AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L)

PADA MODEL MENCIT OBESITAS YANG DIINDUKSI PAKAN TINGGI

LEMAK, KARBOHIDRAT DAN PTU

Laporan Tugas Akhir

Riska Julianti
11161047

Universitas Bhakti Kencana

Fakultas Farmasi
Program Strata I Farmasi

Bandung

2020
 LEMBAR PENGESAHAN

AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L)

PADA MODEL MENCIT OBESITAS YANG DIINDUKSI PAKAN TINGGI
LEMAK, KARBOHIDRAT DAN PTU

Laporan Tugas Akhir

Diajukan untuk memenuhi syarat kelulusan Program Strata I

Farmasi

Riska Julianti
11161047

Bandung, Agustus 2020

Menyetujui,
Pembimbing Utama, Pembimbing Serta,

(apt. Elis Susilawati, M.Si. ) (Dr. apt. Ari Yuniarto, M.Si. )

 ABSTRAK

AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN KELOR (Moringa oleifera L) PADA

MODEL MENCIT OBESITAS YANG DIINDUKSI PAKAN TINGGI LEMAK,
KARBOHIDRAT DAN PTU

Oleh :
Riska Julianti
11161047

Obesitas merupakan akumulasi lemak yang tidak normal didalam tubuh disebabkan oleh
asupan makanan yang berlebih dari pada energi yang digunakan dalam tubuh. Obesitas
merupakan faktor resiko penyakit degeneratif seperti diabetes mellitus, hipertensi dan
penyakit pembuluh darah lainnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh
esktrak etanol daun kelor (Moringa oleifera L) terhadap aktivitas antiobesitas pada mencit
swiss webster. Dengan cara preventif yang diinduksi makanan tinggi lemak, karbohidrat dan
propiltiourasil. Sebanyak 30 ekor mencit dikelompokan menjadi 6 kelompok yaitu kelompok
normal, kelompok pembanding (Orlistat 15,6 mg/KgBB) dan kelompok uji ekstrak etanol
daun kelor dosis 75, 150 dan 300 mg/KgBB. Semua kelompok kecuali kelompok normal
diinduksi dengan pakan tinggi lemak, karbohidrat dan propiltiourasil. Parameter yang diukur
adalah indeks berat badan, indeks pakan, indeks lee, indeks organ dan indeks lemak. Data
diuji secara statistik menggunakan one way Anova dengan tingkat kepercayaan <0,05. Hasil
penelitian menunjukkan dosis 75 mg/kgBB memiliki efektivitas yang lebih baik dari semua
parameter. Disimpulkan bahwa ekstrak daun kelor mempunyai aktivitas sebagai antiobesitas.
Kata Kunci : Antiobesitas, Daun kelor, pakan tinggi lemak, karbohidrat dan propiltiourasil.

i
 THE ACTIVITIES OF ETHANOL EXTRACT OF KELOR LEAVES (Moringa oleifera L) AGAINST
OBESITY MICE MODEL THAT INDUCED BY FAT, CARBOHYDRATE AND PTU

ABSTRACT
By :
Riska Julianti
11161047

Obesity is an abnormal accumulation of fat in the body caused by excess food intake than the
energy used in the body. Obesity is a risk factor for degenerative diseases such as diabetes
mellitus, hypertension and other vascular diseases. This study aims to determine the
antiobesity activity of the ethanol extract of Moringa oleifera L leaves in the obese swiss
webster model. By preventing preventive foods high in fat, carbohydrates and
propyltiouracil. A total of 30 mice were grouped into 6 groups, namely the normal group,
the comparison group (Orlistat 15.6 mg / KgBB) and the test group ethanol extract of
Moringa leaves dose 75, 150 and 300 mg / KgBB. All groups except the normal group were
induced with high-fat, carbohydrate and propylthiouracil feed. The parameters measured
were body weight index, feed index, lee index, organ index and fat index. Data were
statistically tested using one way ANOVA with a confidence level <0.05. The results showed
a dose of 75 mg / kg had better effectiveness than all parameters. It was concluded that
Moringa leaf extract has anti-obesity activity.

Keywords: Antiobesity, Moringa oleifera L, high-fat feed, carbohydrates and

propylthiouracil.

ii
 KATA PENGANTAR

Pertama-tama marilah kita panjatkan puji syukur kehadirat Allah Subhanallahu Wata ‘Ala.
Kemudian shalawat serta salam, mudah-mudahan terlimpah curah kepada baginda Rasulullah
Salallahu’alaihiwasalam beserta keluarganya, sahabatnya, tabi’in tabi’atnya dan umatnya
hingga akhir zaman.

Berkat kekuatan, karunia dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian
tugas akhir ini dengan judul “AKTIVITAS ANTIOBESITAS EKSTRAK ETANOL DAUN
KELOR (Moringa oleifera L) PADA MODEL MENCIT OBESITAS YANG DIINDUKSI
PAKAN TINGGI LEMAK, KARBOHIDRAT DAN PTU”

Kelancaran proses penulisan tugas akhir ini berkat bimbingan, arahan dan petunjuk serta
kerja sama dari berbagai pihak, baik pada tahap persiapan, penyusunan hingga terselesaikan
tugas akhir ini. Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih dan
penghargaan yang setinggi-tingginya kepada:

1. Ibu apt., Elis Susilawati, M.Si. dan Dr. apt., Ari Yuniarto, M.Si. selaku dosen pembimbing
utama dan serta yang telah memberikan bimbingan dan pengarahan dalam proses
pengerjaan laporan tugas akhir ini.

2. Anne Yuliantini, M.Si. selaku dosen wali.

3. Ayahanda Budi Yuhadi dan ibunda Yeti Saripah tercinta yang selalu memberikan
dukungan moral, material, serta dukungan semangat yang melimpah.

4. Ryan Khunam Alamhari, Winda Aniyah, Marliani sebagai team penelitian obesitas yang
sudah banyak membantu saya dalam menyelesaikan tugas akhir ini.

Penulis menyadari bahwa laporan tugas akhir ini masih jauh dari sempurna, maka penulis
menerima dan mengharapkan kritik serta saran yang membangun bagi pembaca.

Semoga Tugas Akhir yang penulis buat ini bisa memberikan pelajaran, pengetahuan dan
manfaat khususnya bagi penulis dan umumnya bagi semua kalangan yang membacanya.

iii
 Bandung, Agustus 2020

Penulis

iv
 DAFTAR ISI

ntents
ABSTRAK........................................................................................................................i
ABSTRACT......................................................................................................................ii
KATA PENGANTAR...................................................................................................iii
DAFTAR ISI...................................................................................................................v
DAFTAR TABEL........................................................................................................viii
DAFTAR GAMBAR.....................................................................................................ix
DAFTAR LAMPIRAN...................................................................................................x
BAB I. PENDAHULUAN..............................................................................................1
I.1 Latar belakang.......................................................................................................1
I.2. Rumusan masalah................................................................................................2
I.3. Tujuan dan manfaat penelitian...........................................................................2
I.4. Hipotesis penelitian..............................................................................................2
I.5. Tempat dan waktu Penelitian..............................................................................2
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA...................................................................................3
II.1 Tanaman Kelor....................................................................................................3
II.1.1 Nama Daerah.................................................................................................3
II.1.2 Deskripsi.........................................................................................................3
II.1.3 Kandungan Kimia.........................................................................................4
II.1.4 Efek Farmakologi.........................................................................................4
II.2 Obesitas.................................................................................................................5
II.2.1 Pengertian......................................................................................................5
II.2.2 Etiologi............................................................................................................5
II.2.3 Patofisiologi....................................................................................................5
II.2.4 Leptin.............................................................................................................6
II.2.5 Hormon Usus.................................................................................................7
II.2.6 Adiponektin....................................................................................................7
II.3 Obat Obesitas.......................................................................................................8
II.4 Induksi Makanan Tinggi Lemak Dan Karbohidrat.........................................9
II.5 Mekanisme Propiltiourasil (PTU) menyebabkan obesitas...............................9
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN..................................................................10
BAB IV. PROSEDUR PENELITIAN........................................................................11
IV.1 Pengumpulan Bahan dan Determinasi...........................................................11
IV.2 Pengolahan bahan............................................................................................11
v
 IV.2.1 Sortasi basah...............................................................................................11
IV.2.2 Pencucian....................................................................................................11
IV.2.3 Pengeringan................................................................................................11
IV.2.4 Sortasi kering.............................................................................................11
IV.2.5 Penyimpanan..............................................................................................11
IV.3 Pembuatan Ekstrak..........................................................................................11
IV.4 Skrining Fitokimia............................................................................................12
IV.4.1 Identifikasi alkaloid...................................................................................12
IV.4.2 Identifikasi Flavonoid................................................................................12
IV.4.3 Identifikasi saponin....................................................................................12
IV.4.4 Identifikasi tanin........................................................................................13
IV.4.5 Identifikasi Kuinolon.................................................................................13
IV.4.6 Identifikasi Triterpenoid/Steroid.............................................................13
IV.5 Karakterisasi Simplisia....................................................................................13
IV.5.1 Penetapan Susut Pengeringan..................................................................13
IV.5.2 Penetapan kadar Abu Total......................................................................13
IV.5.3 Penetapan Kadar Sari Larutan Etanol....................................................14
IV.5.4 Kadar Sari Larut Air.................................................................................14
IV.5.5 Penetapan Kadar Air.................................................................................14
IV.5.6 Penetapan Kadar Abu Tak Larut Asam.................................................15
IV.6 Pembuatan Larutan CMC 0,5%.....................................................................15
IV.7 Pembuatan Sediaan Uji....................................................................................15
IV.8 Penyiapan Hewan Uji.......................................................................................16
IV.9 Pengujian Aktivitas Antiobesitas pada Mencit Obesitas..............................16
IV.10 Analisis data....................................................................................................17
IV.11 Pembuatan Penginduksi.................................................................................17
BAB V. HASIL DAN PEMBAHASAN.......................................................................19
V.1 Determinasi Tanaman.......................................................................................19
V.2 Hasil Ekstraksi...................................................................................................19
V.3 Skrining Senyawa Fitokimia.............................................................................19
V.4 Hasil Karakterisasi Daun Kelor.......................................................................20
V.5 Pengujian Aktivitas Antiobesitas......................................................................22
V.6 Hasil Analisis Bobot Badan Hewan Uji Selama Fase Pengujian...................22
V.7 Hasil Analisis Indeks Pakan..............................................................................25
V.8 Hasil Analisis Indeks Lee...................................................................................27

vi
 V.9 Hasil Analisis Indeks Organ..............................................................................30
V.10 Hasil Analisis Indeks Lemak...........................................................................31
BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN...........................................................................34
VI.1 Kesimpulan........................................................................................................34
VI.2 Saran..................................................................................................................34
DAFTAR PUSTAKA....................................................................................................35

vii
 DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Komposisi Makanan Tingggi lemak dan Karbohidrat....................................9

Tabel 4.1 Komposisi pakan induksi..............................................................................18

Tabel 5.1 Hasil Skrining Fitokimia Daun Kelor...........................................................20

Tabel 5.2 Hasil Karakterisasi Daun Kelor....................................................................21

Tabel 5.3 Hasil analisis uji Anova pada Indeks Berat Badan.......................................23

Tabel 5.4 Hasil analisis uji Anova pada Indeks Sisa Pakan.........................................26

Tabel 5.5 Hasil analisis uji Anova pada Indeks Lee.....................................................29

Tabel 5.6 Hasil analisis uji Anova pada indeks organ..................................................30

Tabel 5.7 Hasil analisis uji Anova pada indeks lemak.................................................32

viii
 DAFTAR GAMBAR
Gambar 2. 1 Tanaman Kelor........................................................................................3
Gambar 2. 2 Perbandingan nutrisi daun kelor..............................................................4
Gambar 2. 3 Sirkuit pengaturan keseimbangan energi.................................................6
Gambar 5. 1 Hasil pengukran Indeks Lee...................................................................27

ix
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil Determinasi......................................................................................37

Lampiran 2. Kode Etik Hewan......................................................................................38
Lampiran 3. Proses Ekstraksi dan Pemekatan Ekstrak..................................................39
Lampiran 4. Karakterisasi Simplisia Daun Kelor..........................................................40
Lampiran 5. Skrinning Fitokimia Daun Kelor...............................................................41
Lampiran 6. Pembuatan Induksi Pakan .........................................................................42
Lampiran 7. Pengujian Terhadap Hewan Uji.................................................................43
Lampiran 8. Bagan alir Prosedur Ekstrak Etanol Daun Kelor.......................................44
Lampiran 9. Bagan Alir Prosedur Pengujian..................................................................45
Lampiran 10. Perhitungan dan Pembuatan Dosis Obat..................................................46

x
 BAB I. PENDAHULUAN

I.1 Latar belakang

Obesitas merupakan kondisi seseorang yang memiliki akumulasi lemak diatas berat idealnya
(Schienkiewitz et al., 2017). dengan Indeks Masa Tubuh (IMT) ≥ 30 kg/m² yang dapat
mengganggu kesehatan (Santu et al., 2015). Lemak tubuh yang tinggi dapat terjadi karena
konsumsi makanan olahan cepat saji dalam jumlah besar dan diet tinggi kalori (Adela et al.,
2015). Dapat beresiko menyebabkan penyakit kronis seperti kardiovaskular (penyakit
jantung dan stroke), diabetes mellitus, osteoarthritis, dan beberapa penyakit keganasan
(Sunyer et al., 2016).

Obesitas merupakan salah satu penyakit yang sudah menjadi masalah kesehatan dunia.
Kasusnya di dunia tahun 2016 pada orang dewasa diatas 18 tahun mencapai 650 juta jiwa
atau sekitar 13% (WHO, 2018). Sedangkan di Indonesia pada orang dewasa lebih dari 18
tahun mengalami peningkatan. Pada tahun 2013 sebanyak 14,8% sedangkan tahun 2018
sebanyak 21,8 % (Riskesdas, 2018).

Berdasarkan prevalensi diatas, perlu dilakukan pengobatan untuk mengatasi masalah tersebut
dengan penggunaan obat seperti orlistat yang dapat menurunkan berat badan dengan
memblok lemak yang dikonsumsi agar tidak diserap oleh tubuh (Joko dkk., 2014) Namun
karena memiliki efek samping yang signifikan seperti gangguan saluran pencernaan, dan
gagal ginjal maka penggunaanya terbatas (BNF, 2019). Sehingga perlu alternatif lain yang
dapat dilakukan dengan memanfaatkan bahan alam di Indonesia salah satunya yaitu daun
kelor (Moringa oleifera L) yang banyak digunakan oleh masyarakat Indonesia untuk terapi
atau pengobatan berbagai macam penyakit.

Pada penelitian sebelumya ekstrak etanol daun kelor telah memiliki aktivitas antiobesitas
yang diinduksi makanan tinggi lemak (Nahar et al., 2016 ). Daun kelor juga mengandung
antioksidan dan komponen bioaktif yang bersifat antidiabetik seperti zat polifenol (Anwar et
al. 2007). Pada bagian akar tanaman kelor memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi (Sashidara
et al., 2009). Juga dapat menurunkan tekanan darah dengan pemberian air rebusan daun kelor
( yati dkk., 2019).

Banyaknya senyawa aktif yang terkandung dalam tanaman kelor berpotensi sebagai alternatif
terapi berbagai penyakit khususnya obesitas. Maka akan dilakukan penelitian pengujian

1
 2

aktivitas ekstrak etanol daun kelor yang diinduksi makanan tinggi lemak, karbohidrat dan
PTU sebagai antiobesitas.

I.2 Rumusan masalah

Berdasarkan latar belakang diatas dapat dirumuskan masalah sebagi berikut :

1. Apakah ekstrak etanol daun kelor (Moringa oleifera L) mempunyai efek antiobesitas pada
mencit yang diinduksi makanan tinggi karbohidrat, lemak dan PTU ?

2. Pada dosis berapakah ekstrak etanol daun kelor (Moringa oleifera L) dapat memberikan
efek antiobesitas pada mencit yang diinduksi makanan tinggi karbohidrat, lemak dan PTU
?

I.3 Tujuan dan manfaat penelitian

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh antiobesitas dari ekstrak etanol daun
kelor (Moringa oleifera L) dan untuk mengetahui dosis ekstrak etanol daun kelor (Moringa
oleifera L) yang memberikan pengaruh terhadap obesitas. Manfaat dari penelitian ini adalah
sebagai informasi alternatif terapi dalam pengobatan obesitas dengan ekstrak etanol daun
kelor dan dapat dijadikan sebagai referensi atau rujukan dalam penelitian selanjutnya
mengenai antiobesitas.

I.4 Hipotesis penelitian

Ekstrak etanol daun kelor (Moringa oleifera L) dapat memberikan efek antiobesitas pada
mencit yang diinduksi pakan tinggi lemak, karbohidrat dan PTU.

I.5. Tempat dan waktu Penelitian

Penelitian dilakukan di laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas Bhakti
Kencana Bandung pada bulan Februari sampai April 2020.
 BAB II. TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Tanaman Kelor

Klasifikasi Pohon kelor sebagai berikut (Krisnadi, 2015) :
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Capparales
Famili : Moringaceae
Genus : Moringa
Spesies : Moringa oleifera Lamk.

Gambar II.1. Tanaman Kelor (Krisnadi, 2015)

II.1.1 Nama Daerah
Di Indonesia, tanaman Kelor memiliki beragam nama. Di Sulawesi disebut kero, wori, kelo,
atau Keloro. Di Madura disebut maronggih. Masyarakat Sunda dan Melayu menyebutnya
Kelor. Di Aceh dikenal murong. Di Ternate disebut sebagai kelo. Di Sumbawa dikenal
kawona. Sedangkan orang-orang Minang menyebutnya dengan nama munggai (Krisnadi,
2015).

II.1.2 Deskripsi
Kelor (Moringa oleifera L) tumbuh dalam bentuk pohon, berumur panjang (perenial) dengan
tinggi 7 - 12 m. Batang berkayu (lignosus), kulit tipis, berwarna putih kotor, permukaan
kasar. Percabangan arah cabang tegak atau miring, simpodial, cenderung tumbuh lurus dan
memanjang. Berkembang biak bisa secara generatif (biji) maupun vegetatif (stek batang).

3
 4

Tumbuh di dataran tinggi sampai di ketinggian ± 1000 m dpl maupun dataran rendah
(Krisnadi, 2015).

Kelor adalah tanaman yang mudah tumbuh meski dalam kondisi ekstrim seperti temperatur
yang sangat tinggi, dan dapat bertahan hidup di daerah bersalju ringan. Tanaman Kelor tahan
pada musim kering yang panjang dan tumbuh dengan baik di daerah dengan curah hujan
tahunan berkisar antara 250 sampai 1500 mm. Meskipun lebih baik pada tanah kering
lempung berpasir atau lempung, tetapi dapat hidup di tanah yang didominasi tanah liat
(Krisnadi, 2015).

II.1.3 Kandungan Kimia

Menurut hasil penelitian (Fuglie LJ, 2001). Daun Kelor mengandung vitamin A, vit B,
vitamin C, kalsium, kalium, protein, dan zat besi, dalam jumlah sangat tinggi yang mudah
diasimilasi dan dicerna oleh tubuh manusia, juga pada tahun 2006 menurut Wiley
InterScience menyebutkan bahwa Kelor mengandung mineral penting dan merupakan
sumber protein yang baik, asam amino, vitamin, β-karoten, fenolat dan berbagai asam amino
essensial lainnya. Kelor memiliki kombinasi yang kaya dan langka dari asam caffeoylquinic,
β – sitosterol, kaempferol, quercetin, dan zeatin.

Gambar II. 2. Perbandingan nutrisi daun kelor segar dan serbuk, dengan beberapa sumber
nutrisi lainnya.

II.1.4 Efek Farmakologi

Daun Kelor merupakan sumber antioksidan alami yang baik karena kandungan dari jenis-
jenis senyawa antioksidan seperti asam askorbat, flavonoid, karotenoid dan phenolic. (Anwar
et al, 2005;. Makkar dan Becker, 1996). Pada bagian akar tanaman kelor memiliki aktivitas
sebagai antiinflamasi (Sashidara dkk., 2009). Ekstrak biji berfungsi sebagai efek
perlindungan yang menurunkan antihipertensi dan lipid peroksida hati. (Krisnadi, 2015).
 5

II.2 Obesitas
II.2.1 Pengertian
Obesitas didefinisikan sebagai keadaan meningkatnya berat badan, yang disebabkan oleh
akumulasi jaringan adiposa, yang cukup banyak menghasilkan efek yang merugikan bagi
kesehatan (Kumar 10th, 2018). Obesitas terjadi ketika terdapat ketidakseimbangan antara
asupan energi dan pegeluaran energi dalam waktu yang lama, sehingga meningkatkan
penyimpanan energi. Kelebihan bobot badan atau Overweight didefinisikan sebagai Indeks
Masa Tubuh (IMT) yang lebih besar dari pada 25 kg/m 2, dimana BMI > 30 kg/m2 disebut
sebagai obesitas (Dipiro, 2015). Pria dengan lingkar pinggang ≥ 94 cm (≥90cm untuk pria
Asia), dan wanita dengan lingkar pinggang ≥80 cm beresiko mengalami masalah kesehatan
seperti obesitas. Lingkar pinggang ≥102 cm pada pria dan ≥ 88 cm pada wanita menunjukkan
risiko yang sangat tinggi terkait masalah kesehatan obesitas (BNF, 2019).

II.2.2 Etiologi
Obesitas adalah penyakit multifaktorial, kompleks yang terjadi karena interaksi antara
genotipe dan lingkungan. Meskipun etiologi tidak diketahui sepenuhnya, namun melibatkan
pengaruh sosial, perilaku, budaya, patofisiologi, metabolisme, dan komposisi genetik.
mayoritas individu yang kelebihan berat badan atau obesitas adalah orang dewasa, tetapi
penyakit ini juga lazim pada anak-anak antara 2 sampai 19 tahun (Marie, 2016).

Faktor genetik menjadi penentu utama obesitas pada beberapa individu, adanya jumlah total
gen berkontribusi mempengaruhi berat badan. Faktor lingkungan seperti gaya hidup yang
relatif kurang aktivitas serta, peningkatan makanan tinggi lemak. Kondisi medis termasuk
penyakit Cushing dan defisiensi hormon pertumbuhan atau sindrom genetik seperti sindrom
Prader-Willi dapat dikaitkan dengan berat badan. Obat-obatan yang berhubungan dengan
penambahan berat badan termasuk insulin, kortikosteroid, beberapa antidepresan,
antipsikotik, dan beberapa antikonvulsan.

II.2.3 Patofisiologi
Kelebihan berat badan dan obesitas adalah ketidakseimbangan yang terjadi antara asupan
energi dan pengeluaran energi. Tingkat obesitas ditentukan oleh panjangnya waktu
ketidakseimbangan. Asupan energi dipengaruhi oleh pengaruh lingkungan, termasuk sosial,
perilaku, dan faktor budaya, sedangkan komposisi genetik dan metabolisme mempengaruhi
pengeluaran energi (Marie, 2016).
 6

Gambar II. 3. Sirkuit pengaturan keseimbangan energi.

Ketika energi yang cukup disimpan dalam jaringan adiposa dan individu mengkonsumsi
makan dengan baik, sinyal adipositas aferen (insulin, leptin, ghrelin, peptida YY) dikirim ke
unit pemrosesan neuron sentral, di hipotalamus. Di sini sinyal adipositas menghambat sirkuit
anabolik dan mengaktifkan sirkuit katabolik. Sistem efektor dari sirkuit pusat ini kemudian
mempengaruhi keseimbangan energi dengan menghambat asupan makanan dan
meningkatkan energi pengeluaran. Pada saat yang sama simpanan energi, dan sinyal
proadipositas berkurang. Sebaliknya, ketika simpanan energi rendah, sirkuit anabolik tersedia
mengambil alih, dengan mengorbankan sirkuit katabolik, untuk menghasilkan simpanan
energi dalam bentuk jaringan adiposa (Kumar, 2018). komponen penting dari sistem aferen
yang mengatur nafsu makan dan rasa kenyang yaitu leptin dan hormon usus, dan adiponektin
yang mengatur konsumsi lemak.

II.2.4 Leptin
Leptin disekresikan oleh sel-sel lemak, dan hasilnya diatur di penyimpanan lemak. BMI dan
penyimpanan lemak tubuh berperan dalam sekresi leptin. Dengan jaringan adiposa yang
melimpah, sekresi leptin dirangsang, dan hormon melewati sawar darah otak dan menuju ke
hipotalamus, di mana akan mengurangi asupan makanan dengan merangsang POMC /
Neuron CART dan menghambat neuron NPY / AgRP. Urutan pengaturan balik terjadi ketika
ada yang melebihi simpanan lemak tubuh, akibatnya sekresi leptin berkurang dan asupan
makanan meningkat. Pada orang dengan badan normal, sistem jalur ini seimbang. Leptin juga
 7

meningkatkan pengeluaran energi dengan merangsang aktifitas fisik, pengeluaran energi, dan
termogenesis, dan ini mungkin merupakan efek katabolik paling penting yang dimediasi oleh
leptin melalui hipotalamus (Kumar, 2018).

II.2.5 Hormon Usus

Hormon usus adalah inisiator dan terminator yang bekerja atas keinginan untuk makan sesuai
kehendak. Contoh-contoh prototipe adalah ghrelin dan peptida YY (PYY). Ghrelin
diproduksi diperut dan nukleus arkuata dari hipotalamus, meningkatkan asupan makanan,
bertindak dengan merangsang neuron NPY / AgRP di hipotalamus. kadar Ghrelin biasanya
naik sebelum makan dan turun 1 hingga 2 jam setelah itu, tetapi penurunan ini dilemahkan
pada orang yang obesitas. Kadar ghrelin lebih rendah pada orang yang obesitas dibandingkan
untuk mereka yang memiliki berat badan normal, dan meningkat dengan pengurangan
obesitas. Kenaikan kadar ghrelin ini jauh berkurang pada individu yang memiliki operasi
lambung, dilakukan untuk pengobatan obesitas, menunjukkan bahwa efek menguntungkan
dari operasi tersebut mungkin sebagian karena berkurangnya permukaan mukosa lambung
yang terpapar makanan (Kumar, 2018).

PYY disekresikan dari sel endokrin di ileum dan usus besar dalam merespon konsumsi
makanan, menurunkan nafsu makan dan menambah rasa kenyang. Bertindak dengan
merangsang neuron POMC / CART di hipotalamus, sehingga mengurangi asupan makanan.
PYY juga mengurangi tingkat pengosongan lambung dan mortilitas usus, yang semuanya
berkontribusi dalam rasa kenyang. Kadar PYY dikurangi dengan kondisi obesitas (Kumar,
2018).

II.2.6 Adiponektin
Adiponektin yang diproduksi di jaringan adiposa, disebut "molekul pembakar lemak".
Adiponektin mengarahkan asam lemak ke otot untuk oksidasi, mengurangi masuknya asam
lemak ke hati dan total kadar trigliserida hati, menurunkan produksi glukosa di hati,
menyebabkan peningkatan sensitivitas insulin dan melindungi terhadap sindrom
metabolisme. Jumlah Adiposit muncul pada saat remaja dan lebih tinggi pada orang yang
mengalami obesitas seperti anak-anak, meskipun pada orang dewasa sekitar 10% dari
adiposit berubah setiap tahun, jumlah adiposit tetap konstan, terlepas dari massa tubuh
individu. Sebagian diet gagal karena hilangnya lemak dari adiposit menyebabkan kadar leptin
jatuh, merangsang nafsu makan dan mengurangi energi pengeluaran (Kumar, 2018).
 8

II.3 Obat Obesitas

Obat obesitas salah satunya adalah orlistat yang merupakan inhibitor lipase yang
menginduksi penurunan berat badan dengan menurunkan lemak dari makanan, juga
meningkatkan profil lipid dan metabolisme metabolik lainnya. Efek samping obat ini seperti
sakit perut, perut kembung, urgensi tinja, dan inkontinensia terjadi pada 80% individu.
Orlistat disetujui untuk penggunaan jangka panjang. Ini mengganggu penyerapan vitamin
larut lemak, siklosporin, levotiroksin, dan kontrasepsi oral.

Lorcaserin adalah agonis reseptor serotonin selektif (5-HT2c) yang disetujui untuk
manajemen kronis berat badan. Aktivasi reseptor 5-HT2c pusat menghasilkan penekanan
nafsu makan menyebabkan penurunan berat bada. Hentikan lorcaserin jika 5% penurunan
berat badan tidak tercapai pada minggu ke 12. Efek samping yang umum termasuk sakit
kepala, pusing, sembelit, kelelahan, dan mulut kering.

Phentermine kombinasi topiramate diindikasikan untuk manajemen berat badan kronis. Obat
harus dihentikan setelah 12 minggu jika penurunan berat badan 5% tidak tercapai. Efek
samping yang umum termasuk sembelit, mulut kering, parestesia, dysgeusia, dan insomnia.

Phentermine dan dietilpropion masing-masing lebih efektif dari pada plasebo dalam
mencapai penurunan berat badan jangka pendek. Tidak boleh digunakan pada pasien dengan
hipertensi berat atau penyakit kardiovaskular yang signifikan (Dipiro, 2015).

Obat-obatan yang menghasilkan perasaan kenyang seperti (metil selulosa p. 54 dan sterculia
p. 54 [tanpa izinindikasi]) telah digunakan dalam upaya untuk mengendalikan nafsu makan,
tetapi ada sedikit bukti untuk kemanjurannya. Berbagai penekan nafsu makan yang bekerja
sentral, termasuk stimulan dan obat serotonergik seperti (dexfenfluramine, fenfluramin,
sibutramine, dan rimonabant), telah digunakan dalam pengelolaan obesitas tetapi telah ditarik
atau tidak lagi direkomendasikan karena masalah keamanan serius atau potensi kecanduan
mereka (BNF, 2019).

II.4 Induksi Makanan Tinggi Lemak Dan Karbohidrat

Tabel II. 1. Komposisi Makanan Tinggi Lemak dan Tinggi Karbohidrat (Sukandar et al,
2016).

Komposisi Induksi (g/1000g) Normal (9/1000g)

 9

Tepung terigu 172 172

Tepung beras 189 0
Tepung jagung 204 102
Tepung ikan 130 370
Tepung kacang hijau 114 336
Lemak sapi 171 0
Minyak sayur 20 20
MSG q.s 0

II.5 Mekanisme Propiltiourasil (PTU) menyebabkan obesitas

Propiltiourasil (PTU) adalah obat yang digunakan untuk mengatasi penyakit hipertiroid
dengan mengatasi kelebihan hormon tiroid dalam tubuh, jika propiltiourasil digunakan pada
orang dengan kadar tiroid normal maka akan menyebabkan hipotiroid dalam tubuh. Jika
tubuh kekurangan hormon tiroid akibatnya, tubuh akan berjalan sangat lamban dan dapat
menyebabkan kegemukan (Dipiro, 2015).
 BAB III. METODOLOGI PENELITIAN

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimen labolatorium yang menguji aktivitas ekstrak
etanol daun kelor (Moringa oleifera L) terhadap mencit obesitas yang diinduksi makanan
tinggi lemak, karbohidrat dan PTU secara invivo.

Tahapan kerja yang dilakukan meliputi pengumpulan tanaman, determinasi, pengolahan

bahan, pembuatan ekstrak etanol daun kelor (Moringa oleifera L), dengan metode maserasi,
karakterisasi simplisia, skrining fitokimia ekstrak etanol daun kelor (Moringa oleifera L),
standarisasi ekstrak, pembuatan sediaan uji, serta pengujian aktivitas antiobesitas ekstrak
etanol daun kelor (Moringa oleifera L).

Hewan yang digunakan adalah mencit jantan Swiss-webster yang diinduksi dengan makanan
tinggi karbohodrat, lemak dan propiltiourasil . pengujian ini dilakukan selama 30 hari.

Kelompok hewan uji yang digunakan adalah mencit yang dibagi menjadi 6 kelompok dan
diadaptasi untuk menyesuaikan dengan lingkungan. Mencit diberikan makanan tinggi lemak,
karbohidrat dan PTU untuk mencapai bobot > 20% dari bobot awal.

Parameter yang diamati selama dilakukan terapi adalah pengukuran indeks berat badan,
indeks makanan, dan indeks fesesnya dengan cara membandingkan bobot makanan dan
fesesnya perhari dengan bobot akhir periode induksi. Diakhir periode terapi hewan uji
dikorbankan dan ditimbang bobot organ (hati, ginjal, limpa, dan testikel) serta lemaknya
(lemak retroperitoneal). Data yang diperoleh dianalisis dengan menggunakan metode One
Way Anova ( Analysis of variance).

10
 BAB IV. PROSEDUR PENELITIAN

IV.1 Pengumpulan Bahan dan Determinasi

Daun kelor (Moringa oleifera L) diperoleh dari daerah Bogor, Jawa Barat. Dilakukan
determinasi sampel di LIPI, kemudian dilanjutkan dengan seleksi daun yang segar dan tidak
terserang penyakit atau rusak.

IV.2 Pengolahan bahan

IV.2.1 Sortasi basah
Sortasi basah dilakukan untuk memisahkan kotoran-kotoran dan bahan-bahan asing lainnya
(Depkes RI, 1995).

IV.2.2 Pencucian
Proses pencucian dilakukan untuk menghilangkan tanah dan pengotor lainnya yang melekat
pada bahan simplisia. Pencucian dilakukan dengan air bersih yang mengalir (Depkes RI,
1995).

IV.2.3 Pengeringan
Metode pengeringan yang dilakukan pada daun adalah pengeringan dengan menggunakan
oven pada suhu 40°.Pengeringan bertujuan untuk mendapatkan simplisia yang tidak mudah
rusak. Sehingga dapat disimpan dalam waktu yang lebih lama. Dengan mengurangi kadar air
dan menghentikan reaksi enzimatik akan dicegah penurunan mutu bahan tumbuhan (Depkes
RI, 1995).

IV.2.4 Sortasi kering

Tujuan sortasi kering yaitu untuk memisahkan benda-benda asing seperti bagian-bagian
tumbuhan yang tidak diinginkan dan pengotor-pengotor lain yang masih ada dan tertinggal
pada simplisia kering (Depkes RI, 1995).

IV.2.5 Penyimpanan
Simplisia yang sudah kering ditempatkan dalam suatu wadah tersendiri yang bersih dan
sesuai dengan sifat simplisia sehingga tidak terpengaruh terhadap kandungan zat yang
terdapat dalam simplisia (Depkes RI, 1995).

IV.3 Pembuatan Ekstrak

Daun kelor (Moringa oleifera L) yang telah diskrining didiekstraksi dengan metode maserasi
menggunakan etanol 96% pada suhu ruangan 3x24 jam, setelah 1x24 jam disaring, kemudian

11
 12

pelarut diganti dengan yang baru. Ekstrak yang diperoleh kemudian dilakukan pemekatan
dengan menggunakan alat rotary evaporator pada suhu 40°C. (Depkes RI, 2008).

Perhitungan rendemen:

Berat Ekstrak
Rendemen Ekstrak = x 100%
Berat Simplisia

IV.4 Skrining Fitokimia

Ekstrak yang diperoleh selanjutnya diuji secara kualitatif untuk mengetahui kandungan
metabolit sekunder yang terdapat dalam ekstrak. Pengujiannya meliputi uji senyawa alkaloid,
flavonoid, saponin, tannin, kuinolon dan triterpenoid/steroid.

IV.4.1 Identifikasi alkaloid

Sebanyak 2 gram sampel ditambahkan dengan 5 ml amonia 30% dan ditambahkan 20 ml
kloroform, lalu digerus dalam mortir. Campuran disaring dengan kertas saring, filtrat berupa
larutan organik diambil (sebagai larutan A). sebanyak 10 ml dari larutan A diekstraksi dengan
10 ml larutan HCl 1:10 dengan pengocokan tabung reaksi, kemudian diambil larutan atasnya
(larutan B). Pada Larutan A diteteskan beberapa tetes dikertas saring dan disemprot atau
ditetesi dengan pereaksi Dragendorff, terbentuknya warna merah atau jingga pada kertas
saring menunjukkan adanya senyawa alkaloid. Pada larutan B dibagi menjadi dua tabung
reaksi, ditambahkan pereaksi Dragendorff jika terbentuk endapan merah bata dan pereaksi
Mayer jika terbentuk endapan putih menunjukan adanya senyawa alkaloid (Djamil and
Anelia, 2009).

IV.4.2 Identifikasi Flavonoid

Sebanyak 2 gram sampel ditambahkan 100 ml air panas, didihkan selama 5 menit dan
disaring hingga doperoleh filtrat. Kemudian digunakan untuk penafisan senyawa golongan
saponin, kuinon, tannin (larutan percobaan). Kemudian kedalam 5 ml larutan percobaan
ditambahkan serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat serta 5 ml amil alkohol, lalu
dikocok kuat dan dibiarkan memisah. Terbentuknya warna pada lapisan amil alkohol
menunjukkan adanya senyawa flavonoid (Djamil and Anelia, 2009).

IV.4.3 Identifikasi saponin

Sebanyak 10 ml larutan percobaan yang diperoleh dari identifikasi golongan flavonoid
dimasukkan kedalam tabung reaksi dan dikocok selama 10 detik secara vertikal, kemudian
didiamkan 10 menit. Pengamatan dilakukan terhadap busa yang terbentuk. Terbentuknya
 13

busa yang stabil dalam tabung reaksi menunjukkan adanya senyawa golongan saponin ketika
ditambahkan 1 tetes asam klorida 1 % (encer) busa tetap stabil (Djamil and Anelia, 2009).

IV.4.4 Identifikasi tanin

Sebanyak 5 ml larutan percobaan direaksikan dengan larutan besi (III) klorida 1 %. Jika
terbentuk warna biru kehitaman menunjukkan adanya senyawa fenolat. Kemudian 5 ml
larutan percobaan ditambahkan larutan gelatin, jika terbentuk endapan putih menunjukan
adanya tanin (Djamil and Anelia, 2009).

IV.4.5 Identifikasi Kuinolon

Sebanyak 5 ml larutan percobaan yang diperoleh dari identifikasi flavonoid, dimasukan
kedalam tabung reaksi, ditambahkan beberapa tetes larutan NaOH 1 N. terbentuknya larutan
merah menunjukkan adanya senyawa golongan kuinon. Namun dapat terjadi reaksi positif
palsu dengan tannin. Maka pemeriksaan dilanjutkan dengan penambahan gelatin kemudian
endapannya disaring dan filtratnya ditambahkan NaOH 1 N, bila tetap terbentuk warna merah
maka menunjukkan adanya kuinon (Djamil and Anelia, 2009)

IV.4.6 Identifikasi Triterpenoid/Steroid

Sebanyak 20 mg sampel dimaserasi dengan 20 ml eter selama 2 jam (dalam wadah dengan
penutup rapat), kemudian disaring dan diambil filtratnya. Sebanyak 5 ml dari filtrat tersebut
diuapkan dalam cawa penguap hingga diperoleh residu. Kedalam residu ditambahkan 2 tetes
asam asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat (pereaksi Lieberman-Buchard).
Terbentuknya warna hijau atau merah menunjukkan adanya senyawa golongan steroid atau
triterpenoid (Djamil and Anelia, 2009).

IV.5 Karakterisasi Simplisia

IV.5.1 Penetapan Susut Pengeringan
Penetapan susut pengeringan menggunakan alat Moisture Balance. Dimasukkan 2 g serbuk
simplisia ke dalam wadah berlapis alumunium foil yang telah ditara lebih dahulu kemudian
diukur kadar susut pengeringan pada suhu 105°C hingga alat menunjukkan angka konstan,
maka akan didapat persen susut pengeringan (Farmakope Herbal Indonesia, 2008).

IV.5.2 Penetapan kadar Abu Total

Ditimbang seksama 2-3 g bahan uji yang telah dihaluskan dan masukkan ke dalam krus
silikat yang telah dipijar dan ditara, pijarkan perlahan-lahan hingga arang habis, dinginkan
dan timbang. Jika dengan cara ini arang tidak dapat dihilangkan, tambahkan air panas, aduk,
saring melalui kertas bebas abu. Masukkan filtrat ke dalam krus, uapkan dan pijarkan hingga
 14

bobot tetap. Kadar abu total dihitung terhadap berat bahan uji, dinyatakan dalam % b/b (FHI,
2008).

Kadar abu total dinyatakan dalam persen menurut rumus :

( bobot krus+ abu total ) −bobot krus kosong

Kadar abutotal= X 100 %
bobot simplisia

IV.5.3 Penetapan Kadar Sari Larutan Etanol

Sebanyak 5 gram serbuk yang telah dikeringkan diudara. Masukan kedalam labu bersumbat,
tambahkan 100 ml etanol 95%, dikocok berkali-kali selama 6 jam pertama, biarkan selama 18
jan. saring cepat untuk menghindarkan penguapan etanol, uapkan 20 ml filtrat hingga kering
dalam cawan dangkal beralas datar yang telah dipanaskan 105ºC dan ditara, panaskan sisa
pada suhu 105ºC hingga bobot tetap. Kadar sari yang larut etanol 96% dihitung terhadap
bahan yang telah dikeringkan diudara (Departemen Kesehatan Republik Indonesia., 2008).

berat ekstrak x 5
Kadar sari larut etanol = x 100%
berat simplisia

IV.5.4 Kadar Sari Larut Air

Serbuk simplisia ditimbang 2 gram, kemudian ditambahkan dengan 100 mL air, dibiarkan
selama 24 jam, filtrat sejumlah 20 mL diuapkan sampai kering dalam cawan penguap
berdasarkan rata-rata yang telah di tara, kemudian residu dpanaskan pada suhu 105°C sampai
bobot tetap. Kadar sari larut air dihitung dalam persen sari yang larut dalam air terhadap
bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 2008).

Kadar sari larut air dinyatakan dalam persen menurut rumus :

( bobot cawan+ sari air )−bobot cawan kosong vol pelarut

Kadar sari larut air=¿ x x 100 %
bobot simplisia vol filtrat

IV.5.5 Penetapan Kadar Air

Sebanyak 200 mL toluena dan 2 mL air dimasukkan ke dalam labu destilasi dan ditambahkan
beberapa keping batu didih. Labu dipanaskan hingga larutan mendidih selama 2 jam,
kemudian didinginkan selama 30 menit dan volume air dibaca pada skala dengan ketelitian
0,05 mL. Hasil yang diperoleh disebut volume destilasi pertama.
 15

Sejumlah zat uji yang diperkirakan mengandung 2-3 mL air ditimbang seksama dan
dimasukkan ke dalam labu destilasi, dimasukkan juga beberapa keping batu didih. Labu
dipanaskan selama 15 menit.Saat larutan mulai mendidih, penyulingan dimulai dengan
kecepatan 2 tetes per detik. Setelah air tersuling seluruhnya, bagian dalam kondensor dibilas
dengan toluena jenuh air. Destilasi dilanjutkan selama ± 5 menit, kemudian pemanasan
dihentikan. Tabung penerima didinginkan pada suhu kamar. Air yang masih menempel pada
dinding tabung penerima dilepaskan dengan mengetuk-ngetuk tabung. Lapisan air dan
toluena dibiarkan memisah dan volume yang terbaca disebut volume destilasi kedua (FHI,
2008).

Kadar air dinyatakan dalam persen menurut rumus :

volume air akhir−volume air awal

Kadar air= X 100 %
bobot simplisia

IV.5.6 Penetapan Kadar Abu Tak Larut Asam

Abu yang diperoleh pada penetapan abu total didihkan dengan 25 mL asam klorida encer
selama 5 menit. Bagian yang tidak larut asam dikumpulkan, disaring menggunakan kertas
saring bebas abu, dicuci dengan air panas, dipijarkan pada suhu 450°C hingga bobot tetap
kemudian ditimbang. Kadar abu tidak larut asam dihitung terhadap bahan yang telah
dikeringkan di udara (FHI, 2008).

Kadar abu tidak larut asam dinyatakan dalam persen menurut rumus

( bobot krus +abu tidak larut asam )−bobot krus kosong

Kadar abutidak larut asam=¿ X 100 %
bobot simplisia

IV.6 Pembuatan Larutan CMC 0,5%

Sebanyak 500 mg CMC-Na ditimbang, kemudian dilarutkan dalam sebagian akuades hangat,
diaduk dan ditambah akuades sambil terus diaduk. Setelah larut, sisa akuades ditambahkan
sampai didapatkan volume larutan CMC – Na 100,0 mL.

IV.7 Pembuatan Sediaan Uji

Ekstrak etanol 96% daun kelor (Moringa oleifera L.) yang diperoleh ditimbang sesuai dengan
kelompok dosis yang dibutuhkan kemudian ditambahkan dengan suspensi CMC 0,5% sesuai
dengan volume yang dapat diberikan pada hewan uji.
 16

IV.8 Penyiapan Hewan Uji

Hewan percobaan yang akan digunakan penelitian terlebih dahulu diadaptasi selama satu
minggu, dalam kandang yang baik untuk menyesuikan dengan ligkungan serta diberi makan
dengan pakan normal dan minum cukup. Kemudian hewan dikelompokan secara acak, tiap
kelompok terdiri dari lima ekor.

IV.9 Pengujian Aktivitas Antiobesitas pada Mencit Obesitas

Pengujian dilakukan secara in vivo menggunakan mencit yang diinduksi makanan tinggi
karbohidrat, lemak dan propiltiourasil yang dicampurkan kedalam minuman lalu dilakukan
tahap terapi setelah pemberian induksi pada mencit, tahap perlakuan dan pengamatan
dilakukan selama 30 hari.

Hewan uji yang digunakan dibagi menjadi enam kelompok, masing-masing kelompok terdiri
dari lima ekor mencit. Kelompok tersebut terdiri dari kelompok normal (kontrol negatif) yang
mendapatkan larutan CMC 0,5%, pakan standar dan tidak diberikan terapi, kelompok kontrol
positif yang mendapatkan larutan CMC 0,5% diinduksi pakan tinggi karbohidrat, lemak serta
propiltiourasil dan tidak diberikan terapi, kelompok pembanding yaitu kelompok yang
mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak dan propiltiourasi serta berikan larutan
orlistat 15,6 mg/KgBB dalam larutan suspensi CMC 0,5% kelompok uji 1 yang mendapatkan
induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak, propiltiourasil dan ekstrak daun kelor (Moringa
oleifera L) pada tiga dosis bertingat yaitu 75 mg/KgBB dalam lauratn suspensi CMC 0,5%
kelompok uji 2 yang mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak, propiltiourasil
dan ektrak daun kelor (Moringa oleifera L) pada dosis yaitu 150 mg/KgBB dalam larutan
suspensi CMC 0,5%, kelompok uji 3 mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak,
propiltiourasil dan ekstrak daun kelor (Moringa oleifera L) pada dosis 300 mg/KgBB dalam
larutan suspensi CMC 0,5%. Pemberian induksi dan terapi dilakukan secara bersamaan.
Parameter yang diamati selama dilakukan terapi adalah pengukuran indeks berat badan,
indeks makanan, dan indeks Lee. Diakhir periode terapi hewan uji dikorbamkan dan
ditimbang bobot organ (hati, ginjal, limpa dan testikel) dan lemaknya (lemak retropritoneal).

Kelompok hewan uji antara lain

1. Kelompok normal (kontrol negatif) yang mendapatkan larutan CMC 0,5% dan pakan
standar dan tidak diberikan terapi

2. Kelompok kontrol positif yang mendapatkan larutan CMC 0,5% dan diinduksi pakan
tinggi karbohidrat, lemak dan propiltiourasil dan tidak diberikan terapi
 17

3. Kelompok pembanding yaitu kelompok yang mendapatkan induksi pakan tinggi

karbohidrat, lemak dan propiltiourasil dan berikan larutan orlistat 15,6 mg/KgBB
dalam larutan suspensi CMC 0,5%

4. Kelompok uji 1 yang mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak dan
propiltiourasil dan ekstrak daun kelor pada tiga dosis bertingat yaitu 50 mg/KgBB
dalam lauratn suspensi CMC 0,5%

5. Kelompok uji 2 yang mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak dan
propiltiourasil dan ektrak daun kelor pada dosis bertingkat yaitu 75 mg/KgBB dalam
larutan suspensi CMC 0,5% ,

6. Kelompok uji 3 mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak dan

propiltiourasil dan ekstrak daun kelor pada tiga dosis bertingkat yaitu 100 mg/KgBB
dalam larutan suspensi CMC 0,5%

IV.10 Analisis data

Data yang akan didapatkan dari hasil penelitian akan dilakukan uji statistik dengan
menggunakan aplikasi software statistik dengan tingkat signifikansi 0,05 (p<0,05) dan taraf
kepercayaan 95% akan dianggap signifikan. Uji hipotesis statistik parametrik yang bertujuan
untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan rata-rata antara lebih dari dua kelompok sampel
yang tidak berpasangan menggunakan uji hipotesis One Way ANOVA.

IV.11 Pembuatan Penginduksi Pakan Normal, Tinggi Lemak dan Karbohidrat

Pembuatan pakanan untuk kelompok normal komposisi makanan normal (%) yang
digunakan, ditunjukkan pada Tabel 4.1

Larutan Propiltiourasil. PTU sebanyak 100 mg/KgBB dilarutkan dalam 1000 mL aquadest
hingga homogen. Komposisi makanan tinggi lemak dicantumkan dalam Tabel 5.1 Lemak
sapi dipanaskan hingga mencair, ditambahkan minyak sayur kemudian dicampurkan dengan
semua tepung (Tabel 4.1) diuleni hingga menjadi adonan yang merata kemudian dibentuk
memanjang dan dikeringkan di bawah lampu pijar 40 watt selama 3 hari. Makanan yang telah
dikeringkan disimpan dalam wadah kedap udara.

Tabel IV. 1. Komposisi Makanan Tinggi Lemak dan Tinggi Karbohidrat

Komposisi Induksi (g/1000g) Normal (g/1000g)

 18

Tepung terigu 172 172

Tepung beras 189 0

Tepung jagung 204 102

Tepung ikan 130 370

Tepung kacang hijau 114 336

Lemak sapi 171 0

Minyak sayur 20 20

MSG q.s 0
(Sukandar et al, 2016).
 BAB V. HASIL DAN PEMBAHASAN

V.1 Determinasi Tanaman

Determinasi merupakan proses untuk menentukan genus atau spesies tumbuhan secara
spesifik. Determinasi bertujuan untuk memastikan identifikasi tanaman yang akan digunakan
dalam penelitian ini sesuai spesies tanaman yang dimaksud. Dalam penelitian aktivitas
antiobesitas ini menggunakan ekstrak etanol daun kelor (Moringa oleifera L) sebagai sediaan
uji. Daun kelor yang digunakan diperoleh dari Balittro Bogor, Jawa Barat. Selanjutnya
tanaman di determinasi di LIPI (Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia), Bogor.
Berdaasarkan keterangan hasil determinasi dengan nomor 0292/03.FF/UBK/X/2019
menyatakan bahwa tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah benar daun kelor
(Moringa oleifera L).

V.2 Hasil Ekstraksi

Metode ekstraksi yang digunakan pada penelitian ini adalah metode maserasi dengan pelarut
etanol 96%. Metode maserasi ini digunakan karena merupakan cara sederhana untuk
mendapatkan senyawa fitokimia yang terkandung dalam tanaman. Pelarut ekstraksi yang
digunakan adalah etanol 96%. Etanol merupakan pelarut universal yang dapat menarik
senyawa polar, semipolar, dan nonpolar (DepKes RI, 2008).

Simplisia daun kelor sebanyak 2000 gram diekstraksi dengan pelarut etanol 96% dengan
metode maserasi yang dilakukan 3x24 jam, kemudian dipekatkan dengan rotary evaporator
pada suhu 50ºC, kecepatan 60 rpm dan diperoleh hasil rendemen 16,2 %.

Perhitungan Rendemen :

324 x 100 %
Rendemen ekstrak (%) = = 16,2%
2000

Rendemen ekstrak (%) = 16,2%

V.3 Skrining Senyawa Fitokimia

Skrining fitokimia dilakukan untuk mengidentifikasi kandungan kimia yang terdapat dalam
tumbuhan (ekstrak) dan untuk mengetahui bahwa tidak ada senyawa dari simplisia ekstrak
yang hilang setelah proses ekstraksi. Metode dengan perekasi yang spesifik dilakukan karena
lebih sederhana dan selektif untuk golongan senyawa yg diuji.

19
 20

Tabel V. 1.

Hasil Skrining Fitokimia Daun Kelor (Moringa oleifera L)

Wayan, (2016)
No Gol Senyawa Ekstrak

1 Alkaloid + +
2 Flavonoid + +
3 Tanin + +
4 Saponin + -
5 Steroid/Tritepenoid + +
6 Kuinin - -
Keterangan :

( + ) = Terdeteksi

( - ) = Tidak Terdeteksi

Hasil skrining fitokimia menunjukan bahwa ekstrak etanol daun kelor (Moringa oleifera L)
mengandung senyawa kimia dari semua golongan yaitu alkaloid, flavonoid, tanin, saponin,
steroid/triterpenoid. Senyawa yang diduga memiliki aktivitas antiobesitas adalah flavonoid.

V.4 Hasil Karakterisasi Daun Kelor

Karakterisasi dilakukan bertujuan untuk mengetahui kualitas dari simplisia apakah memenuhi
standar mutu simplisia atau belum. Karakterisasi daun kelor (Moringa oleifera L) dilakukan
pemeriksaan makroskopik meliputi penetapan kadar air, kadar abu total, kadar sari larut air,
kadar sari larut etanol.

Kadar air dilakukan untuk mengetahui kandungan air didalam simplisia, karena air sebagai
media tumbuhnya jamur dan bakteri yang dapat merusak senyawa yang akhirnya dapat
mempengaruhi aktivitas farmakologi (Sitorus, 2016). Kadar air yang memenuhi syarat yaitu
kurang dari 10%. Kadar air daun kelor sebesar 0,9 %, sehingga kadar ini masuk dalam
rentang yang dipersyaratkan. Penetapan kadar abu total bertujuan untuk mengetahui
kandungan total mineral dan derajat kebersihan dari suatu simplisia (Retnaningtyas, 2013).
Hasil yang didapatkan 10,65 memenuhi syarat sesuai MMI V yaitu < 11. Pada pengujian
kadar sari etanol dan air dilakukan untuk mengetahui gambaran awal senyawa yang terdapat
simplisia tersebut lebih banyak larut pada pelarut air atau etanol (Rismawati, 2015). Hasil
 21

pengujian menunjukkan kadar sari larut air lebih besar dibandingkan etanol, hal ini
menunjukkan senyawa pada daun kelor lebih banyak terlarut pada pelarut air. Pada pengujian
susut pengeringan diperoleh hasil 9,33%, susut pengeringan menunjukkan hilangnya kadar
senyawa pada suhu 105°C dilakukan dengan tujuan untuk memberikan batasan maksimal
mengenai besarnya senyawa yang hilang pada saat proses pengeringan (Depkes RI, 2000:
13). Hasil dari susut pengeringan simplisia daun kelor yaitu sebesar 9, 33 %.

Tabel V.2.

Hasil Karakterisasi daun kelor (Moringa oleifera L)

Kadar %
No Jenis Penetapan Simplisia Persyaratan
1 Kadar Air 0,9 % < 10 % (BPOM)

2 Kadar Abu Total 10, 17 % < 11 % (MMI V)

3 Kadar Sari Larut Air 20,09 % > 5 % (MMI V)

4 Kadar Sari Larut Etanol 46,35 % > 5 % (MMI V)

5 Susut Pengeringan 9, 33% -

V.5 Pengujian Aktivitas Antiobesitas

Hewan uji yang digunakan pada penelitian ini adalah mencit galur swiss webster dengan
bobot 20 – 25 gram. Kelompok hewan uji yang digunakan adalah mencit yang dibagi menjadi
enam kelompok, masing-masing kelompok terdiri dari lima ekor mencit dan diadaptasi
selama satu minggu untuk menyesuaikan dengan lingkungan. Mencit diberikan makanan
tinggi lemak, karbohidrat dan PTU 0,01% dicampurkan pada air minumnya untuk mencapai
bobot > 20% dari bobot awal. Kelompok tersebut terdiri dari kelompok normal (kontrol
negatif) yang mendapatkan larutan CMC 0,5% dan pakan standar dan tidak diberikan terapi,
kelompok kontrol positif yang mendapatkan larutan CMC 0,5% dan diinduksi pakan tinggi
karbohidrat, lemak dan propiltiourasil dan tidak diberikan terapi, kelompok pembanding
yaitu kelompok yang mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak dan
propiltiourasil dan berikan larutan orlistat 15,6 mg/KgBB dalam larutan suspensi CMC 0,5%,
kelompok uji 1 yang mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak dan
 22

propiltiourasil dan ekstrak daun kelor (Moringa oleifera L) pada tiga dosis bertingat yaitu 75
mg/KgBB dalam lauratn suspensi CMC 0,5% kelompok uji 2 yang mendapatkan induksi
pakan tinggi karbohidrat, lemak dan propiltiourasil dan ektrak daun kelor (Moringa oleifera
L) pada dosis yaitu 150 mg/KgBB dalam larutan suspensi CMC 0,5% , kelompok uji 3
mendapatkan induksi pakan tinggi karbohidrat, lemak dan propiltiourasil dan ekstrak daun
kelor (Moringa oleifera L) pada dosis 300 mg/KgBB dalam larutan suspensi CMC 0,5%.
Pemberian induksi dan terapi dilakukan secara bersamaan. Parameter yang diamati selama
dilakukan terapi adalah pengukuran indeks berat badan, indeks Lee dan indeks makanan,.
Diakhir periode terapi hewan uji dikorbankan dan ditimbang bobot organ (hati, ginjal, limpa
dan testikel) dan lemaknya (lemak retropritoneal).

V.6 Hasil Analisis Bobot Badan Hewan Uji Selama Fase Pengujian
Pemberian induksi makanan tinggi lemak, karbohidrat dan PTU secara bersamaan dengan
pemberian ekstrak etanol daun kelor, dilakukan untuk mengetahui efek daun kelor dalam
menurunkan bobot badan. Pemberian pakan tinggi lemak, akan menyebabkan akumulasi
lemak di bawah kulit dan berkontribusi pada peningkatan berat badan mencit (Patonah dkk,
2017) pemberian PTU pada air minum akan menyebabkan kondisi kekurangan hormon tiroid
akibatnya, pertumbuhan akan berjalan sangat lamban dan dapat menyebabkan kegemukan
(Dipiro, 2015).

Berdasarkan hasil uji Anova menggunakan LSD, dimana uji LSD bertujuan untuk melihat
perbedaan signifikan antar kelompok perlakuan. Hasil uji LSD menunjukkan perbedaan yang
signifikan atau bermakna jika nilai signifikannya (p<0,05). Pada T0 tidak terdapat perbedaan
yang signifikan dari semua kelompok karena pada T0 hewan belum dilakukan perlakuan. hal
tersebut menunjukkan bahwa semua hewan uji yang digunakan pada kondisi berat badan
normal.

Tabel V.3.

Perbandingan hasil rata-rata bobot badan

 23

Kelompok Rata-rata ± SD Indeks Berat Badan

uji T0 T7 T14 T21 T28

Kelompok 22,66±1,52 25,00±2,64# 27,33±0,57# 25,66±2,51# 25,00±1,00#

negatif

Kelompok 24,00±1,00 30,66±3,51 32,33±2,30 33,33±1,52 31,00±3,60

positif
Kelompok 23,66±1,15 26,00±2,64 26,33±2,51# 27,00±1,00# 29,33±2,08
Pembanding
EEDK 75 24,00±0,57 24,33±4,04# 27,00±4,00# 28,66±5,50 28,33±5,03
mg/KgBB
EEDK 150 23,66±0,57 27,33±0,57 26,00±2,64# 28,33±2,08 29,00±2,00
mg/KgBB
EEDK 300 23,00±1,00 28,33±2,08 28,66±1,52 30,00±1,00 29,00±1,73
mg/KgBB

Ket :

(*) : berbeda bermakna dengan kontrol negatif (p<0.05)

(#) : berbeda bermakna dengan kontrol positif (p<0.05)

(^) : berbeda bermakan dengan kelompok pembanding (p<0.05)

EEDK 75 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB

EEDK 150 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 150 mg/KgBB

EEDK 300 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 300 mg/KgBB

Hasil yang didapatkan pada hari ke-7 terjadi peningkatan berat badan pada kelompok positif.
Hasil uji LSD menunjukan adanya perbedaan yang signifikan dengan kelompok positif
ditunjukan oleh kelompok negatif dan ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB. Pada ekstrak
etanol daun kelor 150 dan 300 mg/KgBB tidak terdapat perbedaan dengan kelompok positif
namun ekstrak tersebut menunjukan penurunan berat badan dibandingkan dengan kelompok
positif namun tidak signifikan.

Pada T14 terjadi peningkatan berat badan lebih tinggi dari T7 pada kelompok positif.
Berdasrkan hasil uji LSD terdapat perbedaan yang signifikan pada kelompok positif
ditunjukan oleh kelompok negatif, pembanding, ekstrak etanol daun kelor 75 dan 150
 24

mg/KgBB hal ini menunjukan bahwa induksi yang dilakukan berhasil. Pada ekstrak etanol
daun kelor 300 mg/KgBB hewan uji mengalami penurunan berat badan dibandingkan dengan
kelompok positif namun tidak signifikan

Berdasarkan hasil uji LSD T21 terdapat perbedaan yang signifikan dengan kelompok positif
ditunjukan oleh kelompok negatif dan pembanding, pada T28 terdapat perbedaan yang
signifikan dengan kelompok positif ditunjukan oleh kelompok negatif. Jika dilihat pada Tabel
VI.3 kelompok ekstrak etanol daun kelor yang baik dalam menurunkan berat badan secara
berurutan yaitu kelompok ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB, 150 mg/KgBB, 300
mg/KgBB.

Penurunan bobot badan mencit diduga karena adanya kandungan senyawa bioaktif pada
ekstrak etanol daun kelor. Senyawa bioaktif pada ekstrak etanol daun kelor yang diduga
memberikan pengaruh menurunkan bobot badan adalah flavonoid (quersetin dan kaemferol),
tanin. Senyawa tanin memiliki dampak dapat mengendapkan protein yang ada di dalam
permukaan usus halus karena mudah berikatan dengan protein sehingga mengurangi
penyerapan makanan dengan demikian proses kegemukan dapat dihambat (Widyati. 2012).
Flavonoid dipercaya sebagai senyawa yang diduga mempunyai peranan antiobesitas dengan
mekanisme melalui penghambatan aktivitas enzim lipase yang menghidrolisis lemak menjadi
monogliserida dan asam lemak (Ruiz. et al. 2005).

V.7 Hasil Analisis Indeks Pakan

Pengamatan indeks pakan bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak uji terhadap nafsu
makan. Setiap harinya semua kelompok uji diberikan pakan 10 gram / mencit dan keesokan
harinya ditimbang sisa pakan tersebut. Hewan diberikan makanan tinggi lemak, karbohidrat
dan PTU pada semua kelompok uji. Kecuali pada kelompok normal diberikan pakan standar.

Hasil data pengujian dianalisis menggunakan SPSS One Way Anova yang didasarkan pada
uji homogenitas dengan nilai (p>0,05) dan untuk mengetahui perbedaan antar kelompok
menggunakan uji Post Hoc Test LSD. Hasil statistik menunjukkan nilai homogenitas pada
hari ke-7, 14, 21 dan 28 nilai (p>0,05) artinya data tersebut terdistribusi secara homogen dan
dapat dilanjutkan dengan pengujian One Way Anova dengan uji LSD.

Pada hari ke-7 sisa pakan belum tedapat perbedaan yang signifikan terhadap semua
kelompok, sedangkan pada hari ke-14 hasil uji LSD menunjukkan bahwa terdapat perbedaan
yang signifikan dengan kelompok positif ditunjukan oleh kelompok negatif. Juga terdapat
perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol positif dan kelompok pembanding
 25

ditunjukan oleh kelompok ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB dan 150 mg/KgBB yang
menujukan nilai sisa pakan yang lebih banyak. Sisa makanan lebih banyak maka jumlah
makanan yang dimakan lebih sedikit. Hal ini berarti bahwa ekstrak etanol daun kelor
menurunkan asupan makanan hewan uji sehingga berpengaruh terhadap bobot badannya
(Patonah dkk, 2017).

Pada hari ke-21 hasil uji LSD terdapat perbedaan yang signifikan dengan kelompok positif
ditunjukan oleh kelompok ekstrak etanol daun kelor 150 mg/KgBB lebih banyak jumlah sisa
pakannya. Juga terdapat perbedaan yang signifikan dengan kelompok positif, negatif dan
pembanding ditunjukan oleh kelompok ekstrak etanol daun kelor dosis 75 mg/KgBB dan 300
mg/KgBB. Hasil sisa pakan yang didapatkan jumlahnya lebih banyak ini menujukan jumlah
makanan yang dimakan sedikit sehingga berpengaruh terhadap bobot badannya (Patonah dkk,
2017).

Hasil uji LSD pada hari ke-28 terdapat perbedaan yang signifikan dengan kelompok positif
ditunjukan oleh kelompok negatif dan pembanding. Pada kelompok pembanding sisa pakan
lebih sedikit ini menujukan makanan yang dimakan lebih banyak. Kemudian terdapat
perbedaan yang signifikan antara kelompok negatif dan pembanding ditunjukan oleh ekstrak
etanol daun kelor 75 dan 150 mg/KgBB nilai sisa pakan kelompok ekstrak uji lebih banyak,
ini menunjkan ekstrak tersebut lebih mempengaruhi nafsu makan. Juga terdapat perbedaan
yang signifikan dengan kelompok negatif ditunjukan oleh kelompok ekstrak etanol daun
kelor 300 mg/KgBB. Jadi ekstrak yang lebih menurunkan nafsu makan yaitu ekstrak etanol
daun kelor 75 mg/KgBB sehingga mempengaruhi bobot badan.

Tabel V.4

Efek Ekstrak Etanol Daun Kelor Terhadap Jumlah Sisa Pakan

Rata-rata ± SD Indeks Pakan

Kelompok uji
T7 T14 T21 T28
Kelompok 14,90±7,10 20,11±6,87# 19,79±3,81 14,28±1,00#
negatif
 26

Kelompok 15,54±5,87 12,42±6,11 16,65±1,77 23,42±3,73

positif

Kelompok 15,06±3,59 14,90±2,17 18,31±3,16 15,80±3,51#

pembanding

EEDK 75 16,6±4,41 26,92±0,61#^ 34,31±1,97#*^ 29,79±5,91*^

mg/KgBB

EEDK 150 17,15±2,44 25,97±2,11#^ 22,79±3,51# 26,56±6,02*^

mg/KgBB

EEDK 300 12,60±2,32 13,40±1,77 29,93±1,89#*^ 22,31±1,71*

mg/KgBB
Ket :

(*) : berbeda bermakna dengan kontrol negatif (p<0.05)

(#) : berbeda bermakna dengan kontrol positif (p<0.05)

(^) : berbeda bermakan dengan kelompok pembanding (p<0.05)

EEDK 75 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB

EEDK 150 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 150 mg/KgBB

EEDK 300 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 300 mg/KgBB

V.8 Hasil Analisis Indeks Lee

Pengukuran indeks lee dilakukan untuk mengetahui tingkat obesitas hewan uji dengan syarat
>310. Pengukuran dilakukan setiap minggu menggunakan penggaris (cm) dari panjang
hidung sampai anus. Hasil pengukuran berat badan dan tinggi badan mencit dihitung dengan
rumus : 1/3 / panjang hidung-panjang anus*1000 (Arika dkk, 2019).
 27

Indeks Lee
340
330
Rentang indeks lee

320
310
300
290
280
K- k+ orlistat EEDK 75 EEDK 150 EEDK 300
mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB

Kelompok uji

Minggu 0 Minggu I Minggu II Minggu III Minggu IV

Gambar V.1 Hasil pengukran Indeks Lee

Dilihat dari gambar 5.1 merupakan hasil dari data yang sudah dimasukan kedalam rumus
indeks lee. Data menunjukan terjadi penurunan pada minggu terakhir ditunjukan oleh semua
kelompok kecuali kelompok pembanding (orlistat). Pada minggu ke-0 pada semua kelompok
hewan uji dalam keadaan normal karena nilai indeks lee tidak melebihi syarat yaitu >310 hal
ini karena hewan masih adaptasi belum dilakukan perlakuan, pada kelompok negatif terjadi
peningkatan dari minggu ke-1 sampai minggu ke-2 kemudian terjadi penurunan pada minggu
ke-3 sampai ke-4. Nilai indeks lee yang didapatkan pada minggu ke-4 yaitu 302 menunjukan
hewan dalam keadaan normal karena >310. Pada kelompok positif menunjukan hasil indeks
lee yang turun naik dan pada minggu ke-1 hewan sudah mengalami obesitas dengan nilai
indeks lee 329, termasuk minggu ke-2,3 dan 4 hewan mengalami obesitas dengan nilai indeks
lee berturut-turut yaitu 327, 330 dan 324 nilai tersebut melebihi syarat indeks lee yaitu >310
menujukan hewan dalam keadaan obesitas.

Pada kelompok pembanding hasil yang didapatkan naik turun dan pada minggu terakhir
mengalami peningkatan. Pada minggu ke-1,2 dan 3 nilai indeks lee mengalami penurunan
yaitu 312, 310, 308 pada minggu ke-2 dan 3 nilai indeks lee <310 menunjukan hewan tidak
obesitas. Sedangkan minggu ke-4 indeks lee yang didapatkan 316 nilai melebihi syarat >310
ini menunjukan hewan mengalami obesitas. Hal ini terjadi karena kesalahan saat praktek
yaitu larutan orlistat yang digunakan mengendap dan kurangnya pengocokan secara konstan
pada setiap hewan uji saat diinduksi. Akhirnya larutan obat kurang terdispersi secara
sempurna yang membuat efektivitas obat terhadap hewan uji berkurang.
 28

Pada kelompok ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB hasil yang didapatkan berturut-turut
dari minggu ke-0 sampai ke-4 yaitu 307, 308, 310, 316 dan 310. Hasil yang menunjukan
terdapat nilai indeks lee yang tidak memenuhi syarat >310 ditunjukan pada minggu ke-3
namun pada minggu ke-4 hewan mengalami penurunan kembali sehingga hewan tidak
dinyatakan obesitas. Pada kelompok ekstrak etanol daun kelor 150 mg/KgBB hasil yang
didapatkan berturut-turut dari minggu ke-0 sampai ke-4 yaitu 307, 315, 311, 317 dan 317.
Hasil menunjukan pada minggu ke-1 sampai ke-4 indeks lee yang didapat >310 yang
menandakan bahwa hewan mengalami obesitas. Pada kelompok ekstrak etanol daun kelor
300 mg/KgBB hasil yang didapatkan berturut-turut dari minggu ke-0 sampai ke-4 yaitu 297,
317, 313, 314 dan 312 ini menunjukan pada minggu ke-1 sampai ke-4 hewan mengalami
obesitas karena nilai indeks lee >310. Hal ini menunjukan bahwa ekstrak etanol daun kelor
dosis 150 dan 300 mg/KgBB tidak lebih baik dalam mencegah naiknya berat badan meskipun
rentang nilai tidak jauh dari syarat namun hasil akhir hewan mengalami obesitas. Maka
kelompok ekstrak uji yang paling efektif dari indeks lee ini yaitu ekstrak etanol daun kelor 75
mg/KgBB.

Berdasarkan hasil uji Anova mengunakan analisis LSD dengan nilai p<0,05 menyatakan
bahwa pada T0 tidak terdapat perbedaan yang signifikan, pada hasil diagram diatas
menyatakan bahwa pada T0 hewan uji masih adaptasi jadi hewan dalam keadaan normal.
Pada T7 terdapat perbedaan yang signifikan dengan kelompok positif ditunjukan oleh semua
kelompok kecuali kelompok ekstrak etanol daun kelor 300 mg/KgBB hal tersebut
menunjukan induksi mengalami peningkatan bobot badan yang signifikan. Terdapat
perbedaan yang bermakna pada kelompok negatif dengan kelompok positif pada T28 hasil
menunjukan nilai kelompok negatif lebih kecil hal ini menunjukan hewan dalam keadaan
normal. Sedangkan untuk ekstrak uji yang masih dalam rentang normal yaitu pada dosis 75
mg/KgBB terdapat perbedaan yang signifikan dengan kelompok positif pada T7 dan T28.
Tidak terdapat perbedaan pada kelompok ekstrak uji 150 dan 300 pada T14,T21 dan T28 bila
dilihat dari garfik hewan sudah mengalami obesitas. Ini menunjukan bahwa induksi pakan
tinggi lemak, karbohidart dan PTU yang diberikan bersamaan ekstrak etanol daun kelor 150
dan 300 mg/KgBB tidak mencegah terjadinya obesitas. Dosis yang efektif dalam mencegah
obesitas yaitu ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB.

Tabel V.5

Hasil analisis uji Anova pada Indeks Lee

 29

Kelompok Rata-rata ± SD Indeks Lee

uji T0 T7 T14 T21 T28

Kelompok
298,96±11,39 306,43±8,89# 311,60±2,03 308,13±10,41 308,41±5,19#
negatif

Kelompok 311,20±17,14 330,37±10,63 330,81±16,67 329,91±19,45 328,75±15,69

positif

Kelompok
302,23±3,72 312,70±1,41# 315,14±1,60 316,87±4,36 319,99±4,04
pembanding

EEDK 75
305,99±5,81 302,92±11,27# 305,69±5,50# 314,78±10,89 309,19±7,13#
mg/KgBB

EEDK 150
304,70±1,86 313,93±5,51# 313,80±15,17 320,85±11,20 316,13±6,29
mg/KgBB

EEDK 300
293.53±4,30 319,26±5,31 313,41±18,35 318,41±15,25 318,59±17,07
mg/KgBB

Ket :

(*) : berbeda bermakna dengan kontrol negatif (p<0.05)

(#) : berbeda bermakna dengan kontrol positif (p<0.05)

(^) : berbeda bermakan dengan kelompok pembanding (p<0.05)

EEDK 75 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB

EEDK 150 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 150 mg/KgBB

EEDK 300 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 300 mg/KgBB

V.9 Hasil Analisis Indeks Organ

Indeks organ dilakukan setelah hewan dikorbankan pada akhir pengujian. Indeks organ
didapatkan dengan cara membagi bobot organ dengan bobot badan hewan uji.

Tabel V.6

Hasil analisis uji Anova pada indeks organ

Rata-rata±SD Indeks Organ

Kelompok uji
Hati Ginjal Limpa Testikel
 30

Kelompok
1,60±0,28# 0,60±0,07 0,31±0,10 0,33±0,08#
negatif
Kelompok
2,03±0,07 0,65±0,06 0,41±0,08 0,49±0,12
positif
Kelompok
1,66±0,11# 0,54±0,12 0,29±0,05 0,27±0,10#
pembanding
EEDK 75
1,62±0,25# 0,48±0,14 0,34±0,05 0,18±0,01#
mg/KgBB
EEDK 150
1,71±0,27 0,52±0,09 0,39±0,51 0,28±0,03#
mg/KgBB
EEDK 300
1,56±0,36# 0,52±0,15 0,31±0,05 0,33±0,08#
mg/KgBB
Ket :

(*) : berbeda bermakna dengan kontrol negatif (p<0.05)

(#) : berbeda bermakna dengan kontrol positif (p<0.05)

(^) : berbeda bermakan dengan kelompok pembanding (p<0.05)

EEDK 75 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB

EEDK 150 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 150 mg/KgBB

EEDK 300 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 300 mg/KgBB

Dari hasil uji statistik menggunakan uji LSD, pada indeks organ hati terdapat perbedaan yang
signifikan dengan kontrol positif pada semua kelompok kecuali kelompok ekstrak etanol
daun kelor 150 mg/KgBB. Hal ini menunjukan bahwa ekstrak uji tidak mempengaruhi
peningkatan bobot organ hati.

Pada organ ginjal tidak terdapat perbedaan yang signifikan dari setiap kelompok, nilai yang
didapatkan hampir sebanding dengan kelompok positif ditunjukan oleh kelompok negatif. Ini
menunjukan bahwa induksi yang diberikan mempengaruhi peningkatan bobot organ ginjal
atau tidak menurunkan bobot organ ginjal. Pada organ limpa tidak terdapat perbedaan yang
signifikan dari setiap kelompok, nilai yang didapatkan hampir sebanding dengan kelompok
positif ditunjukan oleh kelompok uji ekstrak etanol daun kelor 150 mg/KgBB ini menunjukan
bahwa induksi yang diberikan mempengaruhi peningkatan bobot organ limpa. Pada indeks
organ testiskel terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok positif dengan semua
kelompok uji. Ini menunjukan bahwa tidak terdapat perbedaan dengan kelompok negatif
 31

yang menandakan organ dalam keadaan normal atau ekstrak uji tidak mempengaruhi
peningkatan bobot testikel.

V.10 Hasil Analisis Indeks Lemak

Pengujian Indeks lemak visceral dilakukan diakhir setelah hewan uji dikorbankan dan
dibedah, lemak visceral yang ditimbang yaitu lemak retroperitonial.

Tabel V.7

Analisis uji Anova pada indeks lemak

Rata-rata±SD Lemak
Kelompok uji
Retroperitonial
Kelompok negatif 0,23±0,01

Kelompok positif 0,46±0,10

Kelompok Pembanding
0,37±0,15

EEDK 75 mg/KgBB 0,21±0,12#

EEDK 150 mg/KgBB 0,47±0,09*

EEDK 300 mg/KgBB 0,53±0,18*

Ket :

(*) : berbeda bermakna dengan kontrol negatif (p<0.05)

(#) : berbeda bermakna dengan kontrol positif (p<0.05)

(^) : berbeda bermakan dengan kelompok pembanding (p<0.05)

EEDK 75 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 75 mg/KgBB

EEDK 150 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 150 mg/KgBB

EEDK 300 mg/KgBB : Ekstrak etanol daun kelor 300 mg/KgBB

Hasil yang didapat pada indeks lemak retroperitonial terdapat perbedaan yang signifikan
lebih rendah dari kontrol positif ditunjukan oleh kelompok ekstrak etanol daun kelor 75
 32

mg/KgBB, hal ini menunjukkan bahwa kelompok induksi memiliki distribusi lemak yang
lebih besar yang terakumulasi pada rongga perut. Juga terdapat perbedaan yang signifikan
lebih besar dengan kontrol negatif ditunjukan oleh kelompok ekstrak etanol daun kelor 150
mg/KgBB dan 300 mg/KgBB ini menunjukan semakin tinggi dosis ekstrak yang diberikan
tidak menahan distribusi lemak sehingga terjadi penggumpalan lemak yang menyebabkan
meningkatnya berat badan.

Hasil penelitian ini menunjukan ekstrak etanol daun kelor sebagai antiobesitas sejalan dengan
penelitian yang dilakukan oleh Nahar et al., 2016 bahwa ekstrak etanol daun kelor telah
memiliki aktivitas antiobesitas yang diinduksi makanan tinggi lemak. Daun kelor juga
mengandung antioksidan dan komponen bioaktif yang bersifat antidiabetik seperti zat
polifenol (Anwar et al. 2007). Juga dapat menurunkan tekanan darah dengan pemberian air
rebusan daun kelor (yati dkk., 2019). Hal tersebut merupakan faktor resiko yang dapat
menyebabkan obesitas.
 BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN

VI.1 Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun
kelor memiliki aktivitas antiobesitas. Dengan dosis 75 mg/KgBB sebagai dosis paling efektif
pada parameter berat badan, indeks pakan, indeks lee, indeks organ dan indeks lemak.

VI.2 Saran
Penelitian ini perlu dilakukan lebih lanjut dengan metode pengujian antiobesitas lain dan
perlu dilakukan penelitian mengenai kandungan senyawa aktif yang bertanggung jawab
dalam menurunkan bobot badan.

34
 DAFTAR PUSTAKA

A Dudi Krisnadi. (2015). Edisi revisi maret 2015. Kelor Super Nutrisi
Adela H and Frank B: The epidemiology of obesity- A big picture. Pharmacoeconomics
2015; 33(7): 673-89.
Anwar, F., Latif, S., Ashraf, M., & Gilani, A. H. (2007). Moringa oleifera L. L.: a food plant
with multiple medicinal uses. Phytotherapy Research: An International Journal
Devoted to Pharmacological and Toxicological Evaluation of Natural Product
Derivatives, 21(1), 17–25.
Arika, W. M. et al. (2019) ‘Anti-obesity effects of dichloromethane leaf extract of Gnidia
glauca in high fat diet-induced obese rats’. Heliyon. Elseveir Ltd, 5 (11).
BNF, 2007, British National Formulary 54th Edition, BMJ Publishing Group, London.
Chisholm-Marie,Marie A et al., 2016. Pharmacotherapy Principles & Practice, New York,
hal. 1523-1571.
Darusman LK, Rohaeti E, Sulistiyani. 2001. Kajian Senyawa Golongan Flavonoid Asal
Tanaman Bangle (Zingiber Cassumunar Roxb) Sebagai Senyawa Peluruh Lemak
Melalui Aktivitas Lipase. Bogor: Pusat studi biofarmaka lembaga penelitian. Institut
Pertanian Bogor.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2008. Farmakope Herbal Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Depkes RI. 1995. Farmakope Indonesia, Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Dhara, S., & Chatterjee, K. (2015). A study of VO2 max in relation with body mass index
(BMI) of physical education students. Res. J. Physical Education Sci, 3(6), 9–12.
Dipiro, J. T., Talbert, R. L., Yee, G. C., Matzke, G. R., Wells, B. G., & Posey, L. M. (2015).
Chapter e1: Health Literacy and Medication Use. 9 edition, 1–6513.
Djamil, R & Anelia, T 2009, ‘Penapisan Fitokimia, Uji BSLT, dan Uji Antioksidan Ekstrak
Metanol Beberapa Spesies Papilonaceae’, Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, vol. 7,
no. 2, pp. 65-71.
Fuglie L (2001). The Miracle tree: The Multiple Attributes of Moringa, Dakar.
Joko, S., Dwi, A. N., & Mustofa, S. (2014). Efek orlistat, ekstrak biji kopi hijau, dan
kombinasinya terhadap kadar adiponektin dan profil lipid. Fakultas Kedokteran dan
Ilmu kesehatan. Universitas Jendral Soedriman, Purwokerto. Jurnal Ners, 9(1), 26–34.
Nahar, S., Faisal, F., Iqbal, J., Rahman, M., & Yusuf, M. (2016). Antiobesity activity of
Moringa oleifera L. L. leaves against high fat diet-induced obesity in rats. International
Journal of Basic and Clinical Pharmacology, (January), 1263–1268.
Retnaningtyas, Y., Kristiningrum, N., Renggani, D. dan Narindra, P. (2015) : Karakterisasi
Simplisia dan Teh Herbal Daun Kopi Arabika (Coffea arabica). Prosiding Seminar
Nasional Current Challenger in Drug Use and Development, 50.

35
 35

Riskesdas. (2018). Hasil Utama Riskesdas Penyakit Tidak Menular 2018. Hasil Utama
Riskesdas Penyakit Tidak Menular, 8.
Rismawati. E., Mulyani. D. dan Febriani. D. (2015) : Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak
Etanol Daun Sirsak (Annona Muricata Lin), Prosiding Penelitian SpeSIA Unisba, 477-
478.
Rohit Gundamaraju, Sartaj Banu Mulaplli, Dr. Ramesh C. 2012 Evaluation of Anti-Obesity
Activity of Lantana camara Var Linn. by Progesterone Induced Obesity on Albino Mice.
International Journal of Pharmacognosy and Phytochemical Research. 4(4):213-218.
Ruiz C, Falcocchio S, Xoxi E, Villo L, Nicolosi G, Pastor FIJ, Diaz P, Saso L. 2005.
Inhibition of Candida rugosa lipase by saponin, flavonoids and alkaloids. J. Biosci.
Biotechnol. Biochem. 63 : 539-560.
Sashidhara, K. V, Rosaiah, J. N., Tyagi, E., Shukla, R., Raghubir, R., & Rajendran, S. M.
(2009). Rare dipeptide and urea derivatives from roots of Moringa oleifera L. L. as
potential anti-inflammatory and antinociceptive agents. European Journal of Medicinal
Chemistry, 44(1), 432–436.
Schienkiewitz, A., Mensink, G., Kuhnert, R., & Lange, C. (2017). Overweight and obesity
among adults in Germany.
Scott JP, Sale C, Greeves JP, Casey A, Dutton J, Fraser WD. Effect of exercise intensity on
the cytokine response to an acute bout of running. Med Sci Sports Exerc.
2011;43(12):2297-306.
Sitorus. H., Isnawati. A., Sulistyaningrum. N. dan Salim. M. (2016) : Karaketrisasi Simplisia
dan Ekstrak Kulit Buah Duku (Lansium domesticum Corr) dari Provinsi Sumatera
Selatan dan Jambi, Jurnal Kefarmasian Indonesia, Vol. 6 No. 2, 121.
Sukandar, E. Y., Kurniati, N. F., & Nurdianti, A. N. (2016). Antiobesity Effect Of Ethanol
Extract Of Andredera cordifolia (Ten) Steenis Leaves On Obese Male Wistar Rats
Induced By High-Carbohydrate Diet. Internasional Journal Of Pharmacy and
Pharmaceutical Sciences. ISSN, 975–1491.
Sunyer Deu, J., & NCD Risk Factor Collaboration. 2016. Trends in adult body-mass index in
200 countries from 1975 to 2014: a pooled analysis of 1698 population-based
measurement studies with 19· 2 million participants. Lancet, 387 (10026):1377-1396.
Widyati, Rina Mardiyah. 2012 “Pengaruh pemberian ekstrak daun jati Belanda terhadap berat
badan, berat testis, dan jumlah sperma mencit galur swiss webster”. Skripsi. Bandung:
Universitas Pendidikan Indonesia. Hal 56.
World Health Organization. 2018. The World Health Report
2018.Available.from:https://www.who.int/news-room/fact sheets/detail/obesity-and-
overweight.html. (Accessed 15 November 2019).
Yanti, E. (2019). Pengaruh pemberian rebusan daun kelor (moringa olifiera) terhadap tekanan
darah pada penderita hipertensi. Jik : Jurnal Ilmu Kesehatan, 3(1), 24–29.
Lampiran 1. Hasil Determinasi

37
Lampiran 2. Kode Etik Hewan

37
Lampiran 3. Proses Ekstraksi dan Pemekatan Ekstrak

Proses kegiatan Ekstraksi

Serbuk simplisia daun Proses maserasi

kelor 2 kg

proses rotary evaporator Hasil ekstrak etanol

kental daun kelor

Proses Pemekatan Ekstrak

Proses penguapan ekstrak etanol daun kelor sampai

mendapatkan bobot konstan

38
 Lampiran 4. Karakterisasi Simplisia Daun Kelor

Identifikasi Gambar Keterangan

Kadar Air - 0,9%
Kadar Abu
Total

10.65%

Kadar Sari
Larut Air

46, 5%

Kadar Sari
Larut Etanol

20%

39
 Lampiran 5. Skrinning Fitokimia Daun Kelor

Identifikasi
Golongan
Gambar Hasil
Senyawa

Alkaloid (+) Terdeteksi

Larutan
berwarna merah
bata

Flavonoid (+) Terdeteksi

Larutan
berwarna hijau
kekuningan

Tanin Tanin katekat

(+) Terdeteksi
a. Tanin
Larutan
Katekat berwarna hijau

b. Tanin Tanin gelatin

(+) Terdeteksi
Gelatin
Terdapat
endapan putih

Saponin (+) Terdeteksi

Terdapat busa
yang stabil

Kuinin (+) Terdeteksi

Larutan
berwarna
kemerahan

40
Lampiran 6. Pembuatan Induksi Pakan Tinggi Lemak, Karbohidrat, PTU dan preparasi
sediaan uji
Foto Keterangan
Bahan – bahan yang digunakan
untuk membuat pakan

Hasil pakan normal yang

dibuat seperti dadu

Hasil pakan induksi yang di

bentuk bulat – bulat
Hasil dari sediaan uji yang
akan digunakan secara peroral

41
 Lampiran 7. Pengujian Terhadap Hewan Uji

Perlakuan terhadap hewan uji

Pe P
rla e n
ku g u
an k u
r a
n

peroral terhadap mencit. menggunakan penggaris

dari hidung sampai anus
pada indeks lee.

Pe Ha
ng sil
or
ba
na
n

hewan uji untuk diambil dari organ yang didapat

organnya (hati, ginjal, juga terdapat indeks
testikel, limpa). lemak retroperitonial.

42
 Lampiran 8. Bagan alir Prosedur Ekstrak Etanol Daun Kelor

Pengumpulan
tanaman

Determinasi
daun kelor

Pencucian daun kelor

Pengeringan
di oven 1. Kadar air
2. Kadar sari
larut etanol
3. Kadar sari
Simpilis daun kelor
larut air
4. Kadar abu
total
Ekstraksi dgn maserasi 5. Susut
menggunakan pelarut etanol 96%
selama 3 x 24 jam 1. Alkaloid
2. Flavonoid
3. Saponin
Skrining 4. Steroid/Triter
fitokimia penoid
5. Kuinolon
6. Tanin
ekstrak etanol daun
kelor

43
 Lampiran 9. Bagan Alir Prosedur Pengujian
Uji in vivo

(Preventif)

Aklimatisasi hewan coba

Kel (-) Orlistat 10,8 EEDK 75 EEDK 150 EEDK 300

Kel (+)
Lar CMC mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB
0,5% dan dalam lar disuspensikan disuspensikan disuspensikan
Lar CMC
pakan suspensi Na- dgn Na-CMC dg Na-CMC dg Na-CMC
standar 0,5%
CMC 0,5% 0,5% 0,5% 0,5%

Pemberian pakan tinggi karbohidrat, lemak dan PTU

Pemberian induksi dilakukan secara bersamaan selama 30 hari

Parameter yang diamati

Indeks berat Bobot organ (hati, lemaknya (lemak

badan, makanan, ginjal, limpa dan retropritoneal, lemak
dan feses tekstikel) parietal dan lemak
epididimal)

Analisis dengan one way anova

44
Lampiran 10. Perhitungan dan Pembuatan Dosis Obat Dan Ektrak Etanol Daun Kelor

A. Orlistat

Dosis : 120 mg/KgBB

Dosis mencit : 0,312 mg/20 grBB

120 mg x 0,0026 g = 0,312 mg/20gBB

Volume pemberian = 0,26/20grBB

0,312mg
x 100 ml=0,26 ml
120 mg

Prosedur :

1. Timbang 1 kapsul orlistat,

2. Gerus 1 kapsul orlistat yang sudah ditimbang,

3. Larutkan dalam 100 mL Na CMC 0,5%.

B. Propiltiourasil 0,01 %

Diberikan propiltiourasil pada mencit melalui air minumnya dengan konsentrasi PTU 0,01%

Prosedur :

1. Timbang 1 tablet propiltiourasil

2. Gerus 1 tablet propiltiourasil yang sudah ditimbang,

3. Larutkan dalam 1 Litter aquadest

C. Ekstrak Etanol Daun kelor 75 mg/KgBB

45
Dosis : 75 mg/KgBB

Dosis mencit : 1,5 mg/20 grBB

Vol. Pemberian : 0,2 ml/20 grBB

1,5 mg/0,2 ml x 10 ml = 75 mg/10ml (penimbangan ekstrak utuk 3 hari dalam 10ml)

Prosedur :

1. Timbang 75 mg ekstrak kental,

2. Larutkan dengan 10 mL Na CMC 0,5%,

3. Ekstrak dapat digunakan selama 3 hari.

D. Ekstrak Etanol Daun kelor 150 mg/KgBB

Dosis : 150 mg/KgBB

Dosis mencit : 3 mg/20 grBB

Vol. Pemberian : 0,2 ml/20 grBB

3 mg/0,2 ml x 10 ml = 150 mg/10ml (penimbangan ekstrak utuk 3 hari dalam 10ml)

Prosedur :

1. Timbang 150 mg ekstrak kental,

2. Larutkan dengan 10 mL Na CMC 0,5%,

3. Ekstrak dapat digunakan selama 3 hari.

E. Ekstrak Etanol Daun kelor 300 mg/KgBB

Dosis : 300 mg/KgBB

46
Dosis mencit : 6 mg/20 grBB

Vol. Pemberian : 0,2 ml/20 grBB

6 mg/0,2 ml x 10 ml = 300 mg/10ml (penimbangan ekstrak utuk 3 hari dalam 10ml)

Prosedur :

1. Timbang 300 mg ekstrak kental,

2. Larutkan dengan 10 mL Na CMC 0,5%,

3. Ekstrak dapat digunakan selama 3 hari.

47