Pengembangan dan Validasi

Metode Analisis B
ADE ANDINI
N111 13 059

Title
DEVELOPMENT AND VALIDATION OF
SPECTROSCOPIC METHOD FOR
SIMULTANEOUS ESTIMATION OF SALBUTAMOL
SULPHATE, AMBROXOL HYDROCHLORIDE AND
CETIRIZINE HYDROCHLORIDE IN COMBINED
PHARMACEUTICAL TABLET FORMULATION: A
NOVEL TECHNIQUE FOR IN-VITRO
DISSOLUTION STUDIES

PENDAHULUAN

Salbutamol sulfat,
Pemerian : bubuk putih, kristal atau hampir putih
Kelarutan : Sedikit larut dalam etanol (95%) dan
dalam eter; sangat sedikit larut dalam
diklorometana
Fungsi : menghilangkan bronkospasme dalam
kondisi seperti asma dan PPOK

PENDAHULUAN

Ambroxol hydrochloride,
Pemerian : putih atau kekuningan bubuk kristal
Kelarutan : sedikit larut dalam air; larut dalam
metanol; praktis tidak larut dalam metilen
klorida
Fungsi : ampuh sebagai mucolytic & mucokinetic,
mampu merangsang sekresi bronkial

PENDAHULUAN

Cetirizine hydrochloride,
Pemerian : Warnanya putih atau bubuk hampir
putih
Kelarutan : bebas larut dalam air, praktis tidak
larut dalam aseton dan metilen klorida
Fungsi : menghambat pelepasan histamin dan
mediator sitotoksik dari trombosit

BAHAN DAN METODE

Aparatur dan Instrumen

- Spectrophotometer (UV 1800 Shimadzu,

Jepang)
- rentang panjang gelombang 200-400 nm
- sel kuarsa 1 cm dan lebar celah 1,0 nm
- setiap prosedur yang direndam semalam
dalam campuran asam kromat dan asam
sulfat dibilas secara menyeluruh dengan air
suling ganda dan dikeringkan dalam oven
udara panas.

Bahan dan reagen

Sampel obat murni dari Salbutamol sulfat,

ambroxol Hidroklorida dan Cetirizine hidroklorida
Semua bahan kimia lainnya dan reagen yang
digunakan adalah dari kelas analitis.
Pemilihan pelarut umum

Dapar fosfat pH 6,8 terpilih sebagai pelarut

umum untuk mengembangkan karakteristik
spektral obat. Pemilihan itu dilakukan setelah
menilai kelarutan obat dalam pelarut yang
berbeda.

Persiapan larutan stok standar

Larutan stok standar Salbutamol sulfat, ambroxol

Hidroklorida
dan
Cetirizine
Hydrochloride
disiapkan dengan melarutkan masing-masing 10
mg
sampel
secara
terpisah
di
10 ml pH 6,8 larutan buffer fosfat dan disonikasi
selama 15 menit di kamar mandi sonikator dan
disaring
melalui
kertas
saring
whatman
untuk mendapatkan pengenceran 1 mg / ml 1 i. e.
1000 ug / ml.
Penentuan penyerapan () Maksimal

Dideteksi dengan panjang gelombang

kisaran 200-400 nm.

Plot kalibrasi untuk salbutamol sulfat,

ambroxol hydrochloride dan cetirizine

hydrochloride
Plot kalibrasi untuk Salbutamol sulfat,
ambroxol
Hidroklorida
dan
Cetirizine
hidroklorida menggunakan pH6,8 larutan
buffer fosfat pada penyerapan masingmasing obat yaitu menemukan kisaran
linearitas
obat
di
maksimal
pada
penyerapan masing-masing.

Pengembangan persamaan simultan

Absorbansi diukur pada semua panjang

gelombang yang dipilih dan absorptivitas
selama tiga obat ditentukan di semua tiga
panjang gelombang. Konsentrasi obat dalam
larutan sampel ditentukan dengan
menggunakan rumus berikut:

METODE VALIDASI
Linearitas

Linearitas
pengukuran
dievaluasi
dengan
menganalisis
konsentrasi
yang
berbeda
dari
standar
Salbutamol
sulfat,
ambroxol
Hidroklorida
dan
Cetirizine
Hydrochloride.

Presisi

Repeatability
Ketepatan instrumen diperiksa oleh scanning
berulang dan pengukuran absorbansi larutan (n =
6) untuk Salbutamol sulfat, ambroxol Hidroklorida
dan Cetirizine Hydrochloride (10 ug / ml untuk
setiap obat) tanpa mengubah parameter metode
spektrofotometri yang diusulkan.
Intermediate precision
Presisi metode ditentukan dalam hal intraday dan
variasi interday (% RSD). Presisi intraday (% RSD)
dinilai dengan menganalisis solusi obat standar
dalam rentang kalibrasi, tiga kali pada hari yang
sama. Presisi interday (% RSD) dinilai dengan
menganalisis solusi obat dalam rentang kalibrasi
pada tiga hari yang berbeda.

Limit
of
detection
quantitation .

and

Limit

of

Batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi

(LOQ)
secara
terpisah
ditentukan
berdasarkan standar deviasi terhadap y
dan kemiringan kurva kalibrasi dengan
menggunakan persamaan (4) dan (5),
masing-masing

Dimana, : standar deviasi dari y-intercept

dan S: kemiringan kurva kalibrasi.

Studi Recovery (Akurasi)

Dalam rangka untuk memeriksa akurasi,
reproduktifitas dan ketepatan metode yang
diusulkan, studi pemulihan dilakukan dengan
mengambil larutan campuran standar SAL,
AMB dan CET dan absorbansi ditentukan di
276 nm, 244 nm dan 230 nm masing-masing.

Assay (Analysis) of Drug

Sepuluh tablet (200 mg) bubuk dicampurkan
menggunakan mortir dengan bantuan alu.
Dimana setara dengan 2 mg Salbutamol sulfat,
7,5 mg ambroxol Hidroklorida dan 5 mg
Cetirizine Hidroklorida ditimbang dan dilarutkan
dalam 100 ml pH 6,8 larutan buffer fosfat.
Larutan disonikasi selama 15 menit, disaring
melalui kertas saring Whatman, diencerkan
dengan pH 6,8 penyangga fosfat dan konten
obat dianalisis dengan metode persamaan
simultan
dengan
menggunakan
spektrofotometer sinar UV ganda di 276 nm,
244 nm dan 230 nm masing-masing.

Hasil dan pembahasan

Linerity
Linearitas diamati pada rentang
konsentrasi 10-100 ug / mL untuk
Salbutamol sulfat, 2-18 mg / ml untuk
ambroxol Hidroklorida dan 2-20 mg / ml
untuk Cetirizine hidroklorida pada ketiga
panjang gelombang, yang divalidasi
dengan metode kuadrat terkecil. Koefisien
korelasi (R) ditemukan menjadi 0,999 untuk
Salbutamol sulfat, ambroxol Hidroklorida
dan Cetirizine Hydrochloride.

LOD and LOQ

LOD dan LOQ obat dihitung sesuai
pedoman ICH. LOD nilai untuk SAL, AMB, dan
CET yang ditemukan 0,523 mg / mL, 0.450
ug / mL, dan 0,457 mg / mL, masing-masing.
Nilai LOQ untuk SAL, AMB, dan CET yang
ditemukan 1,372 mg / mL, 1,424 mg / mL, dan
1,386 ug / mL. Data ini menunjukkan bahwa
yang diusulkan Metode ini tepat dan sensitif
untuk penentuan SAL, AMB, dan CET.

Repeatability
Penelitian presisi Instrumental dilakukan
oleh studi pengulangan. Nilai-nilai% RSD
untuk SAL, AMB, dan CET yang ditemukan
menjadi 1,6609, 1,9596, dan 1,8547 masingmasing diberikan dalam tabel 5. Rendah
standar deviasi relatif (<2) menunjukkan
bahwa metode yang diusulkan adalah
berulang.

Intermediate precision (Reproducibility)

Studi presisi dilakukan untuk mempelajari intrahari dan antar hari variasi tanggapan. Intraday
dan interday presisi ditentukan, hasil yang
diberikan dalam tabel 6.
Recovery (Akurasi) studi
Jumlah yang telah diketahui Salbutamol sulfat (20,
40, dan 60 mg / ml), Ambroxol Hidroklorida (4, 8,
dan 12 mg / ml) dan Cetirizine Hidroklorida (6, 10
dan 14 mg / ml) ditambahkan ke dalam larutan
sampel pra-diukur, dan jumlah Salbutamol sulfat,
ambroxol hidroklorida dan Cetirizine hidroklorida
diperkirakan dengan metode yang diusulkan.

Assay of Drugs
Berdasarkan hasil di atas diperoleh, dapat
disimpulkan bahwa metode spektroskopi yang
diusulkan untuk estimasi simultan Salbutamol sulfat,
ambroxol Hidroklorida dan Cetirizine Hidroklorida
cepat, ekonomis, akurat, tepat dan direproduksi.
Utilitas dari metode yang dikembangkan telah
ditunjukkan oleh analisis formulasi tablet dosis
dikombinasikan.

Oleh karena itu, metode yang diusulkan dapat

digunakan untuk estimasi kuantitatif Salbutamol
sulfat,
ambroxol
Hidroklorida
dan
Cetirizine
Hidroklorida dalam bentuk sediaan tablet gabungan.
Metode persamaan simultan dapat digunakan untuk
melakukan studi disolusi in-vitro di formulasi tablet
gabungan dari obat ini.

TERIMA KASIH