S STUDI KASUS S S

VERIFIKASI ANALISIS COLIFORM PADA AMDK DENGAN METODE MPN

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Kasus

Suatu Laboratorium akan menggunakan metode sesuai dengan SNI 19-2897-1992 butir 2.2 untuk pengujian Coliform Metode tersebut akan digunakan untuk analisis rutin pada contoh AMDK Sebelum digunakan maka harus dicek dahulu apakah metode tersebut layak dan dapat digunakan untuk matriks contoh dan lab tersebut
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Metode Pengujian
19-2897-1992 butir 2.2 1 Pipet 10 ml dari masing-masing 1. masing masing dalam 5 tabung yang berisi 10 ml LSTB double streght yang didalamnya terdapat tabung durham terbalik p masing-masing g g 1 ml dan 0.1 ml contoh kedalam 5 tabung g 2. Pipet yang kedua dan ketiga yang berisi 10 ml LSTB single streght yang didalamnya terdapat tabung durham terbalik 3. Inkubasi semua tabung dalam inkubator pada suhu 36 1C s l selama 24-48 24 48 jam j 4. Setelah 24 jam, catat jumlah tabung yang membentuk gas pada masing-masing pengenceran dan simpan lagi tabung yang tidak membentuk gas dalam inkubator pada suhu 36 1C selama 24 jam 5. Kemudian catat tabung yang membentuk Gas
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Sesuai dengan SNI

Uji Penegasan

Pindahkan sebanyak 1 ose dari tiap tabung yg membentuk gas pada media LSTB ke dalam tabung yang berisi 10 ml BGLB. Masukkan semua tabung kedalam inkubator pad suhu 361C selama 24-48 jam. Adanya gas pada tabung BGLB memperkuat adanya bakteri coliform dalam contoh Catat jumlah tabung yang membentuk gas
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Bakteri Coliform (MPN 5 Tabung)

+ 10 mL sampel p + 10 mL LSTB (DS)

Sampel
+ 1 mL sampel + 10 mL LSTB (SS)

Inkubasi 36oC 24-48 jam

+ 0,1 mL sampel + 10 mL LSTB(SS)

Uji Penegasan
Tabung yang membentuk gas 1 ose (sengkelit)

Catat jumlah tabung yang membentuk gas

+ 10 mL BGLBB

Inkubasi 36 1 oC 24-48 jam

Catat jumlah tabung yang membentuk gas

Hitung jumlah bakteri berdasarkan t b l MPN seri tabel i5 tabung

LSTB = Lauryl Sulfate Tryptose Broth BGLBB = Brilliant Green Lactose Bile Broth

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Metode Pengujian

Prosedur dilakukan menurut diatas Metode tidak mengalami perubahan dalam hal media, media peralatan maupun cara kerja

VERIFIKASI
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Verifikasi Metode

Kriteria:

Sensitifitas - Spesifisitas - False positif rate - False F l negatif tif rate t Confidence limit 95%

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Verifikasi Metode

Sa pe Sampel
Sampel rutin Sampel rutin yang dispike Kultur bakteri (satu strain atau lebih)

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Verifikasi Metode

Prosedur - Persiapkan contoh sesuai prosedur (dalam tingkat konsentrasi berbeda) - dikerjakan oleh analis yang berbeda misal: 1 analis 15 x pengulangan jadi 2 analis ada 30 x pengulangan total pengerjaan 450 tabung - Inokulasikan contoh pada media atau tabung-tabung pertumbuhan - Hitung Hit j jumlah l h positif itif dan d negatif tif - Konfirmasi dgn uji kimia untuk tabung yg positif
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Verifikasi Metode
-

Hasil Analisa Tabung negatif 50 tabung Tabung positif pada LSTB 400 tbg

Konfirmasi pada BGLB

Positif ? Positif..? False Negatif?

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

10

Verifikasi Metode

Hasil Analisis
Dugaan positif Positif Negatif A.Positif 400 tbg negatif B. False Negatif 0 tbg

S Susu Cair C

Konfirmasi

C. False positif D. C D Negatif 0 tbg 50 tbg

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

11

Verifikasi Metode
PERHITUNGAN
Sensitifitas = 400/(400+0) X 100 = 100 % S Spesifitas ifit = 50/(50+0) x 100 = 100 % False positive rate = 0 False negative rate = 0 E = (400+50/450) x 100 = 100 % Jumlah tabung = 450 tabung
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

Metode Baik

12