Anda di halaman 1dari 8

GPT (ALAT) IFCC MOD.

LiquiUV Test
Alanine Aminotransferase (EC 2.6.1.2)
Ukuran Paket
REF 12212 16 x 5 ml Kit Uji M Lengkap
12012 10 x 10 ml Kit Uji Lengkap
12022 8 x 50 ml Kit Uji Lengkap
12032 4 x 250 ml Kit Uji Lengkap
IVD
Metode
Metode Kinetik metode penentuan aktivitas ALAT sesuai rekomendasi Panel Pakar IFCC
(Federasi Internasional Kimia Klinik) tanpa aktivasi piridoksalfosfat.
Prinsip Reaksi GPT
2-oksoglutarat + L-alanin GPT L-glutamat piruvat

piruvat + NADH + H LDH L-laktat + NAD


Isi
REF 12212 12012 12022 12032
BUF 16 x4 ml 10 x 8 ml 8x 40 ml 4x 200
ml
SUB 1x16 ml 2x 10 ml 8x 10 ml 4 x 50 ml
BUF Buffer / Reagen enzim
Buffer TRIS (pH 7,4) 125 mmol/l
L-alanin 625 mmol/l
LDH ≥1,5 kU/l
Natrium azida 0,095 %
SUB Substrat
2-oxoglutarat 75 mmol/l
NADH 0,9 mmol/l
Natrium azid 0,095 %

Persiapan Reagen dan Stabilitas


Prosedur 1 dengan Substrat Start
Reagen siap untuk digunakan dan stabil, bahkan setelah dibuka, hingga tanggal kedaluwarsa
yang dinyatakan bila disimpan terlindung dari cahaya pada 2,8 °C Kontaminasi reagen harus
dihindari!
Prosedur 2 dengan Sample Start
REF 12032 dan 12022: Tuang seluruh isi satu botol SUB ke dalam satu botol HU aduk hingga
rata.
REF 12212: Pipet 1 ml dari botol SUB ke dalam satu botol BUF aduk rata
REF 12012: Pipet 2 ml dari botol SUB ke dalam satu botol BUF diaduk rata.
Reagen kerja stabil selama 4 minggu pada suhu 2,8 ° C dan 5 hari pada suhu 15 25 ° C
Spesimen
Serum, plasma heparin atau plasma EDTA
Hindari hemolisis!
Kehilangan aktivitas dalam 3 hari: pada +4° C: -10%
pada 20-25° C: -17%
Pengukuran
Panjang gelombang: Hg 365 nm, 340 nm atau Hg 334 nm
Jarak optik: 1 cm
Temperatur: 25° C, 30° C atau 37° C
Pengukuran Suhu: terhadap udara (menurunkan absorbansi ) Hangatkan reagen
dan kuvet ke suhu yang diinginkan. Suhu harus dijaga konstan
(± 0,5° C) selama durasi pengujian
Prosedur 1

Pipet ke dalam kuvet 25° C, 30° C 37° C


Sampel 200 µl 100 µl
BUF 1000 µl 1000 µl
Campur, inkubasi selama 5 menit pada temperatur yang diinginkan
SUB 250 µl 250 µl
Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan pada waktu yang sama mulai stopwatch.
Baca absorbansi lagi tepat setelah 1. 2 dan 3 menit
Metode semi mikro; untuk metode makro gandakan volume.
Prosedur 2

Pipet ke dalam kuvet 25° C, 30° C 37° C


Sampel 200 µl 100 µl
Kerja reagen 1000 µl 1000 µl
Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan pada saat yang sama mulai stopwatch. Baca
kembali absorbansi tepat setelah 1, 2, dan 3 menit
Metode semi mikro ; untuk metode makro menggandakan volume
Perhitungan
Untuk ΔA / min dengan 0,06-0,08 (Hg 365 nm) atau 0,12-0,16 (Hg 334 nm, 340 nm)
(prosedur 1 + 2) gunakan hanya pengukuran dari 2 menit pertama untuk perhitungan ( 1
menit inkubasi, pengukuran 2 menit)

U/l = ΔA/min x Awal Sample Awal Substrat


Panjang 25° C, 30° C 37° C 25° C, 30° C 37° C
gelombang
Hg 334 nm 971 1780 1173 2184
340 nm 952 1745 1151 2143
Hg 365 nm 1765 3235 2132 3971
Faktor konversi dari satuan tradisional (U / I) dalam satuan Sl (kat / l):
1 U/l = 16,67 x 101 µkat/l
1 µkat/l = 60 U/l
Karakteristik Kinerja
Linearitas
Jika absorbansi berubah per menit (AA / menit) atau melebihi aktivitas

Panjang gelombang ΔA/min 25° C, 30° C (U/l) 37° C (U/l)


(nm)
Hg 365 0.080 170 320
Hg 334/340 0.160 190 350
encerkan 0,1 ml sampel dengan 0,9 ml garam fisiologis (0,9%) dan ulangi pengujian
menggunakan pengenceran ini. Kalikan hasilnya dengan 10. Dalam serum dengan aktivitik
sangat tinggi, absorbansi irisial mungkin sangat rendah karena sebagian besar NADH
mungkin telah dikonsumsi sebelum pembacaan pertama. Dalam kasus ini, jalankan kembali
sampel setelah pengenceran seperti yang dijelaskan di atas. Data kinerja umum dapat
ditemukan di Laporan Verifikasi.
Nilai Referensi/ nilai rujukan:

Temperatur 25° C 30° C 37° C IFCC


Laki-laki 22 U/l 30 U/l 42 U/l 45 U/l
Perempuan 17 U/l 23 U/l 32 U/l 34 U/l
* dengan aktivasi piridoksalfosfat
Kontrol kualitas
Semua serum kontrol dengan GPT nilai yang ditentukan oleh metode ini dapat digunakan.
Kami merekomendasikan untuk menggunakan serum kontrol kualitas kami HumaTrol
berdasarkan serum hewan atau serum kontrol kualitas SERODOS kami berdasarkan serum
manusia.
Otomasi
Proposal untuk menerapkan reagen pada penganalisis tersedia berdasarkan permintaan
Setiap laboratorium harus memvalidasi aplikasi dalam tanggung jawabnya sendiri.
Catatan
(SUB) dan (BUF) mengandung natrium azida (0,095%) Jangan tertelan Hindari kontak
dengan kulit dan selaput lendir.
GOT (ASAT) IFCC MOD.
LiquiUV Test
Aspartat Aminotransferase (EC 2.6.1.1)
Ukuran Paket
REF 12211 16 x 5 ml Kit Uji M Lengkap
12011 10 x 10 ml Kit Uji Lengkap
12021 8 x 50 ml Kit Uji Lengkap
12031 4 x 250 ml Kit Uji Lengkap
IVD
Metode
Metode Kinetik untuk penentuan aktivitas ASAT sesuai dengan rekomendasi panel ahli IFCC
tanpa aktivasi piridoksalfosfat.
Prinsip Reaksi GPT
2-oksoglutarat + L-aspartat GOT L-glutamat oxaloacetat

oxaloacetat + NADH + H+ MDH L-malate + NAD


Isi
REF 12211 12011 12021 12031
BUF 16 x4 ml 10 x 8 ml 8 x 40 ml 4 x 200
ml
SUB 1 x 16 ml 2 x 10 ml 8 x 10 ml 4 x 50 ml
BUF Buffer / Reagen enzim
Buffer TRIS (pH 7,4) 100 mmol/l
L-aspartat 300 mmol/l
LDH ≥ 1,13 kU/l
MDH ≥ 0,75 kU/l
Natrium azida 0,095 %
SUB Substrat
2-oxoglutarat 60 mmol/l
NADH 0,9 mmol/l
Natrium azid 0,095 %

Persiapan Reagen dan Stabilitas


Prosedur 1 dengan Substrat Start
Reagen sudah siap digunakan. Reagennya stabil, bahkan setelah dibuka hingga tanggal
kadaluwarsa yang ditentukan ketika disimpan ditemoat yang terlindungi dari cahaya pada
2...8° C. Hindari kontaminasi pada reagen.
Prosedur 2 dengan Sample Start
Ref 12031 dan 12021 : tuangkan isi yang ada didlam satu botol substrat ke dalam satu botol
buffer, campur sepenuhnya.
Ref 12211 : pipet 1 ml dri botol substrat kedalam satu botol buffer, campur sepenuhnya
Ref 12011 : pipet 2 ml dri botol substrat kedalam satu botol buffer, campur sepenuhnya
dengan baik.
Reagent bekerja dengan stabil selama 4 minggu pada suhu 2...8° C dan 5 hari pada susuh
15...25° C
Spesimen
Serum, plasma heparin atau plasma EDTA
Hindari hemolisis
Kehilangan aktivitas dalam 3 hari: pada +4° C: -8%
pada 20-25° C: -10%
Pengukuran
Panjang gelombang: 365 nm, 340nm atau 334 nm
Jarak optik: 1 cm
Temperatur: 25° C, 30° C atau 37° C
Pengukuran Suhu: terhadap udara (menurunkan absorbansi) Hangatkan reagen
dan kuvet sesuai dengan suhu yang diinginkan. Suhunya harus
tetap konstan selama waktu tes.
Prosedur 1

Pipet ke dalam kuvet 25° C, 30° C 37° C


Sampel 200 µl 100 µl
BUF 1000 µl 1000 µl
Campur, inkubasi selama 5 menit pada temperatur yang diinginkan
SUB 250 µl 250 µl
Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan pada waktu yang sama mulai stopwatch.
Baca absorbansi lagi tepat setelah 1. 2 dan 3 menit
Metode semi mikro; untuk metode makro gandakan volume.

Prosedur 2

Pipet ke dalam kuvet 25° C, 30° C 37° C


Sampel 200 µl 100 µl
Kerja reagen 1000 µl 1000 µl
Campur, baca absorbansi setelah 1 menit dan pada saat yang sama mulai stopwatch. Baca
kembali absorbansi tepat setelah 1, 2, dan 3 menit
Metode semi mikro ; untuk metode makro menggandakan volume
Perhitungan
Untuk ΔA / min dengan 0,06-0,08 (Hg 365 nm) atau 0,12-0,16 (Hg 334 nm, 340 nm)
(prosedur 1 + 2) gunakan hanya pengukuran dari 2 menit pertama untuk perhitungan ( 1
menit inkubasi, pengukuran 2 menit)

U/l = ΔA/min x Sample Substrat


Panjang 25° C, 30° C 37° C 25° C, 30° C 37° C
gelombang
Hg 334 nm 971 1780 1173 2184
340 nm 952 1745 1151 2143
Hg 365 nm 1765 3235 2132 3971
Faktor konversi dari satuan tradisional (U / I) dalam satuan Sl (kat / l):
1 U/l = 16,67 x 101 µkat/l
1 µkat/l = 60 U/l
Karakteristik Kinerja
Linearitas: sampai dengan 600 U/l pada sistem otomatis
Prosedur manual:
Jika absorbansi berubah per menit (AA / menit) atau melebihi aktivitas

Panjang gelombang ΔA/min 25° C, 30° C (U/l) 37° C (U/l)


(nm)
Hg 365 0.080 170 320
Hg 334/340 0.160 190 350
Diencerkan 0.1 ml sampel dengan 0.9 ml Nacl fisiologis (0,9%) dan ulangi pengukuran
menggunakan pengenceran ini. Lalu hasilnya dikalikan 10 dalam serum dengan aktivitas
yang sangat tinggi, absorbansi awal mungkin sangat rendah karena sebagian besar NADH
mungkin telah dikonsumsi sebelum pembacaan pertama. dalam hal ini lakukan kembali
sampel setelah pengenceran seperti dijelaskan di atas.Nilai Referensi/ nilai rujukan:

Temperatur 25° C 30° C 37° C IFCC


Laki-laki 18 U/l 25 U/l 37 U/l 35 U/l
Perempuan 15 U/l 21 U/l 31 U/l 31 U/l
* dengan aktivasi piridoksalfosfat
Kontrol kualitas
Semua serum kontrol dengan GOT nilai yang ditentukan oleh metode ini dapat digunakan.
Kami merekomendasikan untuk menggunakan serum kontrol kualitas kami HumaTrol
berdasarkan serum hewan atau serum kontrol kualitas SERODOS kami berdasarkan serum
manusia.
Otomasi
Proposal untuk menerapkan reagen pada penganalisis tersedia berdasarkan permintaan
Setiap laboratorium harus memvalidasi aplikasi dalam tanggung jawabnya sendiri.
Catatan
(SUB) dan (BUF) mengandung natrium azida (0,095%) Jangan tertelan. Hindari kontak
dengan kulit dan selaput lendir.

Anda mungkin juga menyukai