15082
Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Tadulako Tondo
Palu, Sulawesi Tengah 94118
ABSTRACT
Keywords:
Hyptis capitata Jacq. plant has been using for traditional medicine.
Toxicology, Hyptis capitata
Utilization of medicinal plant must always consider to given dose
Jacq., Hystopathology,
because of toxic effect when too much medicine is taken. The aim of
Liver
this study was to measure the liver damage in rats caused by H.
capitata Jacq. leave extract. Either 300 (P1), 600 (P2) or 900 (P3)
µg/kgBW H. capitata Jacq. leave extract was given orally to rats every
24 hours during 14 days. Zero point five ml ethanol 96% was given
daily (K-) and without given anything (K+) was also conducted as a
control. Both macroscopic and microscopic of liver damage were
assessed. The result showed that rats given P3 treatment had the
highest liver damage. The liver damage in rats was not statistically
significant difference between P3 and K- treatments. The lowest liver
damage was in rats given K+ treatment. There was no significant
difference between P1 and P2 treatments on rats liver damage.
Utilization of medicinal plant as traditional medicine should always be
consider to doses.
ABSTRAK
Kata Kunci:
Tumbuhan Hyptis capitata Jacq. telah lama digunakan sebagai obat
Toksikologi, Hyptis
tradisional. Pemanfaatan tumbuhan obat harus tetap memperhatikan
capitata Jacq.,
dosis karena bila melebihi akan menimbulkan efek toksik. Tujuan dari
Histopatologi, Hati
penelitian ini adalah untuk mengetahui kerusakan hati pada tikus
karena diberi ekstrak daun H. capitata. Penelitian dilakukan dengan
memberikan 300 (P1), 600 (P2) atau 900 (P3) µg/kgBB ekstrak daun
H. capitata Jacq. setiap hari secara oral kepada tikus selama 14 hari
dengan durasi pemberian 24 jam. Pemberian 0,5 ml etanol 96%
perhari (K-) dan tanpa pemberian perlakuan (K+) juga dilakukan
sebagai pembanding. Parameter penilaian adalah kerusakan hati
secara makroskopik dan mikroskopik. Hasil penelitian menunjukkan
bahwa kerusakan sel hati tertinggi diperoleh pada tikus yang diberi
perlakuan P3 yang nilainya tidak berbeda nyata dengan kerusakan
hati tikus yang diberi perlakuan K-. Kerusakan sel hati terendah
terdapat pada tikus yang diberi perlakuan K+. Tidak ada perbedaan
yang nyata antara kerusakan hati tikus yang disebabkan perlakuan P1
dan P2. Penggunaan tumbuhan obat sebagai obat tradisional
sebaiknya tetap memperhatikan dosisnya.
*
Corresponding Author : magfirahtul@untad.ac.id
tempat makan dan minum tikus, kamera dan sebesar 25g berat pasta hasil pemisahan
alat tulis ekstrak menggunakan rotary evaporator.
PROSEDUR KERJA Pembuatan Dosis Ekstrak Daun Baka-
Pembuatan Serbuk Simplisia baka (Hyptis capitata Jacq.)
Daun segar tumbuhan baka-baka (H. Banyaknya ekstrak tiap perlakuan
capitata Jacq.) seberat 6,1 kg dicuci bersih dihitung dengan mengalikan berat rata-rata
menggunakan air mengalir, kemudian (kg) tiap kelompok hewan uji dengan dosis
disortasi basah untuk menghilangkan ekstrak.
kotoran atau daun yang tidak layak untuk Penentuan dosis ekstrak H. capitata
dijadikan sampel. Daun selanjutnya dirajang Jacq. yang diberikan mengacu pada Xu et
dan ditimbang. Sampel daun kemudian al. (2013), bahwa ekstrak kasar daun H.
dikeringanginkan selama 2 minggu sampai capitata Jacq. memiliki nilai LC50<1000
kadar air tersisa 18%, lalu disortasi kembali µg/ml. Berdasarkan hal tersebut, penelitian
dan diblender sampai menjadi serbuk. ini menggunakan 3 dosis ekstrak yaitu 300,
Selanjutnya simplisia dikeringkan dalam 600, dan 900 µg/kg berat badan. Banyaknya
oven dengan suhu 40°C selama 5 jam untuk ekstrak yang diberikan kepada hewan uji
mengurangi kadar air sampai sampai 5%. dihitung dengan cara mengalikan berat rata-
Serbuk simplisia kemudian ditimbang lagi rata (kg) tiap kelompok hewan uji dengan
untuk mengetahui berat keringnya. Berat dosis ekstrak.
kering yang tersisa setalah proses oven Penyiapan Hewan Uji
selama 5 jam adalah 304g. Hewan uji yang digunakan adalah 25
Proses Ekstraksi ekor tikus putih (Rattus norvegicus) jantan
Serbuk simplisia diekstraksi dengan galur Wistar sehat, usia 8-10 minggu
metode maserasi mengacu pada Sharon dengan berat badan 200-250g sesuai
(2013) dengan modifikasi. Serbuk simplisia dengan standar yang telah diatur dalam
baka-baka (H. capitata Jacq.) sebanyak OECD (2001). Tikus dibagi ke dalam 5
304g diekstraksi berulang menggunakan kelompok lalu diaklimatisasi dalam kandang
etanol 96% selama masing-masing 3 x 24 selama 1 minggu dengan tetap diberikan
jam dengan pengadukan. Maserat disaring makan dan minum ad libitum, kemudian
lalu dipisahkan dari pelarut menggunakan dipuasakan selama 12 jam sebelum
rotary evaporator pada suhu 60°C, lalu perlakuan dengan tetap diberikan minum.
diuapkan hingga menjadi ekstrak kental Perlakuan Hewan Uji
(pasta). Ekstrak ditimbang dengan neraca Hewan uji yang telah dibagi ke dalam
analitik untuk mengetahui berat akhir ekstrak 5 kelompok, dengan masing-masing terdiri
sampel daun baka-baka (H. capitata Jacq.). dari 5 ekor tikus putih (R. norvegicus)
Berat ekstrak kental yang dihasilkan dari sebagai ulangan, kemudian menerima
304g berat kering sampel daun adalah perlakuan sebagai berikut:
K+ : Kontrol positif (tanpa perlakuan) normal dapat dilihat dengan permukaan hati
K- : Kontrol negatif (diberikan 0,5 ml yang kasar dan tampak bercak-bercak pada
etanol 96%/hari)
P1 : Diberikan ekstrak etanol daun permukaan hatinya serta warna hati yang
baka-baka (H. capitata Jacq.) 300 terlihat merah kehitaman (Tatukude dkk,
µg/kg bb/ml/hari secara oral
P2 : Diberikan ekstrak etanol daun 2014; Amalina, 2009).
baka-baka (H. capitata Jacq.) 600 Pembuatan Preparat Histopatologi
µg/kg bb/ml/hari secara oral
P3 : Diberikan ekstrak etanol daun Preparat histopatologi dibuat
baka-baka (H. capitata Jacq.) 900 menggunakan metode Kiernan yang
µg/kg bb/ml/hari secara oral
mengacu pada Swarayana dkk (2012).
Perlakuan diberikan selama 14 hari Pembuatan preparat dimulai dengan fiksasi
secara berturut-turut dengan pemberian jaringan, dimana organ hati diambil bagian
ekstrak 1 kali dalam sehari dengan durasi tengahnya dan dipotong kecil kemudian
24 jam. Selama perlakuan tikus tetap dicuci dengan NaCl fisiologis untuk
diberikan makan dan minum ad libitum. membersihkan organ dari darah yang
Setelah hari ke-14 tikus dipuasakan selama menempel. Sampel hati selanjutnya
12 jam. Pada hari ke-15, tikus dianastesi direndam dalam formalsalin selama 24 jam
dengan kloroform lalu dibedah untuk yang berfungsi untuk mengawetkan
pengambilan organ hati. Kondisi morfologis jaringan. Proses selanjutnya adalah
hati diamati secara makroskopik dan dehidrasi yang bertujuan untuk menarik
didokumentasikan setelah sebelumnya molekul air dari dalam jaringan dengan
dicuci dengan NaCl fisiologis. Seluruh menggunakan seri alkohol bertingkat (70%,
prosedur perlakuan hewan coba 80%, 90% dan 96%). Jaringan yang telah
berdasarkan pada standar OECD (2001). dipotong kemudian dimasukan ke dalam
Pengamatan Makroskopik xylol I dan II masing-masing 10 menit untuk
Hasil pengamatan secara makroskopik proses penjernihan. Jaringan kemudian
meliputi pengamatan morfologi dan warna dimasukkan ke dalam paraffin cair dengan
sampel hati tikus putih (R. norvegicus) yang suhu 56°C selama 2 jam sebanyak 2 kali
diamati secara langsung dan menggunakan berturut-turut. Jaringan kemudian diambil
bantuan kamera untuk dilakukan menggunakan pinset dan dilakukan
dokumentasi penampakan hati secara pemblokan menggunakan parafin blok
makroskopik. Kriteria pengamatan secara sampai dingin dan membeku. Pemotongan
makroskopik dideskripsikan berdasarkan (cutting) selanjutnya dilakukan
penampakan struktur permukaan hati tikus menggunakan mikrotom dengan ketebalan
putih (R. norvegicus). Kategori hati normal 10 μm. Jaringan yang terpotong diletakan di
dapat dilihat dengan permukaan hati yang atas air dalam waterbath untuk
rata dan halus serta warna yang terlihat dikembangkan, kemudian ditangkap dengan
merah kecoklatan. Kategori hati yang tidak gelas objek. Jaringan selanjutkan
HASIL
Pengamatan yang telah dilakukan bercak berwarna putih; (b) benjolan
kuning
secara makroskopik memperlihatkan adanya
perubahan pada struktur morfologis hati,
yaitu perubahan warna dan tekstur pada Pengamatan organ hati tikus putih (R.
perbedaan tingkat warna permukaan organ yang berbeda-beda pada setiap kelompok
hati tikus putih (R. norvegicus) pada setiap perlakuan. Pengamatan melalui mikroskop
bercak putih seperti pori-pori besar di adanya gejala kerusakan pada perlakuan K-,
seluruh permukaan bagian atas organ hati P1, P2, dan P3, yaitu berkurangnya
pada perlakuan K-, P1, P2 dan P3. Deskripsi kerapatan sel hati, sinusoid yang semakin
struktur morfologi hati hasil pengamatan melebar, serta ditemukannya sel-sel yang
Tabel 2. Deskripsi struktur morfologi hati tikus pada pengamatan makroskopik setelah 14
hari perlakuan.
Kelompok Keterangan
Warna Tekstur
Gambaran Makroskopis Dan Xu, D. H., , Huang, Y. S., Jiang, D. Q., and
Mikroskopis Hati Dan Ginjal Mencit Yuan, K. 2013. The essential oils
(Mus musculus). Skripsi. Fakultas chemical compositions and
Peternakan, Universitas Hasanuddin antimicrobial, antioxidant activities
Makassar. Makassar. and toxicity of three Hyptis species.
Pharmaceutical Biology, 51(9), 1125-
1130.