Binti Mu’arofah., S.Pd., S.ST., M.

Si

Fakultas Farmasi
Fakultas Teknologi dan Manajemen Kesehatan
Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata Kediri
Pewarnaan Gram adalah suatu pewarnaan untuk mengetahui
spesies bakteri Gram-positif dan Gram-negatif,
berdasarkan sifat kimia dan fisik dinding sel mereka.
Metode ini diberi nama berdasarkan penemunya, ilmuwan
Denmark Hans Christian Gram (1853–1938) yang
mengembangkan teknik ini pada tahun 1884 untuk
membedakan antara pneumokokus dan bakteri Klebsiella
pneumoniae.
a. Bakteri Gram Negatif
Bakteri Gram negative adalah bakteri yang tidak
mempertahankan zat warna gentian violet pada
metode pewarnaan Gram. Bakteri Gram positif akan
mempertahankan warna ungu gelap gentian violet
setelah dicuci dengan alcohol, sementara bakteri
Gram negative tidak.
 b Bakteri Gram Positif
Bakteri Gram positif adalah bakteri yang mempertahankan zat
warna gentiaan violet sewaktu proses pewarnaan Gram. Bakteri
jenis ini akan berwarna ungu saat diamati dengan mikroskop,

Perbedaan Gram positif dan Negatif

Gram positif memiliki membran tunggal yang dilapisi peptidoglikan
tebal. sedangkan bakteri Gram negative bakteri yang dinding selnya
terdiri dari lapisan lipopolisakarida.
Untuk membedakan
Untuk melihat
kuman Gram positif
susunan dan
dan kuman Gram
morfologi kuman.
negative.

Untuk melihat sifat

Untuk membantu
kuman terhadap
klasifikasi kuman.
pewarnaan.
Kuman Gram positif Kuman Gram negatif

• Dituangi Gram I • Dituangi Gram 1

(gentian violet) (gentian violet)
Digenangi Gram 2 Digenangi Gram 2
(lugol) agar cat (lugol)
semakin kuat • Dilunturkan dengan
Dilunturkan Gram 3 Gram 3 (alkohol
(alkohol 70%) 70%) luntur
Digenangi fuchsin • Digenangi fuchsin
tidak terserap terserap sehingga
sehingga kuman tetap kuman merah.
berwarna ungu.
• Objek glass • Ose jarum dan ose bulat
• Spirtus • Mikroskop
• Penjepit • Jembatan pewarnaan
• Pz
• Kuman
• Gram I : Gentian violet
• Gram II : Lugol
• Gram III : Alkohol 70 %
• Gram IV : Fuchsin
 Digenangi Gram I selama
3-5 menit, cat dibuang di
Sediaan difiksasi
cuci dengan air mengalir
kecil
Digenangi Gram II
selama 1 menit, cat
di buang.

Digenangi Gram III

selama 10 detik, alkohol
dibuang dicuci dengan
air mengalir kecil.
 Sifat Pewarnaan Gram Positif Gram Negatif

Bentuk Coccus Batang

Susunan Bergerombol Menyebar

Warna Ungu Merah

 Batang Gram negative :
• Echerichia coli
• Klebsiella
Batang Gram positif : Coccus Gram positif :
• Salmonella
• M. Tuberculosa • Staphylococcus
• Shigella
• M. lepra • Sarkina
• Proteus
• C. difteri • Diplococcus
• Pseudomonas
• Tetracoccus
• Vibrio Cholera