Nama : Annisa Zahra Nasution

NIM : 102011233103
Kelas : Gizi 5B
Mata Kuliah : PSG Biokimia (Praktikum)

PEMERIKSAAN GLUKOSA DARAH

Metode GOD-PAP

Prinsip
Penentuan glukosa setelah oksidasi enzimatik oleh glukosa oksidase. Indikator kolorimetri
adalah quinoneimine, yaitu dihasilkan dari 4-aminoantipyrine dan fenol oleh hidrogen
peroksida di bawah aksi katalitik peroksidase (Trinder's reaksi)

Reagen
● Komponen dan Konsentrasi
1. Buffer fosfat pH 7,5 250 mmol/L
2. Fenol 5 mmol/L
3. 4-Aminoantipirin 0,5 mmol/L
4. Glukosa oksidase (GOD) 10 kU/L
5. Peroksidase (POD) 1 kU/L

Sampel : Plasma Heparin / Plasma EDTA an. Delaa

● Stabilitas
Stabilitas dalam plasma setelah penambahan inhibitor glikolitik (Fluoride,
monoiodacetate, mannose) Pisahkahkan paling lambat 1 jam setelah pengambilan
darah (terpisah dan komponen). Dengan suhu :
➔ 2 hari pada 20 – 25 °C
➔ 7 hari pada 4 – 8 °C
➔ 1 hari pada - 20 °C
● Stabilitas pada serum (terpisah dari isi seluler, hemolisis) tanpa menambahkan
inhibitor glikolitik :
➔ 8 jam 25 °C
➔ 72 jam 4 °C
Spesimen yang terkontaminasi harus dibuang dan pembekuan hanya dilakukan
sekali
Prosedur Pengujian
● Panjang Gelombang
● Jalur optik 1 cm
● Suhu 20 – 25 °C / 37 °C
● Pengukuran terhadap reagen blanko
Blanko Standart Sampel
Blanko 10 μL - -
Standart - 10 μL -
Sampel - - 10 μL
Reagent 1000 μL 1000 μL 1000 μL
Mix, incubate for 20 min. at 20 – 25°C or for 10 min. at 37°C.
Read absorbance within 60 min against reagent blank

Rentang Referensi
Rentang pengukuran 1 - 400 mg/dL (0,06 - 22,2 mmol/L). Ketika nilai melebihi sampel
rentang ini, harus diencerkan 1 + 4 dengan larutan NaCl (9 g/L) dan hasilnya dikalikan 5

Spesifisitas/Interferensi

Tidak ada gangguan yang diamati oleh asam askorbat hingga 15 mg/dL, bilirubin hingga 40
mg/dL, hemoglobin hingga 200 mg/dL, dan lipemia. Trigliserida hingga 2000 mg/dL

Sensitivitas/Batas Deteksi

Batas bawah deteksi adalah 1 mg/dL

Langkah-langkah

1. Ambil reagen menggunakan mikropipet sebanyak 1000 μL kedalam kuvet

2. Selanjutnya ambil sampel serum menggunakan mikropipet pula sebanyak 10 μL ke

dalam kuvet yang telah terisi reagen kemudian diaduk
 3. Inkubasi sampel terlebih dahulu selama 20 menit lalu masukkan kuvet yang berisi
sampel kedalam spektrofotometer UV-Vis

4. Setelah selesai, baca dan catat hasil absorbansi serum yang tertera pada layar
spektrofotometri, lalu hitung glukosa menggunakan rumus

Perhitungan
● Absorbansi lar. standar = 0,428
● Absorbansi lar. sampel = 0,776
● Konsentrasi standar : 100 mg/dL
𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑙𝑎𝑟𝑢𝑡𝑎𝑛 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
Glukosa = 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑙𝑎𝑟𝑢𝑡𝑎𝑛 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
x konsentrasi standar
0,776
= 0,428
x 100

= 200 mg/dL

Kesimpulan
Glukosa sampel atas nama Dela sebesar 200 mg/dL. Jika ditinjau dari rentang referensi, maka
jika sampel diperoleh pada keadaan puasa maupun 2 jam PP, glukosa darah Dela termasuk
dalam kategori tinggi. Sedangkan jika dilihat dari gula darah sewaktu, rentan referensi Gula
Darah Sewaktu untuk kategori normal adalah < 200 mg/dL. Maka dari Gula Darah Sewaktu
Dela, termasuk dalam kategori tinggi dan beresiko diabetes.