ABSTRAK
Hidrolisis protein enzimatis adalah proses pemecahan polimer protein menjadi monomer-
monomer penyusunnya dengan bantuan enzim. Enzim protease adalah sekelompok enzim katalis
yang berfungsi untuk menghidrolisis atau merusak protein dengan cara memutus ikatan peptida
yang menyebabkan terjadinya perubahan tekstur. Praktikum hidrolisis protein enzimatis
dilaksanakan di Laboratorium Ex Sub Bagian Akademik (SBA) Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan Universitas Padjadjaran Rabu 29 Maret 2017 pukul 08.00 WIB sampai 09.40 WIB.
Tujuan dari praktikum ini adalah praktikan mampu melakukan hidrolisis secara enzimatis
dengan menggunakan ekstrak nanas dan pepaya. Prinsip pada praktikum ini adalah pemutusan
ikatan peptide dengan enzim protease. Adapun alat yang digunakan dalam praktikum hidrolisis
protein enzimatis ini adalah cawan petri, blender, pisau, gelas ukur, gelas beaker, timbangan,
tabung reaksi, pH meter, pipet tetes, spatula, label. Sedangkan bahan yang digunakan adalah
susu, telur, daging ikan, tempe, nanas, pepaya, dan akuades. Berdasarkan hasil praktikum dapat
disimpulkan bahwa sampel uji mengalami melunakan tekstur dan penurunan nilai pH.
ABSTRACT
Enzymatic protein hydrolysis is a process of solving the protein polymer into its constituent
monomers with the aid of enzymes. Proteases are a group of enzymes to hydrolyze the catalyst
functioning or damaging proteins by way of breaking the peptide bond which leads to changes in
texture. Practical enzymatic hydrolysis of proteins carried out at the Laboratory Ex Academic
Sub Division (SBA) Faculty of Fisheries and Marine Sciences, University of Padjadjaran
Wednesday, March 29th, 2017 at 08:00 pm until 9:40 pm. The purpose of this lab is praktikan
able to perform enzymatic hydrolysis with an extract of pineapple and papaya. The principle in
this lab is the termination of peptide bond with the protease enzyme. The tools used in the lab
enzymatic hydrolysis of proteins are the petri dishes, blender, knives, measuring cups, glass
beakers, scales, test tubes, pH meter, pipette, spatula, labels. While the materials used are milk,
eggs, meat fish, tempeh, pineapple, papaya, and distilled water. Based on lab results can be
concluded that the test sample experienced a softening of texture and decrease the pH value.
PENDAHULUAN
Protein adalah senyawa organik kompleks yang tersusun atas unsur Karbon(C),
Hidrogen(H), Oksigen(O), Nitrogen(N) dan kadang-kadang mengandung zat Belerang(S), dan
Fosfor(P). Protein merupakan makromolekul yang terdiri dari satu atau lebih polimer.Setiap
Polimer tersusun atas monomer yang disebut asam amino. Masing-masing asam amino
mengandung satu atom Karbon(C) yang mengikat satu atom Hidrogen (H), satu gugus amin
(NH2), satu gugus karboksil(-COOH), dan lain-lain(Gugus R). Berbagai jenis asam amino
membentuk rantai panjang melalui ikatan peptida. Ikatan Peptida adalah ikatan antara gugus
karboksil satu asam amino dengan gugus amin dari asam amino lain yang ada di sampingnya.
Asam amino yang membentuk rantai panjang ini disebut protein (Polipeptida).
Fungsi protein selain berfungsi sebagai zat pembangun dalam tubuh, protein juga berfungsi
sebagai penyokong berbagai aktifitas organ tubuh dan metabolisme. Fungsi protein bagi tubuh,
yaitu: (a) Membantu kerja tubuh dalam menetralkan atau menghancurkan zat-zat asing yang
masuk ke dalam tubuh. (b) Protein merupakan bahan dalam sintesis substansi seperti halnya
hormon, zat antibodi,dan organel sel lainnya. (c) Protein membantu proses pertumbuhan pada
anak-anak dan remaja karena sel-sel tubuh mendapat cukup asupan zat pembangun. (d) Setiap
gram dalam protein dapat menghasilkan 4,1 kalori, yang cocok sebagai sumber energi. (e)
Mengatur metabolisme tubuh. (f) Protein dapat sebagai asupan energi utama untuk yang sedang
diet rendah gula. (g) Menjaga keseimbangan antara asam basa dan keseimbangan cairan dalam
tubuh. Protein berperan penting dalam menjaga stabilitas pH cairan tubuh.
Sumber protein terbagi menjadi 2 yaitu protein nabati dan hewani. Sumber Protein Nabati
contohnya seperti kacang-kacangan (kedelai, almond, kacang mede, kacang hijau, kacang hazel,
kacang merah), jintan, biji bunga matahari dan biji labu. Sedangkan sumber Protein Hewani
contohnya seperti daging merah, daging unggas, telur, ikan dan produk susu.
Proses hidrolisis adalah proses pemecahan suatu molekul menjadi senyawa-senyawa
yang lebih sederhana dengan bantuan molekul air. Hidrolisis protein adalah proses pecahnya atau
terputusnya ikatan peptida dari protein menjadi molekul yang lebih sederhana. Hidrolisis ikatan
peptida akan menyebabkan beberapa perubahan pada protein, yaitu meningkatkan kelarutan
karena bertambahnya kandungan NH3+ dan COO- dan berkurangnya berat molekul protein atau
polipeptida, rusaknya struktur globular protein (Winarno 1983).
Terdapat tiga cara yang dapat ditempuh untuk menghidrolisis protein, yaitu hidrolisis
menggunakan asam, basa dan enzim. Hidrolisis asam adalah hidrolisis dengan mempergunakan
asam kuat anorganik, seperti HCl atau H2SO4 pekat (4-8 normal) dan dipanaskan pada suhu
mendidih, dapat dilakukan dengan tekanan di atas satu atmosfer, selama beberapa jam. Akibat
samping yang terjadi dengan hidrolisis asam ialah rusaknya beberapa asam amino (triptofan,
sebagian serin dan threonin). Hidrolisis basa adalah hidrolisis protein menggunakan basa
merupakan proses pemecahan polipeptida dengan menggunakan basa / alkali kuat, seperti NaOH
dan KOH pada suhu tinggi, selama beberapa jam, dengan tekanan di atas satu atmosfer.
Hidrolisis Enzim adalah hidrolisis enzimatik dilakukan dengan mempergunakan enzim. Dapat
digunakan satu jenis enzim saja, atau beberapa jenis enzim yang berbeda. Penambahan enzim
perlu dilakukan pengaturan pada kondisi pH dan suhu optimum. Dibandingkan dengan hidrolisis
secara kimia (menggunakan asam atau basa), hidrolisis enzimatik lebih menguntungkan karena
tidak mengakibatkan kerusakan asam amino dan asam-asam amino bebas serta peptida dengan
rantai pendek yang dihasilkan lebih bervariasi, reaksi dapat dipercepat kira-kira 1012 sampai
1020, tingkat kehilangan asam amino esensial lebih rendah, biaya produksi relatif lebih murah
dan menghasilkan komposisi asam amino tertentu terutama peptida rantai pendek (dipeptida dan
tripeptida) yang mudah diabsorbsi oleh tubuh.
Salah satu cara lain untuk menghidrolisis kandungan protein dalam suatu bahan dapat
menggunakan enzim proteolitik baik yang berasal dari bahan itu sendiri atau dengan
penambahan enzim dari luar bahan. Enzim proteolitik yang ditambahkan dapat berasal dari
hewan maupun dari tumbuhan (Day 1998).
Enzim proteolitik atau enzim protease adalah enzim yang dapat memecah molekul-
molekul protein dengan cara menghidrolisis ikatan peptida menjadi senyawa-senyawa yang lebih
sederhana seperti proteosa, pepton, polipeptida, dipeptida dan sejumlah asam-asam amino
(Vogel 1990).
Enzim adalah biokatalisator organik yang dihasilkan organisme hidup di dalam
protoplasma, yang terdiri atas protein atau suatu senyawa yang berikatan dengan protein. Enzim
mempunyai dua fungsi pokok sebagai berikut yaitu mempercepat atau memperlambat reaksi
kimia dan mengatur sejumlah reaksi yang berbeda-beda dalam waktu yang sama. Enzim tersusun
atas dua bagian. Apabila enzim dipisahkan satu sama lainnya menyebabkan enzim tidak aktif.
Namun keduanya dapat digabungkan menjadi satu, yang disebut holoenzim. Kedua bagian enzim
tersebut yaitu apoenzim dan koenzim.
Apoenzim adalah bagian protein dari enzim, bersifat tidak tahan panas dan berfungsi
menentukan kekhususan dari enzim. Contoh, dari substrat yang sama dapat menjadi senyawa
yang berlainan, tergantung dari enzimnya. Sedangkan koenzim disebut gugus prostetik apabila
terikat sangat erat pada apoenzim. Tetapi, koenzim tidak begitu erat dan mudah dipisahkan dari
apoenzim. Koenzim memiliki sidat yang termostabil (tahan terhadap panas), mengandung ribose
dan fosfat. Fungsinya menentukan sifat dari reaksinya. Misalnya, apabila koenzim NADP
(Nicotiamida Adenin Denukleotid Phosfat) maka reaksi yang akan terjadi adalah dehidrogenase.
Disini NADP berfungsi sebagai akseptor hidrogen. Koenzim dapat bertindak sebagai
penerima/akseptor hidrogen, seperti NAD atau donor dari gugus kimia, seperti ATP (Adenosin
Tri Phosfat).
Sifat-sifat enzim adalah enzim akan mengalami denaturasi/kerusakan pada suhu atau
temperatur tinggi, efektif dalam jumlah kecil, tidak berubah pada waktu reaksi berlangsung,
tidak memengaruhi keseimbangan, tetapi hanya mempercepat reaksi.
Enzim yang terdapat di nanas yaitu enzim bromealin. Enzim bromelin yaitu suatu enzim
proteolitik yang dapat mengkatalisis reaksi hidrolisis dari protein. Sumber enzim bromelin
terbanyak terdapat pada buah nanas. Nanas merupakan buah yang dapat diperoleh di seluruh
Indonesia dan dapat dipanen sepanjang tahun. Umumnya limbah nanas yang berupa batang,
daun, kulit, dan bonggol belum dimanfaatkan secara optimal. Padahal telah diketahui bahwa
daging, batang, dan bonggol nanas mengandung enzim bromelin.
Enzim yang terdapat di pepaya yaitu enzim papain. Enzim Papain merupakan enzim
protease yang terkandung dalam getah papaya, baik dalam buah, batang maupun daunnya.
Sebagai enzim yang berkemampuan sebagai memecahkan molekul protein, dewasa ini papain
menjadi suatu produk yang sangat bermanfaat bagi kehidupan manusia, baik di kehidupan rumah
tangga maupun industri. Enzim Papain digunakan dalam industri pengolahan daging. Daging
dari hewan tua pun dapat menjadi lunak jika diberi enzim papain. Enzim papain juga digunakan
sebagai bahan penghancur sisa atau buangan hasil industri pengalengan ikan menjadi bubur ikan
atau konsentrat protein hewani.
Tujuan praktikum hidrolisis protein enzimatis ini adalah supaya praktikan mampu
melakukan hidrolisis dengan menggunakan ekstrak nanas dan papaya serta memahami konsep
pemutusan ikatan peptide dengan ezim protease dan memahami perubahan tingkat kekerasan
atau tekstur protein.
METODELOGI
Praktikum hidrolisis protein enzimatis dilaksanakan pada hari Rabu, 29 Maret 2017 pukul
08.00 WIB sampai 09.40 WIB.di Laboratorium Fasiologi Hewan Air (FHA) Fakultas Perikanan
dan Ilmu Kelautan Universitas Padjadjaran.
Alat yang digunakan dalam praktikum hidrolisis protein enzimatis ini diantaranya adalah
Cawan Petri yang digunakan sebagai wadah sampel dan untuk wadah penimbang, blender yang
digunakan untuk menghaluskan nanas dan pepaya, pisau yang digunakan untuk memotong
sampel, timbangan yang digunakan untuk mengukur berat sampel, gelas ukur yang digunakan
untuk mengukur volume larutan, beaker glass yang digunakan untuk menyimpan hasil filtrat, pH
meter yang digunakan untuk mengetahui nilai kadar asam pada sampel, indikator universal
sebagi indikator untuk mengetahui kadar asam pada suatu sampel, tabung reaksi yang digunakan
untuk mereaksikan, pipet tetes yang digunakan untuk mengambil filtrat, spatula yang digunakan
untuk pengaduk larutan, aluminium foil yang digunakan untuk menutup hasil sari sampel yang
sudah dihancurkan agar tidak terkontaminasi, kertas label yang digunakan untuk mempermudah
praktikan dalam mengetahui sampel apa yang sedang diuji.
Bahan yang digunakan dalam praktikum ini diantaranya adalah buah nanas (muda dan
matang) untuk diambil filtratnya sebagai pereaksi, papaya (muda dan matang) untuk diambil
filtratnya sebagai pereaksi, ikan sebagai sampel yang akan direaksikan, susu sebagai sampel
yang akan direaksikan, telur sebagai sampel yang akan direaksikan, dan tempe sebagai sampel
yang akan direaksikan.
Prosedur kerja dalam praktikum ini disajikan dalam bentuk bagan alir berikut ini:
KESIMPULAN
Proses hidrolisis protein enzimatis adalah proses penguraian protein menjadi ikatan
peptida dengan komponen pembantu enzim. Pada praktikum kali ini yang digunakan adalah
enzim bremiolin yang terdapat pada buah nanas dan enzim pepain yang terdapat di buah pepaya.
Hasil praktikum ini dapat disimpulkan bahwa hidrolisis protein secara enzimatis dengan
menggunakan ekstrak buah nanas dan pepaya dapat dilakukan, memahami konsep pemutusan
ikatan peptide dengan enzim protease dan memahami pengaruh perubahan tingkat kekerasan
(tekstur) protein.bahan-bahan makanan yang mengandung protein seperti susu, telur, daging
ikan , dan lain sebagainya dapat terhidrolisis dengan bantuan enzim protease yang terdapat pada
nanas dan pepaya. Nanas dan pepaya muda lebih cepat dalam proses menghidrolisis protein
dibandingkan dengan nanas dan pepaya tua. Hal ini dikarenakan konsentrasi enzim protease lebih
banyak terdapat pada buah nanas dan pepaya muda dibandingkan dengan buah nanas dan pepaya
tua.
DAFTAR PUSTAKA
Day, R.A. Jr and, A. L. Underwood. 1998. Analisis Kimia Kualitatif. Edisi Revisi Terjemahan.
R.Soendoro dkk. Erlangga, Jakarta.
Herdyastuti N. 2006. Isolasi dan Karakterisasi Ekstrak Kasar Enzim Bromelin dari
Batang Nanas (Ananas comusus L.merr). Berk. Penel. Hayati vol. 12: 75–77
Vogel. 1990. Buku Teks Analisis Organik dan Anorganik Kualitatif Makro dan Semimakro
Revisi G. Svehla Terjemahan Ir. L. Setrono dan Dr. A. Haelyana Pudjaatmaka. PT
Kalman Media Pustaka, Jakarta.
LAMPIRAN
Lampiran 1. Alat
Tabung reaksi
Gambar 3. Tabung Reaksi Gambar 4. pH Meter
(Sumber : Dokumen Pribadi) (Sumber : Dokumen Pribadi)
Gambar 5. Gelas Ukur Gambar 6. Beaker Glass
(Sumber : Dokumen Pribadi) (Sumber : Dokumen Pribadi)
Lampiran 2. Bahan
Gambar
Ekstrak 7. Ekstrak
nanas tuaNanas Tua GambarEkst
8. Ekstrak Nanas Tua
(Sumber : Dokumen Pribadi) (Sumber : Dokumen Pribadi)
Gambar 12. Proses Penambahan Ekstrak Nanas Pada Gambar 13. Proses Analisis
Sampel Daging Ikan Nila Perubahan Tekstur Ikan
(Sumber : Dokumen Pribadi) (Sumber : Dokumen Pribadi)