Eurachem 2014 Guide To Method Validation - En.id

Fitness untuk Tujuan
Metode analitis
Sebuah Panduan Laboratorium untuk Validasi Metode dan Topik Terkait
Edisi Kedua 2014

Eurachem Panduan
Fitness untuk Tujuan dari Metode Analytical

Sebuah Panduan Laboratorium untuk Validasi Metode dan Topik Terkait
Edisi kedua
Ucapan Terima Kasih

Dokumen ini telah diproduksi oleh anggota Metode Kelompok Kerja Validasi Eurachem dan lain-lain terkooptasi untuk tugas ini. Mereka yang telah
memberikan kontribusi untuk edisi ini tercantum di bawah ini.
kelompok proyek
Vicki Barwick LGC (UK)

Pedro P. Morillas Bravo Canal de Isabel II Gestión (ES)
Stephen LR Ellison LGC (UK)
Joakim Engman Badan Pangan Nasional (SE)
Elin LF Gjengedal Norwegia University of Life Sciences (NO)
Ulla Oxenbøll Lund Eurofins Miljø A / S (DK)
Bertil Magnusson (redaksi) SP Technical Research Institute Swedia (SE)
Hans-Thomas Müller Mersin (TR)
Marina Patriarca Istituto Superiore di Sanità (IT)
Barbara Pohl Merck KGaA (DE)
Piotr Robouch Komisi Eropa (UE)
Lorens P. Sibbesen (ketua) Labquality International (DK)
Elvar Theodorsson University Hospital di Linköping (SE)
Florent Vanstapel Rumah Sakit Universitas Leuven, Leuven (BE)
Isabelle Vercruysse BELAB (BE)
Aysun Yilmaz Cevre Makanan dan Laboratorium Analisis Industri (TR)
Perihan Yolci Ömeroglu Okan University (TR)
Ulf Örnemark (redaksi) Emendo Dokumentgranskning (SE)
© Copyright
Hak cipta dokumen ini dipegang oleh para penulis yang menyumbangkan. Semua pertanyaan mengenai reproduksi dalam bentuk apapun, termasuk
terjemahan, harus diarahkan ke sekretariat Eurachem. Teks tidak dapat disalin untuk dijual kembali.
Direkomendasikan kutipan
Publikasi ini harus dikutip * sebagai: “B. Magnusson dan U. Örnemark (eds.) Eurachem Panduan: The Fitness untuk Tujuan Metode Analytical
- Sebuah Panduan Laboratorium untuk Validasi Metode dan Topik Terkait, (2 nd ed. 2014). ISBN 978-91-87461-59-0. tersedia dari www.eurachem.org
.”
* Tunduk pada persyaratan jurnal
saya
ii
Fitness untuk Tujuan dari Metode Analytical Eurachem Panduan
Isi
Kata Pengantar untuk edisi kedua ............................................. .................................................. .. 1
Kata Pengantar untuk edisi pertama ............................................. .................................................. ...... 2
Singkatan dan simbol ............................................... .................................................. ....... 3
1 Pengantar ................................................. .................................................. ..................... 5
1.1 Dasar Pemikiran dan ruang lingkup untuk Panduan ini ............................................ .......................................... 5
1.2 Catatan tentang penggunaan Panduan ini ........................................... .................................................. . 5

1.2.1 Terminologi ................................................. .................................................. ................................... 5
1.2.2 Cepat Referensi ................................................ .................................................. ............................ 6
2 Apa metode validasi? .................................................. ............................................. 7
2.1 Definisi ................................................. .................................................. ........................... 7
2.2 Apa perbedaan antara validasi dan verifikasi? ............................................ 7
3 Mengapa metode validasi diperlukan? .................................................. .............................. 9
3.1 Pentingnya pengukuran analitis .............................................. ................................. 9
3.2 Tugas profesional ahli kimia analitis ........................................... ....................... 9
3.3 pengembangan metode ................................................ .................................................. ........... 9
4 Kapan metode divalidasi atau diverifikasi? .................................................. ........... 11
4.1 Validasi metode ................................................ .................................................. .............. 11
4.2 Verifikasi Metode ................................................ .................................................. ........... 11
5 Bagaimana seharusnya metode divalidasi? .................................................. ............................... 13
5.1 Yang melakukan validasi metode? .................................................. ................................ 13

5.1.1 Pendekatan untuk validasi metode .............................................. .................................................. ..... 13
5.1.2 Pendekatan antar laboratorium ................................................ .................................................. ................ 13
5.1.3 pendekatan tunggal-laboratorium .............................................. .................................................. .............. 13
5.2 Tingkat studi validasi .............................................. .................................................. 13
5.3 rencana validasi dan laporan .............................................. .................................................. . 14
5.4 alat validasi ................................................ .................................................. .................. 15

5.4.1 Kosong ................................................. .................................................. ............................................ 15
5.4.2 sampel uji rutin ............................................... .................................................. ........................ 15
5.4.3 bahan berduri / solusi .............................................. .................................................. ................ 15
5.4.4 bahan yang dikeluarkan ................................................ .................................................. ........................... 15
5.4.5 standar pengukuran ................................................ .................................................. .................. 15
5.4.6 Statistik ................................................. .................................................. ........................................ 16
5.5 persyaratan validasi ................................................ .................................................. ... 16
5.6 Proses validasi metode ............................................... .................................................. . 16
6 karakteristik kinerja metode ............................................... ................................ 19
6.1 Selektivitas ................................................. .................................................. .......................... 19

6.1.1 Istilah dan definisi ............................................... .................................................. ...................... 19
6.1.2 Efek dari gangguan ............................................... .................................................. .................... 19
6.1.3 Penilaian selektivitas ............................................... .................................................. ................ 19
aku aku aku

6.2 Batas deteksi dan batas kuantifikasi ........................................... ........................ 20

6.2.1 Istilah dan definisi ............................................... .................................................. ...................... 20
6.2.2 Penentuan standar deviasi pada tingkat rendah .......................................... ........................... 21
6.2.3 Memperkirakan LOD ................................................ .................................................. ............................. 24
6.2.4 Memperkirakan LOQ ................................................ .................................................. ............................. 24
6.2.5 prosedur alternatif ................................................ .................................................. ................... 25
6.2.6 Kemampuan deteksi untuk analisis kualitatif ............................................ .................................... 25
6.3 Jarak kerja ................................................ .................................................. ................... 27

6.3.1 Definisi ................................................. .................................................. ...................................... 27
6.3.2 Pertimbangan untuk studi validasi ............................................. ............................................... 27
6.3.3 Metode dan jangkauan kerja alat ............................................. ................................................ 27
6.3.4 Menilai instrumen jangkauan kerja .............................................. .................................................. 27
6.3.5 Menilai jangkauan kerja metode .............................................. .................................................. ..... 28
6.4 sensitivitas analitis ................................................ .................................................. ......... 30

6.4.1 Definisi ................................................. .................................................. ...................................... 30
6.4.2 Aplikasi ................................................. .................................................. .................................. 30
6.5 Kebenaran ................................................. .................................................. ............................ 30

6.5.1 Terminologi untuk menggambarkan kualitas pengukuran ............................................. ................................... 30
6.5.2 Penentuan bias ............................................... .................................................. ...................... 31
6.5.3 Menafsirkan pengukuran Bias ............................................... .................................................. ....... 34
6.6 Presisi ................................................. .................................................. ............................ 35

6.6.1 Replikasi ................................................. .................................................. .................................... 35
6.6.2 kondisi presisi ................................................ .................................................. ....................... 35
6.6.3 batas presisi ................................................ .................................................. ............................... 36
6.6.4 penentuan simultan pengulangan dan presisi menengah ......................................... 36
6.7 ketidakpastian pengukuran ................................................ .................................................. . 38
6.8 Kekasaran ................................................. .................................................. ........................ 38

6.8.1 Definisi ................................................. .................................................. ...................................... 38
6.8.2 uji kekasaran ................................................ .................................................. .............................. 38
7 Menggunakan metode divalidasi ............................................... .................................................. . 41
8 Menggunakan data validasi untuk merancang kontrol kualitas ........................................... ................... 43
8.1 Pengantar ................................................. .................................................. ...................... 43
8.2 kendali mutu internal ............................................... .................................................. ...... 43
8.3 kontrol kualitas eksternal ............................................... .................................................. ..... 44
9 Dokumentasi metode divalidasi .............................................. ................................ 45
9.1 Dari rancangan untuk versi final ............................................. .................................................. .. 45
9.2 Rekomendasi ................................................. .................................................. ............ 45

9.2.1 Memeriksa petunjuk ............................................... .................................................. ................ 45
9.2.2 Rekomendasi dalam standar ............................................... .................................................. ....... 45
9.2.3 Kontrol berkas ................................................ .................................................. ........................... 45
10 Implikasi dari validasi data untuk menghitung dan melaporkan hasil ........................ 47
Lampiran A - Cara protokol dokumentasi ............................................ .............................. 49
Lampiran B - secara statistik dari batas perhitungan deteksi ........................................ ........ 53
Lampiran C - Analisis varians (ANOVA) ......................................... ................................... 54
Lampiran D - Catatan tentang analisis kualitatif ........................................... ..................................... 56
Bibliografi ................................................. .................................................. ......................... 59
iv
Kata Pengantar untuk edisi kedua
Sejak edisi pertama dari Panduan ini pada tahun 1998, sejumlah perkembangan penting dalam kualitas analitis telah terjadi.
Pertama, seri ISO 9000 standar, yang secara luas digunakan untuk memberikan dasar untuk sistem manajemen mutu, telah
direvisi. filsafat merupakan bagian integral dari standar penilaian kesesuaian internasional dan panduan, yang menyokong
kebutuhan kompetensi untuk laboratorium, uji profisiensi (PT) penyedia dan bahan referensi (RM) produsen.
Dokumen-dokumen ini semua menekankan pentingnya menggunakan metode divalidasi.
Kedua, beberapa panduan umum atau sektor-spesifik pada metode validasi telah direvisi atau dikembangkan.
undang-undang Uni Eropa berisi persyaratan wajib untuk pengukuran analitis di berbagai sektor.
Ketiga, banyak usaha telah diinvestasikan oleh masyarakat analitis dalam menerapkan konsep ketidakpastian. Misalnya, dalam
pedoman diharmoniskan untuk validasi laboratorium tunggal dari metode analisis (2002) IUPAC meramalkan bahwa, “... dengan
meningkatnya ketergantungan pada ketidakpastian pengukuran sebagai indikator kunci dari kedua kebugaran untuk tujuan dan
keandalan hasil, ahli kimia analitik akan semakin melakukan validasi pengukuran untuk mendukung estimasi ketidakpastian ...”. Dalam
tahun-tahun berikutnya, badan akreditasi yang dikeluarkan kebijakan dan dokumen pedoman jelas mengakui penggunaan data
validasi metode dalam proses estimasi ketidakpastian pengukuran.
Selanjutnya, kosakata Internasional metrologi - konsep dasar dan umum dan istilah terkait (VIM) telah direvisi secara
substansial, mempertimbangkan kimia akun dan biologi
pengukuran. Meskipun terminologi yang berhubungan dengan metode validasi jauh dari harmonis, situasi telah membaik. VIM juga
merupakan dokumen normatif untuk laboratorium terakreditasi, misalnya ISO / IEC 17025 dan ISO 15189.
Edisi kedua dari Panduan ini bertujuan untuk mencerminkan perubahan dalam standar internasional dan dokumen bimbingan dan
menempatkan kurang penekanan pada istilah dan definisi. Sebaliknya Panduan mengacu pada VIM dan sumber-sumber lain yang
tersedia. Sebagai konsekuensinya, daftar istilah dan definisi telah dihilangkan dari lampiran. Sastra dikutip dalam edisi ini Halaman
ini tercantum dalam Daftar Pustaka di bagian akhir. sumber tambahan dan literatur yang berhubungan dengan pengembangan
metode dan validasi tersedia sebagai 'daftar Reading' di bawah item menu 'Publikasi' di situs Eurachem di www.eurachem.org.
Lampiran A direvisi sebagai konsekuensi dari perubahan ISO 78-2. Edisi ini juga telah diperluas untuk mencakup informasi atas
dasar statistik batas perhitungan deteksi (Lampiran B), analisis varian (Lampiran C) dan analisis kualitatif (Lampiran D).
Hal ini menjadi semakin umum di antara laboratorium rutin, terutama di sektor klinis, menggunakan sistem pengukuran yang
tersedia secara komersial. Ini berarti bahwa tanggung jawab untuk validasi terutama terletak pada produsen. Pekerjaan
laboratorium akan fokus pada verifikasi data kinerja dipublikasikan produsen dan menunjukkan bahwa metode bekerja pada
tempat akhir-pengguna. Namun, melihat kembali ke kata pengantar untuk edisi pertama, kami menyimpulkan bahwa enam
prinsip yang dinyatakan masih relevan, dan konsisten dengan persyaratan standar internasional seperti ISO / IEC 17025.
MV 2014 1
Kata Pengantar untuk edisi pertama *
Sebuah inisiatif di Inggris untuk mempromosikan praktek yang baik dalam pengukuran analitis telah mengidentifikasi enam prinsip praktek
analitis yang, diambil bersama-sama, dianggap merupakan praktek terbaik. Enam prinsip yang dijelaskan secara lebih rinci dalam panduan
terpisah † adalah:
1. “Pengukuran Analytical harus dilakukan untuk memenuhi persyaratan yang disepakati.” (Yaitu untuk didefinisikan
objektif).
2. “Pengukuran Analytical harus dibuat dengan menggunakan metode dan peralatan yang telah
diuji untuk memastikan mereka cocok untuk tujuan.”
3. “Staf membuat pengukuran analitis harus baik berkualitas dan kompeten untuk melakukan
tugas.”(dan menunjukkan bahwa mereka dapat melakukan analisis dengan benar).
4. “Harus ada penilaian independen reguler dari kinerja teknis dari

laboratorium."
5. “Analytical pengukuran yang dilakukan di satu lokasi harus konsisten dengan yang dibuat
di tempat lain."
6. “Organisasi melakukan pengukuran analitis harus didefinisikan dengan baik kontrol kualitas dan
prosedur jaminan kualitas.”
Prinsip-prinsip ini juga relevan untuk laboratorium apakah mereka bekerja dalam isolasi atau memproduksi hasil yang perlu dibandingkan
dengan orang-orang dari laboratorium lain. Dokumen ini terutama dimaksudkan untuk membantu laboratorium dalam menerapkan Prinsip
2, dengan memberikan panduan tentang evaluasi metode pengujian untuk menunjukkan bahwa mereka cocok untuk tujuan.
*
Edisi pertama (1998) Panduan ini dikembangkan oleh Kelompok Kerja Eurachem dari rancangan awalnya diproduksi oleh LGC.
Orang-orang berikut adalah anggota kelompok Eurachem pada waktu itu:
D. Holcombe, P. De Bievre, D. Böttger, C. Eastwood, J. Hlavay, M. Holmgren, W. Horwitz, M. Lauwaars, B. Lundgren, L. Massart, J. Miller,
J. Morkowski, B . te Nijenhuis, B. Nyeland, R. Philipp, P. Radvila, J. SmeyersVerbeke, R. Stephany, M. Suchanek, C. Vandervoorst, H.
Verplaetse, H. Wallien, M. Walsh, W. Wegscheider,
D. Westwood, HJ van de Wiel.
† panduan manajer untuk VAM, UK Departemen Perdagangan dan Industri, Program Pengukuran Hari Analytical. Diterbitkan sebagai VAM
Prinsip M. Sargent. Anal. Proc., 1995, 32, 201-202.
MV 2014 2
Singkatan dan simbol
Singkatan berikut, akronim dan simbol terjadi dalam Panduan ini.
AMC Metode Komite analitis
ANOVA Analisis varians
AOAC International yang diakui secara global standar mengembangkan organisasi
ASTM International yang diakui secara global standar mengembangkan organisasi
BIPM Biro Internasional Berat dan Ukuran
CCQM Komite Konsultatif untuk Jumlah Zat - Metrologi dalam Kimia
CEN Komite Eropa untuk Standarisasi
CITAC Kerjasama Internasional Lacak Kimia Analitik
CLSI Klinis dan Laboratorium Standards Institute
CRM materi referensi bersertifikat
EA Eropa kerjasama untuk Akreditasi
EC Komisi Eropa
EPA Badan Perlindungan Lingkungan
EQA penilaian kualitas eksternal
Uni Eropa Uni Eropa
GUSI Evaluasi data pengukuran - Panduan untuk ekspresi ketidakpastian dalam pengukuran
ICH Konferensi Internasional tentang Harmonisasi Persyaratan Teknis Pendaftaran Farmasi untuk
Manusia Gunakan
IEC Komisi Electronik Internasional
ISO Organisasi Internasional untuk Standardisasi
IUPAC International Union of Pure and Applied Chemistry
JCGM Komite Bersama untuk Guides di Metrologi
LOD batas deteksi
LOQ batas kuantifikasi
NATA National Association of Testing Authorities
QA kualitas asuransi
QC kontrol kualitas
RSC Royal Society of Chemistry
SANCO Komisi Eropa Direktorat Jenderal Kesehatan dan Konsumen
SUAP Prosedur operasi standar
PT uji profisiensi
RM materi referensi
RSD relatif standar deviasi
UV / VIS ultraviolet / terlihat
VIM kosakata internasional metrologi - konsep dasar dan umum dan istilah terkait
MV 2014 3
b Bias mutlak
b (%) Bias relatif dalam%
kQ multiplier digunakan dalam menghitung batas kuantifikasi
m jumlah pengukuran
n jumlah observasi mereplikasi rata-rata saat melaporkan hasil
nb jumlah observasi kosong rata-rata ketika menghitung koreksi kosong
r batas pengulangan
R batas reproduktifitas
(%) recovery relatif (recovery jelas) di persen
(%) lonjakan pemulihan relatif dalam persen
s standar deviasi
s0 Diperkirakan standar deviasi dari hasil tunggal pada atau dekat konsentrasi nol standar deviasi digunakan
untuk menghitung sebuah LOD atau LOQ
s saya presisi antara standar deviasi
sr pengulangan standar deviasi
sR reproduktifitas standar deviasi
u ketidakpastian standar
x rata nilai (aritmatika rata-rata)
x ref nilai referensi
̅ berarti nilai pengukuran dengan metode alternatif, misalnya metode referensi
̅ berarti nilai sampel berduri dalam percobaan pemulihan menambahkan
konsentrasi dalam percobaan pemulihan
MV 2014 4
1. Perkenalan
1.1 Dasar Pemikiran dan ruang lingkup untuk Panduan metode kualitatif untuk menentukan adanya satu atau lebih
ini analit, misalnya konsep selektivitas dan batas deteksi (LOD).
Validasi metode merupakan syarat penting dalam praktek analisis

Panduan menghindari penekanan pada penggunaan statistik
kimia. Kebanyakan ahli kimia analitik menyadari pentingnya, tetapi

meskipun tidak diragukan lagi mereka dengan pengetahuan
mengapa hal itu harus dilakukan dan kapan, dan apa yang perlu tentang statistik dasar akan menemukan proses validasi
dilakukan, tidak selalu jelas bagi mereka. Beberapa analis yang metode yang lebih mudah untuk memahami dan
digunakan untuk melihat validasi metode sebagai sesuatu yang melaksanakan. Beberapa referensi yang dibuat untuk
hanya bisa dilakukan bekerja sama dengan laboratorium lain dan publikasi statistik dasar untuk ahli kimia [4, 5, 6].
karena itu menahan diri dari itu. Persyaratan dalam standar seperti
ISO / IEC 17025 [1], ISO 15189 [2] dan ISO 15.195 [3] telah
membantu dalam menjelaskan ini. Misalnya, kebutuhan untuk Pemahaman analis metode validasi dihambat oleh fakta
menunjukkan bahwa metode yang cocok untuk tujuan ditekankan bahwa banyak istilah metrologi dan teknis yang digunakan
dalam Pasal 5.4.2 dari ISO / IEC 17025: “ Laboratorium harus untuk menggambarkan proses untuk mengevaluasi metode
menggunakan tes dan / atau kalibrasi metode, termasuk metode bervariasi di berbagai sektor pengukuran analitis, baik dalam
pengambilan sampel, yang memenuhi kebutuhan pelanggan dan arti mereka dan cara mereka ditentukan. Panduan ini tidak
yang sesuai untuk pengujian dan / atau kalibrasi yang dilakukan ... " bisa mengatakan di mana istilah yang digunakan dengan
dan selanjutnya: " Ketika pelanggan tidak menentukan metode benar atau tidak benar meskipun dimaksudkan untuk
yang akan digunakan, laboratorium harus memilih metode yang memberikan beberapa klarifikasi. Saran terbaik ketika
tepat ... ”. Tujuan dari Panduan ini adalah untuk membahas isu-isu menggunakan istilah yang mungkin disalahpahami, adalah
yang berkaitan dengan metode validasi dan meningkatkan untuk menyatakan sumber dan yang konvensi telah
pemahaman pembaca tentang apa yang terlibat, mengapa digunakan. Hal ini tersirat dalam proses validasi metode
penting, dan memberikan beberapa gagasan tentang bagaimana bahwa penelitian untuk menentukan metode karakteristik
hal itu dapat dicapai. kinerja * dilakukan menggunakan peralatan yang sesuai
spesifikasi, bekerja dengan benar, dan cukup dikalibrasi. Oleh
karena itu, pedoman ini tidak mencakup secara khusus
konsep 'peralatan
kualifikasi' atau 'instrumen

Panduan ini diharapkan menjadi yang paling digunakan untuk)
kualifikasi'. Demikian juga analis melaksanakan penelitian
manajer laboratorium bertanggung jawab untuk memastikan
harus kompeten di bidang pekerjaan yang diteliti, dan memiliki
bahwa metode di bawah pengawasan mereka divalidasi secara
pengetahuan yang cukup terkait dengan pekerjaan yang
memadai dan b) analis bertanggung jawab untuk merencanakan
dapat membuat keputusan yang tepat dari pengamatan yang
dan melaksanakan studi tentang metode untuk tujuan validasi.
dilakukan sebagai studi berlangsung.
Staf lain mungkin menemukan bimbingan digunakan sebagai
sumber informasi latar belakang - staf senior dari sudut pandang
manajemen dan staf junior dari segi teknis atau pendidikan 1.2 Catatan tentang penggunaan Panduan ini
pandang. Petunjuk
1.2.1 Terminologi
Dalam revisi Panduan ini fokus utama telah memperbarui
berfokus pada laboratorium tunggal
terminologi dan sastra referensi untuk mencerminkan
validasi. Hal ini bertujuan untuk mengarahkan pembaca terhadap
perkembangan sejak Panduan ini pertama kali diterbitkan
protokol didirikan di mana ini ada dan di mana mereka tidak,
lima belas tahun yang lalu. Berkaitan dengan terminologi
memberikan pengantar sederhana untuk proses yang terlibat dalam
yang telah kita, mana mungkin, mengikuti 3 rd edisi VIM yang
validasi dan memberikan beberapa ide dasar untuk memungkinkan
pertama kali diterbitkan pada tahun 2007 [7, 8]. Ini telah
pembaca untuk merancang strategi validasi mereka sendiri. Saya t
dilengkapi,
termasuk
dimana perlu, dengan
referensi untuk lebih materi pada aspek teknis tertentu
validasi.
*
Panduan ini ditujukan untuk validasi metode kuantitatif. sinonim umum digunakan untuk karakteristik kinerja metode yang
'parameter kinerja metode', 'metrologi
Namun, beberapa prinsip yang dijelaskan di sini juga
karakteristik dan kinerja
relevan untuk
sifat.
MV 2014 5
terminologi yang digunakan dalam ISO / IEC 17025: 2005 [1], dokumen Panduan sering mengacu pada konsentrasi terukur
lain ISO [9, 10, 11] dan Pedoman Harmonized IUPAC untuk meskipun beberapa besaran lain secara teratur diselidiki di
Single-Laboratorium Validasi dari tahun 2002 [12] untuk mencerminkan laboratorium kimia [14]. Dalam proses sampling, persiapan
istilah yang umum digunakan di laboratorium analitis. Dalam beberapa sampel dan analisis istilah-istilah seperti 'sasaran
kasus mungkin sulit untuk memutuskan istilah yang digunakan ketika pengambilan sampel', 'sampel primer',
beberapa istilah yang serupa sedang digunakan. Untuk kejelasan telah
'kenaikan', 'gabungan
dianggap penting untuk menggunakan istilah secara konsisten di sampel', 'subsampel', 'laboratorium sampel', 'test sampel', 'porsi
seluruh Guide. Salah satu contoh adalah istilah yang digunakan untuk test' dan 'solusi test' dapat digunakan [15, 16]. Dalam Panduan
menggambarkan dokumen yang memberikan penjelasan rinci tentang ini biasanya kita menggunakan istilah umum 'sampel' atau 'test
metode yang akan divalidasi menggunakan personil dan peralatan sampel' [17]. * Hal yang paling penting yang digunakan dalam
Panduan didefinisikan dalam teks. Definisi dalam VIM, ISO 9000
[9] dan IUPAC [17, 18] telah disediakan sedapat mungkin. Istilah
di tertentu laboratorium. Untuk di VIM yang berkaitan dengan kimia analitik dijelaskan lebih
analisis kuantitatif VIM mengacu ke lanjut dalam Eurachem Panduan “Terminologi dalam
prosedur pengukuran, dalam ISO / IEC 17025 ini adalah metode, pengukuran analitis” [8]. Pengguna harus mencatat bahwa
dalam ISO 15189 [2] itu adalah masih ada kesepakatan universal tentang definisi beberapa
prosedur pemeriksaan dan banyak laboratorium mengacu pada istilah yang digunakan dalam metode validasi.
mereka Prosedur operasi standar
( SUAP). Kelompok kerja telah memutuskan untuk mematuhi ISO / IEC
17025 dan menggunakan istilah generik
1.2.2 Referensi Cepat
metode. Karena itu, Panduan ini menggunakan
umum dikenal istilah 'validasi metode' meskipun Dalam Pasal 6, kotak berbayang memberikan ' Referensi
'prosedur validasi' akan lebih tepat. cepat 'Saran terkait dengan karakteristik kinerja spesifik
sebuah metode.
Namun, diakui bahwa dalam banyak kasus laboratorium tidak akan
Istilah 'kekasaran' dan 'selektivitas' lebih disukai untuk 'ketahanan'
memiliki waktu dan sumber daya untuk melakukan eksperimen dalam
dan 'kekhususan' [13] sejak mantan digunakan oleh IUPAC [12]. rinci dijelaskan di sini. Melaksanakan operasi dijelaskan dalam kotak,
Berbagai istilah, misalnya 'kalibrasi', 'pengukuran', 'pengujian', menggunakan replikasi kurang dari yang disarankan, masih akan
'analisis' dan 'pemeriksaan' digunakan untuk menggambarkan menghasilkan informasi yang berguna dan tentu saja lebih baik
pekerjaan laboratorium. Panduan ini menggunakan 'analisis' daripada tidak bekerja sama sekali. Namun,
dalam pengertian umum dan menspesifikasikan, di mana itu
diperlukan, keadaan. Demikian pula, ini informasi yang diberikan akan kurang dapat diandalkan dibandingkan jika
replikasi penuh telah dimanfaatkan.
*
Sampel uji: Contoh, dibuat dari sampel laboratorium, dari mana
bagian uji dikeluarkan untuk pengujian atau analisis [17].
MV 2014 6
2 Apa metode validasi?
2.1 Definisi 2.2 Apa perbedaan antara validasi dan

definisi pengesahan dari tiga dokumen internasional verifikasi?
diberikan dalam Tabel 1. validasi metode pada dasarnya ISO 9000 [9] mendefinisikan verifikasi sebagaimana
adalah proses mendefinisikan persyaratan analitis, dan “Konfirmasi, melalui penyediaan bukti objektif, bahwa
mengkonfirmasikan bahwa metode yang dipertimbangkan persyaratan yang ditetapkan telah dipenuhi”. Hal ini sangat
memiliki kemampuan konsisten dengan apa yang mirip dengan definisi validasi pada Tabel 1. VIM [7]
membutuhkan aplikasi. Melekat dalam hal ini adalah menyatakan bahwa verifikasi “penyediaan bukti obyektif
kebutuhan untuk mengevaluasi kinerja metode ini. bahwa item yang diberikan memenuhi persyaratan tertentu”
Penghakiman metode kesesuaian penting; dalam metode dan bahwa validasi adalah “verifikasi, di mana persyaratan
terakhir validasi cenderung berkonsentrasi hanya pada yang ditentukan memadai untuk penggunaan yang
mengevaluasi karakteristik kinerja. Validasi metode dimaksudkan”.
biasanya dianggap terikat sangat erat dengan
pengembangan metode. Banyak karakteristik kinerja Sebuah laboratorium dapat mengadopsi prosedur divalidasi
metode (Tabel yang, misalnya telah diterbitkan sebagai standar, atau membeli
sistem pengukuran lengkap yang akan digunakan untuk aplikasi
2) yang berkaitan dengan metode validasi biasanya tertentu dari produsen komersial.
dievaluasi, setidaknya sekitar, sebagai bagian dari Dalam kedua kasus ini, dasar
pengembangan metode. Namun, penting untuk diingat kerja validasi telah dilakukan namun laboratorium masih perlu memastikan
bahwa validasi resmi versi final kemampuannya untuk menerapkan metode ini. Ini adalah verifikasi.
metode (yang didokumentasikan Ini berarti bahwa beberapa pekerjaan eksperimental harus
Prosedur) harus dilakukan. dilakukan untuk menunjukkan bahwa metode bekerja di
laboratorium pengguna akhir. Namun, beban kerja cenderung
Beberapa sektor menggunakan konsep 'validasi utama'
lebih sedikit dibandingkan dengan validasi dari metode yang
dan 'validasi sekunder', yang terakhir dalam arti verifikasi
telah dikembangkan di rumah.
[19]. Konsep 'kualifikasi' dan 'konfirmasi metrologi' [20]
juga tampaknya untuk menutupi verifikasi (Tabel 1).
Istilah validasi dan verifikasi dibahas lebih lanjut dalam

Panduan Eurachem terminologi dalam pengukuran
analitis [8].
Tabel 1 - Definisi konsep 'validasi' di ISO 9000, ISO / IEC 17025 dan VIM
Definisi Referensi
konfirmasi, melalui penyediaan bukti objektif, bahwa persyaratan untuk penggunaan atau aplikasi ISO 9000 [9] Sebuah
dimaksud tertentu telah dipenuhi
konfirmasi dengan pemeriksaan dan penyediaan bukti objektif bahwa persyaratan tertentu untuk ISO / IEC 17025 [1]
penggunaan yang dimaksudkan khusus dipenuhi
verifikasi, di mana persyaratan yang ditentukan memadai untuk penggunaan yang dimaksudkan VIM [7] b
Sebuah 'Proses kualifikasi' ISO 9000 mendefinisikan sebagai “proses untuk menunjukkan kemampuan untuk memenuhi persyaratan yang ditentukan”.
b VIM mendefinisikan 'verifikasi' sebagai “penyediaan bukti obyektif bahwa item yang diberikan memenuhi persyaratan yang ditentukan”
MV 2014 7
Tabel 2 - Sekilas karakteristik kinerja umum dievaluasi selama validasi metode
karakteristik kinerja
selektivitas
Batas deteksi (LOD) dan batas kuantifikasi (LOQ) Kerja kisaran sensitivitas
Analytical trueness
• Bias, Precision
pemulihan
• pengulangan, presisi menengah dan reproduktifitas Pengukuran
ketidakpastian Sebuah
Kekasaran (ketahanan)
Sebuah Strictly, ketidakpastian pengukuran bukanlah karakteristik kinerja prosedur pengukuran
tertentu tetapi milik hasil yang diperoleh dengan menggunakan bahwa prosedur pengukuran.
MV 2014 8
3 Mengapa validasi metode diperlukan?
3.1 Pentingnya pengukuran analitis keputusan berdasarkan hal itu dapat diambil dengan
keyakinan. Dengan demikian kinerja metode harus divalidasi
dan ketidakpastian pada hasil, pada tingkat tertentu
jutaan dari tes, pengukuran dan
kepercayaan, diperkirakan.
pemeriksaan yang dibuat setiap hari dalam ribuan laboratorium
Ketidakpastian harus dievaluasi dan dikutip dengan cara yang
di seluruh dunia. Ada alasan yang tak terhitung banyaknya
secara luas diakui, internal
mendasari mereka, misalnya: sebagai cara menghargai barang
konsisten dan mudah untuk menafsirkan [21]. Sebagian besar
untuk tujuan perdagangan; mendukung kesehatan; memeriksa
informasi yang diperlukan untuk mengevaluasi ketidakpastian dapat
kualitas air minum, makanan dan pakan; menganalisis
diperoleh selama validasi metode ini. Topik ini dibahas secara
komposisi unsur paduan untuk mengkonfirmasi kesesuaian
singkat dalam Bagian 6.7 dan secara lebih rinci dalam Eurachem /
untuk digunakan dalam konstruksi pesawat terbang; analisis
CITAC Panduan Mengukur Ketidakpastian
forensik dari cairan tubuh dalam penyelidikan kriminal. Hampir
di Analytical
setiap aspek masyarakat didukung dalam beberapa cara oleh
Pengukuran [22].
kegiatan analisis.
Terlepas dari seberapa baik metode dan bagaimana terampil
digunakan, masalah analitis dapat diselesaikan dengan analisis
sampel hanya jika mereka sampel sesuai dengan masalah.
Biaya melaksanakan pengukuran ini adalah tinggi dan biaya
Mengambil sampel yang tepat adalah pekerjaan yang terampil,
tambahan mungkin timbul dari keputusan yang dibuat atas
dasar hasil. Misalnya, tes menunjukkan makanan menjadi yang membutuhkan pemahaman tentang masalah dan kimia
tidak layak dikonsumsi dapat mengakibatkan klaim yang terkait. Sebuah laboratorium harus, sedapat mungkin,
kompensasi; tes mengkonfirmasi kehadiran obat terlarang menawarkan nasihat kepada pelanggan pada pengambilan
dapat mengakibatkan denda, penjara atau bahkan, di sampel sebagai bagian dari perawatan pelanggan. Jelas akan
beberapa negara, eksekusi. Jelas penting untuk membuat ada kesempatan ketika laboratorium tidak dapat sendiri
pengukuran yang benar dan dapat menunjukkan bahwa mengambil atau mempengaruhi pengambilan sampel. Pada
hasilnya adalah benar. kesempatan ini hasil analisis perlu dilaporkan atas dasar sampel
yang diterima, dan laporan harus membuat perbedaan ini jelas.
Kami memiliki sebagian besar (dan memang) difokuskan pada
3.2 Tugas profesional ahli kimia analitik
keseluruhan
Jika hasil analisis tidak dapat dipercaya maka ia memiliki sedikit

nilai dan analisis mungkin juga belum dilakukan. Ketika tujuan metode melakukan
pelanggan komisi kerja analisis dari laboratorium, diasumsikan validasi, yaitu menunjukkan bahwa metode yang 'cocok
bahwa laboratorium memiliki tingkat pengetahuan ahli bahwa untuk tujuan'. Namun, harus
pelanggan tidak memiliki sendiri. pelanggan mengharapkan mengakui bahwa studi validasi metode memberikan
untuk dapat mempercayai hasil yang dilaporkan dan biasanya manfaat tambahan untuk laboratorium melakukan validasi.
hanya menantang mereka ketika perselisihan muncul. Dengan Ini memberikan pengetahuan yang solid dan pengalaman
demikian laboratorium dan stafnya memiliki tanggung jawab rincian praktis melakukan metode, termasuk kesadaran
yang jelas untuk membenarkan kepercayaan pelanggan dengan setiap langkah penting dalam proses. Validasi memberikan
memberikan jawaban yang tepat untuk bagian analisis dari laboratorium dan karyawan keyakinan lebih besar dalam
masalah, kata hasil lain yang memiliki dibuktikan 'kebugaran hasil mereka sendiri.
untuk tujuan'. Tersirat dalam ini adalah bahwa tes yang dilakukan
sesuai untuk bagian analisis dari masalah yang keinginan
pengembangan 3.3 Metode
pelanggan dipecahkan, dan bahwa laporan akhir menyajikan
Pekerjaan validasi didahului dengan tahap pengembangan yang
data analisis sedemikian rupa bahwa pelanggan dapat dengan
mungkin melibatkan staf yang berbeda dan yang dapat
mudah memahaminya dan menarik kesimpulan yang tepat.
Validasi metode memungkinkan ahli kimia untuk menunjukkan mengambil beberapa bentuk. Pada satu ekstrim, mungkin
bahwa metode adalah 'cocok untuk tujuan'. Untuk hasil analisis melibatkan mengadaptasi metode yang ada dengan membuat
untuk menjadi bugar untuk digunakan itu harus dapat dipercaya perubahan kecil sehingga sangat cocok untuk aplikasi baru.
bahwa setiap Sebagai contoh, sebuah metode diperlukan untuk menentukan

toluena dalam air mungkin diadaptasi dari metode yang
diterapkan untuk benzena dalam air. matriks adalah sama, dan
dua analit memiliki luas yang sama
MV 2014 9
sifat. Sangat mungkin bahwa prinsip yang sama isolasi, Metode terakhir akan berhasil. Hal ini tidak biasa untuk
identifikasi, dan kuantifikasi yang diterapkan untuk benzena juga pengembangan metode untuk melibatkan bekerja pada sejumlah
dapat diterapkan untuk toluena. Jika, di sisi lain, metode ide-ide yang berbeda secara bersamaan sebelum akhirnya memilih
diperlukan untuk menentukan benzena dalam tanah, adaptasi satu pemenang. Terlepas dari berapa banyak usaha telah
dari benzena dalam metode air mungkin tidak menjadi pilihan
diinvestasikan selama pengembangan metode,
terbaik. Adaptasi dari beberapa metode lain untuk menentukan
tidak ada
organik dalam tanah mungkin menjadi titik awal yang lebih baik.
menjamin metode ini akan melakukan memadai selama
validasi (atau dalam kondisi rutin di laboratorium tertentu).
Ketika staf yang berbeda yang terlibat dalam
Pada ekstrem yang lain, ahli kimia analitis dapat mulai dengan pengembangan dan validasi tahap ini menawarkan
ide-ide samar sedikit dan menerapkan keahlian dan kemungkinan memeriksa bahwa instruksi (prosedur
pengalaman untuk merancang metode yang cocok. Ini jelas pengukuran) dapat
melibatkan banyak lebih banyak pekerjaan dan tingkat dipahami dan diimplementasikan.
keraguan apakah
MV 2014 10
4 Kapan metode divalidasi atau diverifikasi?
4.1 Metode validasi Verifikasi 4.2 Metode

Sebuah metode harus divalidasi bila diperlukan untuk Untuk metode standar (tidak sah), seperti yang diterbitkan
menunjukkan bahwa karakteristik kinerja yang memadai oleh, misalnya ISO atau ASTM, validasi oleh laboratorium
untuk digunakan untuk tujuan tertentu. Misalnya, menggunakan metode ini tidak diperlukan. Namun,
dinyatakan dalam Pasal 5.4.5.2 dari ISO / IEC 17025 [1] laboratorium perlu memverifikasi kinerja metode yang
bahwa laboratorium harus memvalidasi: termaktub dalam ISO / IEC 17025 Klausul 5.4.2: ... Laboratorium
harus mengkonfirmasi bahwa itu benar dapat beroperasi
• metode non-standar; metode standar sebelum melakukan pengujian atau kalibrasi.
• / Metode yang dikembangkan laboratorium yang dirancang;
• metode standar yang digunakan di luar lingkup yang dimaksudkan;

Verifikasi juga diperlukan bila ada perubahan penting
seperti instrumen baru tapi mirip, relokasi peralatan dll
• amplifikasi dan modifikasi dari metode standar.
kedokteran laboratorium mayoritas pengukuran
Validasi harus seluas yang diperlukan untuk memenuhi dan pengujian akan dilakukan dengan prosedur
persyaratan sehubungan dengan penggunaan yang komersial yang telah divalidasi oleh produsen, tetapi
diberikan atau aplikasi tertentu [23]. Luasnya ( 'skala', yang perlu diverifikasi oleh pengguna akhir [24]. ISO
'ruang lingkup') validasi akan tergantung pada aplikasi, 15189 [2] menekankan bahwa prosedur pemeriksaan
sifat perubahan yang dibuat, dan keadaan dimana yang digunakan tanpa modifikasi tunduk
metode ini akan digunakan. untuk
verifikasi independen oleh laboratorium sebelum
diperkenalkan ke penggunaan rutin. Hal ini juga dapat
Validasi juga diperlukan bila diperlukan untuk mencakup ketika instrumen diperbarui dengan software baru,
menunjukkan kesetaraan hasil yang diperoleh dengan dua atau ketika kontrol kualitas menunjukkan bahwa kinerja
metode, misalnya metode baru dikembangkan dan standar metode yang ditetapkan berubah dengan waktu.
/ metode peraturan yang ada.
MV 2014 11
MV 2014 12
5 Bagaimana seharusnya metode divalidasi?
5.1 Siapa yang melakukan validasi laboratorium adalah pesaing, tunggal-

metode? Pendekatan laboratorium sesuai [12]. Apakah atau tidak
metode divalidasi di laboratorium tunggal akan diterima untuk
5.1.1 Pendekatan metode validasi
tujuan peraturan tergantung pada pedoman yang meliputi
daerah pengukuran yang bersangkutan. Biasanya harus
Setelah pengembangan metode awal selesai, laboratorium mungkin untuk mendapatkan pernyataan kebijakan yang
harus mendokumentasikan prosedur pengukuran secara rinci
jelas dari badan pengawas yang tepat.
(lihat Lampiran A). Ini adalah prosedur terdokumentasi ini yang
diambil ke depan untuk validasi formal.
5.2 Tingkat studi validasi
Ada dua pendekatan utama untuk validasi metode; laboratorium harus memutuskan mana karakteristik
itu perbandingan antar laboratorium kinerja (lihat Tabel 2 dan Pasal 6) perlu diteliti untuk
pendekatan dan pendekatan single-laboratorium. Terlepas dari
memvalidasi metode dan,
pendekatan, itu adalah laboratorium menggunakan metode yang
dalam beberapa kasus, bagaimana detail
bertanggung jawab untuk memastikan bahwa itu adalah cocok untuk
penyelidikan Sebuahtunggal prestasi
penggunaan yang dimaksudkan dan, jika perlu, untuk melaksanakan
karakteristik seharusnya. IUPAC protokol [12] daftar
pekerjaan lebih lanjut untuk melengkapi validasi data yang ada. sejumlah situasi, yang memperhitungkan, antara lain,
status metode dan kompetensi laboratorium. Di mana
ruang lingkup pekerjaan analitis didefinisikan dengan
5.1.2 Pendekatan antar laboratorium
baik dan aplikasi serupa dari waktu ke waktu,
Banyak yang telah diterbitkan dalam literatur tentang metode
dimungkinkan bagi suatu organisasi atau sektor
validasi dengan perbandingan antar laboratorium
menerbitkan pedoman umum untuk tingkat studi validasi.
didedikasikan sering disebut sebagai 'studi kolaboratif' atau
Sebuah contoh dari sektor farmasi ditunjukkan pada
'studi koperasi. Ada sejumlah protokol yang berkaitan dengan
Tabel 3. Dimulai dengan spesifikasi analisis seksama
jenis validasi [25, 26, 27, 28], serta standar ISO 5725 [29]
yang dapat dianggap sebagai umumnya yang paling berlaku. diberikan dalam lingkup
Jika metode yang sedang dikembangkan yang akan memiliki
penggunaan luas, mungkin sebagai prosedur standar itu
diterbitkan, maka studi kolaboratif yang melibatkan Prosedur terdokumentasi (lihat A.5 dalam Lampiran A)
sekelompok laboratorium mungkin adalah cara yang lebih memberikan dasar yang baik di mana untuk
disukai melaksanakan validasi. Sebuah metode yang merencanakan proses validasi, namun diakui bahwa
diterbitkan divalidasi dengan cara ini ditunjukkan untuk dalam praktek ini tidak selalu mungkin. Penilaian kinerja
menjadi kuat. Menerbitkan informasi biasanya mengandung metode dapat dibatasi. Hal ini diakui dalam ISO / IEC
presisi (pengulangan, reproducibility dan / atau batas presisi
yang sesuai) dan, kadang-kadang, perkiraan Bias. Di mana 17025, klausul 5.4.5.3 sebagai Validasi selalu merupakan
metode telah divalidasi oleh standar menyetujui organisasi, keseimbangan antara biaya, risiko dan kemungkinan teknis. Laboratorium
seperti ISO, CEN atau AOAC International, pengguna harus melakukan yang terbaik dalam batasan yang dikenakan,
biasanya akan hanya perlu memverifikasi data kinerja mempertimbangkan
diterbitkan dan / atau membangun data kinerja untuk mereka pelanggan account dan persyaratan peraturan, pengalaman
gunakan sendiri metode ini. Pendekatan ini, oleh karena itu, yang ada metode, alat yang tersedia (Bagian 5.4), dan
mengurangi beban kerja untuk laboratorium menggunakan kebutuhan untuk kompatibilitas metrologi [7] dengan metode
metode ini. yang serupa lainnya sudah digunakan dalam laboratorium atau
digunakan oleh lainnya
laboratorium. Beberapa prestasi
Karakteristik mungkin telah ditentukan sekitar selama
tahap pengembangan metode atau metode
Pendekatan 5.1.3 Single-laboratorium pelaksanaan. Seringkali tertentu
Laboratorium akan dari waktu ke waktu menemukan bahwa metode set percobaan akan menghasilkan
diperlukan tetapi tidak tersedia sebagai standar diterbitkan. Jika informasi di beberapa prestasi
metode ini dikembangkan untuk digunakan dalam satu laboratorium, karakteristik, sehingga dengan perencanaan yang matang upaya yang
misalnya karena tidak ada kepentingan umum dalam metode atau diperlukan untuk mendapatkan informasi yang diperlukan dapat
karena lainnya diminimalkan.
MV 2014 13
Tabel 3 - Tingkat kerja validasi untuk empat jenis aplikasi analitis. Contoh dari sektor farmasi [13]. 'X' menandakan karakteristik
kinerja yang biasanya divalidasi.
Jenis aplikasi analitis
karakteristik kinerja Identifikasi uji kuantitatif untuk uji batas untuk Kuantifikasi komponen
uji pengotor pengotor utama
selektivitas x x x x
Batas deteksi x
Batas kuantifikasi x
Kerja jarak termasuk x x

linearitas
Trueness (bias) x x
Presisi (pengulangan dan presisi x x

menengah)
CATATAN Tabel ini disederhanakan dan telah disesuaikan dengan struktur dan terminologi yang digunakan dalam Panduan ini.
Implikasi dari kendala yang dibahas di atas sangat Metode yang dikembangkan di rumah dll), analit, ukur,
penting di mana metode ini tidak akan digunakan secara satuan pengukuran, jenis dari
rutin. Proses validasi metode yang akan digunakan sampel dan tujuan penggunaan. Sampling dan subsampling
secara rutin relatif welldefined. Jelas prinsip yang sama dapat menjadi bagian dari prosedur pengukuran dan harus,
berlaku untuk analisis ad hoc seperti untuk pengujian dalam kasus-kasus, divalidasi. Bahkan jika langkah ini
rutin. Hal ini diperlukan untuk memiliki tingkat yang dilakukan di tempat lain, hal ini berguna untuk memasukkan
memadai kepercayaan dalam hasil yang dihasilkan. informasi tentang mereka dalam rencana validasi / laporan.
Membangun keseimbangan antara waktu dan kendala
biaya dan kebutuhan untuk memvalidasi metode ini sulit. • perencanaan : Bagian ini harus menguraikan tujuan,
misalnya validasi penuh metode baru, verifikasi
dalam beberapa kinerja metode standar, ekstensi untuk lingkup
keadaan mungkin lebih tepat untuk subkontrak analisis metode, dll Luasnya pekerjaan validasi harus
ke laboratorium lain di mana mereka dapat dilakukan ditunjukkan, yaitu karakteristik kinerja yang akan
secara rutin. diselidiki dan persyaratan terkait.
5.3 Validasi rencana dan laporan

Pekerjaan validasi harus dilakukan, dan hasil yang • karakteristik kinerja : Bagian ini harus memberikan
dilaporkan, menurut prosedur terdokumentasi. penjelasan singkat tentang kinerja
ciri, ulangi apa saja
Garis besar rencana validasi ( 'protokol validasi') dan persyaratan khusus, menguraikan percobaan yang
laporan validasi dapat dinyatakan dalam pedoman sektoral akan dilakukan dan bagaimana hasilnya dievaluasi.
(lihat Bagian 5.5). badan akreditasi nasional dapat Hasil dan kesimpulan dari eksperimen harus
menunjukkan persyaratan minimum untuk dinyatakan. bagian terpisah digunakan untuk setiap
dokumentasi ini [23]. karakteristik kinerja.
Namun, template sederhana untuk gabungan rencana
validasi dan validasi laporan bisa, misalnya terdiri dari • Ringkasan : Bagian terakhir harus meringkas
bagian berikut. pekerjaan validasi dan hasilnya. Implikasi mengenai
penggunaan rutin, dan kontrol kualitas internal dan
• Judul : Bagian ini harus mengidentifikasi metode dan
eksternal, dapat diberikan. Paling
kapan dan siapa yang melakukan pekerjaan. Informasi
penting, menyimpulkan sebuah
singkat tentang ruang lingkup metode dan penjelasan
Pernyataan apakah metode tersebut tepat untuk tujuan harus
singkat tentang metode harus diberikan, serta rincian
diberikan. Perhatikan bahwa ini adalah persyaratan dalam ISO /
dari status metode (misalnya standar internasional,
IEC 17025 [1].
MV 2014 14
5.4 alat Validasi Spiking tidak selalu harus terbatas pada analit bunga. Ini
dapat mencakup apa pun yang ditambahkan ke sampel
5.4.1 Kosong untuk mengukur efek dari penambahan. Sebagai contoh,
Penggunaan berbagai jenis kekosongan memungkinkan sampel bisa dibubuhi jumlah yang bervariasi dari
penilaian berapa banyak dari sinyal yang diukur disebabkan gangguan tertentu untuk menilai konsentrasi
analit dan berapa banyak penyebab lainnya. Berbagai jenis
kosong yang tersedia untuk analis: interferent di mana
penentuan analit adalah negatif
terpengaruh. Sifat spike jelas perlu diidentifikasi.
• Reagen kosong *: Reagen yang digunakan selama proses
analisis (termasuk pelarut yang digunakan untuk ekstraksi
atau pembubaran) dianalisis untuk menentukan apakah 5.4.4 bahan Timbul
mereka berkontribusi pada sinyal pengukuran.
Ini adalah bahan dimana analit kepentingan dapat
dasarnya asing, tetapi telah diperkenalkan kepada massal
• kosong sampel. Ini adalah dasarnya matriks sampel di beberapa titik sebelum materi yang sedang sampel.
tanpa analit ini, misalnya sampel urin manusia tanpa obat analit demikian terikat lebih erat dalam matriks daripada itu
tertentu penyalahgunaan, atau sampel daging tanpa akan memiliki itu telah ditambahkan oleh spiking. Nilai
residu hormon. kekosongan sampel mungkin sulit untuk analit akan tergantung pada jumlah analit dalam kontak
mendapatkan tetapi bahan tersebut diperlukan untuk dengan bahan, tingkat take-up dan kerugian dengan
memberikan perkiraan yang realistis dari gangguan yang matriks dan kerugian lainnya melalui metabolisme,
akan dihadapi dalam analisis sampel uji. disintegrasi spontan atau kimia lain atau proses fisik.
Kegunaan sampel yang dikeluarkan untuk tujuan validasi
tergantung pada seberapa baik nilai analit dapat dicirikan.
5.4.2 sampel uji rutin Berikut ini adalah contoh bahan yang dikeluarkan:
sampel uji rutin berguna karena informasi yang

mereka berikan pada presisi,
gangguan dll yang dapat realistis yang dihadapi dalam 1. Herbisida tepung dari sereal disemprot dengan
hari-hari kerja. Jika isi analit dari bahan uji secara akurat herbisida selama pertumbuhannya;
diketahui, dapat digunakan untuk menilai Bias pengukuran. 2. Aktif bahan di farmasi
Penilaian yang akurat dari konten analit dapat diperoleh formulasi menambahkan pada tahap perumusan.
dengan menggunakan metode referensi, meskipun metode 3. bubuk putih telur (protein dikenal)
tersebut tidak selalu tersedia. ditambahkan ke adonan kue sebelum dipanggang ketika menyelidiki
penyebab alergi.
5.4.3 Spiked bahan / solusi 5.4.5 standar Pengukuran

Ini adalah bahan atau solusi yang analit (s) dari bunga telah Perawatan harus diambil ketika mengacu pada 'standar'
sengaja ditambahkan. Bahan-bahan ini atau solusi mungkin sebagai istilah juga berlaku untuk dokumen tertulis, seperti
sudah mengandung analit bunga sehingga perawatan standar ISO. Di mana istilah ini mengacu pada zat yang
diperlukan untuk memastikan spiking tidak menyebabkan digunakan untuk kalibrasi atau identifikasi tujuan akan lebih
tingkat analit luar jangkauan kerja dari metode ini. Spiking mudah untuk merujuk kepada mereka sebagai standar
dengan jumlah dikenal analit memungkinkan peningkatan pengukuran atau calibrants / kalibrator [7]. Ini secara
dalam menanggapi analit yang akan diukur dan dihitung dalam tradisional dianggap sebagai solusi dari zat tunggal tetapi
hal jumlah menambahkan, meskipun jumlah absolut dari analit dalam prakteknya bisa apa saja di mana parameter atau
hadir sebelum dan setelah penambahan spike tidak diketahui. properti tertentu telah ditandai sejauh itu dapat berfungsi
Perhatikan bahwa sebagian besar metode spiking sebagai referensi metrologi. Hal ini penting untuk
menambahkan analit sedemikian rupa sehingga tidak akan membedakan antara bahan referensi (RMS) dan bahan
seperti terikat erat dengan matriks sampel seperti itu akan jika referensi bersertifikat (CRMs) [7, 30] karena perbedaan
itu hadir secara alami. Oleh karena itu, perkiraan bias yang signifikan dalam cara mereka dapat digunakan dalam proses
diperoleh dengan spiking dapat diharapkan untuk menjadi validasi metode (6.5.2). RMS dapat hampir semua bahan yang
terlalu optimis.
digunakan sebagai dasar untuk referensi, dan dapat
mencakup reagen laboratorium kemurnian diketahui, bahan
kimia industri, atau artefak lainnya. Properti atau analit
kepentingan perlu
*
Sebuah kosong reagen diambil melalui prosedur analitis seluruh
kadang-kadang disebut 'prosedural kosong'.
MV 2014 15
stabil dan homogen tetapi materi tidak perlu memiliki peraturan tertentu mungkin memerlukan metode tertentu
tingkat tinggi karakterisasi, metrologi yang harus diikuti. Tabel 4 menunjukkan jenis pertanyaan
traceability, ketidakpastian dan yang mungkin diajukan dalam meresmikan persyaratan
dokumentasi yang terkait dengan CRMs. Karakterisasi analisis (kolom 1) dan karakteristik kinerja yang sesuai
parameter kepentingan dalam CRM umumnya lebih ketat dari metode yang mungkin perlu dievaluasi (kolom
daripada untuk RM, dan selain itu nilai ditandai bersertifikat
dengan ketertelusuran metrologi didokumentasikan dan 2). Laboratorium kemudian akan mengidentifikasi dan
ketidakpastian. Karakterisasi biasanya dilakukan dengan mengevaluasi karakteristik kinerja yang relevan dan
memeriksa mereka terhadap persyaratan analitis. Proses
menggunakan beberapa metode yang berbeda, atau
validasi berakhir dengan kesimpulan dan pernyataan
prosedur pengukuran primer tunggal, sehingga sejauh
apakah atau tidak kebutuhan analitis terpenuhi. Jika
mungkin, bias dalam karakterisasi berkurang atau bahkan
persyaratan analitis tidak terpenuhi, pengembangan
dihilangkan. Penilaian bias membutuhkan titik acuan yang
metode lebih lanjut diperlukan. Proses pengembangan
handal, sebaiknya, CRM dengan matriks dan analit
dan evaluasi terus sampai metode ini dianggap mampu
konsentrasi sama dengan sampel uji.
memenuhi kebutuhan. Pada kenyataannya persyaratan
analitis jarang setuju dengan pelanggan terlebih dahulu
sedemikian rupa formal. Pelanggan biasanya
5.4.6 Statistik menentukan kebutuhan mereka dalam hal biaya dan /
atau waktu dan jarang tahu seberapa baik metode perlu
metode statistik sangat penting untuk meringkas data dan
melakukan, meskipun persyaratan kinerja untuk metode
untuk membuat penilaian obyektif tentang perbedaan antara
dapat ditentukan mana metode mendukung persyaratan
set data (pengujian signifikansi). Analis harus membiasakan
peraturan atau sesuai dengan spesifikasi. Sebagai
diri dengan setidaknya unsur-unsur yang lebih mendasar dari
contoh,
teori statistik terutama sebagai bantuan untuk evaluasi
presisi, bias, kisaran linear, LOD, LOQ dan ketidakpastian
pengukuran. Sejumlah buku yang berguna
memperkenalkan statistik untuk kimia analitik yang

direferensikan [5, 6, 31, 32, 33, 34].
5.5 Persyaratan Validasi

Persyaratan untuk bagaimana melaksanakan validasi metode
dapat ditentukan dalam pedoman dalam sektor tertentu yang
relevan dengan metode [13, 25, 35 misalnya]. Di mana
Namun, biasanya akan diserahkan kepada kebijaksanaan
persyaratan tersebut ada, dianjurkan mereka diikuti. Ini akan
analis untuk memutuskan apa kinerja diperlukan. Sangat
memastikan bahwa terminologi validasi tertentu,
sering ini berarti menetapkan persyaratan analitis sejalan
bersama-sama dengan statistik yang digunakan, ditafsirkan
dengan kemampuan diketahui metode (misalnya
secara konsisten dalam sektor yang relevan. pengakuan resmi
seperti dimuat di
dari metode mungkin memerlukan karakterisasi menggunakan
metode standar, seperti yang diamati dalam uji
studi kolaboratif.
profisiensi (PT) skema atau diperkirakan dari model
matematika, seperti fungsi Horwitz [40]). Keuangan
Proses validasi 5.6 Metode
Dihadapkan dengan masalah pelanggan tertentu, laboratorium kendala mungkin mendikte bahwa
harus pertama set analitis pengembangan metode yang memenuhi tertentu
persyaratan yang mendefinisikan karakteristik kinerja bahwa analitis kebutuhan tidak
metode harus memiliki untuk mengatasi masalah tersebut ekonomis, dalam hal keputusan harus diambil apakah
(Gambar 1). untuk bersantai persyaratan untuk tingkat yang lebih
dicapai atau memikirkan kembali pembenaran untuk
Menanggapi persyaratan ini, laboratorium perlu mengidentifikasi
analisis.
metode yang ada cocok, atau jika perlu mengembangkan /
memodifikasi metode. Perhatikan bahwa
MV 2014 16
masalah Pelanggan
harus dipecahkan.
Mengatur
persyaratan analisis
Mengidentifikasi / Mengevaluasi
mengembangkan metode
memodifikasi metode yang ada kinerja metode
lebih lanjut
atau mengembangkan metode baru
IYA NIH
Adalah metode TIDAK Bersantai TIDAK pengembangan
cocok untuk tujuan?

persyaratan lebih lanjut layak?
analitis?
IYA NIH IYA NIH TIDAK
masalah validasi Menyatakan kembali
melaporkan persyaratan analisis
Tidak dapat
menggunakan metode
menggunakan metode
Gambar 1 - Proses validasi metode: dari masalah pelanggan untuk keputusan laboratorium pada apakah atau tidak permintaan
pelanggan dapat dilakukan dengan metode diidentifikasi. Catatan: validasi metode terdiri dari tahap di mana karakteristik kinerja
dievaluasi dan kemudian dibandingkan dengan persyaratan analitis. Terlepas dari apa data kinerja yang ada mungkin tersedia untuk
metode, kebugaran untuk tujuan akan ditentukan oleh bagaimana metode yang melakukan bila digunakan oleh analis yang ditunjuk
dengan tersedia peralatan / fasilitas.
MV 2014 17
Tabel 4 - Pertanyaan yang mungkin diajukan dalam meresmikan persyaratan analitis, dan kinerja terkait karakteristik dengan
referensi ke bagian yang sesuai dalam Panduan ini
Pertanyaan karakteristik kinerja Bagian Catatan
Apakah keterbatasan sumber daya berlaku dan bagaimana - orang,

waktu, uang, peralatan dan reagen, fasilitas laboratorium?
Apakah sampling dan subsampling diperlukan (dan akan ini dilakukan

dalam laboratorium)? Adalah
- - Sebuah)
sana apa saja pembatasan di mencicipi
Ukuran / ketersediaan?
Apa sifat kimia, biologi dan fisik dari matriks?
Apakah analit tersebar atau lokal?
Apakah jawaban kualitatif atau kuantitatif yang diperlukan? Selektivitas LOD 6.1
dan LOQ 6.2
Apa analit kepentingan dan tingkat kemungkinan ini (%, mg / g, ng / Selektivitas LOD dan LOQ Kerja 6.1
g, dll .....)? Adalah analit hadir di lebih dari satu bentuk kimia dan rentang linear 6.2
(misalnya oksidasi negara, stereoisomer), dan perlu untuk dapat 6.3
membedakan antara bentuk yang berbeda?
Apa kuantitas dimaksudkan untuk diukur ( 'the ukur')? Apakah itu Pemulihan 6.5
'total' konsentrasi hadir analit yang menarik, atau 'jumlah diekstrak'
di bawah kondisi tertentu?
Apa trueness dan presisi yang diperlukan? Apa ketidakpastian target Trueness dan pemulihan 6.5
dan bagaimana itu harus diungkapkan? pengulangan, menengah
6.6 b)
presisi, reproduktifitas
ketidaktentuan 6.7
Apa gangguan cenderung analit (s)? selektivitas 6.1
Apakah batas toleransi telah ditetapkan untuk semua parameter, Kekasaran 6.8
penting untuk melakukan analisis (misalnya waktu ekstraksi, suhu c)
inkubasi)?
Apakah hasil perlu dibandingkan dengan hasil dari laboratorium ketidaktentuan 6.7
b)
lain?
Apakah hasil perlu dibandingkan dengan spesifikasi eksternal? ketidaktentuan 6.7
b)
a) Tidak semua elemen dari kebutuhan hubungan analitis langsung ke persyaratan validasi metode tetapi mendikte lebih umum, apakah
teknik tertentu yang berlaku. Sebagai contoh, teknik yang berbeda akan berlaku menurut apakah analit tersebar melalui sampel atau
terisolasi di permukaan.
b) Salah satu elemen penting dari persyaratan analisis adalah bahwa hal itu harus mungkin untuk menilai apakah atau tidak metode ini cocok untuk tujuan dan
dengan demikian harus mencakup ketidakpastian yang dibutuhkan dinyatakan baik sebagai ketidakpastian standar atau ketidakpastian diperluas.
c) prosedur standar Diterbitkan biasanya sudah terbukti kasar dalam lingkup prosedur, yaitu jenis matriks dan jangkauan kerja. Oleh karena
itu verifikasi single-laboratorium untuk pelaksanaan prosedur standar yang diterbitkan perlu biasanya tidak termasuk kekasaran.
MV 2014 18
6 karakteristik kinerja Metode
6.1 Selektivitas 6.1.3 Penilaian selektivitas

6.1.1 Istilah dan definisi Selektivitas prosedur harus ditetapkan untuk metode
di-rumah dikembangkan, metode diadaptasi dari literatur
selektivitas analitis berkaitan dengan “ sejauh mana
ilmiah dan metode yang diterbitkan oleh badan
metode dapat digunakan untuk menentukan analit
standardisasi digunakan di luar lingkup yang ditentukan
tertentu dalam campuran atau matriks tanpa gangguan
dalam metode standar. ketika metode
dari komponen lain dari perilaku yang sama”[ 41].
diterbitkan oleh
badan standardisasi yang digunakan dalam lingkup
Definisi dalam berbagai dokumen [7, 18, 42] kurang lebih setuju mereka, selektivitas akan biasanya telah dipelajari
dengan penafsiran ini. Sementara IUPAC merekomendasikan istilah sebagai bagian dari proses standarisasi. Selektivitas
'selektivitas', beberapa daerah, misalnya sektor farmasi [13], metode biasanya diselidiki dengan mempelajari
menggunakan 'kekhususan' atau 'spesifisitas analitis'. Yang terakhir kemampuannya untuk mengukur analit kepentingan
ini dianjurkan untuk menghindari kebingungan dengan 'spesifisitas dalam sampel yang gangguan tertentu telah sengaja
diagnostik' seperti yang digunakan dalam pengobatan laboratorium diperkenalkan (orang-orang berpikir mungkin hadir dalam
[43]. sampel). Di mana tidak jelas apakah atau tidak
gangguan yang sudah ada, selektivitas metode tersebut
6.1.2 Pengaruh gangguan dapat diselidiki dengan mempelajari kemampuannya
untuk mengukur analit dibandingkan dengan metode
Secara umum, metode analisis dapat dikatakan terdiri dari
independen lain. Contoh 1 dan Contoh 2 di bawah ini
tahap pengukuran yang mungkin atau mungkin tidak
didahului dengan tahap isolasi. Pada tahap pengukuran,
dan Referensi Cepat 1 menggambarkan pertimbangan
konsentrasi suatu analit biasanya tidak diukur secara praktis mengenai selektivitas. teknik konfirmasi dapat
langsung. Sebaliknya properti tertentu (misalnya intensitas berguna sebagai alat verifikasi identitas. Semakin bukti
cahaya) diukur. Hal ini, oleh karena itu, penting untuk satu dapat mengumpulkan, semakin baik.
menetapkan bahwa properti diukur hanya karena analit
dan tidak sesuatu kimia atau fisik mirip, atau timbul
sebagai kebetulan sehingga menyebabkan bias dalam
hasil pengukuran. Tahap pengukuran mungkin perlu
didahului dengan tahap isolasi dalam rangka
meningkatkan selektivitas sistem pengukuran. Gangguan
dapat menyebabkan bias dengan meningkatkan atau Sedangkan evaluasi pengulangan membutuhkan
menurunkan sinyal dikaitkan dengan ukur. Ukuran efek pengukuran harus diulang beberapa kali oleh salah satu
untuk matriks yang diberikan biasanya sebanding dengan teknik, konfirmasi identitas analit memerlukan pengukuran
sinyal dan karena itu kadang-kadang disebut efek yang akan dilakukan oleh beberapa, sebaiknya independen,
'proporsional'. Ini perubahan kemiringan fungsi kalibrasi, teknik.
tapi tidak mencegat nya. Efek ini juga disebut 'rotasi' [44]. Konfirmasi meningkatkan kepercayaan diri dalam
teknik di bawah pemeriksaan dan sangat berguna ketika
teknik konfirmasi beroperasi pada prinsip yang berbeda
secara signifikan. Dalam beberapa aplikasi,
sebagai contoh, analisis
diketahui organik dengan kromatografi gas, penggunaan teknik
A 'translasi' atau 'efek tetap' muncul dari sinyal yang
dihasilkan oleh gangguan hadir dalam larutan uji. Oleh konfirmasi adalah penting. Ketika metode pengukuran yang
karena itu independen dari konsentrasi analit. Hal ini sering dievaluasi adalah sangat selektif, penggunaan teknik
disebut sebagai 'background' atau gangguan 'dasar'. Ini konfirmasi lain mungkin tidak diperlukan. Sebuah aspek
mempengaruhi intercept dari fungsi kalibrasi, tapi tidak penting dari selektivitas yang harus dipertimbangkan adalah di
kemiringannya. mana suatu analit mungkin ada dalam sampel lebih dari satu
bentuk seperti: terikat atau tidak terikat;
Hal ini tidak biasa bagi kedua efek proporsional dan

anorganik atau organologam; atau oksidasi
translasi untuk hadir secara bersamaan. Metode
yang berbeda. Definisi besaran ukur karenanya penting
penambahan standar hanya bisa mengoreksi efek
untuk menghindari kebingungan.
proporsional.
MV 2014 19
Contoh 1 - Chromatography. Sebuah puncak dalam jejak Contoh 2 - Spektroskopi. Di inframerah
kromatografi dapat diidentifikasi sebagai akibat analit bunga atas spektroskopi, identifikasi dari tidak diketahui
dasar bahwa RM mengandung analit menghasilkan sinyal pada titik senyawa dapat dilakukan dengan mencocokkan sinyal absorbansi (yaitu
yang sama pada kromatogram. Tapi, adalah sinyal karena analit 'puncak') dalam spektrum analit dengan orang-orang dari spektrum
atau sesuatu yang lain yang kebetulan co-dielusikan, yaitu efek referensi disimpan di perpustakaan spektral. Sekali
tetap? Ini bisa menjadi salah satu atau kedua. Identifikasi analit, saya t dipercaya yang benar
dengan ini berarti hanya, tidak dapat diandalkan dan beberapa Identifikasi telah dibuat, spektrum dari RM analit harus dicatat
bentuk bukti yang mendukung secara tepat dalam kondisi yang sama seperti untuk bagian tes.
Semakin besar jumlah puncak yang cocok antara analit dan RM,
aku s perlu. Untuk contoh, itu semakin baik kepercayaan yang dapat ditempatkan pada
kromatografi bisa diulang menggunakan kolom polaritas yang identifikasi yang benar. Hal ini juga akan bermanfaat meneliti
berbeda, menggunakan prinsip pemisahan yang berbeda untuk bagaimana tergantung bentuk spektrum itu sehubungan dengan
menentukan apakah sinyal dan sinyal yang dihasilkan oleh RM masih bagaimana analit diisolasi dan disiapkan untuk analisis
muncul pada waktu yang sama. Di mana puncaknya adalah karena inframerah. Sebagai contoh,
lebih dari satu senyawa, kolom polaritas yang berbeda mungkin cara
yang baik untuk memisahkan senyawa. Dalam banyak kasus jika spektrum itu
instrumen spektrometri massa modern dapat menawarkan selektivitas dicatat sebagai disc garam, distribusi ukuran partikel dari bagian
yang tinggi, misalnya gas atau tes dalam disk mungkin mempengaruhi bentuk dari spektrum.
cair
kromatografi dengan deteksi spektrometri massa.
Referensi Cepat 1 - Selektivitas
Berapa banyak Apa untuk menghitung / menentukan dari

Melakukan apa komentar
waktu data
Menganalisis sampel 1 Menggunakan hasil dari teknik konfirmasi untuk Putuskan berapa banyak bukti yang
uji, dan RM oleh calon menilai kemampuan metode untuk mengkonfirmasi mendukung cukup diperlukan untuk
dan metode independen identitas analit dan kemampuannya untuk mengukur memberikan keandalan yang cukup.
lain. analit dalam isolasi dari gangguan lainnya.
Menganalisis sampel uji yang 1 Menguji efek interferensi. Apakah kehadiran Jika deteksi atau kuantifikasi
mengandung berbagai dicurigai interferent yang menghambat deteksi atau dihambat oleh gangguan,
kuantifikasi analit? pengembangan metode lebih lanjut
gangguan di hadapan akan diperlukan.
analit bunga.
6.2 Batas deteksi dan batas kuantifikasi dengan metode pada tingkat tertentu dari keyakinan. Artinya,
apa konsentrasi yang benar akan kami yakin melebihi nilai
kritis yang dijelaskan di atas? Istilah-istilah seperti 'batas
6.2.1 Istilah dan definisi deteksi' (LOD), 'nilai terdeteksi minimum', 'batas deteksi',
Di mana pengukuran dilakukan pada rendah atau, dalam arahan Uni Eropa, CCβ [38] digunakan untuk
konsentrasi, ada tiga konsep umum untuk dipertimbangkan. konsep ini.
Pertama, mungkin perlu untuk menetapkan nilai dari hasil yang
dianggap menunjukkan tingkat analit yang secara signifikan
Ketiga, juga penting untuk membangun tingkat terendah
berbeda dari nol. Seringkali beberapa tindakan yang diperlukan
di mana kinerja yang dapat diterima untuk aplikasi khas.
pada tingkat ini, seperti mendeklarasikan bahan terkontaminasi.
Konsep ketiga ini biasanya disebut sebagai batas
Tingkat ini dikenal sebagai 'nilai kritis', 'batas keputusan' atau,
kuantifikasi (LOQ) *.
dalam arahan Uni Eropa, CCα [38].
Kedua, adalah penting untuk mengetahui konsentrasi *

Sinonim digunakan termasuk 'batas kuantifikasi', 'batas
terendah analit yang dapat dideteksi
kuantisasi', 'batas kuantitasi', 'batas
MV 2014 20
Terminologi yang berhubungan dengan semua Praktek (lihat di bawah). pendekatan alternatif dibahas dalam
konsep-konsep ini sangat beragam dan bervariasi antara Bagian 6.2.5 Isu-isu berikut harus dipertimbangkan dalam
sektor. Misalnya, 'batas deteksi' istilah (LOD) atau 'batas menentukan LOD dan LOQ dari percobaan menggunakan
deteksi' (DL) sebelumnya tidak berlaku umum, meskipun
replikasi sederhana.
digunakan dalam beberapa dokumen sektoral [13, 38].
Namun, mereka sekarang dimasukkan ke dalam VIM [7] dan
IUPAC Emas Book [17]. ISO menggunakan sebagai 'nilai sampel cocok untuk memperkirakan LOD dan LOQ: Sampel
terdeteksi minimum dari negara net variabel' istilah umum yang digunakan sebaiknya berupa a) sampel kosong, yaitu
yang untuk kimia diterjemahkan sebagai 'konsentrasi net matriks yang tidak mengandung analit terdeteksi, atau b)
terdeteksi minimum' [45, 46, 47, 48]. Dalam Panduan 'nilai sampel uji dengan konsentrasi analit dekat dengan atau di
kritis' istilah, 'batas deteksi (LOD)' dan 'batas kuantifikasi' bawah LOD diharapkan. sampel kosong bekerja dengan baik
(LOQ) digunakan untuk tiga konsep di atas. Dalam metode untuk metode di mana sinyal terukur diperoleh untuk kosong,
validasi, itu adalah LOD dan LOQ yang paling sering seperti spektrofotometri dan spektroskopi atom. Namun
ditentukan. untuk teknik seperti kromatografi, yang mengandalkan
mendeteksi puncak di atas
kebisingan, sampel dengan

Hal ini juga diperlukan untuk membedakan antara batas
tingkat konsentrasi dekat dengan atau di atas LOD
deteksi instrumen dan batas deteksi metode. Batas deteksi
diperlukan. Ini dapat dibuat dengan, misalnya, spiking
instrumen dapat didasarkan pada analisis sampel, sering
sampel kosong (lihat Bagian
reagen kosong, disajikan langsung ke instrumen (yaitu
5.4).
menghilangkan langkah-langkah persiapan sampel), atau
pada rasio signal-to-noise di, misalnya kromatogram. Untuk Ketika sampel kosong atau sampel uji pada konsentrasi
mendapatkan batas deteksi metode, LOD harus didasarkan rendah tidak tersedia, kosong reagen * sering dapat
pada analisis sampel yang telah diambil melalui prosedur digunakan. Ketika kosong pereaksi ini tidak melalui
pengukuran seluruh menggunakan hasil dihitung dengan prosedur pengukuran secara keseluruhan, dan disajikan
persamaan sama untuk sampel uji. Ini adalah batas deteksi
langsung ke instrumen,
perhitungan berdasarkan ini
metode yang paling berguna untuk validasi metode dan
pengukuran akan memberikanitu instrumen
karena itu merupakan fokus dari Panduan ini. Itu
LOQ / LOD.
Meliputi ruang lingkup metode: Untuk metode dengan

lingkup yang meliputi matriks yang sangat berbeda mungkin
paragraf berikut menggambarkan itu perlu untuk menentukan standar deviasi untuk setiap matriks
estimasi eksperimental LOD dan LOQ. Dasar statistik secara terpisah.
untuk perhitungan LOD diberikan dalam Lampiran B.
Memastikan replikasi perwakilan: Standar deviasi
Karena LOD dan LOQ baik tergantung pada presisi di
harus mewakili kinerja metode seperti yang digunakan di
atau dekat nol, Bagian 6.2.2 pertama menggambarkan
laboratorium, yaitu standar deviasi harus dihitung
estimasi eksperimental dari standar deviasi dari hasil
berdasarkan hasil tes di mana analisis dilakukan tepat
mendekati nol.
sesuai dengan seluruh didokumentasikan prosedur
pengukuran, termasuk langkah-langkah persiapan
6.2.2 Penentuan standar deviasi pada tingkat sampel. Nilai-nilai yang digunakan untuk menghitung
rendah standar deviasi
harus
Kedua LOD dan LOQ biasanya dihitung dengan mengalikan
berada di unit pengukuran yang ditetapkan dalam prosedur.
standar deviasi ( ) Dengan faktor yang sesuai. Adalah penting
bahwa deviasi standar ini merupakan perwakilan dari presisi
diperoleh untuk sampel uji yang khas, dan bahwa Kondisi pengukuran: Standar deviasi
pengukuran ulangan yang cukup dibuat untuk memberikan aku s biasanya diperoleh dibawah
perkiraan yang dapat diandalkan. Pada bagian ini, standar kondisi pengulangan dan ini adalah prosedur yang dijelaskan
deviasi dalam bagian ini. Namun, perkiraan yang lebih handal dapat
didasarkan pada standar diperoleh dari penggunaan
deviasi s 0 untuk hasil tunggal mendekati nol, disesuaikan untuk setiap
averaging atau koreksi kosong digunakan dalam
*
Ada kebingungan tentang terminologi yang berkaitan dengan kosong -
tekad', 'melaporkan limit', 'batas pelaporan' dan 'limit aplikasi'. untuk pembahasan lebih lanjut lihat Bagian
5.4.1.
MV 2014 21
kondisi presisi menengah. Pendekatan ini dibahas lebih sehingga tidak ada koreksi dari deviasi standar yang
lanjut dalam Bagian 6.2.5. diperlukan (lihat Bagian 6.2.5). Contoh 3 menggambarkan
Jumlah pengamatan: Jumlah ulangan ( m) harus cukup perhitungan ini dan diagram alur
untuk mendapatkan perkiraan yang memadai dari pada Gambar 2 merangkum itu
standar deviasi. Biasanya antara 6 dan 15 ulangan koreksi diperlukan untuk rata-rata dan koreksi kosong.
dianggap perlu; 10 ulangan sering direkomendasikan
dalam prosedur validasi / protokol (lihat Bagian 6.2.5.1).
Contoh 3 - Sebuah latihan validasi didasarkan pada analisis kosong
sampel. sepuluh ( m) pengukuran independen dari sampel kosong
yang dibuat di bawah kondisi pengulangan. Hasil memiliki nilai
Memungkinkan untuk rata-rata: Dalam banyak prosedur rata-rata dari 2 mg / kg dan standar deviasi s 0 dari 1 mg / kg.
pengukuran rata-rata ulangan dilaporkan dalam penggunaan rutin

metode, di mana masing-masing ulangan diperoleh dengan
mengikuti seluruh prosedur pengukuran. Dalam hal ini standar Kasus 1 - Prosedur pengukuran menyatakan bahwa
deviasi dari hasil tunggal s 0 harus diperbaiki dengan membagi sampel uji harus diukur sekali ( n = 1) dan hasil dikoreksi
dengan akar kuadrat dari n, dimana n adalah banyaknya ulangan oleh hasil untuk sampel kosong sampel tunggal ( n b = 1).
rata-rata digunakan secara rutin. Dalam serangkaian pengukuran masing-masing berjalan
terdiri dari ulangan tunggal sampel rutin dan satu ( n b) sampel
kosong. Deviasi standar untuk menghitung LOD / LOQ
Memungkinkan untuk efek koreksi kosong: Jika koreksi
kemudian, menurut Gambar 2 sama dengan:
kosong adalah ditentukan di itu
prosedur pengukuran, perawatan harus diambil ketika
menentukan standar deviasi digunakan untuk menghitung
LOD atau LOQ. Jika hasil yang diperoleh selama studi validasi
=? ? + = 1? + = 1√2 = 1,4 mg / kg
semua dikoreksi dengan nilai kosong sama - pendekatan yang
disarankan di sini untuk kesederhanaan - standar deviasi dari kasus 2 - Prosedur pengukuran menyatakan bahwa sampel
hasil akan lebih kecil dari yang terlihat dalam praktek ketika uji harus dianalisis dalam rangkap ( n = 2) dan juga bahwa
hasil dikoreksi oleh nilai-nilai kosong yang berbeda diperoleh sampel kosong harus dianalisis
dalam berjalan yang berbeda . di thi s kasus s 0 harus diperbaiki dalam rangkap dua. Dalam serangkaian
dengan mengalikan dengan + dimana n adalah jumlah pengukuran masing-masing berjalan terdiri dari duplikat ( n
observasi mereplikasi rata-rata ketika melaporkan hasil = 2) sampel rutin dan dua ( n b) sampel kosong. Konsentrasi
diperoleh untuk sampel rutin dikoreksi dengan
dimana setiap ulangan diperoleh mengikuti seluruh prosedur
mengurangkan nilai rata-rata dari dua sampel kosong.
pengukuran, dan n b adalah jumlah observasi kosong
Deviasi standar untuk menghitung LOD / LOQ kemudian,
digunakan untuk menghitung koreksi kosong.
menurut Gambar 2 sama dengan:
=? ? + = 1? + = 1 mg / kg
Perhatikan bahwa di bawah kondisi presisi antara hasil akan
dikoreksi oleh nilai-nilai kosong yang berbeda
MV 2014 22
Dari hasil m mereplikasi pengukuran

selama validasi menghitung standar
deviasi,
Akan hasil kosong IYA NIH
dikoreksi selama
penggunaan rutin
metode?
TIDAK
Gunakan standar deviasi dihitung,

. untuk menghitung LOD dan LOQ
0 adalah estimasi standar deviasi m Hasil tunggal pada atau mendekati nol konsentrasi.
adalah standar deviasi digunakan untuk menghitung LOD dan LOQ.
n adalah jumlah observasi mereplikasi rata-rata ketika melaporkan hasil dimana setiap ulangan diperoleh mengikuti seluruh prosedur
pengukuran.
adalah jumlah observasi kosong rata-rata ketika menghitung koreksi kosong sesuai dengan prosedur pengukuran.
Gambar 2 - Perhitungan standar deviasi, yang akan digunakan untuk estimasi LOD dan LOQ. Aliran
grafik dimulai dengan standar deviasi eksperimental, s 0 dihitung dari hasil pengukuran mereplikasi dalam kondisi pengulangan pada
sampel mendekati nol konsentrasi, baik tanpa koreksi kosong atau dengan koreksi kosong diterapkan untuk semua hasil yang
ditentukan oleh metode. Koreksi kosong ini mungkin didasarkan pada pengamatan kosong tunggal atau pada rata-rata beberapa
pengamatan kosong.
MV 2014 23
6.2.3 Memperkirakan LOD pendekatan yang diberikan dalam Referensi Cepat 2 dapat digunakan
sebagai pedoman umum.
Untuk tujuan validasi itu biasanya cukup untuk
memberikan nilai perkiraan untuk LOD, 6.2.4 Memperkirakan LOQ
yaitu tingkat di mana deteksi analit menjadi bermasalah.
LOQ adalah tingkat terendah dari analit yang dapat
Untuk tujuan ini '3 s 'Pendekatan ditampilkan di Cepat
ditentukan dengan kinerja yang dapat diterima. ( 'Diterima
Referensi 2 biasanya akan cukup.
kinerja' aku s dengan berbagai
dianggap oleh pedoman yang berbeda untuk memasukkan presisi,
Di mana pekerjaan yang mendukung peraturan atau spesifikasi ketelitian dan kebenaran, atau
kepatuhan, pendekatan yang lebih tepat diperlukan, dalam ketidakpastian pengukuran [52]. Dalam praktek,
mengambil khususnya memperhitungkan derajat kebebasan Namun, LOQ dihitung oleh sebagian besar konvensi
yang terkait dengan s 0. Hal ini dijelaskan secara rinci oleh IUPAC menjadi konsentrasi analit yang sesuai dengan standar
[49] dan lain-lain [50, 51]. Dimana nilai kritis dan / atau LOD deviasi yang diperoleh ( ) Pada tingkat rendah dikalikan
digunakan untuk membuat keputusan, presisi harus dipantau dengan faktor, k Q. Nilai default IUPAC untuk k Q adalah 10 [49]
dan batas mungkin perlu dihitung ulang dari waktu ke waktu. dan jika standar deviasi adalah sekitar konstan pada
sektor dan / atau peraturan yang berbeda dapat menggunakan konsentrasi rendah multiplier ini sesuai dengan standar
pendekatan yang berbeda untuk estimasi LOD. Disarankan deviasi relatif (RSD) dari 10%. Pengganda dari 5 dan 6 juga
bahwa konvensi yang digunakan dinyatakan ketika mengutip kadang-kadang digunakan yang sesuai dengan nilai-nilai
batas deteksi. Dengan tidak adanya bimbingan sektoral RSD dari 20% dan 17% masing-masing [53, 54]. Lihat
Referensi lebih lanjut [8] dan Referensi Cepat 3.
di LOD perkiraan, itu
Referensi Cepat 2 - Batas deteksi (LOD)
Berapa
Apa yang menghitung dari
Melakukan apa kali komentar
data
a) Mereplikasi pengukuran sampel 10 Hitung standar deviasi,

kosong, yaitu matriks yang tidak hasil.
mengandung analit terdeteksi. atau
Menghitung dari
mengikuti diagram alur pada Gambar
2.
Mereplikasi pengukuran sampel uji
dengan konsentrasi rendah dari
analit. Hitung LOD sebagai
LOD = 3 ×? .
b) Mereplikasi pengukuran kosong 10 Hitung standar deviasi, s 0 hasil. Pendekatan b) dapat diterima, jika tidak
pereaksi. atau Menghitung mungkin untuk mendapatkan sampel kosong
atau sampel uji pada konsentrasi rendah. Ketika
dari s 0
kosong pereaksi ini tidak diambil melalui
mengikuti diagram alur pada Gambar
Mereplikasi pengukuran kosong prosedur pengukuran secara keseluruhan, dan
2.
pereaksi dibubuhi konsentrasi disajikan langsung ke instrumen, perhitungan
rendah dari analit. akan memberikan instrumen LOD.
Hitung LOD sebagai

LOD = 3 ×? .
CATATAN
1) Untuk beberapa teknik analisis, misalnya kromatografi, sampel uji yang mengandung terlalu rendah konsentrasi atau
kosong reagen mungkin perlu berduri untuk mendapatkan standar deviasi non-nol.
2) Seluruh prosedur pengukuran harus diulang untuk setiap penentuan.
3) Deviasi standar dinyatakan dalam satuan konsentrasi. Ketika standar deviasi dinyatakan dalam
domain sinyal LOD adalah konsentrasi yang sesuai dengan sinyal kosong "# + 3 ×? . Sebuah contoh singkat dari perhitungan LOD
dalam domain sinyal diberikan juga dalam Referensi [5].
MV 2014 24
Referensi Cepat 3 - Batas kuantifikasi (LOQ)
Berapa
Apa yang menghitung dari
Melakukan apa kali komentar
data
a) Mereplikasi pengukuran sampel 10 Hitung standar deviasi, s 0 hasil. Nilai untuk multiplier k Q biasanya 10, tapi nilai-nilai
kosong, yaitu matriks yang tidak Menghitung lain seperti 5 atau 6 yang biasa digunakan
(berdasarkan 'kebugaran untuk tujuan' kriteria).
mengandung analit terdeteksi. atau dari s 0 berikut
diagram alur pada Gambar 2.
Mereplikasi pengukuran sampel Hitung LOQ sebagai LOQ

uji dengan konsentrasi rendah = kQ× .
dari analit.
b) Meniru 10 Hitung standar deviasi, s 0 hasil. Pendekatan b) dapat diterima, jika tidak mungkin
pengukuran kosong pereaksi. Menghitung untuk mendapatkan sampel kosong atau sampel
atau uji pada konsentrasi rendah. Ketika kosong
dari s 0 berikut
diagram alur pada Gambar 2.
pereaksi ini tidak diambil melalui prosedur
pengukuran utuh dan disajikan langsung ke
Mereplikasi pengukuran kosong instrumen perhitungan akan memberikan
pereaksi dibubuhi konsentrasi
Hitung LOQ sebagai LOQ instrumen LOQ.
rendah dari analit.
= kQ× .
CATATAN
1) Untuk beberapa teknik analisis, misalnya kromatografi, sampel uji yang mengandung terlalu rendah konsentrasi
atau kosong reagen mungkin perlu berduri untuk mendapatkan standar deviasi non-nol.
2) Seluruh prosedur pengukuran harus diulang untuk setiap penentuan.
3) Deviasi standar dinyatakan dalam satuan konsentrasi.
6.2.5 Prosedur Alternatif 6.2.5.1 Keandalan dari perkiraan LOD dan LOQ
Bagian sebelumnya telah dijelaskan pendekatan umum untuk
memperkirakan LOD dan LOQ, berdasarkan standar deviasi Perlu dicatat bahwa bahkan dengan 10 ulangan
dari hasil pada konsentrasi dekat ditunjukkan dalam Referensi Cepat 2 dan Referensi
nol, diperoleh berdasarkan pengulangan Cepat 3, perkiraan standar deviasi adalah variabel
kondisi. Pendekatan ini diterapkan secara luas tetapi prosedur inheren. Oleh karena itu, estimasi LOD / LOQ diperoleh
alternatif diberikan dalam standar lain dan protokol. Dalam selama validasi harus diambil sebagai nilai indikatif. Ini
beberapa kasus, misalnya di mana nilai-nilai kosong berbeda
akan cukup
jika perkiraan
secara signifikan dari hari-ke-hari,
LOD / LOQ diperlukan hanya untuk menunjukkan bahwa
menengah
konsentrasi sampel akan jauh di atas LOD / LOQ.
kondisi presisi lebih disukai untuk kondisi pengulangan.
Dimana sampel laboratorium diharapkan mengandung
Sebagai contoh, jika hasil pengendalian mutu untuk sampel uji
konsentrasi rendah dari analit, LOD / LOQ harus
pada tingkat konsentrasi rendah yang tersedia, standar deviasi
dipantau secara teratur.
dari hasil ini dapat digunakan dalam estimasi LOD dan LOQ. Di
mana deviasi standar yang digunakan untuk menghitung LOD
dan LOQ diperoleh di bawah kondisi presisi menengah, 6.2.6 Kemampuan deteksi untuk analisis
penyesuaian untuk memperhitungkan koreksi kosong yang kualitatif
ditunjukkan pada Gambar 2 tidak
Sebuah analisis kualitatif (Lampiran D) melibatkan
identifikasi atau klasifikasi zat dan secara efektif 'ya' /
wajib. Karena itu eksperimental 'tidak' jawaban pada konsentrasi cutoff tertentu suatu
standar deviasi yang diperoleh dari pengendalian mutu internal
analit [55]. Untuk metode kualitatif,
adalah sama dengan standar deviasi
presisi tidak bisa menjadi
yang akan digunakan untuk menghitung LOD dan LOQ. ISO
dinyatakan sebagai deviasi standar atau standar deviasi relatif,
11.843-2 [46] menjelaskan bagaimana instrumen LOD dapat
tapi dapat dinyatakan sebagai tingkat positif dan negatif benar
diperoleh langsung dari kurva kalibrasi.
dan salah.
MV 2014 25
Dalam sebuah studi validasi konsentrasi cut-off dapat tingkat negatif untuk konsentrasi di atas batas rendah -
ditentukan dengan mendirikan tingkat positif dan negatif dengan probabilitas menyatakan, misalnya 5%. Selama
palsu di sejumlah tingkat di bawah dan di atas validasi batas cut-off yang diusulkan diberikan dalam
diharapkan cut-off prosedur terdokumentasi dinilai. (Lihat Contoh 4 dan
konsentrasi. Batas cut-off adalah di mana palsu Referensi Cepat 4).
C ( ug L- 1) Jumlah hasil positif / negatif

contoh 4 - Penentuan konsentrasi cut-off untuk metode kualitatif dengan
menyatakan cut-off sebesar 100 mg L- 1. Sepuluh pengamatan dicatat 150 10/0
pada setiap tingkat. Kurva respon dengan fraksi (di%) dari hasil positif 130 10/0
terhadap konsentrasi dibangun, dari yang itu mungkin untuk 100 9/1
menentukan, dengan inspeksi, konsentrasi ambang di mana tes menjadi 75 5/5
tidak dapat diandalkan. Dengan kriteria <5% hasil negatif palsu, 50 1/9
konsentrasi cut-off adalah antara 100 dan 130 mg L- 1. 20 0/10
10 0/10
Cepat Referensi 4 - Batas deteksi (LOD) untuk analisis kualitatif
Berapa banyak
Melakukan apa Apa untuk menghitung / menentukan dari data
waktu
Ukur, secara acak, kosong sampel dibubuhi 10 Kurva respon% hasil positif atau negatif terhadap konsentrasi harus
analit pada kisaran tingkat konsentrasi. dibangun, dari mana akan mungkin untuk menentukan, dengan
inspeksi, konsentrasi ambang di mana tes menjadi tidak dapat
diandalkan.
MV 2014 26
6.3 kisaran Kerja konsentrasi yang diukur adalah hasil yang diperoleh
dengan menerapkan prosedur pengukuran (termasuk
6.3.1 Definisi
persiapan sampel) menggunakan instrumen dikalibrasi
The 'jangkauan kerja' * adalah interval di mana metode sesuai dengan metode tertulis. Dalam perjalanan validasi
memberikan hasil yang dengan ketidakpastian yang kedua jangkauan kerja alat dan jangkauan kerja metode
dapat diterima. Ujung bawah kisaran kerja dibatasi oleh
harus dinilai. Data pada kisaran kerja sering dihasilkan
batas kuantifikasi LOQ. Ujung atas rentang kerja
selama pengembangan metode. Dalam kasus seperti itu
didefinisikan oleh konsentrasi di mana anomali yang
akan cukup untuk menyertakan data ini dalam laporan
signifikan dalam sensitivitas analitis yang diamati. Contoh
validasi.
dari ini adalah efek plateauing pada nilai absorbansi
tinggi UV / VIS spektroskopi.
6.3.4 Menilai jangkauan kerja alat
6.3.2 Pertimbangan untuk studi
validasi Antara LOQ dan ujung atas kisaran bekerja instrumen,
respon instrumen mematuhi hubungan yang diketahui,
Jangkauan kerja dari metode yang akan divalidasi harus
misalnya linear, lengkung dll Selama validasi perlu saya) mengkonfirmasi
dinyatakan dalam lingkup prosedur terdokumentasi (lihat A.5
hubungan ini, ii)
dalam Lampiran A). Selama validasi perlu untuk
mengkonfirmasi bahwa metode dapat digunakan lebih interval
menunjukkan bahwa instrumen jangkauan kerja kompatibel dengan
ini. Dalam rangka untuk menilai jangkauan kerja, laboratorium
interval dinyatakan dalam lingkup metode, dan aku aku aku) memverifikasi
perlu mempertimbangkan baik metode linearitas dan prosedur
bahwa yang diusulkan
kalibrasi yang diusulkan diberikan dalam metode.
Prosedur kalibrasi instrumen (titik tunggal, bracketing, atau
beberapa poin) yang memadai. Dalam rangka untuk menilai
instrumen kisaran bekerja dan mengkonfirmasi kebugaran
6.3.3 Metode dan jangkauan kerja alat untuk tujuan, standar kalibrasi dengan rentang konsentrasi
yang melebihi rentang konsentrasi yang diharapkan oleh ±
Banyak metode bergantung pada sampel uji yang diterima 10% atau bahkan ± 20% harus dipelajari dan sinyal diplot
di laboratorium (sampel laboratorium) sedang diproses (lihat Referensi Cepat 5 langkah 1 ). Untuk kisaran 1 sampai
(dicerna, diekstraksi, diencerkan) sebelum dapat 100 mg L- 1, ± 20% menunjukkan 0,8-120 mg L- 1. Konsentrasi
disampaikan kepada alat ukur dan sinyal direkam. Dalam yang dipilih harus merata spasi di kisaran. Penilaian awal
kasus ini ada dua rentang bekerja. Rentang metode kerja, jangkauan kerja adalah dengan inspeksi visual dari kurva
yang diberikan dalam lingkup metode (misalnya Bagian respon. Langkah selanjutnya adalah
A.5 dalam Lampiran A), berkaitan dengan konsentrasi

dalam sampel laboratorium. Hal ini diungkapkan, memastikan itu hubungan antara
misalnya, dalam mg kg- 1 untuk sampel uji yang solid. konsentrasi dan instrumen respon oleh
Rentang bekerja instrumen didefinisikan dalam hal memeriksa statistik regresi dan plot residual untuk model
konsentrasi dalam sampel uji diproses disajikan kepada yang dipilih (misalnya linear, kuadrat) (lihat Referensi
instrumen untuk pengukuran (misalnya mg L- 1 dalam Cepat 5 langkah 2). Penilaian juga dapat mencakup
larutan setelah penggalian sampel). Contoh dari langkah-langkah statistik khusus, seperti 'goodness of fit'
jangkauan kerja alat diberikan pada Gambar 3A di mana tes [56, 57]. Dari kurva respon dan statistik pendukung
konsentrasi dalam standar kalibrasi diplot terhadap sinyal yang diperoleh selama instrumen jangkauan kerja, analis
instrumen. Contoh dari berbagai metode kerja diberikan dapat menilai apakah prosedur kalibrasi disarankan
pada Gambar 3B mana konsentrasi sampel tes dikenal diberikan dalam metode yang tepat. Hal ini lebih dinilai
diplot terhadap konsentrasi diukur. Itu dengan mengevaluasi berbagai metode kerja.
*
The VIM jangka [7] adalah 'mengukur interval waktu' atau 'Interval
bekerja'
MV 2014 27
jarak kerja
100 jarak kerja
10 linier
80
Sinyal dari instrumen
8 sensitivitas
Δy 60
konsentrasi diukur
LOQ
LOD
analitis
LOQ
46 Δx
40
2
20
0 00
20 40 60 80 100
0 2 4 6 8 10 12
B
SEBUAH Konsentrasi dalam sampel uji
Konsentrasi dalam standar yang digunakan untuk kalibrasi
Gambar 3 - A) Contoh khas dari kurva respon yang diperoleh dengan metode instrumental. Kinerja karakteristik 'jangkauan kerja',
'rentang linear', 'sensitivitas analitis', 'LOD' dan 'LOQ' diidentifikasi.
B) contoh khas dari kurva diperoleh dengan prosedur pengukuran di mana konsentrasi sampel uji diplot terhadap konsentrasi
diukur.
6.3.5 Menilai jangkauan kerja metode rentang kerja dan linearitas dinilai oleh inspeksi visual
dari plot, didukung oleh statistik dan plot residual dari
regresi linier.
Dalam rangka untuk menilai berbagai metode kerja 1)
sampel dengan konsentrasi yang diketahui dan kosong
sampel harus tersedia; 2) sampel yang digunakan harus Penilaian dari jangkauan kerja akan didukung oleh data
diambil melalui seluruh prosedur pengukuran; 3) dari studi presisi dan bias (lihat Bagian 6.5.2 dan 6.6.2.1),
konsentrasi dari sampel yang berbeda sebaiknya menyediakan bahwa studi ini mencakup konsentrasi di
mencakup seluruh jajaran bunga dan 4) instrumen seluruh jajaran metode kerja. Rentang metode kerja perlu
seharusnya dikalibrasi sesuai prosedur kalibrasi ditetapkan untuk setiap matriks tercakup dalam ruang
disarankan. Hasil pengukuran untuk masing-masing lingkup metode. Hal ini karena gangguan dapat
sampel uji dihitung sesuai dengan prosedur tertulis (lihat menyebabkan respon non-linear, dan kemampuan metode
langkah 3 di Referensi Cepat 5). Nilai-nilai ini diplot pada y
untuk mengekstrak / memulihkan analit mungkin berbeda
dengan matriks sampel.
axis terhadap konsentrasi diketahui dari sampel ( x- axis)

seperti pada Gambar 3B. Metode
MV 2014 28
Referensi Cepat kisaran 5 - Kerja dan linear
Berapa
Melakukan apa kali Apa yang menghitung dari data komentar
1) Ukur kosong ditambah 1 Plot respon (y axis) terhadap Ini akan memberikan konfirmasi visual dari
kalibrasi standar, di 6-10 konsentrasi (sumbu x). apakah atau tidak jangkauan kerja instrumen
konsentrasi merata spasi di adalah linear.
seluruh kisaran bunga. Visual memeriksa untuk mengidentifikasi berbagai
linear perkiraan dan batas-batas atas dan bawah Catatan: Bila sinyal tidak berbanding lurus
dari jangkauan kerja untuk instrumen. dengan konsentrasi, misalnya ketika
bekerja dengan pH atau ion lainnya
elektroda selektif atau metode
kemudian pergi ke 2). immunometric, transformasi dari nilai yang
terukur diperlukan sebelum linearitas dapat
dinilai.
2) Mengukur kosong 1 Plot respon (y axis) terhadap konsentrasi Tahap ini diperlukan untuk menguji berbagai
ditambah kalibrasi standar, (sumbu x). Visual memeriksa untuk outlier kerja, dianggap linear dan terutama di mana
2-3 kali di 6-10 konsentrasi yang mungkin tidak tercermin dalam regresi. metode menggunakan kalibrasi dua titik. Jika
merata spasi di seluruh standar deviasi sebanding dengan konsentrasi
kemudian mempertimbangkan menggunakan
linier. Menghitung statistik regresi yang sesuai. Hitung perhitungan regresi tertimbang daripada regresi
dan plot residual (selisih antara diamati nilai y sederhana non-tertimbang linear. Hal ini tidak
dan dihitung nilai y yang diprediksi oleh garis aman untuk menghapus outlier tanpa terlebih
lurus, untuk setiap x nilai). distribusi acak dari dahulu memeriksa dengan menggunakan
residual tentang nol menegaskan linearitas. tren pengukuran lebih lanjut pada konsentrasi di
sistematis menunjukkan non-linear atau dekatnya. Dalam keadaan tertentu untuk
perubahan berbeda dengan tingkat. kalibrasi instrumen itu mungkin lebih baik untuk
mencoba menyesuaikan kurva non-linear untuk
data. Jumlah sampel kemudian perlu
ditingkatkan. Fungsi lebih tinggi dari kuadrat
umumnya tidak disarankan.
3) Kalibrasi instrumen sesuai 1 Plot konsentrasi diukur ( y Langkah ini diperlukan untuk menilai apakah
prosedur kalibrasi yang axis) terhadap konsentrasi sampel uji ( x- sumbu). berbagai instrumen yang diusulkan dan
diusulkan. Ukur, sesuai Visual memeriksa untuk mengidentifikasi prosedur kalibrasi yang cocok untuk tujuan.
dengan metode tertulis, berbagai linear perkiraan dan batas-batas atas
bahan referensi ditambah dan bawah dari rentang kerja.
kosong atau blank sampel Jika data yang tersedia dari studi bias dan
berduri 2-3 kali di 6-10 presisi yang mencakup kisaran bunga, studi
Menghitung statistik regresi yang sesuai. Hitung berbagai metode kerja yang terpisah mungkin
dan plot residual (selisih antara diamati nilai y tidak diperlukan.
dan dihitung nilai y yang diprediksi oleh garis
konsentrasi merata spasi di lurus, untuk setiap x nilai). distribusi acak dari
kisaran bunga. residual tentang nol menegaskan linearitas. tren
sistematis menunjukkan non-linear.
MV 2014 29
6.4 sensitivitas Analytical hukum Lambert. Hal ini dapat digunakan sebagai pemeriksaan
instrumen kinerja dan standar
6.4.1 Definisi kadang-kadang memerlukan pemeriksaan tersebut harus dibuat [58].
sensitivitas analitis adalah perubahan respon instrumen
yang sesuai dengan perubahan kuantitas yang diukur
(misalnya konsentrasi analit), yaitu gradien dari respon 6,5 trueness
kurva [7, 18]. awalan 'analisis' 6.5.1 Terminologi untuk menggambarkan
aku s
kualitas pengukuran
direkomendasikan untuk menghindari kebingungan dengan
Dalam Panduan ini kami menggunakan tiga karakteristik
'Sensitivitas diagnostik' digunakan dalam pengobatan
kinerja terkait trueness, presisi
laboratorium [43]. 'Sensitivitas' Istilah aku s
dan ketidaktentuan untuk menggambarkan kualitas hasil yang
kadang-kadang digunakan untuk merujuk untuk membatasi deteksi namun
diperoleh dengan metode. Namun, para ilmuwan sering
penggunaan ini tidak disarankan di VIM.
menggunakan konsep yang berbeda, seperti jenis kesalahan
6.4.2 Aplikasi (random, sistematis dan kesalahan kotor), akurasi
sensitivitas analitis bukanlah karakteristik kinerja sangat (kebenaran dan presisi) dan
penting. Namun demikian, setidaknya dua aplikasi yang ketidakpastian. Beberapa konsep-konsep ini memiliki arti
berguna: kualitatif dan beberapa kuantitatif. Selama bertahun-tahun,
istilah serta definisi telah berubah dan istilah baru telah
1. Teoritis analitis sensitivitas diperkenalkan. Selain itu, berbagai sektor masih mendukung
kadang-kadang dikenal. Banyak ion elektroda selektif istilah yang berbeda, yang semuanya mengarah ke banyak
menunjukkan perilaku Nernst, misalnya sinyal dari elektroda kebingungan. Gambar 4 mengilustrasikan hubungan antara
kaca yang berfungsi dengan baik diharapkan dapat mengubah persyaratan dan rincian lebih lanjut diberikan dalam VIM [7] dan
dengan 59 mV / pH. Panduan Eurachem terminologi [8].
2. Dalam sistem pengukuran spektrofotometri yang
absorbansi dapat diprediksi dari bir-
Jenis kesalahan deskriptif kualitatif ukuran kuantitatif
sistematis
trueness prasangka
kesalahan
u prasangka
(Total) error akurasi ketidaktentuan
ukuran spread ( s, RSD

error
ketelitian ...) di bawah kondisi
random
tertentu
Gambar 4 - Ilustrasi hubungan antara beberapa konsep dasar yang digunakan untuk menggambarkan kualitas hasil pengukuran
(berdasarkan pada karya Menditto et al [59].). Evaluasi ketidakpastian menurut GUM [21] mengasumsikan koreksi bias diketahui dan
bahwa ketidakpastian koreksi bias u prasangka termasuk dalam pernyataan ketidakpastian akhir. Hal ini tersirat oleh panah putus-putus di
bawah kotak 'Bias'. Kedua konsep akurasi dan konsep ketidakpastian menganggap bahwa pengukuran dilakukan sesuai dengan
prosedur terdokumentasi dan bahwa efek dari 'kesalahan kotor' (kesalahan) tidak termasuk.
MV 2014 30
Pengukuran 'akurasi' mengungkapkan kedekatan hasil (%) = & ̅

& () * × 100 ( Eq. 4)
tunggal untuk nilai referensi * [29, 48]. (Untuk definisi yang
tepat melihat VIM 2.13). Validasi metode berusaha untuk Untuk menentukan bias menggunakan RM, mean dan standar
menyelidiki keakuratan hasil dengan menilai kedua efek deviasi dari serangkaian pengukuran ulangan ditentukan dan
sistematis dan acak pada hasil tunggal. Akurasi, oleh hasilnya dibandingkan dengan nilai properti yang ditetapkan dari
karena itu, biasanya dipelajari sebagai dua komponen: RM. RM ideal adalah bahan referensi matriks bersertifikat dengan
'trueness' dan 'presisi'. Selain itu, ekspresi semakin umum nilai properti dekat dengan orang-orang dari sampel uji yang
akurasi adalah 'ketidakpastian pengukuran', yang menarik. CRMs umumnya diterima sebagai menyediakan nilai-nilai
menyediakan sosok tunggal. Evaluasi trueness dijelaskan di dapat dilacak [61, 62]. Hal ini juga penting untuk diingat bahwa RM
bawah sementara presisi dibahas dalam Bagian 6.6 dan tertentu seharusnya hanya digunakan untuk satu tujuan selama
ketidakpastian dalam Bagian 6.7. studi validasi. Sebagai contoh, sebuah RM digunakan untuk
kalibrasi harus tidak juga dapat digunakan untuk mengevaluasi
Bias. Dibandingkan dengan berbagai jenis sampel dan analit yang
Pengukuran 'trueness' adalah ekspresi dari seberapa dekat dihadapi oleh
mean dari jumlah tak terbatas hasil (yang dihasilkan oleh
metode) adalah nilai referensi. Karena tidak mungkin untuk laboratorium itu
mengambil jumlah tak terbatas pengukuran, trueness tidak ketersediaan RM terbatas, tetapi penting bahwa bahan yang
dapat diukur. Kami bisa, bagaimanapun, membuat penilaian dipilih adalah sesuai dengan penggunaan.
praktis trueness tersebut. penilaian ini Mungkin perlu untuk mempertimbangkan bagaimana RM itu
biasanya ditandai, misalnya jika contoh
dinyatakan secara kuantitatif dalam hal 'Bias'. persiapan prosedur bekas selama
karakterisasi material tidak dimaksudkan untuk memberikan
6.5.2 Penentuan bias
konsentrasi analit total tetapi jumlah diekstrak dalam kondisi
Sebuah tekad praktis bias bergantung pada tertentu. Untuk pekerjaan peraturan, bahan bersertifikat yang
perbandingan mean dari hasil ( x) dari metode kandidat relevan, idealnya matriks-cocok jika tersedia, harus digunakan.
dengan nilai referensi yang sesuai ( ref Untuk metode yang digunakan untuk jangka panjang pekerjaan di
x). * Tiga pendekatan umum yang tersedia: a) rumah, bahan di-rumah yang stabil dapat digunakan untuk
analisis bahan referensi, b) percobaan pemulihan memantau Bias tetapi CRM harus digunakan dalam penilaian
awal.
menggunakan sampel berduri, dan
c) dibandingkan dengan hasil yang diperoleh dengan metode lain -
melihat studi Referensi Cepat 6. Bias harus mencakup ruang Dengan tidak adanya RMS cocok, studi pemulihan (spiking
lingkup metode dan karena itu mungkin memerlukan analisis jenis eksperimen) dapat digunakan untuk memberikan indikasi
sampel yang berbeda dan / atau tingkat analit yang berbeda. Untuk tingkat kemungkinan bias. Analit dapat hadir dalam berbagai
mencapai hal ini, kombinasi dari pendekatan yang berbeda mungkin bentuk dalam sampel dan kadang-kadang hanya
diperlukan. bentuk-bentuk tertentu yang menarik bagi analis. Metode
sehingga dapat sengaja dirancang untuk menentukan hanya
bentuk khusus dari analit. Kegagalan untuk menentukan
bias dapat dinyatakan secara absolut
sebagian atau seluruh yang hadir analit mungkin
$ = ̅? -? (Persamaan. 1) mencerminkan masalah yang melekat dengan metode ini.
atau relatif dalam persen

Oleh karena itu, perlu untuk menilai efisiensi metode untuk
mendeteksi semua analit hadir [60, 63].
$ (%) = & ̅ '& () * (Persamaan. 2)
& () * × 100
atau sebagai pemulihan lonjakan relatif

Karena tidak biasanya diketahui berapa banyak dari analit
(%) = & ̅, '& ̅ (Persamaan. 3) tertentu hadir dalam porsi tes, sulit untuk memastikan
& -. / 0) × 100
seberapa sukses metode ini telah berada di penggalian itu
dimana ̅ adalah nilai rata-rata dari sampel berduri dan x paku adalah dari matriks sampel. Salah satu cara untuk menentukan
konsentrasi menambahkan. Namun efisiensi ekstraksi adalah spike bagian uji dengan analit
pada berbagai konsentrasi, kemudian ekstrak bagian uji
di beberapa sektor pengukuran analitis,
berduri dan mengukur konsentrasi analit. Masalah yang
pemulihan relatif ( 'recovery jelas') di persen juga
melekat dengan ini adalah bahwa analit diperkenalkan
digunakan [60].
sedemikian rupa mungkin tidak akan terikat kuat sebagai
*
sesuatu yang
Nilai referensi kadang-kadang disebut sebagai 'nilai sebenarnya'
atau 'nilai konvensional benar'.
MV 2014 31
secara alami terdapat dalam matriks porsi tes dan teknik Tujuan dari validasi adalah untuk menunjukkan bahwa metode
akan memberikan kesan terlalu tinggi dari efisiensi ekstraksi. kandidat memberikan hasil yang setara dengan metode yang sudah
Dimungkinkan untuk menilai Bias dengan membandingkan ada. Berikut tujuannya adalah untuk menetapkan bahwa tidak ada
hasil dari metode kandidat dengan yang diperoleh dari bias signifikan dalam kaitannya dengan hasil yang dihasilkan dengan
metode alternatif. Ada dua jenis umum dari metode alternatif metode yang ada (meskipun metode ini mungkin sendiri menjadi
yang mungkin ditemui - metode referensi atau metode yang bias).
sedang digunakan secara rutin di laboratorium. Sebuah

metode referensi dimaksudkan untuk memberikan 'diterima Dalam kedua kasus hasil dari kandidat dan metode
nilai referensi' untuk properti yang diukur dan umumnya akan alternatif, untuk sampel yang sama atau sampel,
memberikan hasil dengan ketidakpastian yang lebih kecil dibandingkan. Sampel (s) mungkin di rumah RM, atau
dibandingkan dengan metode calon. Sebuah jenis tertentu sampel uji hanya khas. Keuntungan dari pendekatan ini
dari metode referensi adalah metode utama. * Kasus kedua adalah bahwa bahan tidak perlu CRMs sebagai metode
muncul ketika alternatif memberikan nilai referensi. Metode ini sehingga
dapat diuji pada sampel 'nyata' yang mewakili
orang-orang yang akan
ditemui secara rutin oleh itu

laboratorium.
*
'Metode Primer': metode memiliki sifat-sifat metrologi tertinggi,
yang operasi benar-benar dijelaskan dan dipahami dalam unit SI dan
yang hasilnya diterima tanpa mengacu pada standar
kuantitas yang sama (CCQM). Itu

sesuai jangka VIM (lihat 2.8 di [7]) adalah 'prosedur pengukuran
referensi utama'.
MV 2014 32
Cepat Referensi 6 - trueness
Berapa banyak Apa untuk menghitung / menentukan

Melakukan apa komentar
waktu dari data
a) Ukur RM 10 Bandingkan nilai rata-rata, x dengan nilai Memberikan ukuran bias memperhitungkan efek
menggunakan metode referensi untuk RM. dari kedua metode dan laboratorium Bias.
kandidat. Hitung Bias, b, persen relatif bias b (%) atau
relatif persen recovery (pemulihan jelas).
$ = ̅? -? $ (%) = ̅
-? X
× 100
̅ × 100
(%) =
b) Ukur matriks kosong 10 Bandingkan perbedaan antara nilai sampel berduri harus dibandingkan dengan sampel
atau sampel uji unspiked rata-rata berduri ̅ dan berarti yang sama unspiked untuk menilai pemulihan bersih
dan dibubuhi dengan nilai x dengan konsentrasi dari lonjakan menambahkan.
analit kepentingan pada ditambahkan . Menghitung
rentang konsentrasi. relatif pemulihan lonjakan
(%) pada berbagai Penerimaan dari sampel berduri atau kosong
konsentrasi: matriks biasanya akan lebih baik daripada untuk

sampel rutin di mana analit yang lebih erat
terikat.
(%) = ̅ -?? ̅ × 100
c) sampel Ukur RM / test 10 Bandingkan nilai rata-rata x dengan nilai Memberikan ukuran bias relatif terhadap metode
menggunakan metode rata-rata ̅ dari alternatif. Metode alternatif mungkin metode
calon dan metode pengukuran yang dilakukan dengan acuan atau, jika tujuannya adalah untuk
alternatif. menggunakan metode alternatif. Hitung Bias b atau mengganti salah satu metode dengan yang lain
persen relatif Bias dan ada kebutuhan untuk menunjukkan
b (%) atau relatif persen recovery performa yang setara, metode yang sedang
(pemulihan jelas). digunakan di laboratorium. Metode alternatif
mungkin sendiri menjadi bias, dalam hal
$ = ̅ -?? ̅ $ (%) = ̅ eksperimen tidak akan memberikan ukuran
mutlak trueness.
-? X2
× 100
̅
̅ × 100
(%) =
CATATAN Bias mungkin berbeda dengan matriks dan tingkat konsentrasi yang berarti bahwa jumlah matriks dan tingkat konsentrasi untuk
diperiksa harus dinyatakan dalam rencana validasi.
MV 2014 33
6.5.3 Menafsirkan pengukuran Bias mempertimbangkan perbedaan yang dikenal antara metode dalam
penyelidikan dan metode (s) digunakan untuk mendapatkan nilai
Gambar 5 menunjukkan dua komponen bias, di sini disebut
referensi ketika mereka menginterpretasikan hasil.
sebagai 'metode Bias' dan 'Bias laboratorium'.
Untuk memenuhi persyaratan analitis tertentu, analit yang

Metode Bias timbul dari kesalahan sistematis yang melekat ke
sama dapat diukur dengan menggunakan beberapa alat ukur
metode, terlepas dari mana laboratorium menggunakannya.
yang berbeda pada banyak situs dalam organisasi yang
Bias laboratorium timbul dari kesalahan sistematis tambahan
sama. Dalam hal ini, banyak dan kompleks sumber bias
khusus untuk laboratorium dan interpretasi dari metode ini.
timbul dalam organisasi. Dalam situasi umum dan kompleks
Dalam isolasi, laboratorium hanya bisa memperkirakan
ini, organisasi dapat menetapkan prosedur untuk
gabungan (total) bias dari dua sumber tersebut. Namun,
memperkirakan ketidakpastian perwakilan mencakup semua
dalam memeriksa Bias, penting untuk menyadari konvensi
situs / instrumen untuk setiap aplikasi. Ini sebaiknya harus
yang berlaku untuk tujuan tertentu. Sebagai contoh, untuk
menggunakan bahan yang memiliki sifat yang sama,
beberapa aplikasi makanan, batas peraturan yang ditetapkan
termasuk matriks sampel, sebagai sampel dimaksudkan
dalam hal hasil yang diperoleh dari yang ditentukan empiris (
untuk diukur. analisis komponen varians dapat digunakan
'operasional didefinisikan')
untuk mengidentifikasi penyebab utama variasi berkontribusi
metode standar.
Metode bias untuk pengukuran 'empiris'
prosedur adalah dengan definisi nol. Bias yang timbul
untuk pengukuran keseluruhan
ketidakpastian, sehingga tindak lanjut untuk mengurangi
semata-mata dari metode tertentu (lihat Gambar 5) kemudian
diabaikan, dan komparabilitas metrologi dengan laboratorium lain perbedaan di seluruh organisasi. Untuk sebagian besar
menggunakan metode yang sama adalah perhatian utama. tujuan, bagaimanapun, penerimaan bias harus diputuskan
Dalam situasi ini, laboratorium idealnya menentukan Bias atas dasar bias keseluruhan diukur terhadap RMS yang tepat,
menggunakan bahan referensi bersertifikat dengan metode dibubuhi bahan atau metode referensi, dengan
peraturan atau empiris tertentu diselidiki, dalam hal bimbingan mempertimbangkan ketepatan metode dan setiap
biasa untuk memeriksa dan menafsirkan bias yang berlaku. Di ketidakpastian dalam nilai-nilai referensi, dan akurasi yang
mana ada bahan tersebut tersedia, atau untuk menambahkan diperlukan oleh penggunaan akhir. tes signifikansi statistik
informasi lebih lanjut, laboratorium dapat menggunakan bahan direkomendasikan [64, 65].
alternatif, tetapi harus
kemudian mengambil peduli untuk
Nilai diukur (rata-rata

laboratorium) Nilai referensi
Jumlah Bias
antar laboratorium
berarti
Bias laboratorium metode Bias
Gambar 5 - Total Bias diukur terdiri dari metode bias dan bias yang laboratorium. Catatan: Laboratorium dan metode bias yang ditampilkan di sini
bertindak dalam arah yang sama. Pada kenyataannya hal ini tidak selalu terjadi.
MV 2014 34
6,6 Presisi kondisi. kondisi yang tepat digunakan harus dinyatakan dalam
setiap kasus. Tujuannya adalah untuk mendapatkan perkiraan
6.6.1 Replikasi presisi yang mencerminkan semua sumber variasi yang akan
Replikasi adalah penting untuk memperoleh estimasi yang terjadi di laboratorium tunggal di bawah kondisi rutin (analis yang
dapat diandalkan dari karakteristik kinerja metode seperti berbeda, diperpanjang
presisi dan bias. Percobaan yang melibatkan analisis skala waktu, berbeda potongan-potongan
dari
ulangan harus dirancang untuk memperhitungkan semua peralatan dll). ‡
variasi dalam kondisi operasional yang dapat diharapkan
6.6.2.1 Perkiraan presisi - aspek umum
selama penggunaan rutin metode ini. Tujuannya harus untuk
menentukan variabilitas khas dan tidak variabilitas minimum.
Presisi umumnya tergantung pada konsentrasi analit,
sehingga harus ditentukan di sejumlah konsentrasi di
kisaran bunga. Hal ini dapat mencakup konsentrasi
6.6.2 kondisi Presisi tertentu yang menarik (seperti batas regulasi) ditambah
Presisi (pengukuran presisi) adalah ukuran dari seberapa hasil konsentrasi pada batas-batas interval pengukuran. Jika
dekat adalah satu sama lain [7, 29]. Hal ini biasanya relevan, hubungan antara presisi dan konsentrasi analit
dinyatakan dengan parameter statistik yang menggambarkan harus ditetapkan. Dalam kasus di mana konsentrasi
penyebaran hasil, biasanya standar deviasi diukur jauh di atas batas deteksi, presisi sering
(atau relatif standar ditemukan sebanding dengan konsentrasi analit. Dalam
deviasi), dihitung dari hasil yang diperoleh dengan kasus seperti itu mungkin lebih tepat untuk
melakukan pengukuran ulangan pada bahan yang cocok mengekspresikan presisi sebagai standar deviasi relatif
dalam kondisi tertentu. Menentukan 'kondisi tertentu' karena ini adalah sekitar konstan selama rentang bunga.
merupakan aspek penting dari evaluasi pengukuran
presisi - kondisi menentukan jenis perkiraan presisi yang
diperoleh.
'Pengulangan Pengukuran' dan 'pengukuran Untuk metode kualitatif, presisi tidak dapat dinyatakan
reproduktifitas' mewakili dua ekstrim sebagai deviasi standar atau standar deviasi relatif, tapi
ukuran presisi yang dapat diperoleh. Dokumentasi dapat dinyatakan sebagai tingkat positif (dan negatif) benar
metode standar (misalnya dari ISO) akan dan yang salah [55] (lihat Bagian 6.2.6).
biasanya mencakup
pengulangan dan data reproduktifitas mana yang berlaku.
Evaluasi presisi memerlukan pengukuran mereplikasi
cukup untuk dilakukan pada bahan yang cocok.
Pengulangan, diharapkan untuk memberikan variasi terkecil dalam hasil, Bahan-bahan harus mewakili sampel uji dalam hal
adalah ukuran dari variabilitas dalam hasil ketika pengukuran dilakukan matriks dan konsentrasi analit, homogenitas dan
oleh seorang analis tunggal dengan menggunakan peralatan yang sama stabilitas, tetapi tidak perlu CRMs. Ulangan juga harus
lebih dari satu skala waktu singkat. * independen, yaitu proses pengukuran keseluruhan,
termasuk persiapan sampel langkah, harus diulang.
Jumlah minimum ulangan
Reproduktifitas, diharapkan untuk memberikan variasi terbesar
dalam hasil, adalah ukuran dari variabilitas dalam hasil antara
laboratorium. † ditentukan bervariasi dengan protokol yang
berbeda, tetapi biasanya antara 6 dan 15 untuk setiap bahan
Antara dua ekstrem, 'menengah yang digunakan dalam penelitian ini. Perlu diingat bahwa sulit
(Pengukuran) presisi' memberikan perkiraan variasi dalam untuk memperkirakan standar deviasi diandalkan dari set data
hasil ketika pengukuran dilakukan di laboratorium tunggal dengan beberapa ulangan. Jika diterima, nilai-nilai dihitung dari
tetapi di bawah kondisi yang lebih bervariasi daripada beberapa set kecil pengukuran ulangan dapat dikombinasikan
pengulangan
(pooled) untuk mendapatkan perkiraan dengan derajat yang
*
cukup kebebasan.
Pengulangan kadang-kadang disebut sebagai 'withinrun',
'dalam-batch' atau presisi 'intra-assay'.
† Dalam validasi reproduktifitas mengacu pada variasi antara
laboratorium menggunakan metode yang sama. Reproduktifitas juga

dapat merujuk ke variasi yang diamati antara laboratorium ‡ presisi Menengah kadang-kadang disebut sebagai
menggunakan metode yang berbeda tapi berniat untuk mengukur 'dalam-laboratorium reproduktifitas', 'Antara-run
jumlah yang sama [7]. Variasi', 'antara batch variasi' atau 'variasi antar-assay'.
MV 2014 35
desain eksperimen tertentu, dianalisis menggunakan analisis cara yang sama, menggantikan s r dengan s saya dan s R,
varians (ANOVA), adalah cara yang efisien untuk memperoleh masing-masing.
perkiraan pengulangan dan presisi menengah dengan jumlah
Dokumentasi metode standar (misalnya dari ISO) biasanya
yang cocok derajat kebebasan (lihat Bagian 6.6.4 dan
akan menyertakan data untuk kedua batas pengulangan dan
Lampiran C untuk penjelasan lebih lanjut dari pendekatan ini).
batas reproduktifitas mana yang berlaku.
Lihat Referensi Cepat 7 untuk
informasi
eksperimen untuk menilai presisi. 6.6.4 Penentuan Simultan pengulangan dan
presisi menengah
6.6.3 batas Presisi
Dari standar deviasi s hal ini berguna untuk menghitung
Pendekatan untuk penentuan simultan pengulangan dan
'batas presisi' [29, 48]. Hal ini memungkinkan analis
presisi menengah dijelaskan dalam ISO 5725-3 [29].
untuk memutuskan apakah ada perbedaan yang
Selain itu, desain berdasarkan pedoman yang
signifikan, pada tingkat keyakinan tertentu, antara hasil
diharmoniskan untuk validasi laboratorium tunggal dari
dari analisis duplikat dari sampel yang diperoleh di
bawah kondisi tertentu. Batas pengulangan metode analisis [12] menawarkan kemungkinan untuk
( r) aku s menentukan pengulangan dan presisi menengah dari
studi tunggal. Subsamples dari bahan uji yang dipilih
dihitung sebagai berikut:
dianalisis dalam replikasi di bawah kondisi pengulangan
× = 2 × strr (Persamaan. 5) di sejumlah berbeda berjalan, dengan variasi maksimum
dalam kondisi antara berjalan (hari yang berbeda, analis
dimana faktor 2 mencerminkan perbedaan yang berbeda, peralatan yang berbeda, dll). Melalui
antara dua pengukuran, t adalah dua ekor ANOVA satu arah [5, 6], pengulangan dapat dihitung
Mahasiswa t nilai untuk jumlah tertentu derajat kebebasan sebagai presisi withingroup, sedangkan presisi antara
(yang berhubungan dengan estimasi s r) diperoleh sebagai akar kuadrat dari jumlah kuadrat dari
dan pada tingkat yang diperlukan kepercayaan. Untuk jumlah withingroup dan antara kelompok presisi. jenis desain
relatif besar dari derajat kebebasan, t dapat memberikan cara yang efisien untuk memperoleh
≈ 2 pada tingkat kepercayaan 95%, sehingga batas derajat yang cukup kebebasan untuk perkiraan
pengulangan sering diperkirakan sebagai: pengulangan dan antara kelompok presisi. Misalnya, 8
kelompok 2 ulangan mengarah ke 8 dan 7 derajat
2=. 8 × srr (Persamaan. 6)
kebebasan untuk
Batas presisi menengah dan batas reproduktifitas ( R) dihitung

dalam
perkiraan
pengulangan dan antara run presisi, masing-masing.
Lihat Lampiran lanjut C.
MV 2014 36
Cepat Referensi 7 - Repeatability, presisi menengah dan reproduktifitas
Apa untuk menghitung / menentukan
Melakukan apa Berapa kali dari data komentar
RMS mengukur, sampel uji

surplus atau kosong sampel
berduri pada berbagai
konsentrasi di kisaran bekerja.
Pengulangan dan presisi
menengah dapat ditentukan
dari studi terpisah (melihat) dan
b) di bawah) atau
secara bersamaan dalam sebuah studi
tunggal (lihat c) di bawah ini.
a) analis yang sama dan 6-15 ulangan untuk Menentukan standar deviasi Memperkirakan standar deviasi
peralatan, laboratorium yang masing-masing bahan. (S) hasil untuk setiap materi. pengulangan s r untuk masing-masing
bahan. Sebuah
sama, skala waktu singkat.
b) analis yang berbeda dan peralatan, 6-15 ulangan untuk Menentukan standar deviasi Memperkirakan presisi antara
laboratorium yang sama, skala waktu masing-masing bahan. (S) hasil untuk setiap materi. standar deviasi s saya untuk
diperpanjang. masing-masing bahan.
c) analis yang berbeda dan peralatan, 6-15 kelompok Hitung pengulangan standar Memperkirakan standar deviasi
laboratorium yang sama, skala waktu duplikat deviasi dari hasil ANOVA untuk pengulangan s r untuk masing-masing
pengukuran b
diperpanjang. setiap materi. bahan.
diperoleh di bawah kondisi
pengulangan pada berbagai
hari / peralatan untuk setiap Hitung antara kelompok standar Memperkirakan presisi antara
materi. deviasi dari ANOVA dan standar deviasi s saya untuk
menggabungkan dengan standar masing-masing bahan.
deviasi pengulangan untuk
masing-masing bahan.
d) analis yang berbeda dan 6-15 kelompok Hitung pengulangan standar Memperkirakan standar deviasi
peralatan, laboratorium yang duplikat deviasi dari hasil ANOVA untuk pengulangan s r untuk masing-masing
pengukuran b
berbeda, skala waktu diperpanjang. setiap materi. bahan.
diperoleh di bawah kondisi
pengulangan di laboratorium yang Memperkirakan standar deviasi
berbeda untuk masing-masing Hitung antara-laboratorium standar reproduktifitas s R untuk
bahan. deviasi dari hasil ANOVA dan masing-masing bahan. Hal ini
menggabungkan dengan standar deviasi memerlukan perbandingan antar
pengulangan untuk masing-masing laboratorium khusus ( 'trial
bahan. kolaboratif').
Sebuah Sebuah standar deviasi pengulangan juga dapat diperkirakan dengan penyatuan beberapa set data kecil, misalnya n = 2, dari hari yang berbeda.
b pengukuran duplikat dalam masing-masing kelompok akan memberikan sejumlah seimbang derajat kebebasan untuk perkiraan within- dan
antara kelompok standar deviasi. Peningkatan jumlah ulangan per kelompok akan meningkatkan jumlah derajat kebebasan yang terkait dengan
perkiraan pengulangan.
MV 2014 37
6,7 ketidakpastian Pengukuran metode standar pengulangan, dan itu

Sebuah diskusi penuh (pengukuran) ketidakpastian presisi menengah laboratorium tidak lebih besar dari
yang diterbitkan reproduktifitas standar deviasi [67].
adalah di luar lingkup Panduan ini tetapi informasi rinci
dapat ditemukan di tempat lain [21, 22]. Ketidakpastian
adalah interval terkait dengan hasil pengukuran yang 6,8 ketidakrataan
menyatakan rentang nilai yang dapat cukup dikaitkan
6.8.1 Definisi
dengan kuantitas yang diukur. Perkiraan ketidakpastian
harus memperhitungkan semua efek diakui beroperasi The 'kekasaran' ( 'ketahanan') dari prosedur analitis adalah
pada hasil. Ketidakpastian yang terkait dengan setiap “ukuran kapasitas untuk tetap tidak terpengaruh oleh kecil,
efek digabungkan sesuai dengan prosedur mapan. tapi variasi yang disengaja dalam parameter metode.
Beberapa pendekatan untuk memperoleh perkiraan Kekasaran memberikan indikasi keandalan metode selama
penggunaan normal”[13].
ketidakpastian
untuk itu hasil dari kimia 6.8.2 uji ketidakrataan

pengukuran dijelaskan [22, 66, 67, 68]. Ini
Dalam metode apapun akan ada tahapan tertentu yang, jika tidak
memperhitungkan:
dilakukan cukup hati-hati, akan memiliki dampak yang signifikan pada
• secara keseluruhan, jangka panjang presisi metode (yaitu kinerja metode dan bahkan dapat mengakibatkan metode tidak bekerja
itu menengah ketelitian atau sama sekali. tahap ini harus diidentifikasi, biasanya sebagai bagian
reproduktifitas); dari pengembangan metode, dan jika mungkin, pengaruh mereka pada
• bias dan ketidakpastian yang, termasuk kinerja metode dievaluasi menggunakan 'test kekasaran' ( 'test
ketidakpastian statistik yang terlibat dalam pengukuran ketahanan'). The AOAC telah mendefinisikan istilah ini dan
bias dan ketidakpastian dalam nilai referensi [69, 70, menggambarkan teknik yang ditetapkan untuk bagaimana
71, 72, 73]; melaksanakan tes tersebut dengan menggunakan rancangan

Plackett-Burman desain eksperimental [74].
• peralatan kalibrasi. ketidakpastian
terkait dengan kalibrasi peralatan seperti saldo,
termometer, pipet dan termos sering diabaikan kecil
dibandingkan dengan presisi keseluruhan dan A 'uji kekasaran' melibatkan membuat perubahan yang
ketidakpastian dalam bias. disengaja untuk metode, dan menyelidiki efek berikutnya pada
Jika hal ini dapat diverifikasi maka kinerja. * Hal ini kemudian memungkinkan untuk
kalibrasi ketidakpastian tidak perlu dimasukkan dalam mengidentifikasi variabel dalam metode yang memiliki efek
estimasi ketidakpastian; paling signifikan dan memastikan bahwa, bila menggunakan
• efek yang signifikan yang beroperasi di selain di atas. metode, mereka dikontrol ketat. Di mana ada kebutuhan untuk
Misalnya, suhu atau waktu rentang diizinkan oleh metode memperbaiki metode lebih lanjut, perbaikan mungkin dapat
ini mungkin tidak sepenuhnya dilaksanakan dalam studi
dilakukan dengan berkonsentrasi pada bagian-bagian dari
validasi, dan efeknya mungkin perlu ditambahkan. Efek
metode yang dikenal untuk menjadi kritis. Kekasaran dari
tersebut dapat berguna diukur oleh penelitian kekasaran
prosedur harus ditetapkan untuk metode di-rumah
(lihat Bagian 6.8), atau studi terkait yang menetapkan
dikembangkan, metode diadaptasi dari literatur ilmiah dan
ukuran efek yang diberikan pada hasil.
metode yang diterbitkan oleh badan standardisasi digunakan di
luar lingkup yang ditentukan dalam metode standar. ketika
metode
Di mana kontribusi efek individu adalah penting,
untuk contoh di kalibrasi diterbitkan oleh
laboratorium, maka akan perlu untuk mempertimbangkan badan standardisasi yang digunakan dalam lingkup metode,
kontribusi individu dari semua individu kekasaran akan biasanya telah dipelajari sebagai bagian dari
efek secara terpisah. proses standarisasi. Oleh karena itu studi kekasaran dalam
banyak kasus tidak perlu sama
Perhatikan bahwa, tunduk pada pertimbangan tambahan
single-laboratorium tingkat.
efek di luar lingkup studi kolaboratif, standar deviasi
Informasi tentang kekasaran seharusnya
reproduktifitas membentuk perkiraan kerja
ditunjukkan dalam prosedur laboratorium dalam bentuk
standar gabungan
ketidakpastian asalkan bias laboratorium, diukur pada
*
Efek pada ukur biasanya dipelajari tetapi alternatif adalah untuk
bahan yang relevan, kecil sehubungan dengan standar
menyelidiki efek pada parameter eksperimental, misalnya resolusi
reproduktifitas deviasi, di-rumah pengulangan sebanding
puncak kromatogram.
dengan
MV 2014 38
Fitness untuk Tujuan dari Metode Analytical EURACPanduan hem
dari batas toleransi menyatakan untuk kritis

parameter eksperimental (Lihat Contoh 5 dan Cepat Referensi
8).
Contoh 5 - Ekstrak dari ISO 11732 [58]. Petunjuk indi Cate kekritisan beberapa eksperimen
parameter.
• NH 4 Cl kering untuk massa konstan pada 105 ± 2 ° C.

• jumlah yang diberikan dapat dikurangi (misalnya dengan satu te n).
• Disimpan dalam botol plastik (polyethylene) di suhu kamar, solusinya adalah stabil untuk sekitar 1 bulan.
• Absorbansi larutan harus harus 0,3-0,5.
• Degas dan memurnikan solusi ..., mengisinya ke dalam reagen waduk dan biarkan selama setidaknya 2 jam milik kita.
• Solusi ini dapat disimpan dalam lemari es untuk t paling satu minggu.
• Wadah kaca, polyalkenes atau politetrafluoroetilena etilena (PTFE) cocok untuk koleksi sampel.
• Dalam kasus luar biasa, sampel dapat disimpan sampai t o dua minggu, asalkan sampel telah pada membran
disaring setelah pengasaman.
Referensi Cepat 8 - ketidakrataan
Apa untuk menghitung / menentukan

Melakukan apa Berapa kali komentar
dari data
Mengidentifikasi variabel yang Kebanyakan efektif dievaluasi dengan Mengetahui pengaruh setiap perubahan kontrol kualitas desain atau
dapat memiliki dampak yang menggunakan desain eksperimental. kondisi pada hasil pengukuran. memodifikasi metode untuk
signifikan pada kinerja metode. mengontrol variabel kritis,
Misalnya 7 parameter dapat
dipelajari dalam 8 percobaan Peringkat variabel dalam urutan efek
Membuat percobaan menggunakan rancangan terbesar pada kinerja metode. misalnya dengan menyatakan
(menganalisis RMS atau sampel Plackett-Burman desain batas toleransi yang sesuai
uji) untuk memantau efek pada eksperimental [74]. dalam prosedur operasi
hasil pengukuran secara Melakukan tes signifikansi untuk standar.
sistematis mengubah variabel. menentukan apakah efek yang diamati
secara statistik signifikan.
MV 2014 39
MV 2014 40
7 Menggunakan metode divalidasi
Bila menggunakan metode orang lain, apakah itu adalah ahli di bidang tertentu kimia ditutupi dengan metode akan
metode yang dikembangkan di tempat lain dalam perlu berlatih sebelum menjadi sepenuhnya mahir. Bila
laboratorium, metode diterbitkan, atau bahkan metode menggunakan metode divalidasi (atau untuk yang peduli
standar atau peraturan, ada dua isu yang perlu
metode apapun)
dipertimbangkan.
itu berikut aturan adalah
Pertama adalah validasi data yang ada cukup untuk direkomendasikan untuk memastikan bahwa diterima
tujuan yang diperlukan atau validasi lebih lanjut kinerja dicapai.
diperlukan? Perlu dicatat bahwa, selain jumlah informasi
1. Pertama, analis harus benar-benar
yang disediakan pada kinerja metode,
akrab dengan metode yang baru sebelum menggunakannya
keandalan
untuk pertama kalinya. Idealnya metode pertama akan
sumber data validasi juga merupakan masalah. Data
menunjukkan analis oleh seseorang yang sudah ahli dalam
yang diperoleh dalam studi kolaboratif atau oleh
penggunaannya. Analis maka harus menggunakannya di
organisasi standardisasi yang diakui umumnya dianggap
bawah pengawasan awalnya dekat. Tingkat pengawasan akan
handal, kurang begitu Data
turun sampai
diterbitkan hanya dalam literatur ilmiah atau disediakan oleh
analis dipandang cukup
produsen peralatan dan / atau reagen. Kedua, jika validasi
kompeten untuk 'pergi solo'. Misalnya kompetensi
data yang ada memadai, adalah laboratorium dapat
bisa dibentuk dalam hal kemampuan analis untuk mencapai
memverifikasi kinerja mengaku mungkin dalam metode?
tingkat kinerja yang tercantum dalam metode, seperti
(Lihat Bagian 2.2). Adalah peralatan dan fasilitas yang
pengulangan, batas deteksi, dll Ini adalah khas dari cara
tersedia memadai? Jika metode telah divalidasi oleh
seseorang mungkin akan dilatih untuk menggunakan
pengujian ekstensif di bawah semua ekstrim kondisi operasi,
metode baru dan laboratorium prosedur pelatihan akan
maka analis baru yang kompeten mungkin akan beroperasi
sering dirancang dengan cara ini dengan langkah-langkah
secara memuaskan dalam data kinerja yang ada. Namun, ini
tujuan di tempat untuk menguji kompetensi pada interval
harus selalu setidaknya diperiksa. Hal ini biasanya cukup
selama pelatihan. Dalam kasus apapun,
untuk menguji kemampuan analis untuk mencapai
pengulangan dinyatakan dan untuk memeriksa bias, asalkan
analis harus membaca
metode standar yang digunakan dalam ruang lingkup. Hal ini
metode dan dibiasakan diri dengan teori di
tercakup lebih lengkap di bawah.
balik pengukuran, mental berlatih berbagai tahap,
mengidentifikasi titik-titik di mana istirahat dapat diambil,
dan bagian dari proses di mana analis berkomitmen untuk
kerja terus menerus. Dimana reagen perlu dipersiapkan,
metode standar umumnya diproduksi oleh beberapa bentuk seberapa stabil yang mereka sekali dipersiapkan? Apakah
studi kolaboratif dan badan standardisasi yang menghasilkan mereka perlu dipersiapkan sebelumnya? Sebuah
mereka sering memiliki ahli statistik untuk membantu perangkap klasik adalah untuk menghabiskan beberapa
memastikan bahwa validasi studi dirancang dengan benar, jam menyiapkan sejumlah sampel dan kemudian
dilakukan dan dievaluasi. Standar ISO 5725 [29] menjelaskan menemukan persiapan reagen yang dibutuhkan untuk
model yang banding antar laboratorium metode harus tahap berikutnya dari karya tersebut melibatkan sintesis
didasarkan dalam rangka memberikan informasi yang dapat yang rumit, sementara itu sampel sendiri mungkin
dipercaya tentang kinerja metode ini. Model ini semakin merendahkan.
diterapkan, tetapi tidak semua metode standar telah
mengalami hal itu. Ini akan berbahaya untuk menganggap
bahwa semua metode standar telah divalidasi dengan baik
2. Kedua, penilaian perlu dibuat dari
dan itu adalah tanggung jawab analis untuk memeriksa
berapa banyak sampel dapat dengan mudah ditangani pada satu
apakah atau tidak informasi yang diberikan pada kinerja
waktu. Hal ini lebih baik untuk menganalisis beberapa sampel baik
metode tersebut cukup.
daripada mencoba untuk menganalisis sejumlah besar dan harus
mengulang sebagian besar dari mereka.
3. Akhirnya, pastikan semua yang diperlukan untuk

Demikian pula, sering diasumsikan bahwa metode standar dapat
Metode tersedia sebelum pekerjaan dimulai. Ini
digunakan langsung dari rak dan data kinerja yang dipublikasikan
melibatkan berkumpul bersama peralatan yang tepat,
dicapai langsung oleh siapa pun yang menggunakan metode ini.
reagen dan standar (dengan
Ini bukan asumsi yang aman. Bahkan mereka yang akrab atau
MV 2014 41
persiapan petugas), mungkin sisakan ruang di lemari Metode lain divalidasi kemudian validasi ulang yang tepat
asam, dll akan diperlukan. Tergantung pada sifat mereka,
perubahan mungkin membuat data validasi asli tidak
Jika diperlukan untuk beradaptasi atau mengubah seseorang
relevan.
MV 2014 42
8 Menggunakan validasi data untuk merancang kontrol kualitas
8.1 Pendahuluan proses. sampel QC, dianalisis pada interval dalam batch
'Jaminan kualitas' (QA) dan 'kontrol kualitas' (QC) adalah analitis akan menunjukkan pergeseran dalam sistem;
istilah yang artinya sering bervariasi sesuai dengan penggunaan berbagai jenis kosong akan menunjukkan apa
konteksnya. Menurut ISO, jaminan kualitas membahas kontribusi untuk sinyal instrumen selain yang dari analit
kegiatan laboratorium menyanggupi untuk memberikan adalah; duplikat analisis memberikan cek dari pengulangan.
keyakinan bahwa persyaratan mutu akan dipenuhi, sampel QC adalah contoh khas yang selama periode waktu
sedangkan kontrol kualitas menjelaskan langkah-langkah tertentu yang cukup stabil dan homogen untuk memberikan
individu yang digunakan untuk benar-benar memenuhi hasil yang sama (tergantung variasi acak dalam kinerja
persyaratan [9]. metode), dan tersedia dalam jumlah yang cukup untuk
memungkinkan analisis berulang dari waktu ke waktu. Selama
periode ini ketepatan antara metode dapat diperiksa dengan
Validasi metode memberikan gambaran tentang kemampuan metode
memantau nilai-nilai yang diperoleh dari analisis sampel QC,
dan keterbatasan yang mungkin dialami digunakan secara rutin
biasanya dengan memplot mereka pada peta kendali. Batas
sedangkan metode yang memegang kendali. kontrol tertentu perlu
yang ditetapkan untuk nilai-nilai pada tabel (konvensional
diterapkan untuk metode untuk memverifikasi bahwa itu tetap dalam
'batas peringatan' ditetapkan pada ± 2 s tentang nilai rata-rata,
kontrol,
dan 'batas tindakan' ditetapkan pada ± 3 s tentang nilai
yaitu adalah melakukan dengan cara yang diharapkan.
rata-rata). Asalkan nilai QC yang diplot sesuai dengan
Selama tahap validasi metode ini sebagian besar
aturan-aturan tertentu yang berkaitan dengan batas-batas
diterapkan untuk sampel konten yang diketahui. Setelah
yang ditetapkan, QC dianggap memuaskan. Selama nilai
metode ini digunakan secara rutin digunakan untuk
sampel QC diterima kemungkinan bahwa hasil dari sampel di
sampel konten yang tidak diketahui. QC internal yang
batch yang sama sebagai sampel QC dapat diambil sebagai
cocok dapat diterapkan dengan terus mengukur sampel
diandalkan. Penerimaan dari nilai yang diperoleh dengan
uji yang stabil, sehingga memungkinkan analis untuk
sampel QC harus diverifikasi sedini praktis dalam proses
memutuskan apakah berbagai jawaban yang diperoleh
analitis sehingga dalam hal masalah, sebagai upaya sesedikit
benar-benar mencerminkan keragaman sampel yang
mungkin telah terbuang pada analisis tidak dapat diandalkan
dianalisis atau apakah perubahan yang tak terduga dan
tidak diinginkan yang terjadi dalam kinerja metode. dari sampel itu sendiri.
Dalam prakteknya ini sampel dikenal harus diukur

dengan setiap batch sampel sebagai bagian dari proses
kontrol kualitas. Pemeriksaan dilakukan akan tergantung
pada sifat, kekritisan dan frekuensi analisis, ukuran
batch, tingkat otomatisasi dan uji kesulitan, dan juga
pada pelajaran selama proses pengembangan dan Selama validasi metode perkiraan awal dari langkah-langkah
validasi. presisi yang berbeda diperoleh. Dalam rangka untuk menetapkan
batas yang realistis pada peta kendali, pengukuran harus
mencerminkan cara metode ini sebenarnya dimaksudkan untuk
digunakan secara dayto-hari. Dengan demikian pengukuran
8.2 kontrol kualitas internal selama validasi harus meniru semua kemungkinan variasi di
operasi
QC internal mengacu pada prosedur yang dilakukan oleh
kondisi: berbeda analis;
staf laboratorium untuk pemantauan terus menerus dari
variasi suhu laboratorium dll Jika hal ini tidak dilakukan, maka
operasi dan hasil pengukuran dalam rangka untuk
standar deviasi akan realistis kecil, sehingga batas-batas yang
memutuskan apakah hasil yang cukup handal akan dirilis
ditetapkan pada grafik yang tidak mungkin dipenuhi dalam
[18, 75]. Ini termasuk analisis ulangan sampel yang stabil
penggunaan normal. Untuk alasan ini, umumnya disarankan
tes, kosong, solusi standar atau bahan serupa dengan yang
untuk menilai kembali batas menyatakan setelah satu tahun
digunakan untuk kalibrasi, melonjak sampel, sampel buta
dan QC sampel [76]. Penggunaan bagan kontrol atau saat dalam jumlah yang memadai hasil yang telah
direkomendasikan untuk pemantauan hasil QC [76, 77]. QC dikumpulkan [76]. Penggunaan berbagai jenis kosong
diadopsi harus terbukti cukup untuk memastikan validitas memungkinkan analis untuk memastikan bahwa perhitungan
hasil. Berbagai jenis kontrol kualitas dapat digunakan untuk yang dibuat untuk analit dapat sesuai dikoreksi untuk
memantau berbagai jenis variasi dalam menghilangkan kontribusi untuk respon yang tidak
MV 2014 43
disebabkan analit. Pengulangan analisis sampel uji rutin sering harus tunduk prosedur QC sistematis
menyediakan sarana memeriksa perubahan presisi menggabungkan penggunaan bagan kontrol dan sampel
dalam proses analisis, yang dapat mempengaruhi hasil cek.
[78]. Ulangan bisa berdekatan dalam batch untuk
8,3 kontrol kualitas Eksternal
memeriksa pengulangan.
Partisipasi teratur dalam uji profisiensi (PT), juga dikenal
sebagai penilaian kualitas eksternal (EQA) adalah cara
Analisis sampel buta secara efektif bentuk analisis berulang
diakui untuk laboratorium untuk memantau kinerja terhadap
dan menyediakan sarana untuk memeriksa presisi. Ini terdiri kedua sendiri
dari direplikasi bagian uji ditempatkan dalam batch analitis, persyaratan dan norma laboratorium rekan. PT membantu
mungkin dengan supervisor laboratorium, dan disebut untuk menyoroti variasi antara
demikian karena analis biasanya tidak menyadari identitas laboratorium (reproduktifitas), dan kesalahan sistematis (bias).
bagian uji atau bahwa mereka ulangan. Jadi analis tidak
memiliki prasangka-prasangka yang harus terkait hasil
skema PT dan jenis-jenis perbandingan antar
tertentu. Standar atau bahan serupa dengan yang laboratorium diterima sebagai sarana penting
digunakan untuk kalibrasi, ditempatkan pada interval di pemantauan tingkat kesetaraan hasil analisis di tingkat
batch analitis, memungkinkan pemeriksaan harus dibuat nasional dan internasional. badan akreditasi mengakui
bahwa respon dari proses analitis untuk analit stabil. Saya t manfaat
skema ini dan sangat mendorong laboratorium untuk
berpartisipasi dalam PT / EQA sebagai bagian integral dari
manajemen mutu mereka [79]. Hal ini penting untuk memantau
adalah tanggung jawab laboratorium PT hasil sebagai bagian dari prosedur QC dan mengambil
manajemen untuk mengatur dan membenarkan tingkat yang tindakan yang diperlukan. Dalam kasus tertentu, badan
sesuai kontrol kualitas, berdasarkan pada penilaian risiko, akreditasi dapat menentukan partisipasi dalam skema PT
dengan mempertimbangkan keandalan metode, kekritisan tertentu sebagai syarat untuk akreditasi. Nilai PT ini tentu saja
pekerjaan, dan kelayakan mengulangi analisis jika tidak bekerja hanya sebagai baik sebagai skema sendiri. Persyaratan untuk
dengan benar pertama kalinya. Hal ini diterima secara luas kompetensi penyedia PT dijelaskan dalam standar ISO / IEC
bahwa untuk analisis rutin, tingkat QC internal 5% adalah wajar, 17043 [80]. informasi praktis tentang cara untuk memilih,
yaitu 1 dari setiap 20 sampel yang dianalisis harus menjadi menggunakan dan menginterpretasikan PT skema disajikan
sampel QC. Namun, untuk yang kuat, dalam Eurachem Panduan [81]. Informasi tentang sejumlah
besar skema dapat ditemukan dalam database EPTIS
metode rutin dengan throughput yang sampel
yang tinggi, tingkat yang lebih rendah dari QC mungkin
wajar. Untuk prosedur yang lebih kompleks, tingkat 20% (Www.eptis.bam.de).
tidak luar biasa dan pada kesempatan bahkan 50% Namun, untuk muncul bidang analisis atau aplikasi langka
mungkin diperlukan. Untuk analisis yang dilakukan jarang, khususnya, mungkin tidak ada skema yang sepenuhnya tepat.
validasi sistem lengkap harus dilakukan pada setiap Dan keterbatasan lainnya sekarang dianggap dalam dokumen
kesempatan. Ini biasanya mungkin melibatkan penggunaan pedoman baru-baru ini [82] yang membutuhkan laboratorium
RM mengandung konsentrasi bersertifikat atau dikenal terakreditasi untuk memperoleh strategi untuk partisipasi
analit, diikuti oleh mereplikasi analisis sampel dan sampel mereka dalam PT.
berduri (sampel yang diketahui jumlahnya analit telah
sengaja ditambahkan). Analisis mereka dilakukan lebih
MV 2014 44
9 Dokumentasi metode divalidasi
9.1 Dari draft versi final berdiri dengan baik untuk digunakan oleh berbagai analis dan
memberikan hasil yang konsisten. Jika tidak maka redrafting perlu
Metode tunduk validasi, dilakukan dengan menggunakan
menjelaskan prosedur secara lebih rinci dan mengurangi ambiguitas.
prosedur terdokumentasi yang harus dipertimbangkan
draft sampai laporan validasi disetujui. Setelah proses
validasi selesai itu 9.2.2 Rekomendasi dalam standar
penting untuk dokumen itu
Sejumlah standar memberikan pedoman tentang apa jenis
Prosedur analitis sehingga metode ini dapat jelas dan
informasi yang harus disertakan saat mendokumentasikan
tegas dilaksanakan. Ada sejumlah alasan untuk ini.
metode. Dari sudut para ahli kimia pandang mungkin yang
paling berguna adalah seri ISO 78, yang menggambarkan
• Berbagai penilaian dari metode yang dilakukan selama dokumentasi dari sejumlah jenis metode analisis kimia
proses validasi berasumsi bahwa, digunakan, metode
yang akan digunakan dengan cara yang sama setiap (Badan standardisasi menghasilkan,
kali. Jika tidak, maka kinerja aktual memvalidasi dan dokumen saja sejumlah besar metode
metode ini tidak akan setiap tahun, dan perlu sebagai konsisten pendekatan
sesuai dengan kinerja diprediksi oleh data validasi. mungkin dan menghasilkan standar-standar ini terutama
Dengan demikian dokumentasi harus untuk kepentingan komite teknis mereka sendiri). ISO
membatasi ruang lingkup untuk memperkenalkan 78-2 [83] menyarankan pada metode dokumentasi untuk
variasi disengaja untuk metode ini. metode kimia umum. Sebuah tata letak berbasis di
• dokumentasi yang tepat juga diperlukan untuk audit sekitar standar ini termasuk dalam Lampiran A. Standar
dan evaluasi tujuan dan juga mungkin diperlukan untuk menunjukkan urutan logis untuk bahan dengan judul
alasan kontrak atau peraturan. direkomendasikan Rekomendasi informasi yang
seharusnya muncul di bawah judul masing-masing. Bila
• dokumentasi yang sesuai dari metode ini akan membantu menggunakan standar ini pembaca harus mencatat
untuk memastikan bahwa penerapan metode dari satu kebutuhan untuk menyeimbangkan fleksibilitas
kesempatan ke yang berikutnya konsisten. Karena kualitas pendekatan terhadap konsistensi. Sementara itu
dokumentasi memiliki efek langsung pada bagaimana secara diharapkan bahwa semua metode harus memiliki format
konsisten metode dapat diterapkan, kemungkinan untuk dokumen yang sama,
memiliki pengaruh pada presisi dan pengukuran
ketidakpastian.
Di fakta, ketidakpastian
kontribusi terkait dengan metode yang tidak cukup
didokumentasikan bisa begitu besar sehingga secara
kontrol 9.2.3 Dokumen
efektif membuat metode berguna. Anomali dalam
Sebuah laboratorium mendokumentasikan metode sendiri
dokumentasi harus diselesaikan sebelum perkiraan yang
mungkin manfaat dari mengembangkan 'rumah bergaya'.
masuk akal ketidakpastian dapat diperoleh.
Serta menyajikan informasi yang relevan dengan cara yang
mudah digunakan logis, juga memungkinkan beban pekerjaan
9.2 Rekomendasi dokumentasi akan tersebar di sejumlah penulis. Konsep yang
dihasilkan oleh sejumlah penulis dapat diperiksa
9.2.1 Memeriksa petunjuk
konsistensinya menggunakan pengecekan otoritas tunggal.
Hal ini tidak mudah untuk mendokumentasikan metode benar. Informasi
metode didokumentasikan merupakan bagian penting dari
harus muncul dalam kira-kira agar pengguna akan diharapkan untuk
sistem manajemen mutu laboratorium dan harus tunduk gelar
membutuhkannya. Sebuah perangkap umum adalah untuk
yang tepat pengendalian dokumen. Tujuan dari ini adalah
mengasumsikan bahwa setiap orang akan memahami mekanisme
untuk memastikan bahwa hanya metode dan prosedur yang
metode pada tingkat yang sama sebagai orang yang telah
telah resmi sebagai cocok untuk digunakan benar-benar
dikembangkan dan didokumentasikan itu. Pengetahuan menduga ini
digunakan. Oleh karena itu, sebagai bagian dari proses
bisa berbahaya. Sebuah cara yang berguna
dokumentasi, metode harus membawa informasi yang
untuk uji itu
memungkinkan pengguna untuk menilai apakah metode
dokumentasi untuk seorang rekan yang kompeten untuk bekerja
tersebut telah diizinkan untuk digunakan dan apakah itu
melalui dokumentasi persis dengan cara yang dijelaskan. Jika ini
selesai.
sesuai dengan apa yang dimaksudkan maka metode
didokumentasikan harus
MV 2014 45
mengenai nomor versi dan tanggal metode; penulis; metode direvisi. Hari-hari ini proses pengendalian dokumen sangat
berapa banyak salinan metode ada; dan pembatasan disederhanakan dengan menggunakan software tertentu. Perubahan
menyalin. Dari waktu ke waktu metode mungkin harus dilakukan hanya oleh mereka sehingga yang berwenang. Hal
ini dapat dikontrol dalam perangkat lunak di mana file yang relevan
memerlukan update. Teknologi yang mendukung
mungkin memiliki luas 'read-only' akses dan akses 'menulis' sangat
prosedur mungkin telah ditingkatkan,
terbatas.
untuk
contoh. pengendalian dokumen memungkinkan penarikan
kelancaran metode usang dan isu
MV 2014 46
10 Implikasi dari validasi data untuk menghitung dan melaporkan

hasil
Adalah penting bahwa analis mampu menerjemahkan data, yang Perawatan harus diambil ketika mencoba untuk menggunakan analisis
dihasilkan selama analisis sampel menggunakan metode hasil dengan -nya menemani
divalidasi, menjadi hasil yang langsung berkontribusi untuk ketidakpastian mencoba untuk memutuskan apakah atau tidak
memecahkan masalah pelanggan. konsinyasi asli dari mana sampel telah diambil sesuai dengan
Karakteristik kinerja didirikan selama proses spesifikasi atau batas [84]. keputusan seperti itu mungkin tidak
validasi bantuan untuk melakukan hal ini. Data untuk menjadi tanggung jawab analis, meskipun analis mungkin
pengulangan, presisi menengah dan reproduktifitas dapat diperlukan untuk memberikan saran teknis untuk membantu
digunakan untuk menentukan apakah perbedaan yang dalam proses pengambilan keputusan. Saat melaporkan hasil,
ditemukan ketika menganalisis sampel yang signifikan. analis harus memutuskan apakah untuk mengoreksi setiap bias
kontrol kualitas berdasarkan data validasi dapat digunakan
yang mungkin telah terdeteksi atau
untuk mengkonfirmasi bahwa metode ini dalam kontrol dan
memproduksi hasil yang berarti. Estimasi ketidakpastian
melaporkan hasil
pengukuran memungkinkan ekspresi hasilnya sebagai
dikoreksi tetapi mengakui keberadaan bias.
rentang nilai dengan tingkat diterima kepercayaan.
Perawatan harus diambil ketika melaporkan hasil sebagai

'tidak terdeteksi'. Pada sendiri pernyataan ini adalah tidak
Adalah penting bahwa analis memiliki akses ke data validasi yang
informatif dan harus disertai dengan penjelasan tentang apa
dapat digunakan untuk mendukung keabsahan hasil. Apakah atau
batas deteksi dalam hal itu. Kadang-kadang adalah tepat
tidak informasi tersebut diteruskan ke pelanggan adalah masalah
untuk melaporkan nilai numerik meskipun ini mungkin di
lain. Sangat sering pelanggan tidak akan memiliki keterampilan
bawah batas yang jelas deteksi. Pihak berwenang
teknis untuk menghargai pentingnya data. Dalam keadaan seperti
kadang-kadang dapat meminta
itu mungkin lebih aman untuk membuat data yang tersedia
bahwa batas
berdasarkan permintaan. Isu-isu seperti metode validasi, kuantifikasi dinyatakan.
variabilitas dan ketidakpastian pengukuran harus diperlakukan
dengan hati-hati dalam keadaan tertentu, misalnya dalam konteks
Di mana pernyataan ketidakpastian diperlukan dengan
hukum atau forensik. Mungkin lebih baik untuk terbuka tentang

hasilnya, mungkin tepat untuk mengutip ketidakpastian
adanya ketidakpastian yang melekat pada pengukuran dan siap diperluas dengan menerapkan faktor cakupan yang cocok.
untuk membenarkan keputusan yang dibuat dalam terang Misalnya, faktor cakupan 2 sesuai dengan interval dengan
mengetahui ketidakpastian itu. tingkat kepercayaan sekitar 95%. Untuk panduan lebih
lanjut tentang cara melaporkan ketidakpastian pengukuran,
Lihat Bagian 9 di itu

Eurachem / CITAC Panduan [22].
MV 2014 47
MV 2014 48
Lampiran A - Cara dokumentasi protokol
Dokumentasi yang memadai dari metode dibahas dalam Bagian 9 dari Panduan. Format berikut disertakan untuk referensi sebagai tata
letak yang sesuai. Hal ini didasarkan pada ISO 78-2 [83], tetapi berisi beberapa saran tambahan pada kalibrasi, kontrol kualitas, dan
pengendalian dokumen. Lampiran A adalah hanya untuk panduan dan harus disesuaikan dengan persyaratan khusus.
A.1 Kata pengantar

A.1.1 Update dan ringkasan tinjauan
Bagian ini memiliki tujuan ganda. Pertama, hal ini dimaksudkan untuk memungkinkan perubahan kecil yang akan dibuat
untuk teks metode tanpa perlu revisi penuh dan cetak ulang metode. Kedua, direkomendasikan bahwa setiap metode harus
ditinjau untuk kebugaran-untuk-tujuan berkala dan ringkasan berfungsi sebagai catatan bahwa ini telah dilakukan.
Ringkasan biasanya akan terletak di depan metode, hanya di dalam sampul depan.
A.1.2 Pembaruan
Setiap tangan ditulis perubahan pada teks metode tersebut akan diterima asalkan perubahan juga dicatat dalam tabel di
bawah (entri yang ditulis tangan diterima) dan tepat berwenang. Ini akan menjadi implisit bahwa otorisasi didukung fakta
bahwa efek dari perubahan pada metode validasi telah diselidiki dan menyebabkan tidak ada masalah, dan bahwa
perubahan telah dibuat untuk semua salinan metode.
# Bagian Sifat amandemen Tanggal Otorisasi

1 (misalnya) 3.4 tingkat perubahan aliran ke 1,2 ml min 1 8/2/96 Bina Marga
A.1.3 Ulasan
Pada waktu tertentu itu akan diharapkan bahwa tanggal di mana metode dipandang digunakan akan antara ulasan dan review berikutnya tanggal,
seperti yang ditunjukkan dalam tabel.
tanggal Ulasan Hasil dari tinjauan tanggal review berikutnya Otorisasi
A.2 pengantar
pendahuluan digunakan, jika perlu, untuk menyajikan informasi, seperti komentar mengenai isi teknis dari prosedur
atau alasan untuk persiapan. Jika informasi latar belakang metode ini diperlukan, sebaiknya dimasukkan dalam
klausul ini.
A.3 Judul
Judul harus mengungkapkan jenis sampel dimana metode pengujian berlaku, analit atau karakteristik yang
ditentukan dan prinsip penentuan. Ini harus dibatasi, sedapat mungkin, untuk informasi berikut. Format yang dipilih:
Penentuan A { analit atau ukur} ( di hadapan B { gangguan}) di C { matriks} menggunakan D { prinsip}.
Peringatan A.4
Seri memperhatikan setiap bahaya dan menggambarkan tindakan yang diperlukan untuk menghindari mereka. tindakan pencegahan rinci dapat diberikan
dalam bagian-bagian yang relevan, tetapi pemberitahuan harus ditarik dengan keberadaan bahaya dan perlu untuk tindakan pencegahan sini. Memberikan
peringatan cocok bahaya yang terlibat dengan:
• penanganan sampel;
• penanganan atau mempersiapkan pelarut, pereaksi, standar, atau bahan lain;
• pengoperasian peralatan;
MV 2014 49
• persyaratan untuk lingkungan penanganan khusus, misalnya lemari asap;

• Konsekuensi dari scaling up percobaan (batas ledakan).
A.5 Cakupan
Bagian ini memungkinkan pengguna potensial untuk melihat dengan cepat apakah metode ini mungkin tepat untuk aplikasi yang
diinginkan, atau apakah keterbatasan yang ada. Rincian berikut harus dicakup:
• deskripsi dari masalah yang mendasari (mengapa metode ini diperlukan);

• analit (s) atau ukur (s) yang dapat ditentukan dengan metode;
• bentuk di mana analit (s) ditentukan - spesiasi, total / tersedia dll .;
• sampel matriks (es) di mana mereka analit (s) dapat ditentukan;
• a (selang berukuran) jangkauan kerja di mana metode dapat digunakan. Ini harus mengacu pada sifat, misalnya
konsentrasi, dalam sampel laboratorium;
• gangguan dikenal yang mencegah atau membatasi penggunaan metode ini;
• teknik instrumental yang digunakan dalam metode;
• ukuran sampel minimum.
Sektor makanan [35] menggunakan konsep 'penerapan' sebagai sinonim untuk lingkup dan mendefinisikan sebagai “analit,
matriks, dan konsentrasi yang metode analisis dapat digunakan memuaskan”.
A.6 (Acuan normatif

klausul ini akan memberikan daftar dokumen-dokumen yang diperlukan untuk penerapan metode. Dokumen yang hanya
digunakan sebagai referensi dalam penyusunan metode tersebut harus ditunjukkan dalam daftar pustaka pada akhir dokumen.
Definisi A.7
Berikan setiap definisi istilah yang digunakan dalam teks yang mungkin diperlukan untuk pemahaman lengkap. Gunakan definisi ISO
sedapat mungkin. sumber kutipan. struktur analitis dapat dimasukkan di sini jika relevan.
A.8 Prinsip
Menguraikan langkah-langkah penting dari metode ini, prinsip dimana teknik analisis beroperasi. Sebuah diagram alur atau
diagram sebab-akibat dapat membantu. Bagian ini harus ditulis sehingga memungkinkan ringkasan di-aglance dari bagaimana
metode bekerja. Sertakan penjelasan pada prinsip perhitungan. Apabila diperlukan untuk memperjelas kerja metode atau
perhitungan, termasuk rincian dari setiap reaksi kimia yang relevan (misalnya, ini mungkin relevan di mana derivatisasi terlibat,
atau dalam titrimetri).
Misalnya “Konsentrasi berasal dari kurva kalibrasi 6 poin dengan membaca off konsentrasi, sesuai dengan
absorbansi sampel, dikoreksi untuk nilai kosong, dan mengalikannya dengan faktor konsentrasi.”
Reaksi A.9
klausul ini akan menunjukkan reaksi penting, jika mereka dianggap perlu untuk pemahaman teks atau perhitungan.
Mereka membenarkan perhitungan yang dibuat dari data yang diperoleh dalam penentuan dan dapat menyebabkan
pemahaman yang lebih baik dari metode ini, terutama jika beberapa perubahan berturut-turut terjadi di negara bagian
oksidasi unsur yang ditentukan. Ketika titrasi yang terlibat, mereka sangat berguna dalam menunjukkan jumlah setara
di setiap mol reaktan.
A.10 Reagen dan bahan

Daftar semua reagen dan bahan yang dibutuhkan untuk proses analisis, bersama-sama dengan karakteristik penting mereka
(konsentrasi, kepadatan, dll) dan nomor untuk referensi nanti. Daftar:
• Abstrak Layanan Kimia (CAS) nomor Registry (jika tersedia);

• rincian dari setiap bahaya yang terkait termasuk petunjuk untuk pembuangan;
• kelas analitis atau kemurnian;
• butuhkan untuk kalibrasi dan QC bahan berasal dari batch independen;
MV 2014 50
• rincian persiapan, termasuk kebutuhan untuk mempersiapkan terlebih dahulu;
• penahanan dan persyaratan penyimpanan;

• umur simpan bahan baku dan reagen siap;
• diperlukan komposisi dengan catatan dari jenis konsentrasi atau kuantitas lainnya;
• persyaratan pelabelan.
A.11 Aparatur
Jelaskan peralatan individu dan bagaimana mereka terhubung secara cukup rinci untuk memungkinkan ambigu set-up.
Nomor item untuk referensi nanti. Diagram dan diagram alur dapat membantu kejelasan. Setiap pemeriksaan fungsi aparat
dirakit harus diuraikan dalam “Prosedur” klausul dalam subpasal menuju “uji pendahuluan” atau “Periksa test” (lihat A.13).
Daftar minimum persyaratan kinerja dan persyaratan verifikasi, cross-referenced ke bagian kalibrasi (A.13) dan setiap
manual instrumen yang relevan. Jika sesuai, lihat Standar Internasional atau dokumen diterima secara internasional
lainnya mengenai gelas laboratorium dan aparat terkait. Sertakan persyaratan lingkungan (lemari asap dll).
A.12 Sampling
Pengambilan sampel dalam protokol ini meliputi baik sampling untuk mendapatkan sampel laboratorium dan subsampling di
laboratorium untuk mendapatkan sampel uji dari mana bagian tes akan ditarik. Jika sampel untuk persiapan sampel laboratorium
independen dari analisis kimia seperti itu, umumnya cukup untuk merujuk informatively dengan prosedur yang relevan khususnya
berkaitan dengan pertanyaan ini. Jika ada prosedur yang relevan seperti ada, klausa pengambilan sampel mungkin termasuk rencana
pengambilan sampel dan prosedur sampling, memberikan panduan tentang bagaimana untuk menghindari perubahan produk dan
dengan persyaratan akun mengenai penerapan metode statistik.
Sampling klausul harus memberikan semua informasi yang diperlukan untuk persiapan sampel uji dari sampel laboratorium.
Termasuk penyimpanan, pendingin / pretreatment dan pembuangan detail. Jika tahap ini sangat rumit, dokumen terpisah
menjelaskan langkah-langkah individu dapat dibenarkan.
Prosedur A.13
Jelaskan masing-masing urutan operasi. Jika metode yang akan dijelaskan sudah diberikan dalam standar lain, kalimat “menggunakan
metode yang ditetapkan dalam ISO 12345” atau “menggunakan salah satu metode yang ditetapkan dalam ISO 12345” harus digunakan,
dengan indikasi perubahan, jika perlu. operasi menyebutkan untuk yang tindakan pencegahan keselamatan khusus yang diperlukan. The
'Prosedur' klausul biasanya meliputi subclauses pada berikut.
• porsi tes (persiapan dari sampel uji atau sampel laboratorium dan massa yang diperlukan atau volume);
• tes kosong (kondisi dan keterbatasan);

• uji pendahuluan atau periksa tes (misalnya untuk memverifikasi kinerja dari alat ukur);
• determinasi (s) atau tes (s). Ini termasuk menyebutkan jumlah pengukuran atau tes (misalnya menduplikasi) dan penjelasan
rinci tentang semua langkah;
• kalibrasi. Mengidentifikasi bagian-bagian penting dari proses analitis. Ini harus dikendalikan oleh operasi hati-hati dan
kalibrasi. Referensi silang ke bagian terkait di atas. Termasuk kalibrasi peralatan - apa yang perlu dikalibrasi,
bagaimana, dengan apa yang, dan seberapa sering? Pertimbangkan ketertelusuran metrologi yang tepat calibrants.
A.14 Perhitungan
Jelaskan bagaimana hasil (s) dihitung. Sertakan informasi tentang unit di mana hasil dan jumlah lainnya harus diungkapkan;
persamaan yang digunakan untuk perhitungan; arti dari simbol-simbol aljabar yang digunakan dalam persamaan; jumlah
tempat desimal atau angka signifikan yang hasilnya adalah untuk diberikan. Simbol-simbol dalam jumlah harus sesuai
dengan ISO 80000 [14].
A.15 Presisi
Untuk metode yang telah mengalami perbandingan antar laboratorium, data presisi (yaitu pengulangan dan
reproduktifitas) harus ditunjukkan. Data presisi dihitung, dan harus
sebaiknya juga menerbitkan, sesuai dengan bagian yang relevan dari ISO 5725 atau sesuai dengan
MV 2014 51
Standar lain yang cocok Internasional (yang harus dirujuk). Jelas menyatakan apakah nilai-nilai presisi dinyatakan secara
absolut atau relatif, atau sebagai batas presisi.
A.16 Jaminan kualitas dan kontrol kualitas

Salah satu hasil dari latihan validasi harus menjadi deskripsi prosedur (uji profisiensi) kontrol kualitas internal dan eksternal untuk
mengikuti. Jelaskan apa bentuk kontrol kualitas yang diperlukan, frekuensi pemeriksaan kontrol kualitas selama analisis batch,
lulus / gagal kriteria, tindakan untuk mengambil dalam hal kegagalan. Referensi silang ke bagian terkait di atas.
A.17 kasus khusus

Sertakan modifikasi prosedur diharuskan oleh ada atau tidak adanya komponen tertentu dalam produk yang akan
dianalisis. Modifikasi akan sudah telah disebut di “Ruang Lingkup” klausa. Setiap kasus khusus akan diberikan judul
yang berbeda.
Laporan A.18 Uji

klausul ini harus menentukan informasi yang akan diberikan dalam laporan uji. Aspek berikut tes biasanya harus
disertakan.
• referensi ke metode yang digunakan;

• hasil (s) dan indikasi kualitas terkait (presisi, ketidakpastian ditentukan; interval kepercayaan) jika berlaku,
termasuk referensi ke “Perhitungan” klausa;
• setiap penyimpangan dari prosedur;
• fitur yang tidak biasa diamati;
• tanggal tes.
A.19 Lampiran
Untuk lebih mudah dibaca, beberapa informasi yang lebih nyaman disajikan dalam lampiran. Ini harus dinyatakan secara jelas apakah
lampiran adalah normatif atau informatif. Contoh informasi yang dapat dicaplok adalah data dari karya validasi metode, analisis risiko
dan ketidakpastian perhitungan. Untuk yang terakhir, sumber utama ketidakpastian yang berkaitan dengan metode harus diidentifikasi
dan nilai-nilai yang ditetapkan terdaftar. kontribusi signifikan tidak digunakan dalam perhitungan akhir harus disebutkan. ketidakpastian
gabungan standar dan / atau ketidakpastian diperluas harus tercantum bersama dengan penjelasan tentang bagaimana itu berasal.
Sebuah pengobatan yang lebih rinci mungkin dalam file cross-referenced.
A.20 Bibliografi
Jika referensi informatif dianggap perlu, ini dapat diberikan pada titik dalam teks di mana mereka disebut atau, jika
ada beberapa, dalam daftar pustaka pada akhir dokumen.
MV 2014 52
Lampiran B - secara statistik dari batas perhitungan deteksi *
Referensi Cepat 2 dalam Bagian 6.2.3 menunjukkan bahwa batas deteksi (LOD) dapat dihitung dengan mengalikan deviasi
standar yang cocok dengan faktor 3. Lampiran ini menjelaskan dasar statistik untuk faktor ini.
Tujuan ketika menentukan LOD biasanya untuk menetapkan konsentrasi terendah dari analit hadir dalam sampel yang dapat
dideteksi, dengan menggunakan prosedur pengukuran yang diberikan, dengan tingkat tertentu dari keyakinan. Mendefinisikan
LOD adalah proses dua langkah. Pertama 'nilai kritis' didirikan. Nilai ini ditetapkan, sehingga peluang mendapatkan hasil
pengukuran yang melebihi nilai kritis adalah tidak lebih besar dari α, jika sampel benar-benar berisi tak satupun analit. Nilai kritis
menetapkan kriteria untuk menyatakan sampel untuk menjadi 'positif'. Sebuah probabilitas positif palsu α = 0.05 umumnya
digunakan; ini mengarah ke nilai kritis sekitar 1,65 s ( dimana s adalah standar deviasi dari sejumlah besar hasil untuk sampel
kosong atau sampel yang mengandung konsentrasi rendah analit, dan 1,65 adalah Mahasiswa satu-tailed t nilai derajat yang tak
terbatas kebebasan pada tingkat signifikansi, α = 0,05). Nilai kritis paling mudah dinyatakan dalam konsentrasi, meskipun pada
prinsipnya mungkin pengamatan apapun, seperti daerah puncak. Setiap hasil yang melebihi nilai kritis harus dinyatakan positif.
Namun, jika benar nilai untuk konsentrasi dalam sampel yang persis sama dengan nilai kritis (dinyatakan dalam konsentrasi),
sekitar setengah dari hasil pengukuran akan diharapkan untuk jatuh di bawah nilai kritis, memberikan tingkat negatif palsu dari
50 %. Sebuah tingkat negatif palsu dari 50% jelas terlalu tinggi untuk penggunaan praktis; metode ini tidak andal memberikan
hasil di atas nilai kritis jika konsentrasi sama dengan nilai kritis. LOD dimaksudkan untuk mewakili konsentrasi benar untuk yang
tingkat negatif palsu dapat diterima mengingat nilai kritis. Kesalahan negatif palsu, β, biasanya diatur sama dengan kesalahan
positif palsu, ini adalah sebagian besar untuk alasan historis (IUPAC merekomendasikan nilai default α = β = 0,05 [49]).
menggunakan α = β = 0,05, LOD perlu
1,65 s di atas nilai yang ditentukan untuk nilai kritis. Faktor untuk menghitung LOD dengan
α = β = 0.05 demikian 1,65 + 1,65 = 3,30. Ini sering dibulatkan untuk memberikan '3 s 'Perhitungan ditampilkan dalam Referensi Cepat
2. Pendekatan ini didasarkan pada beberapa perkiraan yang dijelaskan dalam literatur [49].
Multiplier dari 3, yang dihitung dalam paragraf sebelumnya, muncul dari Student satu-tailed t nilai derajat yang tak terbatas
kebebasan, dibulatkan ke satu angka yang signifikan. Untuk perkiraan statistik ketat dari LOD, faktor pengali yang
digunakan harus memperhitungkan jumlah derajat kebebasan yang terkait dengan perkiraan s. Sebagai contoh, jika s diperoleh
dari 10 pengukuran ulangan, Mahasiswa t nilai pada α = 0.05 1.83 (9 derajat kebebasan). Hal ini menyebabkan LOD
dihitung sebagai 3,7 s.
*
Teks ini didasarkan pada Panduan Eurachem pada Terminologi dalam Analytical Pengukuran [8].
MV 2014 53
Lampiran C - Analisis varians (ANOVA)
Gagasan utama di balik 'analisis varians' (ANOVA) adalah bahwa di mana satu set data yang mereplikasi dapat dikelompokkan dalam
beberapa cara, misalnya dengan analis, instrumen, hari, laboratorium, metode dll, total variasi dalam seluruh rangkaian dapat
direpresentasikan sebagai kombinasi dari varians ( s 2) antara dan di dalam kelompok-kelompok. ANOVA dapat digunakan untuk mengevaluasi
hasil dari jenis penelitian eksperimental yang ditunjukkan pada Gambar C 1. Dalam 'desain bersarang', meniru pengukuran (biasanya
diperoleh di bawah kondisi pengulangan) yang berulang dalam pengukuran yang berbeda berjalan untuk memberikan p kelompok data. Untuk
memperkirakan presisi menengah dari studi tersebut harus ada variasi maksimum dalam kondisi antara berjalan (hari yang berbeda, analis,
dll).
Grup 1 kelompok 2 Kelompok p
x 11 ... x 1n x 21 ... x 2n x p1 ... x pn
Gambar C 1 - Contoh dari 'desain bersarang' untuk percobaan dari yang mengukur presisi
yang berbeda dapat dievaluasi menggunakan ANOVA
Bentuk umum dari meja untuk satu arah ANOVA, untuk total N hasil di p kelompok n
observasi, dan dengan ν derajat kebebasan, ditunjukkan pada Gambar C2. Setiap baris dari tabel berkaitan dengan sumber yang
berbeda variasi. Baris pertama berkaitan dengan variasi antara sarana kelompok; kedua menggambarkan variasi dalam kelompok
dan yang ketiga menggambarkan variasi dari kumpulan data secara keseluruhan. program spreadsheet dan perangkat lunak statistik
juga menyediakan F dan F nilai kritis, dan sesuai P ( probabilitas) nilai.
Sumber variasi Jumlah kuadrat (SS) ν

νν Mean square (MS) F PF crit
antara kelompok SS b p- 1 NONA b = SS b / ( p- 1) NONA b / NONA w
Dalam kelompok SS w Np MS w = SS w / ( Np)

(residu)
Total SS tot = SS b + SS w N- 1
Gambar C2 - Anatomi meja untuk satu arah ANOVA
Nilai-nilai yang berkaitan dengan variasi betweengroup hampir selalu baik disebut sebagai istilah 'betweengroup' atau diidentifikasi oleh
faktor pengelompokan (misalnya analis, hari atau laboratorium). Beberapa istilah yang berbeda digunakan dalam perangkat lunak, buku
pelajaran dll untuk menggambarkan dalam kelompok variasi - 'dalam kelompok', 'sisa', 'error' atau 'pengukuran' yang paling umum.
Dengan asumsi bahwa desain bersarang ditunjukkan pada Gambar C 1 dijalankan oleh sebuah laboratorium tunggal, bahwa
ulangan masing-masing kelompok diperoleh di bawah kondisi pengulangan, dan bahwa kondisi analitis yang bervariasi antara
kelompok, pengulangan dan presisi menengah dapat dihitung sebagai berikut .
MV 2014 54
1. Standar deviasi pengulangan s r, diperoleh dengan mengambil akar kuadrat dari within- yang
Kelompok berarti jangka persegi yang mewakili varians dalam kelompok:
r
s = MS w (Persamaan. C1)
2. Kontribusi terhadap total variasi dari faktor pengelompokan ( s antara) juga diperoleh dari
tabel ANOVA:
MS s
- MS wb
antara
= (Persamaan. C2)
n
3. Ketepatan menengah s saya sekarang dapat dihitung dengan menggabungkan within- dan antara-
komponen varians kelompok di atas:
2 antara 2 sss
= rI
+ (Persamaan. C3)
Percobaan dimaksud dalam Pasal 6.6.4 dapat diilustrasikan sebagai berikut. Sebagai bagian dari latihan validasi metode di
laboratorium tunggal, duplikat pengukuran dilakukan selama masing-masing delapan hari (Tabel C1). Pengukuran pada setiap
hari dilakukan di bawah kondisi pengulangan tapi dengan analis yang berbeda, peralatan yang berbeda dll pada hari yang
berbeda, dalam rangka untuk meniru kondisi di mana metode yang akan digunakan secara rutin.
Tabel C1 - Contoh eksperimental set-up yang memungkinkan pengulangan dan presisi menengah untuk dievaluasi menggunakan ANOVA
satu arah dengan derajat diterima kebebasan
Hari: 1 2 3 4 5 6 7 8
Hasil: x 1,1 x 1,2 x 2,1 x 2,2 x 3,1 x 3,2 x 4,1 x 4,2 x 5,1 x 5,2 x 6,1 x 6,2 x 7,1 x 7,2 x 8,1 x 8,2
Sebuah ANOVA satu arah dapat digunakan untuk memisahkan variasi yang melekat dalam metode (pengulangan) dan variasi
karena perbedaan dalam kondisi pengukuran, yaitu analis yang berbeda, peralatan, diperpanjang skala waktu (presisi menengah).
Perhatikan bahwa dengan pendekatan ini, tidak mungkin untuk menarik kesimpulan tentang yang mana dari parameter - analis,
peralatan, waktu - berkontribusi paling untuk presisi menengah tapi ini biasanya tidak diperlukan pada tahap validasi.
Menerapkan ANOVA satu arah untuk hasil pada Tabel C1 akan memberikan hasil tabel mirip dengan yang di Gambar C2. Itu F, kritis F dan
P nilai-nilai memungkinkan kesimpulan langsung ditarik pada apakah variasi antara hasil yang diperoleh pada hari yang berbeda
secara signifikan lebih besar dari variasi dalam hasil yang diperoleh pada hari yang sama. Nilai untuk dua tindakan presisi ( s r dan s SAYA) kemudian
mudah dihitung dari Persamaan. C1 - Persamaan. C3 di atas. Jumlah tersebut terkait derajat kebebasan ( ν) akan Np
= 16-8 = 8 untuk s r. Nilai dari ν untuk presisi intermediated lebih kompleks tetapi tidak akan lebih kecil dari p- 1, yaitu 7 dalam
contoh ini (lihat Gambar C2). Hal ini menghasilkan kompromi yang masuk akal antara beban kerja dan ketidakpastian
perkiraan presisi.
MV 2014 55
Lampiran D - Catatan tentang analisis kualitatif
Analisis kualitatif mengikuti prinsip-prinsip dasar analisis kuantitatif tetapi konsep yang unik perlu diterapkan saat
menjelaskan sifat-sifat metode dan dalam interpretasi hasil. Lampiran ini memperkenalkan secara singkat analisis
kualitatif dan poin bimbingan relevan.
Analisis kualitatif didefinisikan oleh IUPAC sebagai: analisis di mana zat diidentifikasi atau diklasifikasikan atas dasar
kimia atau sifat fisik, seperti reaktivitas kimia, kelarutan, berat molekul, titik leleh, sifat radiasi (emisi, penyerapan),
spektrum massa, paruh nuklir, dll
[17]. Ini berarti bahwa hasil dinyatakan pada skala nominal, yang lebih rendah daripada mengungkapkan hasil pada skala
rasio. Analisis kualitatif, bukan analisis kuantitatif, karena itu dianjurkan terutama untuk tujuan skrining menggunakan metode
murah atau pada konsentrasi analit dekat dengan batas deteksi (LOD).
A 'metode kualitatif' memberikan efektif 'Ya' / 'Tidak' jawaban sama diberikan cut-off konsentrasi suatu analit [55].
Validasi melibatkan identifikasi cut-off konsentrasi untuk
mengklasifikasikan / mendiagnosa kondisi, misalnya ada atau tidak adanya agen mencemari dalam air di mana ada direktif, hukum dll
mendefinisikan yang cut-off konsentrasi berlaku.
Dalam rangka untuk mengkarakterisasi sifat dari metode kualitatif, metode kuantitatif dengan sifat metrologi superior
(metode konfirmasi), misalnya LOD rendah, adalah optimal untuk menentukan keadaan sebenarnya dari dengan- atau
tanpa kondisi. Sifat metode kualitatif harus ditentukan di sejumlah konsentrasi, bawah, di atas cut-off konsentrasi.
Penggunaan metode kuantitatif konfirmasi adalah lebih baik untuk penggunaan sampel kosong berduri dan non-berduri.
Untuk metode kualitatif, presisi tidak dapat dinyatakan sebagai deviasi standar atau deviasi standar relatif, tetapi dapat dinyatakan
sebagai benar dan tingkat positif palsu, dan benar dan tingkat negatif palsu [55,
85, 86, 87]. Hal ini diilustrasikan pada Gambar D1.
Sampel di atas cut-off Sampel di bawah cut-off
tes positif tes positif benar tes positif palsu (tipe I Total jumlah tes
error) positif
tes negatif tes negatif palsu tes negatif benar Total jumlah tes
(kesalahan tipe II) negatif
Total jumlah sampel di atas Total jumlah sampel di bawah

cut-off cut-off
Gambar D1 - A 2 × 2 meja melayani sebagai dasar untuk menghitung tingkat positif palsu dan negatif palsu
The 'sensitivitas diagnostik' adalah proporsi sampel dengan kondisi, misalnya konsentrasi di atas cutoff, yang memiliki hasil tes
kualitatif positif. Sensitivitas diagnostik adalah fitur mendasar dari metode kualitatif, yang menyatakan kemampuannya untuk
mendeteksi jumlah kecil dari analit dalam sampel untuk menghasilkan biner Ya / Tidak ada respon pada tingkat yang telah ditetapkan
probabilitas.
( Eq. D1)
= ????
ℎ ??
MV 2014 56
Itu 'Spesifisitas diagnostik' adalah proporsi sampel tanpa kondisi, misalnya konsentrasi di bawah cut-off, yang memiliki
hasil tes kualitatif negatif
= ???? ( Eq. D2)

ℎ ???
Data dari metode perbandingan konfirmasi harus digunakan jika tersedia. Jika tidak, berduri dan sampel kosong nonspiked
dapat diukur.
Parameter penting untuk kualitas pengukuran dalam analisis kualitatif adalah LOD dan batas cutoff (Gambar D2). LOD yang
sama didefinisikan sebagai dalam analisis kuantitatif; konsentrasi suatu analit yang memberikan sinyal yang dapat statistik
dibedakan dari sinyal rata-rata sampel kosong yang relevan. Batas cut-off, jika ditentukan dengan benar, adalah di mana
tingkat negatif palsu untuk konsentrasi di atas batas rendah - dengan probabilitas yang dinyatakan. Dalam validasi batas cutoff
yang diusulkan diberikan dalam prosedur terdokumentasi dinilai.
Gambar D2 - Ada dua referensi kuantitatif yang menghasilkan respon biner dalam kualifikasi sampel / jenis klasifikasi analisis
kualitatif: 1. Batas deteksi (LOD) yang melekat pada metode, 2. Batas cut-off yang diberikan dalam prosedur terdokumentasi. Mereka
ditempatkan dalam meningkatkan skala konsentrasi imajiner. Di zona deteksi, di atas batas deteksi, batas cut-off memungkinkan
seseorang untuk membedakan zona konsentrasi komponen di mana respon biner yang benar dihasilkan: yaitu ada di bawah batas
dan Ya di atas mereka.
Beberapa konsep tambahan yang digunakan dalam analisis kualitatif (Tabel D1). Itu nilai prediktif hasil dapat ditingkatkan
dengan meningkatkan prevalensi konsentrasi di atas cut-off di sampel yang diuji dengan metode kualitatif, misalnya dengan
sumber informasi lain daripada metode kimia kualitatif. Hal ini secara substansial akan meningkatkan nilai praktis dari
metode pengukuran kualitatif.
Itu selektivitas dari metode kualitatif adalah sebuah konsep ordinal: sejauh mana analit lain dari satu yang termasuk dalam
spesifikasi mengganggu analisis. Fitur mendasar dari metode ini juga dapat didefinisikan sebagai kemampuan untuk
menghasilkan hasil yang tidak dipengaruhi oleh efek matriks. Semakin baik selektivitas, lebih baik kepastian identitas dan
klasifikasi sampel.
MV 2014 57
Tabel D1 - Definisi dan perhitungan konsep menggambarkan sifat diagnostik metode pengukuran, termasuk metode pengukuran
kualitatif
Konsep (simbol) Deskripsi Rumus
rasio kemungkinan positif ( LR +) Rasio tingkat positif benar untuk tingkat positif palsu.
V + = D46 7 849:???? ?? 484; 48"
???? 1 - D456 7 849 @: 94 4948"
rasio kemungkinan negatif ( LR) Rasio tingkat negatif palsu dengan tingkat negatif yang
V - = 1 - D456 7 849:???? ?? 484; 48"
benar. ?? D456 7 849 @:?? 94 4948"
Diagnostik aneh Ini

perbandingan menggabungkan konsep sensitivitas diagnostik,
3W? = V? +
( DOR) diagnostik kekhususan dan V? -
rasio kemungkinan menjadi satu nomor.
nilai prediksi positif ( PPV) Proporsi sampel dengan hasil tes kualitatif positif yang
XXY = Z <= $:> 7? 8> <: @ 7 484;?:?
memiliki kondisi tersebut. Ini memperhitungkan [785A? <= $:> 7? @ 7 484;?:?
prevalensi kondisi di populasi target sampel.
nilai prediksi negatif ( NPV) Proporsi sampel dengan hasil tes kualitatif negatif yang
XXY = Z <= $:> 7? 8> <:: 6584;?:?
tidak memiliki kondisi tersebut. Ini memperhitungkan [785A? <= $:> 7? ?: 6584;:?
itu
prevalensi kondisi di populasi target sampel.
MV 2014 58
Bibliografi
(Untuk update referensi yang paling penting saat ini silakan merujuk ke Eurachem Daftar Bacaan ditempatkan di bawah Publikasi di
website Eurachem, www.eurachem.org.)
1. ISO / IEC 17025: 2005 Persyaratan umum untuk kompetensi laboratorium pengujian dan kalibrasi, ISO
Jenewa.
2. ISO 15189: 2012 Laboratorium medik - Persyaratan untuk kualitas dan kompetensi, ISO Jenewa.
3. ISO 15.195: 2003 Laboratorium obat - Persyaratan untuk laboratorium pengukuran referensi, ISO Jenewa.
4. JN Miller, metode statistik dasar untuk kimia analitik. Bagian 2. Kalibrasi dan regresi metode. Sebuah tinjauan,
Analis, 1991, 116, 3.
5. JC Miller, JN Miller, Statistik dan kemometrika untuk kimia analitik, ed ke-6., Pearson, Harlow, 2010, ISBN
978-0-273730422.
6. SLR Ellison, VJ Barwick, TJ Duguid Farrant, statistik Praktis untuk ilmuwan analitis. Panduan bangku, 2nd ed., RSC
Publishing, Cambridge, 2009, ISBN 978-0-85404-131-2.
7. kosakata internasional metrologi - konsep dasar dan umum dan istilah terkait (VIM), JCGM 200: 2012, www.bipm.org.
Sebuah versi sebelumnya diterbitkan sebagai ISO / IEC Guide 99: 2007, ISO Jenewa.
8. VJ Barwick, E. Prichard (eds.), Eurachem Panduan: Terminologi dalam pengukuran analitis - Pengantar VIM 3,
Eurachem 2011, ISBN 978-0-948926-29-7, www.eurachem.org.
9. Sistem 2005 manajemen mutu - Dasar-dasar dan kosa kata, ISO Jenewa: ISO 9000.
sistem manajemen mutu 2008 - Persyaratan, ISO Jenewa: 10. ISO 9001.
Platform 11. ISO penjelajahan secara online (OBP), https://www.iso.org/obp/ui/.
12. M. Thompson, SLR Ellison, R. Wood, pedoman Harmonized untuk validasi laboratorium tunggal dari metode analisis
(IUPAC laporan teknis), Pure Appl. Chem., 2002, 74 ( 5), 835.
13. Validasi prosedur analitis: Teks dan metodologi Q2 (R1), ICH harmonis pedoman tripartit 2005, www.ich.org.
14. ISO 80.000-1: 2009 Besaran dan satuan - Bagian 1: Umum, ISO Jenewa.
15. MH Ramsey dan SLR Ellison (eds.), Eurachem / EUROLAB / CITAC / Nordtest / AMC Panduan: ketidakpastian Pengukuran yang timbul
dari pengambilan sampel: panduan untuk metode dan pendekatan, Eurachem,
2007, ISBN 978-0-948926-26-6, www.eurachem.org.
16. AMC singkat teknis No 19, Maret 2005, M. Thompson (ed.), Terminologi - kunci untuk memahami ilmu
analitis. Bagian 2: Sampling dan persiapan sampel, www.rsc.org.
17. Kompendium terminologi kimia (IUPAC Emas Book), www.iupac.org.
18. Kompendium nomenklatur analitis (IUPAC buku orange), www.iupac.org.
19. Metode validasi metode mikrobiologi US Environmental Protection Agency analisis. Disiapkan untuk The forum
EPA pada pengukuran lingkungan (FEM). Action Team FEM Mikrobiologi, FEM Dokumen Nomor 2009-01, 7
Oktober 2009.
20. ISO 10012: 2003 sistem manajemen Pengukuran - Persyaratan untuk proses pengukuran dan alat ukur, ISO
Jenewa.
21. Evaluasi data pengukuran - Panduan untuk ekspresi ketidakpastian dalam pengukuran (GUM), JCGM 100: 2008 (dikoreksi
versi 2010), www.bipm.org. Dicetak sebagai ISO / IEC Guide 98-3: 2008, ISO Jenewa.
22. SLR Ellison, A. Williams (eds.), Eurachem / CITAC Panduan CG4: Eurachem / CITAC, Mengukur ketidakpastian dalam
pengukuran analitis, 3 rd ed., Eurachem 2012, www.eurachem.org.
23. Panduan untuk validasi metode untuk analisis kuantitatif di laboratorium pengujian kimia, INAB Panduan PS15, 3 April 2012,
www.inab.ie.
MV 2014 59
24. CLSI, verifikasi Pengguna kinerja untuk presisi dan trueness; Disetujui pedoman - 2 nd ed.
dokumen CLSI EP15-A2. Wayne PA, Klinik dan Laboratorium Standar Institute 2005, www.clsi.org.
25. Pedoman AOAC untuk prosedur penelitian kolaboratif untuk memvalidasi karakteristik dari metode analisis, 2002,
www.aoac.org.
26. Protokol untuk desain, pelaksanaan dan interpretasi studi metode-kinerja, (IUPAC laporan teknis), Pure
Appl. Chem., 1995, 67 ( 2), 331.
27. ASTM E1601-12 praktek standar untuk melakukan studi antar laboratorium untuk mengevaluasi kinerja suatu
metode analisis 2012, www.astm.org.
28. CEN / TR 10345: 2013 Pedoman untuk pengobatan data statistik dari tes antar laboratorium untuk validasi metode analisis,
CEN Brussels.
29. ISO 5725 Akurasi (trueness dan ketepatan) metode pengukuran dan hasil - Bagian 1-6, ISO Jenewa.
30. ISO Guide 30: 1992 / Amd 1: 2008 Istilah dan definisi yang digunakan dalam hubungannya dengan bahan referensi, ISO Jenewa.
31. M. Thompson, PJ Lowthian, Catatan statistik dan kualitas data untuk ahli kimia analitis, Imperial College Press,
2011, ISBN 978-1848166172.
32. E. Mullins, Statistik untuk kontrol kualitas laboratorium kimia, RSC, Cambridge, 2003, ISBN 978-0-854074-671-3.
33. W. Funk, V. Dammann, G. Donnevert, Jaminan kualitas dalam kimia analitik: Aplikasi dalam lingkungan, makanan,
dan bahan analisis, bioteknologi, dan rekayasa medis, 2 nd ed., Wiley-VCH, Weinheim, 2006, ISBN
978-3-527-31114-9.
34. A. Kallner, statistik Laboratorium. Handbook of rumus dan istilah (1 st ed.), Elsevier, 2013, ISBN
978-0-12-416971-5.
35. Codex Alimentarius Commission, Prosedural panduan 21 st ed., 2013.
36. Council Directive 98/83 / EC (3 November 1998) pada kualitas air dimaksudkan untuk konsumsi manusia.
37. Komisi Directive 2009/90 / EC (31 Juli 2009) meletakkan, sesuai dengan Directive 2000/60 / EC dari Parlemen
Eropa dan Dewan, spesifikasi teknis untuk analisis kimia dan pemantauan status air.
Komisi 38. Keputusan 2002/657 / EC (12 Agustus 2002) menerapkan Council Directive 96/23 / EC tentang kinerja
metode analisis dan interpretasi hasil.
39. SANCO / 12571/2013 (19 November 2013) dokumen Pedoman pengendalian mutu dan validasi prosedur analitis untuk
analisis residu pestisida dalam makanan dan pakan.
40. AMC singkat teknis No 17, Juli 2004, M. Thompson (ed.), The menakjubkan fungsi Horwitz, www.rsc.org.
41. Selektivitas dalam kimia analitik (IUPAC rekomendasi 2001), Pure Appl. Chem., 2001,
73 ( 8), 1381.
42. NATA - Laporan Teknis # 17 - Pedoman untuk validasi dan verifikasi metode kuantitatif dan kualitatif, 2012.
43. E. Theodorsson, Validasi dan verifikasi metode pengukuran dalam kimia klinis, bioanalysis 2012, 4 ( 3),
305.
44. AMC singkat teknis No 37, bulan Maret 2009, M. Thompson (ed.), Penambahan Standard: mitos dan realitas, www.rsc.org.
45. ISO 11.843-1: 1997 / Kor 1: 2003 Kemampuan deteksi - Bagian 1: Istilah dan definisi, ISO Jenewa.
46. ISO 11.843-2: 2007 Kemampuan deteksi - Bagian 2: Metodologi dalam kasus kalibrasi linier, ISO Jenewa.
MV 2014 60
47. ISO 11.843-3: 2002 Kemampuan deteksi - Bagian 3: Metodologi untuk penentuan nilai kritis untuk variabel respon ketika
tidak ada data kalibrasi yang digunakan, ISO Jenewa.
48. ISO 3534 Statistik - Kosakata dan simbol - Bagian 1-3, ISO Jenewa.
49. Nomenklatur dalam evaluasi metode analisis, termasuk kemampuan deteksi dan kuantifikasi (IUPAC
Rekomendasi 1995), Pure Appl. Chem., 1995, 67, 1699.
50. LA Currie, Deteksi dalam kimia analitik - Pentingnya, teori, dan praktek, ACS Simposium Seri 361,
American Chemical Society, Washington, DC 1988.
51. Metode Komite Analytical, Rekomendasi definisi, estimasi dan penggunaan batas deteksi, Analis, 1987, 112, 199.
52. A. Shrivastava, VB Gupta, Metode untuk penentuan batas deteksi dan batas kuantitasi metode analisis,
Chronicles of Young Scientists 2011, 2 ( 1), 21.
53. Amerika Serikat Pharmacopeia, Validasi metode kompendial, 26 th revisi, Nasional
Formularium, 21 st ed. Rockville, MD: Amerika Serikat Pharmacopeial Konvensi Inc., 2003.
Peraturan Komisi 54. (EC) No 333/2007 (28 Maret 2007) meletakkan metode sampling dan analisis untuk kontrol resmi
level timbal, kadmium, merkuri, timah anorganik, 3-MCPD dan benzo (a) pyrene di bahan makanan, Off. J. Uni
Eropa, L 88/29, 29 Maret 2007.
55. M. Valcarcel, S. Cárdenas, D. Barceló et al., Metrologi analisis kimia kualitatif, melaporkan EUR 20.605 EN,
Komisi Eropa, 2002, ISBN 92-894-5194-7.
56. H. Sahai, RP Singh, Penggunaan R2 sebagai ukuran goodness of fit: Sebuah gambaran, Virginia Journal of Science, tahun
1989, 40 ( 1), 5.
57. Metode Analytical Komite, Penggunaan (tepat dan tidak tepat) dari koefisien korelasi, Analis,
1988, 113, 1469.
58. ISO 11732: 2005 Mutu air - Penentuan ammonium nitrogen - Metode analisis arus (CFA dan FIA) dan
deteksi spektrometri, ISO Jenewa.
59. A. Menditto, M. Patriarca, B. Magnusson, Memahami makna akurasi, trueness dan presisi, Accred. Qual.
Assur., 2007, 12, 45.
60. DT Burns, K. Danzer, A. Townshend, Penggunaan istilah “pemulihan” dan “pemulihan jelas” dalam prosedur analitis
(IUPAC Rekomendasi 2002), Pure Appl. Chem., 2002, 74 ( 11), 2201.
61. SLR Ellison, B. Raja, M. Rösslein, M. Salit, A. Williams (eds.), Eurachem / CITAC Panduan Lacak dalam pengukuran
kimia. Sebuah panduan untuk mencapai hasil yang sebanding dalam pengukuran kimia, 1 st ed, Eurachem 2003,
www.eurachem.org.
62. P. De Bievre, R. Dybkaer, A. Fajgelj, D. Brynn Hibbert, ketertelusuran metrologi dari hasil pengukuran dalam kimia:
Konsep dan implementasi (IUPAC Laporan Teknis), Pure Appl. Chem.,
2011, 83 ( 10), 1873.
63. AMC singkat teknis No 21, September 2008, M. Thompson (ed.), The estimasi dan penggunaan faktor pemulihan, www.rsc.org.
64. ISO Guide 33: 2000 Penggunaan bahan referensi bersertifikat, ISO Jenewa.
65. T. Linsinger, Aplikasi catatan 1, Wahyu 3 2010. Perbandingan hasil pengukuran dengan nilai bersertifikat,
www.erm-crm.org.
66. B. Magnusson, T. Näykki, H. Hovind, M. Krysell, Handbook untuk perhitungan ketidakpastian pengukuran di
laboratorium lingkungan, Nordtest Laporan TR 537 (ed. 3.1) 2012, www.nordtest.info.
67. ISO 21748: Pedoman 2010 untuk penggunaan pengulangan, reproduktifitas dan estimasi trueness di estimasi ketidakpastian
pengukuran, ISO Jenewa.
68. Eurolab, ketidakpastian Pengukuran ditinjau kembali: pendekatan alternatif untuk evaluasi ketidakpastian, laporan Teknis No.
1/2007, www.eurolab.org.
69. SLR Ellison, A. Williams, ketidakpastian Pengukuran: kunci untuk penggunaan faktor-faktor pemulihan? Dari “Penggunaan
faktor pemulihan dalam analisis jejak”, M. Parkani (ed.), RSC, Cambridge, 1996, ISBN 0-85404-736-0.
MV 2014 61
70. VJ Barwick, SLR Ellison, ketidakpastian Pengukuran: pendekatan untuk evaluasi ketidakpastian yang terkait
dengan pemulihan, Analis, 1999, 124, 981.
71. SLR Ellison, VJ Barwick, Memperkirakan ketidakpastian pengukuran: Rekonsiliasi menggunakan sebab dan akibat pendekatan,
Accred. Qual. Assur., 1998, 3, 101-105.
72. GE O'Donnell, DB Hibbert, Pengobatan bias dalam memperkirakan ketidakpastian pengukuran, Analis, 2005, 130, 721.
73. B. Magnusson, SLR Ellison, Pengobatan bias pengukuran dikoreksi dalam estimasi ketidakpastian untuk
pengukuran kimia, Anal. Bioanal. Chem., 2008, 390, 201.
74. WJ Youden, EH Steiner, Statistik Manual dari AOAC, AOAC International, 1975, ISBN 0-935584-15-3.
75. pedoman diharmoniskan untuk pengendalian internal berkualitas di laboratorium kimia analitik, (IUPAC laporan teknis), Pure
Appl. Chem., 1995, 67 ( 4), 649.
76. H. Hovind, B. Magnusson, M. Krysell, U. Lund, dan I. Makinen, kontrol kualitas internal - Buku Panduan untuk
laboratorium kimia, Nordtest laporan teknis 569, 4 th ed., 2011, www.nordtest.info.
77. ISO 7870 grafik Control - Bagian 1-5, ISO Jenewa.

78. AMC singkat teknis Nomor 9, Februari 2002, M. Thompson (ed.), A kebugaran-untuk-tujuan kontrol grafik sederhana berdasarkan
hasil duplikat yang diperoleh dari bahan uji rutin, www.rsc.org.
79. ISO / IEC 17011: 2004 Penilaian Kesesuaian - Persyaratan umum untuk badan akreditasi akreditasi lembaga
penilaian kesesuaian, ISO Jenewa.
80. ISO / IEC 17043: 2010 Penilaian Kesesuaian - Persyaratan umum untuk uji profisiensi, ISO Jenewa.
81. I. Mann, B. Brookman (eds.), Eurachem Panduan: Seleksi, penggunaan dan interpretasi uji profisiensi (PT) skema oleh
laboratorium, 2 nd ed., Eurachem 2011, www.eurachem.org.
82. EA-4/18 TA, Pedoman pada tingkat dan frekuensi partisipasi uji profisiensi, Eropa kerjasama untuk Akreditasi
2010, www.european-accreditation.org.
83. ISO 78-2: 1999 Kimia - Layouts untuk standar - Bagian 2: Metode analisis kimia, ISO Jenewa.
84. SLR Ellison, A. Williams (eds.), Eurachem / CITAC Panduan: Penggunaan informasi ketidakpastian dalam penilaian
kepatuhan, Eurachem 2007, www.eurachem.org.
85. RR Galen, SR Gambino, Beyond normalitas: Nilai prediktif dan efisiensi diagnosa medis, John Wiley and
Sons, 1975, ISBN 978-0471290476.
86. MS Pepe, Evaluasi statistik tes medis untuk klasifikasi dan prediksi, Oxford University Press, Oxford, 2003,
ISBN 978-0-19-850984-4.
87. XH. Zhou, NA Obuchowski, DK Mcclish, metode statistik dalam kedokteran diagnostik, 2 nd ed.,
Wiley-Interscience, New York, 2011, ISBN 978-0-470-18314-4.
MV 2014 62
Copyright © 2014
ISBN: 978-91-87461-59-0

Eurachem 2014 Guide To Method Validation - En.id

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Eurachem 2014 Guide To Method Validation - En.id

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Fitness untuk Tujuan

Edisi Kedua 2014

Fitness untuk Tujuan dari Metode Analytical

Ucapan Terima Kasih

Vicki Barwick LGC (UK)

* Tunduk pada persyaratan jurnal

Kata Pengantar untuk edisi pertama ............................................. .................................................. ...... 2

Singkatan dan simbol ............................................... .................................................. ....... 3

1 Pengantar ................................................. .................................................. ..................... 5

1.2 Catatan tentang penggunaan Panduan ini ........................................... .................................................. . 5

2 Apa metode validasi? .................................................. ............................................. 7

2.1 Definisi ................................................. .................................................. ........................... 7

2.2 Apa perbedaan antara validasi dan verifikasi? ............................................ 7

3 Mengapa metode validasi diperlukan? .................................................. .............................. 9

3.1 Pentingnya pengukuran analitis .............................................. ................................. 9

3.2 Tugas profesional ahli kimia analitis ........................................... ....................... 9

3.3 pengembangan metode ................................................ .................................................. ........... 9

4 Kapan metode divalidasi atau diverifikasi? .................................................. ........... 11

4.1 Validasi metode ................................................ .................................................. .............. 11

4.2 Verifikasi Metode ................................................ .................................................. ........... 11

5 Bagaimana seharusnya metode divalidasi? .................................................. ............................... 13

5.1 Yang melakukan validasi metode? .................................................. ................................ 13

5.2 Tingkat studi validasi .............................................. .................................................. 13

5.3 rencana validasi dan laporan .............................................. .................................................. . 14

5.4 alat validasi ................................................ .................................................. .................. 15

5.5 persyaratan validasi ................................................ .................................................. ... 16

5.6 Proses validasi metode ............................................... .................................................. . 16

6 karakteristik kinerja metode ............................................... ................................ 19

6.1 Selektivitas ................................................. .................................................. .......................... 19

aku aku aku

6.2 Batas deteksi dan batas kuantifikasi ........................................... ........................ 20

6.3 Jarak kerja ................................................ .................................................. ................... 27

6.4 sensitivitas analitis ................................................ .................................................. ......... 30

6.5 Kebenaran ................................................. .................................................. ............................ 30

6.6 Presisi ................................................. .................................................. ............................ 35

6.7 ketidakpastian pengukuran ................................................ .................................................. . 38

6.8 Kekasaran ................................................. .................................................. ........................ 38

7 Menggunakan metode divalidasi ............................................... .................................................. . 41

8 Menggunakan data validasi untuk merancang kontrol kualitas ........................................... ................... 43

8.1 Pengantar ................................................. .................................................. ...................... 43

8.2 kendali mutu internal ............................................... .................................................. ...... 43

8.3 kontrol kualitas eksternal ............................................... .................................................. ..... 44

9 Dokumentasi metode divalidasi .............................................. ................................ 45

9.1 Dari rancangan untuk versi final ............................................. .................................................. .. 45

9.2 Rekomendasi ................................................. .................................................. ............ 45

Lampiran A - Cara protokol dokumentasi ............................................ .............................. 49

Lampiran B - secara statistik dari batas perhitungan deteksi ........................................ ........ 53

Lampiran C - Analisis varians (ANOVA) ......................................... ................................... 54

Lampiran D - Catatan tentang analisis kualitatif ........................................... ..................................... 56

Bibliografi ................................................. .................................................. ......................... 59

Kata Pengantar untuk edisi kedua

Kata Pengantar untuk edisi pertama *

4. “Harus ada penilaian independen reguler dari kinerja teknis dari

Prinsip M. Sargent. Anal. Proc., 1995, 32, 201-202.

Singkatan dan simbol

Singkatan berikut, akronim dan simbol terjadi dalam Panduan ini.

AMC Metode Komite analitis

ANOVA Analisis varians

AOAC International yang diakui secara global standar mengembangkan organisasi

ASTM International yang diakui secara global standar mengembangkan organisasi

BIPM Biro Internasional Berat dan Ukuran

CCQM Komite Konsultatif untuk Jumlah Zat - Metrologi dalam Kimia

CEN Komite Eropa untuk Standarisasi