ABSTRAK

Telah dilakukan pemeriksaan bahan kimia obat deksametason pada jamu asam urat yang
beredar di Pasar Pujasera Subang. Penelitian menggunakan 10 sampel jamu asam urat
yang paling banyak diminati oleh masyarakat. Tujuan dari penelitian untuk mengetahui
adanya campuran bahan kimia obat deksametason pada jamu asam urat dan berapa
kadarnya. Dengan metode kualitatif menggunakan KLT dan metode kuntitatif dengan
spektrofotometri UV-VIS. Fase diam pada KLT menggunakan silika gel GF254 dan fase
gerak kloroform : aseton (4:1), dari hasil pengujian KLT terdapat harga Rf deksametason
murni 0,2 dan kontrol positif 0,2. Hasil perhitungan harga Rf yang diperoleh dari 10
sampel, ada 2 sampel yang menunjukan hasil positif mengandung deksametason yaitu
sampel 1 dan sampel 6, untuk mengetahui berapa banyak kadar deksametason dalam 2
sampel jamu tersebut dilanjutkan pengujian dengan menggunakan metode
spektrofotometri UV-Vis. Hasil pengukuran λ maksimum deksametason berada di 239
nm, pemeriksaan menggunakan spektrofotometri UV-Vis didapatkan kadar deksametason
dalam sampel 1 sebesar 0,7125 mg dan sampel 6 sebear 0,5355 mg.

Kata Kunci : Jamu asam urat, Deksametason, Bahan kimia obat, Kromatografi lapis
tipis, spektrofotometri.

i
 ABSTRACK

The result of research prove that dexamethasone has been found in uric acid herbs that
distributed in Pujasera Subang Market. Study uses 10 uric acid herbs the most popular in
society. The purpose of this study was to determine the presence and quantity of
dexamethasone in uric acid herbs. The study using qualitative method with Thin Layer
Chromatography (TLC) and quantitative method with UV-Vis spectrophotometry. The
stationary phase of TLC used silica gel GF254 and the chloroform moving phase : acetone
(4 : 1). Based on KLT research, there was Rf pure dexamethasone value amount 0,2 and
positive control 0,2. The result Rf value was obatained from 10 sample that there was 2
samples which show positive result (containing dexamethasone) wich is sample 1and 6.
The quantity of dexamethasone were measured by using UV-Vis spectrophotometry
method. The maximum λ of dexamethasone was 239 nm. dexamethasone level obtained in
sample 1 is 0,7125 mg and sample 6 is 0,5355 mg.

Keywords : Herbal uric acid, dexamethasone, medicinal chemicals, thin layer

chromatography, spektrophotometry UV-Vis

ii
 DAFTAR ISI

Halaman
ABSTRAK ................................................................................................................... i
ABSTRACK ................................................................................................................. ii
DAFTAR ISI .............................................................................................................. iii
DAFTAR TABEL ..................................................................................................... vi
DAFTAR GAMBAR ................................................................................................ vii
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................... viii
BAB I ........................................................................................................................... 1
PENDAHULUAN ....................................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang....................................................................................... 1

1.2 Identifikasi Masalah .............................................................................. 3

1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................... 3

1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................. 3

1.5 Waktu dan Tempat Penelitian................................................................ 3

BAB II ......................................................................................................................... 4
TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................................. 4
2.1 Obat Tradisional .................................................................................... 4

2.1.1 Peraturan Tentang Produksi dan Distribusi Obat Tradisional ..................5

2.2 Asam Urat .............................................................................................. 5

2.2.1 Penyebab Asam Urat ................................................................................6

2.2.2 Gejala klinis asam urat ..............................................................................6

2.2.3 Kadar Asam Urat ......................................................................................7

2.3 Deksametason ........................................................................................ 7

2.3.2 Struktur Deksametason .............................................................................8

iii
 2.4 Identifikasi Bahan Kimia Obat Deksametason Dalam Jamu Rematik
Secara Kratografi Lapis Tipis ............................................................... 9

2.4.1 Fase diam ................................................................................................10

2.4.2 Fase Gerak .............................................................................................10

2.4.3 Penotolan Sampel ...................................................................................11

2.5 Pemeriksaan Kadar Bahan Kimia Obat Deksametason dengan

Menggunakan Spektrofotometri UV-Vis ........................................... 11

2.5.1 Absorbansi ..............................................................................................12

2.5.2 Prinsip – prinsip Spektrofotometri ..........................................................12

2.5.3 Hukum Lambert-Beer .............................................................................13

2.5.4 Peralatan Untuk Spektrofotometri ..........................................................14

BAB III ...................................................................................................................... 16

METODE PENELITIAN ........................................................................................ 16
3.1 Rancangan Penelitian .......................................................................... 16

3.2 Bahan Penelitian .................................................................................. 16

3.2.1 Bahan Kimia ...........................................................................................16

3.2.2 Sampel ....................................................................................................17

3.2.3 Alat .........................................................................................................17

3.3 Metode Kerja ....................................................................................... 17

3.3.1 Ekstraksi Sampel Jamu Rematik .............................................................17

3.3.2 Uji Pendahuluan......................................................................................18

3.3.3 Uji Kualitatif dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ............18

3.3.4 Uji Kuantitatif dengan Metode Spektrofotometer UV-Vis .....................19

BAB IV ...................................................................................................................... 22
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................ 22
4.1 Hasil Pengumpulan Sampel Jamu Asam Urat .................................... 22
 4.2. Hasil Uji Pendahuluan Reaksi Warna ................................................ 22

4.3. Uji Kualitatif dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) .................... 24

4.5 Hasil Penentuan Kurva Linearitas Deksametason ............................... 27

4.6 Hasil Penentuan Kadar Sampel ........................................................... 28

BAB V........................................................................................................................ 29
SIMPULAN DAN SARAN ...................................................................................... 29
5.1 Simpulan .............................................................................................. 29

5.2 Saran .................................................................................................... 29

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................... 30

LAMPIRAN ............................................................................................................. 33
 DAFTAR TABEL

Tabel Halaman
Tabel 4.1 Hasil Uji Pendahuluan ............................................................................... 23
Tabel 4.2 Hasil Harga Rf ........................................................................................... 25
Tabel 4.3 Hasil Serapan Variasi Konsentrasi Deksametason .................................... 27
Tabel 4.4 Hasil Penetapan Kadar Sampel .................................................................. 28
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman
Gambar 2.1Struktur Kimia Deksametason .................................................................. 8

Gambar 4.1 Panjang Gelombang Deksametason ....................................................... 26

Gambar 4.2 Kurva Linearitas Deksametason............................................................. 27

 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

Lampiran I Diagram Alur Penelitian....................................................................... 33

Lampiran II Foto Hasil Pengumpulan Sampel ......................................................... 34

Lampiran III Foto Hasil Ekstraksi Sampel................................................................ 35

Lampiran IV Foto Hasil Uji Pendahuluan ................................................................ 36

Lampiran V Foto Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis............................................. 37

Lampiran VI Hasil Perhitungan ............................................................................... 38

 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Jamu adalah obat tradisional Indonesia yang berupa bahan tumbuhan, bahan

hewan, bahan mineral, sediaan galenik atau campuran dari bahan-bahan tersebut,

yang secara tradisional telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan

pengalaman (Permenkes RI No. 007 Tahun 2012). Obat tradisional terbuat dari

campuran berbagai bahan tumbuhan, yang dapat dibuat dalam bentuk sediaan

yang bervariasi, dapat berupa serbuk, kapsul, sediaan cair, pil, dan lain-lain, yang

ditujukan untuk pengobatan (Bhowmik, 2009). Sejumlah penelitian melaporkan

bahwa terdapat efek samping dari obat tradisional yang tidak diinginkan (Peng,

2006). Penambahan bahan kimia ke dalam sediaan obat tradisional merupakan

salah satu faktor penting yang mempengaruhi keamanan dari obat tradisional

(Giveon, 2003). Menurut Permenkes RI No.007 Tahun 2012 obat tradisional tidak

boleh mengandung bahan kimia sintetik atau hasil isolasi yang berkhasiat sebagai

obat.

Deksametason adalah kortikosteroid kuat dengan khasiat immuno supresan

dan antiinflamasi yang digunakan untuk mengobati berbagai kondisi peradangan

(Samtani, 2005). Kortikosteroid saat ini sudah dianggap sebagai obat “dewa”

1
 2

karena hampir beberapa penyakit dapat diobati dengan golongan ini (Suherman,

2007). Efek samping dapat timbul karena penghentian pengobatan tiba-tiba atau

pemberian terus menerus terutama dengan dosis besar. Efek ini menyerupai gejala

dari suatu gangguan yang disebabkan oleh produksi kortisol faal berlebihan, yakni

shindroma cushing, gejala sindrom ini adalah retensi cairan di jaringan-jaringan

yang menyebabkan naiknya berat badan dengan pesat muka menjadi tembem dan

bundar (muka bulan), adakalanya kaki dan tangan gemuk (bagian atas). Selain itu

terjadi penumpukan bagian lemak di bahu dan tengkuk, kulit menjadi lebih tipis

dan mudah terluka (Tjay dan Rahardja, 2002). Pada usia lanjut dapat

mempercepat pengeroposan tulang atau osteoporosis (Suherman, 2007). Asam

urat adalah suatu penyakit yang disebabkan oleh tingginya kadar asam urat dalam

darah, yang ditandai dengan gangguan linu-linu terutama di daerah persendian

tulang dan tidak jarang timbul rasa amat nyeri bagi penderitanya. Rasa sakit

tersebut diakibatkan adanya radang pada persendian yang disebabkan oleh

penumpukan kristal akibat tingginya kadar asam urat di dalam darah (Krisnatuti

dkk., 2008).

Sampel jamu asam urat diambil di Pasar Pujasera Kabupaten Subang. Pasar

ini merupakan pusat belanja jamu yang menjual grosir untuk pedagang jamu

gendong yang berjualan keliling ke rumah warga. Tingginya minat masyarakat

dalam menggunakan jamu tetapi pengawasaannya sangat minim, maka diperlukan

adanya pengawasaan pada jamu-jamu yang beredar di kota Subang.

 3

1.2 Identifikasi Masalah

1. Apakah terdapat senyawa Bahan Kimia Obat (BKO) deksametason pada

beberapa jamu asam urat yang beredar di Pasar Pujasera Subang ?

2. Berapakah kadar BKO deksametason pada jamu asam urat ?

1.3 Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui BKO deksametason, dan

banyaknya kadar yang di masukkan sebagai bahan tambahan dalam jamu asam

urat yang beredar di Pasar Pujasera Subang.

1.4 Manfaat Penelitian

Dengan penelitian ini diharapkan dapat bermanfaat untuk memberikan

informasi kepada masyarakat agar dapat berhati-hati dalam mengkonsumsi jamu

tradisional yang mengandung BKO.

1.5 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret-Juni 2017 di Laboratorium

Kimia Farmasi Analisis, Jurusan Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam (FMIPA), Universitas Al-Ghifari Bandung.

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Obat Tradisional

Obat tradisional adalah obat yang berasal dari tumbuhan, hewan, mineral,

atau sediaan galenik, campuran dari bahan tersebut yang belum mempunyai data

klinis dan dipergunakan dalam usaha pengobatan berdasarkan pengalaman. Obat

tradisional atau jamu terdapat dalam bentuk rajangan, serbuk, cairan, dan ada juga

dalam bentuk pil, kapsul, atau tablet sebagai usaha yang dilakukan untuk

perusahaan yang memproduksi jamu untuk mempermudah dikonsumsi (Depkes

RI, 1990).

Menurut Peraturan Kepala Badan POM No. HK.00.05.41.1384 Tahun 2005

Pasal 1, jamu adalah obat tradisional Indonesia. Obat tradisional adalah bahan

atau ramuan yang berupa bahan tumbuhan, bahan hewan, bahan mineral, sediaan

sarian (galenik) atau campuran dari bahan tersebut, yang secara turun temurun

telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman.

Jamu terbuat dari bahan alami dari banyak tumbuhan yang berkhasiat sebagai

jamu hanya beberapa yang sering digunakan sebagai bahan jamu adalah jahe

(Zingiberaceae), kunyit (Curcuma domestica), lengkuas (Languas galanga),

kencur (Kaemferiae galanga), lempuyang pahit (Zingiber amaricans), lempuyang

4
 5

wangi (Zingiber aromaticum), temulawak (Curcuma xanthorrhiza), dan jahe

(Zingiber officinale) (Beers, 2013).

Pada kenyataannya sering terjadi kecurangan yang dilakukan sebagian

penjual jamu dengan menambahkan obat-obat tertentu ke dalam jamu yang

dijualnya. Menurut temuan BPOM, obat yang sering ditambahkan ke dalam jamu

salah satunya yaitu deksametason yang sering terkenal sebagai obat yang bisa

mengobati berbagai penyakit. Penambahan obat pada jamu tradisional juga tidak

sesuai dosis dan indikasi penggunaan obat sehingga menimbulkan efek yang tidak

diinginkan (BPOM, 2006).

2.1.1 Peraturan Tentang Produksi dan Distribusi Obat Tradisional

Sebagian masyarakat beranggapan bahwa jamu tidak mengandung efek

samping karena terbuat dari bahan alami, anggapan ini tidak seluruhnya benar

karena tumbuhan memiliki zat kimia alami yang sebagian memang mangandung

unsur aktif dalam penyembuhan penyakit tertentu. Dalam hubungan ini jamu

sebagai obat tradisional meski terbuat dari bahan alami (tumbuhan) tetapi

mempunyai efek samping, meski diakui efek sampingnya tidak seburuk efek

samping obat kimiawi (Depkes RI, 1985).

2.2 Asam Urat

Asam urat adalah suatu penyakit arthritis yang disebabkan oleh metabolisme

abnormal purin yang ditandai dengan meningkatnya kadar asam urat dalam darah
 6

(Sunita, 2005). Peradangan sendi pada asam urat bersifat menahun, sendi yang

terserang bisa menjadi bengkok atau cacat.

Penyakit asam urat umumnya lebih sering menyerang laki-laki dari pada

wanita karena wanita yang belum menopouse memiliki kadar hormon esterogen

cukup tinggi hormon ini membantu mengeluarkan asam urat melalui urin

sehingga kadar asam urat pada wanita yang belum menopouse itu normal. Pada

laki-laki asam urat sering menyerang diusia setengah baya karena hormon

androgennya mulai stabil tinggi bahkan bisa menimbulkan gejala penyakit asam

urat akut (Junaidi, 2012).

2.2.1 Penyebab Asam Urat

Menutut (Andry DKK, 2009) dan (Junaidi, 2012) penyebab dari asam urat

adalah sebagai berikut :

1. Pembentukan asam urat berlebihan.

2. Pengeluaran asam urat melalui ginjal kurang karena gangguan ditubuli distal

ginjal yang tidak sehat dan disebabkan oleh ginjal yang rusak.

2.2.2 Gejala klinis asam urat

Biasanya serangan pertama hanya menyerang satu sendi dan berlangsung

beberapa hari, kemudian gejalanya hilang secara bertahap, dimana sendi kembali

berfungsi dan tidak muncul gejala hingga terjadi serangan berikutnya namun

cenderung akan semakin buruk dan serangan yang tidak diobati akan
 7

berlangsung lebih lama, lebih sering, dan menyerang beberapa sendi. Sendi yang

terserang akan mengalami kerusakan permanen. Biasanya sendi yang terserang

adalah ibu jari, sendi tarsal kaki, pergelangan kaki, sendi kaki belakang,

pergelangan tangan, lutut, dan pada siku (Junaidi, 2012).

2.2.3 Kadar Asam Urat

Pemeriksaan laboratorium untuk kadar asam urat di dalam darah dan urin

diperlukan untuk diagnosa asam urat, kadar normal asam urat untuk pria antara

2,1-8,5 mg/dL dan wanita 2,0- 6,6 mg/dL. Bagi mereka yang berusia lanjut, kadar

tersebut sedikit lebih tinggi. Rata-rata kadar normal asam urat adalah 3,0-7,0

mg/dL. Kadar normal asam urat dalam darah pada pria 8 mg/dL dan wanita 7

mg/dL. Bila lebih dari 7,0 mg/dL dapat menyebabkan batu ginjal (Sustrani, 2007).

2.3 Deksametason

Deksametason adalah kortikosteroid kuat dengan khasiat immunosupresan

dan anti inflamasi yang digunakan untuk mengobati berbagai kondisi peradangan

(Samtani, 2005). Obat ini dapat mencegah atau menekan timbulnya gejala

inflamasi. Ada dua penyebab timbulnya efek samping penggunaan kortikosteroid.

Efek samping dapat timbul karena penghentian obat secara tiba-tiba atau

pemberian terus-menerus terutama dengan dosis besar (Suherman dan Ascobat,

2012).
 8

Komplikasi yang timbul akibat pemberian obat dalam jangka panjang ialah

gangguan cairan dan elektrolit, hiperglikemia dan glikosuria, mudah mendapat

infeksi, pasien tukak peptik mungkin dapat mengalami pendarahan atau perforasi,

osteoporosis, miopati, psikosis, habitus pasien cushing (antara lain moon face,

buffalo hump, timbunan lemak supraklavikular, obesitas sentral, ekstremitas

kurus, striae, ekimosis, akne, dan hirsutisme) (Suherman dan Ascobat, 2012).

2.3.2 Struktur Deksametason

Gambar 2.1
Struktur Kimia Deksametason

Rumus molekul : C22H29FO5

Berat molekul : 392,47 g/mol

Nama kimia : 9 – fluoro - 11β,17,21 – trihidroksi - 16⍺ - metilpregna - 1,4 –

diena - 3,20 dion
Pemerian : Serbuk hablur, putih sampai praktis putih, tidak berbau, stabil

diudara, melebur pada suhu lebih kurang 250c disertai

peruraian.

Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air,agar sukar larut dalam aseton,

dalam etanol, dalam dioksan, dan dalam metanol.

 9

2.4 Identifikasi Bahan Kimia Obat Deksametason Dalam Jamu Rematik

Secara Kratografi Lapis Tipis

Kromatografi Lapis Tipis adalah prosedur pemisahan zat terlarut oleh suatu

proses dalam sistem yang terdiri dari dua fase atau lebih, salah satu diantaranya

bergerak secara berkesinambungan dengan arah tertentu dan di dalamnya zat-zat

itu menunjukan perbedaan adsorpsi, partisi, kelarutan, tekanan uap, ukuran

molekul atau kerapatan muatan ion, dengan demikian masing-masing zat dapat

diidentifikasi atau ditetapkan dengan metode analitik (Farmakope Indonesia edisi

IV, 1995).

Kromatografi lapis tipis merupakan yang paling cocok untuk analisis obat di

laboratorium farmasi. Metode ini hanya memerlukan investasi yang kecil untuk

perlengkapan, menggunakan waktu yang sangat singkat untuk menyelesaikan

analisis (15-60 menit), dan memerlukan jumlah cuplikan yang sangat sedikit (kira-

kira 0,1 gr) (Stahl, 1985).

Kromatografi lapis tipis mempunyai keuntungan yaitu dalam

pelaksanaannya lebih mudah dan lebih murah dibandingkan dengan kromatografi

kolom. Demikian juga peralatan yang digunakan lebih sederhana dan dapat

dikatakan bahwa hampir semua laboratorium dapat melaksanakan setiap saat

secara tepat (Rohman, 2009).

 10

2.4.1 Fase diam

Fase diam yang digunakan dalam kromatografi lapis tipis merupakan

penjerap berukuran kecil dengan diameter partikel antara 10-30 µm, semakin kecil

ukuran rata-rata pertikel fase diam maka semakin baik kinerja KLT dalam hal

efisiensi dan resolusinya (Rohman, 2009). Dua sifat yang penting dari penyerap

adalah besar partikel dan homogenitasnya, kebanyakan penjerap yang digunakan

adalah silika gel (Sastrohamidjojo, 1985).

2.4.2 Fase Gerak

Fase gerak KLT dapat dipilih dari pustaka, tetapi lebih sering dengan

mencoba-coba karena waktu yang diperlukan hanya sebentar sistem yang

sederhana ialah dengan menggunakan campuaran 2 pelarut organik karena daya

elusi campuran kedua pelarut dapat mudah diatur sedemikian rupa sehingga

pemisahan dapat terjadi sedemikan rupa sehingga pemisahan dapat terjadi secara

optimal.

Petunjuk dalam memilih dan mengoptimasi fase gerak:

a. Fase gerak harus mempunyai kemurnian yang sangat tinggi karena KLT

merupakan teknik yang sensitif.

b. Daya elusi fase gerak harus diatur sedemikian rupa sehingga harga Rf solut

terletak diantara 0,2-0,8 untuk memisahkan pemisahan.

Pemisahan dengan menggunakan fase diam polar seperti silika gel, polaritas fase

gerak akan menentukan kecepatan migrasi solut yang berarti juga menentukan
 11

nilai Rf penembahan pelarut yang bersifat sedikit polar seperti dietil eter kedalam

pelarut non polar seperti metil benzen akan meningkatkan harga Rf secara

signifikan.

2.4.3 Penotolan Sampel

Pemisahan pada kromatografi lapis tipis yang optimal akan diperoleh hanya

jika menotolkan dengan ukuran bercak sekecil dan sesempit mungkin. Hasil

penelitian menunjukan bahwa penotolan secara manual terutama jika sampel yang

akan ditotolkan lebih dari 15 µL. Penotolan sampel yang tidak tepat akan

menyebabkan bercak yang menyebar dan puncak ganda.

2.5 Pemeriksaan Kadar Bahan Kimia Obat Deksametason dengan

Menggunakan Spektrofotometri UV-Vis

Spektrofotometri UV-Vis adalah pengukuran serapan cahaya di daerah

ultraviolet (200–350 nm) dan sinar tampak (350–800 nm) oleh suatu senyawa.

Serapan cahaya UV atau cahaya tampak mengakibatkan transisi elektronik, yaitu

promosi elektron-elektron dari orbital keadaan dasar yang berenergi rendah ke

orbital keadaan tereksitasi berenergi lebih tinggi.

Spektrofotometri UV-Vis anggota teknik analisis spektroskopik yang

memakai sumber REM (Radiasi Elektro Magnetik) ultraviolet dekat (190-380

nm) dan sinar tampak (380-780 nm) dengan memakai instrumen spektrofotometer

dan melibatkan energi elektronik yang cukup besar pada molekul yang dianalisis,
 12

sehingga spektrofotometri UV-Vis lebih banyak dipakai untuk analisis kuantitatif

dibandingkan kualitatif (Khopkar SM,1990).

2.5.1 Absorbansi

Absorbsi cahaya UV-Vis mengakibatkan transisi elektronik, yaitu promosi

elektron-elektron dari orbital keadaan dasar yang berenergi rendah ke orbital

keadaan tereksitasi berenergi lebih tinggi. Energi yang terserap kemudian

terbuang sebagai cahaya atau tersalurkan dalam reaksi kimia. Absorbsi untuk

transisi elektron seharusnya tampak pada panjang gelombang diskrit sebagai suatu

spektrum garis atau peak tajam namun ternyata berbeda.

Spektrum UV maupun tampak terdiri dari pita absorbsi, lebar pada daerah

panjang gelombang yang lebar. Ini disebabkan terbaginya keadaan dasar dan

keadaan eksitasi sebuah molekul dalam subtingkat-subtingkat rotasi dan vibrasi

(Gandjar dan Rohman, 2007).

2.5.2 Prinsip – prinsip Spektrofotometri

Berkas cahaya polikromatis diubah menjadi monokromatis. Sinar

monokromatis yang dilewatkan pada suatu bahan yang dianalisa akan diabsorbsi,

dan sinar yang diabsorbsi oleh bahan yang dianalisa sebanding dengan jumlah

(kosentrasi) bahan yang dianalisa. Hukum Lambert Beer merupakan gabungan

hukum Lambert dan hukum Beer yang menetapkan antara lain intensitas cahaya
 13

yang masuk dengan intensitas cahaya yang keluar, merupakan fungsi dari larutan

dan kadar zat dalam larutan (Depkes RI, 1979).

2.5.3 Hukum Lambert-Beer

Menurut Hukum Lambert, serapan berbanding lurus terhadap ketebalan

sel yang disinari. Menurut Hukum Beer, yang hanya berlaku untuk cahaya

monokromatik dan larutan yang sangat encer, serapan berbanding lurus dengan

konsentrasi (banyak molekul zat). Kedua pernyataan ini dapat dijadikan satu.

Hukum Lambert Beer sehingga diperoleh bahwa serapan berbanding lurus

terhadap konsentrasi dan ketebalan sel, yang dapat ditulis dalam persamaan:

A= a.b.c (g/liter) atau A= ε. b. c (mol/liter)

Dimana:

A = serapan

a = absorptivitas (a)

b = ketebalan sel (cm)

c = konsentrasi (b/v)

ε = absorptivitas molar (ε)

Hukum Lambert-Beer menjadi dasar aspek kuantitatif spektrofotometri

dimana konsentrasi dapat dihitung berdasarkan rumus di atas. Absorptivitas

tergantung pada suhu, pelarut, struktur molekul, dan panjang gelombang radiasi

(Day dan Underwood., 1999 ; Rohman, 2007).

 14

2.5.4 Peralatan Untuk Spektrofotometri

Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmitan atau serapan suatu

sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Alat ini terdiri dari spektrometer yang

menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan

fotometer sebagai alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang

diabsorpsi (Day dan Underwood., 1999). Unsur-unsur terpenting suatu

spektrofotometer adalah sebagai berikut :

1. Sumber cahaya

Lampu deuterium untuk daerah UV dari 190 sampai 350 nm, sementara lampu

halogen kuartz atau lampu tungsten daerah visibel dari 350 sampai 900 nm.

2. Monokromotor

Digunakan untuk menghamburkan cahaya ke dalam panjang gelombang unsur-

unsurnya, yang diseleksi lebih lanjut dengan celah.

3. Kuvet (sel)

Digunakan sebagai wadah sampel yang akan dianalisis. Pada pengukuran di

daerah sinar tampak, kuvet kaca dapat digunakan, tetapi untuk pengukuran

pada daerah ultraviolet harus menggunakan sel kuarsa karena gelas tidak

tembus cahaya pada daerah ini. Kuvet umumnya mempunyai ketebalan 1 cm.

4. Detektor

Berperan untuk memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang

gelombang. Detektor akan mengubah cahaya menjadi sinyal listrik yang

selanjutnya akan ditampilkan oleh penampil data dalam bentuk angka digital.
 15

5. Rekorder

Digunakan sebagai perekam absorbansi yang dihasilkan dari pengukuran (Day

dan Underwood, 1999; Watson, 2005).

 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Rancangan Penelitian

Jenis penelitian ini yaitu pemeriksaan bahan kimia obat deksametason pada

jamu asam urat dengan metode kualitatif menggunakan Kromatrografi Lapis Tipis

(KLT) dan penelitian kuantitatif menggunakan Spektrofotometri UV-Vis, dengan

10 macam sampel jamu asam urat paling banyak diminati masyarakat yang

diambil dari toko jamu yang beredar di Pasar Pujasera Subang. Penelitian ini

dilaksanakan pada bulan Maret-Juli 2017 di Laboratorium Kimia Farmasi

Analisis, Jurusan Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

(FMIPA), Universitas Al-Ghifari Bandung.

3.2 Bahan Penelitian

3.2.1 Bahan Kimia

Sampel jamu asam urat, etanol 96%, kloroform, metanol, metanol PA,

aseton, H2SO4 , HNO3.

16
 17

3.2.2 Sampel

Jamu asam urat diperoleh dari toko-toko jamu grosir di Pasar Pujasera

Subang dengan kriteria jamu asam urat yang paling banyak diminati oleh

masyarakat, jamu yang digunakan pada penelitian ini yaitu 10 macam jamu asam

urat.

3.2.3 Alat

Bejana KLT, Plat KLT (Lempeng silika gel GF254), neraca analitik, lampu

sinar UV, alat-alat gelas yang dipakai dalam laboratorium kimia analisis,

mikropipet, tabung reaksi, kertas saring, dan Spektrofotometri UV-Vis.

3.3 Metode Kerja

3.3.1 Ekstraksi Sampel Jamu Rematik

Semua sampel diambil dosis satu kali dilarutkan dalam 15 mL kloroform :

metanol (9:1) dikocok, disaring, lalu diuapkan dipenangas dengan suhu 70ºC

sampai kering, sisa penguapan dilarutkan dalam 5 mL metanol.

 18

3.3.2 Uji Pendahuluan

a. H2SO4 pekat

Diambil 3 tetes sampel yang sudah diektrasi kemudian ditetesi dengan

H2SO4 1-2 tetes, warna larutan berubah menjadi merah muda.

b. HNO3 pekat

Diambil 3 tetes sampel yang sudah diektrasi kemudian tetesi dengan

HNO3, warna larutan perlahan hilang.

3.3.3 Uji Kualitatif dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

a. Pembuatan Fase Gerak

Dimasukkan campuran kloroform : aseton (4:1) sebanyak 3 mL ke dalam

bejana kromatografi, dielusi selama 1 jam.

b. Penyimpanan plat

Untuk plat digunakan lempeng KLT siap pakai yaitu lempeng silika gel

GF254.

c. Pembuatan Larutan Baku Pembanding

Dimasukkan deksametason 0,5 mg ke dalam 5 mL metanol.

d. Pembuatan Larutan Sampel

Sampel jamu sebanyak satu kali dosis dimasukkan ke dalam gelas kimia,

tambahkan kloroform dan metanol (9:1), diaduk lalu disaring, diuapkan

 19

diatas penangas dengan suhu 70ºC hingga hampir kering, ditambahkan 5

mL etanol.

e. Pembuatan Larutan Kontrol Positif

Dimasukan sampel jamu satu kali dosis ke dalam gelas kimia,

ditambahkan kloroform dan metanol (9:1), diaduk lalu disaring, diuapkan

diatas penangas dengan suhu 70ºC hingga hampir kering, dilarutkan

dengan 5 mL etanol, dan ditambahan 0,5 mg deksametason.

f. Pengujian KLT

Dimasukkan plat KLT yang berukuran 5×8 cm ke dalam bejana

kromatografi yang telah dijenuhkan terlebih dahulu. Plat KLT 1

ditotolkan larutan baku pembanding, plat KLT 2 ditotolkan larutan

kontrol positif, dan plat ke 3 ditotolkan dengan sampel jamu asam urat.

Ditunggu hingga larutan elusi merambat pada plat KLT diihat noda

dengan sinar UV 366 nm, diberi tanda noda dan hitung niai Rf, lalu

bandingkan nilai Rf sampel dengan Rf baku pembanding.

3.3.4 Uji Kuantitatif dengan Metode Spektrofotometer UV-Vis

a. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

Diukur variasi konsentrasi terbesar dari deksametason untuk menentukan

panjang gelombang maksimum.

 20

b. Pembuatan Larutan Blanko

Menggunakan larutan metanol PA.

c. Pembuatan Larutan Induk Baku Pembanding Deksametason 1000

ppm

Deksametason ditimbang sebanyak 25 mg, dimasukkan ke dalam labu

ukur 25 mL. ditambahkan dengan larutan blanko hingga garis tanda,

kocok homogen. Larutan tersebut memiliki konsentrasi 1000 ppm.

d. Variasi konsentrasi larutan deksametason 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, 8

ppm 10 ppm, dan 12 ppm

Memipet larutan induk sebanyak 20 µL, 40 µL, 60 µL, 80 µL,100 µL,

120 µL, ke dalam labu ukur 10 mL, ditambahkan larutan blanko hingga

garis tanda. Kemudian dibaca λ maksimum menggunakan

spektrofotometri UV-Vis.

e. Pengukuran menggunakan spektrofotometri UV-Vis

Hasil penotolan pada KLT yang mempunyai Rf sama dengan larutan

standar deksametason diekstraksi, diambil 1 mL hasil ekstraksi dilarutkan

dalam 10 mL larutan induk. Dimasukkan masing-masing larutan ke

dalam kuvet, diukur dengan spektrofotometri UV-Vis, dengan panjang

gelombang 239 nm dan dihitung kurva baku persamaan linier. Sehingga

didapatkan persamaan kurva baku Y = bx + a dan nilai koefisien dan

korelasi (r) (Chan, Lam, Lee dan Zhang., 2004).

 21

f. Pengukuran Absorbansi Sampel

Kadar dari sampel jamu diketahui berdasarkan persamaan kurva baku Y

= bx + a, dengan Y nilai absorbansinya sebagai y dan x adalah kadar

terukur b/v (Ibrahim, 2016).

 BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Pengumpulan Sampel Jamu Asam Urat

Hasil pengumpulan jamu rematik, diambil sebanyak 10 merek yang paling

diminati masyarakat berdasarkan rumus :

n = 12 = 10

1 + 12 x 10% 2

4.2. Hasil Uji Pendahuluan Reaksi Warna

Uji reaksi warna bertujuan untuk mengetahui adanya gugus fungsi

deksametason pada sampel jamu. Hasil uji reaksi warna dapat dilihat pada Tabel

4.1.

22
 23

Tabel 4.1

Hasil Uji Pendahuluan

Sampel Jamu Pereaksi Hasil

H2SO4 (+) Merah muda

Sampel 1
HNO3 (+) Warna memudar
H2SO4 (-) Kuning
Sampel 2
HNO3 (-) Kuning
H2SO4 (-) Kuning
Sampel 3
HNO3 (-) Orange
H2SO4 (-) Kuning kehijauan
Sampel 4
HNO3 (-) Orange tipis
H2SO4 (-) Kuning
Sampel 5
HNO3 (-) Orange tipis
H2SO4 (+) Merah muda
Sampel 6
HNO3 (+) Warna memudar
H2SO4 (-) Kuning
Sampel 7
HNO3 (-) Orange
H2SO4 (-) Kuning kecolatan
Sampel 8
HNO3 (-) Orange
H2SO4 (-) Kuning
Sampel 9
HNO3 (-) Kuning kehijauan
H2SO4 (-) Kuning
Sampel 10
HNO3 (+) Orange tipis
H2SO4 Merah muda
Kontrol positif
HNO3 Warna jamu perlahan hilang
H2SO4 Warna merah muda
Baku pembanding
HNO3 Warna tidak berubah
Keterangan : + : hasil positif
- : hasil negatif
 24

Uji pendahuluan pada 10 sampel jamu dilakukan untuk membuktikan ada

tidaknya bahan kimia obat deksametason dalam jamu. Dari hasil yang didapatkan

dari uji pendahuluan ini ada dua sampel yang teridentifikasi dan perubahan warna

seperti pada literatur, yaitu sampel 1 dan 6. Penambahan asam-asam pekat

berfungsi untuk membuktikan adanya turunan steroid. Penambahan H2SO4 pekat

untuk membentuk turunan asetil di dalam kloroform, asetil merupakan turunan

dari steroid. Senyawa steroid akan mengalami dehidrasi dengan ditambahkannya

asam kuat dan membentuk gram yang memberikan reaksi warna. Penambahan

HNO3 untuk menunjukan adanya gugus benzena (cincin fenil) yang memecah

protein menjadi gugus benzena.

4.3. Uji Kualitatif dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Kromatografi adalah teknik pemisahan campuran berdasarkan perbedaan

kecepatan perambatan komponen dalam medium tertentu. Komponen pada

kromatografi akan dipisahkan antara dua fase yaitu fase gerak dan fase diam.

Hasil perhitungan Rf pada KLT dapat dilihat pada Tabel 4.2.

 25

Tabel 4.2

Hasil Perhitungan Harga Rf

Sampel Harga Rf

Sampel 1 0,24
Sampel 2 0,44
Sampel 3 0,34
Sampel 4 0,59
Sampel 5 0,53
Sampel 6 0,21
Sampel 7 0,45
Sampel 8 0,16
Sampel 9 0,17
Sampel 10 0,17
Baku Pembanding 0,2
Kontrol + 0,2

Kromatografi lapis tipis dapat digunakan untuk identifikasi dan pemisahan,

senyawa-senyawa yang terpisah pada lapisan tipis diidentifikasi dengan melihat

flouroresi dalam sinar ultraviolet dan mencari harga Rf. Dari hasil KLT dengan

fase gerak kloroform : aseton (4:1) diperoleh Rf baku murni deksametson 0,2 dan

kontrol positif dari sampel 0,2. Sampel yang memiliki Rf hampir sama dengan

kontrol positif adalah sampel 1 dan sampel 6, kedua sampel tersebut positif

mengandung bahan kimia obat deksametason. Untuk memastikan lebih lanjut

kadar deksametason yang ada dalam sedian jamu asam urat maka dilakukan

analisis kuantitatif menggunakan spektroftometi UV-Vis.

 26

4.4 Hasil Uji Kuantitatif dengan Spektrofotometri UV-Vis

Spektrofotometri UV-Vis digunakan untuk pemeriksaan kadar

deksametason yang terdapat pada jamu asam urat dari hasil uji kualitatif

menggunakan KLT. Baku murni deksametason diukur panjang gelombangnya

pada rentang panjang maksimum 200-400 nm, didapat hasil scanning larutan

standar deksametason λ maksimum 239,0 nm. Panjang gelombang deksametason

dapat dilihat pada Gambar 4.1 dan hasil serapan variasi konsentrasi

deksametason dapat dilihat pada Tabel 4. 3.

.
Gambar 4.1
Panjang gelombang maksimum deksametason 239,0 nm
 27

Tabel 4.3

Hasil Serapan Variasi Konsentrasi Deksametason

Konsentrasi Serapan

2 ppm 0,248
4 ppm 0,335
6 ppm 0,455
8 ppm 0,589
10 ppm 0,714
12 ppm 0,849

4.5 Hasil Penentuan Kurva Linearitas Deksametason

Dari hasil pengukuran serapan pada konsentrasi 2 ppm sampai 12 ppm pada

panjang gelombang 239 nm diperoleh hubungan linear antara konsentrasi dengan

serapan dimana y = 0,0611x + 0,1044 dan koefisien relasi atau r = 0,996.

Persamaan garis regresi dapat dilihat pada Gambar 4.2

Kurva Linearitas
1

0,8

0,6
(nm)
A

0,4

0,2

0
0 5 10 15
C
(ppm)
Gamabar 4.2
Kurva Linearitas Deksametason
 28

4.6 Hasil Penentuan Kadar Sampel

Dihitung kadar sampel yang teridentifiasi deksametason dari serapan

sampel pada spektrofotometri UV-Vis berdasarkan persamaan y = 0,0611x +

0,1044. Hasil perhitungan kadar sampel dapat dilihat pada Tabel 4.4.

Tabel 4.4

Hasil Penentuan Kadar Sampel

Konsentrasi
Sampel Pengujian Absorban Kadar rata-rata Kadar sampel
(ppm)
(mg)
I 0,201 1,430
1 II 0,205 1,417 1,425 ± 0,202 0,7125
III 0,201 1,430
I 0,220 1,088
6 II 0,218 1,067 1,071 ± 0,217 0,5355
III 0,215 1,058

Terdapat dua sampel jamu yang positif mengandung bahan kimia obat

deksametason. Seharusnya di dalam jamu tidak boleh terdapat bahan kimia obat

karena jamu dibuat dari bahan-bahan alami. Sesuai dengan peraturan

PERMENKES No.006 tentang industri dan usaha obat tradisional Tahun 2012

Pasal 37 (1) yang berbunyi setiap industri dan usaha obat tradisional dilarang

membuat segala jenis obat tradisional yang mengandung bahan kimia hasil isolasi

atau sintetik yang berkhasiat obat. Perhitungan kadar rata-rata pada dua sampel

jamu asam urat didapatkan hasil kadar deksametason dalam 1 bungkus jamu,

sampel 1 sebesar 0,7125 mg dan sampel 6 sebesar 0,5355 mg.

 BAB V

SIMPULAN DAN SARAN

5.1 Simpulan

1. Terdapat 2 sampel jamu asam urat yang positif mengandung bahan kimia

obat deksametason dari 10 sampel jamu asam urat yang didapatkan dari

Pasar Pujasera Subang.

2. Kadar deksametason dalam sediaan jamu asam urat yang ada pada sampel

1 sebesar 0,7125 mg dan sampel 6 sebesar 0,5355 mg.

5.2 Saran

1. Perlu dilakukan pemeriksaan kembali untuk jamu asam urat yang beredar

di kota-kota lainnya.

2. Perlu dilakukan pemeriksaan bahan kimia obat selain deksametason pada

jamu asam urat.

3. Dapat dilakukan kembali pemeriksaan dengan metode yang lain.

29
 30

DAFTAR PUSTAKA

Andry, Saryono, dan Upoyo., 2009. Analisis Faktor-Faktor yang

Mempengaruhi Kadar Asam Urat Pada Pekerja Kantor di Desa
Karang Turi Kecamatan Bumiayu Kabupaten Berebes. Jurnal
Keperawatan Soedirman.

Almatsier, Sunita., 2005. Pengaruh Asupan Purin dan Cairan Terhadap

Kadar Asam Urat. Jakarta : PT Gramedia Pustaka Utama.

Beers, S. 2013. Jamu Sakti Basmi Penyakit, Awet Muda dan Kecantikan,
Diterjemahkan oleh: Iryani. Jakarta : PT. Ufuk Publishing House.

BPOM RI, 2006. Bahaya Bahan Kimia Obat (BKO) yang Dibubuhkan
kedalamObatTradisional.(http//www.pom.go.id/new/index.php.view/berit
a/144/BAHAYA- BAHAYA-BAHAN-KIMIA-OBAT-BKO-YANG- DI
BUBUHKAN-KEDALAM-OBAT-TRADISIONAL—JAMU-html)diunduh
pada 10 Maret 2017.

BPOM RI, 2005. Peraturan Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan
Republik Indonesia Nomor HK 00.05.41.1384 tentang Kriteria dan
Tata Laksana Pendaftaran Obat Tradisional, Obat Herbal Terstandar
dan Fitofarmaka, Jakarta : Kepala BPOM

Chan, C.C., Lam, H., Lee, Y.C., and Zhang, X., 2004. Analythical Method
Validation and Instrument Performance Verification, 16, Jhon Wiley &
Soons, Inc., USA.

Debjit Bhowmik, 2009. Journal of Chemical and Pharmaceutical Research 1

(1),163-177.

Depkes RI, 1990. Peraturan Menteri Kesehatan RI No.

416/Menkes/Per/IX/1990, Jakarta.

Depkes RI, 1979. Materia Medika Indonesia Jilid III, Hal 63-67, Jakarta, Ditjen
POM Republik Indonesia.

Desi L. Anggraeni, Rusdi B, Hilda W. Aprilia, 2015., Pengembangan Analisis

Parasetamol dan Deksametason pada Jamu Pegal Linu dengan Metode
 31

Ekstraksi Fasa padat dan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.,

UNISBA., Bandung.

Ditjen POM, Depkes RI,, 1985, Cara Pembuatan Simplisia. Departemen

kesehatan RI. Jakarta, 1-27.

Dr. Harmita, Apt., 2006. Analisis Kuantitatif Bahan Baku dan Sedian
Farmasi., Percetakan CIPTA KREASI BERSAMA, Jakarta. Hal. 134-145.

Gandjar, I.G, dan Rohman., 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta : Pustaka
Pelajar. Hal. 419, 425.

Giveon, S.M, 2003. Are People WHO use “Natural Drugs” Aware of Their
Potentially Harmful Side Effects and Reporting to Family, Patient
Education and Counseling, 53, 5-11.

Hadisoebroto Ginayanti, M.Si., Apt, dkk, 2016, Modul Praktikum Kimia

Farmasi Analisis., Universitas Al-Ghifari Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam.

Junaidi, 2012. Stroke Waspadai Ancamannya. Yogyakarta : ANDI.

Khopkar, S.M., 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Penerbit Universitas

Indonesia. Jakarta.

Krisnatuti, dkk., 2008, Perencanaan Menu untuk Penderita Asam Urat,

Penebar Swadaya, Jakarta.

Mahesh, N., Samtani., William J. Jusko., 2005. Stability of Dexamethasone

Sodium Phosphate in Rat Plasma. Internasional Journal of Pharmaceutics.
301. Elsevier. Hal. 1.

Peng, Z., 2006, Quality Control Of Herbal Medicine: Chromatographic

Fingerprinting and Scrining For Adulterants. National Univesity Of
Singapore.

Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 007. Registrasi Obat

Tradisional.,Tahun 2012.
 32

Puri Ratna, S.farm., 2013, Laporan Praktek Kerja Profesi Apoteker di Balai
Besar Pengawasan Obat dan Makanan Bidang Pengujian Terapeutik,
Narkotika, Obat Tradisional, Kosmetika dan Produk Komplemen.
Universitas Jendral Achmad Yani, Cimahi.

Rohman Abdul., 2009, Kromatografi Untuk Analisis Obat. Edisi

Perama,Yogyakarta. Hal. 44-54.

Satiadarma, K., Mulja, M, dan Tjahjono., 2004. Azas Pengembangan Prosedur

Analisis. Edisi I. Surabaya: Airlangga. Halaman 87-94.

Suherman, K.S., 2007, Ardenokortikotoprin, Ardenokortikosteroid, Analog

Sintetik dan Antagonisnya. Dalam Farmakologi dan terapi. Edisi V,
Jakarta : Penerbit Bagian Farmakologi FKUI. Hal. 486-487, 492-493.

Sustrani, Lenny., 2007. Asam Urat. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama.

Tjay, T.H., dan Rahardja, K. (2002). Obat-Obat Penting. Edisi V, Cetakan Ke-2.
PT. Gramedia. Jakarta. Hal : 685, 770.
 33

LAMPIRAN I

DIAGRAM ALUR PENELITIAN

Pengumpulan Sampel
Jamu

Uji Pendahuluan
Uji Pendahuluan Ekstraksi Sampel
1. H2SO4
2. HNO3

Uji Kualitatif
 Pembuatan Fase Gerak
Kromatografi Lapis Tipis  Pembuatan larutan baku
Kr pembanding
 Pembuatan Larutan
Sampel
 Pembuatan Larutan
Kontrol Positif
 Pengujian Dengan KLT
untuk Mencari Harga Rf

Uji Kuantitatif  Pembuatan Larutan Blanko

 Pembuatan larutan Baku
Spektrofotometri UV-Vis Pembandig Deksametason
2,4,6,8,10,12 ppm
 Pembuatan Kurva Baku
 Pembuatan Variasi Konsentrasi
Larutan Sampel
 Pengujian Sampel
Spektrofotometri UV-Vis
 34

LAMPIRAN II

FOTO HASIL PENGUMPULAN SAMPEL

Sampel Jamu
 35

LAMPIRAN III

FOTO HASIL EKSTRAKSI SAMPEL

Hasil Ekstrasksi Sampel Hasil Ekstraksi Sampel

 36

LAMPIRAN IV

FOTO HASIL UJI PENDAHULUAN

Baku pem K+
+ S1 S2

S3 S4 S5 S6
K+ K+ K+ S3

K+
S8
S7 S3
S9 S10
K+ S3

K+

Hasil Uji Reaksi Warna Dengan Pereaksi H2SO4

Baku pem K+ S1
+ S2

S4 S5 S6
S3

S9
S7 S8 S10

Hasil Uji Reaksi Warna Dengan Pereaksi HNO3

 37

LAMPIRAN V

FOTO HASIL UJI KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

Bp k+ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Hasil Uji KLT Dengan Kloroform : Aseton (4:1)

 38

LAMPIRAN VI

HASIL PERHITUNGAN

1. Perhitungan Populasi Sampel

n = 12 = 10

1 + 12 x 10% 2

2. Perhitungan fase gerak kloroform : Aseton (4:1) dalam 3 ml

Kloroform 4 : Aseton 1 = 5

3. Pengenceran variasi konsentrasi

V1 . N1 = V2 . N2

1000 ppm . 0,02 ml = 10 × ?

20 = 2 ppm
10

V1 . N1 = V2 . N2

1000 ppm . 0,04 ml = 10 × ?

40 = 4 ppm
10

V1 . N1 = V2 . N2

1000 ppm . 0,06 ml = 10 × ?

60 = 6 ppm
10
V1 . N1 = V2 . N2
 39

1000 ppm . 0,08 ml = 10 × ?

80 = 8 ppm
10

V1 . N1 = V2 . N2

1000 ppm . 0,10 ml = 10 × ?

100 = 10 ppm
10

V1 . N1 = V2 . N2

1000 ppm . 0,12 ml = 10 × ?

120 = 12 ppm
10

4. Perhitungan Hasil Penentuan Kadar Sampel

Sampel 1

Pengujian Absorban (Y) Konsentrasi (X)

I 0,201 1,430

II 0,205 1,417

III 0,201 1,430

Rata-rata Y = 0,201 + 0,205 + 0,201 Rata-rata X = 1,430 + 1,417 + 1,430

= 0,202 = 1,425
 40

Kadar sampel = rata-rata (X) × faktor pengenceran × pengenceran sampel %

Kadar Sampel = 1,425 × 100 = 142,5 × 5 = 0,7125 mg

100

Sampel 2

Pengujian Absorban (Y) Konsentrasi (X)

I 0,220 1,088

II 0,218 1,067

III 0,215 1,058

Rata-rata Y = 0,220 + 0,218 + 0,215 Rata-rata X = 1,088 + 1,067 + 1,058

= 0,217 = 1,071

Kadar sampel = rata-rata (X) × faktor pengenceran × pengenceran sampel %

Kadar Sampel = 1,071 × 100 = 107,1 × 5 = 0,5355 mg

100

5. Hasil Perhitungan Persamaan Garis Regresi

Konsentrasi (X) Serapan (Y) XY X2 Y2

2 ppm 0,248 0,496 4 0,062
4 ppm 0,335 1,340 16 0,112
6 ppm 0,455 2,730 36 0,207
8 ppm 0,589 4,712 64 0,347
10 ppm 0,714 7,140 100 0,510
12 ppm 0,849 10,188 144 0,721
∑= 42 3,190 26,606 364 1,958
̅= 7 0,532 4,434 60,667 0,326