Penentuan Parameter Farmakokinetika Salisilat dengan Data Urin

Tujuan Umum
Menentukan parameter farmakokinetikasuatu obat dengan menggunakan data Turin

Tujuan Khusus
- Mahasiswa mampu menerapkan cara mendapatkan data eksresi obat dalam urin yang
shahih untuk penentuan parameter farmakokinetika.
- Mahasiswa dapat menghitung parameter farmakokinetika berdasar data eksresi obat
dalam urin.

Dasar Teori
Parameter farmakokinetika dapat ditentukan dari data kadar obat dalam darah atau
dari kadar obat dalam urin sebagai obat utuh atau metabolit aktif.keberadaan obat dalam
tubuh (Time course of drug in the body) ditentukan oleh proses ADME. Data laju eksresi
obat dalam urin analog dengan data kadar obat dalam plasma setiap waktu. Oleh karena
itu parameter farmakokinetika suatu obat dapat ditentukan dengan menggunakan data
urin.

Bahan
- Asam asetilsalisilat (asetosal)/tablet aspirin
- Natrium salisilat p.a
- Ferri nitrat p.a
- Merkuri klorida p.a
- Asam klorida p.a
- Air suling

Alat
- Spektrofometri
- Alat pemusing
- Vortex mixture
- Venoject
- Labu ukur
- Pipet volume
 - Gelas ukur,vial,beker gelas,All

Subjek Coba
Manusia sehat,pria,dewasa,tidak ada gangguan saluran cerna

Prosedur
a) Protokol Percobaan
Seminggu sebelum dan selama percobaan,subjek tidak boleh minum obat
lain,kecuali obat yang digunakan dalam percobaan. Semalam sebelum
percobaan,subjek dipuasakan. Satu jam sebelum percobaan,subjek diberi minum
400 ml air dan segera sebelum minum obat kandung kemih dikosongkan.
Sejumlah urin ditampung untuk digunakan sebagai blanko.
Obat aspirin dosis 500 mg diminum dengan 200 ml air. Selama empat jam
berturut-turut setelah minum obat,subjek diberi minum air sebanyak 200 ml
setiap jam.Cuplikan urin ditampung pada interval waktu tertentu sampai semua
obat dieksresikan (lebih kurang 7 x t1/2 ). Setiap tampungan urin catat dengan
tepat waktu dan volume urin. Tiap cuplikan urin disimpan pada masing-masing
wadah.Ingatlah jangan sampai ada satu datapun yang hilang atau tidak
tertampung dengan benar. Jika urin tidak segera dianalisis,maka cuplikan urin
diberi toluene 0,5-1 ml untuk setiap 20-50 ml urin dan simpan pada suhu 2-8oC
selama 48 jam sampai dilakukan analisis.
b) Metode Penetapan Kadar Salisilat dalam Urin dengan Metode Trinder
Cuplikan urin 1 ml ditambahkan 5 ml pereaksi Trinder. Kocok homogen dengan
wortex, kemudian disentrifuge 5 menit, filtrate dipisahkan dan diamati pada panjang
gelombang maksimum.Sebagai kontrol digunakan 1 ml urin blanko ditambah 5 ml
pereaksi Trinder.
c) Tahapan Percobaan :
1. Pembuatan pereaksi Thinder
a. Menimbang merkuri klorida sebanyak 40 gram dilarutkan dalam air panas
850 ml dan didihkan sampai larut.
b. Kemudian ditambahkan 120 ml asam klorida 1N dan 40 gram ferri
nitrat.Jika semua ferri nitrat sudah dilarutkan,volume larutan dibuat 1000
ml dengan air suling.
2. Pembuatanlarutan baku kerja salisilat
a. Membuat larutan baku induk 1000 mcg/ml dari 116 mg
natriumsalisilat,dilarutkan dalam 100 ml air suling
b. Membuat larutan baku kerja salisilat dengan cara mengencerkan larutan
baku induk dengan air suling sampai didapat larutan dengan kadar
20,50,100,150,dan 200 mcg/ml
3. Penentuan panjang gelombang maksimum
a. Panjang gelombang maksimum ditentukan dengan menggunakan larutan
baku kerja 100 dan 200 mcg/ml.
b. Mereaksikan larutan baku kerja 100 dan 200 mcg/ml sesuai prosedur
penetapan kadar salisilat dan amati nilai serapan pada panjang gelombang
antara 530 560 nm.
c. Membuat kurva serpan terhadap panjang gelombang dari larutan baku kerja
100 dan 200 mcg/ml pada kertas grafik berskala sama! Tentukan lamda
(panjang gelombang) maksimum!
4. Pembuatan kurva baku
a. Melakukan pengamatan serapan dari larutan baku kerja pada 2 yang telah
direaksikan seperti pada metode penetapan kadar salisilat dalam urin
dengan metode dari Trinder, pada panjang gelombang maksimum yang
telah didapat dari 3.
b. Sebagai kontrol menggunakan air suling ditambah 5 ml pereaksi Trinder.
c. Membuat tabel hasil pengamatan dan membuat kurva kadar larutan baku
kerja terhadap serapan pada kertas grafik berskala sama!Hitung koefisien
korelasinya, dan buat persamaan garisnya!
5. Penetapan kembali kadar salisilat yang ditambahkan dalam urin (recovery)
a. Membuat larutan baku induk 1000 mcg/ml dari 116 mg natrium
salisilat,dilarutkan dalam 100 ml urinblanko
b. Buatlah larutan baku kerja salisilat dengan cara mengencerkan larutan baku
induk dengan urin blanko sampai didapat larutan dengan kadar
20,50,100,150, dan 200 mcg/ml
c. Digunakan larutan baku kerja dengan kadar 20,50,100,150 dan 200 mcg/ml.
 Cara :
1. Melakukan pengamatan serapan dari larutan baku kerja pada 5 yang telah
direaksikan seperti pada metode penetapan kadar salisilat dalam urin
dengan metode dari Trinderpada panjang gelombang maksimum yang
telah didapat dari 3.
2. Sebagai kontrol digunakan 1 ml urin blanko ditambah 5 ml pereaksi
Trinder.
3. Tabelkan hasil pengamatan dan buat kurva kadar larutan baku kerja
terhadap serapan pada kertas grafik berskala sama! Hitung % recovery
dengan cara sebagai berikut :
- Memasukkan nilai serapan larutan baku recovery pada persamaan
kurva baku sehingga diperoleh harga kadar salisilat yang diperoleh
kembali.
- Hitung % recovery dengan membagi perolehan kembali salisilat dalam
urin dengan kadar sebenarnya,kemudian dikalikan 100%

% recovery = 100 %

6. Pengumpulan sampel urin

- Membuat jadwal penampungan sampel urin (dengan mempertibangkan
waktu paruh eliminasi salisilat,didapat dari pustaka) selama kurang lebih 7 x
t .
- Melakukan penampungan urin,catat secara tepat volume dan waktu
penampungannya.
d) Penetapan kadar salisilat dalam urin
Tetapkan kadar salisilat dalan cuplikan urin dengan metode dari Trinder dan
amati serapannya pada panjang gelombang maksimum.
Memasukkan data serapan ke persamaan garis recovery untuk mendapatkan
data kadar salisilat dalam urin dari setiap waktu pengambilan.
 Skema Kerja
1. Pembuatan pereaksi Thinder
Menimbang merkuri klorida sebanyak 40 gram dilarutkan dalam air panas 850 ml dan
didihkan sampai larut

Kemudian ditambahkan 120 ml asam klorida 1N dan 40 gram ferri nitrat. Jika semua
ferri nitrat sudah dilarutkan, volume larutan dibuat 1000 ml dengan air suling.

2. Pembuatan larutan baku kerja salisilat

Membuat larutan baku induk 1000 mcg/ml dari 116 mg natrium salisilat, dilarutkan
dalam 100 ml air suling

Membuat larutan baku kerja salisilat dengan cara mengencerkan larutan baku induk
dengan air suling sampai didapat larutan dengan kadar 20, 50, 100, 150, dan 200 mcg/ml

3. Penentuan panjang gelombang maksimum

Panjang gelombang maksimum ditentukan dengan menggunakan larutan baku kerja 100
dan 200 mcg/ml.

Mereaksikan larutan baku kerja 100 dan 200 mcg/ml sesuai prosedur penetapan kadar
salisilat dan amati nilai serapan pada panjang gelombang antara 530 560 nm.

Membuat kurva serpan terhadap panjang gelombang dari larutan baku kerja 100 dan
200 mcg/ml pada kertas grafik berskala sama! Tentukan lamda (panjang gelombang)
maksimum!
4. Pembuatan kurva baku
Melakukan pengamatan serapan dari larutan baku kerja pada 2 yang telah direaksikan
seperti pada metode penetapan kadar salisilat dalam urin dengan metode dari Trinder,
pada panjang gelombang maksimum yang telah didapat dari 3.

Sebagai kontrol menggunakan air suling ditambah 5 ml pereaksi Trinder.

Membuat tabel hasil pengamatan dan membuat kurva kadar larutan baku kerja terhadap
serapan pada kertas grafik berskala sama! Hitung koefisien korelasinya, dan buat
persamaan garisnya!

5. Penetapan kembali kadar salisilat yang ditambahkan dalam urin (recovery)

Membuat larutan baku induk 1000 mcg/ml dari 116 mg natrium salisilat, dilarutkan
dalam 100 ml urin blanko dari 3.

Buatlah larutan baku kerja salisilat dengan cara mengencerkan larutan baku induk dengan
urin blanko sampai didapat larutan dengan kadar 20,50,100,150 dan 200 mcg/ml

Digunakan larutan baku kerja dengan kadar 20,50,100,150 dan 200 mcg/ml.!

6. Pengumpulan sampel urin

Membuat jadwal penampungan sampel urin (dengan mempertibangkan waktu paruh

eliminasi salisilat,didapat dari pustaka) selama kurang lebih 7 x t .

Melakukan penampungan urin,catat secara tepat volume dan waktu penampungannya.

7. Penetapan kadar salisilat dalam urin
Tetapkan kadar salisilat dalan cuplikan urin dengan metode dari Trinder dan amati
serapannya pada panjang gelombang maksimum.

Memasukkan data serapan ke persamaan garis recovery untuk mendapatkan data kadar
salisilat dalam urin dari setiap waktu pengambilan.