ALKALINE PHOSPHATASE

DEA Buffer, DKCG

Orthophosphoric Monoester Phosphohydrolase (Alkaline Optimum) (EC 3.1.3.1)

Package size

REF 12217 16×5 ml CompleteM-Test Kit

12017 10×1o ml Complete Test Kit

12027 8×50 ml Complete Test Kit

12037 4×250 ml Complete Test Kit

IVD

Metode

"Metode standar yang dioptimalkan" sesuai dengan rekomendasi dari Asosiasi Kimia Klinis Jerman

Prinsip Reaksi

p-Nitrophenylphospate+H2O phosphate + p-nitrophenol

Contents

REF 12217 12017 12027 12037

BUF 16×4ml 10×8 ml 8×40 ml 4×200ml

SUB Buffer

Diethanolamine buffer (pH 10,35 ± 0,2) 1.25 mol/l

Magnesium chloride 0,625 mmol/l

SUB Substrate

p-Nitrophenyl phosphate

Preparasi dan stabilitas reagen

Prosedur 1 dengan reagent start

Reagen siap untuk digunakan

Reagen stabil bahkan setelah dibuka hingga tanggal kedaluwarsa yang disebutkan saat disimpan pada
suhu 2....8C. Kontaminasi reagen harus dihindari
Prosedur 2 dengan sampel start

REF 12037 dan 12027. Tuang seluruh isi botol SUB ke dalam satu botol BUF aduk rata

REF 12217. Pipet 1 ml dari botol SUB ke dalam satu botol BUF aduk rata

REF 12017. Pipet 2 ml dari botol SUB kedalam satu botol BUF aduk rata

Reagen kerja stabil selama 4 minggu pada 2.....8C, selama 5 hari pada 15.......25C. Reagen yang bekerja
harus dijaga agar tetap terlindungi dari cahaya

Spesimen

Serum atau plasma heparin

Hindari hemolisis

Hilangnya aktivitas dalam 7 hari : 0% pada 4C, 10% pada 20.....25C

Assay

Panjang gelombang : Hg 405 nm (400-420 nm)

Jalur optic : 1 cm

Suhu : 25C,30c atau 37C

Pengukuran : Baca terhadap udara (meningkatkan absorbansi)

Panaskan reagen dan kuvet sampai suhu yang diinginkan. Suhu harus dijaga konstan ( ± 05°C) selama
pengujian

Prosedur 1 dengan reagent start

Pipet ke dalam kuvet 25°C, 30°C, 37°C

Sampel 20 µl
BUF 1000 µl

Campur lal inkubasi selama 1 menit pada suhu yang diinginkan

SUB 250 µl
Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan start stopwatch pada waktu yang sama. Baca
lagi absorbansi tepat setelah 1,2, dan 3 menit

Prosedur 2 dengan sampel start

Pipet ke dalam kuvet 250 µl

Sampel 20 µl
Reagen kerja
 1000µl
Campur, baca absorbansi setelah 1 menit
dan start stopwatch pada waktu yang
sama. Baca lagi absorbansi tepat setelah
1,2, dan 3 menit

Calculation

Dari pembacaan hitung perubahan absorbansi rata-rata per menit (∆A/min)

Hitung aktivitas alkali fosfatase dalam sampel menggunakan faktor berikut:

U/I = ∆A/ menit.×3433 (prosedur 1 dengan reagent start)

= ∆A/ menit.×2757 (prosedur 1 dengan sampel start)

Faktor konversi dari satuan tradisional (U/I) dalam satuan SI (kat/l) :

1U/l = 16,67×103 µkat/l

1 µkat/l = 60U/l

Performance Characteristis

Linearty

jika perubahan absorbansi per menit (∆A/min) melebihi 0,250, encerkan 0,1 ml sampel dengan
0,5 ml garam fisiologis (0,9%) dan ulangi pengujian menggunakan pengenceran ini. Kalikan
hasilnya dengan 6

Referance Values

Suhu 25°C U/l 30°C U/l 37° U/l

perempuan 40-190 49-232 64-306
Laki-laki 50-190 61-232 80-306
Anak hingga usia Hingga 400 Hingga 488 Hingga 643
15
Anak hinggs udis Hingga 300 Hingga 366 Hingga 483
17

Quality control