KROMATOGRAFI LAWAN ARUS

TETES ( COUNTER CURRENT

CHROMATOGRAPHY DROPLET)
FITOKIMIA – D
NAMA ANGGOTA:

□
Dwi Bagus Haryadi (14330016)

□
Chintya $ahmadhani (16330007)
□ Eka Arfin (16330004)

□
Citra *idyaningrum (163300+1)

□
Nurul $amadhani (163300+7)
□ $afa Kamilah (16330036)
□
Lengkawati $isnaputri (16330032)
 KROMATOGRAFI LAWAN ARUS
(CCC/KLA)

□
Kromatografi Lawan Arus adalah kromatografi cair yang menggunakan 2 fase
cair yang tidak dapat dipisahkan. Yaitu, satu bertindak sebagai fase cair dan
cairan bergerak stasioner dan tidak ada Fase padat.
□
Penemu Yochiro Ito (1978) menamakannya setelah metode lawan arus partisi

kromatografi lawan arus adalah metode distribusi dua atau lebih zat dengan
distribusi berulang antara dua fase cair yang mengalir dalam arah yang berlawanan.
 PRINSIP KROMATOGRAFI LAWAN ARUS

□
Prinsip pemisahan melibatkan partisi dari zat terlarut antara dua pelarut yang
tidak dapat bercampur (fase gerak dan fase diam)
□
Proporsi relatif zat terlarut yang masuk ke masing−masing dua pelarut
yang ditentukan oleh koefisien partisi.
□
Di sini kedua fase itu cair. Pemisahan zat terlarut dalam dua fase didasarkan
pada perbedaan dalam faktor kapasitas. k dan koefisien distribusi, kd pada
analit tersebut.
 PROSEDUR KLA

□
Hasil terbaik diperoleh dengan menyaring larutan sampel sebelum dimasukkan
ke dalam kolom
□
Seluruh Kromatografi Lawan Arus adalah kromatografi
□
Kromatografi menyiratkan bagian yang berputar, rotor, roda gigi, spul,
motor dan pengatur kecepatan.

□
Pencampuran fase−fase dilakukan sehingga analit dapat bergerak di antara
fase− fase
□
Fase Gerak tercampur kemudian menetap dari fase diam di seluruh kolom.
□
Retensi maksimum fase diam diperoleh dengan menggunakan fase kurang
kental sebagai fase gerak.
INSTRUMEN KLA
 KLA KOLOM HIDROSTATIS

−KLA Kolom hidrostatik pertama menggunakan gravitasi untuk

menjaga fase diam cair; mereka disebut kromatografi lawan arus
tetes (KLAT). Mereka membutuhkan waktu elusi yang sangat panjang
(hari).
−Cukup banyak saluran penghubung yang hanya berisi fase gerak.
Hydros@tk design

Hydrodynamic design
 KLA KOLOM HIDRODINAMIK

•
Sentrifugal hidrodinamika yang digunakan dalam KLA kolom memiliki dua
sumbu rotasi, sumbu utama dan satu planet yang menghasilkan medan gaya
sentrifugal variabel. Ada beberapa sumbu planet tetapi yang paling umum
adalah sumbu tunggal, ganda, dan tiga sumbu. Setiap sumbu planet memiliki
kumparan atau spool yang dipasang di atasnya yang berisi gulungan tuba
Teflon yang terus menerus berotasi
1. Kromatografi Iawan arus tetes
2. EIusi Ekstrusi KLA
3. Kromatografi Partisi SentrifugaI

4. KLA Kecepatan Tinggi.

TIPE KROMATOGRAFI LAWAN ARUS

 KROMATOGRAFI LAWAN ARUS TETES

DCCC atau DCC (Kromatrografi arus balik tetes)

merupakan bentuk pemisahan cair−cair, yang
meliputi distribusi arus balik dan komatrografi arus

b a l ik , b e r d a s ar ka n p a r ti si z a t
te t a p t e t e s a n fa se g e r a k d a n
te r la ru t a nt a r a a li r n
k o lo m f a se d i a m . F a se
gerak melewati kolom dalam bentuk tetesan.
LANJUTAN..

□
Kromatografi arus balik tetes (CCCD) merupakan teknik kromatografi cair yang
digunakan untuk fase cair yang tidak bercampur dan tidak ada pendukung padat
□
satu cairan bertindak sebagai fase diam dan yang lainnya sebagai fase gerak
□
Fase diam cair dipegang oleh gravitasi atau dengan gaya sentrifugal. Metode
gravitasi disebut Kromatografi arus balik tetes (CCCD)
 KROMATOGRAFI LAWAN ARUS TETES

□
1. Hanya menggunakan gravitasi untuk memindahkan fase gerak melalui fase
diam
□
2. Dalam mode menurun, tetesan dari fase gerak yang lebih padat dan sampel
dibiarkan jatuh melalui kolom fase diam yang lebih ringan dengan hanya
menggunakan gravitasi.

□
3. lika fase gerak yang kurang padat digunakan akan naik melalui fase diam, ini
disebut mode naik
□
4. Eluen dari satu kolom dipindahkan ke kolom lainnya, semakin banyak
kolom yang digunakan, semakin banyak pelat teoritis dapat dicapai.
□
kromatografi
P r
a ru s
inbasliikpatau
kromatografi partisi adalah teknik kromatografi
cair−cair yang memisahkan komponen campuran
berdasarkan perbedaan afinitas untuk fase gerak
dan fase diam dalam suatu kolom
□
Fase stasioner dan fase gerak ini sama−sama cair.
Partisi zat terlarut dalam dua fase didasarkan pada
perbedaan faktor kapasitas (K), dan koefisien
distribusi (Kd), analit menggunakan fase diam cair
dan fase gerak cair
PENCAMPURAN PENYELESAIAN

PEMISAHAN
FAKTOR−FAKTOR YANG BERPENGARUH

□
Distribusi konstan (D)
□
Volume retensi fase stasioner
□
Waktu Elusi
□
Resolusi
□
Pengaruh panjang kolom
 Deskripsi Instrumen

□
Aparatus DCCC B760

□
Terdiri dari 200−600 kolom vertikal panjang (20−60 cm) tabung kaca
berlekuk sempit 1,5−2 mm
□
Laju alir 25−35 mL/jam
□
lenis kolom DCC−A dan DCC−S
□
Ascending Mode

Sampelnya terletak di bawah. Fase gerak dipompa dari atas melewati sampel.

□
Descending Mode
Sampelnya terletak di atas. Fase gerak dipompa dari bawah melewati sampel.
 PILIHAN PELARUT

□
Titik kritis dalam seleksi adalah

kelarutan Sampel
Koefisien partisi.
□
Sistem berbasis Chloroform, atau

□
Diagram Fase Ternary digunakan untuk memilih sistem pelarut
□
Foucault menyarankan tiga kriteria untuk mengikuti diagram fase terner

□
Pilih pelarut terbaik di mana sampel dapat benar−benar larut,
□
Pilih dua pelarut (satu kurang polar yang lain lebih polar), pelarut terbaik akan
dipartisi ke dalam dua pelarut lainnya,
□
Fraksi kurang polar sampel akan lebih disukai masuk ke fase kurang polar dan
fraksi yang lebih polar akan lebih suka masuk ke fase yang lebih polar sehingga
koefisien partisi rata−rata tetap sekitar 1.
 SISTEM PELARUT
□
Sistem cair biphasic

−octanol dan air

□
Sistem cairan tersier

−chloroform−methanol−water
□
Sistem cairan kuantum
−heksana−etil asetat−aseton−air
 APLIKASI KLAT

□
Aplikasi luas untuk pemisahan preparatif dari konstituen tanaman dan produk
alami lainnya. Khususnya diindikasikan untuk isolasi senyawa polar.
□
Bidang baru aplikasi termasuk minyak esensial, triterpenoid dan steroid,
regulator pertumbuhan tanaman giberelin, antibiotik.

□
Digunakan untuk memisahkan berbagai senyawa dari tanaman dan berbagai
produk alami.
□
Analisis tanaman dan berbagai produk alami, Analisis makanan, Analisis
lingkungan, Logam kelompok tanaman
Pada penelitian fitokimia yaitu dalam pemisahan produk
alami meliputi:
1. Saponin
2. Glikosida jantung (Nerium oleander (Apocynaceae))
3. Iridoid dan secoiridoid glikosida (Ajuga pyramidalis
(Libiatae))
4. Diterpenoid
5. Polifenol (flavonoid, xanthone, katekin, antrakuinon,
chromen, lignan)
6. Karbohidrat dan siklitol
7. Alkaloid
 KEUNTUNGAN KERUGIAN

□
Simple dan cepat
□
Memiliki sensitivitas tinggi Pencampuran yang relatif buruk
menyebabkan berkurangnya efisiensi
□
Memiliki kinerja tinggi pemisahan.
□
Proses yang cepat dan menghemat waktu
□
Memiliki kapasitas resolusi tinggi
□
Akurat dan presisi
□
Tehnik yang penting untuk validasi produk

Penting untuk analisis kualitatif dan kuantitatif

THANK YOU