GPT (ALAT) IFCC MOD.

Pengujian:
Panjang gelombang : Hg 365 nm, 340 nm or
Uji alanine aminotransferase Hg 334 nm
(E. 2.6.1.2) Jalur optik: 1 cm
Suhu : 25 C, 30 C atau 37 C
Metode
Panaskan reagen dan kuvet sampai suhu yang
metode kinetika penentuan aktivitas ALAT
diinginkan. suhu harus dijaga konstan (kurang
sesuai rekomendasi panel ahli IFCC
lebih 0.5 C) selama pengujian.
(international federation of clinical chemistry).
tanpa aktivasi pyridoxalphospate.
Cara kerja 1
Preparasi reagen dan stabilitas
pipet kedalam 25 C atau 37 C
cara kerja 1 dengan substrat start: Reagen
kuvet/tabung 30 C
siap digunakan dan stabil, selalu setelah
dibuka, sampai dengan tanggal kedaluwarsa Sampel 200 l 100 l
yang ditentukan bila disimpan terlindung dari
cahaya pada 2-8 derajat Celsius. kontaminasi BUF/buffer 1000 l 1000 l
reagen harus dihindari!!
Campur, inkubasi 5 menit pada suhu yang
Cara kerja 2 dengan sampel start : diinginkan
- REF 12032 dan 12022: tuangkan seluruh
isi satu botol SUBSTRAT ke dalam satu SUB 250 l 250 l
botol BUFFER/ENZIM REAGENT, aduk
Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan
rata.
pada saat yang sama memulai stopwatch.
- REF 122212: pipet 1 ml dari botol
membaca absorbansi lagi tepat setelah 1, 2
SUBSTRAT kedalam satu botol BUFFER,
dan 3 menit.
aduk rata.
*metode semi mikro; untuk metode makro
- REF 12012: pipet 2 ml dari botol
valume dua kali lipat
SUBSTRAT kedalam satu botol BUFFER,
aduk rata.
Cara kerja 2

Reagen kerja stabil selama 4 minggu pada

pipet kedalam 25 C atau 37 C
suhu 2-8 derajat celsius dan 5 hari pada suhu
kuvet/tabung 30 C
15-25 derajat celsius.
Sampel 200 l 100 l
Spesimen
Serum, plasma heparin atau plasma EDTA Reagen kerja 1000 l 1000 l
Hindari hemolisis!
kehilangan aktivitas dalam 3 hari: Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan
- pada suhu 4 derajat selsius : 10 % dan pada saat yang sama memulai stopwatch.
- pada suhu 20-25 derajat celsius: 17%. membaca absorbansi lagi tepat setelah 1, 2
dan 3 menit.
*metode semi mikro; untuk metode makro
valume dua kali lipat
 Encerkan 0,1 ml sampel dengan 0,9 ml saline
fisiologis (0.9%) dan ulangi pengujian
menggunakan pengenceran ini. kalikan
hasilnya dengan 10.

Dalam serum dengan aktivitas yang sangat

tinggi, absorbansi awal mungkin sangat
rendah karena sebagian besar NADH mungkin
Perhitungan telah dikonsumsi sebelum pembacaan
Untuk ∆A/min dalam 0.06-0.08 (Hg 365 nm) pertama. dalam hal ini jalankan kembali
atau 0.12-0.16 (Hg 334 nm, 340 nm) (cara sampel setelah pengenceran seperti
kerja 1 dan 2) gunakan hanya pengukuran dari dijelaskan di atas.
2 menit pertama untuk perhitungan (1 min
inkubasi, 2 min perhitungan)

Nilai referensi
U/I = Sampel start Substrat
∆A/min x Sampel Suhu 25 C 30 C 37 C IFCC

Panjang 25 C, 37 C 25 C, 37 C Laki-laki 22 U/I 30 U/I 42 U/I 45 U/I

gelombang 30 C 30 C
Wanita 17 U/I 23 U/I 32 U/I 34 U/I
Hg 334 nm 971 1780 1173 2184
Catatan
340 nm 952 1745 1151 2143 Mengandung natrium azida. jangan ditelan.
hindari kontak dengan kulit dan selaput
Hg 365 nm 1765 3235 2132 3971 lendir.

Faktor konversi dari satuan tradisional (U/I) di

satuan standar internasional (Kat/l):
1 U/I = 16.67 x 10-3 kat/l
1 kat/l = 60 U/l

Karakteristik kinerja
Linearitas
jika absorbansi berubah per menit (∆A/min)
atau aktivitas melebihi

Panjang ∆A/min 25 C, 37 C
gelombang 30 C (U/I)
(U/I)

Hg 365 0.080 170 320

Hg 334/340 0.160 190 350