksi secaraalami pada tanaman kubis. Kultur

Xanthomonas campestris murni, setelah diberikaninokulum(media cair dicampurkan dengan nutriennya) untuk built up. Kemudian ditumbuhkanpada tempat pembiakan dan kemudian digunakan fermentor untuk melakukan pembiakanselanjutnya. Media yang sama terdiri dari karbohidrat dan beberapa nutrien lain.Nutrien tambahan yang dibutuhkan oleh mikroorganisme adalah ion ammonium, bufferfosfat, ion magnesium dan sedikit unsur lain. Penurunan pH broth (kaldu) selama fermentasiterjadi karena pembentukan asam organik sebagai produk tambahan dan sebagai bahan darimolekul polisakarida. Jika pH turun dibawah titik kritis kira-kira 5, maka produksi gum akan turundengan signifikan atau berhenti sama sekali. Oleh karena itu dalam setiap fermentasi beberapa jenis bakteri memerlukan penambahan bahan alkali yang sangat penting untuk mempertahankan pH pada selang 6 sampai 7,5 dan suhu fermentasi yang sesuai sekitar 28C sedangkan glukosa,sukrosa dan pati semuanya diperkiraan ekuivalen dengan efisiensi produksi polisakarida. Padasaat proses akan berakhir, broth fermentasi perlu di pasteurifikasikan pada suhu yang mendekatititik didih, gum xanthan diperoleh kembali melalui pengendapan dengan isopropil alkohol.Polisakarida yang diperoleh kembali melalui pengendapan dengan isopropil alkohol. Polisakaridayang diperoleh dikeringkan dan digiling menurut penyebaran ukuran partikel. Kemudian dikemas dan siap dipasarkan. Kondisi Operasional Yang Dibutuhkan Inocullum Build-up Proses terbentuknya inokulum bertujuan untuk meningkatkan konsentrasi sel tetapi meminimalkan produksi gum xanthan karena disekitar sel menghambat transportasi massa nutrisi dan memperpanjang fase lag dari pertumbuhan. Mikroorganisme tersebut dipindahkan dari medium padat kultur kompleks (biasanya YM agar-agar) untuk volume kecil(5 atau 7 mL) dari medium cair kompleks (biasanya YM), tetapi inkubasi hanya terbatassampai 7 jam untuk

mencegah produksi yang signifikan dari xanthan. Volume inokulumuntuk fermentor produksi adalah antara 5 dan 10% dari volume kaldu total dalam bejana. Suhu Suhu yang digunakan untuk kisaran produksi xantan adalah 25-34 C,

tetapikeberadaan kultur pada suhu 28 C dan 30 C adalah cukup umum. Peneliti Cadmus dkkmenyimpulkan bahwa kenaikan temperatur kultur akan meningkatkan produksi xanthantetapi menurunkan konten piruvatnya. Untuk mendapatkan hasil xanthan tinggi, suhu antara31 dan 33 C dianjurkan, tapi kultur pada suhu 27 31 C akan lebih baik pada pencapaiankandungan piruvat yang tinggi dalam gum. Selain itu, optimal suhu untuk produksi xanthantergantung pada media produksi yang digunakan. pH Sebagian besar penulis setuju bahwa pH netral adalah nilai optimum untukpertumbuhan X. Campestris. Selama produksi xanthan, pH menurun dari pH netral terhadapnilai-nilai hampir 5 karena gugus asam hadir dalam xanthan. Beberapa penulis berpendapatbahwa kontrol pH tidak diperlukan untuk proses ini tetapi yang lain merekomendasikankontrol pada pH netral menggunakan alkali seperti KOH, NaOH, dan NH4 OH .Sebuah studitentang pengaruh pH menunjukkan bahwa kontrol pH tidak meningkatkan sel pertumbuhan,tetapi tidak berpengaruh pada xanthan produksi. Ketika pH dikendalikan, produksi xanthanberhenti setelah fase pertumbuhan stasioner dicapai dan ini efek independen dari alkalidigunakan untuk mengontrol pH. Bila pH tidak terkontrol, gusi produksi terus selama fasestasioner pertumbuhan.

Tranfer Massa Berbagai jenis bioreaktor telah digunakan untuk memproduksi gum xanthan , tetapitangki berpengaduk sparged digunakan paling sering. Dalam reaktor berpengaduk, tingkatlaju massa oksigen transfer dipengaruhi oleh laju aliran udara dan kecepatan pengaduk.Ketika reaktor berpengaduk digunakan, laju alir udara umumnya dipertahankan pada nilaikonstan, biasanya 1 L / L min. Sebaliknya, kecepatan pengadukan yang digunakan bervariasipada rentang yang luas. Berikut proses produksi dari xanthan gum

Fungsi xanthan gum menghasilkan peningkatan dalam viskositas cairan dengan menambahkan jumlah yang sangatkecil Gum xanthan memiliki sifat pseudoplasticity yang suatu produk dapat ditarik atau atau bahkan berarti bahwa

direnggangkan, pengunyahan,

akibat dari pencampuran, pengadukan

sehingga produk akan tampak menipis. Tetapi setelah gaya tarik dilepaskan, produk akan menebal kembali (kembali normal). Menjaga kestabilan makanan baik dalam kondisi membeku/mencair Agen penstabil emulsi yang efektif. Dalam makanan, pada salad dressing dan saus membantu untuk mencegah pemisahan minyak

dengan menstabilkan emulsi, meskipun bukan merupakan pengemulsi. Dan mampu menciptakan tekstur yang lembut pada es krim, guar gum, dan locust bean gum.

 membantu memperkuat partikel padat,seperti rempah-rempah sebagai pengikat dan menjaga produk homogen sebagai pengental lumpur dalam industri minyak Dalam kosmetik, gum xanthan digunakan untuk mempersiapkan gel air, biasanya berhubungan dengan bentonite clays. Gum ini juga digunakan dalam emulsi minyak dalam air untuk membantu menstabilkan tetesan minyak terhadap koalesensi.

2. KESIMPULAN Xantomonas campetris adalah suatu mikroorganisme yang berperan penting dalam produksi polisakarida yaitu xanthan gum. Dimana dalam prosesnya menggunakan proses fermentasi. Kadar Glukosa dan konsentrasi kultur bakteri Xanthomonas campetris merupakan dua hal yang paling berpengaruh dalam pproduksi Xanthan gum. Xantan gum sendiri dapat berfungsi sebagai penyetabil beberapa produk makanan, obat-obatan, pakaian, dll,

DAFTAR PUSTAKA

Alfauzia. 2012.

Itp

Xanthan Gum.

http://alfauzia.blogspot.com/2012/06/itp-xanthan-

gum.html. Diaskes tanggal 29 Desember 2012 12.40 Anonim. 2012. Bacteria Genomes.-Xantromonas campetris

http://www.ebi.ac.uk/2can/genomes/bacteria/Xanthomonas_campestris.html diakses tanggal 29 desember 2012 12.30 repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/17745/4/Chapter%20II.pdf Diakses tanggal 27 Desember 2012 19.00 Sufi. 2012. Gum Xanthan. http://www.scribd.com/doc/94499644/Gum-Xanthan. Diakses tanggal 27 Desember 2012 19.15 Suhendro, dkk. Xanthan Gum. JYQ1/Xanthan%20Gum.pdf?nmid=78945912. Diakses pada tanggal 27 Desember 2012 19.20

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa Karena dengan anugerah, petunjuk dan kekuatan yang telah diberikan, penulis dapat menyelesaikan tugas akhir mikrobiologi yang berjudul Xanthomonas campetris sebagai penghasil Polisakarida (Xanthan Gum) Makalah ini tidak mungkin terwujud tanpa bantuan dari beberapa pihak, oleh karena itu pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian tulisan ini, yaitu kepada Ibu Tri Handayani selaku dosen mikrobiologi yang telah memberikan arahan dalam penulisan ini, kepada orang tua kami yang telah memberikan dukungan dan doa serta kepada semua rekan-rekan yang telah membantu dalam penyelesaian tulisan ini. Penulis menyadari bahwa dalam penulisan makalah ini masih banyak kekurangan. Oleh karena itu, penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun. Semoga dengan selesainya karya tulis ini dapat bermanfaat bagi pembaca dan teman-teman.

Jakarta, 30 Desember 2012

Penulis

TUGAS AKHIR MIKROBIOLOGI Xanthomonas campetris sebagai penghasil Polisakarida (Xanthan Gum)

Mata Kuliah Mikrobiologi Oleh : Dea Apriyani (3325102421)

JURUSAN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS NEGERI JAKARTA JAKARTA 2013