BIOKIMIA PERAIRAN
TAHUN 2016
Nur Silmi Nafisah, 230110150125
Kelas B, Kelompok 8
ABSTRAK
Hidrolisis Protein Enzimatis adalah proses pemecahan polimer protein menjadi
monomer-monomer penyusunnya dengan bantuan enzim. Enzim protease adalah sekelompok
enzim katalis yang berfungsi untuk menghidrolisis atau merusak protein dengan cara
memutus ikatan peptida yang menyebabkan terjadinya perubahan tekstur. Praktikum
Hidrolisis Protein Enzimatis ini bertujuan untuk mengetahui penghidrolisisan protein secara
enzimatis dengan ekstrak nanas dan pepaya, serta memahami pemutusan ikatan peptida
dengan enzim protease. Hasil pengamatan yang diperoleh pada praktikum ini setelah susu
dicampur dengan filtrat (ekstrak nanas muda dan tua) terjadi perubahan warna, tekstur, pH,
dan bau. Dari kedua sampel tersebut, sampel yang ditambah ekstrak nanas muda memiliki
dua lapisan yang jelas yaitu lapisan transparan dan endapan dan teksturnya menjadi lebih cair.
Sedangakan pada sampel yang dicampur ekstrak nanas tua tidak banyak perubahan. Hal ini
disebabkan nanas muda mengandung enzim protease dua kali lipat lebih besar dibandingkan
dengan nanas tua.
Kata Kunci : Hidrolisis, Protein, Enzim, Nanas
ABSTRACT
Protein Enzymatic Hydrolysis is the process of solving the protein polymer into its
constituent monomers with the aid of enzymes. Proteases are a family of enzymes to
hydrolyze the catalyst functioning or damaging proteins by way of breaking the peptide bond
which causes changes in texture. Protein Enzymatic Hydrolysis Practicum aims to determine
penghidrolisisan protein enzymatically with extracts of pineapple and papaya, as well as
understand the termination of peptide bonds with the enzyme protease. The observations
obtained in this lab after the milk is mixed with the filtrate (young and old pineapple extract)
change color, texture, pH, and smell. Of the two samples, sample plus young pineapple
extract had two clear layer that is transparent and sediment layers and texture become more
liquid. While the sample was mixed on an old pineapple extract is not much change. This is
due to the young pineapple contains the enzyme protease two-fold greater than the old
pineapple.
Keywords : Hydrolysis, Proteins, Enzymes, Pineapple
PENDAHULUAN
Protein adalah senyawa organic kompleks yang tersusun atas unsur karbon ,
hidrogen (H), Oksigen (O), nitrogen (N), dan kadang-kadang mengandung zat belerang (S),
dan Posfor (P). Protein merupakan makromolekul yang terdiri dari suatu atau lebih polimer.
Setiap polimer tersusun atas monoer yang disebut asam amino. Masing-masing asam amino
mengandung satu asam karbon (C) yang mengikat satu atom hydrogen (H). Satu gugus amin
(NH2), satu gugus karboksil (-COOH) dan lain-lain (Gugus R). Berbagai jenis asam amino
membentuk rantai panjang melalui ikatan peptide. Ikatan peptida adalah ikatan antara gugus
karboksil satu amino dengan gugus amin dari asam amino lain yang ada di sampingnya.
Asam amino yang membentuk rantai panjang ini disebut protein (polipeptida).
Proses hidrolisis adalah proses pemecahan suatu molekul menjadi senyawa-senyawa
yang lebih sederhana dengan bantuan molekul air. Hidrolisis protein adalah proses pecahnya
atau terputusnya ikatan peptide dari protein menjadi molekul lebih sederhana. Hidrolisis
peptida akan menyebabkan beberapa perubahan pada protein, yaitu meningkatkan kelarutan
karena bertambahnya kandungan NH3+ dan COO- dan berkurangnya berat molekul protein
atau polipeptida, dan rusaknya struktur globular protein.
lebih murah, dan menghasilkan komposisi asam amino tertentu terutama peptida rantai
pendek (dipeptida dan tripeptida) yang mudah diabsorpsi tubuh.
Enzim adalah biokatalisator organik yang di terdapat di dalam sitoplasma, terdiri atas
protein atau suatu senyawa yang berkaitan dengan protein. Enzim mempunyai dua fungsi
pokok yaitu mempercepat atau memperlambat reaksi kimia dan mengatur sejumlah reaksi
yang berbeda-beda dalam waktu yang sama. Enzim tersusun atas dua bagian. Bagian pertama
adalah apoenzim yaitu sisi akrif enzim dan koenzim yaitu bagian enzim yang tidak aktif.
Apabila enzim dipisahkan satu sama lainnya menyebabkan enzim tidak aktif. Namun
keduanya dapat digabung menjadi satu yang disebut holoenzim.
Enzim yang terdapat di nanas yaitu enzim bromealin. Enzim bromelin yaitu suatu
enzim proteolitik yang dapat mengkatalisis reaksi hidrolisis dari protein. Sumber enzim
bromelin terbanyak terdapat pada buah nanas. Nanas merupakan buah yang dapat diperoleh
di seluruh Indonesia dan dapat dipanen sepanjang tahun. Umumnya limbah nanas yang
berupa batang, daun, kulit, dan bonggol belum dimanfaatkan secara optimal. Padahal telah
diketahui bahwa daging, batang, dan bonggol nanas mengandung enzim bromelin.
Enzim yang terdapat di pepaya yaitu enzim papain. Enzim Papain merupakan enzim
protease yang terkandung dalam getah papaya, baik dalam buah, batang maupun daunnya.
Sebagai enzim yang berkemampuan sebagai memecahkan molekul protein, dewasa ini papain
menjadi suatu produk yang sangat bermanfaat bagi kehidupan manusia, baik di kehidupan
rumah tangga maupun industri. Enzim Papain digunakan dalam industri pengolahan daging.
Daging dari hewan tua pun dapat menjadi lunak jika diberi Enzim papain. Enzim papain juga
digunakan sebagai bahan penghancur sisa atau buangan hasil industri pengalengan ikan
menjadi bubur ikan atau konsentrat protein hewani.
Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh enzim yang terkandung dalam
ekstrak pepaya dan nanas dalam proses hidrolisis protein. Protein dapat dihidrolisis dengan
bantuan enzim protease. Fungsi dari enzim protease tersebut yaitu untuk memutus ikatan
peptida yang menyebabkan terjadinya perubahan tekstur.
METODOLOGI
Praktikum dilaksanakan pada Hari Senin, 16 Oktober pukul 10.00 12.00 WIB di
Laboratorium Avertebrata Air, Gedung 1 Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas
Padjadjaran.
Alat-alat yang digunakan pada praktikum hidrolisis protein enzimatis antara lain:
Cawan petri digunakan untuk tempat atau wadah sampel; Pisau digunakan untuk memotong
Sampel
Filtrat
pH
pH
Pengamatan
Pengamatan
awal
akhir
Awal
Akhir
Terdapat dua
lapisan, yaitu
Nanas
muda
endapan, cair,
warna bening.
Susu
lebih cair.
Terdapat
substrat namun
bercampur,
Nanas
warna
endapan, cair,
Tua
5
kekuningan,
lebih kental, bau
dominan aroma
nanas
Sampel
Filtrat
pH
pH
awal
akhir
Pepaya
4,5
Muda
1
Tempe
7
Pepaya
Tua
2
Tempe
Nanas
Muda
Nanas
Pengamatan
Pengamatan
Awal
Akhir
Tekstur keras, agak
pucat,
bau khas tempe, tekstur
warna
lunak,
coklat aroma
bau
dan putih.
tempe
Tekstur keras, pucat,
tekstur
lunak,
warna
coklat aroma
bau
dan putih
pepaya
Tekstur keras, Memutih, agak
7
4,5
5
warna
coklat lumat,
bau
dan putih
bercampur
Tekstur keras, Warna
masih
warna
Tua
dan putih
Keras,
Pepaya
3
Daging
Ikan
Muda
Pepaya
Muda
Daging
Ikan
Nanas
Tua
merahan,
Muda
5
Telur
10
Pepaya
merahan,
Tua
Muda
6
Telur
Susu
amis
Pepaya
Muda
Pepaya
merah
pucat
putih Putih,
lembek,
endapan,
amis
bau
samar-samar
putih Warna oranye,
khas
papaya,
filtrat
tidak bersatu
putih Ada dua lapisan
warna
amis
pudar
kuning
dan endapan
putih Bau nanas,
bau warna
sedikit
Warna
Tua
7
Nanas
kuning
Warna
Nanas
keras,
putih Warna
Kental,
6
sedikit
amis
merah Sedikit
kemerahamis
Kental,
Pepaya
bercampur
merah Melembut,
kemerahamis
Keras,
Nanas
tekstur
7
Tua
coklat coklat,
warna
kuning pekat.
putih Warna
putih,
endapan,
endapan, cair
Warna
putih Tidak
bersatu,
tidak
ada
endapan, cair
Praktikum kali ini mengenai hidrolisis protein enzimatis dengan menggunakan ekstrak
buah pepaya dan buah nanas. Sampel yang digunakan untuk dihidrolisis adalah Tempe,
daging ikan, telur, dan susu. Kelompok 1 dan 2 menggunakan sampel tempe, kelompok 3 dan
4 menggunakan sampel daging ikan, kelompok 5 dan 6 menggunakan sampel telur, dan
kelompok 7 dan 8 menggunakan sampel susu. Setiap kelompok ganjil menambahkan ekstrak
pepaya muda dan pepaya tua pada sampel yang akan diuji, sedangkan kelompok genap
menambahkan ekstrak nanas muda dan nanas tua pada sampel yang akan diuji. Penggunaan
ekstrak buah tua dan muda dimaksudkan agar praktikan mengetahui enzim protease yang
berasal dari mana yang lebih cepat bereaksi.
Sampel yang digunakan oleh kelompok 8 adalah susu yang filtratnya adalah ekstrak
nanas muda dan nanas tua. Sebelum ditambahkan filtrat, sampel terlebih dahulu diukur
sebanyak 5 ml menggunakan gelas ukur yang dipipet menggunakan pipet dan dipindahkan ke
tabung reaksi. Pengukuran dilakukan sebanyak dua kali untuk dimasukkan ke tabung reaksi
kedua. Sebelum dicampur dengan filtrat dilakukan pengamatan awal terhadap sampel
tersebut meliputi warna, tekstur, pH dan baunya. pH awal dari sampel susu ini adalah 7.
Setelah itu dilakukan pengukuran yang sama pula untuk filtrat, pemberian filtrat dengan
perbandingan 1:1 yaitu 5 ml ekstrak nanas muda dan 5 ml ekstrak nanas tua dan ditambahkan
ke tabung reaksi yang berisi susu. Setelah ditambahkan, sampel didiamkan selama 30 menit.
Setelah 30 menit, sampel diamati kembali dan diperolehlah hasil yang berbeda dengan
pengamatan awal sebelum sampel dicampur dengan ekstrak, baik nanas muda maupun nanas
tua.
Dalam data tabel hasil pengamatan kelompok 8 di atas, susu yang belum ditambahkan
filtrat ekstrak nanas muda dan nanas tua berwarna putih susu, tidak ada endapan, cair, aroma
khas susu. Namun ketika dicampur filtrat dan didiamkan selama 30 menit mengalami
perubahan warna, tekstur, bau, dan pHnya dan berbeda pula perubahan antara sampel dengan
ekstrak nanas muda dan sampel dengan ekstrak nanas tua. Sampel yang diberikan nanas
muda memiliki dua lapisan, yaitu lapisan endapan berwarna putih dan lapisan cairan warna
bening kekuningan. Bau susu dan nanas pudar atau samar-samar dan teksturnya lebih cair.
Sedangkan pada sampel yang dicampur ekstrak nanas tua menjadi terdapat substrat namun
bercampur, warnanya menjadi kekuningan, teksturnya lebih kental, dan bau dominan aroma
nanas. Perbedaan ini memperlihatkan bahwa sampel yang diberikan ekstrak nanas muda
memiliki perubahan yang lebih berbeda, hal ini dikarenakan enzim protease lebih banyak
terkandung pada ekstrak nanas yang muda dibandingkan yang matang sehingga ekstrak nanas
muda lebih bisa merusak sifat fisik dan kimia dari protein yang terdapat di susu.
Kelompok lain yang menggunakan ekstrak nanas sebagai filtratnya adalah kelompok
2, 4, dan 6. Kelompok 2 menggunakan sampel tempe. Pengamatan awal ketika tempe belum
diberikan filtrat adalah teksturnya masih keras, warnanya coklat dan putih, dan aromanya
khas tempe. Namun ketika dicampur dengan ekstrak nanas muda dan nanas tua mengalami
perubahan yang berbeda. Sampel yang dicampur ekstrak nanas muda perubahan warna yaitu
memutih, teksturnya menjadi agak lumat, dan bau bercampur. Sedangkan sampel yang
diberikan ekstrak nanas tua tidak terjadi perubahan yng signifikan, teksturnya masih keras
dan warnanya masih sama. Kelompok 4 yang menggunakan sampel daging ikan pada
pengamatan awal sebelum sampel diberikan ekstrak nanas teksturnya masih keras, warna
putih kemerah-merahan, bau amis. Setelah dicampur ekstrak dan didiamkan selama 30 menit
perubahan sampel yang diberikan ekstrak nanas muda teksturnya menjadi lumat dan
warnanya pucat, sedangkan yang diberikan ekstrak nanas tua teksturnya masih keras. Begitu
pula pada kelompok 6 yang menggunakan sampel telur, pada pengamatan awal sebelum
diberikan ekstrak nanas warna putih telur, teksturnya kental, dan bau amis. Setelah diberikan
ekstrak nanas dan didiamkan selama 30 menit perubahan yang lebih terlihat pada telur yang
dicampur ekstrak nanas muda yaitu menjadi terdapat dua lapisan dimana terdapat endapan
dan warnanya kekuningan serta baunya masih amis. Sedangkan pada telur yang diberikan
ekstrak nanas tua warnanya masih kuning pekat dan baunya dominan bau nanas.
Dari penjelasan perubahan sifat fisik dari sampel yang diberikan ekstrak nanas muda
dan tua di atas, dapat diketahui bahwa sampel yang diberikan ekstrak nanas muda mengalami
perubahan yang lebih berbeda dari kondisi awalnya yaitu teksturnya menjadi lembek atau
mudah hancur dan warnanya menjadi pudar. Berbeda dengan sampel yang diberikan ekstrak
nanas tua yang tidak begitu banyak mengalami perubahan pada warna, tekstur, dan baunya.
Perubahan ini terjadi akibat kandungan enzim bromelin yang terdapat pada nanas. Bromelin
merupakan enzim yang diisolasi dari sari atau batang buah nanas. Enzim bromelin
merupakan salah satu jenis enzim protease yang mampu menghidrolisis ikatan peptida
protein menjadi molekul yang lebih kecil yaitu asam amino sehingga lebih mudah dicerna
tubuh. Kandungan enzim bromelin pada nanas muda dua kali lebih banyak dibanding nanas
tua karena pada nanas muda daging buahnya masih keras sehingga membutuhkan enzim
bromelin yang lebih banyak untuk melunakkan dagingnya. Hal ini menyebabkan perubahan
yang terjadi pada sampel yang diberikan ekstrak nanas muda lebih cepat dan lebih terlihat
Kelompok yang menggunakan ekstrak papaya sebagai filtratnya adalah kelompok 1,
3, 5, dan 7. Perubahannya tidak jauh berbeda seperti penambahan ekstrak nanas. Kelompok 1
menggunakan sampel tempe. Pengamatan awal sebelum diberikan ekstrak pepaya teksturnya
masih keras dan warnanya masih terang. Setelah ditambahkan filtrat dan didiamkan selama
30 menit, sampel yang diberikan ekstrak papaya muda terdapat perubahan warna dan tekstur
dan baunya masih khas tempe, sedangkan sampel yang diberikan ekstrak papaya tua
teksturnya lebih lunak, pucat, dan baunya dominan bau pepaya. Hal ini dapat diduga karena
belum sempurnanya proses hidrolisis oleh enzim papain pada ekstrak pepaya muda yang
diberikan pada sampel sehingga pada sampel yang diberikan ekstrak pepaya muda tidak
terlihat perubahannya.
Kelompok 3 menggunakan sampel daging ikan. Sebelum diberikan filtrak ekstrak
papaya, teksturnya keras, warna merah sedikit tua, dan bau amis. Setelah dicampur, pada
sampel yang diberikan pepaya muda teksturnya melembut, warnanya menjadi pucat, dan
baunya sedikit amis, sampel yang diberikan ekstrak pepaya tua teksturnya masih sedikit
keras, warnanya masih merah, dan baunya masih amis. Hal ini disebabkan karena pepaya
muda mengandung enzim protease dua kali lipat lebih besar dibandingkan dengan yang tua.
Papain merupakan enzim protease yang terkandung dalam getah papaya baik dalam buah,
batang, dan daunnya. Cara kerja enzim ini dapat dilakukan dengan cara memecahkan molekul
protein melalui kegiatan hidrolisis protein. Enzim ini mula-mula akan merusak
mukopolisakrida dari matriks substansi dasar, kemudian secara cepat menurun serat-serat
tenunan pengikat. Selama proses ini kolagen dan myofibril terhidrolisis. Hal ini
menyebabkan hilangnya ikatan antar serat daging dan pemecahan serat fragmen yang lebih
pendek, sehingga meningkatkan keempukan daging.
Kelompok 5 menggunakan telur sebagai sampelnya, sebelum dicampur ekstrak
pepaya teksturnya kental, warna putih kekuningan, dan baunya amis. Setelah dicampur
ekstrak pepaya dan didiamkan selama 30 menit terjadi perubahan pada sampel. Sampel telur
yang diberikan ekstrak pepaya muda warnanya menjadi kuning muda, terdapat sedikit
endapan, dan baunya menjadi samar. Sampel telur yang diberikan ekstrak pepaya tua menjadi
warna oranye, bau pepaya, dan zat tidak bersatu. Hal ini juga disebabkan karena enzim
papain pada pepaya muda lebih banyak daripada pepaya tua, maka proses pemutusan ikatan
peptida pada protein yang terdapat pada telur lebih cepat pada sampel yang diberikan ekstrak
pepaya muda.
Kelompok 7 menggunakan sampel susu yang diberikan ekstrak ekstrak pepaya. Mulamula sampel susu memiliki warna putih susu, bau khas susu, tidak ada endapan, dan
tekstrurnya cair. Sampel susu yang diberikan ekstrak pepaya muda warnanya masih putih,
terdapat endapan, bau susu. Sampel yang diberikan ekstrak pepaya tua tidak bersatu dengan
filtratnya dan baunya dominan pepaya. Hal ini dapat dikarenakan enzim papain pada ekstrak
pepaya muda lebih banyak sehingga pada sampel susu yang diberi ekstrak pepaya muda
memiliki endapan namun Sedangkan pada sampel yang diberikan ekstrak pepaya tua tidak
terjadi perubahan warna dan kedua cairan tidak bersatu atau masih belum terurai
menunjukkan tidak efektifnya kerja enzim pada ekstrak pepaya tua atau belum sempurnanya
pemutusan atau proses hidrolisis protein pada sampel tersebut.
KESIMPULAN
Proses hidrolisis protein enzimatis adalah proses penguraian protein menjadi ikatan
peptida dengan komponen pembantu enzim. Enzim protease digunakan untuk menghidrolisis
protein. Protein-protein yang terkandung dalam daging ikan, susu, tempe, dan telur akan
terhidrolisis oleh enzim ini. Enzim yang terdapat pada nanas yaitu enzim bromelin dan pada
buah pepaya yaitu enzim papain. Enzim yang terdapat pada ekstrak buah muda akan lebih
cepat bereaksi dalam menghidrolisis protein dibandingkan ekstrak buah yang matang karena
enzim yang terdapat pada ekstrak buah muda dua kali lebih banyak daripada buah yang sudah
tua. Fungsi dari enzim protease tersebut yaitu untuk memutus ikatan peptida yang
menyebabkan terjadinya perubahan tekstur. Hasil dari proses hidrolisis protein ini membuat
tekstur dari makanan menjadi lebih lumat, lembek, lebih cair daripada sebelum dihidrolisis.
Cara kerja enzim ini dapat dilakukan dengan cara memecahkan molekul protein melalui
kegiatan hidrolisis protein. Enzim ini mula-mula akan merusak mukopolisakrida dari matriks
substansi dasar, kemudian secara cepat menurun serat-serat tenunan pengikat. Selama proses
ini kolagen dan myofibril terhidrolisis. Hal ini menyebabkan hilangnya ikatan antar serat
daging dan pemecahan serat fragmen yang lebih pendek, sehingga meningkatkan keempukan
daging.
DAFTAR PUSTAKA
Bintang. Maria. 2010. Biokimia Teknik Penelitian. Jakarta: Erlangga.
Day, R.A. Jr and, A. L. Underwood. 1998. Analisis Kimia Kualitatif. Edisi Revisi
Terjemahan. R.Soendoro dkk. Erlangga: Jakarta.
Aizzatun
(2013).
Enzim
Papain
Dalam
Pepaya.
Dari:
http://aizzatunnikmahsuju.blogspot.com/2013/07/enzim-papain-dalam-pepaya.html
(diakses pada tanggal 23 Oktober 2016, pada pukul 20.30 WIB).
Nurahman,
Parid
(2012).
Hidrolisis
Protein
Enzimatis.
Dari:
http://www.slideshare.net/ariedpirates/laporan-praktikum-hidrolisis-proteinenzimatis (diakses pada tanggal 23 Oktober 2016, pada pukul 20.00 WIB).
Rahman, M Ali. 2013.
Hidrolisis
Protein Enzimatis
Biokimia
Perairan. Dari:
https://www.academia.edu/9544202/HIDROLISIS_PROTEIN_ENZIMATIS_BIOK
IMIA_PERAIRAN (diakses pada tanggal 23 Oktober 2016, pada pukul 09.32 WIB)
Rochima, Emma dkk. 2013. Modul Praktikum Biokimia.Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan Universitas Padjadjaran. Jatinangor : Tidak diterbitkan.
Utami, Dhiah Putri (2010). Skripsi Pengaruh Penambahan Ekstrak Buah Nanas dan Waktu
Pemasakan
yang
Berbeda
Terhadap
Kualitas
Daging
Itik
Afkir.
Dari:
LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Pengamatan Laboratorium Avertebrata Air