Jurusan Biologi

Fakultas Matematika dan Ilmu pengetahuan Alam

Universitas Jember 2020

PRAKTIKUM MK BIOTEKNOLOGI KESEHATAN 2021

ACARA I. ISOLASI PLASMID pGLO

TUJUAN PRAKTIKUM
Tujuan dari praktikum Isolasi Plasmid adalah sebagai
berikut :
- Mahasiswa dapat mengetahui dan memahami
tahapan-tahapan isolasi DNA plasmid dengan meode
alkaline lysis
- Mahasiswa mampu memahami pengertian, fungsi,
karakteristik, dan bagian-bagian dari plasmid pGLO
DASAR TEORI
-- Plasmid
Plasmid hampir
merupakan
selalu
molekul
membawa
DNA
satu
sirkuler
gen utas
atauganda
lebih dan
yangsering
berukuran
kali
gen-gen
kecil yaitu
tersebut
antaramenyebabkan
1 kb - 200 kb
- adanya
Plasmidciri-ciri
mempunyai
penting3 komponen
yang
ditunjukkan
penting yaitu:
oleh bakteri inangnya
- Berdasarkan
- Origin of replication
karakteristik
(ORI)
gen yang
dikodenya,
- Multiple plasmid
cloning site
dibagi
(MCS)
menjaid 5
jenis
- Gen
yaitu:
penanda seleksi
- Plasmid fertilitas (F)
- Plasmid resistensi (R)
- Plasmid kolisin (CoI)
- Plasmid degradatif
- Plasmid virulensi
DASAR TEORI
- Umumnya, plasmid digunakan
bakteri dapat dapat bertahan pada
keadaan yang kurang
menguntungkan, dan jika sudah tidak
dibutuhkan lagi, DNA plasmid dapat
dibuang
- Plasmid dapat membentuk
konformasi superkoil pada saat
proses replikasi
METODE PRAKTIKUM
BAHAN ALAT CARA KERJA
Bahan yang digunakan dalam Alat yang digunakan dalam acara Langkah kerja dan dasar teori
acara praktikum Isolasi Plasmid praktikum Isolasi Plasmid adalah terkait plasmid pGLO dapat
adalah sebagai berikut : sebagai berikut : dilihat pada link video praktikum
- Solution I (150mM glukosa, - Mesin sentrifugasi yang tertera dibawah ini.
25mM Tris Cl (pH 8.0), RNAse, berpendingin https://youtu.be/WZbAfQ58eCw
10 mM EDTA (pH 8.0)) - Micropipet (langkah kerja)
- Solution II (0,2 n NaOH, 1% - Erlenmeyer https://youtu.be/8EBoK1Ft3QA
SDS) - Tabung falcon (dasar teori)
- Solution III (60 ml 5M - Pipet
potassium acetate, 11,5 ml - Pipet ukur
Glacial acetic acid, 28,5 ml H2O) - Ice box / freezer
- Isopropanol
- Buffer TE
- Ethanol pa dan EtOH 70%
PEMBAHASAN LAPORAN HASIL LAPORAN
Pembahasan laporan dari praktikum Hasil laporan praktikum Isolasi Plasmid yaitu
Isolasi Plasmid adalah sebagai berikut : dalam bentuk gambar plasmid pGLO yang
1. Jelaskan apa yang dimaksud didapatkan dari melihat video dasar teori
dengan plasmid dan praktikum.
pembagiannya berdasarkan gen
yang dibawanya
2. Jelaskan tentang plasmid pGLO
meliputi; fungsi, karakteristik,
bagian-bagiannya, dst
3. Jelaskan pengertian dan prinsip
kerja dari metode isolasi plasmid
alkaline lysis
4. Jelaskan fungsi setiap perlakuan
dan larutan yang digunakan