LAPORAN PRAKTIKUM

SITOHISTOLOGI
(Clearing dan Embedding Jaringan serta Membuat Larutan Hemaktosilin Harris)

Disusun Oleh :
Arsya Kunkha Yoan Astri Skevietzcha
P07134120043

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN YOGYAKARTA
JURUSAN TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS
PROGRAM STUDI DIPLOMA III
2022
A. TANGGAL PRAKTIKUM : Senin, 31 Januari 2022
B. JUDUL : Clearing dan Embedding Jaringan serta Membuat
Larutan Hemaktosilin Harris
C. PRINSIP : Alkohol atau aseton di dalam jaringan digantikan
oleh larutan xylol atau benzol atau pertamax.
D. TUJUAN :
1. Mahasiswa mampu memahami dan melakukan teknik – teknik histoteknik
yang digunakan dalam pembuatan preparat jaringan
2. Mahasiswa mampu memahami dan membuat preparat dari jaringan
3. Mahasiswa mampu menganalisa dari preparat jaringan dengan
menggunakan mikroskop

E. DASAR TEORI
Penjernihan adalah metode yang digunakan mengeluarkan alkohol dari jaringan
dan menggantikannya dengan suatu larutan yang berikatan dengan parafin. Pada
proses clearing ini sangat penting karena apabila dijaringan masih tersisa alkohol
walaupun sedikit, parafin tidak akan bisa masuk kedalam jaringan. Sehingga
jaringan nantinya tidak akan sempurna dalam pembuatan blocking, pemotongan
dan pewarnaan. Proses clearing ini menggunakan bermacam-macam zat
penjernih yaitu xylol atau xylene dan toluol atau toluene (Waheed, 2012).
Penanaman (Embedding) merupakan proses untuk mengeluarkan cairan
pembening dari jaringan dan digantikan dengan parafin. Jaringan ini harus
terbebas dari cairan pembening karena nantinya akan mengkristal dan sewaktu
dipotong jaringan akan mudah robek. Berdasarkan metode prosesnya yaitu
jaringan akan dibenamkan di larutan parafin selama 3x dan dalam jangka waktu
tertentu sambil dipanaskan agar parafinnya tidak membeku (Rina, 2013)

F. ALAT DAN BAHAN

1. Jaringan dari Hewan Formalin 10%
2. Alkohol 70%, 80%, 96%, Alcohol Absolut
3. Xylol
4. Besi potongan berbentuk L (Leuckhart)
5. Oven
6. Parafin
7. Microtom
8. Waterbath
9. Albumin (Putih telur + Gliserin)
10. Objek Glass
11. Pewarna HE
12. Eosin
 13. Balsam Kanada

G. CARA KERJA
 Hemaktosilin Harris
1. Siapkan alat dan bahan
2. Larutkan hematoksilin di dalam alkohol
3. Larutkan ammonium/potassium alum di dalam
distilled water dan panaskan
4. Hentikan pemanasan dan campur kedua larutan
tersebut
5. Panaskan dengan cepat sambil di aduk
6. Hentikan pemanasan dan campurkan merkuri
oksida kedalamnya perlahan-lahan
7. Panaskan kembali hingga larutan bewarna purple
gelap
8. Hentikan pemanasan dan tempatkan wadah berisi larutan tersebut di
dalam wadah berisi air dingin hingga laurtan hematoksilin menjadi
dingin
9. Larutan siap untuk digunakan segera setelah dinginkan
10. Tambahkan 2-4ml asam asetat glasial per 100ml Larutan untuk
meningkankan ketajaman warna inti
11. Saring sebelum digunakan

 Clearing
1. Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2. Dimasukkan jaringan ke dalam larutan Xylol I selama 30 menit
3. Dimasukkan kembali ke dalam larutan Xylol II selama 30 menit
4. Dengan pembeningan maka jaringan akan bening dan transparan

 Embedding
1. Dsiapkan 3 wadah yang berisi parafin di dalam oven
2. Jaringan direndam ke dalam oven yang sudah ada wadah parafin I
selama 1 jam
3. Kemudian masukkan jaringan ke wadah 2 selama 1 jam
4. Selanjutnya masukkan jaringan ke wadah 3 selama 1 jam
H. HASIL PRAKTIKUM

 Didapatkan jaringan yang bersih dari

etanol
 Disimpan dalam toples untuk
dilanjutkan ke proses selanjutnya

I. PEMBAHASAN
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan bertujuan untuk menghilangkan
kadar ethanol pada jaringan. Keberhasilan dari proses clearing dapat dilihat dari
jaringan yang berubah menjadi jernih (transparan). Pada proses embedding,
parafin cepat sekali memadat ketika parafin cair dituangkan pada kotak parafin.
Untuk itu proses penanaman jaringan juga membutuhkan waktu yang cepat.

J. KESIMPULAN
1. Histoteknik merupakan suatu cara untuk membuat preparat histologis
melalui berbagai proses sehingga mejadi suatu preparat yang siap untuk
dianalisis
2. Sajian histologis dapat digunakan sebagai riset, untuk dapat mengetahui
struktur sel baik yang normal maupun yang patologis
3. Pengerjaan histoteknik membutuhkan waktu yang lama

Yogyakarta, 5 Februari 2022

Praktikan

Arsya Kunkha Yoan A.S

P07134120043