Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Cbab7
Fotosintesis:
Reaksi Ringan

KEHIDUPAN DI BUMI TERGANTUNG PADA ENERGI yang berasal dari

matahari. Fotosintesis adalah satu-satunya proses biologis yang penting
yang dapat memanen energi ini. Selain itu, sebagian besar sumber
energi planet ini dihasilkan dari aktivitas fotosintesis baik di masa lalu
atau zaman dahulu (bahan bakar fosil). Bab ini memperkenalkan prinsip-
prinsip fisika dasar yang mendasari penyimpanan energi fotosintesis dan
pemahaman terkini tentang struktur dan fungsi aparatus fotosintesis
(Blankenship 2002).
Syarat fotosintesis secara harfiah berarti "sintesis menggunakan cahaya."
Seperti yang akan kita lihat dalam bab ini, organisme fotosintesis menggunakan
energi matahari untuk mensintesis senyawa karbon yang tidak dapat dibentuk
tanpa masukan energi. Lebih khusus lagi, energi cahaya mendorong sintesis
karbohidrat dari karbon dioksida dan air dengan menghasilkan oksigen:

6 CO2 + 6 H2HAI → C6H12HAI6 + 6 O2

Karbon Air Karbohidrat Oksigen
dioksida

Energi yang tersimpan dalam molekul-molekul ini nantinya dapat digunakan untuk menggerakkan

proses seluler di pabrik dan dapat berfungsi sebagai sumber energi untuk semua bentuk kehidupan.

Bab ini membahas peran cahaya dalam fotosintesis, struktur aparatus

fotosintesis, dan proses yang dimulai dengan eksitasi klorofil oleh cahaya
dan berujung pada sintesis ATP dan NADPH.

FOTOSINTESIS PADA TANAMAN TINGGI

Jaringan fotosintesis yang paling aktif pada tumbuhan tingkat tinggi adalah mesofil
daun. Sel mesofil memiliki banyak kloroplas, yang mengandung pigmen hijau
penyerap cahaya khusus, yaitu:klorofil. Dalam fotosintesis, tanaman
menggunakan energi matahari untuk mengoksidasi air, sehingga melepaskan
oksigen, dan untuk mengurangi karbon dioksida, sehingga membentuk senyawa
karbon besar, terutama gula. Serangkaian reaksi kompleks yang
112 Bab 7

mina dalam reduksi CO2 termasuk reaksi tilakoid dan reaksi
fiksasi karbon.
NS reaksi tilakoid fotosintesis berlangsung di membran
internal khusus kloroplas yang disebut tilakoid (lihat Bab 1).
Produk akhir dari reaksi tilakoid ini adalah senyawa
berenergi tinggi ATP dan NADPH, yang digunakan untuk
sintesis gula dalamreaksi fiksasi karbon. Proses sintetik ini
berlangsung di stroma kloroplas, daerah berair yang
mengelilingi tilakoid. Reaksi tilakoid fotosintesis adalah
subjek dari bab ini; reaksi fiksasi karbon dibahas dalam Bab
8.
Dalam kloroplas, energi cahaya diubah menjadi energi kimia
oleh dua unit fungsional yang berbeda yang disebut fotosistem.
Energi cahaya yang diserap digunakan untuk menggerakkan
transfer elektron melalui serangkaian senyawa yang bertindak
sebagai donor elektron dan akseptor elektron. Mayoritas elektron
akhirnya mereduksi NADP+ menjadi NADPH dan
makan H2O ke O2. Energi cahaya juga digunakan untuk menghasilkan
gaya gerak proton (lihat Bab 6) melintasi membran tilakoid.
bran, yang digunakan untuk mensintesis ATP.
KONSEP UMUM
Pada bagian ini kita akan mengeksplorasi konsep-konsep
penting yang memberikan dasar untuk pemahaman
fotosintesis. Konsep-konsep ini mencakup sifat cahaya, sifat-
sifat pigmen, dan berbagai peran pigmen.
Cahaya Memiliki Karakteristik
Partikel dan Gelombang
Atrium fisika pada awal abad kedua puluh adalah
kesadaran bahwa cahaya memiliki sifat partikel dan
ombak. Gelombang (Gambar 7.1)
dicirikan oleh apanjang gelombang,
dilambangkan dengan huruf Yunani
lambda (aku), yang merupakan jarak Panjang gelombang, aku (nm)
Medan listrik
komponen
Arah dari
perambatan
Medan gaya
Wavele
komponen ngth (l)
GAMBAR 7.1 Cahaya adalah gelombang elektromagnetik
transversal, terdiri dari medan listrik dan magnet yang
berosilasi yang saling tegak lurus dan terhadap arah rambat
cahaya. Cahaya bergerak dengan kecepatan 3× 108 MS-1.
Panjang gelombang (l) adalah jarak antara puncak
gelombang yang berurutan.
baik medan listrik maupun medan magnet berosilasi tegak
lurus terhadap arah rambat gelombang dan pada 90°
terhadap satu sama lain.
Cahaya juga merupakan partikel, yang kita sebut a foton.
Setiap foton mengandung sejumlah energi yang disebut
kuantum (jamak kuantum). Kandungan energi cahaya tidak
terus menerus melainkan disampaikan dalam paket-paket
diskrit ini, kuanta. Energi (E) foton tergantung pada frekuensi
cahaya menurut hubungan yang dikenal sebagai
Hukum Planck:
E = hn (7.2)
di mana H adalah konstanta Planck (6.626 × 10–34 J s).
Sinar matahari seperti hujan foton dengan frekuensi yang berbeda.
Mata kita hanya sensitif terhadap rentang frekuensi yang kecil—wilayah
cahaya tampak dari spektrum elektromagnetik (Gambar 7.2). Cahaya
dengan frekuensi yang sedikit lebih tinggi (atau

antara puncak gelombang yang 10–3 10-1 10 103 105 107 109 1011 1013 1015
berurutan. NSfrekuensi, Frekuensi, n (Hz)
1020 1018 1016 1014 1012 1010 108 106 104 102
diwakili oleh huruf Yunani nu (n),
adalah jumlah puncak gelombang
yang melewati pengamat dalam Gamma ultra- Radio
Jenis radiasi sinar sinar-X violet Gelombang Microwave Inframerah
waktu tertentu. Persamaan
sederhana menghubungkan
panjang gelombang, frekuensi, dan
kecepatan gelombang apa pun:
400 Spektrum yang terlihat 700
c = ln (7.1)
Energi tinggi Energi rendah
di mana C adalah kecepatan
gelombang—dalam kasus ini,
GAMBAR 7.2 Spektrum elektromagnetik. Panjang gelombang () dan frekuensi () berhubungan terbalik. Mata
kecepatan cahaya (3,0 × 108 MS–
kita hanya peka terhadap rentang panjang gelombang radiasi yang sempit, wilayah yang terlihat, yang
1). Gelombang cahaya adalah
membentang dari sekitar 400 nm (ungu) hingga sekitar 700 nm (merah). Cahaya dengan panjang
gelombang elektromagnetik gelombang pendek (frekuensi tinggi) memiliki kandungan energi yang tinggi; cahaya dengan panjang
transversal (sisi-ke-sisi), di mana: gelombang panjang (frekuensi rendah) memiliki kandungan energi yang rendah.

panjang gelombang yang lebih pendek) berada
di wilayah spektrum ultraviolet, dan cahaya
dengan frekuensi yang sedikit lebih rendah
(atau panjang gelombang yang lebih panjang)
berada di wilayah inframerah. Output matahari
ditunjukkan pada Gambar 7.3, bersama dengan
kepadatan energi yang menyerang permukaan
Bumi. Spektrum penyerapan klorofilA
(kurva C pada Gambar 7.3) menunjukkan
kira-kira bagian dari output matahari
yang digunakan oleh tanaman.
NS spektrum penyerapan (jamak
spektrum) menampilkan jumlah energi
cahaya yang diambil atau diserap oleh
molekul atau zat sebagai fungsi dari
panjang gelombang cahaya. penyerapan-
spektrum ion untuk zat tertentu dalam pelarut yang tidak
menyerap dapat ditentukan dengan spektrofotometer seperti yang
diilustrasikan pada Gambar 7.4. Spektrofotometri, teknik yang
digunakan untuk mengukur penyerapan cahaya oleh sampel, lebih
dibahas lengkap di WebTopik 7.1.
2.0
keluaran surya
1.5
Irradiance Wm–2 nm–1
Energi di permukaan bumi
1.0
Penyerapan
klorofil
0,5
400 800 1200
Panjang gelombang, aku
Bisa dilihat
spektrum
GAMBAR 7.3 Spektrum matahari dan hubungannya dengan
spektrum penyerapan klorofil. Kurva A adalah keluaran
energi matahari sebagai fungsi panjang gelombang. Kurva
B adalah energi yang menghantam permukaan bumi.
Lembah tajam di wilayah inframerah di luar 700 nm
mewakili penyerapan energi matahari oleh molekul di
atmosfer, terutama uap air. Kurva C adalah spektrum
serapan klorofil, yang menyerap kuat pada bagian
spektrum biru (sekitar 430 nm) dan merah (sekitar 660 nm).
Karena cahaya hijau di tengah wilayah yang terlihat tidak
diserap secara efisien, sebagian besar dipantulkan ke mata
kita dan memberi tanaman warna hijau yang khas.
Fotosintesis: Reaksi Terang 113
monokromator Ditularkan
fotodetektor cahaya Perekam
Lampu Prisma Sampel atau komputer
Saya0 Saya A
aku (nm)
Cahaya insiden monokromatik
GAMBAR 7.4 Diagram skema spektrofotometer. Instrumen terdiri
dari sumber cahaya, monokromator yang berisi perangkat pemilihan panjang
gelombang seperti prisma, pemegang sampel, fotodetektor, dan perekam atau
komputer. Panjang gelombang keluaran monokromator dapat diubah dengan rotasi
prisma; grafik absorbansi (A) versus panjang gelombang () disebut spektrum.
Ketika Molekul Menyerap atau Memancarkan Cahaya,
Mereka Mengubah Keadaan Elektroniknya
Klorofil tampak hijau di mata kita karena menyerap cahaya
terutama di bagian spektrum merah dan biru, jadi hanya sebagian
cahaya yang diperkaya dengan panjang gelombang hijau (sekitar
550 nm) yang dipantulkan ke mata kita (lihat Gambar 7.3).
Penyerapan cahaya diwakili oleh Persamaan 7.3, di mana
klorofil (Chl) dalam energi terendah, atau keadaan dasar,
menyerap foton (diwakili oleh Hn) dan membuat transisi ke
keadaan energi yang lebih tinggi, atau tereksitasi, (Chl*):
Chl + Hn → Chl* (7.3)
Distribusi elektron dalam molekul tereksitasi agak berbeda
dari distribusi dalam molekul keadaan dasar (Gambar 7.5)
Penyerapan cahaya biru mengeksitasi klorofil ke tingkat energi
yang lebih tinggi daripada penyerapan cahaya merah karena
energi foton lebih tinggi ketika panjang gelombangnya singkat.
Dalam keadaan tereksitasi yang lebih tinggi, klorofil sangat
tidak stabil, sangat cepat melepaskan sebagian energinya ke
lingkungan sebagai panas, dan memasuki keadaan tereksitasi
terendah, di mana ia dapat stabil selama maksimum beberapa
nanodetik (10–9 S). Karena ketidakstabilan yang melekat pada
keadaan tereksitasi ini, setiap proses yang menangkap
1600 2000 energinya harus sangat cepat.
Dalam keadaan tereksitasi terendah, klorofil tereksitasi
memiliki empat jalur alternatif untuk membuang energi yang
tersedia.
1. Klorofil yang tereksitasi dapat memancarkan kembali foton dan
dengan demikian kembali ke keadaan dasarnya—proses yang
dikenal sebagai fluoresensi. Ketika itu terjadi, panjang
gelombang fluoresensi sedikit lebih panjang (dan energinya
lebih rendah) daripada panjang gelombang penyerapan karena
sebagian dari energi eksitasi diubah menjadi panas sebelum
foton fluoresen dipancarkan. Klorofil berfluoresensi di wilayah
spektrum merah.
2. Klorofil yang tereksitasi dapat kembali ke keadaan dasarnya
dengan secara langsung mengubah energi eksitasinya
menjadi panas, tanpa emisi foton.
114 Bab 7

GAMBAR 7.5 Penyerapan dan emisi cahaya (A) (B)

oleh klorofil. (A) Diagram tingkat energi.
Penyerapan atau emisi cahaya ditunjukkan Keadaan tereksitasi lebih tinggi
dengan garis vertikal yang menghubungkan 400
keadaan dasar dengan keadaan elektron Biru
tereksitasi. Pita serapan biru dan merah
klorofil (yang masing-masing menyerap foton Kehilangan panas 500
biru dan merah) sesuai dengan panah vertikal
ke atas, menandakan bahwa energi yang

Absorption of blue light

Wavelength, l
diserap dari cahaya menyebabkan molekul 600
Keadaan tereksitasi terendah
berubah dari keadaan dasar ke keadaan

Energy
tereksitasi. Panah yang mengarah ke bawah merah

menunjukkan fluoresensi, di mana molekul 700

bergerak Fluoresensi

Absorption of
dari keadaan tereksitasi terendah ke keadaan (kehilangan energi Fluoresensi
dasar sambil memancarkan kembali energi oleh emisi cahaya 800

red light
sebagai foton. (B) Spektrum absorpsi dan lebih lama l) Penyerapan
fluoresensi. Panjang gelombang panjang
(merah) pita serapan klorofil sesuai dengan 900
cahaya yang memiliki energi yang dibutuhkan Keadaan dasar (keadaan energi terendah)
untuk menyebabkan transisi dari keadaan dasar
ke keadaan tereksitasi pertama. Pita serapan
panjang gelombang pendek (biru) berhubungan
dengan transisi ke keadaan tereksitasi yang lebih
tinggi.

(A) Klorofil

H CH2 CH3 HAI

C H CH3 CHO C HH3CH

H
H3C A B C2H5 B C2H5 H3C A B
n n n n C2H5

H Mg H Klorofil B Bakterioklorofil A
H3C n n
D C CH3
H
(B) Karotenoid (C) Pigmen bilin
E
CH2 H H HAI
H CH3
CH2 HAI H3C
COOCH3 CH3
NH
HAI C CH
CH3 H3C CH
HC
HAI C CH3 H
HC H3C
CH2 CH NH
HC HOOC CH2 CH2
CH C CH3
H
HC
C CH3 CH HOOC CH2 CH2
HC n
(CH 2) CH H3C
3
H3C HC H
HC CH3 CH H
H3C
HC
CH NH
(CH 2)3
H3C HC H3C CH
HC CH3 CH HAI
HC CH3
(CH2)3 H3C Fikoeritrobilin
CH H3C

CH3 CH3
β- Karoten
Klorofil A
 Photosintesis: Reaksi Terang 115

3. Klorofil dapat berpartisipasi dalam transfer energi, di 3

mana klorofil yang tereksitasi mentransfer energinya
ke molekul lain.
2 4
4. Proses keempat adalah fotokimia, di mana energi

Absorption
keadaan tereksitasi menyebabkan reaksi kimia terjadi. 1 5
Reaksi fotokimia fotosintesis adalah salah satu reaksi
kimia yang paling cepat diketahui. Kecepatan ekstrim
ini diperlukan untuk fotokimia untuk bersaing dengan
tiga kemungkinan reaksi lain dari keadaan tereksitasi
yang baru saja dijelaskan.
400 500 600 700 800
Pigmen Fotosintetik Menyerap Cahaya yang Panjang gelombang (nm)

Mendukung Fotosintesis
Energi sinar matahari pertama kali diserap oleh pigmen
tanaman. Semua pigmen aktif dalam fotosintesis ditemukan di
kloroplas. Struktur dan spektrum penyerapan beberapa
pigmen fotosintesis ditunjukkan pada Gambar 7.6 dan
7.7, masing-masing. Klorofil danbakterioklorofil (pigmen
yang ditemukan pada bakteri tertentu) adalah pigmen khas
organisme fotosintesis, tetapi semua organisme
mengandung campuran lebih dari satu jenis pigmen,
masing-masing memiliki fungsi tertentu.
Klorofil A dan B berlimpah di tanaman hijau, dan
C dan D ditemukan di beberapa protista dan cyanobacteria.
Sejumlah jenis bakterioklorofil yang berbeda telah ditemukan; Tipe
A adalah yang paling banyak didistribusikan. WebTopik 7.2
menunjukkan distribusi pigmen dalam berbagai jenis
organisme fotosintesis.
Semua klorofil memiliki struktur cincin kompleks yang secara
kimiawi terkait dengan gugus mirip porfirin yang ditemukan dalam
hemoglobin dan sitokrom (lihat Gambar 7.6A). Selain itu, ekor
hidrokarbon yang panjang hampir selalu melekat pada struktur
cincin. Ekor menambatkan klorofil ke bagian hidrofobik
lingkungannya. Struktur cincin mengandung beberapa elektron
yang terikat longgar dan merupakan bagian dari molekul yang
terlibat dalam transisi elektron dan reaksi redoks.
Berbagai jenis karotenoid ditemukan dalam organisme
fotosintesis adalah semua molekul linier dengan banyak ikatan
rangkap terkonjugasi (lihat Gambar 7.6B). Pita serapan pada
daerah 400 hingga 500 nm memberikan karakteristik warna
oranye pada karotenoid. Warna wortel, misalnya, disebabkan
oleh karotenoid-karoten, yang struktur dan penyerapannya
Struktur molekul beberapa pigmen fotosintesis. (A)
▲
Spektrum yang terlihat Inframerah
GAMBAR 7.7 Spektrum penyerapan beberapa fotosintesis
pigmen. Kurva 1, bakterioklorofilA; kurva 2, klorofil
A; kurva 3, klorofil B; kurva 4, fikoeritrobilin; kurva 5,
β- karoten. Spektrum serapan yang ditunjukkan adalah untuk
pigmen murni yang dilarutkan dalam pelarut nonpolar, kecuali
untuk kurva 4, yang mewakili buffer berair fikoeritrin, protein
dari cyanobacteria yang mengandung kromofor fikoeritrobilin
yang terikat secara kovalen pada rantai peptida. Dalam banyak
kasus, spektrum pigmen fotosintesis in vivo secara substansial
dipengaruhi oleh lingkungan pigmen dalam membran
fotosintesis. (Setelah Avers 1985.)
spektrum tion ditunjukkan pada Gambar 7.6 dan 7.7, masing-masing.
Karotenoid ditemukan di semua organisme fotosintesis,
kecuali mutan yang tidak mampu hidup di luar
laboratorium. Karotenoid merupakan konstituen integral
dari membran tilakoid dan biasanya berhubungan erat
dengan antena dan protein pigmen pusat reaksi. Cahaya
yang diserap oleh karotenoid ditransfer ke klorofil untuk
fotosintesis; karena peran ini mereka disebut
pigmen aksesori.
EKSPERIMEN UTAMA DALAM
MEMAHAMI FOTOSINTESIS
Menetapkan persamaan kimia fotosintesis secara keseluruhan
membutuhkan beberapa ratus tahun dan kontribusi oleh:
banyak ilmuwan (referensi literatur untuk
perkembangan sejarah dapat ditemukan di situs
web). Pada tahun 1771, Joseph Priestley

GAMBAR 7.6
mengamati bahwa setangkai daun mint yang
klorofil memiliki struktur cincin seperti porfirin dengan atom magnesium (Mg)
tumbuh di udara di mana sebuah lilin telah
terkoordinasi di tengah dan ekor hidrokarbon hidrofobik panjang yang
menambatkannya di membran fotosintesis. Cincin seperti porfirin adalah tempat padam meningkatkan udara sehingga lilin lain
penyusunan ulang elektron yang terjadi ketika klorofil tereksitasi dan elektron dapat menyala. Dia telah menemukan evolusi
yang tidak berpasangan ketika teroksidasi atau tereduksi. Berbagai klorofil oksigen oleh tumbuhan. Seorang Belanda, Jan
berbeda terutama dalam substituen di sekitar cincin dan pola ikatan rangkap. (B) Ingenhousz, mendokumentasikan peran penting
Karotenoid adalah poliena linier yang berfungsi sebagai pigmen antena dan
cahaya dalam fotosintesis pada tahun 1779.
agen fotoprotektif. (C) Pigmen bilin adalah tetrapirol rantai terbuka yang
ditemukan dalam struktur antena yang dikenal sebagai fikobilisom yang terjadi Ilmuwan lain menetapkan peran
pada cyanobacteria dan ganggang merah. BERSAMA2 dan H2O dan menunjukkan bahwa organik
116 Bab 7

materi, khususnya karbohidrat, adalah produk fotosintesis

)
bersama dengan oksigen. Pada akhir abad kesembilan

) or
belas, reaksi kimia keseluruhan yang seimbang untuk foto-
sintesa dapat dituliskan sebagai berikut: Spektrum penyerapan

O2 evolution rate (
Spektrum aksi
T
L  Saya G ht, tempat n→

Absorbance (
6 CO2 +6 H2HAI   C6H12O+6 6 O2 (7.4)

dimana C6H12HAI6 mewakili gula sederhana seperti glukosa. Seperti

yang akan dibahas dalam Bab 8, glukosa bukanlah yang sebenarnya
produk dari reaksi fiksasi karbon. Namun, energi untuk
produk yang sebenarnya kira-kira sama, sehingga 400 500 600 700 800
representasi glukosa dalam Persamaan 7.4 harus dianggap Panjang gelombang (nm)

sebagai kemudahan tetapi tidak diartikan secara harfiah.

Reaksi kimia fotosintesis sangat kompleks. Faktanya,
setidaknya 50 langkah reaksi antara sekarang telah
diidentifikasi, dan tidak diragukan lagi langkah-langkah
tambahan akan ditemukan. Petunjuk awal sifat kimia dari
proses kimia penting fotosintesis datang pada tahun 1920 dari
penyelidikan bakteri fotosintetik yang tidak menghasilkan
oksigen sebagai produk akhir. Dari studinya tentang bakteri ini,
CB van Niel menyimpulkan bahwa fotosintesis adalah proses
redoks (reduksi-oksidasi). Kesimpulan ini telah dikonfirmasi,
dan telah berfungsi sebagai konsep dasar yang menjadi dasar
semua penelitian selanjutnya tentang fotosintesis.
Sekarang kita beralih ke hubungan antara aktivitas
fotosintesis dan spektrum cahaya yang diserap. Kami akan
membahas beberapa eksperimen kritis yang telah
berkontribusi pada pemahaman kami saat ini tentang
fotosintesis, dan kami akan mempertimbangkan persamaan
untuk reaksi kimia esensial fotosintesis.
Spektrum yang terlihat Inframerah
GAMBAR 7.8 Spektrum aksi dibandingkan dengan absorpsi
spektrum. Spektrum serapan diukur seperti yang ditunjukkan pada
Gambar 7.4. Spektrum aksi diukur dengan memplot respons
terhadap cahaya seperti evolusi oksigen, sebagai fungsi panjang
gelombang. Jika pigmen yang digunakan untuk memperoleh
spektrum absorpsi sama dengan yang menyebabkan respon, maka
spektra absorpsi dan aksi akan cocok. Dalam contoh yang
ditunjukkan di sini, spektrum aksi untuk evolusi oksigen cocok
dengan spektrum penyerapan kloroplas utuh dengan cukup baik,
menunjukkan bahwa penyerapan cahaya oleh klorofil memediasi
evolusi oksigen. Perbedaan ditemukan di wilayah penyerapan
karotenoid, dari 450 hingga 550 nm, menunjukkan transfer dari
karotenoid ke klorofil.
diperlukan sebagai transfer energi antara klorofil.

Spektrum Aksi Menghubungkan Penyerapan Cahaya

dengan Aktivitas Fotosintetik
Panjang gelombang cahaya (nm)
Penggunaan spektrum aksi telah menjadi pusat pengembangan
pemahaman kita saat ini tentang fotosintesis. NS 400 500 600 700
spektrum aksi menggambarkan besarnya respons sistem Spirogyra
Bakteri aerotaktik
biologis terhadap cahaya, sebagai fungsi panjang gelombang. sel
Misalnya, spektrum aksi untuk fotosintesis dapat dibangun dari Spiral
pengukuran evolusi oksigen pada panjang gelombang yang kloroplas
berbeda (Gambar 7.8). Seringkali spektrum aksi dapat
mengidentifikasi kromofor (pigmen) yang bertanggung jawab
atas fenomena tertentu yang diinduksi cahaya.
Beberapa spektrum aksi pertama diukur oleh TW Engelmann
pada akhir 1800-an (Gambar 7.9). Engelmann menggunakan prisma
untuk menyebarkan sinar matahari menjadi pelangi yang dibiarkan
jatuh pada filamen alga akuatik. Suatu populasi
dari O2-mencari bakteri dimasukkan ke dalam sistem. NS

Prisma
GAMBAR 7.9 Diagram skema pengukuran spektrum aksi oleh TW Engelmann.
Engelmann memproyeksikan spektrum cahaya ke kloroplas spiral dari alga hijau
berserabutSpirogyra dan mengamati bahwa bakteri pencari oksigen yang dimasukkan
ke dalam sistem dikumpulkan di wilayah spektrum di mana pigmen klorofil menyerap. Lampu
Spektrum aksi ini memberikan indikasi pertama tentang efektivitas cahaya yang
diserap oleh pigmen aksesori dalam mendorong fotosintesis.

bakteri berkumpul di daerah filamen yang
paling berkembang O2. Ini adalah daerah yang diterangi oleh
cahaya biru dan cahaya merah, yang sangat diserap oleh
klorofil. Hari ini, spektrum aksi dapat diukur dalam
spektrograf berukuran ruangan di mana monokromator
besar memandikan sampel eksperimental dalam cahaya
monokromatik. Tetapi prinsip eksperimennya sama dengan
eksperimen Engelmann.
Spektrum aksi sangat penting untuk penemuan
dua fotosistem berbeda yang beroperasi di O2-organisme fotosintesis
yang berkembang. Sebelum kami memperkenalkan dua pho-
tosystems, bagaimanapun, kita perlu menggambarkan antena
pengumpul cahaya dan kebutuhan energi fotosintesis.
Fotosintesis Berlangsung di Kompleks
yang Mengandung Antena Pemanen
Cahaya dan Pusat Reaksi Fotokimia
Sebagian energi cahaya yang diserap oleh klorofil dan
karotenoid akhirnya disimpan sebagai energi kimia melalui
pembentukan ikatan kimia. Konversi energi dari satu
bentuk ke bentuk lain ini merupakan proses kompleks yang
bergantung pada kerja sama antara banyak molekul
pigmen dan sekelompok protein transfer elektron.
Sebagian besar pigmen berfungsi sebagai kompleks
antena, mengumpulkan cahaya dan mentransfer energi ke
kompleks pusat reaksi, di mana reaksi oksidasi dan reduksi
kimia yang mengarah pada penyimpanan energi jangka
panjang berlangsung (Gambar 7.10). Struktur molekul dari
beberapa antena dan kompleks pusat reaksi dibahas nanti
dalam bab.
Transfer energi Transfer elektron
Lampu
Molekul pigmen akseptor
e-
O2 produced per flash
Reaksi
Tengah
e-
Kompleks antena Penyumbang
GAMBAR 7.10 Konsep dasar transfer energi selama fotosintesis.
Banyak pigmen bersama-sama berfungsi sebagai antena,
mengumpulkan cahaya dan mentransfer energinya ke pusat
reaksi, di mana reaksi kimia menyimpan sebagian energi
dengan mentransfer elektron dari pigmen klorofil ke molekul
akseptor elektron. Donor elektron kemudian mereduksi klorofil
lagi. Pemindahan energi dalam antena adalah fenomena fisik
murni dan tidak melibatkan perubahan kimia.
Fotosintesis: Reaksi Terang 117
Bagaimana manfaat tanaman dari pembagian kerja antara
antena dan pigmen pusat reaksi ini? Bahkan di bawah sinar
matahari yang cerah, molekul klorofil hanya menyerap
beberapa foton setiap detik. Jika setiap klorofil memiliki pusat
reaksi lengkap yang terkait dengannya, enzim-enzim yang
menyusun sistem ini akan sering menganggur, hanya kadang-
kadang diaktifkan oleh penyerapan foton. Namun, jika banyak
pigmen dapat mengirim energi ke pusat reaksi umum, sistem
tetap aktif dalam waktu yang lama.
Pada tahun 1932, Robert Emerson dan William Arnold
melakukan eksperimen kunci yang memberikan bukti pertama
untuk kerjasama banyak molekul klorofil dalam konversi energi
selama fotosintesis. Mereka menyampaikan dengan sangat
singkat (10–5 s) kilatan cahaya ke suspensi alga hijau
Chlorella pyrenoidosa dan mengukur jumlah oksigen yang
dihasilkan. Kilatan berjarak sekitar 0,1 detik, waktu yang telah
ditentukan Emerson dan Arnold dalam pekerjaan sebelumnya
cukup lama untuk langkah-langkah enzimatik dari proses untuk
diselesaikan sebelum kedatangan kilatan berikutnya. Para
peneliti memvariasikan energi kilatan dan menemukan bahwa
pada energi tinggi produksi oksigen tidak meningkat ketika
kilatan yang lebih intens diberikan: Sistem fotosintesis jenuh
dengan cahaya (Gambar 7.11).
Dalam pengukuran hubungan produksi oksigen dengan
energi flash, Emerson dan Arnold terkejut menemukan
bahwa dalam kondisi jenuh, hanya satu molekul oksigen
yang dihasilkan untuk setiap 2.500 molekul klorofil dalam
sampel. Kita tahu sekarang bahwa beberapa ratus pigmen
terkait dengan setiap pusat reaksi dan bahwa setiap pusat
reaksi harus beroperasi empat kali
Hasil maksimum = 1 O2 / 2500 molekul klorofil
Kemiringan awal = hasil kuantum
1 O2 / 9–10 kuantum yang diserap
Intensitas rendah Intensitas tinggi
Energi flash (jumlah foton)
GAMBAR 7.11 Hubungan produksi oksigen dengan
energi flash, bukti pertama interaksi antara pigmen
antena dan pusat reaksi. saat jenuh
energi, jumlah maksimum O2 dihasilkan adalah 1 molekul
per 2500 molekul klorofil.
118 Bab 7
untuk menghasilkan satu molekul oksigen—maka nilai
2500 klorofil per O2.
Pusat reaksi dan sebagian besar kompleks antena
merupakan komponen integral dari membran fotosintesis.
Pada organisme fotosintetik eukariotik, membran ini
ditemukan di dalam kloroplas; pada prokariota fotosintesis,
tempat fotosintesis adalah membran plasma atau
membran yang berasal darinya.
Grafik yang ditunjukkan pada Gambar 7.11 memungkinkan kita
untuk menghitung parameter penting lainnya dari reaksi terang
fotosintesis, hasil kuantum. NShasil kuantum dari foto-
sintesis (F) didefinisikan sebagai berikut:
F = Jumlah produk fotokimia
Jumlah total kuanta yang diserap
Di bagian linier (intensitas cahaya rendah) dari kurva,
peningkatan jumlah foton merangsang peningkatan
proporsional dalam evolusi oksigen. Jadi kemiringan kurva
mengukur hasil kuantum untuk produksi oksigen. Hasil
kuantum untuk proses tertentu dapat berkisar dari 0 (jika
proses itu tidak merespons cahaya) hingga 1,0 (jika setiap
foton yang diserap berkontribusi pada proses). Diskusi
yang lebih rinci tentang hasil kuantum dapat ditemukan di
Topik Web 7.3.
Dalam kloroplas fungsional yang disimpan dalam cahaya
redup, hasil kuantum fotokimia adalah sekitar 0,95, hasil
kuantum fluoresensi adalah 0,05 atau lebih rendah, dan hasil
kuantum dari proses lain dapat diabaikan. Oleh karena itu,
sebagian besar molekul klorofil yang tereksitasi mengarah
pada fotokimia.
Reaksi Kimia Fotosintesis Didorong
oleh Cahaya
Penting untuk disadari bahwa kesetimbangan untuk reaksi kimia
yang ditunjukkan pada Persamaan 7.4 terletak sangat jauh pada
arah reaktan. Konstanta kesetimbangan untuk Persamaan 7.4,
dihitung dari tabel energi bebas pembentukan untuk masing-
masing senyawa yang terlibat, adalah sekitar 10–500. Angka ini
sangat dekat dengan nol sehingga orang bisa yakin bahwa
sepanjang sejarah alam semesta tidak ada molekul glukosa
terbentuk secara spontan dari H2O dan CO2 tanpa energi
eksternal yang disediakan. Energi yang dibutuhkan untuk
penggerak reaksi fotosintesis berasal dari cahaya. ini
bentuk Persamaan 7.4 yang lebih sederhana:
nt (CH2O) + O2
BERSAMA2 +H2HAI   L  aku g  ht, tempat→
dimana (CH2O) adalah seperenam dari molekul glukosa. Sekitar sembilan atau
sepuluh foton cahaya diperlukan untuk menggerakkan reaksi.
Persamaan 7.6.
Meskipun hasil kuantum fotokimia dalam kondisi
optimum hampir 100%, efisiensi konversi cahaya menjadi
energi kimia jauh lebih sedikit. Jika merah
cahaya dengan panjang gelombang 680 nm diserap, total
energi yang masuk (lihat Persamaan 7.2) adalah 1760 kJ per
mol oksigen yang terbentuk. Jumlah energi ini lebih dari cukup
untuk mendorong reaksi dalam Persamaan 7.6, yang memiliki
perubahan energi bebas keadaan standar +467 kJ mol-1. Oleh
karena itu, efisiensi konversi energi cahaya pada panjang
gelombang optimal menjadi energi kimia sekitar 27%, yang
sangat tinggi untuk sistem konversi energi. Sebagian besar
energi yang tersimpan ini digunakan untuk proses
pemeliharaan sel; jumlah yang dialihkan ke pembentukan
biomassa jauh lebih sedikit (lihat Gambar 9.2).
Tidak ada konflik antara fakta bahwa efisiensi kuantum
fotokimia (hasil kuantum) hampir 1 (100%) dan efisiensi
konversi energi hanya 27%. NSefisiensi kuantum adalah
(7.5)
ukuran fraksi foton yang diserap yang terlibat dalam
fotokimia; NS
efisiensi energi adalah ukuran seberapa banyak energi dalam
foton yang diserap disimpan sebagai produk kimia. Angka-
angka menunjukkan bahwa hampir semua foton yang diserap
terlibat dalam fotokimia, tetapi hanya sekitar seperempat dari
energi di setiap foton yang disimpan, sisanya diubah menjadi
panas.
Cahaya Mendorong Reduksi NADP dan
Pembentukan ATP
Keseluruhan proses fotosintesis adalah reaksi kimia redoks, di
mana elektron dikeluarkan dari satu spesies kimia, sehingga
mengoksidasinya, dan ditambahkan ke spesies lain, sehingga
menguranginya. Pada tahun 1937, Robert Hill menemukan
bahwa dalam cahaya, tilakoid kloroplas yang terisolasi
mereduksi berbagai senyawa, seperti garam besi. Senyawa ini
berfungsi sebagai oksidan menggantikan CO2, seperti yang ditunjukkan persamaan
berikut:
4 Fe3+ + 2 H2HAI → 4 Fe2+ + HAI2 + 4 H+ (7.7)
Banyak senyawa sejak itu telah terbukti bertindak sebagai
akseptor elektron buatan dalam apa yang kemudian dikenal
sebagai reaksi Hill. Penggunaannya sangat berharga dalam
menjelaskan reaksi yang mendahului reduksi karbon.
Kita sekarang tahu bahwa selama fungsi normal dari
sistem fotosintesis, cahaya mereduksi nikotinamida adenin
dinukleotida fosfat (NADP), yang pada gilirannya berfungsi
sebagai zat pereduksi untuk fiksasi karbon dalam siklus
Calvin (lihat Bab 8). ATP juga terbentuk selama aliran
elektron dari air ke NADP, dan juga digunakan dalam
reduksi karbon.
(7.6)
Reaksi kimia di mana air dioksidasi menjadi oksigen,
NADP berkurang, dan ATP terbentuk dikenal sebagai reaksi
tilakoid karena hampir semua reaksi hingga reduksi NADP
berlangsung di dalam tilakoid. Reaksi fiksasi dan reduksi
karbon disebut reaksi
reaksi stroma karena reaksi reduksi karbon terjadi di
daerah berair kloroplas, stroma.

Hasil kuantum
0.1
Quantum yield of
photosynthesis
Penyerapan
0,05 spektrum
0
400 500 600 700
Panjang gelombang (nm)
Spektrum yang terlihat
GAMBAR 7.12 Efek jatuh merah. Hasil kuantum foto-
sintesis (kurva hitam) turun drastis untuk cahaya merah jauh dengan panjang
gelombang lebih besar dari 680 nm, menunjukkan bahwa cahaya merah jauh
saja tidak efisien dalam mendorong fotosintesis. Sedikit penurunan di dekat
500 nm mencerminkan efisiensi fotosintesis yang agak lebih rendah
menggunakan cahaya yang diserap oleh pigmen aksesori, karotenoid.
Meskipun pembagian ini agak sewenang-wenang, secara
konseptual berguna.
Organisme yang Berkembang dengan Oksigen Memiliki
Dua Fotosistem Yang Beroperasi Secara Seri
Pada akhir 1950-an, beberapa eksperimen membingungkan para
ilmuwan yang mempelajari fotosintesis. Salah satu eksperimen
yang dilakukan oleh Emerson, mengukur hasil kuantum fotosintesis
sebagai fungsi panjang gelombang dan mengungkapkan efek yang
dikenal sebagai tetesan merah (Gambar 7.12).
Jika hasil kuantum diukur untuk panjang gelombang di
mana klorofil menyerap cahaya, nilai yang ditemukan di
sebagian besar rentang cukup konstan, menunjukkan bahwa
setiap foton yang diserap oleh klorofil atau pigmen lain sama
efektifnya dengan foton lainnya dalam mendorong fotosintesis.
Namun, hasil turun drastis di daerah merah jauh dari
penyerapan klorofil (lebih besar dari 680 nm).
Penurunan ini tidak dapat disebabkan oleh penurunan penyerapan
klorofil karena hasil kuantum hanya mengukur cahaya yang benar-benar telah
diserap. Dengan demikian, cahaya dengan panjang gelombang lebih besar
dari 680 nm jauh kurang efisien daripada cahaya dengan panjang gelombang
lebih pendek.
Hasil eksperimen membingungkan lainnya adalah efek
peningkatan, juga ditemukan oleh Emerson. Dia mengukur laju
fotosintesis secara terpisah dengan cahaya dari dua panjang
gelombang yang berbeda dan kemudian menggunakan dua sinar
secara bersamaan (Gambar 7.13). Ketika cahaya merah dan merah
jauh diberikan bersama-sama, laju fotosintesis lebih besar daripada
jumlah laju individu. Ini adalah pengamatan yang mengejutkan dan
mengejutkan.
Fotosintesis: Reaksi Terang 119
photosynthesis
Relative rate of
merah jauh Mati lampu merah Mati Keduanya Mati
Lampu menyala pada lampu menyala
Waktu
GAMBAR 7.13 Efek peningkatan. Laju fotosintesis ketika cahaya
merah dan merah jauh diberikan bersama-sama lebih besar
daripada jumlah laju ketika mereka dipisahkan. Efek
peningkatan memberikan bukti penting yang mendukung
konsep bahwa fotosintesis dilakukan oleh dua sistem
fotokimia yang bekerja bersama-sama tetapi dengan panjang
gelombang optima yang sedikit berbeda.
Pengamatan ini akhirnya dijelaskan oleh eksperimen yang
dilakukan pada 1960-an (lihat WebTopik 7.4) yang mengarah
pada penemuan bahwa dua kompleks fotokimia, sekarang
dikenal sebagai fotosistem I dan II (PSI dan PSII), beroperasi
secara seri untuk melakukan reaksi penyimpanan energi awal
fotosintesis.
Fotosistem I lebih suka menyerap cahaya merah jauh dengan
panjang gelombang lebih besar dari 680 nm; fotosistem II secara
istimewa menyerap cahaya merah 680 nm dan didorong sangat
buruk oleh cahaya merah jauh. Ketergantungan panjang
gelombang ini menjelaskan efek peningkatan dan efek penurunan
merah. Perbedaan lain antara fotosistem adalah bahwa
• Fotosistem I menghasilkan reduktor kuat, mampu
mereduksi NADP+, dan oksidan lemah.
• Fotosistem II menghasilkan oksidan yang sangat kuat, mampu
mengoksidasi air, dan reduktor yang lebih lemah daripada
yang dihasilkan oleh fotosistem I.
Reduktor yang dihasilkan oleh fotosistem II mereduksi
oksidan yang dihasilkan oleh fotosistem I. Sifat-sifat kedua
fotosistem ini ditunjukkan secara skematis pada Gambar
7.14.
Skema fotosintesis yang digambarkan pada Gambar 7.14,
disebut Z (untuk zigzag) skema, telah menjadi dasar untuk
memahami O2-organisme fotosintesis yang berkembang
(oksigen). Ini menjelaskan pengoperasian dua fisik
dan fotosistem yang berbeda secara kimiawi (I dan II), masing-
masing dengan pigmen antena dan pusat reaksi fotokimianya
sendiri. Kedua fotosistem dihubungkan oleh rantai transpor
elektron.
 120 Bab 7

e-
Kuat
Reducing

700rb* NADP+
reduktor

Lemah e- NADPH
reduktor P680* e-
Elektron
Redox potential

mengangkut e-
merah jauh
rantai
lampu
H2HAI
e- 700rb
e-
Lemah
lampu merah
HAI2 + H+ pengoksidasi

P680 Fotosistem I
Oxidizing

Kuat
pengoksidasi
GAMBAR 7.14 Skema Z fotosintesis. Cahaya merah yang
diserap oleh fotosistem II (PSII) menghasilkan oksidan kuat
Fotosistem II dan reduktor lemah. Cahaya merah jauh yang diserap oleh
fotosistem I (PSI) menghasilkan oksidan lemah dan
reduktor kuat. Oksidan kuat yang dihasilkan oleh PSII
mengoksidasi air, sedangkan reduktor kuat yang
dihasilkan oleh PSI mereduksi NADP+. Skema ini
merupakan dasar untuk memahami transpor elektron
fotosintesis. P680 dan P700 mengacu pada panjang
gelombang penyerapan maksimum klorofil pusat reaksi di
PSII dan PSI, masing-masing.

ORGANISASI
ALAT FOTOSINTETIK
Bagian sebelumnya menjelaskan beberapa prinsip fisika
yang mendasari fotosintesis, beberapa aspek peran
fungsional berbagai pigmen, dan beberapa reaksi kimia
yang dilakukan oleh organisme fotosintetik. Sekarang kita
beralih ke arsitektur peralatan fotosintesis dan struktur Stroma
komponennya. lamela
(bukan

Kloroplas Adalah Tempat Fotosintesis ditumpuk)

Pada eukariota fotosintesis, fotosintesis terjadi di organel Luar dan

batin
subseluler yang dikenal sebagai kloroplas. Gambar 7.15 membran
menunjukkan mikrograf elektron transmisi dari bagian tipis
Tilakoid
dari kloroplas kacang polong. Aspek yang paling mencolok
dari struktur kloroplas adalah sistem luas membran
internal yang dikenal sebagai:tilakoid. Semua klorofil
terkandung dalam sistem membran ini, yang merupakan Grana
lamela
tempat berlangsungnya reaksi terang fotosintesis. (bertumpuk)
Reaksi reduksi karbon, yang dikatalisis oleh enzim yang
larut dalam air, berlangsung di stroma (jamak
stroma), daerah kloroplas di luar tilakoid. Sebagian besar
tilakoid tampaknya sangat erat terkait satu sama lain. Stroma

Membran bertumpuk ini dikenal sebagaigrana lamela (

tunggal lapisan tipis; setiap tumpukan disebut nenek), dan
membran terbuka di mana tidak ada penumpukan dikenal
sebagai stroma lamela.
Dua membran terpisah, masing-masing terdiri dari lapisan
GAMBAR 7.15 Mikrograf elektron transmisi kloroplas dari
ganda lipid dan bersama-sama dikenal sebagai amplop, jenis
kacang polong (Pisum sativum), tetap dalam glutaraldehida
kloroplas yang paling umum (Gambar 7.16). Sistem membran danOsO4, tertanam dalam resin plastik, dan diiris tipis dengan
ganda ini mengandung berbagai sistem transpor metabolit. ultramikrotom. (14.500×) (Atas perkenan J. Swafford.)
 Fotosintesis: Reaksi Terang 121

Stroma Kloroplas juga mengandung DNA,

Ruang antar-membran
lamela
(situs PSI) RNA, dan ribosomnya sendiri. Banyak
dari protein kloroplas adalah produk
Tilakoid Luar transkripsi dan translasi di dalam
amplop
kloroplas itu sendiri, sedangkan yang
lain dikodekan oleh DNA inti,
disintesis pada ribosom sitoplasma,
Grana lamellae dan kemudian diimpor ke dalam
(tumpukan kloroplas. Pembagian kerja yang luar
tilakoid dan
situs PSII) biasa ini, dalam banyak kasus meluas
ke subunit yang berbeda dari
Tilakoid kompleks enzim yang sama, akan
Stroma dibahas lebih rinci nanti dalam bab
Tilakoid ini. Untuk beberapa struktur dinamis
lumen Stroma
Batin lapisan tipis kloroplas lihatEsai Web 7.1.
Granum
amplop (tumpukan tilakoid)

GAMBAR 7.16 Gambar skematis dari keseluruhan organisasi anggota
bran dalam kloroplas. Kloroplas tumbuhan tingkat tinggi dikelilingi oleh
membran dalam dan luar (amplop). Daerah kloroplas yang berada di dalam
membran dalam dan mengelilingi membran tilakoid dikenal sebagai stroma.
Ini berisi enzim yang mengkatalisis fiksasi karbon dan jalur biosintetik
lainnya. Membran tilakoid sangat terlipat dan muncul dalam banyak gambar
untuk ditumpuk seperti koin, meskipun pada kenyataannya mereka
membentuk satu atau beberapa sistem membran interkoneksi besar, dengan
interior dan eksterior yang terdefinisi dengan baik sehubungan dengan
stroma. Ruang dalam di dalam tilakoid dikenal sebagai
lumen. (Setelah Becker 1986.)
Tilakoid
Tilakoid
lumen
Stroma
Amino
ujung
Tilakoid (NH2)
selaput
Tilakoid Mengandung
Protein Membran Integral
Berbagai macam protein penting untuk
fotosintesis tertanam dalam membran
tilakoid. Dalam banyak kasus, bagian dari
protein ini meluas ke daerah berair di kedua
sisi tilakoid. Iniprotein membran integral
mengandung sebagian besar asam amino
hidrofobik dan karena itu jauh lebih stabil
dalam media tidak berair seperti bagian
hidrokarbon dari membran (lihat Gambar
1.5A).
Pusat reaksi, antena pig-
kompleks protein-mentasi, dan sebagian besar enzim transpor
elektron semuanya merupakan protein membran integral.
Dalam semua kasus yang diketahui, protein membran integral
kloroplas memiliki orientasi unik di dalam membran. Protein
membran tilakoid memiliki satu wilayah yang mengarah ke sisi
stroma membran dan yang lainnya mengarah ke bagian dalam
tilakoid, yang dikenal sebagai protein membran tilakoid.lumen (
lihat Gambar 7.16 dan 7.17).
Klorofil dan pigmen pengumpul cahaya aksesori dalam
membran tilakoid selalu berhubungan secara nonkovalen
tetapi sangat spesifik dengan protein. Baik antena dan
klorofil pusat reaksi dikaitkan dengan protein yang diatur
dalam membran untuk mengoptimalkan transfer energi di
kompleks antena dan transfer elektron di pusat reaksi,
sementara pada saat yang sama meminimalkan proses
yang sia-sia.

GAMBAR 7.17 Pola lipatan yang diprediksi dari protein D1

dari pusat reaksi PSII. Bagian hidrofobik membran dilalui
lima kali oleh rantai peptida yang kaya akan residu asam
amino hidrofobik. Protein tersusun secara asimetris dalam
membran tilakoid, dengan
karboksil amino (NH2) terminal di sisi stroma membran dan terminal
Tilakoid ujung karboksil (COOH) di sisi lumen.
lumen (COOH)
(Setelah Trebst 1986.)
122 Bab 7
STROMA Tilakoid
selaput
LUMEN
LHCII Sitokrom PSII PSI ATP sintase
pemangkas B6F dimer
Fotosistem I dan II Terpisah Secara Spasial
di Membran Tilakoid
Pusat reaksi PSII, bersama dengan antena klorofil dan
protein transpor elektron terkait, terletak terutama di grana
lamellae (Gambar 7.18) (Allen dan Forsberg 2001).
Pusat reaksi PSI dan pigmen antena yang terkait dan
protein transfer elektron, serta enzim faktor kopling yang
mengkatalisis pembentukan ATP, ditemukan hampir secara
eksklusif di lamela stroma dan di
tepi grana lamellae. SitokromB6 F kompleks rantai transpor
elektron yang menghubungkan
dua fotosistem (lihat Gambar 7.21) tersebar merata antara
stroma dan grana.
Jadi dua peristiwa fotokimia yang terjadi di
HAI2-fotosintesis berkembang dipisahkan secara spasial. Pemisahan ini
menyiratkan bahwa satu atau lebih pembawa elektron
bahwa fungsi antara fotosistem berdifusi dari daerah grana
membran ke daerah stroma, tempat elektron dikirim ke
fotosistem I.
Dalam PSII, oksidasi dua molekul air menghasilkan
empat elektron, empat proton, dan satu O2 (lihat Persamaan
7.8). Proton yang dihasilkan oleh oksidasi air ini harus
juga dapat berdifusi ke daerah stroma, tempat ATP
disintesis. Peran fungsional dari pemisahan besar ini
(puluhan nanometer) antara fotosistem I dan II tidak
sepenuhnya jelas tetapi diperkirakan meningkatkan
efisiensi distribusi energi antara dua fotosistem (Trissl dan
Wilhelm 1993; Allen dan Forsberg 2001).
GAMBAR 7.18 Organisasi kompleks protein thy-
membran lakoid. Fotosistem II terletak terutama di daerah tumpukan
membran tilakoid; fotosistem I dan ATP sintase ditemukan di daerah
yang tidak ditumpuk yang menonjol ke dalam
stroma. sitokromB6 F kompleks terdistribusi secara merata.
Pemisahan lateral kedua fotosistem ini membutuhkan elektron
dan proton yang dihasilkan oleh fotosistem II diangkut dalam jarak
yang cukup jauh sebelum dapat ditindaklanjuti oleh fotosistem I dan
enzim pengganda ATP. (Setelah Allen dan Forsberg 2001.)
Pemisahan spasial antara fotosistem I dan II
menunjukkan bahwa stoikiometri satu-ke-satu yang ketat
antara kedua fotosistem tidak diperlukan. Sebagai
gantinya, pusat reaksi PSII memasukkan ekuivalen
pereduksi ke dalam kumpulan perantara umum pembawa
elektron terlarut (plastoquinone), yang akan dijelaskan
secara rinci nanti dalam bab ini. Pusat reaksi PSI
menghilangkan ekuivalen pereduksi dari kumpulan umum,
bukan dari kompleks pusat reaksi PSII tertentu.
Sebagian besar pengukuran jumlah relatif fotosistem I dan
II telah menunjukkan bahwa ada kelebihan fotosistem II dalam
kloroplas. Paling umum, rasio PSII terhadap PSI adalah sekitar
1,5:1, tetapi dapat berubah ketika tanaman ditanam dalam
kondisi cahaya yang berbeda.
Bakteri Fotosintetik Anoksigenik Memiliki Pusat
Reaksi yang Mirip dengan Fotosistem II
Tidak tidak2-organisme berkembang (anoksigenik), seperti
bakteri fotosintetik ungu dari genus Rhodobakter dan
Rhodopseudomonas, hanya mengandung satu fotosistem.
Organisme yang lebih sederhana ini sangat berguna untuk studi
struktural dan fungsional terperinci yang telah berkontribusi pada
pemahaman yang lebih baik tentang fotosintesis oksigen.
Hartmut Michel, Johann Deisenhofer, Robert Huber, dan
rekan kerja di Munich menyelesaikan struktur tiga dimensi
pusat reaksi dari bakteri fotosintetik ungu
Rhodopseudomonas viridis (Deisenhofer dan Michel 1989).
Pencapaian penting ini, di mana Hadiah Nobel diberikan
pada tahun 1988, adalah resolusi tinggi pertama

lution, penentuan struktural sinar-X untuk protein membran
integral, dan penentuan struktural pertama untuk kompleks
pusat reaksi (lihat Gambar 7.5.A dan 7.5.B dalamTopik Web
7.5). Analisis rinci dari struktur ini, bersama dengan
karakterisasi banyak mutan, telah mengungkapkan banyak
prinsip yang terlibat dalam proses penyimpanan energi yang
dilakukan oleh semua pusat reaksi.
Struktur pusat reaksi bakteri dianggap serupa dalam
banyak hal dengan yang ditemukan di fotosistem II dari
organisme yang berevolusi oksigen, terutama di bagian
akseptor elektron dari rantai. Protein yang membentuk inti
dari pusat reaksi bakteri relatif mirip dalam urutan dengan
rekan-rekan fotosistem II mereka, menyiratkan keterkaitan
evolusioner.
ORGANISASI SISTEM ANTENA
PENYERAP CAHAYA
Sistem antena dari berbagai kelas organisme fotosintesis
sangat bervariasi, berbeda dengan pusat reaksi, yang tampak
serupa bahkan pada organisme yang berkerabat jauh.
Keragaman kompleks antena mencerminkan adaptasi
evolusioner terhadap lingkungan yang beragam di mana
organisme yang berbeda hidup, serta kebutuhan beberapa
organisme untuk menyeimbangkan masukan energi ke dua
fotosistem (Grossman et al. 1995; Green dan Durnford 1996).
Sistem antena berfungsi untuk menghantarkan energi
secara efisien ke pusat-pusat reaksi yang berhubungan
dengannya (van Grondelle et al. 1994; Pullerits dan
Sundström 1996). Ukuran sistem antena sangat bervariasi
pada organisme yang berbeda, mulai dari 20 hingga 30
bakterioklorofil per pusat reaksi pada beberapa bakteri
fotosintetik, hingga umumnya 200 hingga 300 klorofil per
pusat reaksi pada tumbuhan tingkat tinggi, hingga
beberapa ribu pigmen per pusat reaksi. pada beberapa
jenis alga dan bakteri. Struktur molekul pigmen antena juga
cukup beragam, meskipun semuanya terkait dalam
beberapa cara dengan membran fotosintesis.
Mekanisme fisik dimana energi eksitasi disampaikan dari
klorofil yang menyerap cahaya ke pusat reaksi dianggap
perpindahan resonansi. Dengan mekanisme ini energi
eksitasi ditransfer dari satu molekul ke molekul lain melalui
proses nonradiatif.
Analogi yang berguna untuk transfer resonansi adalah transfer
energi antara dua garpu tala. Jika satu garpu tala dipukul dan
ditempatkan dengan benar di dekat garpu tala lainnya, garpu tala
kedua menerima energi dari garpu tala pertama dan mulai
bergetar. Seperti dalam transfer energi resonansi dalam kompleks
antena, efisiensi transfer energi antara dua garpu tala tergantung
pada jarak mereka satu sama lain dan orientasi relatifnya, serta
nada atau frekuensi getarannya.
Transfer energi dalam kompleks antena sangat efisien:
Sekitar 95 hingga 99% foton yang diserap oleh pigmen
antena memiliki energi yang ditransfer ke pusat reaksi, di
mana ia dapat digunakan untuk fotokimia. Ada perbedaan
penting antara transfer energi antara
Fotosintesis: Reaksi Terang 123
pigmen di antena dan transfer elektron yang terjadi di
pusat reaksi: Sementara transfer energi adalah fenomena
fisik murni, transfer elektron melibatkan perubahan kimia
dalam molekul.
Antena Menyalurkan Energi ke
Pusat Reaksi
Urutan pigmen di dalam antena yang menyalurkan energi yang
diserap menuju pusat reaksi memiliki serapan maksimum yang
secara progresif bergeser ke arah panjang gelombang merah
yang lebih panjang (Gambar 7.19). Pergeseran merah dalam
penyerapan maksimum ini berarti bahwa energi keadaan
tereksitasi agak lebih rendah di dekat pusat reaksi daripada di
bagian yang lebih perifer dari sistem antena.
Sebagai hasil dari pengaturan ini, ketika eksitasi ditransfer,
misalnya, dari klorofil Bmolekul menyerap maksimal pada 650
nm ke klorofil A molekul yang menyerap maksimal pada 670
nm, perbedaan energi antara dua klorofil yang tereksitasi ini
hilang ke lingkungan sebagai panas.
Agar eksitasi ditransfer kembali ke klorofil B, energi yang
hilang sebagai panas harus disuplai kembali. Probabilitas
transfer balik karena itu lebih kecil hanya karena energi
panas tidak cukup untuk menutupi defisit antara pigmen
energi yang lebih rendah dan energi yang lebih tinggi. Efek
ini memberikan proses perangkap energi derajat arah atau
ireversibilitas dan membuat pengiriman eksitasi ke pusat
reaksi lebih efisien. Pada dasarnya, sistem mengorbankan
sebagian energi dari setiap kuantum sehingga hampir
semua kuanta dapat terperangkap oleh pusat reaksi.
Banyak Kompleks Antena Memiliki Motif
Struktural yang Sama
Pada semua organisme fotosintetik eukariotik yang
mengandung klorofil A dan klorofil B, protein antena yang
paling melimpah adalah anggota keluarga besar protein
yang terkait secara struktural. Beberapa protein ini
terutama terkait dengan fotosistem II dan disebutlight-
harvesting complex II (LHCII) protein; yang lain terkait
dengan fotosistem I dan disebutLHCI protein. Kompleks
antena ini juga dikenal sebagaiklorofil a/b protein antena (
Paulsen 1995; Green dan Durnford 1996).
Struktur salah satu protein LHCII telah ditentukan
dengan kombinasi mikroskop elektron dan kristalografi
elektron (Gambar 7.20) (Kühlbrandt et al.
1994). Protein mengandung tiga-daerah heliks dan
mengikat sekitar 15 klorofil A dan B molekul, serta
beberapa karotenoid. Hanya beberapa dari pigmen ini yang
terlihat dalam struktur yang diselesaikan. Struktur protein
LHCI belum ditentukan tetapi mungkin mirip dengan
protein LHCII. Semua protein ini memiliki kesamaan urutan
yang signifikan dan hampir pasti merupakan keturunan
dari protein nenek moyang yang sama (Grossman et al.
1995; Green dan Durnford 1996).
Cahaya diserap oleh karotenoid atau klorofil B dalam
protein LHC dengan cepat ditransfer ke klorofil A dan
 124 Bab 7

(A) (B)

Tinggi
Lampu

Karotenoid*
Energi hilang
Karotenoid
Klorofil B* sebagai panas

Klorofil B Antena selama

kompleks perangsangan
Energy gradient

Klorofil A Klorofil A* transfer

Photon absorption
P680*

Energy
Energi dari
reaksi
Tengah
bergairah
negara
tersedia
untuk penyimpanan
P680 Reaksi
Tengah Energi keadaan dasar
Rendah

GAMBAR 7.19 Penyaluran eksitasi dari sistem antena

tem menuju pusat reaksi. (A) Energi keadaan tereksitasi
pigmen meningkat dengan jarak dari pusat reaksi; yaitu,
pigmen yang lebih dekat ke pusat reaksi memiliki energi yang
lebih rendah daripada yang lebih jauh dari pusat reaksi.
Gradien energi ini memastikan bahwa transfer eksitasi menuju STROMA Tilakoid
pusat reaksi secara energetik menguntungkan dan transfer
selaput
eksitasi kembali ke bagian periferal antena secara energetik
tidak menguntungkan. (B) Sebagian energi hilang sebagai
panas ke lingkungan melalui proses ini, tetapi dalam kondisi
optimal hampir semua eksitasi yang diserap dalam kompleks
antena dapat dikirim ke pusat reaksi. Tanda bintang
menunjukkan keadaan tereksitasi.

kemudian ke pigmen antena lain yang terkait erat dengan

pusat reaksi. Kompleks LHCII juga terlibat dalam proses
regulasi, yang akan dibahas nanti dalam bab ini.

MEKANISME TRANSPORTASI ELEKTRON

Beberapa bukti yang mengarah pada gagasan dua reaksi fotokimia
yang beroperasi secara seri telah dibahas sebelumnya dalam bab
Klorofil A Karotenoid
ini. Di sini kita akan mempertimbangkan secara rinci reaksi kimia
Klorofil B
yang terlibat dalam transfer elektron selama fotosintesis. Kita
akan membahas tentang eksitasi klorofil LUMEN
oleh cahaya dan reduksi akseptor
elektron pertama, aliran elektron GAMBAR 7.20 Tampilan dua dimensi dari struktur antena LHCII
kompleks dari tumbuhan tingkat tinggi, ditentukan oleh kombinasi mikroskop
melalui fotosistem II dan I, oksidasi air
elektron dan kristalografi elektron. Seperti kristalografi sinar-X, kristalografi
sebagai sumber elektron utama, dan elektron menggunakan pola difraksi elektron berenergi lunak untuk
reduksi akseptor elektron terakhir menyelesaikan struktur makromolekul. Kompleks antena adalah protein
(NADP+). Mekanisme kemiosmotik yang pigmen transmembran, dengan tiga daerah heliks yang melintasi bagian
memediasi sintesis ATP akan dibahas nonpolar dari membran. Sekitar 15 klorofilA dan B molekul terkait dengan
kompleks, serta beberapa karotenoid. Posisi beberapa klorofil ditunjukkan,
secara rinci nanti dalam bab ini (lihat
dan dua karotenoid membentuk X di tengah kompleks. Di dalam membran,
“Transportasi Proton dan Sintesis ATP kompleksnya berbentuk trimerik dan beragregasi di sekitar pinggiran
dalam Kloroplas”). kompleks pusat reaksi PSII. (Setelah Kühlbrandt dkk. 1994.)
 Fotosintesis: Reaksi Terang 125

Elektron yang Dikeluarkan dari Klorofil Perjalanan Melalui
Serangkaian Pembawa Elektron yang Terorganisir dalam
“Skema Z”
Gambar 7.21 menunjukkan versi skema Z saat ini, di mana
semua pembawa elektron diketahui berfungsi dalam elektron.
aliran tron dari H2O ke NADP+ diatur secara vertikal pada titik
tengah potensial redoksnya (lihat WebTopik 7.6 untuk bulu-
ada detailnya). Komponen yang diketahui bereaksi satu sama
lain dihubungkan oleh panah, sehingga skema Z benar-benar
merupakan sintesis dari informasi kinetik dan termodinamika.
Panah vertikal besar mewakili masukan energi cahaya ke dalam
Hampir semua proses kimia yang membentuk reaksi
terang fotosintesis dilakukan oleh empat proses utama:
kompleks protein: fotosistem II, sitokrom B6 F kompleks,
fotosistem I, dan ATP sintase. Empat ini ber-
kompleks membran gral berorientasi vektor dalam membran
tilakoid untuk berfungsi sebagai berikut (Gambar 7.22):
• Fotosistem II mengoksidasi air menjadi O2 dalam lumen tilakoid
dan dalam prosesnya melepaskan proton ke dalam
lumen.
• Sitokrom B6 F menerima elektron dari PSII dan

sistem. mengirimkannya ke PSI. Itu juga mengangkut tambahan

Foton membangkitkan klorofil khusus dari pusat reaksi (P680

proton ke dalam lumen dari stroma.
untuk PSII, dan P700 untuk PSI), dan sebuah elektron dikeluarkan. • Fotosistem I mereduksi NADP+ menjadi NADPH di stroma
Elektron kemudian melewati serangkaian pembawa elektron dan melalui kerja ferredoxin (Fd) dan flavoprotein
akhirnya mereduksi P700 (untuk elektron dari PSII) atau NADP+ ferredoxin–NADP reductase (FNR).
(untuk elektron dari PSI). Banyak dari diskusi berikut
• ATP sintase menghasilkan ATP saat proton berdifusi kembali
menggambarkan perjalanan para pemilih ini.
melaluinya dari lumen ke stroma.
tron dan sifat pembawanya.

– 2.0
700rb* 5
A0
A1
– 1,5 FeSx
FeSA
FeSB
Fd 6
– 1.0 FNR

1 DP+
P680* tidak

– 0,5
Pheo NADPH
3 sitokrom
QA B6F kompleks

Cyt B
m

0 QB
Cyt B
Q
1
FeSR
0,5 H2HAI Cyt F Lampu
PC 700rb
4
Oksigen-
berkembang
2
1.0 kompleks
yz Lampu
P680
HAI2 + H+
1.5
Fotosistem II Fotosistem I

GAMBAR 7.21 Skema Z terperinci untuk O2-fotosintesis yang berkembang
organisme tetik. Pembawa redoks ditempatkan di tengah
titik potensial redoks (pada pH 7). (1) Panah vertikal mewakili
penyerapan foton oleh klorofil pusat reaksi: P680 untuk fotosistem
II (PSII) dan P700 untuk fotosistem I (PSI). Klorofil pusat reaksi PSII
yang tereksitasi, P680*, mentransfer elektron ke pheophytin (Pheo).
(2) Pada sisi pengoksidasi PSII (di sebelah kiri tanda panah yang
menghubungkan P680 dengan P680*), P680 yang dioksidasi oleh
cahaya direduksi kembali oleh
kamuz , yang telah menerima elektron dari oksidasi air. (3) Di
sisi pereduksi PSII (di sebelah kanan tanda panah bergabung-
ing P680 dengan P680*), pheophytin mentransfer elektron ke
akseptor QA dan QB, yaitu plastoquinone. (4)
sitokrom B6 F kompleks mentransfer elektron ke plastocyanin (PC),
protein larut, yang pada gilirannya mereduksi P700+ (oksi-
mati P700). (5) Penerima elektron dari P700* (A0) adalah
dianggap sebagai klorofil, dan akseptor berikutnya (A1) adalah
kuinon. Serangkaian protein besi-sulfur yang terikat membran
(FeSX, FeSA, dan FeSB) mentransfer elektron ke ferredoxin
terlarut (Fd). (6) Flavoprotein ferredoxin-NADP . yang larut
reduktase (FNR) mereduksi NADP+ menjadi NADPH, yang digunakan
dalam siklus Calvin untuk mereduksi CO2 (lihat Bab 8). Garis putus-putus
menunjukkan aliran elektron siklik di sekitar PSI. (Setelah
Blankenship dan Pangeran 1985.)
126 Bab 7

STROMA (H+ rendah) H+

NADP+ + H+ ADP + PSaya ATP

NADPH
Lampu Lampu
H+
FNR ATP
Fd sintase
Rendah

P680
700rb
PSII sitokrom
PQ PSI
B6F
e-
PQH2 e- e-

plastokuinon PC
Tinggi
H+ Elektrokimia
H2HAI H+ Plastocya nin potensi
HAI2 + H+
gradien
Oksidasi
air

LUMEN (H+ tinggi)

GAMBAR 7.22 Transfer elektron dan proton dalam membran
tilakoid dilakukan secara vektor oleh empat kompleks
protein. Air dioksidasi dan proton dilepaskan di lumen oleh
PSII. PSI mereduksi NADP+ menjadi NADPH di dalam
stroma, melalui aksi ferredoxin (Fd) dan flavoprotein
ferredoxin-NADP reductase (FNR). Proton juga diangkut ke
dalam lumen oleh aksi sitokrom
B6 F kompleks dan berkontribusi pada proton elektrokimia
gradien. Proton-proton ini kemudian harus berdifusi ke enzim
ATP sintase, di mana difusinya menuruni gradien potensial
elektrokimia digunakan untuk mensintesis ATP di
stroma. plastoquinone tereduksi (PQH .)2) dan plastosianin
mentransfer elektron ke sitokrom B6 F dan untuk PSI, masing-masing.
Garis putus-putus mewakili transfer elektron; garis padat
mewakili gerakan proton.

Sifat redoks tanah dan tereksitasi

keadaan pusat reaksi klorofil
Energi Diambil Ketika Klorofil Tereksitasi Miskin Bagus
Mengurangi Molekul Akseptor Elektron pengoksidasi akseptor Penyumbang mengurangi
agen orbit orbit agen
Seperti dibahas sebelumnya, fungsi cahaya adalah untuk
membangkitkan klorofil khusus di pusat reaksi, baik
dengan penyerapan langsung atau, lebih sering, melalui Lampu
transfer energi dari pigmen antena. Proses eksitasi ini
Miskin akseptor Bagus
dapat dibayangkan sebagai promosi elektron dari orbital
Penyumbang

mengurangi orbit orbit pengoksidasi

klorofil yang terisi energi tertinggi ke orbital yang tidak agen agen
terisi energi terendah (Gambar 7.23). Elektron di orbital atas Keadaan dasar Keadaan bersemangat

hanya terikat longgar pada klorofil dan mudah hilang jika
ada molekul yang dapat menerima elektron di dekatnya.
Reaksi pertama yang mengubah energi elektron menjadi
energi kimia—yaitu peristiwa fotokimia utama—adalah
transfer elektron dari keadaan tereksitasi klorofil di pusat
reaksi ke molekul akseptor. Cara yang setara untuk melihat
proses ini adalah bahwa foton yang diserap menyebabkan
penataan ulang elektron di klorofil pusat reaksi, diikuti oleh
proses transfer elektron di mana sebagian energi dalam
foton ditangkap dalam bentuk energi redoks.
Segera setelah peristiwa fotokimia, klorofil pusat reaksi
berada dalam keadaan teroksidasi (kekurangan elektron, atau
bermuatan positif) dan molekul akseptor elektron terdekat
klorofil klorofil
GAMBAR 7.23 Diagram pendudukan orbital untuk klorofil pusat
reaksi dan keadaan tereksitasi. Dalam keadaan dasar, molekul
adalah zat pereduksi yang buruk (kehilangan elektron dari orbital
berenergi rendah) dan zat pengoksidasi yang buruk (hanya
menerima elektron ke orbital berenergi tinggi). Dalam keadaan
tereksitasi situasinya terbalik, dan sebuah elektron dapat hilang
dari orbital berenergi tinggi, membuat molekul tersebut menjadi
agen pereduksi yang sangat kuat. Inilah alasan potensial redoks
keadaan tereksitasi yang sangat negatif yang ditunjukkan oleh
P680* dan P700* pada Gambar 7.21. Keadaan tereksitasi juga
dapat bertindak sebagai oksidan kuat dengan menerima elektron
ke orbital berenergi lebih rendah, meskipun jalur ini tidak
signifikan di pusat-pusat reaksi. (Setelah Blankenship dan Prince
1985.)

ecule berkurang (kaya elektron, atau bermuatan negatif). Sistem
sekarang berada pada titik kritis. Orbital berenergi lebih rendah
dari klorofil pusat reaksi teroksidasi bermuatan positif yang
ditunjukkan pada Gambar 7.23 memiliki kekosongan dan dapat
menerima elektron. Jika molekul akseptor menyumbangkan
elektronnya kembali ke pusat reaksi klorofil, sistem akan kembali ke
keadaan yang ada sebelum eksitasi cahaya, dan semua energi yang
diserap akan diubah menjadi panas.
Ini boros rekombinasi proses, bagaimanapun, tampaknya
tidak terjadi pada tingkat yang substansial di pusat-pusat reaksi
yang berfungsi. Sebaliknya, akseptor mentransfer elektron
ekstra ke akseptor sekunder dan seterusnya ke bawah rantai
transpor elektron. Pusat reaksi teroksidasi dari klorofil yang
telah menyumbangkan elektron direduksi kembali oleh donor
sekunder, yang pada gilirannya direduksi oleh tersier.
penyumbang. Pada tumbuhan, donor elektron utama adalah H2O, dan
akseptor elektron pamungkas adalah NADP+ (lihat Gambar 7.21).
Inti dari penyimpanan energi fotosintesis dengan
demikian adalah transfer awal elektron dari klorofil yang
tereksitasi ke molekul akseptor, diikuti oleh serangkaian
reaksi kimia sekunder yang sangat cepat yang memisahkan
muatan positif dan negatif. Reaksi sekunder ini
memisahkan muatan ke sisi berlawanan dari membran
tilakoid dalam waktu sekitar 200 picoseconds (1 picosecond
= 10–12 S). Dengan muatan yang terpisah demikian,
reaksi pembalikan banyak orde besarnya lebih lambat, dan
energi telah ditangkap. Setiap transfer elektron sekunder
disertai dengan hilangnya beberapa energi, sehingga
membuat proses tersebut secara efektif tidak dapat diubah.
Hasil kuantum untuk produksi produk stabil di pusat reaksi
murni dari bakteri fotosintetik telah diukur sebagai 1,0;
yaitu, setiap foton menghasilkan produk yang stabil, dan
tidak ada reaksi pembalikan yang terjadi.
Meskipun jenis pengukuran ini belum dilakukan pada
pusat reaksi murni dari tumbuhan tingkat tinggi,
persyaratan kuantum terukur untuk O2 produksi dalam kondisi
optimal (cahaya intensitas rendah) menunjukkan bahwa
nilai untuk peristiwa fotokimia utama sangat dekat dengan
1,0. Struktur pusat reaksi tampaknya sangat disesuaikan
untuk laju reaksi produktif maksimal dan laju minimal
reaksi pemborosan energi.
Klorofil Pusat Reaksi dari Dua Fotosistem Menyerap
pada Panjang Gelombang yang Berbeda
Seperti dibahas sebelumnya dalam bab ini, PSI dan PSII memiliki
karakteristik penyerapan yang berbeda. Pengukuran yang tepat
dari penyerapan maksimum dimungkinkan oleh perubahan optik di
klorofil pusat reaksi dalam keadaan tereduksi dan teroksidasi.
Klorofil pusat reaksi secara sementara dalam keadaan teroksidasi
setelah kehilangan elektron dan sebelum direduksi kembali oleh
donor elektronnya.
Dalam keadaan teroksidasi, serapan cahaya yang kuat di daerah
spektrum merah yang merupakan ciri klorofil hilang, atau
dikelantang. Oleh karena itu, dimungkinkan untuk memantau
keadaan redoks klorofil ini dengan penyelesaian waktu
Fotosintesis: Reaksi Terang 127
pengukuran absorbansi optik di mana pemutihan ini dipantau
secara langsung (lihat WebTopik 7.1).
Dengan menggunakan teknik tersebut, Bessel Kok
menemukan bahwa pusat reaksi klorofil fotosistem I menyerap
maksimal pada 700 nm dalam keadaan tereduksi. Oleh karena
itu, klorofil ini dinamaiRp700 (P adalah singkatan dari pigmen).
HT Witt dan rekan kerja menemukan transien optik analog dari
fotosistem II pada 680 nm, sehingga klorofil pusat reaksinya
dikenal sebagai P680. Sebelumnya, Louis Duysens telah
mengidentifikasi bakterioklorofil pusat reaksi dari bakteri
fotosintetik ungu sebagai: P870.
Struktur sinar-X dari pusat reaksi bakteri (lihat Gambar
7.5.A dan 7.5.B in WebTopik 7.5) jelas menunjukkan
bahwa P870 adalah pasangan atau dimer bakterioklorofil
yang berpasangan erat, bukan molekul tunggal. Donor
utama fotosistem I, P700, adalah dimer klorofilA
molekul. Fotosistem II juga mengandung dimer klorofil,
meskipun donor utama, P680, mungkin tidak sepenuhnya
berada pada pigmen ini. Dalam keadaan teroksidasi, klorofil
pusat reaksi mengandung elektron yang tidak berpasangan.
Molekul dengan elektron tidak berpasangan seringkali dapat
dideteksi dengan teknik resonansi magnetik yang dikenal
sebagai:resonansi spin elektron (ESR). Studi ESR, bersama
dengan pengukuran spektroskopi yang telah dijelaskan, telah
mengarah pada penemuan banyak pembawa elektron
perantara dalam sistem transpor elektron fotosintesis.
Pusat Reaksi Fotosistem II Adalah
Kompleks Pigmen-Protein Multisubunit
Fotosistem II terkandung dalam superkompleks protein
multisubunit (Gambar 7.24) (Barber et al. 1999). Pada
tumbuhan tingkat tinggi, superkompleks protein multisubunit
memiliki dua pusat reaksi lengkap dan beberapa kompleks
antena. Inti pusat reaksi terdiri dari dua protein membran yang
dikenal sebagai D1 dan D2, serta protein lainnya, seperti yang
ditunjukkan pada Gambar 7.25 (Zouni et al. 2001).
Klorofil donor utama (P680), klorofil tambahan,
karotenoid, feofitin, dan plastokuinon (dua akseptor
elektron yang dijelaskan pada bagian berikut) terikat pada
protein membran D1 dan D2. Protein ini memiliki beberapa
kesamaan urutan dengan peptida L dan M dari bakteri
ungu. Protein lain berfungsi sebagai kompleks antena atau
terlibat dalam evolusi oksigen. Beberapa, seperti
sitokrom B559, tidak memiliki fungsi yang diketahui tetapi mungkin
terlibat dalam siklus pelindung di sekitar fotosistem II.
Air Dioksidasi menjadi Oksigen oleh Fotosistem II
Air dioksidasi menurut reaksi kimia berikut:
(Hoganson dan Babcock 1997):
2 H2HAI → HAI2 + 4 H+ + 4 e- (7.8)
Persamaan ini menunjukkan bahwa empat elektron dikeluarkan
dari dua molekul air, menghasilkan satu molekul oksigen dan
empat ion hidrogen. (Untuk lebih lanjut tentang reaksi oksidasi-
reduksi, lihat Bab 2 di situs web danWebTopik 7.6.)
128 Bab 7
(A) (B)
CP43
D1
D2 CP47 D2
CP47 D2
D1
CP43
GAMBAR 7.24 Struktur protein multisubunit dimer
superkompleks fotosistem II dari tumbuhan tingkat tinggi, sebagaimana
ditentukan oleh mikroskop elektron. Gambar menunjukkan dua pusat reaksi
lengkap, yang masing-masing merupakan kompleks dimer.
(A) Susunan heliks dari subunit inti D1 dan D2 (merah) dan
CP43 dan CP47 (hijau). (B) Pemandangan dari lumenal
Air adalah molekul yang sangat stabil. Oksidasi air untuk
membentuk molekul oksigen sangat sulit, dan kompleks
fotosintesis oksigen-evolving adalah satu-satunya sistem
biokimia yang diketahui melakukan reaksi ini. Evolusi
oksigen fotosintesis juga merupakan sumber dari hampir
semua oksigen di atmosfer bumi.
Mekanisme kimia oksidasi air fotosintesis belum
diketahui, meskipun banyak penelitian telah memberikan
sejumlah besar informasi tentang proses tersebut (lihat
Topik Web 7.7 dan Gambar 7.26). Proton yang dihasilkan
oleh oksidasi air dilepaskan ke dalam lumen tilakoid, tidak
langsung ke kompartemen stroma (lihat Gambar 7.22).
Mereka dilepaskan ke dalam lumen karena sifat vektorial
membran dan fakta bahwa kompleks oksigen-evolving
terlokalisasi di bagian dalam.
(C)
CP26 LHCII
CP43 CP29
23
D1
CP47
33
CP47 D2
D1
CP29 CP43
LHCII CP26
sisi superkompleks, termasuk kompleks antena tambahan, LHCII, CP26
dan CP29, dan kompleks pengembangan oksigen ekstrinsik, ditunjukkan
sebagai lingkaran oranye dan kuning. Heliks yang tidak ditetapkan
ditampilkan dalam warna abu-abu. (C) Tampak samping kompleks yang
menggambarkan susunan protein ekstrinsik dari kompleks yang
berevolusi oksigen. (Setelah Barber et al. 1999.)
permukaan tilakoid. Proton-proton ini akhirnya ditransfer
dari lumen ke stroma melalui translokasi melalui ATP
sintase. Dengan cara ini, proton yang dilepaskan selama
oksidasi air berkontribusi pada potensi elektrokimia yang
mendorong pembentukan ATP.
Telah diketahui selama bertahun-tahun bahwa mangan (Mn)
adalah kofaktor penting dalam proses pengoksidasi air (lihat Bab 5),
dan hipotesis klasik dalam penelitian fotosintesis menyatakan
bahwa ion Mn mengalami serangkaian reaksi oksidasi.
tions—yang dikenal sebagai S menyatakan, dan diberi label S0, S1, S2,
S3, dan S4 (Lihat Topik Web 7.7)—yang mungkin terkait dengan
H2Oksidasi O dan pembentukan O2 (lihat Gambar 7.26).
Hipotesis ini mendapat dukungan kuat dari berbagai
eksperimen, terutama studi penyerapan sinar-X dan ESR, yang
keduanya mendeteksi mereka secara langsung (Yachandra
 GAMBAR 7.25 Struktur pusat reaksi fotosistem II dari
cyanobacterium Synechococcus elongatus, diselesaikan pada 3,8 .
Strukturnya mencakup protein pusat reaksi inti D1 dan D1,
Protein antena CP43 dan CP47, sitokrom B559 dan C550, protein
(A)
CP47 evolusi oksigen 33 kDa ekstrinsik PsbO, dan pigmen
dan kofaktor lainnya. Tujuh heliks yang belum ditetapkan ditampilkan dalam warna abu-abu.
(A) Pemandangan dari permukaan lumen, tegak lurus terhadap bidang
membran. (B) Tampak samping sejajar dengan bidang membran. (Setelah
Zouni dkk. 2001.)

(B)
PsbK/
Stroma Fe(Cyt B559)
PsbL
PsbH
chlzD2
psbl

D2
Cyt B559
D1
PsbX
chlzD1 Nonheme
besi α
CP47
β
mn cluster besi heme CP43
mn cluster
dari Cyt B559
PsbO
Fe
Cyt C550/PsbV
besi heme
dari Cyt C550

10 CP43
Lumen

GAMBAR 7.26 Model siklus keadaan S dari evolusi oksigen di PSII. Berturut-turut
tahap dalam oksidasi air melalui kompleks oksigen-evolving Mn ditampilkan. kamuz
adalah radikal tirosin yang merupakan pembawa elektron perantara antara P680 dan
kluster Mn. (Setelah Tommos dan Babcock 1998.)

O Mn O Mn O Mn
O Mn O kamuz
e- H+
, O Mn O kamuz
e- H+
, om tidak
HAI HAI HAI HAI HAI HAI HAI HAI
H H
HAI H H HAI H
H HAI H
HAI H H HAI H HAI H
HAI HAI HAI
O Mn HAI O Mn O O Mn O
O Mn Cl O Mn Cl O Mn Cl
HAI Ca HAI Ca HAI Ca
HAI OO HAI OO HAI OO
S0 S1 S2*

HAI2

2 H2HAI

Cl Cl

O Mn O Mn O Mn
O Mn O kamuz O Mn O kamuz
O Mn O
HAI HAI HAI HAI HAI HAI
HAI HAI
HAI HAI H HAI H H
HAI H HAI H HAI
HAI HAI
O Mn O O Mn O HAI O Mn O
O Mn e- , H+ O Mn e- H+
, O Mn
HAI Ca HAI Ca HAI Ca
OO OO OO
HAI HAI HAI
S4 S3 S2
130 Bab 7

dkk. 1996). Eksperimen analitis menunjukkan bahwa ion empatMn
terkait dengan setiap kompleks oksigen yang berevolusi. Eksperimen
lain menunjukkan bahwa Cl- dan Ca2+ ion sangat penting
untuk o2 evolusi (lihat Gambar 7.26 danWebTopik 7.7).
Satu pembawa elektron, umumnya diidentifikasi sebagai Yz,
fungsi antara kompleks oksigen-evolving dan P680 (lihat Gambar-
nomor 7.21 dan 7.26). Untuk berfungsi di wilayah ini, Yz harus memiliki
kecenderungan yang sangat kuat untuk mempertahankan elektronnya. Ini
spesies telah diidentifikasi sebagai radikal yang terbentuk dari
residu tirosin dalam protein D1 dari pusat reaksi PSII.
Feofitin dan Dua Kuinon Menerima Elektron
dari Fotosistem II
Bukti dari studi spektral dan ESR menunjukkan bahwa
pheophytin bertindak sebagai akseptor awal dalam
fotosistem II, diikuti oleh kompleks dua plastoquinone di
dekat atom besi. Feofitin adalah klorofil di mana atom
magnesium pusat telah digantikan oleh dua atom
hidrogen. Perubahan kimia ini memberikan sifat kimia dan
spektral feofitin yang sedikit berbeda dengan klorofil.
Susunan yang tepat dari pembawa dalam kompleks
akseptor elektron tidak diketahui, tetapi mungkin sangat
mirip dengan pusat reaksi bakteri ungu (untuk detailnya,
lihat Gambar 7.5.B diWebTopik 7.5).
Dua plastoquinone (QA dan QB) terikat pada pusat reaksi
dan menerima elektron dari feofitin dalam
mode berurutan (Okamura et al. 2000). Perpindahan keduanya
elektron ke QB menguranginya menjadi Q 2–
B , dan
Q . tereduksi 2–
mengambil dua proton dari sisi stroma medium,
menghasilkan pengurangan sepenuhnya plastohidrokuinon (QH2) (Angka
7.27). Plastohidrokuinon kemudian berdisosiasi dari
kompleks pusat reaksi dan memasuki bagian hidrokarbon dari
membran, di mana ia pada gilirannya mentransfer elektronnya ke
(A)
HAI CH3
H3C
(CH2 C CH CH2)9 H
H3C
HAI
sitokrom B6 F kompleks. Tidak seperti kompleks protein besar
pada membran tilakoid, hidrokuinon adalah protein kecil,
molekul nonpolar yang mudah berdifusi di inti nonpolar
dari bilayer membran.
Aliran Elektron Melalui Sitokrom B6F
Kompleks Juga Mengangkut Proton
NS sitokrom B6 F kompleks adalah protein multisubunit besar
dengan beberapa kelompok prostetik (Cramer et al. 1996;
Berry dkk. 2000). Ini berisi duaB-ketik heme dan satu C-
ketik hem (sitokrom F ). Di dalam C-jenis sitokrom heme secara
kovalen melekat pada peptida; di dalamB-jenis sitokrom
kelompok protoheme yang mirip secara kimiawi tidak terikat
secara kovalen (Gambar 7.28). Selain itu, kompleks
mengandungProtein besi-sulfur Rieske (dinamai untuk
ilmuwan yang menemukannya), di mana dua atom besi
dijembatani oleh dua atom belerang.
Struktur sitokrom F dan sitokin terkait
krom SM1 kompleks telah ditentukan dan menyarankan
mekanisme aliran elektron dan proton. Cara yang tepat
dimana elektron dan proton mengalir melalui
sitokrom B6 F kompleks belum sepenuhnya dipahami, tetapi mekanisme
yang dikenal sebagai siklus Q menyumbang sebagian besar
pengamatan. Dalam mekanisme ini, plastohydroquinone
(QH2) teroksidasi, dan salah satu dari dua elektron dilewatkan
sepanjang rantai transpor elektron linier menuju fotosistem
I, sedangkan elektron lainnya melewati proses siklik yang
B meningkatkan jumlah proton yang dipompa melintasi
membran (Gambar 7.29).
Dalam rantai transpor elektron linier, Rieske . teroksidasi
protein (FeSR) menerima elektron dari plastohydroquinone
(QH2) dan mentransfernya ke sitokrom F (lihat Gambar 7.29A).
sitokromF kemudian mentransfer elektron ke warna biru
tembaga protein plastocyanin (PC), yang pada gilirannya
mengurangi P700 teroksidasi dari PSI. Pada bagian siklik dari
proses (lihat Gambar 7.29B), plastosemiquinone (lihat Gambar
7.27) mentransfer elektron lainnya ke salah satuB-jenis heme,
melepaskan kedua protonnya ke sisi lumenal membran.
NS B-jenis heme mentransfer elektronnya melalui yang kedua B-
mengetik heme menjadi molekul kuinon teroksidasi, mereduksinya
menjadi bentuk semikuinon di dekat permukaan stroma

plastokuinon

GAMBAR 7.27 Struktur dan

(B) reaksi plastoquinone yang bekerja
pada fotosistem II. (A)
_
Plastoquinone terdiri dari kepala
HAI HAI• OH quinoid dan ekor panjang non-
H3C R H3C R H3C R polar yang menambatkannya di
e- 1 e- 2 H+ membran. (B) Reaksi redoks dari
+ + +
plastoquinone. Kuinon teroksidasi
H3C H3C H3C penuh (Q), semikuinon anionik (Q•),
HAI HAI- OH dan dikurangi
hidrokuinon (QH2) bentuk adalah
kuinon Plastosemikuinon plastohidrokuinon ditampilkan; R mewakili sisi
(Q) (Q-• ) (QH2) rantai.
Protohem CH2 Dia me C CH3
Protein
dari B-Tipe dari C-Tipe
sitokrom CH3 CH sitokrom CH3 CH S CH2

H H H H

n n
CH3 CH3 H3C CH3
n Fe n n Fe n
- OOC CH2 CH2 CH CH2 - OOC CH2 CH2 CH S CH2
n n
CH3
H H H H

CH2 CH3 CH2 CH3

CH2 CH2

MENDEKUT- MENDEKUT-

GAMBAR 7.28 Struktur kelompok prostetik B- dan C-jenis sitokrom. Ahli-

kelompok toheme (juga disebut protoporfirin IX) ditemukan di B-jenis sitokrom, heme C
kelompok dalam C-jenis sitokrom. hemeC gugus tersebut terikat secara kovalen pada protein
melalui ikatan tioeter dengan dua residu sistein dalam protein; gugus protoheme tidak terikat
secara kovalen dengan protein. Ion Fe berada dalam keadaan oksidasi 2+ dalam sitokrom
tereduksi dan dalam keadaan oksidasi 3+ dalam keadaan teroksidasi
sitokrom.

(A) QH pertama2 teroksidasi

STROMA sitokrom B6F kompleks

Q
Tilakoid Q- e-
selaput
Cyt B
e- GAMBAR 7.29 Mekanisme elektro tidak dan proton
QH2 Cyt B e- PSI
PSII transfer di dan sitokrom bf6 kompleks. Ini
700rb
e- kompleks berisi dua B-jenis sitokrom (Cyt
Q
FeSR B), A C-jenis sitokrom (Cyt C, secara historis disebut
e- sitokrom F ), protein Rieske Fe–S (FeSR),
Cyt F
PC dan dua situs oksidasi-reduksi kuinon. (A)
e- Proses nonsiklik atau linier: Sebuah plastohy-
2 H+ Plastosianin drokuinon (QH2) molekul yang dihasilkan oleh
LUMEN aksi PSII (lihat Gambar 7.27) dioksidasi dekat
sisi lumenal kompleks, mentransfer dua
elektronnya ke protein Rieske Fe–S dan salah satu
(B) QH kedua2 teroksidasi
dari B-jenis sitokrom dan secara bersamaan
mengeluarkan dua proton ke lumen. NS
STROMA sitokrom B6F kompleks elektron ditransfer ke FeSR diteruskan ke sitokrom F (
Q- Cyt F ) dan kemudian menjadi plastocyanin

Tilakoid 2 H+ e- (PC), yang mengurangi P700 dari PSI. yang dikurangiB-

selaput jenis sitokrom mentransfer elektron ke yang
Cyt B lain B-jenis sitokrom, yang mereduksi kuinon
(Q) menjadi semikuinon (Q•) negara (lihat
QH2 e-
Cyt B e- Gambar 7.27). (B) Proses siklik: Sedetik
PSI
PSII QH2 QH2 teroksidasi, dengan satu elektron berpindah dari
700rb
Q e- FeSR ke PC dan akhirnya ke P700. Elektron
FeSR kedua melewati keduanyaB-jenis sitokrom
e-
Cyt F dan mereduksi semikuinon menjadi plastohidrokuinon,
PC pada saat yang sama mengambil dua proton dari
e- stroma. Secara keseluruhan, empat proton diangkut
2 H+ Plastosianin melintasi membran untuk setiap dua elektron yang
LUMEN
dikirim ke P700.
132 Bab 7

kompleks. Urutan aliran elektron serupa lainnya (A) Stroma

sepenuhnya mengurangi plastoquinone, yang mengambil Fd-
- Fd
proton dari sisi stroma membran dan dilepaskan + ––
+
+ –––
dari B6 F kompleks seperti plastohydroquinone. D e- + ++
Hasil bersih dari dua pergantian kompleks adalah bahwa
FeSB E
dua elektron ditransfer ke P700, dua plastohidrokuinon
FeSA K
dioksidasi menjadi bentuk kuinon, dan satu plastokuinon C
teroksidasi direduksi menjadi bentuk hidrokuinon. Selain
PsaA e- PsaB
itu, empat proton ditransfer dari stroma ke sisi lumenal LI FeSx
membran.
A1
Dengan mekanisme ini, aliran elektron yang
menghubungkan sisi akseptor dari pusat reaksi PSII ke sisi A0
donor dari pusat reaksi PSI juga menimbulkan potensial J
e-
elektrokimia melintasi membran, sebagian karena perbedaan HG
konsentrasi H+ pada kedua sisi membran. Potensi elektrokimia 700rb

ini digunakan untuk menggerakkan sintesis ATP. Aliran

e-
elektron siklik melalui sitokromB dan plastoquinone
meningkatkan jumlah proton yang dipompa per elektron n +
- + F
- +
melebihi apa yang dapat dicapai dalam urutan linier yang ketat. -
PC - + Lampu

Plastoquinone dan Plastocyanin Membawa

PC-
Elektron antara Fotosistem II dan I
Lumen
Lokasi dua fotosistem pada tempat yang berbeda pada membran
tilakoid (lihat Gambar 7.18) mensyaratkan bahwa setidaknya satu
komponen mampu bergerak di sepanjang atau di dalam membran PsaC
untuk mengirimkan elektron yang dihasilkan oleh
Stroma
fotosistem II menjadi fotosistem I. Sitokrom B6 F kompleks
didistribusikan secara merata antara grana dan PsaE
daerah stroma membran, tetapi ukurannya yang besar membuatnya PsaD
tidak mungkin sebagai pembawa seluler. Sebaliknya, plastoquinone atau
plastocyanin atau mungkin keduanya dianggap sebagai pembawa
bergerak untuk menghubungkan kedua fotosistem.
Plastosianin adalah protein kecil (10,5 kDa), larut dalam air,
mengandung tembaga yang mentransfer elektron antara
sitokrom B6 F kompleks dan P700. Protein ini ditemukan di
ruang lumen (lihat Gambar 7.29). Pada alga hijau tertentu
dan cyanobacteria, a C-jenis sitokrom kadang-kadang ditemukan
sebagai pengganti plastosianin; mana dari dua protein ini yang
disintesis tergantung pada jumlah tembaga yang tersedia untuk
organisme.

Pusat Reaksi Fotosistem I

Mengurangi NADP+
Kompleks pusat reaksi PSI adalah kompleks
multisubunit besar (Gambar 7.30) (Jordan et al.
2001). Berbeda dengan PSII, antena inti yang
terdiri dari sekitar 100 klorofil merupakan
bagian dari pusat reaksi PSI, P700. Antena inti
dan P700 terikat pada dua protein, PsaA dan
PsaB, dengan massa molekul dalam kisaran 66
hingga 70 kDa (Brettel 1997; Chitnis 2001; lihat
jugaWebTopik 7.8).
Pigmen antena membentuk mangkuk yang
mengelilingi kofaktor transfer elektron, yang
berada di tengah kompleks. Di dalam
Lumen
GAMBAR 7.30 Struktur fotosistem I. (A) Model struktural PSI
pusat reaksi. Komponen pusat reaksi PSI diatur di sekitar dua protein
utama, PsaA dan PsaB. Protein minor PsaC ke PsaN diberi label C ke N.
Elektron ditransfer dari plastocyanin (PC) ke
P700 (lihat Gambar 7.21 dan 7.22) dan kemudian ke molekul klorofil, A0, ke
phylloquinone, A1, ke FeSX, FeSA, dan FeSB Pusat Fe-S, dan akhirnya ke protein
besi-sulfur yang larut, ferrodoksin (Fd). (B) Tampak samping satu
monomer PSI dari cyanobacterium Synechococcus elongatus, pada resolusi
2,5Å. Sisi stroma membran berada di bagian atas, dan sisi lumenal berada di
bagian bawah gambar. transmembran-heliks PsaA dan PsaB masing-masing
ditampilkan sebagai silinder biru dan merah. (A setelah Buchanan dkk. 2000; B
dari Jordan dkk. 2001.)
 Fotosintesis: Reaksi Terang 133

bentuk tereduksinya, pembawa elektron yang berfungsi di wilayah (A)

akseptor fotosistem I semuanya merupakan zat pereduksi yang Cl
sangat kuat. Spesies tereduksi ini sangat tidak stabil sehingga sulit Cl
untuk diidentifikasi. Bukti menunjukkan bahwa salah satu akseptor
H CH3 T+ T+ CH3
awal ini adalah molekul klorofil, dan yang lainnya adalah a n
spesies kuinon, phylloquinone, juga dikenal sebagai vitamin K1. Cl- Cl-
C
Akseptor elektron tambahan mencakup serangkaian tiga HAI N(CH3)2 Parakuat
protein besi-sulfur yang terkait dengan membran, atau ikatan ferre- (metil viologen)
DCMU (diuron)
doxin, juga dikenal sebagai Pusat Fe–S FeSX, FeSA, dan FeSB
(diklorofenil-dimetilurea)
(lihat Gambar 7.30). Pusat Fe–S X adalah bagian dari pengikatan P700
protein; pusat A dan B berada pada protein 8 kDa yang
merupakan bagian dari kompleks pusat reaksi PSI. Elektron (B)
700rb* Parakuat
ditransfer melalui pusat A dan B keferedoksin (Fd), protein
besi-sulfur kecil yang larut dalam air (lihat Gambar 7.21 dan
7.30). Flavoprotein terkait membranferredoxin-NADP P680* DCMU NADP+
reduktase (FNR) mereduksi NADP+ menjadi NADPH,
sehingga melengkapi urutan transpor elektron nonsiklik QA
yang dimulai dengan oksidasi air (Karplus et al. 1991). QB
NADPH
Selain reduksi NADP+, ferredoxin tereduksi yang
H2HAI
dihasilkan oleh fotosistem I memiliki beberapa fungsi lain 700rb
dalam kloroplas, seperti suplai reduktor untuk mereduksi
HAI2
nitrat dan regulasi beberapa enzim fiksasi karbon (lihat Bab P680
8).
GAMBAR 7.31 Struktur kimia dan mekanisme kerja dua
Aliran Elektron Siklik Menghasilkan ATP tetapi tidak ada NADPH herbisida penting. (A) Struktur kimia diklorofenil-
Beberapa sitokrom B6 F kompleks ditemukan di wilayah dimetilurea (DCMU) dan metil viologen (paraquat), dua
stroma membran, di mana fotosistem I berada herbisida yang menghalangi aliran elektron fotosintesis.
DCMU juga dikenal sebagai diuron. (B) Tempat kerja kedua
terletak. Dalam kondisi tertentualiran elektron siklik dari herbisida. DCMU memblokir aliran elektron pada akseptor
sisi pereduksi fotosistem I, melalui B6 F kompleks dan kuinon fotosistem II, dengan bersaing untuk tempat
kembali ke P700, diketahui terjadi. Siklus listrik ini pengikatan plastokuinon. Paraquat bekerja dengan
Aliran tron digabungkan dengan pemompaan proton ke dalam menerima elektron dari akseptor awal fotosistem I.
lumen, yang dapat digunakan untuk sintesis ATP tetapi tidak
mengoksidasi air atau mereduksi NADP+. Aliran elektron siklik
sangat penting sebagai sumber ATP dalam selubung berkas
kloroplas dari beberapa tanaman yang melakukan C4 fiksasi
TRANSPORTASI PROTON DAN
karbon (lihat Bab 8).
SINTESIS ATP DALAM KLOROPLAST
Beberapa Herbisida Memblokir Aliran Elektron Pada bagian sebelumnya kita telah mempelajari bagaimana energi cahaya
Penggunaan herbisida untuk membunuh tanaman yang tidak diinginkan yang ditangkap digunakan untuk mereduksi NADP+ menjadi NADPH. Fraksi
tersebar luas di pertanian modern. Banyak kelas herbisida yang berbeda lain dari energi cahaya yang ditangkap digunakan untuk sintesis ATP yang
telah dikembangkan, dan mereka bertindak dengan menghalangi asam bergantung pada cahaya, yang dikenal sebagai:fotofosforilasi.
amino, karotenoid, atau biosintesis lipid atau dengan mengganggu Proses ini ditemukan oleh Daniel Arnon dan rekan kerjanya
pembelahan sel. Herbisida lain, seperti DCMU pada 1950-an. Dalam kondisi seluler normal, fotofosforilasi
(dichlorophenyldimethylurea) dan paraquat, menghalangi aliran membutuhkan aliran elektron, meskipun dalam beberapa
elektron fotosintesis (Gambar 7.31). DCMU juga dikenal sebagai diuron. kondisi aliran elektron dan fotofosforilasi dapat berlangsung
Paraquat telah memperoleh ketenaran publik karena penggunaannya secara independen satu sama lain. Aliran elektron tanpa
pada tanaman ganja. fosforilasi yang menyertainya disebuttidak berpasangan.
Banyak herbisida, DCMU di antaranya, bertindak dengan Sekarang diterima secara luas bahwa fotofosforilasi bekerja
menghalangi aliran elektron pada akseptor kuinon fotosistem II, melalui mekanisme kemiosmotik, pertama kali diusulkan
dengan bersaing untuk tempat pengikatan plastokuinon yaitu pada tahun 1960 oleh Peter Mitchell. Mekanisme umum yang
biasanya ditempati oleh QB. Herbisida lain, seperti sama mendorong fosforilasi selama respirasi aerobik pada
paraquat, bertindak dengan menerima elektron dari bakteri dan mitokondria (lihat Bab 11), serta transfer banyak
fotosistem I dan kemudian bereaksi dengan oksigen untuk ion dan metabolit melintasi membran (lihat Bab 6).
membentuk superoksida, O2- , spesies
yang sangat merusak Kemiosmosis tampaknya menjadi aspek pemersatu dari proses
komponen kloroplas, terutama lipid. membran dalam semua bentuk kehidupan.
134 Bab 7
Kloroplas
tilakoid Imbang
Disangga
medium
pH 4 pH 4
GAMBAR 7.32 Ringkasan percobaan yang dilakukan oleh
Jagendorf dan rekan kerja. Tilakoid kloroplas terisolasi yang
disimpan sebelumnya pada pH 8 diseimbangkan dalam asam
medium pada pH 4. Tilakoid kemudian dipindahkan ke
buffer pada pH 8 yang berisi ADP dan PSaya. Gra-
Dalam Bab 6 kita membahas peran ATPase dalam
kemiosmosis dan transpor ion pada membran plasma sel.
ATP yang digunakan oleh membran plasma ATPase
disintesis oleh fotofosforilasi di kloroplas dan fosforilasi
oksidatif di mitokondria. Di sini kita prihatin dengan
perbedaan konsentrasi proton kemiosmosis dan
transmembran yang digunakan untuk membuat ATP dalam
kloroplas.
Prinsip dasar kemiosmosis adalah bahwa perbedaan
konsentrasi ion dan perbedaan potensial listrik melintasi
membran merupakan sumber energi bebas yang dapat
dimanfaatkan oleh sel. Seperti yang dijelaskan oleh hukum
kedua termodinamika (lihat Bab 2 di situs web untuk diskusi
terperinci), setiap distribusi materi atau energi yang tidak
seragam mewakili sumber energi. Perbedaan dalampotensial
kimia dari setiap spesies molekul yang konsentrasinya tidak
sama pada sisi yang berlawanan dari membran menyediakan
sumber energi seperti itu.
Sifat asimetris membran fotosintesis dan fakta bahwa
aliran proton dari satu sisi membran ke sisi lain menyertai
aliran elektron telah dibahas sebelumnya. Arah translokasi
proton sedemikian rupa sehingga stroma menjadi lebih
basa (lebih sedikit ion H+) dan lumen menjadi lebih asam
(lebih banyak ion H+) sebagai akibat dari transpor elektron
(lihat Gambar 7.22 dan 7.29).
Beberapa bukti awal yang mendukung mekanisme kemiosmotik
pembentukan ATP fotosintesis diberikan oleh eksperimen elegan
yang dilakukan oleh André Jagendorf dan rekan kerja (Gambar
7.32). Mereka menangguhkan tilakoid kloroplas dalam buffer pH 4,
dan buffer menyebar melintasi membran, menyebabkan interior,
serta eksterior, dari tilakoid untuk menyeimbangkan pada pH asam
ini. Mereka kemudian dengan cepat mentransfer tilakoid ke buffer
pH 8, dengan demikian
ADP + PSaya Dalam gelap
Tilakoid
ditransfer
ADP
+ ATP
pH 8 PSaya
pH8
dient yang dihasilkan oleh manipulasi ini memberikan kekuatan
pendorong untuk sintesis ATP tanpa adanya cahaya. Eksperimen
ini memverifikasi prediksi teori kemiosmotik yang menyatakan
bahwa potensial kimia melintasi membran dapat menyediakan
energi untuk sintesis ATP.
menciptakan perbedaan pH 4 unit melintasi membran tilakoid,
dengan bagian dalam asam relatif terhadap bagian luar.
Mereka menemukan bahwa sejumlah besar ATP terbentuk
dari ADP dan PSaya oleh proses ini, tanpa masukan cahaya
atau transpor elektron. Hasil ini mendukung prediksi
hipotesis kemiosmotik, dijelaskan dalam paragraf berikut.
Mitchell mengusulkan bahwa total energi yang tersedia
untuk sintesis ATP, yang disebutnya kekuatan gerak proton
(ΔP), adalah jumlah potensial kimia proton dan potensial
listrik transmembran. Kedua komponen gaya gerak proton
dari luar membran ke dalam diberikan oleh persamaan
berikut:
Δ p = ΔE - 59 (pΗSaya - PΗ) (7.9)
di mana ΔE adalah potensial listrik transmembran, dan pHSaya
– pHo (atau ΔpH) adalah perbedaan pH melintasi membran.
Konstanta proporsionalitas (pada 25°C) adalah 59 mV per pH
unit, sehingga perbedaan pH transmembran 1 unit pH
setara dengan potensial membran 59 mV.
Dalam kondisi transpor elektron keadaan tunak dalam
kloroplas, potensial listrik membran cukup kecil karena
pergerakan ion melintasi membran, sehingga ΔP
dibangun hampir seluruhnya oleh ΔpH. Stoikiometri proton
yang ditranslokasi per ATP yang disintesis baru-baru ini
ditemukan menjadi empat ion H+ per ATP (Haraux dan De
Kouchkovsky 1998).
Selain kebutuhan untuk pembawa elektron bergerak yang
dibahas sebelumnya, distribusi fotosistem II dan I yang tidak
merata, dan ATP sintase pada membran tilakoid (lihat Gambar
7.18), menimbulkan beberapa tantangan untuk pembentukan
ATP. ATP sintase hanya ditemukan di stroma lamellae dan di
tepi tumpukan grana. Proton dipompa

melintasi membran oleh sitokrom B6 F kompleks atau
proton yang dihasilkan oleh oksidasi air di tengah
grana harus bergerak menyamping hingga beberapa puluh nanometer untuk
mencapai ATP sintase.
ATP disintesis oleh kompleks enzim besar (400 kDa) yang
dikenal dengan beberapa nama: ATP sintase, ATPase (setelah
reaksi kebalikan dari hidrolisis ATP), dan CFHai–CF1 (Boyer
1997). Enzim ini terdiri dari dua bagian: hidrofobik
bagian terikat membran yang disebut CFHai dan bagian yang
menonjol ke dalam stroma disebut CF1 (Gambar 7.33).
CFHai tampaknya membentuk saluran melintasi membran
yang dapat dilalui oleh proton. CF1 terdiri dari beberapa peptida,
termasuk tiga salinan dari masing-masing α dan β semangat-
pasang surut diatur secara bergantian seperti bagian dari
jeruk. Sedangkan situs katalitik sebagian besar terletak diβ
polipeptida, banyak peptida lain yang dianggap
memiliki fungsi regulasi utama. CF1 adalah bagian
kompleks yang mensintesis ATP.
Struktur molekul ATP sintase mitokondria telah
ditentukan dengan kristalografi sinar-X (Stock et al. 1999).
Meskipun ada perbedaan yang signifikan antara kloroplas
dan enzim mitokondria, mereka
STROMA
H+
ATP
ADP + PSaya
β αβ
α α
β
CF1
B
Tilakoid
selaput
δγε
CFHai
A dianggap sebagai katup pengaman, membuang kelebihan
C
LUMEN H+
GAMBAR 7.33 Struktur ATP sintase. Enzim ini meng-
terdiri dari kompleks multisubunit besar, CF1, melekat pada
sisi stroma membran ke bagian membran integral
tion, yang dikenal sebagai CFHai. CF1 terdiri dari lima polip-
pasang surut, dengan stoikiometri α3, β3, , , . CFHai mengandung
mungkin empat polipeptida yang berbeda, dengan stoikiometri
dari a, b, b, C12.
Fotosintesis: Reaksi Terang 135
memiliki arsitektur keseluruhan yang sama dan situs
katalitik mungkin hampir identik. Faktanya, ada kesamaan
yang luar biasa dalam cara aliran elektron digabungkan
dengan translokasi proton dalam kloroplas, mitokondria,
dan bakteri ungu (Gambar 7.34). Aspek lain yang luar biasa
dari mekanisme sintase ATP adalah bahwa tangkai internal
dan mungkin sebagian besar CFHai bagian dari enzim berputar
selama katalisis (Yasuda et al. 2001). Enzim tersebut berfungsi
sekutu motor molekul kecil (lihat WebTopik 7.9 dan 11.4).
PERBAIKAN DAN PERATURAN
MESIN FOTOSINTETIK
Sistem fotosintesis menghadapi tantangan khusus. Mereka
dirancang untuk menyerap sejumlah besar energi cahaya dan
memprosesnya menjadi energi kimia. Pada tingkat molekuler,
energi dalam foton dapat merusak, terutama dalam kondisi yang
tidak menguntungkan. Secara berlebihan, energi cahaya dapat
menyebabkan produksi spesies beracun, seperti superoksida,
oksigen singlet, dan peroksida, dan kerusakan dapat terjadi jika
energi cahaya tidak dihamburkan dengan aman (Horton et al. 1996;
Asada 1999; Müller et al. 2001). Organisme fotosintesis karena itu
mengandung mekanisme pengaturan dan perbaikan yang
kompleks. Beberapa mekanisme ini mengatur aliran energi dalam
sistem antena, untuk menghindari eksitasi berlebih dari pusat
reaksi dan memastikan bahwa kedua fotosistem sama-sama
terbelah. Meskipun sangat efektif, proses ini tidak sepenuhnya
aman dari kegagalan, dan terkadang senyawa beracun dihasilkan.
Mekanisme tambahan diperlukan untuk menghilangkan senyawa
ini—khususnya, spesies oksigen beracun. Terlepas dari mekanisme
pelindung dan pemulung ini, kerusakan dapat terjadi, dan
mekanisme tambahan diperlukan untuk memperbaiki sistem.
Gambar 7.35 memberikan gambaran umum tentang beberapa
tingkat sistem regulasi dan perbaikan.
Karotenoid Berfungsi sebagai Agen Fotoprotektif
Selain perannya sebagai pigmen aksesori, karotenoid
memainkan peran penting dalam fotoproteksi. Membran
fotosintesis dapat dengan mudah rusak oleh sejumlah
besar energi yang diserap oleh pigmen jika energi ini tidak
dapat disimpan oleh fotokimia; makanya diperlukan
mekanisme proteksi. Mekanisme fotoproteksi dapat
energi sebelum dapat merusak organisme. Ketika energi
yang tersimpan dalam klorofil dalam keadaan tereksitasi
dengan cepat dihamburkan oleh transfer eksitasi atau
fotokimia, keadaan tereksitasi dikatakanpadam.
Jika keadaan tereksitasi klorofil tidak cepat dipadamkan dengan
transfer eksitasi atau fotokimia, ia dapat bereaksi dengan oksigen
molekuler untuk membentuk keadaan tereksitasi oksigen yang dikenal
sebagai oksigen tunggal (1HAI2*). Oksigen singlet yang sangat
reaktif terus bereaksi dan merusak banyak komponen seluler.
komponen, terutama lipid. Karotenoid mengerahkan aksi
fotoprotektifnya dengan secara cepat memadamkan keadaan
tereksitasi klorofil. Keadaan tereksitasi karotenoid tidak memiliki
136 Bab 7

GAMBAR 7.34 Kesamaan aliran

(A) bakteri ungu
elektron fotosintesis dan respirasi
SITOSOL pada bakteri, kloroplas, dan
H+
Lampu ADP + PSaya mitokondria. Pada ketiganya,
aliran elektron digabungkan
F1 dengan translokasi proton,
ATP menciptakan gaya gerak proton
transmembran (ΔP). Energi dalam
Reaksi
Q gaya gerak proton kemudian
Tengah Cyt SM1 FHai digunakan untuk sintesis ATP oleh
kompleks ATP sintase. (A) Pusat reaksi (RC)
pada bakteri fotosintetik ungu
Cyt ATP melakukan aliran elektron siklik,
C menghasilkan potensial proton
H+ sint hase
PERIPLASM H+ melalui aksi

sitokrom SM1 kompleks. (B)

(B) Kloroplas Kloroplas melakukan non-
aliran elektron siklik,
STROMA H+ mengoksidasi air dan mereduksi
ADP + PSaya
Lampu Lampu NADP+. Proton dihasilkan oleh
NADP+
NADPH oksidasi air dan oleh
CF1 ATP oksidasi PQH2 (Q) oleh
sitokrom B6 F kompleks. (C)
PSII PSI Mitokondria mengoksidasi NADH
Reaksi Q Cyt B6F Reaksi menjadi NAD+ dan mereduksi
Tengah Tengah CFHai oksigen menjadi air. Proton
kompleks
dipompa oleh enzim NADH dehi-
drogenase, sitokrom SM1
PC ATP
kompleks, dan sitokrom oksi-
sintase
H2HAI O2+ H+ H+ H+ cepat. Sintase ATP dalam
LUMEN ketiga sistem sangat mirip
dalam struktur.

(C) Mitokondria

MATRIKS H+
ADP + PSaya
NADH NAD+ HAI2 H2HAI
F1 ATP

NADH Q
dehidrogenase Cyt SM1 Cytoch Roma
kompleks oksidase FHai

Cyt ATP
C sintase
H+ H+ H+ H+
ANTARMEMBRAN
RUANG ANGKASA

energi yang cukup untuk membentuk oksigen singlet, sehingga meluruh kembali ke
keadaan dasarnya sambil kehilangan energinya sebagai panas.
Organisme mutan yang kekurangan karotenoid tidak
dapat hidup dengan adanya cahaya dan oksigen molekuler
situasi sulit untuk O2-organ fotosintesis yang berkembang
aliran. Untuk non-O2-bakteri fotosintesis berkembang, mutan yang
kekurangan karotenoid dapat dipertahankan di bawah laboratorium
kondisi tory jika oksigen dikeluarkan dari media
pertumbuhan.
Baru-baru ini karotenoid ditemukan berperan dalam
pendinginan nonfotokimia, yang merupakan mekanisme
pelindung dan pengaturan kedua.
Beberapa Xantofil Juga Berpartisipasi dalam
Pembuangan Energi
Pendinginan nonfotokimia, proses utama yang mengatur
pengiriman energi eksitasi ke pusat reaksi, dapat dianggap
sebagai "kenop volume" yang menyesuaikan aliran
 Fotosintesis: Reaksi Terang 137

GAMBAR 7.35 Gambaran keseluruhan dari pengaturan pengambilan foton Foton digunakan untuk
foton dan perlindungan dan perbaikan kerusakan foto. intensitas fotosintesis
Perlindungan terhadap photodamage adalah proses bertingkat.
Garis pertahanan pertama adalah penekanan kerusakan dengan
pendinginan eksitasi berlebih sebagai panas. Jika pertahanan ini
tidak cukup dan fotoproduk beracun terbentuk, berbagai sistem Foton berlebih
pengurai menghilangkan fotoproduk reaktif. Jika garis pertahanan Garis pertama

kedua ini juga gagal, fotoproduk dapat merusak protein D1 pertahanan:

fotosistem II. Kerusakan ini menyebabkan fotoinhibisi. Protein D1 Penekanan
kemudian dikeluarkan dari pusat reaksi PSII dan didegradasi. D1 mekanisme
yang baru disintesis dimasukkan kembali ke dalam pusat reaksi
PSII untuk membentuk unit fungsional. (Setelah Asada 1999.) Panas Keadaan triplet dari Chl (3Chl*)
Superoksida (O -
Beracun 2)
Baris kedua fotoproduk oksigen tunggal (1O *2)
pertahanan: Hidrogen peroksida (H2HAI2)
Memulung Radikal hidroksil (•OH)
eksitasi ke pusat reaksi PSII ke tingkat yang dapat diatur, sistem (misalnya,
tergantung pada intensitas cahaya dan kondisi lainnya. Proses karotenoid,
superoksida
ini tampaknya menjadi bagian penting dari pengaturan sistem
dismutase, Kerusakan D1
antena di sebagian besar alga dan tanaman. askorbat) dari PSII
Pendinginan nonfotokimia adalah pendinginan
fluoresensi klorofil (lihat Gambar 7.5) dengan proses selain Perbaikan, sintesis de novo
fotokimia. Sebagai hasil dari pendinginan nonfotokimia,
sebagian besar eksitasi dalam sistem antena yang D1 teroksidasi
disebabkan oleh iluminasi intens dipadamkan oleh konversi
menjadi panas (Krause dan Weis 1991). Pendinginan
nonfotokimia dianggap terlibat dalam melindungi mesin
penghambatan foto
fotosintesis terhadap eksitasi berlebihan dan kerusakan
selanjutnya.
Mekanisme molekuler nonfotokimia
pendinginan tidak dipahami dengan baik,
meskipun jelas bahwa pH lumen tilakoid dan
keadaan agregasi kompleks antena merupakan
faktor penting. Tiga karotenoid, disebut
OH
xantofil, terlibat dalam pendinginan
HAI
nonfotokimia: violaxanthin, antheraxanthin,
Rendah
dan zeaxanthin (Gambar 7.36). lampu
HAI
Dalam cahaya tinggi, violaxanthin diubah menjadi
HO Violaxanthin
zeaxanthin, melalui antheraxanthin perantara, oleh
enzim violaxanthin de-epoxidase. Ketika intensitas
cahaya berkurang, prosesnya terbalik. Pengikatan H2HAI 2H
proton dan zeaxanthin ke protein antena pemanen NADPH Askorbat
cahaya diduga menyebabkan perubahan konformasi
2 H + O2 H2HAI
OH
yang mengarah pada
pendinginan dan pembuangan panas (Demmig-

HAI

HO Anteraxantin
GAMBAR 7.36 Struktur kimia violaksan-
tipis, antheraxanthin, dan zeaxanthin. Keadaan yang
sangat padam dari fotosistem II dikaitkan dengan H2HAI 2H
zeaxanthin, keadaan yang tidak padam dengan NADPH Askorbat
violaxanthin. Enzim menginterkonversi kedua karotenoid
ini, dengan antheraxanthin sebagai perantara, sebagai 2 H + O2 H2HAI
OH
respons terhadap perubahan kondisi, terutama
perubahan intensitas cahaya. Pembentukan zeaxanthin
menggunakan askorbat sebagai kofaktor, dan Tinggi
pembentukan violaxanthin membutuhkan NADPH. lampu
(Setelah Pfündel dan Bilger 1994.) HO Zeaxanthin
138 Bab 7
Adams dan Adams 1992; Horton dkk. 1996). Pendinginan
nonfotokimia tampaknya lebih disukai terkait dengan
kompleks antena periferal fotosistem II, protein PsbS (Li et
al. 2000).
Pusat Reaksi Fotosistem II Mudah
Rusak
Efek lain yang tampaknya menjadi faktor utama dalam
stabilitas aparatus fotosintesis adalah fotoinhibisi, yang terjadi
ketika eksitasi berlebih yang tiba di pusat reaksi PSII
menyebabkan inaktivasi dan kerusakannya (Long et al. 1994).
penghambatan foto adalah serangkaian proses molekuler
yang kompleks, yang didefinisikan sebagai penghambatan
fotosintesis oleh cahaya berlebih.
Seperti yang akan dibahas secara rinci dalam Bab 9, fotoinhibisi
bersifat reversibel pada tahap awal. Penghambatan yang
berkepanjangan, bagaimanapun, mengakibatkan kerusakan pada
sistem sehingga pusat reaksi PSII harus dibongkar dan diperbaiki (Melis
1999). Target utama dari kerusakan ini adalah protein D1
yang merupakan bagian dari kompleks pusat reaksi PSII
(lihat Gambar 7.24). Ketika D1 rusak oleh cahaya berlebih,
itu harus dikeluarkan dari membran dan diganti dengan
molekul yang baru disintesis. Komponen lain dari pusat
reaksi PSII tidak rusak oleh eksitasi berlebih dan dianggap
dapat didaur ulang, sehingga protein D1 adalah satu-
satunya komponen yang perlu disintesis.
Fotosistem I Terlindungi dari Spesies
Oksigen Aktif
Fotosistem I sangat rentan terhadap kerusakan dari spesies oksigen
aktif. Akseptor ferredoxin dari PSI adalah reduktor yang sangat kuat
yang dapat dengan mudah mereduksi molekul oksigen menjadi
membentuk superoksida (O -
2). Pengurangan ini bersaing dengan norma-
mal penyaluran elektron ke reduksi NADP+ dan proses lainnya.
Superoksida adalah salah satu dari serangkaian spesies
oksigen aktif yang dapat sangat merusak membran biologis.
Superoksida yang terbentuk dengan cara ini dapat dihilangkan
dengan aksi serangkaian enzim, termasuk superoksida
dismutase dan askorbat peroksidase (Asada 1999).
Penumpukan Tilakoid Mengizinkan
Pemisahan Energi di antara Fotosistem
Fakta bahwa fotosintesis pada tumbuhan tingkat tinggi didorong
oleh dua fotosistem dengan sifat penyerap cahaya yang berbeda
menimbulkan masalah khusus. Jika laju pengiriman energi ke PSI
dan PSII tidak tepat sama dan kondisinya sedemikian rupa
sehingga laju fotosintesis dibatasi oleh cahaya yang tersedia
(intensitas cahaya rendah), laju aliran elektron akan dibatasi oleh
fotosistem yang menerima lebih sedikit. energi. Dalam situasi yang
paling efisien, masukan energi akan sama untuk kedua fotosistem.
Namun, tidak ada susunan pigmen tunggal yang akan memenuhi
persyaratan ini karena pada waktu yang berbeda dalam sehari
intensitas cahaya dan distribusi spektral cenderung mendukung
satu fotosistem atau yang lain (Trissl dan Wilhelm 1993; Allen dan
Forsberg 2001).
Masalah ini dapat diselesaikan dengan mekanisme yang menggeser
energi dari satu fotosistem ke fotosistem lainnya sebagai respons
terhadap kondisi yang berbeda. Mekanisme pengaturan seperti itu telah
terbukti beroperasi dalam kondisi eksperimen yang berbeda.
Pengamatan bahwa hasil kuantum keseluruhan fotosintesis hampir
tidak tergantung pada panjang gelombang (lihat Gambar
7.12) sangat menyarankan bahwa mekanisme seperti itu ada.
Membran tilakoid mengandung protein kinase yang dapat
memfosforilasi residu treonin spesifik pada permukaan LHCII,
salah satu protein pigmen antena terikat-membran yang
dijelaskan sebelumnya dalam bab ini (lihat Gambar 7.20). Ketika
LHCII tidak terfosforilasi, ia memberikan lebih banyak energi ke
fotosistem II, dan ketika terfosforilasi, ia memberikan lebih
banyak energi ke fotosistem I (Haldrup et al. 2001).
Kinase diaktifkan ketika plastoquinone, salah satu pembawa
elektron antara PSI dan PSII, terakumulasi dalam keadaan
tereduksi. Plastoquinone tereduksi terakumulasi ketika PSII
diaktifkan lebih sering daripada PSI. LHCII terfosforilasi
kemudian bermigrasi keluar dari daerah tumpukan membran
ke daerah yang tidak ditumpuk (lihat Gambar
7.18), mungkin karena interaksi tolak-menolak dengan muatan
negatif pada membran yang berdekatan.
Migrasi lateral LHCII menggeser keseimbangan energi
menuju fotosistem I, yang terletak di lamela stroma, dan
menjauh dari fotosistem II, yang terletak di tumpukan
membran grana. Situasi ini disebutnegara bagian 2. Jika
plastoquinone menjadi lebih teroksidasi karena eksitasi
berlebih dari fotosistem I, kinase dinonaktifkan dan tingkat
fosforilasi LHCII menurun oleh aksi fosfatase yang terikat
membran. LHCII kemudian bergerak kembali ke grana, dan
sistem dalamnegara bagian 1. Hasil akhirnya adalah kontrol
yang sangat tepat dari distribusi energi antara fotosistem,
yang memungkinkan penggunaan paling efisien dari energi
yang tersedia.
GENETIKA, PERAKITAN, DAN EVOLUSI
SISTEM FOTOSINTETIK
Kloroplas memiliki DNA, mRNA, dan mesin sintesis protein
mereka sendiri, tetapi beberapa protein kloroplas
dikodekan oleh gen nuklir dan diimpor ke kloroplas. Pada
bagian ini kita akan mempertimbangkan genetika,
perakitan, dan evolusi komponen kloroplas utama.
Genom Kloroplas, Sianobakteri, dan
Nuklir Telah Diurutkan
Genom kloroplas lengkap dari beberapa organisme telah
diurutkan. DNA kloroplas berbentuk lingkaran dan
ukurannya berkisar antara 120 hingga 160 kilobasa. Genom
kloroplas mengandung urutan pengkodean untuk sekitar
120 protein. Beberapa dari sekuens DNA ini mengkode
protein yang belum dikarakterisasi. Tidak pasti apakah
semua gen ini ditranskripsi menjadi mRNA dan
diterjemahkan menjadi protein, tetapi tampaknya beberapa
protein kloroplas masih harus diidentifikasi.

Genom lengkap cyanobacterium Sinekosistis (strain PCC
6803) dan tanaman yang lebih tinggi Arabidopsis
telah diurutkan, dan genom tanaman penting seperti padi
dan jagung telah dilengkapi (Kotani dan Tabata 1998;
Arabidopsis Genome Initiative 2000). Data genom untuk
kloroplas dan DNA inti akan memberikan wawasan baru
tentang mekanisme fotosintesis, serta banyak proses
tanaman lainnya.
Gen Kloroplas Menunjukkan Pola
Warisan Non-Mendel
Kloroplas dan mitokondria berkembang biak dengan
pembelahan bukan dengan sintesis de novo. Cara reproduksi
ini tidak mengherankan, karena organel ini mengandung
informasi genetik yang tidak ada dalam nukleus. Selama
pembelahan sel, kloroplas dibagi antara dua sel anak. Namun,
pada sebagian besar tanaman seksual, hanya tanaman ibu
yang menyumbangkan kloroplas ke zigot. Pada tumbuhan ini
pola pewarisan Mendel normal tidak berlaku untuk gen yang
dikodekan kloroplas karena keturunannya menerima kloroplas
hanya dari satu orang tua. Hasilnya adalah
non-Mendel, atau ibu, warisan. Banyak sifat yang diwariskan
dengan cara ini; salah satu contohnya adalah sifat resistensi
herbisida yang dibahas dalamWebTopik 7.10.
Banyak Protein Kloroplas Diimpor dari
Sitoplasma
Protein kloroplas dapat dikodekan oleh DNA kloroplas atau
nuklir. Protein yang dikodekan kloroplas disintesis pada
ribosom kloroplas; protein yang disandikan nukleus
disintesis pada ribosom sitoplasma dan kemudian diangkut
ke dalam kloroplas. Banyak gen nuklir mengandung intron
—yaitu, urutan basa yang tidak mengkode protein. MRNA
diproses untuk menghilangkan intron, dan protein
kemudian disintesis di sitoplasma.
Gen-gen yang dibutuhkan untuk fungsi kloroplas
didistribusikan dalam nukleus dan dalam genom kloroplas
tanpa pola yang jelas, tetapi kedua set tersebut penting untuk
kelangsungan hidup kloroplas. Beberapa gen kloroplas
diperlukan untuk fungsi seluler lainnya, seperti heme dan
sintesis lipid. Kontrol ekspresi gen nuklir yang mengkode
protein kloroplas adalah kompleks, melibatkan regulasi yang
bergantung pada cahaya yang dimediasi oleh fitokrom (lihat
Bab 17) dan cahaya biru (lihat Bab 18), serta faktor-faktor lain
(Bruick dan Mayfield 1999; Wollman dkk. 1999).
Pengangkutan protein kloroplas yang disintesis dalam
sitoplasma adalah proses yang diatur secara ketat (Chen
dan Schnell 1999). Misalnya, enzim rubisco (lihat Bab 8),
yang berfungsi dalam fiksasi karbon, memiliki dua jenis
subunit, subunit besar berkode kloroplas dan subunit kecil
berkode nukleus. Subunit kecil rubisco disintesis di
sitoplasma dan diangkut ke kloroplas, tempat enzim dirakit.
Dalam kasus ini dan kasus lain yang diketahui, protein kloroplas
yang disandikan nukleus disintesis sebagai protein prekursor
Fotosintesis: Reaksi Terang 139
mengandung urutan asam amino N-terminal yang dikenal sebagai a
peptida transit. Urutan terminal ini mengarahkan protein
prekursor ke kloroplas, memfasilitasi perjalanannya melalui
membran selubung luar dan dalam, dan kemudian
dipotong. Plastosianin pembawa elektron adalah protein
yang larut dalam air yang dikodekan dalam nukleus tetapi
berfungsi dalam lumen kloroplas. Oleh karena itu harus
melintasi tiga membran untuk mencapai tujuannya di
lumen. Peptida transit plastosianin sangat besar dan
diproses lebih dari satu langkah.
Biosintesis dan Penguraian
Klorofil Adalah Jalur Kompleks
Klorofil adalah molekul kompleks yang sangat cocok untuk fungsi
penyerapan cahaya, transfer energi, dan transfer elektron yang
mereka lakukan dalam fotosintesis (lihat Gambar).
7.6). Seperti semua biomolekul lainnya, klorofil dibuat melalui
jalur biosintetik di mana molekul sederhana digunakan sebagai
bahan penyusun untuk merakit molekul yang lebih kompleks
(Porra 1997; Beale 1999). Setiap langkah dalam jalur biosintetik
dikatalisis secara enzimatik.
Jalur biosintetik klorofil terdiri dari lebih dari selusin
langkah Topik Web 7.11). Proses ini dapat dibagi menjadi
beberapa fase (Gambar 7.37), yang masing-masing dapat
dianggap terpisah, tetapi di dalam sel sangat terkoordinasi
dan diatur. Regulasi ini penting karena klorofil bebas dan
banyak zat antara biosintetik merusak komponen seluler.
Kerusakan sebagian besar terjadi karena klorofil menyerap
cahaya secara efisien, tetapi dengan tidak adanya protein
yang menyertainya, mereka tidak memiliki jalur untuk
membuang energi, sehingga terbentuk oksigen singlet
yang beracun.
Jalur penguraian klorofil pada daun tua sangat berbeda
dengan jalur biosintetik (Matile et al. 1996). Langkah
pertama adalah penghilangan ekor fitol oleh enzim yang
dikenal sebagai klorofilase, diikuti dengan penghilangan
magnesium oleh magnesium de-kelatase. Selanjutnya
struktur porfirin dibuka oleh enzim oksigenase yang
bergantung pada oksigen untuk membentuk tetrapirol
rantai terbuka.
Tetrapirol selanjutnya dimodifikasi untuk membentuk
produk tak berwarna yang larut dalam air. Metabolit tidak
berwarna ini kemudian diekspor dari kloroplas tua dan
diangkut ke vakuola, di mana mereka disimpan secara
permanen. Metabolit klorofil tidak diproses lebih lanjut atau
didaur ulang, meskipun protein yang terkait dengannya
dalam kloroplas kemudian didaur ulang menjadi protein
baru. Daur ulang protein dianggap penting untuk ekonomi
nitrogen tanaman.
Organisme Fotosintetik Kompleks Berevolusi dari
Bentuk Sederhana
Aparatus fotosintesis rumit yang ditemukan pada tumbuhan
dan ganggang adalah produk akhir dari rangkaian evolusi yang
panjang. Banyak yang bisa dipelajari tentang evolusi ini
140 Bab 7

Fase I Fase II

COOH COOH
HOOC
CH2 CH2
COOH
CH2 CH2

CHNH2 C HAI NH n
n
COOH CH2NH2 NH2
H n HN
Asam glutamat Asam 5-Aminolevulinat (ALA) Porfobilinogen (PBG)

COOH COOH
Protoporfirin IX

Mg 2+
Fase III

CH2 CH3 CH2 CH3

CH3 A B CH3 A B
n n CH3 n n CH3
Mg NADPH, ringan Mg
H n n Protoklorofilida n n

CH3 D C CH3 oksidoreduktase CH3 D C CH3

E E
H Situs pengurangan

COOH CO 2CH O CO 2CH O

3
3
COOH
Klorofilida A Monovinil protoklorofilida A

GAMBAR 7.37 Jalur biosintesis kloro-

Fase IV ekor fitol fil. Jalur dimulai dengan asam glutamat, yang diubah
menjadi asam 5-aminolevulinat (ALA). Dua molekul
CH CH2 CH3 ALA terkondensasi membentuk porfobilinogen
(PBG). Empat molekul PBG dihubungkan untuk
membentuk protoporfirin IX. Magnesium (Mg)
H3C A B CH2CH3 kemudian dimasukkan, dan siklisasi cincin E yang
n n bergantung pada cahaya, reduksi cincin D, dan
Mg penempelan ekor fitol menyelesaikan prosesnya.
n n Banyak langkah dalam proses yang dihilangkan
H3C
D C CH3 dalam gambar ini.
H
E
HH
CO 2CH O
HAI 3

HAI
ekor fitol

Klorofil A

proses dari analisis organisme fotosintetik prokariotik yang
lebih sederhana, termasuk bakteri fotosintetik anoksigenik
dan cyanobacteria.
Kloroplas adalah organel sel semiotonom, dengan DNA-
nya sendiri dan alat sintesis protein lengkap. Banyak
protein yang membentuk aparatus fotosintesis, serta
semua klorofil dan lipid, disintesis dalam kloroplas. Protein
lain diimpor dari sitoplasma dan dikodekan oleh gen nuklir.
Bagaimana pembagian kerja yang aneh ini terjadi?
Kebanyakan ahli sekarang setuju bahwa kloroplas adalah
keturunan dari hubungan simbiosis antara cyanobacterium
dan sel eukariotik nonfotosintetik sederhana. Jenis
hubungan ini disebutendosimbiosis (Cavalier-Smith 2000).
Awalnya cyanobacterium mampu hidup mandiri, tetapi
seiring waktu banyak informasi genetik yang diperlukan
untuk fungsi seluler normal hilang, dan sejumlah besar
informasi yang diperlukan untuk mensintesis aparatus
fotosintesis dipindahkan ke nukleus. Sehingga kloroplas
tidak lagi mampu hidup di luar inangnya dan akhirnya
menjadi bagian integral dari sel.
Pada beberapa jenis alga, kloroplas diperkirakan muncul
melalui endosimbiosis organisme fotosintetik eukariotik
(Palmer dan Delwiche 1996). Dalam organisme ini kloroplas
dikelilingi oleh tiga dan dalam beberapa kasus empat
membran, yang dianggap sisa-sisa membran plasma dari
organisme sebelumnya. Mitokondria juga diperkirakan
berasal dari endosimbiosis dalam peristiwa terpisah jauh
lebih awal dari pembentukan kloroplas.
Jawaban atas pertanyaan lain yang berkaitan dengan
evolusi fotosintesis kurang jelas. Ini termasuk sifat sistem
fotosintesis paling awal, bagaimana dua fotosistem menjadi
terkait, dan asal usul evolusi kompleks evolusi oksigen
(Blankenship dan Hartman 1998; Xiong et al. 2000).
RINGKASAN
Fotosintesis adalah penyimpanan energi matahari yang
dilakukan oleh tumbuhan, alga, dan bakteri fotosintetik.
Foton yang diserap membangkitkan molekul klorofil, dan
klorofil yang tereksitasi ini dapat membuang energi ini
sebagai panas, fluoresensi, transfer energi, atau fotokimia.
Cahaya diserap terutama di kompleks antena, yang terdiri
dari klorofil, pigmen aksesori, dan protein dan terletak di
membran tilakoid kloroplas.
Pigmen antena fotosintesis mentransfer energi ke
kompleks klorofil-protein khusus yang dikenal sebagai
pusat reaksi. Pusat reaksi mengandung kompleks protein
multisubunit dan ratusan atau, pada beberapa organisme,
ribuan klorofil. Kompleks antena dan pusat reaksi
merupakan komponen integral dari membran tilakoid.
Pusat reaksi memulai serangkaian reaksi kimia yang
kompleks yang menangkap energi dalam bentuk ikatan
kimia.
Fotosintesis: Reaksi Terang 141
Hubungan antara jumlah kuanta yang diserap dan hasil
produk fotokimia yang dibuat dalam reaksi yang
bergantung pada cahaya diberikan oleh hasil kuantum.
Hasil kuantum dari langkah-langkah awal fotosintesis
adalah sekitar 0,95, menunjukkan bahwa hampir setiap
foton yang diserap menghasilkan pemisahan muatan di
pusat reaksi.
Tumbuhan dan beberapa prokariota fotosintesis
memiliki dua pusat reaksi, fotosistem I dan fotosistem II,
yang berfungsi secara seri. Kedua fotosistem dipisahkan
secara spasial: PSI ditemukan secara eksklusif di membran
stroma yang tidak ditumpuk, PSII sebagian besar di
membran grana yang ditumpuk. Klorofil pusat reaksi PSI
menyerap maksimal pada 700 nm, sedangkan PSII pada
680 nm. Fotosistem II dan I melakukan transpor elektron
nonsiklik, mengoksidasi air menjadi oksigen molekuler, dan
mereduksi NADP+ menjadi NADPH. Sangat sulit untuk
mengoksidasi air menjadi oksigen molekuler, dan sistem
evolusi oksigen fotosintesis adalah satu-satunya sistem
biokimia yang diketahui dapat mengoksidasi air, sehingga
menyediakan hampir semua oksigen di atmosfer bumi.
Fotooksidasi air dimodelkan dengan mekanisme keadaan S
lima langkah.
Residu tirosin dari protein D1 dari pusat reaksi PSII
berfungsi sebagai pembawa elektron antara kompleks
oksigen yang berevolusi dan P680. Feofitin dan dua
plastokuinon adalah pembawa elektron antara P680 dan
sitokrom B6 F kompleks. Plastosianin adalah mobil elektron
rier antara sitokrom B6 F dan 700rb. Pembawa elektron yang
menerima elektron dari P700 adalah pereduksi yang sangat kuat.
agen ing, dan mereka termasuk kuinon dan tiga protein
besi-sulfur terikat membran yang dikenal sebagai
ferredoxins terikat. Aliran elektron berakhir dengan reduksi
NADP+ menjadi NADPH oleh ferrodoksin-NADP reduktase
yang terikat membran.
Sebagian energi foton juga awalnya disimpan sebagai
energi potensial kimia, sebagian besar dalam bentuk
perbedaan pH melintasi membran tilakoid. Energi ini
dengan cepat diubah menjadi energi kimia selama
pembentukan ATP oleh aksi kompleks enzim yang dikenal
sebagai ATP sintase. Fotofosforilasi ADP oleh ATP sintase
didorong oleh mekanisme kemiosmotik. Aliran elektron
fotosintesis digabungkan dengan translokasi proton
melintasi membran tilakoid, dan stroma menjadi lebih basa
dan lumen lebih asam. Gradien proton ini mendorong
sintesis ATP dengan stoikiometri empat ion H+ per ATP.
NADPH dan ATP yang dibentuk oleh reaksi terang
menyediakan energi untuk reduksi karbon.
Kelebihan energi cahaya dapat merusak sistem fotosintesis,
dan beberapa mekanisme meminimalkan kerusakan tersebut.
Karotenoid bekerja sebagai agen fotoprotektif dengan secara
cepat memadamkan keadaan tereksitasi klorofil. Perubahan
keadaan terfosforilasi protein pigmen antena dapat
142 Bab 7

mengubah distribusi energi antara fotosistem I dan II bila

terjadi ketidakseimbangan antara energi yang diserap oleh 7.10 Cara Kerja Beberapa Herbisida
masing-masing fotosistem. Siklus xantofil juga Beberapa herbisida membunuh tanaman dengan menghalangi
berkontribusi pada pembuangan energi berlebih dengan aliran elektron fotosintesis.
pendinginan nonfotokimia.
7.11 Biosintesis Klorofil
Kloroplas mengandung DNA dan mengkodekan dan
Klorofil dan heme berbagi langkah awal jalur
mensintesis beberapa protein yang penting untuk
biosintetik mereka.
fotosintesis. Protein tambahan dikodekan oleh DNA inti,
disintesis di sitosol, dan diimpor ke kloroplas. Klorofil
disintesis dalam jalur biosintetik yang melibatkan lebih dari Esai Web
selusin langkah, yang masing-masing diatur dengan sangat
7.1 Pandangan baru tentang struktur kloroplas
hati-hati. Setelah disintesis, protein dan pigmen dirakit ke
Stromulus memperluas jangkauan kloroplas.
dalam membran tilakoid.

Materi Web Referensi Bab

Allen, JF, dan Forsberg, J. (2001) Pengenalan molekuler di tilakoid
struktur dan fungsi. Tren Tanaman Sci. 6: 317–326.
Topik Web Inisiatif Genom Arabidopsis. (2000) Analisis genom
7.1 Prinsip Spektrofotometri urutan tanaman berbunga Arabidopsis thaliana. Alam408: 796–
815.
Spektroskopi adalah teknik kunci untuk mempelajari
Asada, K. (1999) Siklus air-air dalam kloroplas: Scavenging
reaksi terang.
oksigen aktif dan disipasi foton berlebih. annu. Pdt. Fisiol
7.2 Distribusi Klorofil dan Pigmen Tumbuhan. Tanaman Mol. Biol.50: 601–639.
Fotosintetik Lainnya Avers, CJ (1985) Biologi Sel Molekuler. Addison-Wesley, Membaca,
MA.
Kandungan klorofil dan pigmen fotosintesis Barber, J., Nield, N., Morris, EP, dan Hankamer, B. (1999) Subunit
lainnya bervariasi di antara kerajaan penentuan posisi dalam fotosistem II ditinjau kembali. Tren Biokimia. Sci.24: 43–
tumbuhan. 45.
Beale, SI (1999) Enzim biosintesis klorofil. fotosintesis.
7.3 Hasil Kuantum Res. 60: 43–73.
Hasil kuantum mengukur seberapa efektif cahaya Becker, WM (1986) Dunia Sel. Benyamin/Cummings,
mendorong proses fotobiologis. Menlo Park, CA.
Berry, EA, Guergova-Kuras, M., Huang, L.-S., dan Crofts, AR
7.4 Efek Antagonis Cahaya pada Oksidasi (2000) Struktur dan fungsi sitokrom SM kompleks. annu. Pdt.
Sitokrom Biokimia.69: 1005–1075.
Fotosistem I dan II ditemukan dalam beberapa Kekosongan, RE (2002) Mekanisme Molekuler Fotosintesis.
Ilmu Blackwell, Oxford.
eksperimen yang cerdik.
Blankenship, RE, andHartman, H. (1998) Asal usul dan evolusi
7.5 Struktur Dua Pusat Reaksi Bakteri fotosintesis oksigen. Tren Biokimia. Sci.23: 94–97.
Studi difraksi sinar-X menyelesaikan struktur Blankenship, RE, dan Prince, RC (1985) Redoks keadaan tereksitasi
potensial dan skema Z fotosintesis. Tren Biokimia. Sci.10: 382–
atom pusat reaksi fotosistem
383.
II. Boyer, PD (1997) Sintase ATP: Mesin molekuler yang luar biasa.
7.6 Potensi Titik Tengah dan Reaksi Redoks annu. Pdt. Biokimia.66: 717–749.
Brettel, K. (1997) Transfer elektron dan pengaturan redoks
Pengukuran potensial titik tengah berguna
kofaktor pada fotosistem I. Biokim. Biofis. Akta1318: 322–373.
untuk menganalisis aliran elektron melalui Bruick, RK, dan Mayfield, SP (1999) Terjemahan yang diaktifkan cahaya
fotosistem II. dari mRNA kloroplas. Tren Tanaman Sci. 4: 190–195.
7.7 Evolusi Oksigen Buchanan, BB, Gruissem., W., dan Jones, RL, eds. (2000)Bio-
kimia dan Biologi Molekuler Tumbuhan. Amer. Soc. Fisiologi
Mekanisme status S adalah model yang berharga untuk Tumbuhan, Rockville, MD.
pemisahan air di PSII. Cavalier-Smith, T. (2000) Keturunan membran dan kloroplas awal
evolusi. Tren Tanaman Sci. 5: 174-182.
7.8 Fotosistem I
Chen, X., dan Schnell, DJ (1999) Impor protein ke dalam kloroplas.
Reaksi PSI adalah kompleks multiprotein. Tren Sel Biol. 9: 222–227.
7.9 ATP Sintase Chitnis, PR (2001) Fotosistem I: Fungsi dan fisiologi. annu.
Pdt. Fisiol Tumbuhan. Tanaman Mol. Biol.52: 593–626.
ATP sintase berfungsi sebagai motor Cramer, WA, Soriano, GM, Ponomarev, M., Huang, D., Zhang,
molekuler. H., Martinez, SE, dan Smith, JL (1996) Beberapa struktur baru
aspek dan kontroversi lama mengenai sitokrom B6 F
kompleks fotosintesis oksigen. annu. Pdt. Fisiol Tumbuhan.
Tanaman Mol. Biol.47: 477–508.

Deisenhofer, J., andMichel, H. (1989) Reaksi fotosintesis
pusat dari bakteri ungu Rhodopseudomonas viridis. Sains245:
1463–1473.
Demmig-Adams, B., dan Adams, WW, III. (1992) Fotoproteksi
dan tanggapan lain dari tanaman untuk stres cahaya yang tinggi. annu. Pdt. Fisiol
Tumbuhan. Tanaman Mol. Biol.43: 599–626.
Hijau, BR, dan Durnford, DG (1996) Klorofil-karotenoid
protein fotosintesis oksigen. annu. Pdt. Fisiol Tumbuhan.
Tanaman Mol. Biol.47: 685–714.
Grossman, AR, Bhaya, D., Apt, KE, dan Kehoe, DM (1995)
Kompleks pemanenan cahaya dalam fotosintesis oksigenik:
Keanekaragaman, kontrol, dan evolusi. annu. Pdt.29: 231–288.
Haldrup, A., Jensen, PE, Lunde, C., dan Scheller, HV (2001) Bal-
ance of power: Pandangan tentang mekanisme tema transisi keadaan
fotosintesis. Tren Tanaman Sci. 6: 301–305.
Haraux, F., dan De Kouchkovsky, Y. (1998) Kopling energi dan ATP
sintase. fotosintesis. Res.57: 231–251.
Hoganson, CW, dan Babcock, GT (1997) Mekanisme ametalloradikal
anisme untuk menghasilkan oksigen dari air dalam fotosintesis.
Sains 277: 1953–1956.
Horton, P., Ruban, AV, andWalters, RG (1996) Regulasi cahaya
panen pada tanaman hijau. annu. Pdt. Fisiol Tumbuhan. Tanaman Mol.
Biol.47: 655–684.
Jordan, P., Fromme, P., Witt, HT, Klukas, O., Saenger, W., dan
Krauss, N. (2001) Struktur tiga dimensi fotosistem cyanobacterial
I pada resolusi 2,5 . Alam 411: 909–917.
Karplus, PA, Daniels, MJ, dan Herriott, JR (1991) Struktur atom
ferredoxin-NADP+ reduktase: Prototipe untuk keluarga flavoenzim
yang baru secara struktural. Sains 251: 60–66.
Kotani, H., dan Tabata, S. (1998) Pelajaran dari pengurutan
genom cyanobacterium uniseluler, Synechocystis sp. PCC6803.
annu. Pdt. Fisiol Tumbuhan. Tanaman Mol. Biol.49: 151–171.
Krause, GH, andWeis, E. (1991) Fluoresensi klorofil dan foto
tosintesis: Dasar-dasar. annu. Pdt. Fisiol Tumbuhan. Tanaman Mol. Biol.
42: 313–350.
Kühlbrandt, W., Wang, DN, dan Fujiyoshi, Y. (1994)Model atom
kompleks pemanenan cahaya tanaman dengan kristalografi elektron.
Alam 367: 614–621.
Li, XP, Bjorkman, O., Shih, C., Grossman, AR, Rosenquist, M.,
Jansson, S., andNiyogi, KK (2000) Protein pengikat apigment
penting untuk regulasi pemanenan cahaya fotosintesis. Alam
403: 391–395.
Panjang, SP, Humphries, S., dan Falkowski, PG (1994) Photoinhi-
gigitan fotosintesis di alam. annu. Pdt. Fisiol Tumbuhan. Tanaman
Mol. Biol.45: 633–662.
Matile, P., Hörtensteiner, S., Thomas, H., dan Kräutler, B. (1996)
Pemecahan klorofil pada daun tua. Fisiol Tumbuhan. 112: 1403–
1409.
Melis, A. (1999) Kerusakan dan siklus perbaikan fotosistem-II dalam kloro-
plasts: Apa yang memodulasi tingkat photodamage in vivo? Tren Tanaman
Sci. 4: 130–135.
Fotosintesis: Reaksi Terang 143
Müller, P., Li, X.-P., dan Niyogi, KK (2001) Non-fotokimia
pendinginan: Respons terhadap energi cahaya berlebih. Fisiol Tumbuhan. 125:
1558–1566.
Okamura, MY, Paddock, ML, Graige, MS, dan Feher, G. (2000)
Transfer proton dan elektron di pusat reaksi bakteri. Biokim.
Biofis. Akta1458: 148-163.
Palmer, JD, dan Delwiche, CF (1996) Kloroplas bekas
dan kasus nukleus yang menghilang. Prok. Natal akad. Sci. Amerika Serikat
93: 7432–7435.
Paulsen, H. (1995) Klorofil a/b-mengikat protein. fotokimia. foto-
tobiol. 62: 367–382.
Pfündel, E., dan Bilger, W. (1994) Regulasi dan kemungkinan fungsi
siklus violaxanthin. fotosintesis. Res.42: 89–109.
Porra, RJ (1997) Kemajuan terbaru dalam porfirin dan klorofil
biosintesis. fotokimia. fotobiol.65: 492–516.
Pullerits, T., dan Sundström, V. (1996) Fotosintetik cahaya-panen
ing kompleks pigmen-protein: Menuju pemahaman bagaimana dan
mengapa. acc. Kimia Res.29: 381–389.
Stock, D., Leslie, AGW, andWalker, JE (1999) Arsitektur molekuler
struktur motor putar di ATP sintase. Sains 286: 1700–1705.
Tommos, C., dan Babcock, GT (1999) Produksi oksigen di alam:
Proses enzim metalloradikal yang digerakkan oleh cahaya. acc. Kimia Res.37: 18–
25.
Trebst, A. (1986) Topologi plastoquinone dan herbisida
mengikat peptida fotosistem II di membran tilakoid.
Z. Naturforsch. Teil C.240–245.
Trissl, H.-W., dan Wilhelm, C. (1993) Mengapa membran tilakoid
dari tumbuhan tingkat tinggi membentuk tumpukan grana? Tren Biokimia. Sci.18: 415–
419.
vanGrondelle, R., Dekker, JP, Gillbro, T., dan Sundström, V. (1994)
Transfer energi dan perangkap dalam fotosintesis. Biokim. Biofis.
Akta1187: 1–65.
Wollman, F.-A., Minai, L., dan Nechushtai, R. (1999) Biogenesis
dan perakitan protein fotosintesis dalam membran tilakoid.
Biokim. Biofis. Akta1411: 21–85.
Xiong, J., Fisher, W., Inoue, K., Nakahara, M., dan Bauer, CE (2000)
Bukti molekuler untuk evolusi awal fotosintesis. Sains 289: 1724–
1730.
Yachandra, VK, Sauer, K., dan Klein, MP (1996) klaster mangan
ter dalam fotosintesis: Di mana tanaman mengoksidasi air menjadi dioksigen.
Kimia Putaran.96: 2927–2950.
Yasuda, R., Noji, H., Yoshida, M., Kinosita, K., dan Itoh, H. (2001)
Resolusi sublangkah rotasi yang berbeda dengan analisis kinetik
submilidetik F 1-ATPase. Alam 410: 898–904.
Zouni, A., Witt, H.-T., Kern, J., Fromme, P., Krauss, N., Saenger, W.,
andOrth, P. (2001) Struktur kristal fotosistem II dariSyne-
chococcus elongatus pada resolusi 3,8Å. Alam 409: 739–743.
 8
Cbab

Fotosintesis:
Reaksi Karbon

BAB 5KAMI MEMBAHAS kebutuhan tanaman akan unsur hara mineral

dan cahaya untuk tumbuh dan melengkapi siklus hidupnya. Karena
organisme hidup berinteraksi satu sama lain dan lingkungannya, nutrisi
mineral berputar melalui biosfer. Siklus ini melibatkan interaksi yang
kompleks, dan setiap siklus sangat penting dalam dirinya sendiri. Karena
jumlah materi di biosfer tetap konstan, energi harus dipasok untuk
menjaga agar siklus tetap beroperasi. Jika tidak, peningkatan entropi
menentukan bahwa aliran materi pada akhirnya akan berhenti.
Organisme autotrofik memiliki kemampuan untuk mengubah sumber
energi fisik dan kimia menjadi karbohidrat tanpa adanya substrat
organik. Sebagian besar energi eksternal dikonsumsi dalam transformasi
BERSAMA2 ke keadaan tereduksi yang sesuai dengan kebutuhan sel (—
CHOH—).
Perkiraan terbaru menunjukkan bahwa sekitar 200 miliar ton CO2 dikonversi
menjadi biomassa setiap tahun. Sekitar 40% dari massa ini berasal dari
aktivitas fitoplankton laut. Sebagian besar karbon dimasukkan ke dalam
senyawa organik oleh reaksi reduksi karbon yang terkait dengan
fotosintesis.
Dalam Bab 7 kita melihat bagaimana oksidasi fotokimia air menjadi
molekul oksigen digabungkan dengan pembentukan ATP dan nukleotida
piridin tereduksi (NADPH) melalui reaksi yang terjadi di kloroplas.
membran tilakoid. Reaksi yang mengkatalisis reduksi CO2 menjadi
karbohidrat digabungkan dengan konsumsi NADPH dan ATP oleh
enzim yang ditemukan di stroma, fase larut kloroplas.
Reaksi stroma ini telah lama dianggap tidak bergantung pada cahaya dan,
sebagai akibatnya, disebut sebagai reaksi stroma reaksi gelap. Namun,
karena reaksi terlokalisasi stroma ini bergantung pada produk dari proses
fotokimia, dan juga diatur secara langsung oleh cahaya, maka reaksi ini lebih
tepat disebut sebagai reaksi reaksi karbon fotosintesis.
Dalam bab ini kita akan memeriksa reaksi siklik yang mencapai
fiksasi dan reduksi CO2, kemudian pertimbangkan bagaimana fenomena
fotorespirasi yang dikatalisasi oleh enzim karboksilasi mengubah efisiensi
146 Bab 8
H2HAI ADP + PSaya NADP+
Lampu
triosa
Klorofil
fosfat
HAI2 ATP + NADPH BERSAMA2 + H2HAI
Reaksi terang Reaksi karbon
GAMBAR 8.1 Reaksi terang dan reaksi karbon fotosintesis
kak. Cahaya diperlukan untuk pembentukan ATP dan
NADPH. ATP dan NADPH dikonsumsi oleh
reaksi bon, yang mereduksi CO2 menjadi karbohidrat
(triosa fosfat).
ilmu fotosintesis. Bab ini juga akan menjelaskan mekanisme
biokimia untuk mengkonsentrasikan karbon dioksida yang
memungkinkan tanaman untuk mengurangi dampak fotorespirasi.
tion: CO2 pompa, C4 metabolisme, dan metabolisme asam
crassulacean (CAM). Kami akan menutup bab ini dengan con-
sideration dari sintesis sukrosa dan pati.
SIKLUS CALVIN
Semua eukariota fotosintesis, dari alga paling primitif
ke angiosperma paling canggih, mengurangi CO2 menjadi
karbohidrat melalui mekanisme dasar yang sama: fotosintesis car-
siklus reduksi bon awalnya dijelaskan untuk C3 spesies (
siklus Calvin, atau siklus pentosa fosfat [RPP] reduktif).
Jalur metabolisme lain yang terkait dengan fotosintesis
fiksasi tetik CO2, seperti C4 siklus asimilasi karbon
fotosintesis dan oksidasi karbon fotorespirasi.
siklus tion, baik tambahan atau tergantung pada siklus
Calvin dasar.
Pada bagian ini kita akan memeriksa bagaimana CO2 ditetapkan oleh
siklus Calvin melalui penggunaan ATP dan NADPH yang dihasilkan
oleh reaksi terang (Gambar 8.1), dan bagaimana siklus
Calvin diatur.
Siklus Calvin Memiliki Tiga Tahapan:
Karboksilasi, Reduksi, dan Regenerasi
Siklus Calvin dijelaskan sebagai hasil dari serangkaian
eksperimen elegan oleh Melvin Calvin dan rekan-rekannya
pada 1950-an, di mana Hadiah Nobel diberikan pada 1961.
(Lihat Topik Web 8.1). Dalam siklus Calvin, CO2 dan air
dari lingkungan secara enzimatik dikombinasikan dengan a
molekul akseptor lima karbon untuk menghasilkan dua
molekul zat antara tiga karbon. Zat antara ini (3-
fosfogliserat) direduksi menjadi karbohidrat dengan
menggunakan ATP dan NADPH yang dihasilkan secara
fotokimia. Siklus ini diselesaikan dengan regenerasi
akseptor lima karbon (ribulosa-1,5-bifosfat, disingkat RuBP).
Siklus Calvin berlangsung dalam tiga tahap (Gambar 8.2):
(CH2HAI)n
1. Karboksilasi dari CO2 akseptor ribulosa-1,5-bifosfat,
membentuk dua molekul 3-fosfogliserat,
perantara stabil pertama dari siklus Calvin
2. Pengurangan dari 3-fosfogliserat, membentuk
gliseraldehida-3-fosfat, suatu karbohidrat
3. Regenerasi dari CO2 akseptor ribulosa-1,5-bifosfat dari
gliseraldehida-3-fosfat
Karbon dalam CO2 adalah bentuk paling teroksidasi yang
ditemukan di alam (+4). Karbon dari zat antara stabil pertama, 3-
fosfogliserat, lebih tereduksi (+3), dan selanjutnya direduksi
dalam produk gliseraldehida-3-fosfat (+1). Secara
keseluruhan, reaksi awal siklus Calvin menyelesaikan
reduksi karbon atmosfer dan, dengan demikian,
memfasilitasi penggabungannya ke dalam senyawa organik.
Karboksilasi Ribulosa Bisfosfat Dikatalis
oleh Enzim Rubisco
BERSAMA2 memasuki siklus Calvin dengan bereaksi dengan
ribulosa-1,5bifosfat untuk menghasilkan dua molekul 3-fosfogliserat
(Gambar 8.3 dan Tabel 8.1), suatu reaksi yang dikatalisis oleh
enzim kloroplas ribulosa bifosfat karboksilase/oksigenase,
disebut sebagai rubisko (Lihat WebTopik 8.2). Sebagai indi-
Awal siklus
Ribulosa-1,5-
BERSAMA2 + H2HAI
bifosfat
ADP Karboksilasi
Regenerasi
3-fosfogliserat
ATP ATP
+
NADPH
Pengurangan
Gliseraldehida-3-
fosfat
ADP + PSaya NADP+
Sukrosa, pati
GAMBAR 8.2 Siklus Calvin berlangsung dalam tiga tahap: (1)
karboksilasi, di mana CO2 secara kovalen terkait dengan
kerangka karbon; (2) reduksi, di mana karbohidrat
dibentuk dengan mengorbankan ATP yang diturunkan secara
fotokimia dan ekuivalen pereduksi dalam bentuk NADPH; dan
(3) regenerasi, di mana CO2 akseptor ribulosa-
1,5-bifosfat terbentuk kembali.
 +
6 NADPH 6 NADP
CH 2OPO 2–
3
+ +
3 H2HAI OP
C HAI O 6 H+
3 CO2 6 H+ 6ATP 6 ADP 6 PSaya
MENDEKUT- C
H C OH triosa
H C OH H C OH fosfat
H C OH Rubisko Fosfogliserat Gliseraldehida
kinase 3-fosfat G3P DHAP
CH2OP CH2OP
CH2OP dehidrogenase
3-fosfogliserat 1,3-bifosfogliserat
Ribulosa
1,5-bifosfat O H
C

H C OH

3 ADP CH2OP

Gliseraldehida
Fosforibulokinase 3-fosfat

3ATP
CH 2OH CH2OH CH2OPO 2–
3 triosa
fosfat
C HAI BERSAMA
PSaya H2HAI
BERSAMA isomerase
HO C H HO CH HO CH Aldolase

H C OH H C OH Fruktosa H C OH CH2OH CH2OH

1,6-bisfosfatase
CH2OP H C OH H C OH BERSAMA BERSAMA

Ribulosa CH2OP CH2OP CH2OP MEMOTONG

Xilulose 2
5-fosfat
5-fosfat
3-epimerase Fruktosa Fruktosa dihidroksi- dih ydroxy-
6-fosfat 1,6-bifosfat aseton aseton
fosfat fosfat

O H
CH 2OH
C
C HAI
H C OH Aldolase
H C OH Transketolase H C OH
H C OH CH2OP
CH2OP eritrosa
4-fosfat
Ribulosa
5-fosfat
CH2OPO3 2– CH2OH

C HAI C HAI
CH 2OH CH2OH
HO C H H2HAI PSaya
HO C H
C HAI Ribulosa BERSAMA

5-fosfat H C OH H C OH
H C OH 3-epimerase HO CH
Sedoheptulosa
H C OH 1,7-bisfosfatase H C OH
H C OH H C OH
H C OH H C OH
CH2OP CH2OP
CH2OP CH2OP
Ribulosa Xilulose
5-fosfat 5-fosfat Sedoheptulosa Sedoheptulosa
1,7-bifosfat 7-fosfat

O H
CH2OH C
C HAI Ribulosa H C OH
5-fosfat
H C OH isomerase H C OH Transketolase

H C OH H C OH

CH2OP CH2OP

Ribulosa Ribosa
5-fosfat 5-fosfat

GAMBAR 8.3 Siklus Calvin. Karboksilasi tiga molekul ribulosa-1,5-

bifosfat menyebabkan bersih sintesis satu molekul gliseraldehida-3-fosfat dan
regenerasi tiga molekul bahan awal. Proses ini dimulai dan diakhiri dengan tiga
molekul ribulosa-1,5-bifosfat, yang mencerminkan sifat siklik dari jalur tersebut.
148 Bab 8

TABEL 8.1
Reaksi dari siklus Calvin
Enzim Reaksi

1. Ribulosa-1,5-bifosfat karboksilase/oksigenase 6 Ribulosa-1,5-bifosfat + 6 CO2 + 6 H2HAI →

12 (3-fosfogliserat) + 12 H+
2. 3-fosfogliserat kinase 12 (3-Fosfogliserat) + 12 ATP →
12 (1,3-bifosfogliserat) + 12 ADP
3. NADP: gliseraldehida-3-fosfat dehidrogenase 12 (1,3-Bisfosfogliserat) + 12 NADPH + 12 H+→
12 gliseraldehye-3-fosfat + 12 NADP+ + 12 PSaya
4. Triosa fosfat isomerase 5 Gliseraldehida-3-fosfat →
5 dihidroksiaseton-3-fosfat
5. Aldolase 3 Gliseraldehida-3-fosfat + 3 dihidroksiaseton3-
fosfat → 3 fruktosa-1,6-bifosfat
6. Fruktosa-1,6-bisphosphatase 3 Fruktosa-1,6-bifosfat + 3 H2HAI → 3 fruktosa6-
fosfat + 3 PSaya
7. Transketolase 2 Fruktosa-6-fosfat + 2 gliseraldehida-3-fosfat →
2 erythrose-4-phosphate + 2 xylulose-5-phosphate

8. Aldolase 2 Erythrose-4-phosphate + 2 dihydroxyacetone-3-phosphate →

2 sedoheptulosa-1,7-bifosfat
9. Sedoheptulose-1,7,bisphosphatase 2 Sedoheptulosa-1,7-bifosfat + 2 H2HAI → 2 sedoheptulosa7-
fosfat + 2 PSaya
10. Transketolase 2 Sedoheptulosa-7-fosfat + 2 gliseraldehida-3-fosfat →
2 ribosa-5-fosfat + 2 xilulosa-5-fosfat
11a. Ribulosa-5-fosfat epimerase 4 Xilulose-5-fosfat → 4 ribulosa-5-fosfat 2
11b. Ribosa-5-fosfat isomerase Ribosa-5-fosfat → 2 ribulosa-5-fosfat
12. Ribulosa-5-fosfat kinase 6 Ribulosa-5-fosfat + 6 ATP → 6 ribulosa-1,5-bifosfat + 6 ADP +
6 H+

Bersih: 6 CO2 + 11 H2O + 12 NADPH + 18 ATP → Fruktosa-6-fosfat + 12 NADP+ + 6 H+ + 18 ADP + 17 PSaya

Catatan: PSaya singkatan dari fosfat anorganik.

dicat dengan nama lengkap, enzim juga memiliki oksigenase
aktivitas di mana O2 bersaing dengan CO2 untuk substrat
umum ribulosa-1,5-bifosfat (Lorimer 1983). Seperti yang kita
akan dibahas nanti, properti ini membatasi CO . bersih2 fiksasi.
Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 8.4, CO2 ditambahkan ke karbon 2
ribulosa-1,5-bifosfat, menghasilkan ikatan enzim yang tidak stabil
antara, yang dihidrolisis untuk menghasilkan dua molekul
produk stabil 3-fosfogliserat (lihat Tabel 8.1, reaksi 1). Dua
molekul 3-fosfogliserat—diberi label “atas” dan “bawah”
pada gambar—dibedakan oleh fakta bahwa molekul atas
mengandung
karbon dioksida berpori, yang ditunjuk di sini sebagai *CO2.
Dua sifat reaksi karboksilase terutama
penting:
1. Perubahan negatif energi bebas (lihat Bab 2 di situs web
untuk diskusi energi bebas) yang terkait dengan
karboksilasi ribulosa-1,5-bifosfat adalah besar; sehingga
reaksi maju sangat disukai.
2. Afinitas rubisco untuk CO2 cukup tinggi untuk memastikan
karboksilasi cepat pada konsentrasi rendah
CO yang
2 ditemukan dalam sel fotosintesis.
Rubisco sangat melimpah, mewakili hingga 40% dari
total protein larut sebagian besar daun. Konsentrasi situs
aktif rubisco dalam stroma kloroplas dihitung sekitar 4 mM,
atau sekitar 500 kali lebih besar dari
konsentrasi CO .nya2 substrat (lihat WebTopik 8.3).
Triosa Fosfat Dibentuk pada Langkah
Reduksi Siklus Calvin
Selanjutnya dalam siklus Calvin (Gambar 8.3 dan Tabel 8.1),
3fosfogliserat yang terbentuk pada tahap karboksilasi
mengalami dua modifikasi:
1. Ini pertama kali difosforilasi melalui 3-fosfogliserat kinase
menjadi 1,3-bisfosfogliserat melalui penggunaan ATP
yang dihasilkan dalam reaksi terang (Tabel 8.1, reaksi 2).
2. Kemudian direduksi menjadi gliseraldehida-3-fosfat
melalui penggunaan NADPH yang dihasilkan oleh
reaksi terang (Tabel 8.1, reaksi 3). Enzim kloroplas
NADP:gliseraldehida-3-fosfat dehidrogenase
mengkatalisis langkah ini. Perhatikan bahwa enzim ini
mirip dengan glikolisis (yang akan diuraikan
 Fotosintesis: Reaksi Karbon 149

GAMBAR 8.4 Karboksilasi

1CH2OPO 2–
ribulosa-1,5-bisfosfat oleh Karboksilasi Hidrolisis 3
rubisco. 1CH OPO 2– 2C
1
CH2 OPO3 2- * CO2 2 3 H2HAI H * CO2- “kamu pper”
2C 2C OH
HAI HO * CO2-
+
3C 3C
H OH HAI
3BERSAMA -

2
4C 4C
H OH H OH 4C
H OH “Lebih rendah”
5CH2OPO3 2- 5CH2OPO 2–
3 5CH2OPO 2–
3

Ribulosa-1,5-bifosfat 2-Karboksi-3-ketorabinitol- 3-fosfogliserat

1,5-bifosfat
(zat antara sementara, tidak
stabil, terikat enzim)

dibahas dalam Bab 11), kecuali bahwa NADP daripada
NAD adalah koenzim. Bentuk NADP-linked dari enzim
disintesis selama pengembangan kloroplas
(penghijauan), dan bentuk ini lebih disukai digunakan
dalam reaksi biosintetik.
Operasi Siklus Calvin Membutuhkan
Regenerasi Ribulosa-1,5-Bisfosfat
Penyerapan CO . yang berkelanjutan2 mengharuskan CO2
akseptor, ribulosa-1,5-bifosfat, terus-menerus diregenerasi.
Untuk mencegah penipisan zat antara siklus Calvin, tiga
molekul ribulosa-1,5-bifosfat (total 15 karbon) dibentuk oleh
reaksi yang mengubah karbon dari lima molekul triosa
fosfat (5 × 3 = 15 karbon). Perombakan ini terdiri dari reaksi
4 sampai 12 pada Tabel 8.1 (lihat juga Gambar 8.3):
6. Bisfosfat tujuh karbon ini kemudian dihidrolisis melalui
fosfatase spesifik untuk menghasilkan
sedoheptulosa-7-fosfat (reaksi 9).
7. Sedoheptulosa-7-fosfat menyumbangkan unit dua
karbon ke molekul kelima (dan terakhir) gliseraldehida-3-
fosfat melalui transketolase dan menghasilkan ribosa-5-
fosfat (dari C-3 ke C-7 dari sedoheptulosa) dan xilulosa
-5-fosfat (dari C-2 dari sedoheptulosa dan
gliseraldehida-3-fosfat) (reaksi 10).
8. Dua molekul xilulosa-5-fosfat diubah menjadi dua
molekul gula ribulosa-5-fosfat oleh epimerase
ribulosa-5-fosfat (reaksi 11a). Molekul ketiga ribulosa-5-
fosfat dibentuk dari ribosa-5-fosfat oleh ribosa-5-fosfat
isomerase (reaksi 11b).

9. Akhirnya, ribulosa-5-fosfat kinase mengkatalisis fosforilasi

1. Satu molekul gliseraldehida-3-fosfat diubah melalui
ribulosa-5-fosfat dengan ATP, sehingga meregenerasi tiga
triosa fosfat isomerase menjadi dihidroksiaseton-3-
molekul yang dibutuhkan dari molekul awal.
fosfat dalam reaksi isomerisasi (reaksi 4).
BERSAMA2 akseptor, ribulosa-1,5-bifosfat (reaksi 12).

2. Dihidroksiaseton-3-fosfat kemudian mengalami Siklus Calvin Meregenerasi

kondensasi aldol dengan molekul kedua
gliseraldehida-3-fosfat, suatu reaksi yang dikatalisis oleh
aldolase menghasilkan fruktosa-1,6-bifosfat (reaksi 5).
3. Fruktosa-1,6-bifosfat menempati posisi kunci dalam
siklus dan dihidrolisis menjadi fruktosa-6-fosfat (reaksi
6), yang kemudian bereaksi dengan enzim transketolase.
4. Satu unit dua karbon (C-1 dan C-2 dari fruktosa-6-
fosfat) ditransfer melalui transketolase ke molekul
ketiga gliseraldehida-3-fosfat untuk menghasilkan
eritrosa-4-fosfat (dari C-3 ke C -6 dari fruktosa) dan
xilulosa-5-fosfat (dari C-2 dari fruktosa dan
gliseraldehida-3-fosfat) (reaksi 7).
5. Eritrosa-4-fosfat kemudian bergabung melalui aldolase
dengan molekul keempat triosa fosfat
(dihidroksiaseton-3-fosfat) untuk menghasilkan gula
tujuh karbon sedoheptulosa-1,7-bifosfat (reaksi 8).
Komponen Biokimianya Sendiri
Reaksi siklus Calvin meregenerasi zat antara biokimia yang
diperlukan untuk mempertahankan operasi siklus. Tetapi yang
lebih penting, laju operasi siklus Calvin dapat ditingkatkan
dengan peningkatan konsentrasi zat antara; yaitu, siklusnya
adalahautokatalitik. Akibatnya, siklus Calvin memiliki fitur
metabolik yang diinginkan untuk menghasilkan lebih banyak
substrat daripada yang dikonsumsi, selama triosa fosfat tidak
dialihkan ke tempat lain:
5 RuBP4– + 5 CO2 + 9 H2O + 16 ATP4– + 10 NADPH →
6 RuBP4– + 14 Psaya + 6 H+ + 16 ADP3– + 10 NADP+
Pentingnya sifat autokatalitik ini ditunjukkan oleh
percobaan di mana daun yang sebelumnya gelap atau
kloroplas yang diisolasi diterangi. Dalam percobaan seperti itu,
BERSAMA2 fiksasi dimulai hanya setelah jeda, yang disebut
periode induksi, dan laju fotosintesis meningkat seiring waktu
dalam beberapa menit pertama setelah permulaan iluminasi. NS
150 Bab 8
peningkatan laju fotosintesis selama periode induksi
sebagian disebabkan oleh aktivasi enzim oleh cahaya
(dibahas nanti), dan sebagian lagi karena peningkatan
konsentrasi zat antara dalam siklus Calvin.
Stoikiometri Siklus Calvin Menunjukkan Bahwa
Hanya Seperenam dari Triosa Fosfat Digunakan
untuk Sukrosa atau Pati
Sintesis karbohidrat (pati, sukrosa) menyediakan wastafel yang
memastikan aliran atom karbon yang memadai melalui
siklus Calvin di bawah kondisi CO2 terus menerus2
serapan. Fitur penting dari siklus ini adalah ketersediaannya secara keseluruhan.
ikiometri. Pada permulaan iluminasi, sebagian besar triosa
fosfat ditarik kembali ke dalam siklus untuk memfasilitasi
pembentukan konsentrasi metabolit yang memadai.
Namun, ketika fotosintesis mencapai keadaan stabil, lima
per enam triosa fosfat berkontribusi pada regenerasi
ribulosa-1,5-bifosfat, dan seperenam diekspor ke sitosol
untuk sintesis sukrosa atau metabolit lain yang diubah
menjadi pati di dalam kloroplas.
Masukan energi, yang disediakan oleh ATP dan NADPH,
diperlukan untuk menjaga siklus berfungsi dalam fiksasi.
konsentrasi CO2. Perhitungan pada akhir Tabel 8.1 menunjukkan
bahwa untuk mensintesis setara dengan 1 molekul
heksosa, 6 molekul CO2 ditetapkan dengan mengorbankan 18 ATP dan
12 NADPH. Dengan kata lain, siklus Calvin berhubungan dengan
menjumlahkan dua molekul NADPH dan tiga molekul
ATP untuk setiap molekul CO2 difiksasi menjadi karbohidrat.
Kita dapat menghitung termodinamika keseluruhan maksimal
efisiensi fotosintesis jika kita mengetahui kandungan energi
cahaya, kebutuhan kuantum minimum (mol
kuanta yang diserap per mol CO2 tetap; lihat Bab 7), dan energi
yang tersimpan dalam satu mol karbohidrat (heksosa).
Cahaya merah pada 680 nm mengandung 175 kJ (42 kkal)
per kuantum mol foton. Persyaratan kuantum minimum
biasanya dihitung menjadi 8 foton per molekul CO2
tetap, meskipun angka yang diperoleh secara eksperimental adalah 9 to
10 (lihat Bab 7). Oleh karena itu, energi cahaya minimum
dibutuhkan untuk mereduksi 6 mol CO2 untuk satu mol heksosa
adalah sekitar 6 × 8 × 175 kJ = 8400 kJ (2016 kkal). Bagaimana-
pernah, satu mol heksosa seperti fruktosa hanya menghasilkan
2804 kJ (673 kkal) ketika dioksidasi total.
Membandingkan 8400 dan 2804 kJ, kita melihat bahwa
efisiensi termodinamika maksimum fotosintesis adalah
sekitar 33%. Namun, sebagian besar energi cahaya yang
tidak terpakai hilang dalam pembentukan ATP dan NADPH
melalui reaksi terang (lihat Bab 7) daripada selama operasi
siklus Calvin.
Kita dapat menghitung efisiensi siklus Calvin secara lebih
langsung dengan menghitung perubahan energi bebas
yang terkait dengan hidrolisis ATP dan oksidasi NADPH,
yang masing-masing adalah 29 dan 217 kJ (7 dan 52 kkal)
per mol. Kita melihat dalam daftar yang merangkum reaksi
siklus Calvin bahwa sintesis 1 molekul fruktosa-6-fosfat dari
6 molekul CO menggunakan 12
2 NADPH dan 18ATP
molekul. Oleh karena itu siklus Calvin mengkonsumsi (12× 217)
+ (18 × 29) = 3126 kJ (750 kkal) dalam bentuk NADPH dan ATP,
menghasilkan efisiensi termodinamika mendekati 90%.
Pemeriksaan perhitungan ini menunjukkan bahwa
sebagian besar energi yang dibutuhkan untuk konversi CO2
menjadi karbohidrat berasal dari NADPH. Artinya, 2 mol NADPH
× 52 kkal mol-1 = 104 kkal, tetapi 3 mol ATP × 7 kkal mol-1 =
21 kkal. Jadi, 83% (104 dari 125 kkal) energi yang tersimpan
berasal dari NADPH pereduksi.
Siklus Calvin tidak terjadi di semua sel autotrofik. Beberapa
bakteri anaerob menggunakan jalur lain untuk pertumbuhan
autotrofik:
• Sintesis asam organik yang dimediasi feredoksin dari
turunan asetil– dan suksinil– CoA melalui pembalikan
siklus asam sitrat (siklus asam karboksilat reduktif
bakteri sulfur hijau)
• Siklus penghasil glioksilat (jalur hidroksipropionat dari
bakteri nonsulfur hijau)
• Jalur linier (jalur asetil-KoA) dari bakteri asetogenik dan
metanogenik
Jadi meskipun siklus Calvin secara kuantitatif adalah yang paling
jalur penting CO . autotrofik2 fiksasi, yang lain telah
dijelaskan.
PERATURAN SIKLUS CALVIN
Efisiensi energi yang tinggi dari siklus Calvin menunjukkan
bahwa beberapa bentuk regulasi memastikan bahwa
semua zat antara dalam siklus hadir pada konsentrasi yang
memadai dan bahwa siklus dimatikan ketika tidak
diperlukan dalam gelap. Secara umum, variasi konsentrasi
atau aktivitas spesifik enzim memodulasi laju katalitik,
sehingga menyesuaikan tingkat metabolit dalam siklus.
Perubahan ekspresi gen dan biosintesis protein
mengatur konsentrasi enzim. Modifikasi protein
pascatranslasi berkontribusi pada regulasi aktivitas enzim.
Pada tingkat genetik, jumlah setiap enzim yang ada dalam
stroma kloroplas diatur oleh mekanisme yang mengontrol
ekspresi genom nukleus dan kloroplas (Maier et al. 1995;
Purton 1995).
Regulasi jangka pendek dari siklus Calvin dicapai dengan
beberapa mekanisme yang mengoptimalkan konsentrasi zat
antara. Mekanisme ini meminimalkan reaksi yang beroperasi
dalam arah yang berlawanan, yang akan membuang sumber
daya (Wolosiuk et al. 1993). Dua mekanisme umum dapat
mengubah sifat kinetik enzim:
1. Transformasi ikatan kovalen seperti reduksi disulfida
dan karbamilasi gugus amino, yang menghasilkan
enzim yang dimodifikasi secara kimia.
2. Modifikasi interaksi nonkovalen, seperti pengikatan
metabolit atau perubahan komposisi

tion lingkungan seluler (misalnya, pH). Selain itu,
pengikatan enzim ke membran tilakoid meningkatkan
efisiensi siklus Calvin, sehingga mencapai tingkat
organisasi yang lebih tinggi yang mendukung
penyaluran dan perlindungan substrat.
Aktivasi Enzim Bergantung Cahaya Mengatur
Siklus Calvin
Lima enzim yang diatur cahaya beroperasi dalam siklus Calvin:
1. Rubisco
2. NADP: gliseraldehida-3-fosfat dehidrogenase
3. Fruktosa-1,6-bisphosphatase
4. Sedoheptulose-1,7-bisphosphatase
5. Ribulosa-5-fosfat kinase
Empat enzim terakhir mengandung satu atau lebih
gugus disulfida (—S—S—). Cahaya mengontrol aktivitas
keempat enzim ini melaluisistem ferredoxin-thioredoxin,
mekanisme oksidasi-reduksi berbasis kovalen tiol yang
diidentifikasi oleh Bob Buchanan dan rekan (Buchanan
1980; Wolosiuk et al. 1993; Besse dan Buchanan 1997;
Schürmann dan Jacquot 2000). Dalam gelap residu ini ada
dalam keadaan teroksidasi (—S—S—), yang membuat
enzim tidak aktif atau subaktif. Dalam terang gugus —S—S
— direduksi menjadi keadaan sulfhidril (—SHHS—).
Perubahan redoks ini menyebabkan aktivasi enzim
(Gambar 8.5). Resolusi struktur kristal setiap anggota
sistem ferredoxin-thioredoxin dan enzim target
fruktosa-1,6bisphosphatase dan NADP:malat
dehidrogenase (Dai et al. 2000) telah memberikan informasi
berharga tentang mekanisme yang terlibat.
Sinyal sulfhidril (juga disebut ditiol) dari protein
pengatur tioredoksin ditransmisikan ke enzim target
spesifik, menghasilkan aktivasinya (lihat WebTopik 8.4).
Dalam beberapa kasus (seperti fruktosa-1,6-bisfosfatase),
aktivasi terkait tioredoksin ditingkatkan oleh efektor
(misalnya, substrat fruktosa-1,6-bifosfat).
Inaktivasi enzim target yang diamati pada penggelapan
tampaknya terjadi dengan pembalikan jalur reduksi
(aktivasi). Artinya, oksigen mengubah tioredoksin dan
enzim target dari keadaan tereduksi (—SH HS—) menjadi
keadaan teroksidasi (—S—S—) dan, dengan demikian,
menyebabkan inaktivasi enzim (lihat Gambar 8.5; lihat juga
WebTopik 8.4). Empat terakhir dari enzim yang tercantum
di sini diatur langsung oleh thioredoxin; yang pertama,
rubisco, diatur secara tidak langsung oleh enzim aksesori
tioredoksin, rubisco activase (lihat bagian berikutnya).
Aktivitas Rubisco Meningkat dalam Cahaya
Aktivitas rubisco juga diatur oleh cahaya, tetapi enzim itu
sendiri tidak merespon terhadap thioredoxin. George Lorimer
dan rekannya menemukan bahwa rubisco diaktifkan
ketika aktivator CO2 (molekul yang berbeda dari sub-
Fotosintesis: Reaksi Karbon 151
Lampu
Fotosistem I
Ferredoksin Ferredoksin
(teroksidasi) (dikurangi)
Ferredoksin:
tioredoksin
H+
reduktase
(dikurangi) (teroksidasi)
Tioredoksin Tioredoksin
SH HS S S
(teroksidasi) (dikurangi)
Enzim sasaran Enzim sasaran
S S SH HS
Tidak aktif Aktif
GAMBAR 8.5 Sistem ferredoxin-thioredoxin mengurangi enzim
spesifik dalam cahaya. Setelah reduksi, enzim biosintetik
diubah dari keadaan tidak aktif menjadi keadaan aktif. Proses
aktivasi dimulai dengan reduksi ferredoxin oleh fotosistem I
(lihat Bab 7). Feredoksin tereduksi ditambah dua proton
digunakan untuk mereduksi gugus disulfida aktif katalitik (—S
—S—) dari enzim besi-sulfur ferredoxin:thioredoxin reduktase,
yang selanjutnya mereduksi disulfida yang sangat spesifik (—S
—S—) ikatan protein pengatur kecil tioredoksin (lihat Topik
Web 8.4 untuk detailnya). Bentuk tereduksi (—SH HS—) dari
tioredoksin kemudian mereduksi ikatan disulfida kritis
(mengubah —S—S— menjadi
— SH HS—) dari enzim target dan dengan demikian menyebabkan
aktivasi enzim itu. Sinyal cahaya dengan demikian diubah menjadi
sulfhidril, atau -SH, sinyal melalui ferredoxin dan enzim
ferredoxin:thioredoxin reduktase.
strat CO2 yang menjadi tetap) bereaksi lambat dengan
tidak bermuatan -NH2 kelompok lisin dalam situs aktif
enzim. Turunan karbamat yang dihasilkan (baru
situs anionik) kemudian dengan cepat mengikat Mg2+ untuk menghasilkan kompleks
teraktivasi (Gambar 8.6).
Dua proton dilepaskan selama pembentukan
kompleks terner rubisco–CO2–Mg2+, jadi aktivasi didorong
oleh peningkatan pH dan Mg2+ konsentrasi.
Dengan demikian, perubahan stroma yang bergantung pada cahaya pada pH dan Mg2+
(lihat bagian berikutnya) muncul untuk memfasilitasi aktivasi
rubisco yang diamati oleh cahaya.
Dalam keadaan aktif, rubisco mengikat molekul lain
dari CO2, yang bereaksi dengan bentuk 2,3-enediol dari ribulosa-
1,5-bifosfat (P—O—CH2—COH—COH—CHOH— CH2O—P)
menghasilkan 2-karboksi-3-ketoribitol 1,5-bisfos-
152 Bab 8
Rubisko Rubisko
H+ BERSAMA2 H+
Lys Lys
NH3+ H+ NH2 H+
Karbamilasi
Tidak aktif
GAMBAR 8.6 mana rubisco diaktifkan melibatkan pembentukan car-
Satu jalan masuk
bamate–Mg2+ kompleks pada -gugus amino dari lisin di dalam situs aktif enzim. Dua
proton dilepaskan. Aktivasi ditingkatkan dengan peningkatan Mg2+
konsentrasi dan pH yang lebih tinggi (konsentrasi H+ rendah) yang dihasilkan dari iluminasi.
CO2 terlibat dalam karbamat-Mg2+ reaksi tidak sama dengan CO2
terlibat dalam karboksilasi ribulosa-1,5-bifosfat.
takdir. Ketidakstabilan ekstrim dari zat antara yang terakhir
menyebabkan pemutusan ikatan yang menghubungkan
karbon 2 dan 3 dari ribulosa-1,5-bifosfat, dan sebagai
akibatnya, rubisco melepaskan dua molekul 3-fosfogliserat.
Pengikatan gula fosfat, seperti ribulosa-1,5bifosfat, ke
rubisco mencegah karbamilasi. Gula fosfat dapat
dihilangkan oleh enzim rubisco activase, dalam reaksi yang
membutuhkan ATP. Peran utama dari rubisco activase
adalah untuk mempercepat pelepasan fosfat gula terikat,
sehingga mempersiapkan rubisco untuk karbamilasi
(Salvucci dan Ogren 1996, lihat jugaWebTopik 8.5).
Rubisco juga diatur oleh gula fosfat alami,
karboksyarabinitol-1-fosfat, yang sangat mirip dengan zat
antara transisi enam karbon dari reaksi karboksilasi.
Inhibitor ini terdapat pada konsentrasi rendah pada daun
dari banyak spesies dan pada konsentrasi tinggi pada daun
legum seperti kedelai dan kacang. Carboxyarabinitol1-
phosphate mengikat rubisco di malam hari, dan
dihilangkan oleh aksi rubisco activase di pagi hari, ketika
kerapatan fluks foton meningkat.
Pekerjaan terbaru telah menunjukkan bahwa di beberapa
tanaman rubisco activase diatur oleh sistem ferredoxin-
thioredoxin (Zhang dan Portis 1999). Selain menghubungkan
thioredoxin ke kelima enzim pengatur siklus Calvin, temuan ini
memberikan mekanisme baru untuk menghubungkan cahaya
dengan pengaturan aktivitas enzim.
Pergerakan Ion Bergantung Cahaya
Mengatur Enzim Siklus Calvin
Cahaya menyebabkan perubahan ion reversibel di stroma
yang mempengaruhi aktivitas rubisco dan enzim kloroplas
lainnya. Setelah penerangan, proton dipompa dari stroma
ke dalam lumen tilakoid. Penghabisan proton digabungkan
ke Mg2+ penyerapan ke dalam stroma. Fluks ion ini
menurunkan konsentrasi stroma H+ (pH 7→ 8) dan
meningkatkan Mg2+. Perubahan komposisi ionik ini
stroma kloroplas dibalik saat
Rubisko Rubisko penggelapan.
Beberapa enzim siklus Calvin
Mg2+ (rubisco, fruktosa-1,6bisphosphatase,
Lys Lys
sedoheptulose-1,7-bisphosphatase,
NH NH dan ribulosa-5-fosfat kinase) lebih
Mg2+
aktif pada pH 8 daripada pada pH 7
MENDEKUT- MENDEKUT-
dan membutuhkan Mg2+ sebagai
Mg2+ kofaktor untuk katalisis. Oleh karena
itu fluks ion yang bergantung pada
Aktif
cahaya ini meningkatkan aktivitas
enzim kunci dari siklus Calvin (Heldt
1979).
Transpor Membran yang
Tergantung Cahaya Mengatur
Siklus Calvin
Tingkat di mana karbon diekspor
dari kloroplas berperan
berperan dalam regulasi siklus Calvin. Karbon diekspor
sebagai fosfat triosa dalam pertukaran untuk ortofosfat
melalui translocator fosfat di membran bagian dalam
amplop kloroplas (Flügge dan Heldt 1991). Untuk
memastikan kelanjutan operasi siklus Calvin, setidaknya
lima perenam dari triosa fosfat harus didaur ulang (lihat
Tabel 8.1 dan Gambar 8.3). Jadi, paling banyak seperenam
dapat diekspor untuk sintesis sukrosa di sitosol atau
dialihkan ke sintesis pati di dalam kloroplas. Pengaturan
aspek metabolisme karbon fotosintesis ini akan dibahas
lebih lanjut ketika sintesis sukrosa dan pati dibahas secara
rinci nanti dalam bab ini.
THE C2 SIKLUS KARBON
FOTOSINTETIK OKSIDATIF
Sifat penting rubisco adalah kemampuannya untuk
mengkatalisis karboksilasi dan oksigenasi RuBP. Oksigenasi
adalah reaksi utama dalam proses yang dikenal sebagai
fotorespirasi. Karena fotosintesis dan fotorespirasi bekerja
dalam arah yang berlawanan secara diametral,
torespirasi menyebabkan hilangnya CO2 dari sel-sel yang secara simultan
secara bersamaan memperbaiki CO2 oleh siklus Calvin (Ogren 1984;
Leegood et al. 1995).
Pada bagian ini kita akan menjelaskan C2 siklus karbon
fotosintesis oksidatif—reaksi yang menghasilkan
pemulihan awal karbon yang hilang melalui oksidasi.
CO . fotosintesis2 Fiksasi dan Oksigenasi
Fotorespirasi Adalah Reaksi yang Bersaing
Penggabungan satu molekul O2 ke dalam isomer 2,3-
enediol dari ribulosa-1,5-bifosfat menghasilkan
zat antara tidak stabil yang dengan cepat membelah menjadi 2-
fosfoglikolat dan 3-fosfogliserat (Gambar 8.7 dan Tabel 8.2,
reaksi 1). Kemampuan untuk mengkatalisis oksigenasi
ribulosa-1,5-bifosfat adalah milik semua rubisco, mengenai-
 KLOROPLAS

2 POCH 2— (CHOH) —3 HCOP

2 siklus Calvin
Ribulosa-1,5-bifosfat

2 O2
(2.1)
2 POCH2 — CHOH — CO -2 + POCH2 — CHOH — CO -2
3-fosfogliserat 3-fosfogliserat
-
2 POCH 2— CO 2

2-fosfoglikolat
ADP
2 H2HAI
(2.10)
(2.2) HHAI2C— (CH2)2 — CH HO2C— (CH2)2 —
nH2 -BERSAMA2 CO—CO2 ATP
2 PSaya
teman gluta A-ketoglutarat
2 HOCH 2— CO - -
2 HOCH2 — HOCH — CO2
glikolat Gliserat

PEROKSISME

2 glikolat glutamat Gliserat

HO2C— (CH2)2 —
HAI2
CO—CO2
2 O2 NAD+
A-ketoglutarat
(2.9)
HAI2 (2.4) (2.3)
NADH
2 H2HAI2
HOCH2 — CO — CO -2
-
2 H2HAI 2 OCH— CO2
Hidroksipiruvat
Glioksilat
glutamat

(2.5) (2.8)

A-ketoglutarat

2 H2 n CH2 — CO2 - HOCH2 - H2 nCH - CO - 2

glisin serin

(2.6, 2.7) MITOKONDRION

NAD+ NADH nH +
4

2 glisin serin

H2HAI BERSAMA2

GAMBAR 8.7 Reaksi utama fotorespirasi
siklus. Pengoperasian C2 siklus fotosintesis oksidatif
melibatkan interaksi kooperatif antara tiga
organel: kloroplas, mitokondria, dan peroksisom. Dua
molekul glikolat (empat karbon) yang diangkut dari
kloroplas ke peroksisom diubah menjadi glisin, yang
selanjutnya diekspor ke mitokondria dan diubah menjadi
serin (tiga karbon) dengan pelepasan karbon dioksida (satu
karbon) secara bersamaan. Serin diangkut ke peroksisom
dan diubah menjadi gliserat. Yang terakhir mengalir ke
kloroplas di mana ia difosforilasi ke
3-fosfogliserat dan dimasukkan ke dalam siklus Calvin. Nitrogen
anorganik (amonia) yang dilepaskan oleh mitokondria ditangkap
oleh kloroplas untuk digabungkan menjadi asam amino dengan
menggunakan kerangka yang sesuai (-ketoglutarat). Panah berat
berwarna merah menandai asimilasi amonia menjadi glutamat
yang dikatalisis oleh glutamin sintetase. Selain itu, pengambilan
oksigen dalam peroksisom mendukung siklus oksigen pendek yang
digabungkan dengan reaksi oksidatif. Aliran karbon, nitrogen dan
oksigen masing-masing ditunjukkan dalam warna hitam, merah
dan biru. Lihat Tabel 8.2 untuk deskripsi setiap reaksi bernomor.
154 Bab 8
TABEL 8.2
Reaksi dari C2 siklus karbon fotosintesis oksidatif
Enzim
1. Ribulosa-1,5-bifosfat karboksilase/oksigenase
(kloroplas)
2. Fosfoglikolat fosfatase (kloroplas)
3. Glikolat oksidase (peroksisom)
4. Katalase (peroksisom)
5. Glyoxylate: glutamat aminotransferase (peroksisom)
6. Glisin dekarboksilase (mitokondria)
7. Serin hidroksimetiltransferase (mitokondria)
8. Serin aminotransferase (peroksisom)
9. Hidroksipiruvat reduktase (peroksisom)
10. Gliserat kinase (kloroplas)
Catatan: Setelah pelepasan glikolat dari kloroplas (reaksi 2 → 3), interaksi organel ini dengan peroksisom dan mitokondria mendorong
keseluruhan reaksi berikut:
2 Glikolat + glutamat + O2 → gliserat + -ketoglutarat + NH +
3-fosfogliserat yang terbentuk dalam kloroplas (reaksi 10) diubah menjadi ribulosa-1,5-bifosfat melalui reaksi reduktif dan
regeneratif dari siklus Calvin. Amonia dan-ketoglutarat diubah menjadi glutamat di kloroplas oleh glutamat terkait ferrodoksin
sintase (GOGAT).
PSaya singkatan dari fosfat anorganik.
kurang dari asal taksonomi. Bahkan rubisco dari bakteri
anaerobik, autotrofik mengkatalisis reaksi oksigenase
ketika terkena oksigen.
Sebagai substrat alternatif untuk rubisco, CO2 dan O2
bersaing untuk reaksi dengan ribulosa-1,5-bifosfat karena
karboksilasi dan oksigenasi terjadi dalam situs aktif yang
sama dari enzim. Ditawarkan konsentrasi yang sama dari
BERSAMA2 dan O2 dalam tabung reaksi, angiosperma rubiscos memfiksasi CO2
sekitar 80 kali lebih cepat daripada mereka mengoksidasi. Namun, sebuah
larutan berair dalam kesetimbangan dengan udara pada 25 ° C memiliki
BERSAMA2:HAI2 rasio 0,0416 (lihat Topik Web 8.2 dan 8.3).
Pada konsentrasi ini, karboksilasi di udara melebihi oksigen
generasi dengan sedikit tiga banding satu.
C2 siklus karbon fotosintesis oksidatif bertindak sebagai operasi
pemulung untuk memulihkan karbon tetap yang hilang selama
fotorespirasi oleh reaksi oksigenase rubisco (Topik Web
8.6). 2-fosfoglikolat yang terbentuk dalam kloroplas
dengan oksigenasi ribulosa-1,5-bifosfat dengan cepat
dihidrolisis menjadi glikolat oleh fosfatase kloroplas
tertentu (Gambar 8.7 dan Tabel 8.2, reaksi 2). Metabolisme
glikolat selanjutnya melibatkan kerja sama dua organel lain:
peroksisom dan mitokondria (lihat Bab 1) (Tolbert 1981).
Glikolat meninggalkan kloroplas melalui protein
pengangkut spesifik dalam membran amplop dan berdifusi
ke peroksisom. Di sana ia dioksidasi menjadi glioksilat dan
hidrogen peroksida (H2HAI2) oleh flavin mononukleotida-
Reaksi
2 Ribulosa-1,5-bifosfat + 2 O2 →2 fosfoglikolat + 2 3-
fosfogliserat + 4 H+
2 Fosfoglikolat + 2 H2HAI → 2 glikolat + 2 PSaya
2 Glikol + 2 O2 → 2 glioksilat + 2 H2HAI2
2 H2HAI2 → 2 H2O + O2
2 Glyoxylate + 2 glutamat → 2 glisin + 2 -ketoglutarat
Glisin + NAD+ + H+ + H4-folat → NADH + CO2 + NH4 + +
metilen-H4-folat
Metilen-H4-folat + H2O + glisin → serin + H4-folat Serin
+ -ketoglutarat → hidroksipiruvat + glutamat
Hidroksipiruvat + NADH + H+→ gliserat + NAD+
Gliserat + ATP → 3-fosfogliserat + ADP + H+
4 + BERSAMA2 + H2HAI
oksidase dependen: glikolat oksidase (Gambar 8.7 dan Tabel
8.2, reaksi 3). Sejumlah besar hidrogen peroksida yang
dilepaskan dalam peroksisom dihancurkan oleh aksi
katalase (Tabel 8.2, reaksi 4) sedangkan glioksilat
mengalami transaminasi (reaksi 5). Donor amino untuk
transaminasi ini mungkin glutamat, dan produknya adalah
asam amino glisin.
Glisin meninggalkan peroksisom dan memasuki
mitokondria (lihat Gambar 8.7). Di sana kompleks multienzim
glisin dekarboksilase mengkatalisis konversi dua molekul glisin
dan satu NAD+ menjadi satu molekul masing-masing
serin, NADH, NH + 4 dan CO2 (Tabel 8.2, reaksi 6 dan
7). Kompleks multienzim ini, hadir dalam konsentrasi besar
dalam matriks mitokondria tumbuhan, terdiri dari empat
protein, bernama protein-H (polipeptida yang mengandung
lipoamida), protein-P (suatu 200 kDa, homodimer, protein yang
mengandung piridoksal fosfat), T- protein (protein yang
bergantung pada folat), dan protein L (protein yang
mengandung nukleotida flavin adenin).
Amonia yang terbentuk dalam oksidasi glisin berdifusi
dengan cepat dari matriks mitokondria ke kloroplas, di mana
glutamin sintetase menggabungkannya dengan kerangka
karbon untuk membentuk asam amino. Serin yang baru
terbentuk meninggalkan mitokondria dan memasuki
peroksisom, di mana ia diubah pertama kali oleh transaminasi
menjadi hidroksipiruvat (Tabel 8.2, reaksi 8) dan kemudian oleh
reduksi bergantung NADH menjadi gliserat (reaksi 9).

Antar-jemput amalate-oksaloasetat mentransfer NADH dari
sitoplasma ke peroksisom, sehingga mempertahankan
konsentrasi NADH yang memadai untuk reaksi ini. Akhirnya,
gliserat masuk kembali ke kloroplas, di mana ia difosforilasi
untuk menghasilkan 3-fosfogliserat (Tabel 8.2, reaksi 10).
Dalam fotorespirasi, berbagai senyawa disirkulasikan secara
bersama-sama melalui dua siklus. Dalam salah satu siklus,
karbon keluar dari kloroplas dalam dua molekul glikolat dan
kembali dalam satu molekul gliserat. Pada siklus lainnya,
nitrogen keluar dari kloroplas dalam satu molekul glutamat
dan kembali dalam satu molekul amonia (bersama dengan satu
molekul-ketoglutarat) (lihat Gambar 8.7).
Jadi secara keseluruhan, dua molekul fosfoglikolat
(empat atom karbon), yang hilang dari siklus Calvin oleh
oksigenasi RuBP, diubah menjadi satu molekul 3-fosfo-
gliserat (tiga atom karbon) dan satu CO2. Dengan kata lain,
75% dari karbon hilang oleh oksigenasi ribulosa-1,5-bis-
fosfat diperoleh kembali oleh C2 siklus karbon fotosintesis
oksidatif dan kembali ke siklus Calvin (Lorimer 1981).
Di sisi lain, total nitrogen organik tetap tidak berubah
karena pembentukan nitrogen anorganik
(NH +4) dalam mitokondria diseimbangkan oleh sintesis
glutamin dalam kloroplas. Demikian pula, penggunaan
NADH di peroksisom (oleh hidroksipiruvat reduktase)
diimbangi dengan pengurangan NAD+ di mitokondria (oleh
glisin dekarboksilase).
Persaingan antara Karboksilasi dan
Oksigenasi Menurunkan Efisiensi
Fotosintesis
Karena fotorespirasi bersamaan dengan fotosintesis
tesis, sulit untuk mengukur tingkat fotorespirasi
dalam sel utuh. Dua molekul 2fosfoglikolat
(empat atom karbon) diperlukan untuk membuat
satu molekul 3-fosfogliserat, dengan melepaskan
satu molekul
BERSAMA2; jadi secara teoritis seperempat dari karbon
yang masuk ke C2 siklus karbon fotosintesis oksidatif
dilepaskan sebagai CO2.
Pengukuran CO2 pelepasan oleh daun bunga
matahari mendukung nilai yang dihitung ini. Hasil ini
menunjukkan bahwa laju fotosintesis
sebenarnya adalah sekitar 120 hingga 125% dari
laju yang diukur. Rasio karboksilasi terhadap
oksigenasi di udara pada 25°C dihitung antara
2,5 dan 3. Perhitungan lebih lanjut menunjukkan
bahwa fotorespirasi menurunkan efisiensi fiksasi
karbon fotosintesis dari 90% menjadi sekitar 50%.
Penurunan efisiensi ini dapat diukur sebagai:
peningkatan kebutuhan kuantum untuk CO2 GAMBAR 8.8 Aliran karbon di daun ditentukan oleh keseimbangan
fiksasi di bawah kondisi fotorespirasi (udara antara dua siklus yang saling berlawanan. Sedangkan siklus Calvin
mampu beroperasi secara independen dengan adanya sub-
dengan O tinggi2 dan CO . yang rendah2) dibandingkan
strata yang dihasilkan oleh transpor elektron fotosintesis, C2 siklus
dengan kondisi nonfotorespirasi (O rendah2 dan CO . yang karbon fotosintesis oksidatif membutuhkan operasi lanjutan dari Calvin
tinggi2). siklus untuk meregenerasi bahan awalnya, ribulosa-1,5-bifosfat.
Fotosintesis: Reaksi Karbon 155
Karboksilasi dan Oksigenasi
Berhubungan erat dalam Daun Utuh
Metabolisme karbon fotosintesis dalam daun utuh mencerminkan
keseimbangan terpadu antara dua siklus yang saling berlawanan
dan saling terkait (Gambar 8.8). Siklus Calvin dapat
beroperasi secara independen, tetapi C2 siklus karbon fotosintesis
oksidatif tergantung pada siklus Calvin untuk pasokan
ribulosa-1,5-bifosfat. Keseimbangan antara dua siklus
ditentukan oleh tiga faktor: sifat kinetik
rubisco, konsentrasi substrat CO2 dan O2,
dan suhu.
Dengan meningkatnya suhu, konsentrasi CO2
dalam larutan dalam kesetimbangan dengan udara berkurang lebih dari
konsentrasi O2 melakukan (lihat Topik Web 8.3). konsekuensi-
Selanjutnya, rasio konsentrasi CO2 juga2 menurun seiring
dengan naiknya suhu. Sebagai hasil dari properti ini, pho-
torespirasi (oksigenasi) meningkat relatif terhadap
fotosintesis (karboksilasi) ketika suhu naik. Efek ini
ditingkatkan oleh sifat kinetik rubisco, yang juga
menghasilkan peningkatan oksigenasi relatif pada suhu
yang lebih tinggi (Ku dan Edwards 1978). Secara
keseluruhan, kemudian, peningkatan suhu secara progresif
memiringkan keseimbangan menjauh dari siklus Calvin dan
menuju siklus karbon fotosintesis oksidatif (lihat Bab 9).
Fungsi Biologis Fotorespirasi Tidak
Diketahui
Meskipun C2 siklus karbon fotosintesis oksidatif memulihkan
75% dari karbon yang awalnya hilang dari Calvin
siklus sebagai 2-fosfoglikolat, mengapa 2-fosfoglikolat terbentuk
sama sekali? Satu penjelasan yang mungkin adalah bahwa formasi
2-fosfoglikolat
HAI2
HAI2
Ribulosa
1,5-bifosfat
BERSAMA2 BERSAMA2
(Bersih
karbon (Bersih
3-fosfogliserat karbon
memperoleh)
kehilangan)
Transpor elektron C2 siklus karbon
dan siklus Calvin fotosintesis oksidatif
156 Bab 8
dari 2-fosfoglikolat adalah konsekuensi dari reaksi kimia
karboksilasi, yang membutuhkan zat antara
yang dapat bereaksi dengan kedua CO2 dan O2.
Reaksi seperti itu hanya memiliki sedikit konsekuensi dalam
waktu evolusi awal jika rasio CO2 juga2 di udara adalah
lebih tinggi dari saat ini. Namun, CO . yang rendah2:HAI2
rasio lazim di zaman modern kondusif untuk fotorespirasi
tanpa fungsi lain selain pemulihan beberapa karbon yang
ada dalam 2-fosfoglikolat.
Penjelasan lain yang mungkin adalah bahwa fotorespirasi
itu penting, terutama dalam kondisi intensitas cahaya tinggi.
sitas dan CO . antar sel yang rendah2 konsentrasi (misalnya,
ketika stomata tertutup karena tekanan air), untuk menghilang
kelebihan ATP dan mengurangi daya dari reaksi terang,
sehingga mencegah kerusakan pada aparatus fotosintesis.
Arabidopsis mutan yang tidak dapat melakukan fotorespirasi tumbuh
biasanya di bawah 2% CO2, tetapi mereka mati dengan cepat jika
dipindahkan ke udara normal. Ada bukti dari bekerja dengan transgenik
tumbuhan yang fotorespirasi melindungi C3 tanaman dari
fotooksidasi dan fotoinhibisi (Kozaki dan Takeba 1996).
Pekerjaan lebih lanjut diperlukan untuk meningkatkan pemahaman
kita tentang fungsi fotorespirasi.
BERSAMA2-MEKANISME KONSENTRASI I:
POMPA ALGAL DAN SIANOBAKTERIAL
Banyak tanaman tidak melakukan fotorespirasi sama sekali, atau mereka
melakukannya hanya sampai batas tertentu. Tumbuhan ini memiliki rubiscos
yang normal, dan kurangnya fotorespirasi merupakan konsekuensi dari
mekanisme yang mengkonsentrasikan CO2 di lingkungan
rubisco dan dengan demikian menekan reaksi oksigenasi.
Di bagian ini dan dua bagian berikutnya kita akan membahas
tiga mekanisme untuk mengkonsentrasikan CO2 di tempat
karboksilasi:
1. C4 fiksasi karbon fotosintesis (C4)
2. Metabolisme asam Crassulacean (CAM)
3. CO2 pompa pada membran plasma
Dua yang pertama dari CO . ini2-mekanisme pemekatan ditemukan
di beberapa angiospermae dan melibatkan "tambahan" pada
siklus Calvin. Tanaman dengan C4 metabolisme sering ditemukan di
lingkungan yang panas; Tanaman CAM adalah tipikal dari lingkungan gurun.
ronmen. Kami akan memeriksa masing-masing dari dua sistem ini setelah
kami mempertimbangkan mekanisme ketiga: a CO2 pompa ditemukan
pada tanaman air yang telah dipelajari secara ekstensif di unisel-
cyanobacteria lular dan alga.
Ketika sel alga dan cyanobacterial tumbuh di udara
diperkaya dengan 5% CO2 dan kemudian dipindahkan ke CO . rendah2
medium, mereka menunjukkan gejala khas fotorespirasi.
tion (O2 penghambatan fotosintesis pada konsentrasi rendah CO2). Tetapi jika
sel ditumbuhkan di udara yang mengandung 0,03% CO2, mereka dengan
cepat mengembangkan kemampuan untuk berkonsentrasi dalam
karbon ganik (CO2 ditambah HCO 3)
-
secara internal. Di bawah ini
rendah-CO2 kondisi, sel-sel tidak lagi berfotorespirasi.
Pada konsentrasi CO2 ditemukan di lingkungan perairan,
rubisco beroperasi jauh di bawah spesifik maksimalnya
aktivitas. Organisme laut dan air tawar mengatasi kelemahan ini
dengan mengumpulkan karbon anorganik dengan menggunakan:
BERSAMA2 dan HCO3 -pompa pada membran plasma. ATP
berasal dari reaksi terang memberikan energi yang diperlukan
penting untuk penyerapan aktif CO2 dan HCO -3 . Total dalam-
karbon ganic di dalam beberapa sel cyanobacterial dapat mencapai
konsentrasi 50 mM (Ogawa dan Kaplan 1987). Pekerjaan terbaru
menunjukkan bahwa gen tunggal yang mengkode faktor
transkripsi dapat mengatur ekspresi gen yang mengkodekan
komponen CO2-mekanisme pemekatan pada alga (Xiang et
al. 2001).
Protein yang berfungsi sebagai CO2–HCO - 3 pompa tidak
hadir dalam sel yang tumbuh dalam konsentrasi tinggi CO2 tapi apakah
diinduksi pada paparan konsentrasi rendah CO2. NS
akumulasi HCO - 3 diubah menjadi CO2 oleh enzim mobil-
anhidrase bonic, dan CO2 memasuki siklus Calvin.
Konsekuensi metabolik dari CO . ini2 pengayaan adalah
penekanan oksigenasi ribulosa bifosfat
dan karenanya juga penekanan fotorespirasi. Biaya energik
adaptasi ini adalah ATP tambahan yang dibutuhkan
untuk mengkonsentrasikan CO2.
BERSAMA2-MEKANISME KONSENTRASI
II: C4 SIKLUS KARBON
Terdapat perbedaan anatomi daun antar tumbuhan yang
memiliki C4 siklus karbon (disebut C4 tanaman) dan yang
berfotosintesis hanya melalui siklus fotosintesis Calvin (C3
tanaman). Melintasi bagian dari C . khas3 daun mengungkapkan satu
jenis sel utama yang memiliki kloroplas, yaitu mesofil. Sebaliknya,
khas C4 daun memiliki dua jenis sel yang mengandung kloroplas:
mesofil dan bundel selubung (atau Kranz, Jerman untuk
sel "karangan bunga") (Gambar 8.9).
Ada variasi anatomi yang cukup besar dalam susunan
sel-sel selubung bundel sehubungan dengan mesofil dan
jaringan vaskular. Namun, dalam semua kasus, operasi
dari C4 siklus membutuhkan upaya kerja sama dari kedua sel
jenis. Tidak ada sel mesofil dari C4 tanaman lebih dari dua
atau tiga sel dari sel selubung bundel terdekat (lihat
Gambar 8.9A). Selain itu, jaringan luas plasmodesmata
(lihat Gambar 1.27) menghubungkan sel mesofil dan
selubung bundel, sehingga menyediakan jalur untuk aliran
metabolit antar jenis sel.
Malat dan Aspartat Adalah Produk Karboksilasi
dari C4 siklus
Pelabelan awal C4 asam pertama kali diamati pada 14BERSAMA2
studi pelabelan tebu oleh HP Kortschack dan rekan
dan jagung oleh Y. Karpilov dan rekan kerja. Saat pergi
terpapar selama beberapa detik untuk 14BERSAMA2 dalam terang, 70 to
80% dari label ditemukan di C4 asam malat dan aspartat—
pola yang sangat berbeda dari yang diamati
pada daun yang berfotosintesis hanya melalui siklus Calvin.
 Fotosintesis: Reaksi Karbon 157

(A) (B)

(C) (D)

(E)

Sel mesofil Bundel sel selubung

GAMBAR 8.9 Penampang daun, menunjukkan anatomi

perbedaan antara C3 dan C4 tanaman. (A) AC4 monokotil,
saccharum officinarum (tebu). (135×) (B) AC3 monokotil, Poa sp.
(sebuah rumput). (240×) (C) AC4 dikotil, Flaveria australasica
(Asteraceae). (740×) Sel selubung bundel besar di C4
daun (A dan C), dan tidak ada sel mesofil lebih dari dua
Plasmodesmata atau tiga sel dari sel selubung bundel terdekat.
Fitur anatomi ini tidak ada di C3 daun (B). (D)
Model tiga dimensi dari C4 daun. (A dan B © David Webb;
C milik Athena McKown; D setelah Lüttge and
Higinbotham; E dari Craig dan Goodchild 1977.)
158 Bab 8

Dalam melakukan observasi awal ini CO . atmosfer2

CR Slack menjelaskan apa yang sekarang Plasma
siklus karbon tosintetik (C4 siklus selaput
menetapkan bahwa C4 asam mala stabil Mesofil
pertama, intermedia yang terdeteksi sel Dinding sel

daun tebu dan karbo tersebut Fosfoenol-

HCO 3-
selanjutnya menjadi atom karbon piruvat
1 (Hatch and Slack 1966). Daun ini
tidak dikatalisis oleh ru
phoenylpyruvate) carboxylase (C Karboksilasi Regenerasi
Cara transfer karbon dari atom karbon 4 malat ke atom
karbon 1 3-fosfogliserat menjadi jelas ketika keterlibatan C4 AC id C3 AC id

mesofil dan sel-sel selubung berkas dijelaskan. Enzim

yang berpartisipasi terjadi di salah satu dari dua jenis sel:
PEP karboksilase dan piruvat-ortofosfat dikinase terbatas
pada sel mesofil; dekarboksilase dan enzim dari siklus Bundel
Calvin lengkap terbatas pada sel-sel selubung bundel. sarung
sel
Dengan pengetahuan ini, Hatch dan Slack mampu
merumuskan model dasar siklus siklus Calvin

C4 AC id
(Gambar 8.11 dan Tabel 8.3).
BERSAMA2

C4 Siklus Konsentrat CO2 dalam Dekarboksilasi C3 AC id

Bundel Sel Selubung
C . dasar4 siklus terdiri dari empat tahap:
1. Fiksasi CO2 oleh karboksilasi
fosfoenolpiruvat di mesofil
sel membentuk C4 asam (malat dan/atau
aspartat) GAMBAR 8.10 C . dasar4 Siklus karbon fotosintesis melibatkan empat
tahap dalam dua jenis sel yang berbeda: (1) Fiksasi CO2 menjadi asam
2. Transportasi C4 asam ke sel selubung empat karbon dalam sel mesofil; (2) Transportasi asam empat karbon dari
bundel sel mesofil ke sel selubung bundel; (3) Dekarboksilasi dari empat-kar-
asam bon, dan pembentukan CO . yang tinggi2 konsentrasi dalam bundel
3. Dekarboksilasi C4 asam dalam sel sel sarung. CO2 yang dilepaskan difiksasi oleh rubisco dan diubah menjadi
selubung bundel dan generasi karbohidrat oleh siklus Calvin. (4) Transportasi asam tiga karbon sisa
dari CO2, yang kemudian direduksi menjadi kembali ke sel mesofil, di mana CO . asli2 akseptor, fosfoenolpiruvat,
karbohidrat melalui siklus Calvin diregenerasi.

TABEL 8.3
Reaksi dari C4 siklus karbon fotosintesis
Enzim Reaksi

1. Fosfoenolpiruvat (PEP) karboksilase Fosfoenolpiruvat + HCO - 3→ oksaloasetat + PSaya

2. NADP: malat dehidrogenase Oksaloasetat + NADPH + H+→ malat + NADP +

3. Aspartat aminotransferase Oksaloasetat + glutamat → aspartat + -ketoglutarat

4. Enzim malat NAD(P) Malat + NAD(P)+ → piruvat + CO2 + NAD(P)H + H+

5. Fosfoenolpiruvat karboksikinase Oksaloasetat + ATP → fosfoenolpiruvat + CO2 + ADP

6. Alanin aminotransferase Piruvat + glutamat ↔ alanin + -ketoglutarat

7. Adenilat kinase AMP + ATP → 2 ADP

8. Piruvat-ortofosfat dikinase Piruvat + Psaya + ATP → fosfoenolpiruvat + AMP + PPSaya

9. Pirofosfatase PPsaya + H2HAI → 2 PSaya

Catatan: PSaya dan PPSaya berdiri untuk fosfat anorganik dan pirofosfat, masing-masing.
 CO . atmosfer2

Sel mesofil ATP

Karbonat adenilat
anhidrase kinase 2 PSaya
2 ADP

MENDEKUT MENDEKUT
NADP+ NADPH PSaya HCO3- AMP +PPSaya ATP + P Saya
CH2 CH2 CH2

H C OH C HAI C OPO 32–

malat Karboksilase PEP piruvat-
dehidrogenase fosfat
2
BERSAMA -
2
BERSAMA - MENDEKUT
dikinase
malat oksaloasetat Fosfoenol-
piruvat (PEP)

CH3
Enzim malat
C HAI

MENDEKUT

NADP+ NADPH + CO2 piruvat

Sel selubung bundel siklus Calvin

GAMBAR 8.11 C4 jalur fotosintesis. Hidrolisis dua ATP menggerakkan siklus ke arah
panah, sehingga memompa CO2 dari atmosfer ke
Siklus Calvin kloroplas dari sel selubung berkas.

4. Transportasi C3 asam (piruvat atau alanin) yang dibentuk

oleh langkah dekarboksilasi kembali ke meso-
sel phyll dan regenerasi CO2 akseptor fosfoenolpiruvat
Salah satu ciri menarik dari siklus ini adalah regenerasi
akseptor primer—fosfoenolpiruvat—menggunakan dua
ikatan fosfat “energi tinggi”: satu dalam reaksi yang
dikatalisis oleh piruvat-ortofosfat dikinase
(Tabel 8.3, reaksi 8) dan lainnya dalam konversi PPSaya
ke 2PSaya dikatalisis oleh pyrophosphatase (reaksi 9; lihat juga
Gambar 8.11).
Pengangkutan metabolit antara mesofil dan sel
selubung bundel didorong oleh gradien difusi di sepanjang
banyak plasmodesmata, dan transportasi di dalam sel
diatur oleh gradien konsentrasi dan pengoperasian
translokator khusus pada selubung kloroplas. Siklusnya
sehingga secara efektif mengangkut CO2 dari atmosfer ke dalam sel
selubung berkas. Proses transportasi ini menghasilkan
konsentrasi CO . yang jauh lebih tinggi2 dalam sel selubung bundel daripada
yang akan terjadi dalam keseimbangan dengan atmosfer eksternal
phere. Peningkatan konsentrasi CO . ini2 di situs
baik monokotil dan dikotil, dan sangat menonjol di
Gramineae (jagung, millet, sorgum, tebu), Chenopodiaceae (
Atripleks), dan Cyperaceae
(endapan). Sekitar 1% dari semua spesies yang diketahui memiliki C4
metabolisme (Edwards dan Walker 1983).
Ada tiga variasi dari C . dasar4 jalur yang terjadi pada
spesies yang berbeda (lihat Topik Web 8.7). Varian-
tion berbeda terutama dalam C4 asam (malat atau aspartat)
diangkut ke dalam selubung bundel dan dengan cara
dari dekarboksilasi.
Konsentrasi CO2 dalam Sel Selubung Bundel
Memiliki Biaya Energi
Efek bersih dari C4 siklus adalah untuk mengubah larutan encer
dari CO2 dalam sel mesofil menjadi CO2 pekat2 larutan
dalam sel selubung berkas. Studi mobil PEP-
mutan yang kekurangan boxylase Amaranthus edulis jelas
menunjukkan bahwa kurangnya mekanisme yang efektif untuk
pemusatan CO2 dalam selubung bundel sangat meningkat
fotorespirasi dalam C4 tanaman (Dever et al. 1996).
Termodinamika memberi tahu kita bahwa pekerjaan harus dilakukan untuk

karboksilasi rubisco menghasilkan penekanan oksigenasi membangun dan memelihara CO2 gradien konsentrasi dalam
ribulosa-1,5-bifosfat dan karenanya fotorespirasi. selubung bundel (untuk diskusi rinci tentang theoody-
Ditemukan di rerumputan tropis, tebu, dan namics, lihat Bab 2 di situs web). Prinsip ini juga berlaku
jagung, C4 siklus sekarang diketahui terjadi pada 16 keluarga untuk operasi C4 siklus. Dari penjumlahan
160 Bab 8
TABEL 8.4
Energi dari C4 siklus karbon fotosintesis
Fosfoenolpiruvat + H2O + NADPH + CO2 (mesofil) Malat
+ NADP+
Piruvat + Psaya + ATP
PPsaya + H2HAI
AMP + ATP
Bersih: CO2 (mesofil) + ATP + 2 H2HAI
Biaya pemekatan CO2 dalam sel selubung bundel = 2 ATP per CO2
Catatan: Seperti ditunjukkan dalam reaksi 1 dari Tabel 8.3, H2O dan CO2 ditunjukkan pada baris pertama tabel ini benar-benar bereaksi dengan
fosfoenolpiruvat sebagai HCO -
3.
PSaya dan PPSaya berdiri untuk fosfat anorganik dan pirofosfat, masing-masing.
dari reaksi yang terlibat, kita dapat menghitung biaya energi
ke pabrik (Tabel 8.4). Perhitungan menunjukkan bahwa CO2-
proses pemekatan mengkonsumsi dua ekuivalen ATP (2
ikatan “energi tinggi”) per CO2 molekul yang diangkut. Jadi total
kebutuhan energi untuk mengikat CO2 oleh gabungan C4 dan
siklus Calvin (masing-masing dihitung dalam Tabel 8.4 dan 8.1)
adalah lima ATP ditambah dua NADPH per CO2 tetap.
Karena permintaan energi yang lebih tinggi ini, C4 tanaman
berfotosintesis dalam kondisi nonfotorespirasi (tinggi
BERSAMA2 dan rendahO2) membutuhkan lebih banyak kuanta cahaya per CO2 dibandingkan
C3 daun lakukan. Di udara normal, kebutuhan kuantum C3
tanaman berubah dengan faktor-faktor yang mempengaruhi keseimbangan antara
fotosintesis dan fotorespirasi, seperti suhu. Sebaliknya,
karena mekanisme yang dibangun untuk menghindari
fotorespirasi, persyaratan kuantum C4 tanaman tetap relatif
konstan di bawah lingkungan yang berbeda
kondisi (lihat Gambar 9.23).
Cahaya Mengatur Aktivitas Kunci C4 Enzim
Cahaya sangat penting untuk pengoperasian C4 siklus
karena mengatur beberapa enzim tertentu. Misalnya,
aktivitas PEP karboksilase, NADP: malat dehidrogenase, dan
piruvat-ortofosfat dikinase (lihat Tabel 8.3) diatur dalam
menanggapi variasi kerapatan fluks foton oleh dua proses
yang berbeda: reduksi-oksidasi gugus tiol dan fosforilasi-
defosforilasi.
NADP:malat dehidrogenase diatur melalui sistem
tioredoksin kloroplas (lihat Gambar 8.5). Enzim direduksi
(diaktifkan) pada saat daun diterangi dan dioksidasi
(dinonaktifkan) pada saat penggelapan. PEP karboksilase
diaktifkan oleh mekanisme fosforilasi-defosforilasi yang
bergantung pada cahaya yang belum dikarakterisasi.
Anggota regulator ketiga dari C4 jalur, piruvat-ortofosfat
dikinase, dengan cepat dinonaktifkan oleh
fosforilasi enzim yang bergantung pada ADP yang tidak
biasa ketika kerapatan fluks foton turun (Burnell dan Hatch
1985). Aktivasi dilakukan dengan pembelahan fosforolitik
dari gugus fosfat ini. Kedua reaksi, fosfor-
→ malat + NADP+ + PSaya (mesofil)
→ piruvat + NADPH + CO2 (bundel sarung)
→ fosfoenolpiruvat + AMP + PPSaya (mesofil)
→ 2 PSaya (mesofil)
→ 2ADP
→ BERSAMA2 (bundel selubung) + 2ADP + 2 PSaya
lasi dan defosforilasi, tampaknya dikatalisis oleh protein
pengatur tunggal.
Di Iklim Panas dan Kering, C4 Siklus Mengurangi
Fotorespirasi dan Kehilangan Air
Dua fitur C4 siklus dalam C4 tanaman mengatasi efek
merusak dari suhu yang lebih tinggi pada fotosintesis yang
dicatat sebelumnya. Pertama, afinitas PEP karboksilase untuk
substratnya, HCO - 3 , cukup tinggi sehingga enzim
jenuh oleh HCO - 3 dalam keseimbangan dengan tingkat udara CO2.
Selanjutnya, karena substratnya adalah HCO - 3 , oksigen tidak
pesaing dalam reaksi. Aktivitas mobil PEP yang tinggi ini
boxylase memungkinkan C4 tanaman untuk mengurangi bukaan stomata dan
dengan demikian menghemat air sambil memperbaiki CO2 dengan tarif setara
atau lebih besar dari C3 tanaman. Fitur menguntungkan
kedua adalah penekanan fotorespirasi yang dihasilkan
dari konsentrasi CO2 dalam sel selubung bundel (Marocco
et al. 1998).
Fitur-fitur ini memungkinkan C4 tanaman untuk berfotosintesis lebih
efisien pada suhu tinggi daripada C3 tanaman, dan mereka adalah
mungkin alasan kelimpahan relatif C4 tanaman di iklim yang lebih
kering dan lebih panas. Tergantung pada lingkungan alami mereka
ronment, beberapa tanaman menunjukkan sifat antara
antara ketat C3 dan C4 jenis.
BERSAMA2-MEKANISME KONSENTRASI III:
METABOLISME ASAM CRASSULACEAN
Mekanisme ketiga untuk mengkonsentrasikan CO2 di situs rubisco
ditemukan dalam metabolisme asam crassulacean (CAM).
Terlepas dari namanya, CAM tidak terbatas pada keluarga
Crassulaceae (Crassula, Kalanchoe, Sedum); itu ditemukan di
banyak keluarga angiospermae. Kaktus dan euphorbias adalah
tanaman CAM, serta nanas, vanila, dan agave.
Mekanisme CAM memungkinkan tanaman untuk meningkatkan efisiensi
penggunaan air. Biasanya, tanaman CAM kehilangan 50 hingga 100 g
air untuk setiap gram CO2 diperoleh, dibandingkan dengan nilai
250 hingga 300 g dan 400 hingga 500 g untuk C4 dan C3 tanaman,
 Fotosintesis: Reaksi Karbon 161

masing-masing (lihat Bab 4). Dengan demikian, tanaman CAM malam dan menutupnya selama hari-hari yang panas dan kering.
memiliki keunggulan kompetitif di lingkungan kering. Menutup stomata pada siang hari meminimalkan kehilangan air, tetapi
Mekanisme CAM mirip dalam banyak hal dengan karena H2O dan CO2 berbagi jalur difusi yang sama, CO
siklus C. Pada tumbuhan C, pembentukan C4 asam dalam jaringan- kemudian harus diambil pada malam hari.
Hai dipisahkan dari dekarboksilasi diorated melalui karboksilasi
C efiksasi CO . yang dihasilkan2 oleh selubung fosfoksaloasetat, yang kemudian direduksi
C bawah. Pada tanaman CAM, pembentukan menjadi e terakumulasi dan disimpan
T s baik temporal dan spasial sepais dalam anatomi besar tanaman CAM yang
R ditangkap oleh karboksilase PEP di khas, tetapi tidak wajib (lihat Gambar 8.12).
C akhir yang terbentuk dari oksaloasetat Jumlah besar asam malat, setara
P vakuola (Gambar 8.12). Selama e nt dari CO2 berasimilasi di malam hari, telah
D diangkut ke kloroplas dan lama sebagai pengasaman nokturnal daun
D Enzim NADP-malat, CO . yang dilepaskan2 eh 1948).
Saya dalam siklus, dan NADPH digunakan untuk hari, stomata menutup, mencegah kehilangan
C produk triosa fosfat terkotak untuk er penyerapan CO2. Sel-sel daun deacidof
S vacuolar asam malat dikonsumsi.
biasanya dicapai dengan aksi yme pada
T AM Plants Buka di Malam Hari dan malat (Drincovich et al. 2001).
C Hari a ditutup, CO . yang dilepaskan secara internal2
n-

Gelap: Stomata terbuka Cahaya: Stomata tertutup

BERSAMA2 serapan dan atmosfer Izin stoma terbuka Dekarboksilasi malat yang stoma tertutup
fiksasi: daun BERSAMA2
masuknya CO2 dan disimpan dan refiksasi internal mencegah H2O rugi
pengasaman kehilangan H2HAI BERSAMA2: deacidifikasi dan CO2 serapan

PSaya
HCO 3-

Karboksilase PEP
NADP+ malic
enzim
Fosfoenol- oksaloasetat
BERSAMA2
malat Asam malat
piruvat
NADH
NAD+ malic piruvat
dehidrogenase Calvin
NAD+
siklus
triosa
fosfat malat Pati Vakuola

Pati Asam malat Kloroplas

Kloroplas Vakuola

GAMBAR 8.12 Metabolisme asam crassulacean (CAM). Pemisahan sementara CO2 serapan dari
reaksi fotosintesis: CO2 penyerapan dan fiksasi terjadi pada malam hari, dan dekar-
boxylation dan refiksasi CO . yang dilepaskan secara internal2 terjadi pada siang hari. Keuntungan
adaptif dari CAM adalah pengurangan kehilangan air melalui transpirasi, dicapai dengan
pembukaan stomata pada malam hari.
162 Bab 8
Peningkatan konsentrasi internal CO2 secara efektif
menekan oksigenasi fotorespirasi ribulosa
bifosfat dan mendukung karboksilasi. C3 asam yang
dihasilkan dari dekarboksilasi dianggap diubah
pertama menjadi triosa fosfat dan kemudian menjadi pati atau
sukrosa, sehingga meregenerasi sumber akseptor karbon asli.
Fosforilasi Mengatur Aktivitas PEP
Karboksilase di C4 dan Tanaman CAM
Mekanisme CAM yang telah kami uraikan dalam diskusi ini memerlukan
pemisahan karboksilasi awal dari dekarboksilasi berikutnya, untuk
menghindari siklus yang sia-sia. Sebagai tambahan-
terhadap pemisahan spasial dan temporal yang ditunjukkan oleh C4
dan tanaman CAM, masing-masing, siklus sia-sia dihindari oleh
regulasi PEP karboksilase (Gambar 8.13). Dalam C4
menanam karboksilase "dinyalakan," atau aktif, di siang hari
dan pada tanaman CAM pada malam hari. Di kedua C4 dan
tanaman CAM, PEP karboksilase dihambat oleh malat dan diaktifkan
oleh glukosa-6-fosfat (lihat Esai Web 8.1 untuk diskusi
rinci tentang regulasi PEP karboksilase).
Fosforilasi residu serin tunggal dari enzim CAM
mengurangi penghambatan malat dan meningkatkan kerja
glukosa-6-fosfat sehingga enzim menjadi lebih aktif secara
katalitik (Chollet et al. 1996; Vidal dan Chollet 1997) (lihat
Gambar 8.13). Fosforilasi dikatalisis oleh karboksilase-
kinase PEP. Sintesis kinase ini dirangsang oleh penghabisan
Ca2+ dari vakuola ke sitosol dan aktivasi yang dihasilkan dari
Ca2+/calmodulin protein kinase (Giglioli-Guivarc'h dkk. 1996;
Coursol dkk. 2000; Nimmo 2000; Bakrim dkk. 2001).
Beberapa Tumbuhan Menyesuaikan Pola CO .nya2
Penyerapan ke Kondisi Lingkungan
Tumbuhan memiliki banyak mekanisme yang memaksimalkan air dan
BERSAMA2 pasokan selama pengembangan dan reproduksi. C3
tumbuhan mengatur bukaan stomata daunnya selama
ATP ADP
kinase
OH
Karboksilase PEP Karboksilase PEP
Formulir hari tidak aktif
Ser Bentuk malam aktif
Dihambat fosfatase
oleh malat
PSaya H2HAI
GAMBAR 8.13 Regulasi diurnal CAM phosphoenolpyru-
vat (PEP) karboksilase. Fosforilasi residu serin (Ser-OP)
menghasilkan suatu bentuk enzim yang aktif pada malam
hari dan relatif tidak sensitif terhadap malat. Pada siang
hari, defosforilasi serin (Ser-OH) memberikan bentuk
enzim yang dihambat oleh malat.
siang hari, dan stomata menutup pada malam hari. C4 dan tanaman CAM
menggunakan PEP karboksilase untuk memperbaiki CO2, dan mereka berpisah
enzim dari rubisco baik secara spasial (C4 tanaman) atau
temporal (tanaman CAM).
Beberapa CAMplants menunjukkan regulasi jangka panjang dan
mampu menyesuaikan pola CO . mereka2 serapan terhadap
kondisi lingkungan. Tanaman CAM fakultatif seperti tanaman es
(Mesembryanthemum crystallinum) lanjutkan C3 metabolisme di
bawah kondisi tanpa tekanan, dan mereka beralih ke CAM dalam
respon terhadap panas, air, atau stres garam. Bentuk regulasi ini
membutuhkan ekspresi banyak gen CAM sebagai respons terhadap
sinyal stres (Adams et al. 1998; Cushman 2001).
Di lingkungan akuatik, cyanobacteria dan ganggang hijau
memiliki air yang melimpah tetapi menemukan CO . yang rendah2 konsentrasi dalam
lingkungan mereka dan secara aktif mengonsentrasikan CO2 anorganik2
secara intraseluler. Dalam diatom, yang berlimpah dalam fito-
plankton, CO2-mekanisme pemusatan bekerja secara simultan
bersama-sama dengan C4 jalur (Reinfelder et al. 2000).
Diatom adalah contoh organisme fotosintetik yang bagus
yang memiliki kapasitas untuk menggunakan CO . yang berbeda2-
mekanisme konsentrasi dalam menanggapi fluktuasi lingkungan.
SINTESIS pati dan sukrosa
Pada sebagian besar spesies, sukrosa adalah bentuk utama
karbohidrat yang ditranslokasikan ke seluruh tanaman oleh
floem. Pati adalah cadangan karbohidrat stabil yang tidak larut
yang terdapat di hampir semua tanaman. Baik pati maupun
sukrosa disintesis dari triosa fosfat yang dihasilkan oleh siklus
Calvin (lihat Tabel 8.1) (Beck dan Ziegler 1989). Jalur untuk
sintesis pati dan sukrosa ditunjukkan pada Gambar 8.14.
Pati Disintesis di Kloroplas
Mikrograf elektron menunjukkan deposit pati yang
menonjol, serta studi lokalisasi enzim, tidak diragukan lagi
bahwa kloroplas adalah tempat sintesis pati di daun
(Gambar 8.15). Pati disintesis dari triosa fosfat melalui
fruktosa-1,6-bifosfat (Tabel 8.5 dan Gambar 8.14). Zat
antara glukosa-1-fosfat diubah menjadi ADP-glukosa
melalui pirofosforilasi ADP-glukosa (Gambar 8.14 dan Tabel
8.5, reaksi 5) dalam reaksi yang membutuhkan ATP dan
menghasilkan pirofosfat (PPSaya, atau H2P2HAI 2–7 ).
Seperti dalam banyak reaksi biosintetik, pirofosfat
OP
dihidrolisis melalui pirofosfatase anorganik spesifik menjadi
Ser dua ortofosfat (PSaya) molekul (Tabel 8.5, reaksi 6), sehingga
mendorong reaksi 5 menuju sintesis ADP-glukosa.
Tidak peka Akhirnya, bagian glukosa dari ADP-glukosa ditransfer ke
untuk malat ujung non-pereduksi (karbon 4) dari glukosa terminal dari
rantai pati yang sedang tumbuh (Tabel 8.5, reaksi 7),
sehingga melengkapi urutan reaksi.
Sukrosa Disintesis di Sitosol
Situs sintesis sukrosa telah dipelajari oleh fraksinasi sel, di
mana organel diisolasi dan dipisahkan satu sama lain.
Analisis enzim telah menunjukkan bahwa sukrosa disintesis
dalam sitosol dari triosa fosfat
 KLOROPLAS

Fosfo-
glukomutase Heksosa
Glukosa-1- (5-4) Glukosa-6- fosfat
ADP-glukosa isomerase
fosfat fosfat
Glukosa ADP (5-3)
Pati piro- ATP
sintase PPSaya fosforilase Fruktosa-6-fosfat
(5-7) (5-5)

Pirofosfatase PSaya
Fruktosa-1, 6-
Pati
(5-6) siklus Calvin bifosfatase
H2O (5-2)
PSaya

Triosa fosfat Fruktosa-1,6-bifosfat

Aldolase
(5-1)

SITOSOL Penerjemah Pi

(6-1)
Sukrosa
Triosa fosfat
PSaya Aldolase
Sukrosa fosfat (6-3)
fosfatase PSaya

(6-10)
Fruktosa-1,6-bifosfat
Sukrosa
fosfat
Fruktosa-1, 6-
Sukrosa fosfat PSaya
bisfosfatase
sintase PSaya
(6-4a)
(6-9) UDP-glukosa
PPSaya

UTP Fruktosa-6-fosfat
UDP-glukosa Glukosa se-6-
Glukosa-1-
pirofosforilasi fosfat Heksosa fosfat
phospat
(6-7) isomerase
Fosfo-
glukomutase (6-5)
(6-6)

GAMBAR 8.14 Sintesis pati dan sukrosa berlangsung secara kompetitif PSaya sebagai ganti PSaya, dan sukrosa disintesis. Ketika
proses yang terjadi di kloroplas dan sitosol, P sitosolSaya konsentrasi rendah, triosa fosfat dipertahankan
masing-masing. Ketika P . sitosolSaya konsentrasi tinggi, dalam kloroplas, dan pati disintesis. Nomor-
kloroplas triosa fosfat diekspor ke sitosol melalui bers menghadap panah dikunci ke Tabel 8.5 dan 8.6.

melalui jalur yang mirip dengan pati—yaitu, melalui
fruktosa-1,6-bifosfat dan glukosa-1-fosfat (Gambar 8.14 dan
Tabel 8.6, reaksi 2-6).
Dalam sintesis sukrosa, glukosa-1-fosfat diubah menjadi
UDP-glukosa melalui pirofosforilasi UDP-glukosa spesifik
(Tabel 8.6, reaksi 7) yang analog dengan pirofosforilasi ADP-
glukosa dari kloroplas. Pada tahap ini, dua reaksi berurutan
menyelesaikan sintesis sukrosa (Huber dan Huber 1996).
Pertama, sukrosa-6fosfat sintase mengkatalisis reaksi UDP-
glukosa dengan fruktosa-6-fosfat untuk menghasilkan
sukrosa-6-fosfat dan UDP (Tabel 8.6, reaksi 9). Kedua,
sukrosa-6fosfat fosfatase (fosfohidrolase) memotong fosfat
dari sukrosa-6-fosfat, menghasilkan sukrosa (Tabel 8.6,
reaksi 10). Reaksi terakhir, yang pada dasarnya
ireversibel, menarik mantan ke arah sintesis sukrosa.
Seperti pada sintesis pati, pirofosfat yang terbentuk
dalam reaksi yang dikatalisis oleh UDP-glukosa
pirofosforilasi (Tabel 8.6, reaksi 7) dihidrolisis, tetapi tidak
segera seperti pada kloroplas. Karena tidak adanya
pirofosfatase anorganik, pirofosfat dapat digunakan oleh
enzim lain, dalam reaksi transfosforilasi. Salah satu
contohnya adalah fruktosa-6-fosfat fosfotransferase, suatu
enzim yang mengkatalisis reaksi seperti yang dikatalisis
oleh fosfofruktokinase (Tabel 8.6, reaksi 4a) kecuali
pirofosfat menggantikan ATP sebagai donor fosforil.
Perbandingan reaksi pada Tabel 8.5 dan 8.6 (seperti yang
diilustrasikan pada Gambar 8.14) mengungkapkan bahwa
konversi triosa fosfat menjadi glukosa-1-fosfat dalam jalur
164 Chu
setelah 8

Sintesis Sukrosa dan Pati

Bersaing
Butir pati
Reaksi
Tilakoid
Konsentrasi relatif ortofosfat dan
triosa fosfat merupakan faktor utama
yang mengontrol apakah karbon yang
terfiksasi secara fotosintesis dipartisi
sebagai pati dalam kloroplas atau
sebagai sukrosa dalam sitosol. Kedua
kompartemen berkomunikasi satu
sama lain melalui translocator fosfat/
triosa fosfat, juga disebut translocator
fosfat (lihat Tabel 8.6, reaksi 1),
antiporter stoikiometri yang ketat.

Translocator fosfat mengkatalisis

pergerakan ortofosfat dan triosa
fosfat dalam arah yang berlawanan
antara kloroplas dan sitosol.
GAMBAR 8.15 Mikrograf elektron dari sel selubung bundel dari jagung, menunjukkan Konsentrasi rendah ortofosfat
butir pati di dalam kloroplas. (15.800×) (Foto oleh SE Frederick, milik E. dalam sitosol membatasi ekspor
H. Newcomb.)
triosa fosfat dari kloroplas melalui
translo-
mengarah ke sintesis pati dan sukrosa memiliki beberapa kator, sehingga mendorong sintesis pati. Sebaliknya,
langkah yang sama. Namun, jalur ini memanfaatkan isozim kelimpahan ortofosfat dalam sitosol menghambat sintesis
(berbagai bentuk enzim yang mengkatalisis reaksi yang pati di dalam kloroplas dan mendorong ekspor triosa fosfat
sama) yang unik untuk kloroplas atau sitosol. ke dalam sitosol, di mana ia diubah menjadi sukrosa.
Isozim memiliki sifat yang sangat berbeda. Misalnya,
fruktosa-1,6-bisphosphatase kloroplastik diatur oleh sistem Ortofosfat dan triosa fosfat mengontrol aktivitas
thioredoxin tetapi tidak oleh fruktosa- beberapa enzim pengatur dalam jalur biosintesis sukrosa
2,6-bifosfat dan AMP. Sebaliknya, bentuk sitosol dari enzim dan pati. Enzim kloroplas ADP-glukosa pirofosforilasi (lihat
diatur oleh fruktosa-2,6-bifosfat (lihat bagian selanjutnya), Tabel 8.5, reaksi 5) adalah enzim kunci yang mengatur
sensitif terhadap AMP terutama dengan adanya sintesis pati dari glukosa1-fosfat. Enzim ini dirangsang oleh
fruktosa-2,6-bifosfat, dan tidak terpengaruh oleh 3-fosfogliserat dan dihambat oleh ortofosfat. Rasio
tioredoksin. konsentrasi tinggi 3-fosfogliserat terhadap ortofosfat
Selain fruktosa-1,6-bisphosphatase sitosol, sintesis biasanya ditemukan dalam kloroplas yang menyala yang
sukrosa diatur pada tingkat sukrosa fosfat sintase, suatu secara aktif mensintesis pati. Kondisi timbal balik berlaku
enzim alosterik yang diaktifkan oleh glukosa-6-fosfat dan dalam kegelapan.
dihambat oleh ortofosfat. Enzim ini dinonaktifkan dalam
gelap dengan fosforilasi residu serin tertentu melalui Fruktosa-2,6-bifosfat adalah molekul kontrol kunci yang
protein kinase dan diaktifkan dalam cahaya dengan memungkinkan peningkatan sintesis sukrosa dalam terang
defosforilasi melalui fosforilasi protein. dan penurunan sintesis dalam gelap. Hal ini ditemukan
phatase. Glukosa-6-fosfat menghambat kinase, dan PSaya dalam sitosol dalam konsentrasi menit, dan memberikan
menghambat fosfatase. efek pengaturan pada interkonversi sitosol fruktosa-1,6-
Pemurnian dan kloning sukrosa-6-fosfat fosfatase baru- bifosfat dan fruktosa-6-fosfat (Huber 1986; Stitt 1990):
baru ini dari daun padi (Lund et al. 2000) memberikan
informasi baru tentang sifat molekuler dan fungsional
enzim ini. Studi-studi ini menunjukkan bahwa sukrosa-6- – 2HAI3POCH2 – 2HAI3POCH2 HAI
HAI OPO 2– OH
fosfat sintase dan sukrosa-6-fosfatase ada sebagai 3
kompleks supramolekul yang menunjukkan aktivitas H HO CH2OH H HO CH2OPO 2–
H H 3
enzimatik yang lebih tinggi daripada enzim konstituen yang
diisolasi (Salerno et al. 1996). Interaksi nonkovalen dari dua OHH OHH
enzim yang terlibat dalam dua langkah terakhir dari sintesis Fruktosa-2,6-bifosfat (suatu Fruktosa-1,6-bifosfat (suatu
sukrosa menunjukkan fitur regulasi baru dari metabolisme metabolit pengatur) metabolit perantara)
karbohidrat pada tanaman.
 Fotosintesis: Reaksi Karbon 165

TABEL 8.5
Reaksi sintesis pati dari triosa fosfat dalam kloroplas
1. Fruktosa-1,6, bifosfat aldolase
Dihydroxyacetone-3-phosphate + glyceraldehyde-3-phosphate→ fructose-1,6-bisphosphate

CH 2OH CH2OPO 32– 2–O3POH2C

O OH
C O HO CH H HO CH OPO 2–
H 2 3
CH2OPO3 2– C
HO H
O H
2. Fructose-1,6-bisphosphatase
Fructose-1,6-bisphosphate + H2O→ fructose-6-phosphate + Pi

2–O3POH2C 2–O P
O OH 3 OH2C O OH
H HO H HO CH2OH
H CH 2OPO 2–
3 H
HO H HO H

3. Hexose phosphate isomerase

Fructose-6-phosphate → glucose-6-phosphate

2–O3POH2C
O OH CH 2OPO 2–
3

H HO CH2OH H O H
H H
OH H
HO H HO OH
H OH
4. Phosphoglucomutase
Glucose-6-phosphate → glucose-1-phosphate

CH 2OPO 2–
3
CH2OH

H O H H O H
H H
OH H OH H
HO OH HO OPO 32–

H OH H HO

5. ADP-glucose pyrophosphorylase
Glucose-1-phosphate + ATP → ADP-glucose + PPi

CH2OH CH2OH

H O H H O H O O
H
OH H OH H
HO OPO 32– HO O P O P O Adenosine

H HO H HO O– O–

6. Pyrophosphatase

PPi + H2O → 2 Pi + 2H+

7. Starch synthase
ADP-glucose + (1,4-α-D-glucosyl)n→ ADP + (1,4-α-D-glucosyl)n+1
CH2OH CH2OH CH2OH CH2OH

H O H H OH H O H H O
O O
H H H
OH H OH H OH H OH H
HO O P O P O Adenosine OH O O O O
H HO O– O– H OH H OH H OH
Nonreducing end of a Elongated starch with
starch chain with n + 1 residues
n residues

Note: Reaction 6 is irreversible and“pulls” the preceding reaction to the right.

Pi and PPi stand for inorganic phosphate and pyrophosphate, respectively.
166 Chapter 8

TABLE 8.6
Reactions of sucrose synthesis from triose phosphate in the cytosol

1. Phosphate/triose phosphate translocator

Triose phosphate (chloroplast) + Pi (cytosol) → triose phosphate (cytosol) + Pi (chloroplast)

2. Triose phosphate isomerase

Dihydroxyacetone-3-phosphate → glyceraldehyde-3-phosphate
CH 2OH CH2OPO 32–

C O HO CH

CH2OPO3 2– C
O H
3. Fructose-1,6-bisphosphate aldolase
Dihydroxyacetone-3-phosphate + glyceraldehyde-3-phosphate→ fructose-1,6-bisphosphate

CH 2OH CH2OPO 32– 2–O3POH2C

O OH
C O HO CH H HO
H CH 2OPO 2–
3
CH2OPO 32– C
HO H
O H

4a. Fructose-1,6-phosphatase
Fructose-1,6-bisphosphate + H2O → fructose-6-phosphate + Pi
2–O3POH2C 2–O3POH2C
O OH O OH
H HO 2– H HO
H CH 2OPO 3 H CH2OH

HO H HO H

4b. PPi-linked phosphofructokinase

Fructose-6-phosphate + PPi → fructose-1,6-bisphosphate + Pi
2–O3POH2C 2–O3POH2C
O OH O OH
HH O H HO
H CH2OH H CH2OPO 32–

HO H HO H
5. Hexose phosphate isomerase
Fructose-6-phosphate → glucose-6-phosphate

2–O3POH2C
O OH CH 2OPO 2–
3
H HO CH2OH H O H
H H
OH H
HO H HO OH
H OH
6. Phosphoglucomutase
Glucose-6-phosphate → glucose-1-phosphate

CH 2OPO 2–
3
CH2OH
H O H H O H
H H
OH H OH H
HO OH HO OPO 32–

H OH H HO

7. UDP-glucose pyrophosphorylase
Glucose-1-phosphate + UTP → UDP-glucose + PPi

CH2OH O O O CH2OH
H O H O
–O P O P O P O Uridine H H O O
H H
OH H OH H
HO OPO 32– –O –O –O
HO O P O P O Uridine
H HO H OH O– O–
 Photosynthesis: Carbon Reactions 167

TABLE 8.6 (continued)

Reactions of sucrose synthesis from triose phosphate in the cytosol

8. Pyrophosphatase
PPi +H2O → 2 Pi + 2 H+

9. Sucrose phosphate synthase

UDP-glucose + fructose-6-phosphate → UDP + sucrose-6-phosphate

CH2OH 2–O3PO CH2 CH2OH

O OH
H O H O O H OH
H H HO CH2OH H
OH H O P O P O Uridine H OH H
HO HO
HO H
H OH O– O– H OH

2–O3PO CH2 O
O
10. Sucrose phosphate phosphatase H HO CH2OH
Sucrose-6-phospha te + H 2O → sucrose + Pi H
HO H
CH2OH CH2OH
H O H H O H
H H
OH H OH H
HO HO
H OH H OH

2–O3PO CH2 O HOH 2C

O O O
H HO CH OH H HO CH2OH
H 2 H
HO H HO H

Note: Reaction 1 takes place on the chloroplast inner envelope membrane. Reactions 2 through 10 take place in the cytosol. Reaction 8 is irre- versible
and“pulls” the preceding reaction to the right.
Pi and PPi stand for inorganic phosphate and pyrophosphate, respectively .

Increased cytosolic fructose-2,6-bisphosphate is associated the hydrolysis of cytosolic fructose-1,6-bisphosphate and

with decreased rates of sucrose synthesis because fructose-
2,6-bisphosphate is a powerful inhibitor of cytosolic fructose-
1,6-bisphosphatase (see Table 8.6, reaction 4a) and an activa-
tor of the pryophosphate-dependent (PPi-linked)
phosphofructokinase (reaction 4b). But what, in turn, controls the
cytosolic concentration of fructose-2,6-bisphosphate?
Fructose-2,6-bisphosphate is synthesized from fructose6-
phosphate by a special fructose-6-phosphate 2-kinase (not
to be confused with the fructose-6-phosphate 1-kinase of
glycolysis) and is degraded specifically by
fructose-2,6bisphosphatase (not to be confused with
fructose-1,6-bisphosphatase of the Calvin cycle). Recent
evidence suggests that, as in animal cells, both plant
activities reside on a single polypeptide chain.
The kinase and phosphatase activities are controlled by
orthophosphate and triose phosphate. Orthophosphate
stimulates fructose-6-phosphate 2-kinase and inhibits
fructose-2,6-bisphosphatase; triose phosphate inhibits the
2kinase (Figure 8.16). Consequently, a low cytosolic ratio of
triose phosphate to orthophosphate promotes the formation of
fructose-2,6-bisphosphate, which in turn inhibits
slows the rate of sucrose synthesis. A high cytosolic ratio of
triose phosphate to orthophosphate has the opposite effect.
Light regulates the concentration of these activators and
inhibitors through the reactions associated with
photosynthesis and thereby controls the concentration of
fructose-2,6-bisphosphate in the cytosol. The glycolytic
enzyme phosphofructokinase also functions in the
conversion of fructose-6-phosphate to fructose-1,6-
bisphosphate, but in plants it is not appreciably affected by
fructose-2,6-bisphosphate.
The activity of phosphofructokinase in plants appears to be
regulated by the relative concentrations of ATP, ADP, and AMP.
The remarkable plasticity of plants was once again illustrated
by recent gene deletion experiments with transformed tobacco
plants. This experiment shows that the transformed plants can
grow without a functional pyrophosphate-dependent
fructose-6-phosphate kinase enzyme. In this case the
conversion of fructose-6-phosphate to fructose-1,6-
bisphosphate is apparently catalyzed exclusively by
phosphofructokinase (Paul et al. 1995).
168 Chapter 8

(A) (B)

Activated by:

Glycolysis ATP ADP Orthophosphate (Pi)

Fructose-6-phosphate

Inhibited by:
Fructose-1,6-bisphosphate Fructose-6-
phosphate 2- Dihydroxyacetone
Activates kinase phosphate
Pi
3-phosphoglycerate

PP-Fructose- Inhibits
Fructose-1,6- Fructose-2, 6- Fructose- 6-
6-phosphate
bisphosphatase bisphosphate phosphate
kinase

PP Pi Fructose-2,6- Inhibited by:

bisphosphatase Orthophosphate (Pi)
Fructose-6-phosphate Fructose-6-phosphate

Pi
Sucrose synthesis

FIGURE 8.16 Regulation of the cytosolic interconversion of fructose-6-phosphate and

fructose-1,6-bisphosphate. (A) The key metabolites in the allocation between glycolysis and
sucrose synthesis. The regulatory metabolite fructose 2,6-bisphosphate regulates the
interconversion by inhibiting the phosphatase and activating the kinase, as shown.
(B) The synthesis of fructose-2,6-bisphosphate itself is under strict regulation by the
activators and inhibitors shown in the figure.

active. The carboxylation and oxygenation reactions take place

SUMMARY
The reduction of CO2 to carbohydrate via the carbon-linked
reactions of photosynthesis is coupled to the consumption of
NADPH andATP synthesized by the light reactions of thy-
lakoid membranes. Photosynthetic eukaryotes reduce CO2
via the Calvin cycle that takes place in the stroma, or soluble
phase, of chloroplasts. Here, CO2 and water are combined
with ribulose-1,5-bisphosphate to form two molecules of 3-
phosphoglycerate, which are reduced and converted to
carbohydrate. The continued operation of the cycle is ensured
by the regeneration of ribulose-1,5-bisphosphate. The Calvin
cycle consumes two molecules of NADPH and three mole-
cules of ATP for every CO2 fixed and, provided these
substrates, has a thermodynamic efficiency close to 90%.
Several light-dependent systems act jointly to regulate
the Calvin cycle: changes in ions (Mg2+ and H+), effector
metabolites (enzyme substrates), and protein-mediated
systems (rubisco activase, ferredoxin–thioredoxin system).
The ferredoxin–thioredoxin control system plays a
versatile role by linking light to the regulation of other
chloroplast processes, such as carbohydrate breakdown,
photophosphorylation, fatty acid biosynthesis, and mRNA
translation. Control of these reactions by light separates
opposing biosynthetic from degradative processes and
thereby minimizes the waste of resources that would occur
if the processes operated concurrently.
Rubisco, the enzyme that catalyzes the carboxylation of
ribulose-1,5-bisphosphate, also acts as an oxygenase. In
both cases the enzyme must be carbamylated to be fully
at the active site of rubisco. When reacting with oxygen, rubisco
produces 2-phosphoglycolate and 3-phosphoglycerate from
ribulose-1,5-bisphosphate rather than
two 3-phosphoglycerates as with CO2, thereby decreasing
the efficiency of photosynthesis.
The C2 oxidative photosynthetic carbon cycle rescues the
carbon lost as 2-phosphoglycolate by rubisco oxyge-
nase activity. The dissipative effects of photorespiration are
avoided in some plants by mechanisms that concentrate
CO2 at the carboxylation sites in the chloroplast. These
mechanisms include a C4 photosynthetic carbon cycle,
CAM metabolism, and “CO2 pumps” of algae and
cyanobacteria.
The carbohydrates synthesized by the Calvin cycle are
converted into storage forms of energy and carbon: sucrose
and starch. Sucrose, the transportable form of carbon and
energy in most plants, is synthesized in the cytosol, and its
synthesis is regulated by phosphorylation of sucrose phosphate
synthase. Starch is synthesized in the chloroplast. The balance
between the biosynthetic pathways for sucrose and starch is
determined by the relative concentrations of metabolite
effectors (orthophosphate, fructose-6-phosphate, 3-
phosphoglycerate, and dihydroxyacetone phosphate).
These metabolite effectors function in the cytosol by way of
the enzymes synthesizing and degrading fructose-2,6-
bisphosphate, the regulatory metabolite that plays a primary
role in controlling the partitioning of photosynthetically fixed
carbon between sucrose and starch. Two of these effectors, 3-
phosphoglycerate and orthophosphate, also act on

starch synthesis in the chloroplast by allosterically
regulating the activity of ADP-glucose pyrophosphorylase.
In this way the synthesis of starch from triose phosphates
during the day can be separated from its breakdown, which
is required to provide energy to the plant at night.
Web Material
Web Topics
8.1 How the Calvin CycleWas Elucidated
Experiments carried out in the 1950s led to the
discovery of the path of CO2 fixation.
8.2 Rubisco: A Model Enzyme for Studying
Structure and Function
As the most abundant enzyme on Earth, rubisco
was obtained in quantities sufficient for
elucidating its structure and catalytic properties.
8.3 Carbon Dioxide: Some Important
Physicochemical Properties
Plants have adapted to the properties of CO2 by
altering the reactions catalyzing its fixation.
8.4 Thioredoxins
First found to regulate chloroplast enzymes,
thioredoxins are now known to play a regulatory
role in all types of cells.
8.5 Rubisco Activase
Rubisco is unique among Calvin cycle enzymes
in its regulation by a specific protein, rubisco
activase.
8.6 Operation of the C2 Oxidative Photosynthetic
Carbon Cycle
The enzymes of the C2 oxidative photosynthetic
carbon cycle are localized in three different
organelles.
8.7 Three Variations of C4 Metabolism
Certain reactions of the C4 photosynthetic pathway
differ among plant species.
Web Essay
8.1 Modulation of Phosphoenolpyruvate
Carboxylase in C4 and CAM Plants
The CO2-fixing enzyme, phosphoenolpyruvate
carboxylase is regulated differently in C4 and
CAM species.
Chapter References
Adams, P., Nelson, D. E., Yamada, S., Chmara, W., Jensen, R. G.,
Bohnert, H. J., and Griffiths, H. (1998) Tansley ReviewNo. 97;
Growth and development of Mesembryanthemum crystallinum.
New Phytol. 138:171–190.
Photosynthesis: Carbon Reactions 169
Bakrim, N., Brulfert, J., Vidal, J., and Chollet, R. (2001) Phospho-
enolpyruvate carboxylase kinase is controlled by a similar sig-
naling cascade inCAMandC4 plants. Biochem. Biophys. Res. Com-
mun. 286: 1158–1162.
Beck, E., andZiegler, P. (1989) Biosynthesis and degradation of starch
in higher plants. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 40: 95–
118.
Besse, I., andBuchanan, B. B. (1997) Thioredoxin-linkedplant and ani-
mal processes: The newgeneration. Bot. Bull. Acad. Sinica 38: 1–11.
Bonner, W., and Bonner, J. (1948) The role of carbon dioxide in acid
formation by succulent plants. Am. J. Bot. 35: 113–117.
Buchanan, B. B. (1980) Role of light in the regulation of chloroplast
enzymes. Annu. Rev. Plant Phsyiol. 31: 341–394.
Burnell, J. N., andHatch, M. D. (1985) Light–darkmodulation of leaf
pyruvate, Pi dikinase. Trends Biochem. Sci. 10: 288–291.
Chollet, R., Vidal, J., and O’Leary, M. H. (1996) Phosphoenolpyru-
vate carboxylase: A ubiquitous, highly regulated enzyme in
plants. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 47: 273–298.
Coursol, S., Giglioli-Guivarc’h, N., Vidal, J., and Pierre J.-N. (2000)
An increase in the phosphoinositide-specific phospholipase C
activity precedes induction of C4 phosphoenolpyruvate car-
boxylase phosphorylation in illuminated andNH4Cl-treated pro-
toplasts fromDigitaria sanguinalis. Plant J. 23: 497–506.
Craig, S., and Goodchild, D. J. (1977) Leaf ultrastructure of Triodia
irritans: AC4 grass possessing an unusual arrangement of pho-
tosynthetic tissues. Aust. J. Bot. 25: 277–290.
Cushman, J. C. (2001) Crassulacean acid metabolism: A plastic
photosynthetic adaptation to arid environments. Plant Physiol.
127: 1439–1448.
Dai, S., Schwendtmayer, C., Schürmann, P., Ramaswamy, S., and
Eklund, H. (2000) Redox signaling in chloroplasts: Cleavage of
disulfides by an iron-sulfur cluster. Science 287: 655–658.
Dever, L. V., Bailey, K. J., Lacuesta, M., Leegood, R. C., and Lea P. J.
(1996) The isolation and characterization of mutants of the C4
plant Amaranthus edulis. Comp. Rend. Acad. Sci., III. 919–959.
Drincovich, M. F., Casati, P., andAndreo, C. S. (2001) NADP-malic
enzyme fromplants: Aubiquitous enzyme involved in different
metabolic pathways. FEBS Lett. 490: 1–6.
Edwards, G. E., andWalker, D. (1983) C3, C4: Mechanisms and Cellu-
lar and Environmental Regulation of Photosynthesis. University of
California Press, Berkeley.
Flügge, U. I., andHeldt,. H. W. (1991) Metabolite translocators of the
chloroplast envelope. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 42:
129–144.
Frederick, S. E., andNewcomb, E. H. (1969) Cytochemical localiza-
tion of catalase in leaf microbodies (peroxisomes). J. Cell Biol. 43: 343–
353.
Giglioli-Guivarc’h, N., Pierre, J.-N., Brown, S., Chollet, R., Vidal, J.,
andGadal, P. (1996) The light-dependent transduction pathway
controlling the regulatory phosphorylation of C4 phospho-
enolpyruvate carboxylase in protoplasts from Digitaria san-
guinalis. Plant Cell 8: 573–586.
Hatch, M. D., and Slack, C. R. (1966) Photosynthesis by sugarcane
leaves. Anew carboxylation reaction and the pathway of sugar
formation. Biochem. J. 101: 103–111.
Heldt, H. W. (1979) Light-dependent changes of stromal H+ and
Mg2+ concentrations controlling CO2 fixation. In Photosynthesis II
(Encyclopedia of Plant Physiology, NewSeries, vol. 6) M. Gibbs and
E. Latzko, eds. Springer, Berlin, pp. 202–207.
Huber, S. C. (1986) Fructose-2,6-bisphosphate as a regulatory
metabolite in plants. Annu. Rev. Plant Physiol. 37: 233–246.
Huber, S. C., andHuber, J. L. (1996) Role and regulation of sucrose-
phosphate synthase in higher plants. Annu. Rev. Plant Physiol.
Plant Mol. Biol. 47: 431–444.
Kozaki,A., and Takeba, G. (1996) Photorespiration protects C3 plants
fromphotooxidation. Nature 384: 557–560.
170 Chapter 8
Ku, S. B., and Edwards, G. E. (1978) Oxygen inhibition of photo-
synthesis. III. Temperature dependence of quantumyield and its
relation to O2/CO2 solubility ratio. Planta 140: 1–6.
Leegood, R. C. Lea, P. J., Adcock, M. D., and Haeusler, R. D. (1995)
The regulation and control of photorespiration. J. Exp. Bot. 46:
1397–1414.
Lorimer, G. H. (1981) The carboxylation and oxygenation of ribulose
1,5-bisphosphate: The primary events in photosynthesis and
photorespiration. Annu. Rev. Plant Physiol. 32 349–383.
Lorimer G. H. (1983) Ribulose-1,5-bisphosphate oxygenase. Annu.
Rev. Biochem. 52: 507–535.
Lund, J. E., Ashton, A. R., Hatch, M. D., and Heldt, H. W. (2000)
Purification, molecular cloning, and sequence analysis of sucrose- 6F-
phosphate phosphohydrolase from plants. Proc. Natl. Acad. Sci. USA
97: 12914–12919.
Lüttge, U., andHiginbotham, N. (1979) Transport in Plants. Springer-
Verlag, NewYork.
Maier, R. M., Neckermann, K., Igloi, G. L., and Koessel, H. (1995)
Complete sequence of themaize chloroplast genome: Gene con- tent,
hotspots of divergence and fine tuning of genetic informa- tion by
transcript editing. J. Mol. Biol. 251: 614–628.
Maroco, J. P., Ku, M. S. B., Lea P. J., Dever, L. V., Leegood, R. C., Fur-
bank, R. T., and Edwards, G. E. (1998) Oxygen requirement and
inhibition of C4 photosynthesis:An analysis of C4 plants deficient
in the C3 and C4 cycles. Plant Physiol. 116: 823–832.
Nimmo, H. G. (2000) The regulation of phosphoenolpyruvate car-
boxylase in CAMplants. Trends Plant Sci. 5: 75–80.
Ogawa, T., and Kaplan, A. (1987) The stoichiometry between CO2
and H+ fluxes involved in the transport of inorganic carbon in
cyanobacteria. Plant Physiol. 83: 888–891.
Ogren, W. L. (1984) Photorespiration: Pathways, regulation and
modification. Annu. Rev. Plant Physiol. 35: 415–422.
Paul, M., Sonnewald, U., Hajirezaei, M., Dennis, D., and Stitt, M.
(1995) Transgenic tobacco plants with strongly decreased expres-
sion of pyrophosphate: Fructose-6-phosphate 1-phosphotrans-
ferase do not differ significantly fromwild type in photosynthate
partitioning, plant growth or their ability to cope with limiting
phosphate, limiting nitrogen and suboptimal temperatures.
Planta 196: 277–283.
Purton, S. (1995) The chloroplast genome of Chlamydomonas. Sci.
Prog. 78: 205–216.
Reinfelder, J. R., Kraepiel, A. M. L., andMorel, F. M. M. (2000) Uni-
cellular C4 photosynthesis in a marine diatom. Nature 407: 996–
999.
Salerno, G. L., Echeverria, E., and Pontis, H. G. (1996) Activation of
sucrose-phosphate synthase by a protein factor/sucrose-phos- phate
phosphatase. Cell. Mol. Biol. 42: 665–672.
Salvucci, M. E., andOgren, W. L. (1996) The mechanismof Rubisco
activase: Insights from studies of the properties and structure of the
enzyme. Photosynth. Res. 47: 1–11.
Schürmann, P., and Jacquot, J.-P. (2000) Plant thioredoxin systems
revisited. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 51: 371–400.
Stitt, M. (1990) Fructose-2,6-bisphosphate as a regulatory molecule
in plants. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 41: 153–185.
Tolbert, N. E. (1981) Metabolic pathways in peroxisomes and gly-
oxysomes. Annu. Rev. Biochem. 50: 133–157.
Vidal, J., and Chollet, R. (1997) Regulatory phosphorylation of C4
PEP carboxylase. Trends Plant Sci. 2: 230–237.
Wolosiuk, R. A., Ballicora, M. A., andHagelin, K. (1993) The reduc-
tive pentose phosphate cycle for photosynthetic carbon dioxide
assimilation: Enzyme modulation. FASEB J. 7: 622–637.
Xiang, Y., Zhang, J., andWeeks, D. P. (2001) The Cia5 gene controls
formation of the carbon concentrating mechanism in Chlamy-
domonas reinhardtii. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98: 5341–5346.
Zhang, N., and Portis, A. R. (1999) Mechanismof light regulation of
Rubisco: Aspecific role for the larger Rubisco activase isoform
involving reductive activation by thioredoxin-f. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA 96: 9438–9443.