J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8

Tersedia secara online di www.sciencedirect.com

ScienceDirect

beranda jurnal: www.el sevier. com / cari / j ff

Ekstraksi, pemisahan dan identifikasi antosianin

dari produk sampingan anggur merah dan
aktivitas biologisnya

Evangelos D. Trikas Sebuah , b , Maria Melidou Sebuah , Rigini M. Papi Sebuah ,

George A. Zachariadis b , Dimitrios A. Kyriakidis Sebuah , *
Sebuah Laboratory of Biochemistry, Department of Chemistry, Aristoteles University of Thessaloniki, 54124

Thessaloniki, Yunani
b Laboratory of Analytical Chemistry, Department of Chemistry, Aristoteles University of Thessaloniki, 54124 Thessaloniki,

Yunani

ARTIKEL INFO ABSTRAK

Sejarah artikel: Produk sampingan dari pengolahan anggur merupakan masalah pembuangan utama industri anggur.
Diterima 1 Maret 2016 Namun, produk sampingan ini dapat digunakan sebagai sumber senyawa fenolik yang bertanggung jawab
Diterima dalam bentuk revisi 26 Juni atas efek menguntungkan dari anggur. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk memanfaatkan limbah
2016 tersebut, yaitu pomace anggur merah, dengan mengekstraksi produk alami bernilai tambah tinggi,
Diterima 29 Juni 2016 antosianin. Kandungan antosianin yang tepat dari ekstrak telah ditentukan; 21 antosianin diidentifikasi
Tersedia online menggunakan kromatografi cair ditambah dengan susunan fotodioda dan spektrometri massa
(HPLC-PDA-MS), dan antosianin dominannya [malvidin-3-O-glukosida, malvidin3- (6 ″ - asetilglukosida) dan

Kata kunci: malvidin-3- (6-Op-coumaroylglucoside)] diisolasi dan dikumpulkan dalam tiga fraksi berbeda yang

Pomace anggur mengandung senyawa yang diinginkan pada konsentrasi relatif di atas 80%. Aktivitas antioksidan,

Senyawa fenolik antibakteri, dan antiradang dari ekstrak, fraksi, dan senyawa standar dievaluasi sementara percobaan

Aktivitas antioksidan dilakukan untuk membandingkan hasil ini dengan varietas anggur (Syrah) dari mana produk sampingan

Aktivitas antibakteri tertentu diproduksi. Ekstrak produk sampingan dan anggur kental menunjukkan aktivitas antibakteri yang

Aktivitas antiradang tinggi terhadap bakteri yang diuji, serta aktivitas anti-inflamasi terhadap COX-1 dan COX-2. Lebih lanjut, hasil
aktivitas antioksidan menunjukkan adanya efek sinergis antar senyawa fenolik, sementara itu juga
diperkirakan bahwa 1 gram produk sampingnya sesuai dengan Trolox 6,79 mM,

© 2016 Diterbitkan oleh Elsevier Ltd.

Senyawa kimia: Malvidin-3-glukosida (PubChem CID: 443652); Malvidin-3- (6 ″ - asetilglukosida) (CID PubChem: 44256986); Malvidin3- (6-Op-coumaroylglucoside)
(PubChem CID: 101753350); Quercetin (PubChem CID: 5280343); Asam galat (PubChem CID: 370).
* Penulis yang sesuai. Laboratorium Biokimia, Departemen Kimia, Universitas Aristoteles Thessaloniki, Thessaloniki, Yunani.
Alamat email: kyr@chem.auth.gr (DA Kyriakidis).
Singkatan: ACN, asetonitril; Cn, sianidin; Dp, delphinidin; DPPH, 2,2-Difenil-1-pikrilhidrazil; HPLC, kromatografi cair kinerja tinggi; MS, spektrometri massa; Mv,
malvidin; PDA, larik fotodioda; Pn, peonidin; Pt, petunidin; TAC, total kandungan antosianin; TAE, setara antosianin total; TEAC, kapasitas antioksidan setara trolox;
Trolox, ( ±) - 6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchromane-2carboxylic acid

http://dx.doi.org/10.1016/j.jff.2016.06.033
1756-4646 / © 2016 Diterbitkan oleh Elsevier Ltd.
 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8
1. pengantar
Penggunaan limbah pengolahan untuk produksi produk baru sangat menarik ( Clemente,
aktivitas antibakteri bubuk anggur pomace dan ekstrak anggur pomace dari
Pardo, Medajon, Medajon, & Bernal, 2015; Rachana & Gupta, 2010 ). Contoh
karakteristik adalah pemanfaatan produk sampingan industri anggur yang
biasanya diperlakukan sebagai limbah, sehingga meningkatkan beban
pembuangan untuk kilang anggur. Residu yang dihasilkan dari proses
vinifikasi anggur merah ini dikenal sebagai pomace, yang tertinggal saat buah
diproses untuk jus, anggur, atau produk lainnya. Pomace terutama terdiri dari
kulit, sisa ampas, biji dan batang ( Clemente dkk., 2015; Mendes, Xavier,
Evtuguin, & Lopez, 2013; Ping, Pizzi, Ding Guo, & Brosse, 2011 ).
Diketahui bahwa konsumsi anggur merah dapat berdampak positif bagi
kesehatan manusia, terutama karena senyawa fenolik yang dikandungnya.
Namun, ada banyak penelitian ( Cotoras dkk., 2014; Kammerer, Claus, Carle, &
Schieber, 2004; Ramirez-Lopez & DeWitt, 2014; Rockenbach dkk., 2011a, 2011b )
melaporkan bahwa anggur pomace mengandung senyawa fenolik dalam
jumlah yang signifikan, karena persentase yang besar dari total fenol terletak
pada kulit anggur. Antosianin adalah kategori senyawa fenolik khusus yang
terdapat dalam anggur merah dan produk sampingan anggur merah ( Acevedo
De la Cruz dkk., 2012; Corrales, Garcia, Butz, & Tauscher, 2009; Revilla,
Perez-Magarino, Gonzalez-SanJose, & Beltran, 1999 ). Senyawa ini sangat
penting, tidak hanya karena memainkan peran penting dalam kualitas anggur,
tetapi juga karena fakta bahwa senyawa tersebut dapat memiliki efek
menguntungkan bagi kesehatan manusia ( Silvan, Reguero, & Pascual-Teresa,
2016; Yao, Xu, Zhang, & Lu, 2013 ).
Kehadiran radikal bebas ujian dalam tubuh manusia telah dikaitkan
dengan beberapa penyakit seperti Alzheimer dan Parkinson. Senyawa
antioksidan memiliki kemampuan untuk bereaksi dengan radikal ini dan
menetralkannya. Senyawa fenolik, yang terdapat dalam anggur dan produk
sampingan anggur, telah terbukti memiliki sifat antioksidan seperti itu ( Alonso,
Guillean, Barroso, Puertas, & Garcia, 2002; Llobera & Canellas, 2008; Weidner,
Powalka, Karamac, & Amarowicz, 2012; Weidner dkk., 2013 ), dan juga korelasi
positif antara aktivitas antioksidan dan total kandungan fenoliknya telah
diamati ( Alonso dkk., 2002 ). Selain itu, dua kelompok yang mempelajari
aktivitas antioksidan dan biologis dari fenolat bebas, teresterifikasi dan terikat
tidak larut menyimpulkan bahwa yang tidak larut lebih efektif daripada fenolat
bebas dan teresterifikasi lainnya ( Ayoub, Camargo, & Shahidi, 2016; Camargo,
Regitano-d'Arce, Biasoto, & Shahidi, 2014 ). Antosianin telah dipelajari secara
khusus untuk sifat antioksidannya ( Aguirre dkk., 2010; Duymus, Goger, &
Husnu Can Bas, 2014; Han et al., 2015; Kallithraka, Mohdaly, Makris, & Kefalas,
2005; Tedesco, Russo, Nazzaro, Russo, & Palumbo, 2001 Meskipun demikian,
hasilnya belum sepenuhnya meyakinkan mengenai potensinya, dan sejauh
mana mereka berkontribusi pada aktivitas antioksidan total anggur, meskipun
mereka telah dicirikan sebagai kontributor utama aktivitas antioksidan yang
ditunjukkan oleh sampel anggur, anggur, pomace dan teh ( Lingua, Fabani,
Wunderlin, & Baroni, 2016; Lu dkk., 2015 ).
Aktivitas antibakteri dari biji anggur dan ekstrak pomace anggur telah
dilaporkan di masa lalu dan hubungan langsung antara aktivitas ini dan
kandungan total senyawa fenolik telah dibuktikan ( Baydar, Ozkan, & Sagdic,
549
2004; Baydar, Sagdic, Ozkan, & Cetin, 2006; Sanhueza, Tello, Vivanco,
Mendoza, & Wilkens, 2014 ). Itu Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus adalah dua patogen yang digunakan untuk evaluasi
varietas anggur Turki ( Sagdic, Ozturk,
& Kisi, 2012 ), sementara Escherichia coli dan Serovar enterik salmonella
typhi digunakan oleh Junqueira-Goncalves dkk. (2015 ) untuk evaluasi aktivitas
masing-masing dalam ekstrak buah beri.
Aspek lain dari pemanfaatan produk sampingan anggur terkait dengan
potensi sifat anti-inflamasi. Penggunaan obat anti-inflamasi nonsteroid untuk
pengobatan peradangan dan nyeri sering disertai dengan efek samping
gastrointestinal dan ginjal yang merugikan, yang menyebabkan pertumbuhan
minat dalam pencarian nutraceuticals ( Seaver & Smith, 2004 ). Selama
pencarian ini, efek ekstrak fenolik kaya antosianin dari sayuran akar ungu
telah dipelajari untuk kemampuannya mencegah stres oksidatif dalam model
sistem epitel usus menggunakan sel Caco-2 ( Zhang, Liu, & Tsao, 2016 ),
sedangkan ekstrak dan fraksi anggur pomace PetitVerdot juga telah diuji
aktivitasnya pada migrasi neutrofil dan edema kaki, dengan hasil antiradang
yang positif ( Denny dkk., 2014 ). Selain itu, efek anggur merah dan putih,
ekstrak anggur serta senyawa fenolik yang biasa terjadi dalam anggur,
terhadap aktivitas siklooksigenase (COX) telah diuji ( Kutil dkk., 2014; Seaver &
Smith, 2004; Seeram, Zhang, & Nair, 2009; Waffo-Teguo dkk., 2001 ),
mengungkapkan mekanisme biokimia yang kuat di balik efek kesehatan
anggur. Lebih khusus lagi, isoenzim COX, COX-1 dan COX-2, terlibat dalam
pengendalian reaksi inflamasi dengan mengkatalisis konversi asam arakidonat
menjadi PGH2, prekursor PG ( Seeram dkk., 2009 ). Selain sebagai enzim
pro-inflamasi, siklogenesis juga mempengaruhi agregasi platelet,
vasokonstriksi dan vasodilatasi ( Kutil dkk., 2014 ), sementara ada informasi
yang muncul mengenai peran mereka dalam kanker ( Seeram dkk., 2009;
Waffo-Teguo dkk., 2001 ). Mengingat spektrum aktivitas COX yang luas, serta
kurangnya informasi sebelumnya mengenai efek produk sampingan anggur
terhadapnya, kami menguji ekstrak serta senyawa yang diisolasi, yang
bertujuan untuk menentukan kontribusi setiap senyawa terhadap efek
keseluruhan.
Penelitian ini dimaksudkan untuk mendapatkan ekstrak aktif, kaya
antosianin, dari produk sampingan anggur merah. Ekstrak ini kemudian
dianalisis kandungan antosianin, kuersetin, dan asam galatnya menggunakan
metode LC-MS yang dikembangkan ( Trikas, Papi, Kyriakidis, & Zachariadis,
2016 ). Pemisahan ekstrak dengan HPLC preparatif menghasilkan tiga fraksi
yang dianalisis kandungan fenoliknya. Fraksi ini, serta ekstrak awal, dievaluasi
aktivitas antioksidan, antibakteri dan antiradangnya. Eksperimen serupa
dilakukan untuk membandingkan aktivitas biologis dari komponen terisolasi
dari produk sampingan anggur dengan varietas anggur (Syrah) dari mana
produk sampingan tertentu diproduksi.
2. Bahan dan metode
2.1. Bahan
Semua reagen memiliki kualitas analitik dan air deionisasi digunakan untuk
persiapan semua larutan berair. Asetonitril (kelas LC / MS),
2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH), ( ±) - 6-
550 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8

hidroksi-2,5,7,8-tetramethylchromane-2-carboxylic acid (Trolox), Jerman) digunakan Pengumpulan berbagai fraksi dilakukan dengan
quercetin (C. 15 H 10 HAI 7, ≥ 95%) dan asam galat ((HO) 3 C 6 H 2 BERSAMA 2 H, ≥ 98%) pengumpul sampel otomatis menggunakan waktu sebagai parameter
dibeli dari Sigma-Aldrich (St. Luis, MO, USA). pengumpulan. Selanjutnya, ketiga fraksi dikondensasikan dalam rotary
Kuromanin klorida (cyanidin-3-O-glukosida, C. 21 H 21 HAI 11 Cl, ≥ 96%), myrtillin evaporator Heidolph Laborota 4000 untuk menghilangkan asam format 1%
chloride (delphinidin-3-O-glukosida, C. 21 H 21 HAI 12 Cl, ≥ 95%), sianidin klorida (C. 15 H yang ada dalam eluen dan akhirnya diencerkan dalam metanol.
11 HAI 6 Cl, ≥ 96%), delphinidin klorida (C. 15 H 11 HAI 7 Cl, ≥ 95%), malvidinchloride (C. 17 H
15 HAI 7 Cl, ≥ 97%), andoenin
klorida (malvidin-3-O-glukosida, C. 23 H 25 HAI 12 Cl, ≥ 97%) diperoleh dari
2.5. Metode
Extrasynthese (Lyon, Prancis). Metanol, hidroklorik
asam 37% (v / v), asam format dan air (kadar MS) disediakan oleh Chem-Lab
2.5.1. Evaluasi aktivitas antioksidan
(Zedelgem, Belgia), Reagen Carlo Erba (Italia), Panreac (Barcelona, Spanyol)
Semua fraksi dianalisis sesuai dengan metode yang dilaporkan oleh Brand-Williams,
dan Thermo Fischer Scienti fi c (Waltham, MA , AS), masing-masing.
Cuvelier, dan Berset (1995) . Hasilnya
dinyatakan sebagai setengah konsentrasi hambat maksimal (IC 50) dan
Varietas anggur Syrah dan produk sampingan yang dihasilkan setelah
kapasitas antioksidan setara asTrolox (TEAC). Untuk yang terakhir,
prosedur vinifikasi diperoleh dari kilang anggur "Ktima Gerovassiliou".
Larutan standar Trolox disiapkan di berbagai konsentrasi
trations dan IC-nya 50 nilai TEAC yang sesuai dihitung setelah mengidentifikasi
hubungan
2.2. Prosedur ekstraksi antara IC 50 dari sampel yang dipelajari dan Trolox. Semua penentuan
dilakukan dalam rangkap tiga.
Limbah padat disimpan di - 20 ° C hingga dua bulan. Sebelum analisis, limbah
padat dibekukan dan disimpan pada suhu 4 ° C atau di atas es. Perbandingan
antara jumlah limbah yang dikeringkan dengan pembekuan dan bubuk yang
2.5.2. Aktivitas antibakteri
Aktivitas antibakteri dari ekstrak diuji terhadap empat spesies berbeda - Escherichia
dihasilkan adalah 3 banding 1.
coli ( BL21 [DE3]), Staphylococcus
Lima puluh gram serbuk yang dihasilkan dicampur dengan 200 mL
aureus ( ATCC 6538), Bacillus subtilis ( ATCC 6633) dan Bacillus cereus
metanol dan pH diatur menjadi 4,0 dengan penambahan HCl. Campuran
(ATCC 11778) - menggunakan metode difusi cakram untuk uji kerentanan
diaduk semalaman pada suhu 4 ° C, disonikasi selama 3 menit, disentrifugasi
antimikroba ( Bauer, Kirby, Serris, & Turck, 1966 ). Disk telah diresapi dengan
pada 5000 rpm (G-force: 3214) selama 20 menit, dan disaring di bawah vakum
250 dan 500 µ g dari Total Antosianin Setara (TAE) dari ekstrak produk samping
menggunakan penyaring Whatman. Terakhir, ekstrak metanol dikondensasi
(M) atau anggur kental (W) dan zona diameter penghambatan dihitung.
menggunakan rotary evaporator. Ekstrak akhir (M) dipilih dan disimpan di - 20 °
Diameter zona penghambatan lengkap (seperti yang dinilai dengan mata
C hingga dua minggu. Perawatan awal anggur hanya mencakup kondensasi
telanjang) diukur, termasuk diameter cakram. Zona diukur hingga milimeter
dalam rotavapor.
penuh terdekat, menggunakan penggaris, yang dipegang di bagian belakang
lempeng petri terbalik. Cawan petri ditempatkan beberapa inci di atas latar
belakang hitam yang tidak memantulkan cahaya dan diterangi dengan cahaya
2.3. Identifikasi dan kuantifikasi antosianin dalam
yang dipantulkan. Zona diameter hambat pengencer (metanol) telah dikurangi
anggur pomace dan ekstrak anggur
di semua sampel sementara semua penentuan dilakukan dalam rangkap dua.
Aktivitas antibakteri dilaporkan sebagai peningkatan zona diameter hambat
Ekstrak metanol dan konsentrat anggur dianalisis kandungan antosianinnya
(mm) dibandingkan dengan zona diameter metanol saja.
menggunakan metode HPLC-PDA-MS. Sebuah Shimadzu LCMS-2010 EV,
menggunakan proses ionisasi elektrospray (ESI) dan penganalisis
quadrupolemass, dilengkapi dengan detektor SPDM20A PDA (Shimadzu
Corporation, Kyoto, Jepang), pada mode ionisasi positif, digunakan untuk
pemisahan kromatografi dan identifikasi senyawa, sedangkan kolom
kromatografi yang digunakan adalah Dionex, RP-C18, Acclaim 120, 150 × 4,6
mm × 5 µ m (Ilmu Pengetahuan Thermo Fisher). Program elusi gradien 2.5.3. Aktivitas antiradang
digunakan, menggunakan air / asam format (99: 1, v / v) dan asetonitril / asam Aktivitas anti-inflamasi ditentukan dengan mengevaluasi aktivitas
format (99: 1, v / v) sebagai pelarut elusi. Tingkat aliran 0,5 mL menit - 1 dengan penghambatan ekstrak dan senyawa yang diisolasi terhadap aktivitas COX-1
program elusi gradien 45 menit sebagai berikut: 0 menit, 10% B; 0–5 menit, dan COX-2 dengan menggunakan alat uji skrining inhibitor enzim
10–22% B; 5–14 menit, 22–28% B; 14–35 menit, 28–42% B; 35–40 menit, 42– immunoassay (EIA) COX (ovine) (Cayman, No. 560101) , Kimia Cayman, Ann
100% B; 40–45 menit, 100–10% B. Sebelum injeksi ke dalam sistem Arbor,
HPLCPDA-MS, sampel disaring melalui 0,45 µ m filter jarum suntik (BGB MI, USA) sesuai dengan instruksi dari pabriknya. Siklooksigenase
Analytik, Richmond, VA, USA). mengkatalisis langkah pertama dalam biosintesis asam arakidonat menjadi
PGH2. PGF2 α dihasilkan dari reduksi PGH2 dengan stannous chloride, dan
diukur dengan enzymes immunoassay (EIA). Enzim COX-1 atau COX-2 dengan
adanya heme ditambahkan ke ekstrak yang diperiksa dan diinkubasi selama
2.4. Isolasi tiga antosianin utama 10 menit pada suhu 37 ° C. Asam arakidonat ditambahkan ke dalam campuran
reaksi selama 2 menit pada suhu 37 ° C dan terakhir reaksi dihentikan dengan
Untuk mengisolasi tiga antosianin dominan dari ekstrak limbah padat dalam menambahkan 1 M HCl. Jumlah PG tracer yang mampu berikatan dengan PG
fraksi yang berbeda sistem Pompa HPLC Marathon III yang dilengkapi dengan antiserum berbanding terbalik dengan konsentrasi PG di dalam sumur sejak
ReproSil 100 C18, 250 × 10 mm × 7 µ m kolom persiapan (Dr. Maisch HPLC
GmbH, Ammerbuch,
 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8 551

konsentrasi pelacak PG dipertahankan konstan sedangkan konsentrasi PG
bervariasi. Kompleks antibodi-PG ini berikatan dengan antibodi monoklonal
anti kelinci tikus yang sebelumnya telah menempel pada sumur. Pelat dicuci
untuk menghilangkan reagen yang tidak terikat dan kemudian pereaksi
Ellman, yang mengandung substrat asetilkolin esterase, ditambahkan ke
setiap sumur. Produk dari reaksi enzimatik ini ditentukan secara
spektrofotometri (pembaca pelat titer mikro) pada 405 nm dan sebanding
dengan jumlah PG tracer yang terikat pada sumur, yang berbanding terbalik
dengan jumlah PG. Persen penghambatan dihitung dengan membandingkan
aktivitas COX-1 atau COX-2 dengan ada dan tidak adanya senyawa yang diuji.
Semua penentuan dilakukan dalam rangkap dua.
Senyawa nant pada kedua sampel adalah glukosida berbasis malvidin
(malvidin-3-glukosida, malvidin-3-asetilglukosida dan
malvidin-3-coumaroylglucoside). Hasil kami sesuai dengan yang dilaporkan
oleh Lingua dkk. (2016) , dimana Syrah memiliki kandungan antosianin tertinggi
dibandingkan varietas Merlot dan Cabernet Sauvignon. Selanjutnya ditentukan
juga konsentrasi kuersetin dan asam galat pada kedua sampel untuk
mempelajari kontribusinya dalam aktivitas biologis sampel. Meja 2 ).
3.2. Isolasi tiga antosianin utama

Seperti yang disajikan di Tabel 1 , tiga antosianin dominan dalam ekstrak

produk samping adalah malvidin-3-O-glukosida, malvidin-3- (6 ″ - acetylglucoside),
3. hasil dan Diskusi dan malvidin-3- (6-O-pcoumaroylglucoside) sekitar 88,8% dari total kandungan
antosianin. Oleh karena itu, tujuan kami adalah untuk mengisolasi senyawa ini
3.1. Identifikasi dan kuantifikasi antosianin dalam dalam fraksi yang berbeda dan mempelajari kemungkinan aktivitas
anggur pomace dan ekstrak anggur biologisnya.

Kedua sampel, yaitu ekstrak produk samping dan anggur kental, dianalisis
dengan sistem HPLC-PDA-MS dan total 23 antosianin diidentifikasi. Semuanya
hadir dalam anggur, sementara 21 di antaranya terdeteksi dalam ekstrak
produk sampingan ( Tabel 1 , Gambar 1 ). Antosianin yang terdeteksi
diklasifikasikan menjadi empat kelompok, glukosida sederhana, asetil
glukosida, glukosida cinnamoyl, dan piroantosianin, sedangkan
Pemisahan menghasilkan tiga fraksi yang dianalisis dalam sistem
HPLC-PDA-MS ( Gambar 2 ) dan kandungan fenoliknya diberikan Tabel 3 . Fraksi
1 (F1) terdiri dari 80,1% malvidin3-O-glukosida, fraksi 2 (F2) dari 81,6%
malvidin-3- (6 ″ -
asetilglukosida), sedangkan fraksi ketiga (F3) mengandung 87,6% malvidin-3-
(6-Op-coumaroylglucoside) dari total konsentrasi fenoliknya.

Tabel 1 - Senyawa antosianin diidentifikasi oleh HPLC-PDA-MS dalam ekstrak yang dianalisis.

Puncak no Identitas t r ( min) m/z Produk sampingan Kental

(M +) ekstrak (mg L - 1) anggur (mg L. - 1)

Glukosida sederhana
1 Delphinidin-3-O-glukosida 7.21 465 4.47 ± 0.22 22.34 ± 1.45
2 Cyanidin-3-O-glukosida 8.01 449 - 2.40 ± 0.20
3 Petunidin-3-O-glukosida 8.22 479 18.98 ± 1.21 78.43 ± 5.19
4 Peonidin-3-O-glukosida 9.03 463 18.31 ± 1.17 38.29 ± 2.71
5 Malvidin-3-O-glukosida 9.28 493 955.85 ± 59.25 920.41 ± 55.46
Asetil glukosida
6 Turunan Dp-gls-pyruvate 7.53 533 - 3.02 ± 0.27
7 Turunan Pt-gls-piruvat 8.63 547 1.98 ± 0.20 4.00 ± 0.31
8 Dp-3- (6 ″ - asetilglukosida) 9.69 507 9.79 ± 0,75 26.31 ± 2.02
9 Mv-3-gls-piruvat (Vitisin A) 9.80 561 28.82 ± 2.02 68.37 ± 4.55
10 Vitisin B (turunan Mv) Cn-3- (6 ″ - asetilglukosida) 10.17 517 30.05 ± 2.81 54.48 ± 4.13
11 10.47 491 29.24 ± 2.17 2.86 ± 0.24
12 Pt-3- (6 ″ - asetilglukosida) 10.98 521 72.13 ± 5.14 214.73 ± 14.29
13 Pn-3- (6 ″ - asetilglukosida) 12.44 505 32.64 ± 2.54 76.92 ± 5.11
14 Mv-3- (6 ″ - asetilglukosida) 12.57 535 1718.92 ± 105.61 1027.36 ± 65.34
Glukosida Cinnamoyl
15 Dp-3- (6 ″ - p-coumaroylglucoside) 12.89 611 5.12 ± 0.46 15.74 ± 1.22
16 Mv-3- (6 ″ - caffeoylglucoside) 14.01 655 69.47 ± 4.27 4.80 ± 0.36
17 Cn-3- (6 ″ - p-coumaroylglucoside) 14.67 595 3.99 ± 0.31 9.20 ± 0.74
18 Pt-3- (6 ″ - p-coumaroylglucoside) 14.91 625 29.95 ± 2.13 78.10 ± 5.17
19 Pn-3- (6 ″ - p-coumaroylglucoside) 17.04 609 41.46 ± 3.04 80.12 ± 5.35
20 Mv-3- (6-Op-coumaroylglucoside) 17.17 639 764.20 ± 51.36 623.92 ± 43.35
Pyroanthocyanin
21 Mv-3- (6 ″ - asetilglukosida) piruvat 10.61 603 26.52 ± 2.15 49.03 ± 3.21
22 Mv-3-glukosida-etil-katekin 11.17 809 11.48 ± 0.76 10.11 ± 1.02
23 Mv-3- (6 ″ - asetilglukosida) -4-vinilfenol 21.54 651 32.64 ± 2.36 76.92 ± 4.89
Total 3906.02 ± 249.93 3487,90 ± 226.58

HPLC, kromatografi cair kinerja tinggi; PDA, larik fotodioda; MS, spektrometri massa; Cn, sianidin; Pn, peonidin; Pt, petunidin; Mv, malvidin; Dp, delphinidin.
552 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8
Gambar. 1 - Profil kromatografi HPLC-PDA dari antosianin ditentukan dalam produk sampingan industri anggur. Angka puncak sesuai dengan Tabel 3 .
3.3. Evaluasi aktivitas antioksidan
Kapasitas pembersihan radikal sampel dievaluasi dan kapasitas
antioksidannya dinyatakan sebagai mmol L. - 1 dari Trolox setara ( Tabel 4 dan 5 )
menggunakan kurva kalibrasi Trolox (0–400 µ M).
Tiga komentar utama dapat dibuat dengan mengevaluasi hasil aktivitas
antioksidan. Yang pertama berkaitan dengan perbandingan aktivitas
antioksidan antara antosianin dan antosianin bebas gula. Baik antosianidin
(sianidin, delphinidin, dan malvidin) dan antosianin 3-O-terglikosilasi yang
setara menyajikan aktivitas yang relatif sebanding ( Tabel 4 ). Lebih khusus lagi,
pada tingkat kepercayaan 95%, perbedaan antara pasangan malvidin /
Mv-3O-glukosida tidak dianggap signifikan secara statistik (P> 0,05). Untuk dua
pasangan lainnya, sianidin / Cn-3-O-glukosida dan delphinidin /
Dp-3-O-glukosida, perbedaan dianggap signifikan secara statistik dengan P
<0,05. Dalam studi tentang
Kahkonen, Heinonen, dan Alvarez (2003 ), perkiraan nilai aktivitas antioksidan
antara pasangan sianidin / Cn-3-O-glukosida, delphinidin / Dp-3-O-glukosida,
dan malvidin / Mv-3-O-glukosida secara praktis sama.
Seperti yang ditunjukkan di Tabel 4 , pecahan 1, 2, dan 3 menghasilkan lebih tinggi
aktivitas antioksidan dari malvidin dan setara
Tabel 2 - TAC, quercetin, dan asam galat diukur dengan HPLC-PDA-MS dalam sampel yang dianalisis.
Ekstrak TAC (mg L - 1)
Ekstrak produk sampingan 3906.02 ± 249.93
Anggur kental 3487,90 ± 226.58
TAC, total kandungan antosianin; HPLC, kromatografi cair kinerja tinggi; PDA, larik fotodioda; MS, spektrometri massa.
aktivitas malvidin-3-O-glikosida. Hal ini mungkin disebabkan oleh efek sinergis
antara antosianin malvidin dan senyawa fenolik lain yang ada di setiap fraksi.
Efek sinergis di antara antosianin telah dilaporkan oleh
Sun, Huang, Cai, Cao, dan Han (2015 ), serta efek yang sama direproduksi oleh
katekin, malvidin-3-O-glukosida dan peonidin-3-O-glukosida ( Rossetto dkk.,
2002 ). Selanjutnya asam klorogenat, galat, protocatechuic dan vanillic ( Palafox-Carlos
dkk., 2012 ), serta resveratrol dengan senyawa fenolik lainnya ( Skroza, Mekinic,
Svilovic, Simat, & Katalinic, 2015 ), menunjukkan efek antioksidan sinergis.
Dalam penelitian kami, anggur kental juga dievaluasi untuk aktivitas
antioksidannya ( Tabel 5 ). Ditemukan bahwa satu mililiter anggur dan satu
gram limbah padat masing-masing sesuai dengan 0,12 mM dan 6,79 mM dari
Trolox, yang menunjukkan pentingnya biologis produk sampingan anggur dan
kebutuhan untuk kemungkinan pemanfaatan bioteknologi mereka.
Selain itu, perkiraan aktivitas antioksidan (+) katekin, kuersetin, dan asam
galat ditemukan menurun dalam urutan berikut: asam galat> quercetin> (+) -
katekin. Hasil ini sesuai dengan kesimpulan kelompok lain untuk aktivitas
antioksidan senyawa fenolik ( Kahkonen dkk., 2003; Luo, Basile, & Kennelly,
2002; Skroza dkk., 2015 ). Aktivitas antioksidan senyawa fenolik dengan satu
cincin aromatik,
Quercetin (mg L - 1) Asam galat (mg L. - 1)
382.93 ± 24.26 260.92 ± 17.17
93.14 ± 6.52 574.88 ± 38.62
 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8 553

Gambar. 2 - Analisis HPLC-PDA pada 520 nm ekstrak produk sampingan anggur dan fraksinya.
554 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8

gugus hidroksil dan pada posisi yang sama, tetapi yang terakhir tidak memiliki
Tabel 3 - Senyawa fenolik terdeteksi pada tiga fraksi yang
dikumpulkan dari ekstrak limbah padat. Sebuah cincin-C 2,3-ikatan rangkap dan fungsi 4-oxi. Perbedaan struktural tersebut
dianggap bertanggung jawab atas peningkatan aktivitas antioksidan quercetin
Senyawa Konsentrasi Relatif
dibandingkan dengan katekin ( Skroza dkk., 2015 ).
(mg L - 1) konsentrasi
dalam
Sampel (%)
3.4. Aktivitas antibakteri
Pecahan 1
Pn-3-O-glukosida 23.38 ± 1.73 2.83
Mv-3-O-glukosida 705.30 ± 49.15 80.10 Aktivitas antibakteri dipelajari E. coli, B. subtilis,
Pt-3- (6 ″ - asetilglukosida) 23.70 ± 1.72 2.96 B. cereus dan S. aureus yang menyebabkan beberapa infeksi pada manusia.
(+) - katekin 55.08 ± 3.81 7.67 Toksin yang dihasilkan oleh S. aureus diketahui menyebabkan keracunan
( -) - epikatekin 33.47 ± 2.13 4.83 makanan dan sebagai B. subtilis dan B. cereus adalah bakteri Gram-positif. E.
Pecahan 2
coli dipilih sebagai bakteri Gram negatif karena keberadaan lipopolisakarida
Mv-3-O-glukosida 17.83 ± 1.24 1.79
pada membran luarnya berfungsi sebagai penahan yang memperlambat
Pn-3- (6 ″ - asetilglukosida) 41.10 ± 3.03 4.14
penetrasi antimikroba. Hal ini dikaitkan dengan porins hidrofilik yang
Mv-3- (6 ″ - asetilglukosida) 810.80 ± 54.85 81.60
Quercetin-3-glukuronida 59.21 ± 4.12 6.01 mengecualikan masuknya senyawa hidrofobik, sedangkan kurangnya
Hiperosida 55.76 ± 3.75 5.65 fosfogliserida dari membran luar tidak termasuk saluran efektif untuk difusi
Pecahan 3 hidrofobik.
Mv-3- (6 ″ - asetilglukosida) 10.09 ± 0.81 3.72
Pn-3- (6 ″ - p- 23.56 ± 1.85 8.69
Ekstrak produk sampingan dan anggur kental menunjukkan aktivitas
coumaroylglucoside)
antibakteri yang bergantung pada dosis E. coli, S. aureus,
Mv-3- (6-O- 237.40 ± 16.68 87.50
p-coumaroylglucoside)
B. cereus dan B. subtilis ( Tabel 6 ). Ekstrak produk sampingan paling efektif

Sebuah Konstituen kecil <0,5%.

melawan E. coli dan S. aureus, mengarah ke 9,78 ± 0,71 mm dan 9,08 ± 0,42
mm peningkatan dari zona diameter hambat masing-masing, dibandingkan
Pn, peonidin; Pt, petunidin; Mv, malvidin.
dengan efek yang lebih kecil terhadapnya B. cereus
(7.00 ± 1,45 mm). Efek yang sama diperoleh dengan anggur kental, yang
seperti asam galat, berkorelasi positif dengan jumlah gugus hidroksil. Dalam
memberikan efek yang lebih tinggi terhadap E. coli dan
kasus senyawa dengan struktur yang lebih kompleks, terdapat juga batasan
S. aureus, mengarah ke 9,89 ± 1,42 dan 10,13 ± Peningkatan 0,35 mm dari
sterik yang mempengaruhi aktivitasnya. Quercetin dan katekin memiliki
zona diameter hambat, masing-masing ( Tabel 6 ). Pada tingkat kepercayaan
jumlah yang sama
95%, perbedaan pada kedua kasus dianggap signifikan secara statistik.
Aktivitas antibakteri yang diamati dari ekstrak produk sampingan sesuai
dengan hasil yang dipublikasikan sebelumnya ( Baydar dkk., 2004, 2006;
Tabel 4 - IC 50 dan nilai TEAC senyawa dan fraksi standar.
Sanhueza dkk., 2014 ). Sagdic dkk. (2012 ) melaporkan itu S. aureus lebih
sensitif daripada E. coli ketika ekstrak anggur pomace digunakan. Terlepas
Senyawa / Ekstrak IC 50 nilai TEAC dari kenyataan bahwa kedua ekstrak tersebut efektif melawan bakteri,
Delphinidin 56.52 µ M 4.68 perbedaan dalam potensinya dapat dikaitkan dengan kandungan yang
Dp-3-O-glukosida 71.04 µΜ 3.72 berbeda dalam fenolat spesifik seperti quercetin dan asam galat, yang dikenal
Sianidin 24.13 µΜ 10.97 karena aktivitas antibakterinya ( Akiyama, Fujii, Yamasaki, Oono, & Iwatsuki,
Cn-3-O-glukosida 33.95 µΜ 7.80
2001; Hirai dkk., 2010 ). Menurut percobaan kami ( Meja 2 ) dalam 500 µ g ΤΑ Ekstrak
Malvidin 14.07 µΜ 18.82
hasil samping C kandungan kuersetin dan asam galat adalah 50 dan 34 µ g,
Mv-3-O-glukosida 16.23 µΜ 16.32
(+) - Catechin 140,70 µΜ 1.88
masing-masing. Quercetin dan asam galat pada jumlah yang disebutkan di

Quercetin 117.10 µΜ 2.26 atas efektif melawan E. coli ( 3.81 ± 0,57 dan 1,39 ± 0,15 mm, masing-masing)
Asam galat 55.81 µΜ 4.75 dan S. aureus ( 2.5 ± 0,79 dan
Pecahan 1 5.55 µΜ Sebuah 47.35
Pecahan 2 9.16 µΜ Sebuah 28.69
Pecahan 3 8.44 µΜ Sebuah 31.14
2.33 ± 0,61 mm, masing-masing), tetapi tidak efektif melawan B. cereus dan B.
Sebuah µΜ dihitung berdasarkan konsentrasi antosianin dominan dari fraksinya.
subtilis ( Gambar 3 Ketika quercetin dan asam galat digabungkan, mereka
menunjukkan aktivitas yang lebih tinggi melawan E. coli ( 5.76 versus 9.78
Cn, sianidin; Mv, malvidin; Dp, delphinidin; TEAC, kapasitas antioksidan setara trolox.
peningkatan zona diameter penghambatan) atau melawan
S. aureus ( 5.4 versus 9.33 peningkatan zona diameter hambat).

Tabel 5 - IC 50 dan nilai TEAC dari ekstrak. 3.5. Aktivitas antiradang

Senyawa / Ekstrak IC 50 nilai TEAC

Ekstrak produk sampingan dan anggur kental sepenuhnya menghambat
Anggur kental 724 ng mL - 1 0,12 mMmL - 1 Sebuah
aktivitas COX-1 dan COX-2 pada konsentrasi 100 µΜ dari TAC ( Gambar. 4 dan 5 ).
Ekstrak produk sampingan 372 ng mL - 1 6,79 mM g - 1 b
Lebih khusus lagi, anggur kental mengurangi aktivitas COX-1 sebesar 98,9%
Sebuah mM Trolox per mL anggur.
dan aktivitas COX-2 sebesar 83,5%, menempati peringkat teratas dari hasil
b mM Trolox per gram limbah padat. TEAC, kapasitas
yang dipublikasikan sebelumnya untuk 26 anggur merah berbeda dengan nilai
antioksidan setara trolox.
penghambatan yang dilaporkan dari 12,1 menjadi 94,3% ( Kutil
 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8 555

Tabel 6 - Efek antibakteri yang bergantung pada dosis dari ekstrak produk sampingan dan anggur kental terhadap E. coli, S. aureus, B. cereus
dan B. subtilis. Sebuah

Peningkatan zona diameter hambat (mm) Anggur

kental Ekstrak produk sampingan

Bakteri 250 µ g TAC 500 µ g TAC 250 µ g TAC 500 µ g TAC

Gram-negatif
E. coli 4.77 ± 0,54 9.89 ± 1.42 5.01 ± 0,54 9.78 ± 0.71
Gram-positif
S. aureus 5.08 ± 0.71 10.13 ± 0.35 4.08 ± 0.71 9.08 ± 0.42
B. cereus 5.67 ± 0.84 7.80 ± 0.88 5.42 ± 0.35 7.00 ± 1.45
B. subtilis 4.71 ± 0.18 7.71 ± 0.88 5.08 ± 0.71 8.43 ± 2.00

Sebuah Dalam semua sampel, zona diameter hambat vektor (metanol) telah dikurangi.

dkk., 2014 ). Berkenaan dengan ekstrak produk samping, itu mengurangi
aktivitas COX-1 sebesar 99% dan aktivitas COX-2 sebesar 89,1% pada
konsentrasi yang sama dengan anggur merah (100 µ M dari TAC). Terlepas dari
kenyataan bahwa konsentrasi yang sama digunakan, ekstrak produk
sampingan menunjukkan aktivitas yang sedikit lebih baik, mungkin karena
karakteristik kualitatifnya.
Quercetin dan asam galat (diuji pada konsentrasinya dalam ekstrak
produk sampingan, 15 µΜ dan 18 µΜ, masing-masing) tidak menunjukkan
efek yang signifikan terhadap aktivitas siklooksigenase. Hasil yang sama
dilaporkan oleh Kutil dkk. (2014) . Namun, peran antiinflamasi, dengan
menurunkan kadar protein COX-2 dengan dosis
cara bergantung quercetin, telah dilaporkan oleh
Garcia-Mediavilla dkk. (2007) . Seperti yang ditunjukkan di Gambar 5 , pecahan 1
(23 µΜ malvidin-3-O-glukosida) sedikit menghambat aktivitas COX-2 (12,79%),
sedangkan fraksi 2 (38 µΜ
malvidin-3-6 ″ - asetilglukosida) dan fraksi 3 (14 µΜ malvidin3-
(6-Op-coumaroylglucoside)) tidak memiliki efek apa pun. Hasil serupa
diperoleh dengan tiga fraksi saat diuji terhadap COX-1. Namun, ketika ketiga
fraksi ini digabungkan, peningkatan efek penghambatan terhadap COX-2
ditunjukkan (28,58%), karena efek sinergis dari senyawa ini. Telah dilaporkan
bahwa malvidin menghambat COX-1 dan COX-2 ac-

Fig.3 - Efek antibakteri dari ekstrak produk sampingan (500 µ g ΤΑ C) dan asam galat pastinya (34 µ g) dan quercetin (50 µ g) konsentrasi, secara terpisah
atau digabungkan E. coli ( SEBUAH), S. aureus ( B), B. cereus ( C) dan B. subtilis ( D). Dalam semua sampel, zona diameter hambat vektor (metanol) telah
dikurangi. Semua nilai adalah rata-rata dari dua eksperimen yang dilakukan dalam duplikat.
556 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8

Gambar 4 - Efek anti-COX-1 dari ekstrak, quercetin dan asam galat. Anggur kental (W) dan ekstrak produk samping ( Μ) berada pada konsentrasi 100 µΜ dari
TAC. Senyawa fenolik berada pada konsentrasi yang tepat seperti yang dikandungnya di 100 µΜ dari TAC, artinya 15 µΜ quercetin dan 18 µΜ asam galat.

tivity sekitar 50% ( Seeram dkk., 2009 ), tetapi para penulis ini telah melakukan
eksperimen mereka pada konsentrasi yang lebih tinggi (40 mM).
4. Kesimpulan
Dalam penelitian ini limbah padat proses peremajaan anggur merah
digunakan sebagai bahan baku. Ekstrak yang diperoleh dan fraksi yang
dikumpulkan, bersama dengan senyawa standar, dievaluasi aktivitas
antioksidan, antibakteri, dan antiinflamasinya. Mengenai aktivitas antioksidan,
tidak ada perbedaan penting antara antosianidin dan antosianin glikosilasi 3-O
yang sesuai. Lebih lanjut, diindikasikan bahwa terjadi interaksi sinergis antara
senyawa fenolik yang terdapat dalam fraksi, dan aktivitas antioksidan dari 1
gram produk samping menghasilkan a
jumlah Trolox yang lebih tinggi secara signifikan dibandingkan dengan 1
mililiter anggur. Mengenai tindakan biologisnya, ekstrak produk sampingan
dan anggur kental menunjukkan aktivitas antibakteri yang tinggi terhadap
empat bakteri yang diuji. 60% aktivitas antibakteri melawan E. coli dan S.
aureus disebabkan oleh kandungan quercetin dan asam galat. Ekstrak produk
sampingan dan anggur kental telah menunjukkan penghambatan yang
hampir sempurna terhadap enzim COX-1 dan COX-2. Hasil penelitian kami
menunjukkan aktivitas biologis yang signifikan dari produk sampingan anggur
terhadap pemanfaatan komersialnya di berbagai bidang, dalam industri
makanan dan farmasi.
Konflik kepentingan

Penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Gambar 5 - Efek anti-COX-2 dari ekstrak, fraksi, secara terpisah atau digabungkan, dan quercetin dan asam galat. Anggur kental (W) dan ekstrak produk
samping ( Μ) berada pada konsentrasi 100 µΜ sama dengan sianida-O-glukosida. Fraksi dan senyawa fenolik berada pada konsentrasi yang tepat seperti
yang dikandungnya di 100 µΜ sama dengan cyaniding-O-glukosida M, artinya 23 µΜ malvidin-3-O-glukosida (F1), 38 µΜ malvidin-3-6 ″ - asetilglukosida
(F2), 14 µΜ malvidin-3- (6-Op-coumaroylglucoside) (F3), 15 µΜ quercetin dan 18 µΜ asam galat.
 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8
Pengakuan
Pekerjaan ini didukung oleh aksi “11SYN_2_1992” “KERJASAMA 2011”
EYDE-ETAK yang didanai oleh Program Operasional “Daya Saing dan
Kewirausahaan” (EPAN-II).
REFERENSI
Acevedo De la Cruz, A., Hilbert, G., Riviere, C., Mengin, V., Ollat,
N., Bordenave, L., Decroocq, S., Delaunay, JC, Delrot, S., Merillon, JM,
Monti, JP, Gomes, E., & Richard, T. (2012). Identifikasi dan komposisi
antosianin liar Vitis spp. aksesi dengan menggunakan LC-MS dan LC-NMR. Analytica Shimada, KI, & Fukushima, M. (2015). Karakterisasi antosianin dan
Chimica Acta, 732, 145–152.
Aguirre, M., Chen, Y., Isaacs, M., Matsuhiro, B., Mendoza, L., &
Torres, S. (2010). Perilaku elektrokimia dan kapasitas antioksidan
antosianin dari anggur merah Chili, anggur dan raspberry. Kimia
Pangan, 121, 44–48.
Akiyama, H., Fujii, K., Yamasaki, O., Oono, T., & Iwatsuki, K.
(2001). Tindakan antibakteri terhadap beberapa tanin
Staphylococcus aureus. Jurnal Kemoterapi Antimikroba,
48, 487–491.
Alonso, A., Guillean, D., Barroso, C., Puertas, B., & Garcia, A.
(2002). Penentuan aktivitas antioksidan produk sampingan anggur
dan korelasinya dengan kandungan polifenol.
Jurnal Kimia Pertanian dan Pangan, 50, 5832–5836. Ayoub, M., Camargo,
AC, & Shahidi, F. (2016). Antioksidan dan
bioaktivitas dari fenolat bebas, teresterifikasi dan tidak larut dari
makanan biji berry. Kimia Pangan, 197 ( Bagian A), 221–232.
Bauer, AW, Kirby, WMM, Serris, JC, & Turck, M. (1966).
Pengujian kerentanan antibiotik dengan metode cakram tunggal
standar. American Journal of Clinical Pathology,
45, 493–496.
Baydar, NG, Ozkan, G., & Sagdic, O. (2004). Total fenolik
isi dan aktivitas antibakteri anggur ( Vitis vinifera L.) ekstrak. Kontrol
Makanan, 15, 335–339.
Baydar, NG, Sagdic, O., Ozkan, G., & Cetin, S. (2006).
Penentuan efek antibakteri dan total kandungan fenolik anggur ( Vitis
vinifera L.) ekstrak biji. Jurnal Internasional Ilmu dan Teknologi Pangan,
41, 799–804.
Merek-Williams, W., Cuvelier, ME, & Berset, C. (1995). Penggunaan a
metode radikal bebas untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan. Ilmu
dan Teknologi Pangan LWT, 28, 25–30.
Camargo, AC, Regitano-d'Arce, MAB, Biasoto, ACT, &
Shahidi, F. (2014). Fenolat berat molekul rendah dari jus anggur dan
produk sampingan pembuatan anggur: Aktivitas antioksidan dan
penghambatan oksidasi kolesterol lipoprotein densitas rendah manusia
dan kerusakan untai DNA. Jurnal Kimia Pertanian dan Pangan, 62, 12159–12171.
Clemente, R., Pardo, T., Medajon, P., Medajon, E., & Bernal, P.
(2015). Produk sampingan makanan sebagai amandemen dalam elemen
jejak tanah yang terkontaminasi. Food Research International, 73, 175–189.
Corrales, M., Garcia, A., Butz, P., & Tauscher, B. (2009). Ekstraksi
antosianin dari kulit anggur dibantu oleh tekanan hidrostatik tinggi. Jurnal
Teknik Pangan, 90, 415–421. Cotoras, M., Vivanco, H., Melo, R., Aguirre, M.,
Silva, E., &
Mendoza, L. (2014). Evaluasi in vitro dan in vivo aktivitas antioksidan dan
prooksidan senyawa fenolik yang diperoleh dari anggur ( Vitis vinifera) pomace. Kimia Pertanian dan Pangan, 50, 1379–1382. Mendes, J., Xavier, A., Evtuguin,
Molekul: Jurnal Kimia Sintetis dan Kimia Produk Alami, 19, 21154–
21167. [sumber daya elektronik].
Denny, C., Lazarini, JG, Franchin, M., Melo, PS, Pereira, GE,
Massarioli, AP, Moreno, IAM, Paschoal, JAR, Alencar, S.
557
M., & Rosalen, PL (2014). Bioprospeksi pomace anggur Petit Verdot
sebagai sumber senyawa antiradang. Jurnal Makanan Fungsional, 8, 292–300.
Duymus, H., Goger, F., & Husnu Can Bas, K. (2014). In vitro
sifat antioksidan dan komposisi antosianin dari ekstrak elderberry. Kimia
Pangan, 155, 112–119. Garcia-Mediavilla, V., Crespo, I., Collado, PS,
Esteller, A.,
Sanchez-Campos, S., Tunon, MJ, & Gonzalez-Gallego, J. (2007).
Anti-inflamasi flavon quercetin dan kaempferol menyebabkan
penghambatan sintase oksida nitrat yang diinduksi, siklooksigenase-2
dan C-protein reaktif, dan penurunan regulasi jalur faktor nuklir
kappaB dalam sel hati Chang. Jurnal Farmakologi Eropa, 557, 221–
229.
Han, KH, Kitano-Okada, T., Seo, JM, Kim, SJ, Sasaki, K.,
proantosianidin ekstrak kacang adzuki dan aktivitas antioksidannya. Jurnal
Makanan Fungsional, 14,
692–701.
Hirai, I., Okuno, M., Katsuma, R., Arita, N., Tachibana, M., &
Yamamoto, Y. (2010). Karakterisasi anti- Staphylococcus aureus aktivitas
quercetin. Jurnal Internasional Ilmu dan Teknologi Pangan, 45, 1250–1254.
Junqueira-Goncalves, MP, Yanez, L., Morales, K., Navarro, M.,
Contreras, RA, & Zuniga, GE (2015). Isolasi dan karakterisasi senyawa
fenolik dan antosianin dari murta ( Ugni molinae Turcz.) Buah. Penilaian
aktivitas antioksidan dan antibakteri. Molekul: Jurnal Kimia Sintetis dan
Kimia Produk Alami, 20, 5698–
5713. [sumber daya elektronik].
Kahkonen, M., Heinonen, M., & Alvarez, P. (2003). Antioksidan
aktivitas antosianin dan aglikonnya. Jurnal Kimia Pertanian dan
Pangan, 51, 628–633.
Kallithraka, S., Mohdaly, A., Makris, B., & Kefalas, P. (2005).
Penentuan pigmen antosianin utama dalam varietas anggur asli Hellenic ( Vitis
vinifera sp.): Asosiasi dengan aktivitas antiradikal. Jurnal Komposisi dan
Analisis Pangan, 18,
375–386.
Kammerer, D., Claus, A., Carle, R., & Schieber, A. (2004).
Skrining polifenol pomace dari varietas anggur merah dan putih ( Vitis
vinifera L.) oleh HPLC-DAD-MS / MS. Jurnal Kimia Pertanian dan
Pangan, 52, 4360–4367.
Kutil, Z., Temml, V., Maghradze, D., Pribylova, M., Dvorakova, M.,
Schuster, D., Vanek, T., & Landa, P. (2014). Dampak anggur dan konstituen
anggur pada aktivitas katalitik siklooksigenase-1, siklooksigenase-2, dan
5-lipoksigenase. Mediator Peradangan, 2014, 178931.
Lingua, M., Fabani, M., Wunderlin, D., & Baroni, M. (2016). In vivo
aktivitas antioksidan anggur, pomace, dan anggur dari tiga varietas
merah yang ditanam di Argentina: Hubungannya dengan profil fenolik. Jurnal
Makanan Fungsional, 20, 332–345.
Llobera, A., & Canellas, J. (2008). Aktivitas antioksidan dan diet
serat anggur putih Prensal Blanc ( Vitis vinifera) produk sampingan.
Jurnal Internasional Ilmu dan Teknologi Pangan, 43, 1953–
1959.
Lu, HP, Dai, WD, Tan, JF, Guo, L., Zhu, Y., & Lin, Z. (2015).
Identifikasi antosianin dari kultivar teh berwarna daun ungu Zijuan ( Camellia
sinensis var. assamica)
dan karakterisasi aktivitas antioksidannya. Jurnal Makanan Fungsional,
17, 449–458.
Luo, XD, Basile, M., & Kennelly, E. (2002). Polifenolik
antioksidan dari buah Chrysophyllum cainito L. (apel bintang). Jurnal
D., & Lopez, L. (2013). Terintegrasi
pemanfaatan kulit anggur dari pomace anggur putih.
Tanaman dan Produk Industri, 49, 286–291.
Palafox-Carlos, H., Gil-Chávez, J., Sotelo-Mundo, RR, Namiesnik,
J., Gorinstein, S., & González-Aguilar, GA (2012). Antioksidan
558 J ou rna lof Func ti ona l F ood s 2 5 (2 0 1 6) 5 4 8 - 5 5 8
interaksi antara senyawa fenolik utama yang ditemukan di pulp mangga
'Ataulfo': Asam klorogenik, galat, protokatekuat dan vanilik. Molekul:
Jurnal Kimia Sintetis dan Kimia Produk Alami, 17, 12657–12664. [sumber
daya elektronik].
Ping, L., Pizzi, A., Ding Guo, Z., & Brosse, N. (2011). Kental
Ekstraksi tanin dari anggur pomace: Karakterisasi dan pemanfaatan
sebagai perekat kayu untuk papan partikel kayu.
Tanaman dan Produk Industri, 34, 907–914.
Rachana, S., & Gupta, DK (2010). Pemanfaatan pomace dari
industri pengolahan apel: Review. Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan,
47 ( 4), 365–371.
Ramirez-Lopez, L., & DeWitt, C. (2014). Analisis fenolik
senyawa dalam pomace anggur kering komersial dengan kinerja tinggi
spektrometri massa ionisasi elektrospray kromatografi cair. Ilmu Pangan
& Gizi, 2, 470–
477.
Revilla, I., Perez-Magarino, P., Gonzalez-SanJose, ML, & Beltran,
S. (1999). Identifikasi turunan antosianin dalam ekstrak kulit anggur
dan anggur merah dengan kromatografi cair dengan larik dioda dan
deteksi spektrometri massa. Jurnal Kromatografi. A, 847, 83–90.
Rockenbach, I., Gonzaga, VL, Rizelio, V., Goncalves, EA,
Genovese, M., & Fett, R. (2011a). Senyawa fenolik dan aktivitas
antioksidan dari biji dan ekstrak kulit anggur merah ( Vitis vinifera dan Vitis
labrusca) pomace dari pembuatan anggur Brasil. Food Research
International, 44, 897–901. Rockenbach, I., Rodrigues, E., Gonzaga, L.,
Caliari, V., Genovese,
M., Goncalves, EA, & Fett, R. (2011b). Kandungan senyawa fenol dan
aktivitas antioksidan dalam pomace dari buah anggur merah pilihan ( Vitis
vinifera L. dan Vitis labrusca L.) diproduksi secara luas di Brasil. Kimia
Pangan, 127, 174–179.
Rossetto, M., Vanzani, P., Mattivi, F., Lunelli, M., Scarpa, M., & Rigo,
A. (2002). Efek antioksidan sinergis katekin dan malvidin 3-glukosida pada
peroksidasi asam linoleat yang dipicu oleh radikal bebas dalam misel. Arsip
Biokimia dan Biofisika,
408, 239–245.
Sagdic, O., Ozturk, I., & Kisi, O. (2012). Pemodelan antimikroba
efek dari pomace anggur yang berbeda dan ekstraknya S. aureus dan
E. coli dalam sup sayuran menggunakan jaringan syaraf tiruan dan
sistem logika fuzzy. Sistem Pakar dengan Aplikasi, 39, 6792–
6798.
Sanhueza, L., Tello, M., Vivanco, M., Mendoza, L., & Wilkens, M.
(2014). Hubungan aktivitas antibakteri terhadap patogen yang
ditularkan melalui makanan dan senyawa fenolik total pada ekstrak
anggur pomace dari varietas Cabernet Sauvignon dan Syrah. Kemajuan
dalam Mikrobiologi, 4, 225–232.
Seaver, B., & Smith, JR (2004). Penghambatan isoform COX
oleh nutraceuticals. Jurnal Farmakoterapi Herbal, 4 ( 2), 11–18.
Seeram, NP, Zhang, Y., & Nair, MG (2009). Penghambatan
proliferasi sel kanker manusia dan enzim siklooksigenase oleh
antosianidin dan katekin. Nutrisi dan Kanker, 46, 101–106.
Silvan, JM, Reguero, M., & Pascual-Teresa, S. (2016). A pelindung
efek antosianin dan xantofil pada kerusakan akibat UVB pada sel epitel
pigmen retina. Makanan & Fungsi, 7,
1067–1076.
Skroza, D., Mekinic, IG, Svilovic, S., Simat, V., & Katalinic, V.
(2015). Investigasi potensi efek sinergis resveratrol dengan senyawa
fenolik lain: Kasus campuran fenolik biner. Jurnal Komposisi dan Analisis
Pangan, 38,
13–18.
Sun, D., Huang, S., Cai, S., Cao, J., & Han, P. (2015). Pencernaan
properti dan efek sinergis pada aktivitas biologis beras ungu ( Oryza sativa
L.) antosianin yang menjalani simulasi pencernaan gastrointestinal secara
in vitro. Food Research International,
78, 114–123.
Tedesco, I., Russo, GL, Nazzaro, F., Russo, M., & Palumbo, R.
(2001). Efek antioksidan antosianin anggur merah dalam eritrosit manusia
normal dan katalase-tidak aktif. Jurnal Biokimia Gizi, 12, 505–511.
Trikas, E., Papi, R., Kyriakidis, D., & Zachariadis, G. (2016). SEBUAH
metode LC-MS sensitif untuk antosianin dan perbandingan produk
sampingan dan kandungan anggur yang setara. Perpisahan, 18,
doi: 10.3390 / separations3020018.
Waffo-Teguo, P., Hawthorne, ME, Cuendet, M., Merillon, JM,
Kinghorn, AD, Pezzuto, JM, & Mehta, RG (2001). Kegiatan kemopreventif
kanker potensial dari stilbenoid anggur dan flavans yang diekstrak dari
anggur ( Vitis vinifera) kultur sel.
Nutrisi dan Kanker, 40, 173–179.
Weidner, S., Powalka, A., Karamac, M., & Amarowicz, R. (2012).
Ekstrak senyawa fenolik dari biji tiga buah anggur liar - Perbandingan
aktivitas antioksidannya dan kandungan senyawa fenoliknya. Jurnal
Internasional Ilmu Molekuler, 13, 3444–3457.
Weidner, S., Rybarczyk, A., Karamac, M., Krol, A., Mostek, A.,
Grebosz, J., & Amarowicz, R. (2013). Perbedaan komposisi fenolik dan
sifat antioksidan di antaranya
Vitis coignetiae dan Vitis vinifera ekstrak biji. Molekul: Jurnal Kimia
Sintetis dan Kimia Produk Alami, 18 ( 3), 3410–3426. [sumber daya
elektronik].
Yao, SL, Xu, Y., Zhang, YY, & Lu, YH (2013). Nasi hitam dan
antosianin menginduksi penghambatan penyerapan kolesterol in vitro. Makanan
& Fungsi, 4, 1602–1608.
Zhang, H., Liu, R., & Tsao, R. (2016). Fenolik kaya antosianin
Ekstrak sayuran akar ungu menghambat sitokin pro-inflamasi yang
diinduksi oleh H. 2 HAI 2 dan meningkatkan aktivitas enzim antioksidan
dalam sel Caco-2. Jurnal Makanan Fungsional, 22,
363–375.